RU2679414C1 - Method of forecasting the formation of extended astmatic triad in patients with polyposal rhinosinusitis after polypotomy - Google Patents
Method of forecasting the formation of extended astmatic triad in patients with polyposal rhinosinusitis after polypotomy Download PDFInfo
- Publication number
- RU2679414C1 RU2679414C1 RU2018100383A RU2018100383A RU2679414C1 RU 2679414 C1 RU2679414 C1 RU 2679414C1 RU 2018100383 A RU2018100383 A RU 2018100383A RU 2018100383 A RU2018100383 A RU 2018100383A RU 2679414 C1 RU2679414 C1 RU 2679414C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- patients
- nadh
- formation
- triad
- polypotomy
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 201000009890 sinusitis Diseases 0.000 title claims abstract description 22
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 22
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 claims description 12
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims description 9
- 208000037062 Polyps Diseases 0.000 claims description 6
- 208000015768 polyposis Diseases 0.000 claims description 6
- 238000009534 blood test Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 12
- 108010052375 Glutamate Dehydrogenase (NADP+) Proteins 0.000 description 9
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- FVTCRASFADXXNN-SCRDCRAPSA-N flavin mononucleotide Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O FVTCRASFADXXNN-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 5
- 229940013640 flavin mononucleotide Drugs 0.000 description 5
- FVTCRASFADXXNN-UHFFFAOYSA-N flavin mononucleotide Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O FVTCRASFADXXNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000011768 flavin mononucleotide Substances 0.000 description 5
- 235000019231 riboflavin-5'-phosphate Nutrition 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 4
- UHUFTBALEZWWIH-UHFFFAOYSA-N tetradecanal Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC=O UHUFTBALEZWWIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020005199 Dehydrogenases Proteins 0.000 description 3
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 3
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 3
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 2
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010009137 Chronic sinusitis Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000016901 Glutamate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023156 Glutamate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019909 Hernia Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000003820 Lipoxygenases Human genes 0.000 description 1
- 108090000128 Lipoxygenases Proteins 0.000 description 1
- ZRVUJXDFFKFLMG-UHFFFAOYSA-N Meloxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=NC=C(C)S1 ZRVUJXDFFKFLMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028735 Nasal congestion Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 1
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 1
- NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N albuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=C1 NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 238000011861 anti-inflammatory therapy Methods 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000004044 bronchoconstricting agent Substances 0.000 description 1
- 230000003435 bronchoconstrictive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000027157 chronic rhinosinusitis Diseases 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 150000002066 eicosanoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 230000002390 hyperplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 1
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000006241 metabolic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000010352 nasal breathing Effects 0.000 description 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 1
- 235000019645 odor Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- QQJLHRRUATVHED-UHFFFAOYSA-N tramazoline Chemical compound N1CCN=C1NC1=CC=CC2=C1CCCC2 QQJLHRRUATVHED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001262 tramazoline Drugs 0.000 description 1
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 229940070384 ventolin Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, иммунологии и оториноларингологии и может быть использовано для прогнозирования формирования развернутой астматической триады после полипотомии при полипозном риносинусите (ПРС).The invention relates to medicine, namely to allergology, immunology and otorhinolaryngology and can be used to predict the formation of a detailed asthmatic triad after polypotomy with polyposis rhinosinusitis (ORS).
Развернутая астматическая триада (AT), включающая в себя полипозный риносинусит, непереносимость ненаркотических анальгетиков (НА) и нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП), бронхиальную астму, развивается не у всех больных ПРС. В классическом варианте развернутый симптомокомплекс астматической триады развивается чаще всего с определенной последовательностью: аллергическая риносинусопатия, которая в 20-25% случаев переходит в полипозный риносинусит (ПРС) с формированием обструкции носа. С целью восстановления носового дыхания больным ПРС неоднократно проводится оперативное вмешательство - полипотомия.The developed asthmatic triad (AT), which includes polypous rhinosinusitis, intolerance to non-narcotic analgesics (NA) and non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), bronchial asthma, does not develop in all patients with PRS. In the classic version, the expanded symptom complex of the asthmatic triad develops most often with a certain sequence: allergic rhinosinusopathy, which in 20-25% of cases passes into polypous rhinosinusitis (ORS) with the formation of obstruction of the nose. In order to restore nasal breathing, patients with ORS repeatedly undergo surgery - polypotomy.
Так, в 37% случаев формирования AT (n=273) у больных полипозным риносинуситом была проведена полипотомия более трех раз. Анализ данных катамнеза больных AT (n=273) позволяет выделить факторы риска развития развернутого клинического симптомокомплекса: особенности течения аллергической риносинусопатии (АР) с формированием полипозного синусита с полипами в носу, требующих частых оперативных вмешательств (полипотомии); непереносимость НА и НПВП, проявляющаяся бронхиальной астмой.So, in 37% of cases of AT formation (n = 273) in patients with polypous rhinosinusitis, polypotomy was performed more than three times. Analysis of the follow-up data of patients with AT (n = 273) allows us to identify risk factors for the development of a developed clinical symptom complex: features of the course of allergic rhinosinusopathy (AR) with the formation of polyposis sinusitis with polyps in the nose, requiring frequent surgical interventions (polypotomy); intolerance to NA and NSAIDs, manifested by bronchial asthma.
При развернутой астматической триаде непереносимость НА и НПВП связана с их непосредственным вмешательством в метаболизм арахидоновой кислоты, ингибируя циклоксигеназу, переключая метаболизм на липоксигеназный путь с избыточным образованием лейкотриенов, обладающих выраженным бронхоконстрикторным эффектом. Это существенно утяжеляет течение заболевания и может быть причиной развития астматического статуса. Поэтому основные лечебно-профилактические мероприятия должны быть направлены на предупреждение формирования развернутой AT у больных ПРС.With the developed asthmatic triad, intolerance to NA and NSAIDs is associated with their direct intervention in the metabolism of arachidonic acid, inhibiting cyclooxygenase, switching metabolism to the lipoxygenase pathway with excessive formation of leukotrienes with a pronounced bronchoconstrictor effect. This significantly aggravates the course of the disease and can be the cause of the development of asthmatic status. Therefore, the main therapeutic and preventive measures should be aimed at preventing the formation of deployed AT in patients with ORS.
По данным наших исследований вероятность развития AT у больных ПРС превышает 63%. Есть сведения, что после полипотомии в 53% случаев через 3-4 года наблюдаются рецидивы ПРС [1, 2]. Такой непродолжительный эффект полипотомии при ПРС обусловлен отсутствием эквивалентов прогнозирования прогрессирования патологического процесса с формированием развернутой астматической триады.According to our studies, the likelihood of developing AT in ORS patients exceeds 63%. There is evidence that after polypotomy in 53% of cases after 3-4 years, relapses of ORS are observed [1, 2]. Such a short-term effect of polypotomy in ORS is due to the lack of equivalents for predicting the progression of the pathological process with the formation of a developed asthmatic triad.
Известен способ прогнозирования развития бронхиальной астмы у больных полипозным риносинуситом [3], включающий определение в крови пациентов молекул средней массы (МСМ), ед.оп.пл., измерение температур выдыхаемого и вдыхаемого воздуха (Т выд), °С, и (Т вдых), °С, и определение разности этих температур (ДТ), °С. Прогноз осуществляют с помощью дискриминантного уравнения: D=+5,028×T выд-0,405×ΔТ-8,910×МСМ, где граничное значение дискриминантной функции составляет 152,16. При D меньше граничного значения у больных с полипозным риносинуситом прогнозируют развитие бронхиальной астмы.There is a method for predicting the development of bronchial asthma in patients with polyposis rhinosinusitis [3], which includes the determination of medium-weight molecules (MSM) in the blood of patients, units of measurement, measuring the temperature of the exhaled and inhaled air (T exp), ° C, and (T inhalation), ° С, and determination of the difference of these temperatures (ДТ), ° С. The forecast is carried out using the discriminant equation: D = + 5.028 × T vy-0.405 × ΔT-8.910 × MSM, where the boundary value of the discriminant function is 152.16. When D is less than the boundary value in patients with polypous rhinosinusitis, the development of bronchial asthma is predicted.
Недостатками известного способа являются: сложность определения в крови пациентов молекул средней массы (МСМ) и трудоемкость из-за необходимости математического расчета дискриминантного уравнения.The disadvantages of this method are: the difficulty of determining in the blood of patients of molecules of medium weight (MSM) and the complexity due to the need for mathematical calculation of the discriminant equation.
Задачей изобретения является создание информативного способа прогнозирования формирования развернутой астматической триады у больных полипозным риносинуситом после полипотомии.The objective of the invention is the creation of an informative method for predicting the formation of a detailed asthmatic triad in patients with polypoid rhinosinusitis after polypotomy.
Поставленную задачу осуществляют за счет того, что с помощью биолюминесцентного метода у больных полипозным риносинуситом после полипотомии определяют активность ферментов лимфоцитов периферической крови больных: НАДФ-глутаматдегидрогеназы (НАДФ-ГДГ) и НАДН-лактатдегидрогеназы (НАДН-ЛДГ). Вычисляют соотношение активностей (НАДФ-ГДГ / НАДН-ЛДГ), и при значении полученного показателя равном или более 5,4 прогнозируют формирование астматической триады.The task is carried out due to the fact that the activity of patients' peripheral blood lymphocytes enzymes: NADP-glutamate dehydrogenase (NADP-GDH) and NADH-lactate dehydrogenase (NADH-LDH) is determined using a bioluminescent method in patients with polyposis rhinosinusitis after polypotomy. The ratio of activities (NADF-GDH / NADH-LDH) is calculated, and when the value of the obtained indicator is equal to or more than 5.4, the formation of an asthmatic triad is predicted.
Значение 5,4 получено опытным путем на основании сопоставления рассчитываемого показателя с характером течения полипозного риносинусита и астматической триады у обследуемых больных.The value of 5.4 was obtained experimentally based on a comparison of the calculated indicator with the nature of the course of polypous rhinosinusitis and asthmatic triad in the examined patients.
Значение показателя, определяемое по соотношению величин активностей НАДФ-ГДГ и НАДН-ЛДГ, равное или более 5,4 свидетельствует о снижении интенсивности анаэробного окисления глюкозы и повышении оттока субстратов с цикла трикарбоновых кислот на реакции аминокислотного обмена.The value of the indicator, determined by the ratio of the activities of NADP-GDH and NADH-LDH, equal to or more than 5.4, indicates a decrease in the intensity of anaerobic oxidation of glucose and an increase in the outflow of substrates from the tricarboxylic acid cycle to amino acid exchange reactions.
Известно, что лимфоциты являются главными клетками в системе иммунологического надзора [4]. От уровня функциональной активности лимфоцитов зависит исход и характер течения воспалительного процесса. Установлено, что функциональная активность лимфоцитов в значительной степени определяется уровнем их метаболических процессов [5]. К числу показателей, наиболее объективно отражающих основные параметры внутриклеточного метаболизма, можно отнести дегидрогеназы.It is known that lymphocytes are the main cells in the system of immunological surveillance [4]. The outcome and nature of the course of the inflammatory process depends on the level of functional activity of lymphocytes. It has been established that the functional activity of lymphocytes is largely determined by the level of their metabolic processes [5]. Among the indicators that most objectively reflect the main parameters of intracellular metabolism, dehydrogenases can be attributed.
НАДФ-зависимая глутаматдегидрогеназа (НАДФ-ГДГ) (ГДГ, КФ 1.4.1.2) -основной фермент азотистого метаболизма, локализуется в различных частях клетки. В качестве кофермента для НАФ-ГДГ использует НАДФ. НАДФ-ГДГ находятся на ключевых позициях внутриклеточного метаболизма в ряде основных пластических процессов (например синтез аминокислот) [5].NADP-dependent glutamate dehydrogenase (NADP-GDH) (GDH, EC 1.4.1.2), the main enzyme of nitrogen metabolism, is localized in various parts of the cell. As a coenzyme for NAF-GDG uses NADF. NADP-GDH are at key positions in intracellular metabolism in a number of basic plastic processes (for example, amino acid synthesis) [5].
НАДН-зависимая лактатдегидрогеназа (НАДН-ЛДГ) (ЛДГ, КФ 1.1.1.27) - фермент гликолиза, обратимо катализирующий окисление лактата в пировиноградную кислоту с участием в качестве кофермента НАД+. ЛДГ занимает ключевое положение в регуляции цитоплазматического уровня НАДН/НАД и характеризует уровень терминальных реакций гликолиза [4].NADH-dependent lactate dehydrogenase (NADH-LDH) (LDH, EC 1.1.1.27) is a glycolysis enzyme that reversibly catalyzes the oxidation of lactate to pyruvic acid with the participation of NAD + as a coenzyme. LDH occupies a key position in the regulation of the cytoplasmic level of NADH / NAD and characterizes the level of terminal glycolysis reactions [4].
Способ выполняется следующим образом.The method is as follows.
У больных полипозным риносинуситом после полипотомии, забирают венозную кровь из локтевой вены свободным током в пробирки с гепарином. Выделяют лимфоциты. Центрифугируют на градиенте плотности фиколл-верографина по стандартной методике А. Воушп (1968) [6]. Подсчитывают концентрацию лимфоцитов, например, в камере Горяева. При контроле морфологического состава лейкоцитарных взвесей определяют чистоту выхода лимфоцитов, которая составляет не менее 97%. 1 млн. выделенных клеток используют для определения активностей НАДФ-ГДГ и НАДН-ЛДГ в лимфоцитах одним из известных способов, например, биолюминесцентным методом [7]. Для этого в 150 мкл инкубационной смеси, содержащей соответствующий субстрат и кофактор, вносят 50 мкл суспензии разрушенных лимфоцитов. Конкретные значения концентраций субстратов и кофакторов, рН среды для определяемых ферментов представлены в таблице 1.In patients with polypous rhinosinusitis after polypotomy, venous blood is taken from the ulnar vein by free flow into heparin tubes. Lymphocytes are isolated. It is centrifuged on a density gradient of ficoll-verographin according to the standard method of A. Wooshp (1968) [6]. The concentration of lymphocytes is calculated, for example, in the Goryaev chamber. When controlling the morphological composition of leukocyte suspensions determine the purity of the output of lymphocytes, which is at least 97%. 1 million selected cells are used to determine the activities of NADP-GDH and NADH-LDH in lymphocytes using one of the known methods, for example, by the bioluminescent method [7]. For this, in 50 μl of the incubation mixture containing the appropriate substrate and cofactor, add 50 μl of a suspension of destroyed lymphocytes. Specific values of the concentrations of substrates and cofactors, pH of the medium for the determined enzymes are presented in table 1.
Примечание: среду с рН 9,8 готовят на Трис-HCl буфере (ICN Biomedicals Inc., США); с рН 7,0 - на К+, Na+-фосфатном буфере (буфер готовят из K2HPO4 и NaH2PO4 (Реахим, Россия)).Note: medium with a pH of 9.8 is prepared on Tris-HCl buffer (ICN Biomedicals Inc., USA); with a pH of 7.0 on K + , Na + phosphate buffer (buffer prepared from K 2 HPO 4 and NaH 2 PO 4 (Reakhim, Russia)).
После инкубации исследуемых проб при 37°С в течение 30 минут для НАДФ-ГДГ или 5 минут для НАДН-ЛДГ к 200 мкл инкубационной смеси добавляют 50 мкл флавинмононуклеотида (ФМН) в концентрации 1,5×10-5М, 50 мкл 0,0005% миристинового альдегида и 10 мкл ферментативной системы НАДН : ФМНоксидоредуктаза-люцифераза (все реактивы биолюминесцентной системы разводят в 0,1 М К+, Na+-фосфатном буфере с рН 7,0). После смешивания биолюминесцентных реактивов и инкубационной пробы с помощью биохемилюминометра, например марки "БЛМ-8803", измеряют свечение. Учитывая, что в клетках имеется определенное количество субстратов для течения различных метаболических реакций, в том числе и катализируемых исследуемыми ферментами, определяют показатели, условно названные "субстратный фон ферментов". Определение производят в тех же условиях, что и для вышеперечисленных дегидрогеназ, но в инкубационную смесь вместо соответствующего субстрата вносят буфер. В результате измерения свечения на биолюминометре получают относительные значения активности исследуемых ферментов. Чтобы получить абсолютные значения активности строят графики зависимости интенсивности биолюминесценции от концентрации НАДФН и НАДН (калибровочный график). Для этого 200 мкл стандартного раствора НАДФН или НАДН в диапазоне 10-9-10-4 М вносят в кюветы биолюминометра, содержащие ФМН, миристиновый альдегид и НАДФН : ФМНоксидоредуктазу-люциферазу в концентрациях, указанных выше, после чего производят измерение интенсивности биолюминесценции. В связи с широким диапазоном рН буферов, используемых для определения дегидрогеназной активности, а также рН-зависимостью биолюминесценции ферментативной системы из светящихся бактерий, калибровочные графики строят на основе соответствующего буфера.After incubation of the test samples at 37 ° C for 30 minutes for NADP-HDH or 5 minutes for NADH-LDH, 50 μl of flavin mononucleotide (FMN) at a concentration of 1.5 × 10 -5 M, 50 μl 0, is added to 200 μl of the incubation mixture. 0005% myristic aldehyde and 10 μl of the NADH: FMN oxidoreductase-luciferase enzyme system (all reagents of the bioluminescent system are diluted in 0.1 M K + , Na + phosphate buffer with pH 7.0). After mixing the bioluminescent reagents and the incubation sample using a biochemiluminometer, for example brand "BLM-8803", measure the glow. Given that the cells have a certain number of substrates for the course of various metabolic reactions, including those catalyzed by the studied enzymes, the parameters conventionally called "substrate background of enzymes" are determined. The determination is made under the same conditions as for the above dehydrogenases, but a buffer is added to the incubation mixture instead of the corresponding substrate. As a result of measuring the glow on a bioluminometer, relative values of the activity of the studied enzymes are obtained. To obtain the absolute values of the activity, graphs of the dependence of the intensity of bioluminescence on the concentration of NADPH and NADH are constructed (calibration graph). For this, 200 μl of a standard solution of NADPH or NADH in the range of 10 -9 -10 -4 M is added to the bioluminometer cuvette containing FMN, myristic aldehyde and NADPH: FMN oxidoreductase-luciferase in the concentrations indicated above, after which the intensity of bioluminescence is measured. Due to the wide range of pH buffers used to determine dehydrogenase activity, as well as the pH dependence of the bioluminescence of the enzymatic system from luminous bacteria, calibration plots are built on the basis of the corresponding buffer.
Активность ферментов рассчитывают по формуле: А=Δ[С]×V/ТThe enzyme activity is calculated by the formula: A = Δ [C] × V / T
где:Where:
А - активность дегидрогеназы, Е на 1×104 лимфоцитов (1E=1 мкмоль/мин [1]);A - dehydrogenase activity, E per 1 × 10 4 lymphocytes (1E = 1 μmol / min [1]);
Δ[С] - разница концентраций НАД(Ф)Н в пробах "фермент" и "фон фермента", мкмоль;Δ [C] is the difference in the concentrations of NAD (F) N in the samples "enzyme" and "background enzyme", mmol;
V - объем пробы, мл;V is the sample volume, ml;
Т - время инкубации, мин.T - incubation time, min
Затем рассчитывают соотношение активностей НАДФ-ГДГ и НАДН-ЛДГ (НАДФ-ГДГ / НАДН-ЛДГ). Значение полученного показателя равное или более 5,4 свидетельствует о прогнозе развития астматической триады.Then calculate the ratio of the activities of NADP-GDH and NADH-LDH (NADF-GDG / NADH-LDH). A value of the obtained indicator equal to or more than 5.4 indicates a prognosis of the development of an asthmatic triad.
Данный способ апробирован на больных полипозным риносинуситом с непеносимостью НА и НПВП (n=25) в возрасте от 25-45 лет. Все больные были обследованы с помощью общепринятых лабораторных методов обследования при поступлении в стационар и в динамике через 6, 12, 24 месяцев.This method was tested on patients with polyposis rhinosinusitis with intolerance to NA and NSAIDs (n = 25) aged 25-45 years. All patients were examined using generally accepted laboratory examination methods upon admission to the hospital and in dynamics after 6, 12, 24 months.
Активность НАДФ-ГДГ и НАДН-ЛДГ в лимфоцитах крови определяли с помощью биолюминесцентного метода.The activity of NADP-GDH and NADH-LDH in blood lymphocytes was determined using the bioluminescent method.
В результате динамического наблюдения в течение 2-х лет за больными ПРС с непереносимостью НПВП (n=25) после полипотомии у 18 человек (60%) наблюдалось формирование астматической триады,As a result of dynamic observation over 2 years of patients with ORS with NSAID intolerance (n = 25) after polypotomy in 18 people (60%), the formation of an asthmatic triad was observed,
У всех больных обнаружено совпадение прогноза формирования AT, сделанного по предложенному способу (табл. 2).In all patients, a match was found in the forecast for the formation of AT made by the proposed method (table. 2).
Клинический пример №1.. Выписка из истории болезни №2547/16. Больная П. 49 лет поступила на стационарное лечение в НИИ медицинских проблем Севера (г.Красноярск). Отмечалась заложенность в носу после приема нестероидных противовоспалительных препаратов. Осмотр ЛОР-органов установил наличие полипов в полости носа. Направлена на полипотомию.Clinical example No. 1 .. Extract from the medical history No. 2547/16. Patient P., 49 years old, was admitted to hospital in the Research Institute of Medical Problems of the North (Krasnoyarsk). Nasal congestion was noted after taking non-steroidal anti-inflammatory drugs. Examination of ENT organs revealed the presence of polyps in the nasal cavity. Directed to polypotomy.
Рентгенография органов грудной клетки. Признаки диффузного пневмосклероза.Chest x-ray. Signs of diffuse pneumosclerosis.
Рентгенография придаточных пазух носа. Признаки хронического синусита.X-ray of the sinuses. Signs of chronic sinusitis.
Спирография: нарушения ФВД по обструктивному типу. Проба с вентолином положительная прирост OФB1 на 34%.Spirography: obstructive FVD disorders. Test with ventolin positive increase OFB 1 by 34%.
ПСВ суточная вариабельность 38%.PSV daily variability of 38%.
Консультация оториноларинголога: хронический полипозный риносинусит с полипами в носу.Consultation of an otorhinolaryngologist: chronic polypous rhinosinusitis with polyps in the nose.
Проведено обследование больной биолюминесцентным методом по предложенному способу. При исследовании лимфоцитов периферической крови до полипотомии по предложенному способу обнаружено, что соотношение активностей НАДФ-ГДГ и НАДН-ЛДГ составило 27,02 (больше 5, 4): пример №8 из табл. 2, что дает основания для прогнозирования формирования развернутой AT.A patient was examined with a bioluminescent method according to the proposed method. In the study of peripheral blood lymphocytes before polypotomy by the proposed method, it was found that the ratio of the activities of NADP-HDH and NADH-LDH was 27.02 (more than 5, 4): example No. 8 from table. 2, which gives reason to predict the formation of a deployed AT.
Через 24 месяца повторного осмотра появились жалобы на приступы экспираторной одышки до 9-10 эпизодов в течение дня и 3-4 ночных эпизода ежедневно. Приступы удушья были вызваны физической нагрузкой, резкими запахами, при похолодании и после приема ортофена (НПВП). Диагностирована AT.After 24 months of re-examination, complaints appeared of attacks of expiratory dyspnea of up to 9-10 episodes during the day and 3-4 nightly episodes daily. Attacks of suffocation were caused by physical exertion, pungent odors, during cooling, and after taking orthophene (NSAIDs). Diagnosed with AT.
Клинический пример №2. Выписка из истории болезни №15436/12. Больной С. 53 лет поступил на стационарное лечение в НИИ медицинских проблем Севера (г. Красноярск).Clinical example No. 2. Extract from the medical history No. 15436/12. Patient S., 53 years old, was admitted to inpatient treatment at the Research Institute of Medical Problems of the North (Krasnoyarsk).
Страдает полипозным риносинуситом в течение полугода. Данное обострение связано с курсом противовоспалительной терапии препаратом мовалис (НПВП) по поводу лечения грыжи поясничного отдела позвоночника. В связи с отсутствием эффекта от базисной терапии было рекомендовано стационарное лечение для оперативного вмешательства - полипотомии.Suffers from polypous rhinosinusitis for six months. This exacerbation is associated with a course of anti-inflammatory therapy with Movalis (NSAIDs) for the treatment of hernia of the lumbar spine. Due to the lack of effect from basic therapy, inpatient treatment for surgical intervention, polypotomy, was recommended.
Рентгенография органов грудной клетки - патологии не выявлено.Chest x-ray - no pathology detected.
КТ придаточных пазух носа - признаки гиперпластического полипозного двустороннего гаймороэтмоидита с полипами в носу.CT of the sinuses - signs of hyperplastic polypous bilateral sinusitis with polyps in the nose.
Спирография - нарушения функции внешнего дыхания не выявлено.Spirography - violations of the function of external respiration were not detected.
При исследовании лимфоцитов периферической крови биолюминесцентным методом по предложенному способу обнаружено, что соотношение активностей НАДФ-ГДГ и НАДН-ЛДГ составило 2,84 (меньше 5,4): пример №21 из табл. 2, что указывает на отсутствие формирования AT после полипотомии.In the study of peripheral blood lymphocytes by the bioluminescent method according to the proposed method, it was found that the ratio of the activities of NADP-GDH and NADH-LDH was 2.84 (less than 5.4): example No. 21 from table. 2, which indicates the absence of AT formation after polypotomy.
При амбулаторном обследовании больной в диспансерном кабинете аллергологом-иммунологом и оториноларингологом через 6, 12, 24 месяцев после удаления полипов развернутая AT не сформировалась.During an outpatient examination of the patient in the dispensary, an allergist-immunologist and an otorhinolaryngologist 6, 12, 24 months after removal of the polyps, an expanded AT did not form.
Технический результат предлагаемого способа:The technical result of the proposed method:
- возможность прогноза формирования астматической триады на фоне полипозного риносинусита после полипотомии;- the ability to predict the formation of an asthmatic triad against the background of polypous rhinosinusitis after polypotomy;
- однократный забор венозной крови;- a single venous blood sampling;
- высокий уровень совпадения прогноза.- high level of coincidence of the forecast.
Предложенный способ позволяет корректировать лечебно-профилактические мероприятия на этапах динамического наблюдения и может быть рекомендован для применения в клинической практике.The proposed method allows you to adjust the treatment and preventive measures at the stages of dynamic observation and can be recommended for use in clinical practice.
Источники информацииInformation sources
1. Forster U. Strathmann S., Schafer D. et al. Eicosanoid imbalance correlates in vitro with the pattern of clinical symptoms of Samter's triad. // Rhinology. - 2013. - Vol. 51(1). - P. 6-9.1. Forster U. Strathmann S., Schafer D. et al. Eicosanoid imbalance correlates in vitro with the pattern of clinical symptoms of Samter's triad. // Rhinology. - 2013 .-- Vol. 51 (1). - P. 6-9.
2. Johns C.B., Laidlaw T.M. Elevated total serum IgE in nonatopic patients with aspirin-exacerbated respiratory //Am. J. Rhinol. Allergy. - 2014. - Vol. 28(4) - P. 287-289.2. Johns C. B., Laidlaw T. M. Elevated total serum IgE in nonatopic patients with aspirin-exacerbated respiratory // Am. J. Rhinol. Allergy. - 2014 .-- Vol. 28 (4) - P. 287-289.
3. RU 2630972 C2, 09.08.2017.3. RU 2630972 C2, 08/09/2017.
4. Березов T.T., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1998. - 704 с.4. Berezov T.T., Korovkin B.F. Biological chemistry. - M.: Medicine, 1998 .-- 704 p.
5. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология. - М.: Медицина, 2000. -432 с.5. Khaitov P.M., Ignatieva G.A., Sidorovich I.G. Immunology. - M .: Medicine, 2000. -432 p.
6. Boyum A. Isolation of lymphocytes from blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1968. - Vol. 21 (Suppl. 97). - P. 77-80.6. Boyum A. Isolation of lymphocytes from blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1968. - Vol. 21 (Suppl. 97). - P. 77-80.
7. Савченко A.A., Сунцова Л.Н. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови человека биолюминесцентным методом // Лабораторное дело. - 1989. - №11. - С.3-25.7. Savchenko A.A., Suntsova L.N. Highly sensitive determination of the activity of dehydrogenases in lymphocytes of human peripheral blood using the bioluminescent method // Laboratory. - 1989. - No. 11. - S.3-25.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018100383A RU2679414C1 (en) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Method of forecasting the formation of extended astmatic triad in patients with polyposal rhinosinusitis after polypotomy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018100383A RU2679414C1 (en) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Method of forecasting the formation of extended astmatic triad in patients with polyposal rhinosinusitis after polypotomy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2679414C1 true RU2679414C1 (en) | 2019-02-08 |
Family
ID=65273774
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018100383A RU2679414C1 (en) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Method of forecasting the formation of extended astmatic triad in patients with polyposal rhinosinusitis after polypotomy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2679414C1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013039785A2 (en) * | 2011-09-12 | 2013-03-21 | Kalypsys, Inc. | Heterocyclic inhibitors of histamine receptors for the treatment of disease |
| RU2630972C2 (en) * | 2016-02-04 | 2017-09-15 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" | Method for bronchial asthma development prediction in patients with rhinosinusitis polyposa |
-
2018
- 2018-01-09 RU RU2018100383A patent/RU2679414C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013039785A2 (en) * | 2011-09-12 | 2013-03-21 | Kalypsys, Inc. | Heterocyclic inhibitors of histamine receptors for the treatment of disease |
| RU2630972C2 (en) * | 2016-02-04 | 2017-09-15 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" | Method for bronchial asthma development prediction in patients with rhinosinusitis polyposa |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| MODRZYNSKI M. et al. Zafirlukast in treatment of nasal polyps in patients with aspirin intolerant bronchial asthma--preliminary report// Pol Merkur Lekarski. 2002 Mar;12(69):224-7. * |
| Захарова Э.В. / Клинико-функциональные особенности течения бронхиальной астмы, сочетанной с полипозным риносинуситом, при различных вариантах лечения / Авто диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Благовещенск 2007. * |
| САМСОНОВ В.П. и др. Прогнозирование развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой //БЮЛЛЕТЕНЬ Выпуск 56, 2015, c. 42-45. * |
| САМСОНОВ В.П. и др. Прогнозирование развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой //БЮЛЛЕТЕНЬ Выпуск 56, 2015, c. 42-45. Захарова Э.В. / Клинико-функциональные особенности течения бронхиальной астмы, сочетанной с полипозным риносинуситом, при различных вариантах лечения / Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Благовещенск 2007. MODRZYNSKI M. et al. Zafirlukast in treatment of nasal polyps in patients with aspirin intolerant bronchial asthma--preliminary report// Pol Merkur Lekarski. 2002 Mar;12(69):224-7. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Chen et al. | Endogenous hydrogen sulfide in patients with COPD | |
| Koczulla et al. | Comparison of exhaled breath condensate pH using two commercially available devices in healthy controls, asthma and COPD patients | |
| Carpagnano et al. | Analysis of mitochondrial DNA alteration in new phenotype ACOS | |
| CN105039530B (en) | Mark and its application that mitochondria correlation refining miRNA occurs as mankind's severe asthenospermia | |
| Xu et al. | Association of serum bilirubin with stroke severity and clinical outcomes | |
| Chen et al. | A circulating exosomal microRNA panel as a novel biomarker for monitoring post‐transplant renal graft function | |
| Wu et al. | Plasma mtDNA analysis aids in predicting pancreatic necrosis in acute pancreatitis patients: A pilot study | |
| RU2750973C1 (en) | Method for diagnosing bronchial obstruction in lung transplant recipients | |
| Paschoal et al. | Cystic fibrosis in adults | |
| RU2679414C1 (en) | Method of forecasting the formation of extended astmatic triad in patients with polyposal rhinosinusitis after polypotomy | |
| Ramendra et al. | Triaging donor lungs based on a microaspiration signature that predicts adverse recipient outcome | |
| Kurniawan et al. | the Differences in Troponin I and Ck-Mb Values in Acute Myocardial Infarction Patients With St Elevation and Without St Elevation | |
| CN107460241A (en) | Application of the excretion body microRNA in acute myocardial infarction AMI risk assessment | |
| Kondratyeva et al. | Clinical and genetic characterization of patients with cystic fibrosis and functional assessment of the chloride channel with the pathogenic variant c. 831G> A (p. Trp277*), described for the first time | |
| Fingerova et al. | The measurement of reactive oxygen species in human neat semen and in suspended spermatozoa: a comparison | |
| Tan et al. | The prognostic implications of perioperative endogenous hydrogen sulfide and nitric oxide levels in children with congenital heart disease complicated by pulmonary arterial hypertension | |
| Shevchenko et al. | MiR‐339 and galectin‐3: diagnostic value in patients with airway obstruction after lung transplantation | |
| WO2022136474A1 (en) | Marker for the diagnosis and monitoring of progression of the bicuspid aortic valve (bav) and/or (bav)-associated thoracic aortic aneurysm | |
| RU2498300C1 (en) | Method for prediction of outcome of widespread purulent peritonitis | |
| Restrepo‐Serna et al. | Association between stress and catecholamines with painful TMD in children | |
| RU2593791C1 (en) | Method for prediction of development of cardiovascular complications following suffered acute myocardial infarction with st segment elevation in patients with anxiety and depressive disorders | |
| RU2452377C1 (en) | Method of predicting development of acute endometriosis after medical abortion | |
| Singh et al. | Quantitative assessment of expression of lactate dehydrogenase and its isoforms 3 and 4 may serve as useful indicators of progression of gallbladder cancer: a pilot study | |
| RU2425640C1 (en) | Method of predicting recurrent cerebrovascular complications in patients with hypertension in combination with ischemic heart disease in acute period of ischemic stroke | |
| Bernard et al. | NADPH oxidases and aging models of lung fibrosis |