RU2671637C1 - Method of predicting the risk of rejection of the kidney before transplantation - Google Patents
Method of predicting the risk of rejection of the kidney before transplantation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2671637C1 RU2671637C1 RU2018100350A RU2018100350A RU2671637C1 RU 2671637 C1 RU2671637 C1 RU 2671637C1 RU 2018100350 A RU2018100350 A RU 2018100350A RU 2018100350 A RU2018100350 A RU 2018100350A RU 2671637 C1 RU2671637 C1 RU 2671637C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- rejection
- risk
- mip
- 1alpha
- transplantation
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к медицине, в частности к иммунологическим лабораторным исследованиям в трансплантологии и может быть использовано как критерий прогноза степени риска отторжения почки до ее трансплантации.The present invention relates to medicine, in particular to immunological laboratory studies in transplantology and can be used as a criterion for predicting the degree of risk of kidney rejection before transplantation.
Клиническая трансплантология является одним из оптимальных способов лечения заболеваний почек, не поддающихся традиционным способам. Однако пересадка тканей или органов от одного индивидуума другому, генетически отличающемуся, вызывает реакцию отторжения пересаженного биологического материала. Поэтому отторжение является одной из основных причин ограниченной выживаемости трансплантата. Известно, что иммунологическая реакция на донорский орган включает комплекс последовательных клеточных и молекулярных процессов, которые суммарно обуславливают клиническую картину отторжения (Taniguchi М, Rebellato LM, Cai J, Hopfield J, et al.. Higher risk of kidney graft failure in the presence of anti-angiotensin II type-1 receptor antibodies. Am J Transplant. - 2013. - №13. - p. 2577-2589). На сегодняшний день нет никаких сомнений в неудовлетворенной медицинской потребности диагностики повреждения трансплантата, чтобы обеспечить более персонализированный терапевтический подход (Volk HD, Sawitzki В, Reinke P. Molecular analysis of renal allograft biopsies-more than a nice toy for researchers? Am J Transplant. -2013. - №13. - p. 539-540).Clinical transplantology is one of the best ways to treat kidney diseases that are not amenable to traditional methods. However, the transplantation of tissues or organs from one individual to another, genetically different, causes a rejection reaction of the transplanted biological material. Therefore, rejection is one of the main causes of limited transplant survival. An immunological response to a donor organ is known to include a complex of sequential cellular and molecular processes that together determine the clinical picture of rejection (Taniguchi M, Rebellato LM, Cai J, Hopfield J, et al .. Higher risk of kidney graft failure in the presence of anti -angiotensin II type-1 receptor antibodies. Am J Transplant. - 2013. - No. 13. - p. 2577-2589). To date, there is no doubt about the unmet medical need for diagnosis of transplant damage to provide a more personalized therapeutic approach (Volk HD, Sawitzki B, Reinke P. Molecular analysis of renal allograft biopsies-more than a nice toy for researchers? Am J Transplant. - 2013. - No. 13. - p. 539-540).
В последние годы уделяется большое внимание биохимическим, иммунологическим, молекулярногенетическим исследованиям, благодаря чему удалось получить представление о процессах, лежащих в основе повреждения трансплантата при отторжении.In recent years, much attention has been paid to biochemical, immunological, molecular genetic studies, thanks to which we have been able to get an idea of the processes that underlie graft damage during rejection.
Аналогом данной заявки является способ мониторинга состояния пациента после трансплантации органа (патент РФ на изобретение № 2560705, опубликованный в 2015 г. Хубутия М.Ш., Пинчук А.В., Евсеев А.К., Гольдин М.М.). Способ основан на электрохимическом методе определения патологических состояний при помощи измерения редокс потенциалов (РП) плазмы крови. При этом ежедневно определяют РП плазмы крови пациента с помощью платинового электрода относительно хлорсеребряного электрода. Платиновый электрод предварительно обрабатывают с помощью катодно-анодного сканирования в растворе неорганического восстановителя в циклическом потенциодинамическом режиме. Проводят ежедневный мониторинг величины РП плазмы крови пациента и выявляют изменения величин РП в одном направлении за сутки или несколько суток. При выявлении изменения РП более 25 мВ за сутки или несколько суток судят о наличии дисфункции трансплантата или высоком риске развития криза отторжения трансплантата.The analogue of this application is a method for monitoring the patient’s condition after organ transplantation (RF patent for invention No. 2560705, published in 2015, Khubutiya M.Sh., Pinchuk A.V., Evseev A.K., Goldin M.M.). The method is based on the electrochemical method for determining pathological conditions by measuring redox potentials (RP) of blood plasma. In this case, the RP of the patient’s blood plasma is determined daily using a platinum electrode relative to the silver chloride electrode. A platinum electrode is pretreated using cathode-anode scanning in an inorganic reductant solution in a cyclic potentiodynamic mode. Daily monitoring of the RP value of the patient’s blood plasma is carried out and changes in the RP values in one direction per day or several days are detected. If a change in RP of more than 25 mV per day or several days is detected, the presence of transplant dysfunction or a high risk of developing a graft rejection crisis are judged.
Недостатками способа являются:The disadvantages of the method are:
1) Наличие специального прибора для определения редокс потенциала, с платиновым электродом.1) The presence of a special device for determining the redox potential, with a platinum electrode.
2) Необходимость предварительной трудоемкой обработки электрода с помощью катодно-анодного сканирования в водном растворе 0,1 М Na2SO3 в циклическом потенциодинамическом режиме перед каждым измерением.2) The need for preliminary laborious treatment of the electrode using cathode-anode scanning in an aqueous solution of 0.1 M Na2SO3 in a cyclic potentiodynamic mode before each measurement.
3) Для мониторинга необходимо осуществлять забор крови у трансплантированных пациентов ежедневно.3) For monitoring, it is necessary to take blood from transplanted patients daily.
За ближайший аналог принят способ диагностики отторжения почечного аллотрансплантата (патент РФ на изобретение №2430370, публикация 2009 г. Васильченко И.А., Метелин В.Б., Цалман А.Я., Ватазин А.В.). Способ диагностики отторжения почечного аллотрансплантата включает определение фазовой высоты РН живых лимфоцитов периферической крови методом фазово-интерференционной микроскопии. По полученным результатам рассчитывают функциональную активность лимфоцитов по формуле: FA=(k3n3+k2n2+k1n1+k0n0)/n, где n - число лимфоцитов в выборке, n3 - число лимфоцитов с РН≤1,5 мкм, n2 - число лимфоцитов с 1,5 мкм ≤ РН ≤ 2 мкм, n1 - число лимфоцитов с 2 мкм≤РН≤2,5 мкм, n0 - число лимфоцитов с РН ≥ 2,5 мкм, k3, k2, k1, k0 - коэффициенты активности лимфоцитов. Если FA=1,8-2,0, то диагностируют отторжение почечного трансплантата.For the closest analogue, a method for the diagnosis of renal allograft rejection was adopted (RF patent for the invention No. 2430370, publication 2009, Vasilchenko I.A., Metelin V.B., Tsalman A.Ya., Vatazin A.V.). A method for diagnosing renal allograft rejection includes determining the phase height of the pH of living peripheral blood lymphocytes by phase interference microscopy. Based on the results obtained, the functional activity of lymphocytes is calculated by the formula: FA = (k3n3 + k2n2 + k1n1 + k0n0) / n, where n is the number of lymphocytes in the sample, n3 is the number of lymphocytes with pH ≤1.5 μm, n2 is the number of lymphocytes with 1 , 5 μm ≤ pH ≤ 2 μm, n1 is the number of lymphocytes with 2 μm ≤ pH ≤2.5 μm, n0 is the number of lymphocytes with pH ≥ 2.5 μm, k3, k2, k1, k0 are the lymphocyte activity coefficients. If FA = 1.8-2.0, then renal transplant rejection is diagnosed.
Основным недостатком данного способа является неспецифичность метода, так как повышение функциональной активности лимфоцитов может быть связано не только с отторжением, но и с ишемическим и реперфузионным повреждением ткани, воспалительными и инфекционными процессами и т.д. Так же способ требует высокой квалификации персонала и дополнительного оборудования.The main disadvantage of this method is the non-specificity of the method, since an increase in the functional activity of lymphocytes can be associated not only with rejection, but also with ischemic and reperfusion tissue damage, inflammatory and infectious processes, etc. Also, the method requires highly qualified personnel and additional equipment.
Задачи: снижение риска потери трансплантата; повышение чувствительности и специфичности способа диагностики предикторов отторжения; упрощение способа, не требующего дополнительного оборудования и специального обучения персонала, сокращение материальных затрат.Objectives: reduce the risk of transplant loss; increasing the sensitivity and specificity of the method for the diagnosis of rejection predictors; simplification of the method that does not require additional equipment and special training of personnel, reduction of material costs.
Сущностью предложенного изобретения является определение уровня концентрации комплекса цитокинов до трансплантации и по уровню полученных значений прогнозирование степени риска отторжения.The essence of the proposed invention is to determine the level of concentration of the complex of cytokines before transplantation and the level of values obtained, predicting the degree of risk of rejection.
Технический результат: способ при использовании позволяет снизить риск отторжения аллотрансплантата почки, определив уровень риска отторжения до трансплантации. Это дает возможность в период предоперационной подготовки реципиента, провести профилактическое лечение и предотвратить потерю трансплантата, улучшить его функции после трансплантации и таким образом повлиять на благоприятный исход трансплантации. Предлагаемое в данном способе иммунологическое исследование уровня цитокинов, является простым в исполнении, минимально инвазивным и занимает на 20% меньше времени по сравнению с известным аналогом.Technical result: the method when used allows to reduce the risk of kidney allograft rejection by determining the risk of rejection prior to transplantation. This makes it possible, during the preoperative preparation of the recipient, to carry out preventive treatment and prevent the loss of the transplant, improve its function after transplantation and thus affect the favorable outcome of the transplant. The immunological study of the level of cytokines proposed in this method is simple in execution, minimally invasive and takes 20% less time in comparison with the known analogue.
Для осуществления этого способа предложено всем пациентам при постановке в лист ожидания, параллельно с выявлением HLA антител, из того же образца крови выполнять первичное иммунологическое определение уровня цитокинов в крови: IL-1RA, IL-2, IL-6, Eotaxin, МСР-1, MIP-1alpha, MIP-1beta, SDF-1alpha, GM-CSF, BDNF, LIF. Исследование методом мультиплексного анализа на сформированной для этого исследования мультиплексной панели Simplex ProcartaPlex (например, eBioscience, США). Для этого в лунки иммунологического планшета вносят по 25 мкл аналита и по 25 мкл смеси микросфер, покрытых специфичными антителами. Далее, для первичного исследования предлагается инкубировать при t 24°С на шейкере в течение 60 мин, при 500 об/мин и далее при t 4°С всю ночь, для увеличения чувствительности теста. После отмывки добавляют по 25 мкл смеси детекторных антител, затем выполняют инкубацию при t 24°С в течение 30 мин и промывку. Затем в каждую лунку добавляют по 50 мкл стрептавидина-фикоэритрина в качестве флуоресцентного красителя и инкубируют при t 24°С в течение 30 мин.To implement this method, it is proposed that all patients, when placed on a waiting list, in parallel with the detection of HLA antibodies, from the same blood sample, perform an initial immunological determination of the level of cytokines in the blood: IL-1RA, IL-2, IL-6, Eotaxin, MCP-1 , MIP-1alpha, MIP-1beta, SDF-1alpha, GM-CSF, BDNF, LIF. Multiplexed analysis on the Simplex ProcartaPlex multiplex panel formed for this study (for example, eBioscience, USA). For this, 25 μl of analyte and 25 μl of a mixture of microspheres coated with specific antibodies are added to the wells of the immunological tablet. Further, for the initial study, it is proposed to incubate at t 24 ° C on a shaker for 60 minutes, at 500 rpm and then at t 4 ° C all night to increase the sensitivity of the test. After washing, 25 μl of a mixture of detector antibodies is added, then incubation at 24 ° C for 30 minutes and washing are performed. Then, 50 μl streptavidin-phycoerythrin as a fluorescent dye is added to each well and incubated at 24 ° C for 30 minutes.
Детекцию результатов мультиплексного анализа выполняют с использованием двухлазерной системы с цифровой обработкой сигналов на проточном флуоресцентном анализаторе (например, Luminex 100/200 Luminex Corporation, США).The multiplex analysis results are detected using a two-laser system with digital signal processing on a flow fluorescence analyzer (for example, Luminex 100/200 Luminex Corporation, USA).
Повторное исследование проводят непосредственно перед трансплантацией, параллельно с постановкой кросс-матча, из одного и того же образца крови, забранного в день трансплантации. При повторном исследовании, после смешивания аналита и смеси микросфер, рекомендуется инкубировать при t 24°С на шейкере 60 мин, при 500 об/мин, для сокращения времени исследования и далее продолжить протокол с сохранением тех же условий.A second study is carried out immediately before transplantation, in parallel with the staging of a cross-match, from the same blood sample taken on the day of transplantation. When re-testing, after mixing the analyte and the mixture of microspheres, it is recommended to incubate at t 24 ° C on a shaker for 60 minutes, at 500 rpm, to reduce the time of the study and continue the protocol with the same conditions.
По результатам производят оценку риска отторжения (см. таблицу) и предоперационное прогнозирование возможности развития отторжения после трансплантации почки. Причем риском отторжения является изменение концентрации не менее трех маркеров острого отторжения.The results are used to assess the risk of rejection (see table) and preoperative prediction of the possibility of rejection after kidney transplantation. Moreover, the risk of rejection is a change in the concentration of at least three markers of acute rejection.
Степени риска отторжения почки по результатам концентрации цитокинов у пациентов с хронической почечной болезнью (ХПБ) перед трансплантацией.The degree of risk of kidney rejection according to the results of the concentration of cytokines in patients with chronic renal disease (CPD) before transplantation.
В периферической крови 51 реципиентов аллотрансплантата почки перед трансплантацией и в различные сроки после трансплантации (7, 30, 90 и 180 дней) оценивали содержание 47 цитокинов: IL-12p70, IL-13, IL-1b, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-18, IL-10, IL-17A, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27, IL-9, IL-31, IL-15, IL-1a, IL-1RA, IL-7, IL-33; IFN-alpha, IFN-gamma, TNF-alpha, TNF-beta, Eotaxin, GRO-alpha, IL-8(CXCL8), IP-10, MCP-1, MIP-1alpha, MIP-1beta, MIG, SDF-1alpha, RANTES; GM-CSF, NGF-beta, BDNF, EGF, FGF-2, HGF, LIF, PDGF-BB, PIGF-1, SCF, VEGF-A, VEGF-D, методом мультиплексного анализа и технологии хМАР (принцип проточной цитометрии).In the peripheral blood of 51 kidney allograft recipients before transplantation and at various times after transplantation (7, 30, 90 and 180 days), the content of 47 cytokines was evaluated: IL-12p70, IL-13, IL-1b, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-18, IL-10, IL-17A, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27, IL-9, IL-31, IL-15, IL- 1a, IL-1RA, IL-7, IL-33; IFN-alpha, IFN-gamma, TNF-alpha, TNF-beta, Eotaxin, GRO-alpha, IL-8 (CXCL8), IP-10, MCP-1, MIP-1alpha, MIP-1beta, MIG, SDF-1alpha , RANTES; GM-CSF, NGF-beta, BDNF, EGF, FGF-2, HGF, LIF, PDGF-BB, PIGF-1, SCF, VEGF-A, VEGF-D, multiplex analysis and xMAP technology (flow cytometry principle).
Всем реципиентам был проведен скрининг предсуществующих HLA-антител перед трансплантацией и антитела не были выявлены, что свидетельствует об отсутствии иммунизации антигенами главного комплекса гистосовместимости ранее.All recipients were screened for pre-existing HLA antibodies before transplantation and no antibodies were detected, indicating that there was no previous immunization of the main histocompatibility complex with antigens.
У 34 пациентов наблюдалось не осложненное течение послеоперационного периода на протяжении 180 дней, у 8 - выработались HLA-антитела без клинических проявлений отторжения, а у 9 пациентов в послеоперационном периоде наблюдалась дисфункция трансплантата - острые отторжения (подтвержденные иммуногистохимическим исследованием) и выявлялись HLA-антитела. Контрольную группу составили 20 человек (здоровые доноры крови), обоего пола, возраст - 18-50 лет.In 34 patients, an uncomplicated postoperative period was observed for 180 days, in 8 - HLA antibodies were developed without clinical manifestations of rejection, and in 9 patients in the postoperative period transplant dysfunction was observed - acute rejections (confirmed by immunohistochemical study) and HLA antibodies were detected. The control group consisted of 20 people (healthy blood donors), of both sexes, age - 18-50 years.
Наряду с определением концентрации цитокинов реципиентам проводили стандартные исследования: OAK, биохимические, ИГХ, бактериологические исследования.Along with determining the concentration of cytokines, recipients underwent standard studies: OAK, biochemical, IHC, bacteriological studies.
В результате проведенного исследования выявлены прогностически значимые маркеры острого отторжения трансплантата почки - IL-1RA, IL-2, IL-6, Eotaxin, МСР-1, MIP-1alpha, МIР-1beta, SDF-1alpha, GM-CSF, BDNF, LIF, так как они продемонстрировали достоверные изменения концентрации у реципиентов с кризами отторжения еще до трансплантации. А так же были разработаны критерии риска отторжения для пациентов с ХПБ перед трансплантацией.As a result of the study, prognostically significant markers of acute kidney transplant rejection were revealed - IL-1RA, IL-2, IL-6, Eotaxin, MCP-1, MIP-1alpha, MIP-1beta, SDF-1alpha, GM-CSF, BDNF, LIF , since they demonstrated significant changes in concentration in recipients with rejection crises before transplantation. Also, rejection risk criteria were developed for patients with CPD before transplantation.
В таблице представлены значения критериев риска для каждого цитокина. За пороговые значения концентраций низкой степени риска приняты результаты, полученные у реципиентов почки до трансплантации, впоследствии не имевших отторжений в 100% случаев. Критерии значительной степени риска - это результаты реципиентов почки до трансплантации, впоследствии имевших отторжения в 89% случаев. Промежуточные значения - неопределенный риск отторжения, который составляет 19%.The table shows the values of the risk criteria for each cytokine. The threshold values for low-risk concentrations are taken to be the results obtained from kidney recipients before transplantation, which subsequently did not have rejection in 100% of cases. Criteria of a significant degree of risk are the results of kidney recipients before transplantation, which subsequently had rejection in 89% of cases. Intermediate values - the uncertain risk of rejection, which is 19%.
На основании полученных данных был рассчитан относительный риск (RR) развития отторжения. У пациентов, имевших достоверные повышения или понижения уровня данных цитокинов в крови до трансплантации, отторжения наблюдается в 13,4 раза чаще. Показатель относительного риска свидетельствует о наличии прямой связи (р<0,05) между концентрацией цитокинов до трансплантации и вероятностью отторжения. Число больных, которых необходимо лечить (NNT) - 1,729.Based on the data obtained, the relative risk (RR) of rejection was calculated. In patients who had a significant increase or decrease in the level of these cytokines in the blood before transplantation, rejection is observed 13.4 times more often. The relative risk indicator indicates the presence of a direct relationship (p <0.05) between the concentration of cytokines before transplantation and the probability of rejection. The number of patients to be treated (NNT) is 1.729.
Пример 1.Example 1
Реципиенту Д., мужчина, 30 лет с диагнозом хронический гломерулонефрит, хроническая почечная болезнь (ХПБ) С5 перед трансплантацией было выполнено иммунологическое исследование уровня цитокиновых маркеров отторжения и получены результаты: IL-1RA - 359,16 пг/мл, IL-2 - 20,67 пг/мл, IL-6 - 0 пг/мл, Eotaxin - 149,0 пг/мл, МСР-1 - 157,35 пг/мл, MIP-1alpha - 9,50 пг/мл, MIP-1beta - 725,71 пг/мл, SDF-1alpha - 1182,12 пг/мл, GM-CSF - 10,01 пг/мл, BDNF - 127,67 пг/мл, LIF - 0 пг/мл. Концентрация маркеров: IL-1RA, IL-2, IL-6, MIP-1alpha, MIP-1beta, BDNF, LIF - соответствовала минимальным значениям низкой степени риска. Посттрансплантационный период действительно протекал без осложнений, трансплантат функционирует 2 года.Recipient D., male, 30 years old, with a diagnosis of chronic glomerulonephritis, chronic kidney disease (CPD) C5 before transplantation, an immunological study of the level of cytokine rejection markers was performed and the results were obtained: IL-1RA - 359.16 pg / ml, IL-2 - 20 , 67 pg / ml, IL-6 - 0 pg / ml, Eotaxin - 149.0 pg / ml, MCP-1 - 157.35 pg / ml, MIP-1alpha - 9.50 pg / ml, MIP-1beta - 725.71 pg / ml, SDF-1alpha - 1182.12 pg / ml, GM-CSF - 10.01 pg / ml, BDNF - 127.67 pg / ml, LIF - 0 pg / ml. Marker concentration: IL-1RA, IL-2, IL-6, MIP-1alpha, MIP-1beta, BDNF, LIF - corresponded to the minimum values of low risk. The post-transplant period really proceeded without complications, the transplant has been functioning for 2 years.
Пример 2.Example 2
Больная К., женщина 26 лет. Диагноз: хронический интерстициальный нефрит, ХПБ С5, находилась на программном гемодиализе (ПГД) с 2013 года. Исследование уровня цитокинов накануне трансплантации показало следующие результаты: IL-1RA - 425,71 пг/мл, IL-2 - 32,8 пг/мл, IL-6 - 13,59 пг/мл, Eotaxin - 157,4 пг/мл, МСР-1 - 180,54 пг/мл, MIP-1alpha - 10,05 пг/мл, MIP-1beta - 784,26 пг/мл, SDF-1alpha - 1127,82 пг/мл, GM-CSF - 15,07 пг/мл, BDNF - 320,47 пг/мл, LIF - 0,97 пг/мл. Концентрация пяти маркеров: IL-2, IL-6, Eotaxin, GM-CSF, BDNF была на уровне верхних значений низкой степени риска. Согласно этим данным есть основание предположить о нормальном приживлении трансплантата, что и было подтверждено записями в истории болезни. Трансплантат продолжает функционировать.Patient K., a woman of 26 years. Diagnosis: chronic interstitial nephritis, CP5 C5, has been on programmed hemodialysis (PGD) since 2013. The study of cytokine levels on the eve of transplantation showed the following results: IL-1RA - 425.71 pg / ml, IL-2 - 32.8 pg / ml, IL-6 - 13.59 pg / ml, Eotaxin - 157.4 pg / ml MCP-1 - 180.54 pg / ml, MIP-1alpha - 10.05 pg / ml, MIP-1beta - 784.26 pg / ml, SDF-1alpha - 1127.82 pg / ml, GM-CSF - 15 07 pg / ml, BDNF - 320.47 pg / ml, LIF - 0.97 pg / ml. The concentration of five markers: IL-2, IL-6, Eotaxin, GM-CSF, BDNF was at the level of upper values of low risk. According to these data, there is reason to assume that the graft is normally engraftment, which was confirmed by records in the medical history. The graft continues to function.
Пример 3.Example 3
Больная Р., женщина 44 лет. Диагноз: сахарный диабет 1 типа, комбинированная нефропатия. ХБП С5. ПГД с 2010 г. После проведения иммунологического исследования уровня цитокинов, получены результаты: IL-1RA - 564,79 пг/мл, IL-2 - 34,56 пг/мл, IL-6 - 13,60 пг/мл, Eotaxin - 151,24 пг/мл, МСР-1 - 168,39 пг/мл, MIP-1alpha - 10,79 пг/мл, MIP-1beta - 795,45 пг/мл, SDF-1alpha - 1316,76 пг/мл, GM-CSF - 12,58 пг/мл, BDNF - 1176,51 пг/мл, LIF - 1,23 пг/мл. После сравнения данных с табличными значениями, установили, что: IL-6, MIP-1alpha, MIP-1beta, SDF-1alpha соответствовали нижней границе неопределенной степени риска. Посттрансплантационный период действительно протекал без осложнений, трансплантат функционирует 2,1 года.Patient R., a woman of 44 years. Diagnosis: type 1 diabetes mellitus, combined nephropathy. CKD C5. PGD since 2010. After an immunological study of the level of cytokines, the results were obtained: IL-1RA - 564.79 pg / ml, IL-2 - 34.56 pg / ml, IL-6 - 13.60 pg / ml, Eotaxin - 151.24 pg / ml, MCP-1 - 168.39 pg / ml, MIP-1alpha - 10.79 pg / ml, MIP-1beta - 795.45 pg / ml, SDF-1alpha - 1316.76 pg / ml GM-CSF 12.58 pg / ml, BDNF 1176.51 pg / ml, LIF 1.23 pg / ml. After comparing the data with tabular values, it was found that: IL-6, MIP-1alpha, MIP-1beta, SDF-1alpha corresponded to the lower limit of the indefinite degree of risk. The post-transplant period really proceeded without complications, the transplant has been functioning for 2.1 years.
Пример 4.Example 4
Было выполнено иммунологическое исследование уровня цитокиновых маркеров отторжения пациенту О., мужчина 46 лет. Диагноз: периодическая болезнь (Средиземноморская лихорадка), абдоминальная форма. ХБП С5.ПГД с 2013 г. Исследование выполнялось в день трансплантации за 8 часов до операции. Результаты продемонстрировали следующие показатели: IL-1RA - 345,08 пг/мл, IL-2 - 26,63 пг/мл, IL-6 - 15,58 пг/мл, Eotaxin - 150,73 пг/мл, МСР-1 - 1184,21 пг/мл, MIP-1alpha - 11,68 пг/мл, MIP-1beta - 847,37 пг/мл, SDF-1alpha - 1423,79 пг/мл, GM-CSF - 13,41 пг/мл, BDNF - 127,66 пг/мл, LIF - 0 пг/мл. Сопоставив полученные результаты с табличными значениями, установили, что: IL-6, MIP-1alpha, MIP-1beta, BDNF имели пограничные значения неопределенной степени риска. Посттрансплантационный период протекал без осложнений. Через три месяца после трансплантации у пациента были обнаружены анти-HLA антитела к антигенам гистосовместимости второго класса 15%. Согласно записям в истории болезни было проведено лечение ритуксимабом в дозировке 1 мг/кг веса, а так же плазмаферез и корректировка доз иммуносупрессоров. Через шесть месяцев антитела были на уровне 1%. Трансплантат продолжает функционировать. Данный пример иллюстрирует возможность проявления иммунной реакции и при неопределенной степени риска.An immunological study was performed of the level of cytokine rejection markers for patient O., a 46-year-old man. Diagnosis: intermittent disease (Mediterranean fever), abdominal form. CKD C5.PGD since 2013. The study was performed on the day of transplantation 8 hours before surgery. The results showed the following indicators: IL-1RA - 345.08 pg / ml, IL-2 - 26.63 pg / ml, IL-6 - 15.58 pg / ml, Eotaxin - 150.73 pg / ml, MCP-1 - 1184.21 pg / ml, MIP-1alpha - 11.68 pg / ml, MIP-1beta - 847.37 pg / ml, SDF-1alpha - 1423.79 pg / ml, GM-CSF - 13.41 pg / ml, BDNF - 127.66 pg / ml, LIF - 0 pg / ml. Comparing the obtained results with tabular values, it was found that: IL-6, MIP-1alpha, MIP-1beta, BDNF had boundary values of uncertain risk. The post-transplant period was uneventful. Three months after transplantation, the patient was found anti-HLA antibodies to histocompatibility antigens of the second class of 15%. According to the records in the medical history, rituximab was treated at a dosage of 1 mg / kg body weight, as well as plasmapheresis and dose adjustment of immunosuppressants. After six months, antibodies were at 1%. The graft continues to function. This example illustrates the possibility of the manifestation of an immune response and at an uncertain degree of risk.
Пример 5.Example 5
Больной О., м. 46 лет, поступил в больницу с диагнозом хронический гломерулонефрит, ХПБ С5, находящийся на ПГД с 2013 г. За шесть часов до трансплантации было выполнено иммунологическое исследование уровня цитокиновых маркеров отторжения и получены результаты: IL-1RA - 362,73 пг/мл, IL-2 - 45,02 пг/мл, IL-6 - 49,14 пг/мл, Eotaxin - 154,16 пг/мл, МСР-1 - 320,34 пг/мл, MIP-1alpha - 41,5 пг/мл, MIP-1beta - 909,68 пг/мл, SDF-1alpha - 1283,4 пг/мл, GM-CSF - 10,71 пг/мл, BDNF - 16,12 пг/мл, LIF - 1,13 пг/мл. Концентрация шести маркеров (IL-2, IL-6, МСР-1, MIP-1alpha, MIP-1beta, BDNF) соответствовала верхним границам значительной степени риска. Интраоперационно проведена перфузия аутоплазмы и плазмаферез. Так же, за два часа до трансплантации был введен симулект 20 мг внутривенно, капельно для профилактики острого отторжения. Повторное введение выполнили на четвертые сутки после трансплантации. Трансплантат сохраняет свою функцию на протяжении 2,5 лет.Patient O., m. 46 years old, was admitted to the hospital with a diagnosis of chronic glomerulonephritis, CP5 C5, located on PGD since 2013. Six hours before transplantation, an immunological study of the level of cytokine rejection markers was performed and the results were obtained: IL-1RA - 362, 73 pg / ml, IL-2 - 45.02 pg / ml, IL-6 - 49.14 pg / ml, Eotaxin - 154.16 pg / ml, MCP-1 - 320.34 pg / ml, MIP-1alpha - 41.5 pg / ml, MIP-1beta - 909.68 pg / ml, SDF-1alpha - 1283.4 pg / ml, GM-CSF - 10.71 pg / ml, BDNF - 16.12 pg / ml, LIF - 1.13 pg / ml. The concentration of six markers (IL-2, IL-6, MCP-1, MIP-1alpha, MIP-1beta, BDNF) corresponded to the upper limits of a significant degree of risk. Autoplasia and plasmapheresis perfusion was performed intraoperatively. Also, two hours prior to transplantation, a 20 mg simulect was administered intravenously, drip to prevent acute rejection. Repeated administration was performed on the fourth day after transplantation. The graft retains its function for 2.5 years.
Пример 6.Example 6
Пациенту Б., м. 31 год, с диагнозом хронический гломерулонефрит, гипертонический вариант, ХПБ С5, ПГД с 2001г было проведено иммунологическое исследование уровня цитокиновых маркеров отторжения. Проведенный анализ полученных результатов показал наличие четырех цитокинов с высоким риском отторжения: МСР-1 - 253,21 пг/мл,, MIP-1alpha - 11,69 пг/мл, MIP-1beta - 847,38 пг/мл, SDF-1alpha - 1511,7 пг/мл. Было решено, проводить интраоперационную профилактику острого отторжения симулектом по стандартной схеме с проведением плазмафереза. Посттрансплантационный период протекал без осложнений. Трансплантат функционирует 2,2 года.Patient B., m. 31 years old, with a diagnosis of chronic glomerulonephritis, hypertensive variant, CPB C5, PGD, since 2001, an immunological study of the level of cytokine rejection markers was carried out. The analysis of the results showed the presence of four cytokines with a high risk of rejection: MCP-1 - 253.21 pg / ml, MIP-1alpha - 11.69 pg / ml, MIP-1beta - 847.38 pg / ml, SDF-1alpha - 1511.7 pg / ml. It was decided to carry out intraoperative prophylaxis of acute rejection with simulect according to the standard scheme with plasmapheresis. The post-transplant period was uneventful. The transplant has been functioning for 2.2 years.
Приведенные данные доказывают, что предлагаемый способ позволяет определить степень риска острого отторжения до трансплантации и дают возможность провести профилактическое лечение, благодаря чему улучшить результаты трансплантации почки. Данный способ может быть применен в обычных лабораториях медицинских учреждений, выполняющих трансплантацию почки.These data prove that the proposed method allows to determine the risk of acute rejection before transplantation and make it possible to carry out preventive treatment, thereby improving the results of kidney transplantation. This method can be applied in conventional laboratories of medical institutions performing kidney transplantation.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018100350A RU2671637C1 (en) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Method of predicting the risk of rejection of the kidney before transplantation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018100350A RU2671637C1 (en) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Method of predicting the risk of rejection of the kidney before transplantation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2671637C1 true RU2671637C1 (en) | 2018-11-06 |
Family
ID=64103143
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018100350A RU2671637C1 (en) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Method of predicting the risk of rejection of the kidney before transplantation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2671637C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2728683C1 (en) * | 2019-12-03 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России) | Method for early diagnosis of transplant rejection |
| RU2759049C1 (en) * | 2021-03-30 | 2021-11-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И.Шумакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for diagnosing acute graft rejection in heart recipients |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2018843C1 (en) * | 1991-03-07 | 1994-08-30 | Зайчик Альберт Михайлович | Method of forecasting chronic rejection of renal transplant |
| WO2012136585A1 (en) * | 2011-04-04 | 2012-10-11 | Innogenetics N.V. | Methods and means for determining a functional polymorphism in ficolin-2 for predicting the outcome of kidney transplantation |
-
2018
- 2018-01-09 RU RU2018100350A patent/RU2671637C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2018843C1 (en) * | 1991-03-07 | 1994-08-30 | Зайчик Альберт Михайлович | Method of forecasting chronic rejection of renal transplant |
| WO2012136585A1 (en) * | 2011-04-04 | 2012-10-11 | Innogenetics N.V. | Methods and means for determining a functional polymorphism in ficolin-2 for predicting the outcome of kidney transplantation |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| CHAIR D.A. et al. Guideline ERBP, Nephrol Dial Transplant (2013), N 28, c.1-71. * |
| АЛЕКСЕЕВ А.В. и др. Современные биомаркеры острого повреждения почек. Практическая медицина. Современные вопросы диагностики, N 03, 2014, с.3-10. * |
| АЛЕКСЕЕВ А.В. и др. Современные биомаркеры острого повреждения почек. Практическая медицина. Современные вопросы диагностики, N 03, 2014, с.3-10. CHAIR D.A. et al. Guideline ERBP, Nephrol Dial Transplant (2013), N 28, c.1-71. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2728683C1 (en) * | 2019-12-03 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России) | Method for early diagnosis of transplant rejection |
| RU2759049C1 (en) * | 2021-03-30 | 2021-11-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И.Шумакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for diagnosing acute graft rejection in heart recipients |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Limon et al. | Malassezia is associated with Crohn’s disease and exacerbates colitis in mouse models | |
| Setiadi et al. | IL-17A is associated with the breakdown of the blood-brain barrier in relapsing-remitting multiple sclerosis | |
| CN105228521A (en) | The new diagnostic method of diagnosis depression and monitor treatment effect | |
| Powell et al. | Association of inflammatory and endothelial cell activation biomarkers with acute kidney injury after sepsis | |
| Chiappini et al. | Recommendations for the diagnosis of pediatric tuberculosis | |
| RU2671637C1 (en) | Method of predicting the risk of rejection of the kidney before transplantation | |
| McDonald et al. | Alterations in nucleotide-binding oligomerization domain-2 expression, pathway activation, and cytokine production in Yao syndrome | |
| US20230233561A1 (en) | Assessing and treating biological aging | |
| Florholmen et al. | Candidate mucosal and surrogate biomarkers of inflammatory bowel disease in the era of new technology | |
| WO2018224506A2 (en) | Auto immune diagnosis using t cell populations | |
| Szukiewicz et al. | High glucose level disturbs the resveratrol-evoked curtailment of CX3CL1/CX3CR1 signaling in human placental circulation | |
| Malíčková et al. | Anti-inflammatory effect of biological treatment in patients with inflammatory bowel diseases: calprotectin and IL-6 changes do not correspond to sRAGE changes | |
| KR101829997B1 (en) | Kit for organ transplant rejection or monitor the status of immune rejection | |
| JP2017502676A (en) | Convergence of aggregation rates for effective peripheral diagnostics for Alzheimer's disease | |
| Wauthier et al. | A rare case of tuberculosis-induced hypercalcemia | |
| Wang et al. | LCP1 knockdown in monocyte-derived macrophages: mitigating ischemic brain injury and shaping immune cell signaling and metabolism | |
| RU2778614C1 (en) | Method for predicting the development of relapse in the medical treatment of graves' disease | |
| RU2712946C1 (en) | Method for assessing the balance of the immune, inflammatory and anti-inflammatory reaction of alveolar macrophages recovered from resected parts of the lung of patients suffering pulmonary tuberculosis, depending on the degree of mycobacterium tuberculosis macrophages infection | |
| RU2767624C1 (en) | Method for determining the risk of developing cardiovascular complications in patients with stage ii essential arterial hypertension within 12 months after covid-19 | |
| RU2528882C1 (en) | Method for prediction of stage of multiple sclerosis taking into account values of immunological status | |
| RU2314040C1 (en) | Method for predicting acute pyelonephritis in children | |
| Zarifovich et al. | Methods for Prediction and Prevention of Purular-Septic Complications of Liver Echinococcosis | |
| Thorp et al. | CCR2+ monocytes promote white matter injury and cognitive dysfunction after myocardial infarction | |
| RU2318447C1 (en) | Method for differential diagnostics of chronic pyelonephritis in children | |
| RU2286580C1 (en) | Method for diagnosing beginning blood platelets aggregation disorders |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200110 |