RU2681533C1 - Method of differential diagnostics of mushroom mycosis - Google Patents

Method of differential diagnostics of mushroom mycosis Download PDF

Info

Publication number
RU2681533C1
RU2681533C1 RU2018107368A RU2018107368A RU2681533C1 RU 2681533 C1 RU2681533 C1 RU 2681533C1 RU 2018107368 A RU2018107368 A RU 2018107368A RU 2018107368 A RU2018107368 A RU 2018107368A RU 2681533 C1 RU2681533 C1 RU 2681533C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
dendritic cells
diagnosis
langerin
mycosis
skin
Prior art date
Application number
RU2018107368A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Александр Сергеевич Жуков
Валентин Алексеевич Шевченко
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) filed Critical Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА)
Priority to RU2018107368A priority Critical patent/RU2681533C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2681533C1 publication Critical patent/RU2681533C1/en

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531Production of immunochemical test materials

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention relates to medicine, in particular to a method for the differential diagnosis of fungal mycosis. To do this, analyze the patient's biological material from the lesion and conduct immunohistochemical studies of biopsy specimens. Relative area of expression of CD83+ - and Langerin (CD207)+ - dendritic cells is determined. When determining the relative area of expression of Langerin-positive dendritic cells ≥0.9 % and the relative area of expression of CD83-positive dendritic cells ≥0.5 % diagnose fungal mycosis. At values below, a diagnosis of chronic benign disease is established. Invention provides for the differential diagnosis of fungal mycosis and chronic benign disease.
EFFECT: increases the reliability and effectiveness of this diagnosis.
1 cl, 1 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может найти свое применение в медицинских целях для дифференциальной диагностики грибовидного микоза (Т-клеточная лимфома кожи) и хронических доброкачественных заболеваний кожи.The invention relates to medicine, namely to dermatology, and can find its application for medical purposes for the differential diagnosis of fungal mycosis (T-cell lymphoma of the skin) and chronic benign skin diseases.

Известен способ диагностики грибовидного микоза с применением гистологического исследования, когда путем компьютерной морфометрии ядер лимфоцитов дермы в гистологическом срезе кожи из очага поражения проводят определение планиметрических характеристик ядер лимфоцитов. Дополнительно определяют удельную плотность ядер лимфоцитов на единицу площади имиджа среза, периметр и усредненный диаметр ядра, фактор формы (Патент на изобретение РФ №2466398, G01N 33/48, опубл. 10.11.2012).A known method for the diagnosis of fungal mycosis using histological examination, when by computer morphometry of the nuclei of lymphocytes of the dermis in a histological section of the skin from the lesion, determine the planimetric characteristics of the nuclei of lymphocytes. Additionally determine the specific density of the nuclei of lymphocytes per unit area of the image of the slice, perimeter and average diameter of the nucleus, form factor (Patent for the invention of the Russian Federation No. 2466398, G01N 33/48, publ. 10.11.2012).

Недостатком метода является то, что изменения характеристик лимфоцитов происходит при прогрессировании заболевания и не позволяет диагностировать болезнь на ее начальном этапе. Кроме того, рекомендуемые для анализа программы не являются рутинными, что не обеспечивает повсеместное их применение для анализа гистологических срезов. Также стоит учесть, что гистологическая картина может быть весьма вариабельной в зависимости от клинических проявлений и стадии заболевании, и диагностическое значение приведенных выше критериев не одинаково, не всегда является достоверным.The disadvantage of this method is that changes in the characteristics of lymphocytes occur with the progression of the disease and do not allow to diagnose the disease at its initial stage. In addition, the programs recommended for analysis are not routine, which does not ensure their widespread use for the analysis of histological sections. It is also worth considering that the histological picture can be very variable depending on the clinical manifestations and stage of the disease, and the diagnostic value of the above criteria is not the same, it is not always reliable.

Известен способ диагностики грибовидного микоза с применением гистологического исследования путем проведения морфометрии базальных кератиноцитов, измеряя их площадь и ядерно-цитоплазматическое соотношение. При увеличении площади базальных кератиноцитов в 1,5 и более раза по сравнению с нормальной кожей, ядерно-цитоплазматического соотношения базальных кератиноцитов в 2 и более раза по сравнению с нормальной кожей диагностируют лимфомы кожи, а при неизмененных морфометрических показателях базальных кератиноцитов - псевдолимфомы кожи (Патент на изобретение РФ №2476879, G01N 33/48, G01N 33/53, G01N 33/483, опубл. 27.02.2013).A known method for the diagnosis of fungal mycosis using histological examination by morphometry of basal keratinocytes, measuring their area and nuclear-cytoplasmic ratio. With an increase in the area of basal keratinocytes by 1.5 or more times compared with normal skin, the nuclear-cytoplasmic ratio of basal keratinocytes by 2 or more times compared with normal skin, skin lymphomas are diagnosed, and with unchanged morphometric parameters of basal keratinocytes, skin pseudolymphomas (Patent for the invention of the Russian Federation No. 2476879, G01N 33/48, G01N 33/53, G01N 33/483, publ. 02.27.2013).

Недостатком методов является их низкая чувствительность, невозможность дифференциальной диагностики начальной стадии заболевания, когда наиболее важно установить диагноз, а также трудности диагностики при развитии различных (неклассических) форм болезни. Также не уточнено, сколько базальных кератиноцитов необходимо обследовать для установления значимости данного диагностического фактора.The disadvantage of the methods is their low sensitivity, the impossibility of differential diagnosis of the initial stage of the disease, when it is most important to establish a diagnosis, as well as the difficulties of diagnosis in the development of various (non-classical) forms of the disease. It is also not specified how many basal keratinocytes must be examined to establish the significance of this diagnostic factor.

В основу изобретения положена задача создания способа дифференциальной диагностики грибовидного микоза с целью установления значимых дифференциально-диагностических маркеров, на основании детекции которых удастся производить оперативную диагностику наиболее часто встречающегося вида лимфомы кожи - грибовидного микоза. Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в способе дифференциальной диагностики грибовидного микоза, включающем анализ взятого у больного биологического материала из очага поражения и проведения иммуногистохимического исследования биоптатов, определяют относительную площадь экспрессии CD83+- и Langerin (CD207)+-дендритных клеток, при этом при определении относительной площади экспрессии Langerin-позитивных дендритных клеток ≥0,9% и относительной площади экспрессии CD83-позитивных дендритных клеток ≥0,5% диагностируют грибовидный микоз, а при значениях ниже указанных устанавливают диагноз хронического доброкачественного заболевания.The basis of the invention is the creation of a method for the differential diagnosis of fungal mycosis with the aim of establishing significant differential diagnostic markers, based on the detection of which it will be possible to carry out operational diagnostics of the most common type of skin lymphoma - fungal mycosis. The solution to this problem is provided by the fact that in the method for differential diagnosis of fungal mycosis, which includes analysis of biological material taken from the patient from the lesion and immunohistochemical study of biopsy specimens, the relative expression area of CD83 + - and Langerin (CD207) + - dendritic cells is determined, while determining the relative expression area of Langerin-positive dendritic cells ≥0.9% and the relative expression area of CD83-positive dendritic cells ≥0.5% are diagnosed with fungoid mycosis, and at values below indicated, a diagnosis of chronic benign disease is established.

Технический результат заключается в повышении достоверности, эффективности, экономичности и воспроизводимости.The technical result is to increase the reliability, efficiency, efficiency and reproducibility.

Анализ микроокружения малигнизированных лимфоцитов проводят путем детекции CD83+- и Langerin (CD207)+-дендритных клеток в ходе иммуногистохимического исследования у больных грибовидным микозом и пациентов с хроническим доброкачественным заболеванием кожи на примере мелкобляшечного парапсориаза.The microenvironment analysis of malignant lymphocytes is carried out by detection of CD83 + - and Langerin (CD207) + - dendritic cells during immunohistochemical studies in patients with fungoid mycosis and patients with chronic benign skin disease using small scalp parapsoriasis.

Изобретение осуществляется следующим образом.The invention is as follows.

1. Предварительно подготавливают образцы кожи, которые вырезают так, чтобы в микроскопическом срезе сохранялись топографические соотношения, характерные для исследуемого материала. Блоки для проводки вырезают после фиксации.1. Skin samples are preliminarily prepared, which are cut out so that topographic ratios characteristic of the material under study are preserved in a microscopic section. Blocks for wiring are cut out after fixing.

2. Биоптат кожи помещают в емкость с фиксатором, объем фиксирующей жидкости превышал в 10-20 раз объем фиксируемого объекта. Если объект был разрезан на фрагменты толщиной более 5-6 мм, его оставляли в фиксаторе на 2-3 часа для уплотнения, после чего ткань рассекают на пластины толщиной 2-3 мм и помещают в свежий раствор фиксатора. Общее время фиксации при комнатной температуре (около 20°С) составляет от 18 до 24 часов. В повседневной работе в качестве фиксирующей жидкости использовали 10% раствор формалина или цинк-формалин, который обеспечивает сохранение антигенных детерминант для проведения иммуногистохимических исследований.2. A skin biopsy is placed in a container with a retainer, the volume of the fixing fluid exceeded 10-20 times the volume of the fixed object. If the object was cut into fragments with a thickness of more than 5-6 mm, it was left in the fixative for 2-3 hours for compaction, after which the tissue was dissected into plates with a thickness of 2-3 mm and placed in a fresh fixative solution. The total fixation time at room temperature (about 20 ° C) is from 18 to 24 hours. In everyday work, a 10% formalin solution or zinc formalin, which ensures the preservation of antigenic determinants for immunohistochemical studies, was used as a fixing fluid.

3. Обезвоживание и пропитывание парафином биоптатов кожи проводят вручную по восходящим спиртам (70%, 80%, 90% и 100%) в аппарате гистологической проводки тканей «Leica Peloris» («Leica Microsystems», Германия), заливают в парафин.3. Dehydration and paraffin impregnation of skin biopsy samples are carried out manually using ascending alcohols (70%, 80%, 90% and 100%) in a histological tissue instrument Leica Peloris (Leica Microsystems, Germany), and they are poured into paraffin.

4. Срезы приготовливают толщиной 3-4 мкм. Используют микротом ротационный Accu-Cut®SRM™200.4. Slices are prepared with a thickness of 3-4 microns. Use the rotary Accu-Cut®SRM ™ 200 microtome.

5. После этого приступают непрямому иммуногистохимическому исследованию. Для этого срезы наклеивали на стекла, обработанные полилизином, распарафинивают, блокируют эндогенную пероксидазу раствором перекиси водорода в метаноле и выполняют демаскировку антигенов путем нагревания в трис-ЭДТА или цитратном буфере в течение 30 мин при температуре 95°С на водяной бане. Для иммуногистохимической детекции субпопуляций лимфоцитов, дендритных клеток и пролиферативной активности клеток используют первичные мышиные и кроличьи моноклональные античеловеческие антитела (Таблица 1). Время инкубации с первичными антителами составляет 18-20 часов при t°=+40°С.5. After this, an indirect immunohistochemical study is started. To do this, the slices were pasted onto polylysine-treated glasses, paraffinized, endogenous peroxidase was blocked with a solution of hydrogen peroxide in methanol and the antigens were unmasked by heating in Tris-EDTA or citrate buffer for 30 min at 95 ° C in a water bath. Primary murine and rabbit monoclonal anti-human antibodies are used for immunohistochemical detection of subpopulations of lymphocytes, dendritic cells and proliferative activity of cells (Table 1). The incubation time with primary antibodies is 18-20 hours at t ° = + 40 ° C.

Figure 00000001
Figure 00000001

Для детекции клеток используют полимерную систему визуализации Envision (Dako, Дания), где в качестве хромогена применяют диаминобензидин (ДАБ) (Dako, Швеция). Инкубацию проводят с системой визуализации - 30 мин. при температуре +20°С. для проявления результата реакции ДАБ наносият на срезы на 5 мин.Envision polymer imaging system (Dako, Denmark) is used for cell detection, where diaminobenzidine (DAB) (Dako, Sweden) is used as a chromogen. Incubation is carried out with a visualization system - 30 min. at a temperature of + 20 ° C. for the manifestation of the result of the reaction, DAB is applied to the slices for 5 minutes

Выполняют определение количества окрашенных цветовой меткой (позитивных) клеток при 200-кратном увеличении светового микроскопа в трех полях зрения (размерами 7204530 мкм), выбранных с учетом наибольшего количества меченых клеток, программное обеспечение «Морфология 5.2» (ВидеоТесТ, Россия). Определяют относительную площадь экспрессии, которую рассчитывают как отношение площади, занимаемой иммунопозитивными клетками к общей площади клеток в поле зрения, и выражают в процентах.The number of stained (positive) colored cells is determined by a 200-fold increase in the light microscope in three fields of view (7204530 μm in size), selected taking into account the largest number of labeled cells, Morphology 5.2 software (VideoTesT, Russia). The relative expression area is determined, which is calculated as the ratio of the area occupied by immunopositive cells to the total area of cells in the field of view, and expressed as a percentage.

При выявлении относительной площади экспрессии Langerin-позитивных дендритных клеток ≥0,9%, и CD83-позитивных дендритных клеток ≥0,5% определяется высокая диагностическая информативность данных маркеров при установлении диагноза грибовидного микоза (SE 0,87, SP 0,90) и (SE 0,71, SE 0,71) соответственно, что может успешно использоваться в дифференциальной диагностике с хроническими доброкачественными заболеваниями кожи.When the relative expression area of Langerin-positive dendritic cells ≥0.9% and CD83-positive dendritic cells ≥0.5% are detected, the high diagnostic information content of these markers is determined when a diagnosis of fungal mycosis is established (SE 0.87, SP 0.90) and (SE 0.71, SE 0.71), respectively, which can be successfully used in the differential diagnosis of chronic benign skin diseases.

Изобретение иллюстрируется следующими конкретными примерами.The invention is illustrated by the following specific examples.

Пример 1.Example 1

Больной Иванов И.И., 69 лет, поступила в клинику для уточнения диагноза. Болен в течение 5 лет, когда появились зудящие пятна на коже верхних конечностей и на коже живота. На основании клинической картины врач заподозрил грибовидный микоз. Результаты проведенного гистологического исследования не позволяют исключить начинающуюся лимфому кожи. Проведено иммуногистохимическое исследование с определением относительной площади экспрессии Langerin+- и CD83+-дендритных клеток пораженной кожи.Patient Ivanov I.I., 69 years old, was admitted to the clinic to clarify the diagnosis. Sick for 5 years, when itchy spots appeared on the skin of the upper limbs and on the skin of the abdomen. Based on the clinical picture, the doctor suspected fungal mycosis. The results of the histological examination do not allow to exclude the onset of skin lymphoma. An immunohistochemical study was carried out to determine the relative expression area of Langerin + and CD83 + dendritic cells of the affected skin.

Результаты: Относительная площадь экспрессии Langerin+-дендритных клеток 2.5%, CD83+-дендритных клеток 1.5%. На основании результатов ИГХ установлен диагноз: пятнистая стадия ГМ (Ib). Начата специфическая терапия. Диагноз подтвердился гистологически при повторной биопсии.Results: Relative expression area of Langerin + dendritic cells 2.5%, CD83 + dendritic cells 1.5%. Based on the results of IHC, the diagnosis was established: spotted stage of GM (Ib). Specific therapy started. The diagnosis was confirmed histologically by repeated biopsy.

Пример 2.Example 2

Больная Петрова А.А., 45 лет, поступила в клинику для уточнения диагноза. Больна в течение 2-месяцев, когда впервые стала отмечать появление отечных зудящих пятен на коже лица, верхних конечностей, туловища. Лечилась самостоятельно топическими ГКС с нестойким эффектом. На основании клиническое картины дерматолог на приеме заподозрил проявления грибовидного микоза. Результаты гистологического исследования не позволяют однозначно отвергнуть диагноз начинающейся лимфомы кожи. Проведено иммуногистохимическое исследование с определением относительной площади экспрессии Langerin+- и CD83+-дендритных клеток пораженной кожи.Patient A. Petrova, 45 years old, was admitted to the clinic to clarify the diagnosis. Sick for 2 months, when she first began to notice the appearance of edematous itchy spots on the skin of the face, upper limbs, trunk. It was treated independently with topical corticosteroids with an unstable effect. Based on the clinical picture, the dermatologist at the reception suspected manifestations of fungal mycosis. The results of a histological examination do not allow us to unequivocally reject the diagnosis of incipient skin lymphoma. An immunohistochemical study was carried out to determine the relative expression area of Langerin + and CD83 + dendritic cells of the affected skin.

Результаты: Относительная площадь экспрессии Langerin+-дендритных клеток 0.5%, CD83+-дендритных клеток 0.2%. На основании полученных сведений установлен диагноз Микробная экзема, торпидное течение. Назначена системная десенсибилизирующая терапия, топические ГКС, антигистаминные средства, проведена санация очагов хронических инфекций. Клинические проявления полностью нивелировались.Results: Relative expression area of Langerin + dendritic cells 0.5%, CD83 + dendritic cells 0.2%. Based on the information received, a diagnosis of Microbial eczema, torpid course was established. Appointed systemic desensitizing therapy, topical corticosteroids, antihistamines, sanitized foci of chronic infections. Clinical manifestations were completely leveled.

Из анализа научно-технической и патентной литературы не обнаружено сведений о возможности проведения дифференциальной диагностики на основании определения и сопоставления относительной площади экспрессии CD83+- и Langerin (CD207)+-дендритных клеток в ходе анализа пораженной кожи у больных грибовидным микозом и хроническими доброкачественными дерматозами путем автоматического анализа в программном обеспечении, что позволяет сделать выводы о соответствии заявляемого технического решения критериям «новизна» и «изобретательский уровень».From the analysis of scientific, technical and patent literature, no information was found on the possibility of differential diagnostics based on the determination and comparison of the relative expression area of CD83 + - and Langerin (CD207) + - dendritic cells during the analysis of affected skin in patients with fungoid mycosis and chronic benign dermatoses by automatic analysis in software, which allows us to draw conclusions about the compliance of the proposed technical solution with the criteria of "novelty" and "inventive step".

Claims (1)

Способ дифференциальной диагностики грибовидного микоза, включающий анализ взятого у больного биологического материала из очага поражения и проведения иммуногистохимического исследования биоптатов, отличающийся тем, что определяют относительную площадь экспрессии CD83+- и Langerin (СО207)+-дендритных клеток, при этом при определении относительной площади экспрессии Langerin-позитивных дендритных клеток ≥0,9% и относительной площади экспрессии CD83-позитивных дендритных клеток ≥0,5% диагностируют грибовидный микоз, а при значениях ниже указанных устанавливают диагноз хронического доброкачественного заболевания.A method for differential diagnosis of fungal mycosis, including analysis of biological material taken from a patient from the lesion site and immunohistochemical study of biopsy specimens, characterized in that they determine the relative expression area of CD83 + - and Langerin (СО207) + - dendritic cells, while determining the relative expression area of Langerin positive dendritic cells ≥0.9% and relative expression area of CD83-positive dendritic cells ≥0.5% are diagnosed with fungoid mycosis, and at values below tanavlivayut diagnosis of chronic benign disease.
RU2018107368A 2018-02-27 2018-02-27 Method of differential diagnostics of mushroom mycosis RU2681533C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018107368A RU2681533C1 (en) 2018-02-27 2018-02-27 Method of differential diagnostics of mushroom mycosis

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018107368A RU2681533C1 (en) 2018-02-27 2018-02-27 Method of differential diagnostics of mushroom mycosis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2681533C1 true RU2681533C1 (en) 2019-03-07

Family

ID=65632847

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018107368A RU2681533C1 (en) 2018-02-27 2018-02-27 Method of differential diagnostics of mushroom mycosis

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2681533C1 (en)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1145998A1 (en) * 1982-08-05 1985-03-23 Харьковский научно-исследовательский институт дерматологии и венерологии Method of differential diagnosis of mycosis fungoides and dermatoses of untumor nature
US20100311041A1 (en) * 2005-06-14 2010-12-09 Statens Serum Institut Pcr diagnostics of dermatophytes and other pathogenic fungi

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1145998A1 (en) * 1982-08-05 1985-03-23 Харьковский научно-исследовательский институт дерматологии и венерологии Method of differential diagnosis of mycosis fungoides and dermatoses of untumor nature
US20100311041A1 (en) * 2005-06-14 2010-12-09 Statens Serum Institut Pcr diagnostics of dermatophytes and other pathogenic fungi

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BARBOZA T. C. et al. Jorge Lobo’s Disease: Immunohistochemical Characterization of Dendritic Cells in Cutaneous Lesions //Mycopathologia. - 2015. - Т. 179. - N. 3-4. - С. 269-274. *
BARBOZA T. C. et al. Jorge Lobo’s Disease: Immunohistochemical Characterization of Dendritic Cells in Cutaneous Lesions //Mycopathologia. - 2015. - Т. 179. - N. 3-4. - С. 269-274. UENOTSUCHI T. et al. Immune Surveillance against Sporothrix schenckii Infection //Fungal Immunology. - Springer, Boston, MA, 2005. - С. 453-458. *
UENOTSUCHI T. et al. Immune Surveillance against Sporothrix schenckii Infection //Fungal Immunology. - Springer, Boston, MA, 2005. - С. 453-458. *
ЖУКОВ А.С. Иммунологические и молекулярногенетические механизмы развития грибовидного микоза //Вестник дерматологии и венерологии. - 2015. - N. 4. - С. 42-50. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Eady et al. Mast cell population density, blood vessel density and histamine content in normal human skin
Zorn-Kruppa et al. Tight Junction barriers in human hair follicles–role of claudin-1
Nuovo False-positive results in diagnostic immunohistochemistry are related to horseradish peroxidase conjugates in commercially available assays
Young et al. The prognostic value of cell surface antigens in low grade, non-invasive, transitional cell carcinoma of the bladder
Thompson et al. Body cavity fluids
Frech et al. Autophagy is a key feature in the pathogenesis of systemic sclerosis
Pan et al. Oncologic outcomes and radiation safety of nipple-sparing mastectomy with intraoperative radiotherapy for breast cancer
WO2022194033A1 (en) Peripheral blood tcr marker for diffuse large b-cell lymphoma, and detection kit and use therefor
JP2015227865A (en) Method of evaluating skin dry condition
Thompson et al. Nailfold biopsy in scleroderma and related disorders
RU2681533C1 (en) Method of differential diagnostics of mushroom mycosis
US20190100802A1 (en) Marker for predicting pressure ulcer development and use thereof
Schurman et al. Improved detection of metastases to lymph nodes and estrogen receptor determination
RASBR1DGE et al. A histological and immunohistological study of cervical intraepithelial neoplasia in relation to recurrence after local treatment
RU2104526C1 (en) Method for diagnosing t-cellular lymphomae of skin
RU2703314C1 (en) Method for differential diagnosis of plaque psoriasis with other chronic skin diseases
RU2362165C2 (en) Way of estimation of probability of lymphogenous innidiation of infiltrating ductal cancer of mammary gland
Smith et al. The cytological diagnosis of solid tumours by small needle aspiration and its influence on cancer clinic practice
RU2764549C1 (en) Method for evaluating the antipsoriatic effect of an external agent on a laboratory model of imiquimod-induced psoriasis
Ireland Diagnostic criteria in the assessment of glomerular capillary basement membrane lesions in newly diagnosed juvenile diabetics
RU2790468C1 (en) Method for predicting the appearance of distant metastases of melanoma of the choroid
Graham et al. Papanicolaou smears and frozen sections on selected cutaneous neoplasms
WO2006110827A2 (en) Constricting gel assay and therapeutic patch
RU2819755C2 (en) Method for studying dynamics of blv-infection in vivo
Ismaili et al. Core Needle Biopsy Diagnosis of Fibroepithelial Lesions of the Breast in the Moroccan patients: Accuracy and Diagnostic Challenges

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20200228