RU2669024C2 - Method of modeling experimental liver cirrhosis - Google Patents

Method of modeling experimental liver cirrhosis Download PDF

Info

Publication number
RU2669024C2
RU2669024C2 RU2016145857A RU2016145857A RU2669024C2 RU 2669024 C2 RU2669024 C2 RU 2669024C2 RU 2016145857 A RU2016145857 A RU 2016145857A RU 2016145857 A RU2016145857 A RU 2016145857A RU 2669024 C2 RU2669024 C2 RU 2669024C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
liver
cirrhosis
weeks
modeling
ethanol
Prior art date
Application number
RU2016145857A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2016145857A3 (en
RU2016145857A (en
Inventor
Александр Евгеньевич Антушевич
Александр Николаевич Гребенюк
Вячеслав Юрьевич Голофеевский
Владимир Иванович Евдокимов
Денис Александрович Халютин
Анна Александровна Ярцева
Дмитрий Владимирович Бузанов
Борис Лаврович Макеев
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) filed Critical Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА)
Priority to RU2016145857A priority Critical patent/RU2669024C2/en
Publication of RU2016145857A3 publication Critical patent/RU2016145857A3/ru
Publication of RU2016145857A publication Critical patent/RU2016145857A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2669024C2 publication Critical patent/RU2669024C2/en

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G09EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
    • G09BEDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
    • G09B23/00Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
    • G09B23/28Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Computational Mathematics (AREA)
  • Mathematical Analysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Algebra (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Mathematical Optimization (AREA)
  • Mathematical Physics (AREA)
  • Pure & Applied Mathematics (AREA)
  • Business, Economics & Management (AREA)
  • Educational Administration (AREA)
  • Educational Technology (AREA)
  • Theoretical Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: experimental medicine.SUBSTANCE: invention relates to experimental medicine, namely to experimental toxicology and hepatology, and concerns the modeling of liver cirrhosis. To do this, intragastric administration to laboratory animals for 3 weeks, every other day, 40 % ethanol at a dose of 3 g/kg is performed. At the same time, intraperitoneal administration of a 1 % solution of N-nitrosodimethylamine at a dose of 5 mg/kg for 4 consecutive days of each week is performed.EFFECT: method makes it possible to increase the reproducibility, shorten the period of modeling cirrhosis of the liver and bring the model closer to the clinical course of this pathology in humans.1 cl, 3 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, направлено на моделирование хронического токсического поражения печени в виде фиброза и цирроза и может быть использовано для изучения токсических поражений печени в доклиническом исследовании гепатозащитных препаратов и при разработке новых способов лечения цирроза печени. В настоящее время в экономически развитых странах заболеваемость циррозом печени составляет около 20-40 больных на 100 тыс. населения, и этот показатель неуклонно растет, от данного заболевания погибают около 350 тыс. человек в год. Чаще цирроз развивается при длительной интоксикации алкоголем (по разным данным, от 40 до 80% случаев). Существующие средства и схемы терапии цирроза печени не всегда оказываются эффективными и характеризуются большим количеством противопоказаний и побочных эффектов. Одна из возможных причин подобного состояния дел - отсутствие адекватных экспериментальных моделей цирроза печени. Роль алкоголя как этиологического фактора в развитии цирроза печени общепризнана.The invention relates to medicine, is aimed at modeling chronic toxic liver damage in the form of fibrosis and cirrhosis and can be used to study toxic liver damage in a preclinical study of hepatoprotective drugs and in the development of new methods of treating liver cirrhosis. Currently, in economically developed countries, the incidence of liver cirrhosis is about 20-40 patients per 100 thousand people, and this indicator is growing steadily, about 350 thousand people per year die from this disease. More often, cirrhosis develops with prolonged intoxication with alcohol (according to various sources, from 40 to 80% of cases). Existing means and regimens for cirrhosis are not always effective and are characterized by a large number of contraindications and side effects. One of the possible reasons for this state of affairs is the lack of adequate experimental models of liver cirrhosis. The role of alcohol as an etiological factor in the development of cirrhosis is generally recognized.

Известен способ инициации токсического поражения печени путем перорального введения 40% этилового спирта в дозе 14 мл/кг в течение 60 суток [Доркина Е.Г. Гепатопротекторные свойства флавоноидов: автореф. дис. … д-ра биол. наук / Е.Г. Доркина. - Волгоград, 2010. - 45 с.].A known method of initiating toxic liver damage by oral administration of 40% ethyl alcohol at a dose of 14 ml / kg for 60 days [Dorkina EG Hepatoprotective properties of flavonoids: author. dis. ... Dr. Biol. sciences / E.G. Dorkin. - Volgograd, 2010. - 45 p.].

Недостатком данного способа является длительность введение 40% этанола - 60 сут и более, а также то, что в результате подобного воздействия обычно развивается только токсический гепатит и/или жировой гепатоз, но никак не фиброз и цирроз. В связи с этим, при моделировании алкоголь-индуцированного экспериментального цирроза печени, согласно данным литературы, возникает необходимость усиливать гепатотоксическое повреждающее действие этанола с помощью других гепатотоксикантов и наоборот [Popper Н. Histogenesis of alcoholic fibrosis and cirrhosis in the baboon / H. Popper, C.S. Lieber // Am. J. Pathol. - 1980. - Vol. 98, №3. - P. 695-716].The disadvantage of this method is the duration of the introduction of 40% ethanol - 60 days or more, and also the fact that as a result of such exposure usually only toxic hepatitis and / or fatty hepatosis develops, but not fibrosis and cirrhosis. In this regard, when modeling alcohol-induced experimental liver cirrhosis, according to the literature, there is a need to enhance the hepatotoxic damaging effect of ethanol with other hepatotoxicants and vice versa [Popper N. Histogenesis of alcoholic fibrosis and cirrhosis in the baboon / H. Popper, C.S. Lieber // Am. J. Pathol. - 1980. - Vol. 98, No. 3. - P. 695-716].

Известен способ создания модели токсического гепатита и цирроза печени млекопитающих, согласно которому в качестве гепатотоксиканта внутрижелудочно вводят 50% раствор совтола-1 на оливковом масле из расчета 0,25 мл на 100 г массы тела и ежедневно в течение 1 мес вместо воды животным дают для питья 10% раствор этанола (Патент на изобретение RU №2197018, 2003]. Применение в этой модели этанола позволяет добиться развития хронического токсического гепатита, а совтол предназначен для быстрого токсического поражения печени. При сочетании двух компонентов их токсические эффекты суммируются, что в итоге приводит к развитию как токсического гепатита, так и цирроза печени через 4-6 недель после начала введения токсикантов.There is a method for creating a model of toxic hepatitis and cirrhosis of mammalian liver, according to which, as a hepatotoxicant, a 50% solution of Sovtol-1 in olive oil is administered intragastrically at the rate of 0.25 ml per 100 g of body weight and the animals are given daily for water for 1 month for drinking 10% ethanol solution (Patent for invention RU No. 2197018, 2003]. The use of ethanol in this model allows the development of chronic toxic hepatitis, and Sovtol is intended for rapid toxic damage to the liver. With a combination of two components their toxic effects are summarized, which ultimately leads to the development of both toxic hepatitis and cirrhosis 4-6 weeks after the start of the introduction of toxicants.

Недостатком данного способа моделирования цирроза печени является то, что замена водного питьевого режима алкоголем не является физиологичной, в связи с чем, по данным литературы, около 30% животных отказываются от приема алкоголя [Патент на изобретение RU №2373927, 2007; Филатова Е.В. Влияние социальных условий на формирование предпочтения этанола у крыс / Е.В. Филатова [и др.] // Доклады Академии наук. - 2010. - Т. 430, №4. - С. 35-37].The disadvantage of this method of modeling liver cirrhosis is that the replacement of the drinking water regimen with alcohol is not physiological, and therefore, according to the literature, about 30% of animals refuse to drink alcohol [Patent for the invention RU No. 2373927, 2007; Filatova E.V. The influence of social conditions on the formation of ethanol preferences in rats / E.V. Filatova [et al.] // Reports of the Academy of Sciences. - 2010. - T. 430, No. 4. - S. 35-37].

Известен способ, при котором водный раствор диметилнитрозамина вводят интрагастрально из расчета 50-100 мг/кг массы животного 1 раз в неделю на протяжении 2-3 месяцев, при этом исследование печени обычно проводят через 2 недели после последнего введения. Другим вариантом этого же способа является введение водного раствора диметилнитрозамина интраперитонеально на протяжении 2-3 месяцев каждую неделю три дня подряд с последующим 4-дневным перерывом [Арутюнян И.В. Моделирование цирроза печени на лабораторных животных / И.В. Арутюнян [и др.] // Клиническая и экспериментальная морфология. - 2012. - №2. - С. 45-50].There is a method in which an aqueous solution of dimethylnitrosamine is administered intragastrally at a rate of 50-100 mg / kg of animal weight 1 time per week for 2-3 months, while the liver is usually examined 2 weeks after the last injection. Another option of the same method is the introduction of an aqueous solution of dimethylnitrosamine intraperitoneally for 2-3 months every week for three days in a row, followed by a 4-day break [I. Harutyunyan. Modeling of liver cirrhosis in laboratory animals / I.V. Harutyunyan [et al.] // Clinical and experimental morphology. - 2012. - No. 2. - S. 45-50].

Недостатком способа является длительность эксперимента.The disadvantage of this method is the duration of the experiment.

Известен способ моделирования повреждения печени в эксперименте путем однократного введения крысам N-нитрозодиметиламина внутрибрюшинно в дозах 7 и 15 мг/кг [Томилин Н.В. Экспериментальная оценка генотоксического действия N-нитрозодиметиламина при однократном введении в токсических дозах белым крысам / Н.В. Томилин [и др.] // Актуальные проблемы диагностики, профилактики и лечения профессионально обусловленных заболеваний: Сборник материалов Всероссийской научно-практической конференции, Сочи, 14-15 октября 2013 года. - Сочи, 2013. - С. 423-425].A known method of modeling liver damage in the experiment by a single administration to rats of N-nitrosodimethylamine intraperitoneally at doses of 7 and 15 mg / kg [Tomilin N.V. Experimental evaluation of the genotoxic effect of N-nitrosodimethylamine with a single administration in toxic doses to white rats / N.V. Tomilin [et al.] // Actual problems of diagnosis, prevention and treatment of occupationally caused diseases: Proceedings of the All-Russian Scientific and Practical Conference, Sochi, October 14-15, 2013. - Sochi, 2013. - S. 423-425].

Однако при действии таких доз N-нитрозодиметиламина при однократном введении фиброз и цирроз печени не развиваются, а эффект повреждения этого органа регистрируется только по цитогенетическим показателям.However, under the action of such doses of N-nitrosodimethylamine with a single injection, liver fibrosis and cirrhosis do not develop, and the effect of damage to this organ is recorded only by cytogenetic indicators.

При введении диметилнитрозамина в дозах 5,0-7,5 мг/кг в течение 2-3 недель у всех грызунов развивается хронический токсический гепатит, а у значительной части (50-70%) еще и фиброз, но формирования цирроза печени не происходит [Constandinou С. Modelling liver fibrosis in rodents / С. Constandinou, N. Henderson, J.P. Iredale // Methods Mol. Med. - 2005. - Vol. 117. - P. 237-250].With the introduction of dimethylnitrosamine in doses of 5.0-7.5 mg / kg for 2-3 weeks, all rodents develop chronic toxic hepatitis, and a significant proportion (50-70%) also have fibrosis, but liver cirrhosis does not occur [ Constandinou C. Modeling liver fibrosis in rodents / C. Constandinou, N. Henderson, JP Iredale // Methods Mol. Med. - 2005. - Vol. 117. - P. 237-250].

Известен способ моделирования цирроза печени, который представляет собой введение в желудок лабораторного животного два раза в неделю в течение месяца 50%-ного раствора совтола-1 на оливковом масле из расчета 0,25 мл на 100 г массы тела и 10%-ного раствора этанола вместо воды для питья [Патент на изобретение RU №2197018, МПК G09B 23/28, 20.01.2003].A known method of modeling liver cirrhosis, which is the introduction into the stomach of a laboratory animal twice a week for a month, a 50% solution of Sovtol-1 in olive oil at the rate of 0.25 ml per 100 g of body weight and 10% ethanol solution instead of drinking water [Patent for the invention RU No. 2197018, IPC G09B 23/28, 01/20/2003].

Недостатком известного способа является невысокая степень точности воспроизведения поражения печени в эксперименте.The disadvantage of this method is the low degree of accuracy of reproduction of liver damage in the experiment.

Техническим результатом разработанного изобретения является повышение воспроизводимости и приближение модели экспериментального цирроза к клиническому течению данной патологии печени у человека.The technical result of the developed invention is to increase the reproducibility and approximation of the model of experimental cirrhosis to the clinical course of this human liver pathology.

Технический результат достигается тем, что для получения модели цирроза печени в эксперименте включают дозированное введение этанола крысам, причем этанол вводят внутрижелудочно в течение 3-х недель через день в дозе 3 г/кг и одновременно осуществляют внутрибрюшинное введение 1% раствора диметилнитрозамина (ДМНА) в дозе 5 мг/кг.The technical result is achieved by the fact that in order to obtain a model of liver cirrhosis in an experiment, dosed ethanol is administered to rats, moreover, ethanol is administered intragastrically for 3 weeks every other day at a dose of 3 g / kg and at the same time intraperitoneal administration of a 1% solution of dimethylnitrosamine (DMNA) is carried out in dose of 5 mg / kg.

В таблице 1 представлена динамика веса животных в ходе эксперимента.Table 1 presents the dynamics of the weight of the animals during the experiment.

В таблице 2 представлены морфологические показатели у животных при моделировании экспериментального токсического цирроза печени.Table 2 presents the morphological parameters in animals when modeling experimental toxic liver cirrhosis.

В таблице 3 представлены биохимические показатели у животных при моделировании экспериментального токсического цирроза печени.Table 3 presents the biochemical parameters in animals when modeling experimental toxic liver cirrhosis.

Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.

Для получения модели цирроза печени экспериментальным животным вводят этанол внутрижелудочно в течение 3-х недель через день в дозе 3 г/кг и одновременно осуществляют внутрибрюшинное введение 1% раствора диметилнитрозамина (ДМНА) в дозе 5 мг/кг.To obtain a model of cirrhosis of the liver, ethanol was administered intragastrically to experimental animals for 3 weeks every other day at a dose of 3 g / kg and intraperitoneal administration of 1% dimethylnitrosamine (DMNA) at a dose of 5 mg / kg was simultaneously administered.

Для доказательства соответствия заявленного технического решения критериям изобретения был проведен эксперимент на 80 белых беспородных крысах-самцах массой 180-220 г. Животные были разделены на четыре группы:To prove the conformity of the claimed technical solution to the criteria of the invention, an experiment was conducted on 80 white outbred male rats weighing 180-220 g. Animals were divided into four groups:

- 1-я группа (n=20) - внутрижелудочно вводили 40% этанол в дозе 3 г/кг в течение 3-х недель через 1 сут;- 1st group (n = 20) - 40% ethanol was administered intragastrically at a dose of 3 g / kg for 3 weeks after 1 day;

- 2-я группа (n=20) - внутрибрюшинно вводили 1% раствор N-нитрозодиметиламина (ДМНА) в дозе 5 мг/кг течение 4-х последовательных суток каждой недели в течение 3-х недель;- 2nd group (n = 20) - 1% solution of N-nitrosodimethylamine (DMNA) was administered intraperitoneally at a dose of 5 mg / kg for 4 consecutive days of each week for 3 weeks;

- 3-я группа (n=20) - внутрижелудочно вводили 40% этанол в дозе 3 г/кг в течение 3-х недель через 1 сут и одновременно внутрибрюшинно вводили 1% раствор N-нитрозодиметиламина (ДМНА) в дозе 5 мг/кг течение 4-х последовательных суток каждой недели;- 3rd group (n = 20) - 40% ethanol was administered intragastrically at a dose of 3 g / kg for 3 weeks after 1 day and a 1% solution of N-nitrosodimethylamine (DMNA) was administered intraperitoneally at a dose of 5 mg / kg for 4 consecutive days of each week;

- 4-я группа (n=20) - контрольная группа; животным вводили внутрижелудочно по 0,5 мл физиологического раствора через 1 день и внутрибрюшинно по 0,5 мл физиологического раствора в течение 4-х последовательных суток каждой недели в течение 3-х недель.- 4th group (n = 20) - control group; animals were injected intragastrically with 0.5 ml of physiological saline after 1 day and intraperitoneally with 0.5 ml of physiological saline for 4 consecutive days of each week for 3 weeks.

Наблюдение за лабораторными животными осуществляли в течение 2-х недель до эксперимента (карантин), в ходе 3-недельного внутрижелудочного и внутрибрюшинного введения гепатотоксикантов, а также в течение 3-х недель после окончания их введения. Оценка клинико-лабораторных и морфологических показателей у лабораторных животных опытных и контрольной групп проводилась до эксперимента, через 3 и 6 недель после начала введения гепатотоксикантов (второе исследование было выполнено для уточнения возможности возобновления процессов спонтанного фиброзобразования после отмены гепатотоксикантов).Observation of laboratory animals was carried out for 2 weeks before the experiment (quarantine), during the 3-week intragastric and intraperitoneal administration of hepatotoxicants, as well as within 3 weeks after the end of their administration. Assessment of clinical, laboratory and morphological parameters in laboratory animals of the experimental and control groups was carried out before the experiment, 3 and 6 weeks after the start of hepatotoxicant administration (the second study was performed to clarify the possibility of resuming spontaneous fibrosis after the hepatotoxicants were withdrawn).

Животных содержали в стандартных условиях вивария на обычном пищевом рационе, со свободным доступом к воде. Масса тела животных 1-3-й группы перед началом эксперимента была (147,9±5,2) г, 4-й (контрольной) группы - (148,0±6,3) г. Исходные клинико-лабораторные показатели у животных опытных и контрольной групп также не различались.Animals were kept under standard vivarium conditions on a normal diet, with free access to water. The body weight of animals of the 1-3rd group before the experiment was (147.9 ± 5.2) g, of the 4th (control) group - (148.0 ± 6.3) g. Initial clinical and laboratory parameters in animals experimental and control groups also did not differ.

Наличие и выраженность токсического повреждения печени оценивали путем визуального наблюдения клинической картины интоксикации, изучения биохимических показателей периферической крови и морфологического исследования препаратов печени.The presence and severity of toxic liver damage was assessed by visual observation of the clinical picture of intoxication, the study of biochemical parameters of peripheral blood and morphological studies of liver preparations.

В качестве биохимических показателей, характеризующих основные функции печени, изучали: общий белок, креатинин, мочевину, глюкозу, билирубин, калий, натрий, хлор, кальций, аланинаминотрансферазу, аспартатаминотрансферазу, гамма-глютамилтранспептидазу и индикатор холестаза - щелочную фосфатазу. Оценку биохимических показателей осуществляли с помощью анализатора «Roche Omni С».As biochemical indicators characterizing the basic functions of the liver, we studied: total protein, creatinine, urea, glucose, bilirubin, potassium, sodium, chlorine, calcium, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, gamma-glutamyl transpeptidase and an indicator of cholestasis - alkaline phosphatase. Evaluation of biochemical parameters was carried out using a Roche Omni C analyzer.

Для подтверждения факта развития экспериментального цирроза печени через 1, 2 и 3 недели после начала эксперимента проводили эвтаназию животных (по 5 особей из каждой группы) и осуществляли забор образцов печени с последующим гистологическим исследованием по стандартным методикам. Срезы печени оценивали с использованием исследовательских микроскопов «Polyvar» и «Leica DMRE», цифрового комплекса видеонаблюдения и программы анализа изображений «Видеотест-4». Морфологическую оценку степени повреждения печени проводили по результатам измерения площади, занимаемой соединительной тканью, в пределах 5-7 печеночных долек на 6 срезах печени, окрашенных по ван Гизону [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К., 2012. - 944 с.]. С помощью компьютерной обработки сканированного изображения среза печени рассчитывали относительную площадь, занимаемую в ткани печени сформировавшимся коллагеном.To confirm the development of experimental cirrhosis of the liver 1, 2, and 3 weeks after the start of the experiment, animals were euthanized (5 animals from each group) and liver samples were taken, followed by histological examination using standard methods. Liver sections were evaluated using Polyvar and Leica DMRE research microscopes, a digital video surveillance system and the Video Test-4 image analysis program. A morphological assessment of the degree of liver damage was carried out according to the results of measuring the area occupied by connective tissue, within 5-7 hepatic lobules on 6 sections of the liver, stained according to van Gieson [Guide for conducting preclinical studies of drugs / ed. A.N. Mironova. - M .: Grif and K., 2012. - 944 p.]. Using computer processing of the scanned image of a liver section, the relative area occupied in the liver tissue by the formed collagen was calculated.

Значимость межгрупповых различий средних величин параметрических показателей оценивали с помощью t-критерия Стьюдента. В таблицах данные представлены в виде средней арифметической величины и ошибки средней величины (М±m).The significance of intergroup differences in the average values of parametric indicators was evaluated using Student's t-test. In the tables, the data are presented in the form of arithmetic mean and error of the mean (M ± m).

Эксперименты показали (табл. 1), что уже к концу 3-й недели комбинированное воздействие этанола и ДМНА сопровождалось значительным ростом (более чем на 30 г по сравнению с фоновыми значениями) массы тела у животных 3-й группы.The experiments showed (Table 1) that by the end of the 3rd week, the combined effect of ethanol and DMNA was accompanied by a significant increase (more than 30 g compared to background values) of body weight in animals of the 3rd group.

При вскрытии через 3 недели после начала эксперимента у 50% животных 3-й группы отмечали наличие развитого асцита с большим количеством (около 6-8 мл) серозной жидкости в брюшной полости (табл. 2). Весовой коэффициент печени у крыс 3-й группы был статистически значимо меньшим, чем у крыс 4-й (контрольной) группы (р<0,05), влажность печени у животных 3-й группы была понижена.At autopsy 3 weeks after the start of the experiment, 50% of animals of the 3rd group showed the presence of developed ascites with a large amount (about 6-8 ml) of serous fluid in the abdominal cavity (Table 2). The weight coefficient of the liver in rats of the 3rd group was statistically significantly lower than in rats of the 4th (control) group (p <0.05), and the humidity of the liver in animals of the 3rd group was reduced.

Повышение воспроизводимости в формировании фиброза и цирроза печени достигается за счет потенцирования N-нитрозодиметиламином гепатотоксического эффекта этанола и наоборот. Кроме того, моделирование токсического фиброза и цирроза печени осуществляется в более короткие сроки, а развивающаяся при этом клинико-лабораторная и морфологическая картина поражения в значительной степени приближена к клиническому течению данной патологии печени у человека.The increase in reproducibility in the formation of liver fibrosis and cirrhosis is achieved due to the potentiation of the hepatotoxic effect of ethanol by N-nitrosodimethylamine and vice versa. In addition, modeling of toxic fibrosis and cirrhosis of the liver is carried out in a shorter time, and the developing clinical, laboratory and morphological picture of the lesion is largely close to the clinical course of this liver pathology in humans.

При использовании нашей модели формирование клинико-лабораторной и морфологической картины цирроза печени с развитием выраженного асцита (до 6-8 мл жидкости в брюшной полости) у 50% лабораторных животных начинается уже через 3 недели после начала сочетанного введения двух гепатотоксикантов - N-нитрозодиметиламина и этанола. У оставшихся 50% лабораторных животных в эти же сроки также формируется фиброз и цирроз печени, но в брюшную полость выпотевает до 1-2 мл жидкости. Таким образом, предлагаемая модель позволяет сократить сроки моделирования цирроза печени по сравнению со стандартной длительностью эксперимента в среднем в два раза (с 6 недель до 3 недель), а также повысить точность воспроизведения клинико-лабораторной и морфологической картины токсического фиброза и цирроза печени.Using our model, the formation of a clinical, laboratory and morphological picture of liver cirrhosis with the development of severe ascites (up to 6-8 ml of fluid in the abdominal cavity) in 50% of laboratory animals begins 3 weeks after the start of the combined administration of two hepatotoxicants - N-nitrosodimethylamine and ethanol . In the remaining 50% of laboratory animals, fibrosis and cirrhosis of the liver are also formed at the same time, but up to 1-2 ml of fluid is sweated in the abdominal cavity. Thus, the proposed model allows us to reduce the time required for modeling liver cirrhosis compared to the standard experiment duration by an average of two times (from 6 weeks to 3 weeks), and also to increase the accuracy of reproducing the clinical, laboratory and morphological picture of toxic fibrosis and liver cirrhosis.

Комбинированное воздействие гепатотоксикантов способствует формированию у крыс экспериментального цирроза печени уже через 3 недели после начала инъекций, что проявляется в увеличении количества соединительной ткани в печени, цирротическом ее перерождении и развитии асцита. При этом, в первую неделю после начала комбинированного воздействия этанола и N-нитрозодиметиламина в ткани печени отмечается центральный геморрагический некроз, затем происходит формирование септ и волокнистой соединительной ткани (2-я неделя), а спустя 3 недели - мелкоузелкового цирроза. Таким образом, разработанная нами модель позволяет проследить последовательное развитие всех морфологических признаков повреждения вплоть до развития цирроза.The combined effect of hepatotoxicants promotes the formation of experimental liver cirrhosis in rats already 3 weeks after the start of injection, which is manifested in an increase in the amount of connective tissue in the liver, its cirrhotic degeneration and the development of ascites. At the same time, in the first week after the beginning of the combined effect of ethanol and N-nitrosodimethylamine, central hemorrhagic necrosis is observed in the liver tissue, then septa and fibrous connective tissue are formed (2nd week), and after 3 weeks fine-cirrhosis. Thus, the model we developed allows us to trace the consistent development of all morphological signs of damage up to the development of cirrhosis.

Figure 00000001
Figure 00000001

Figure 00000002
Figure 00000002

Figure 00000003
Figure 00000003

Figure 00000004
Figure 00000004

Figure 00000005
Figure 00000005

Figure 00000006
Figure 00000006

Claims (1)

Способ моделирования экспериментального цирроза печени, включающий дозированное введение этанола крысам, отличающийся тем, что этанол вводят внутрижелудочно в течение 3-х недель через день в дозе 3 г/кг, одновременно осуществляют внутрибрюшинное введение в течение 4-х последовательных дней каждой недели 1% раствора диметилнитрозамина (ДМНА) в дозе 5 мг/кг.A method for simulating experimental cirrhosis of the liver, including dosed ethanol administration to rats, characterized in that ethanol is administered intragastrically for 3 weeks every other day at a dose of 3 g / kg, at the same time intraperitoneal administration of 1% solution is carried out for 4 consecutive days of each week dimethylnitrosamine (DMNA) at a dose of 5 mg / kg.
RU2016145857A 2016-11-22 2016-11-22 Method of modeling experimental liver cirrhosis RU2669024C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016145857A RU2669024C2 (en) 2016-11-22 2016-11-22 Method of modeling experimental liver cirrhosis

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016145857A RU2669024C2 (en) 2016-11-22 2016-11-22 Method of modeling experimental liver cirrhosis

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2016145857A3 RU2016145857A3 (en) 2018-05-23
RU2016145857A RU2016145857A (en) 2018-05-23
RU2669024C2 true RU2669024C2 (en) 2018-10-05

Family

ID=62202205

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016145857A RU2669024C2 (en) 2016-11-22 2016-11-22 Method of modeling experimental liver cirrhosis

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2669024C2 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2740569C1 (en) * 2020-07-14 2021-01-15 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Северо-Осетинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for simulating chronic alcohol intoxication in experimental rats
RU2817175C1 (en) * 2023-11-11 2024-04-11 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный медицинский университет имени Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for simulating liver cirrhosis in experiment

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0228861B1 (en) * 1985-12-19 1991-11-27 Kabushiki Kaisya Advance Agent for reducing the dimethylnitrosoamine level
RU94026117A (en) * 1994-07-14 1996-08-27 Нижегородский государственный медицинский институт Method for modeling hepatitis and hepatic cirrhosis in mammals
RU2197018C2 (en) * 2000-02-16 2003-01-20 Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека Method for modeling hepatic cirrhosis
RU2500039C1 (en) * 2012-07-31 2013-11-27 Александр Михайлович Пузиков Method for simulating primary biliary cirrhosis

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0228861B1 (en) * 1985-12-19 1991-11-27 Kabushiki Kaisya Advance Agent for reducing the dimethylnitrosoamine level
RU94026117A (en) * 1994-07-14 1996-08-27 Нижегородский государственный медицинский институт Method for modeling hepatitis and hepatic cirrhosis in mammals
RU2197018C2 (en) * 2000-02-16 2003-01-20 Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека Method for modeling hepatic cirrhosis
RU2500039C1 (en) * 2012-07-31 2013-11-27 Александр Михайлович Пузиков Method for simulating primary biliary cirrhosis

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BINGUL I et al.Betaine treatment decreased oxidative stress, inflammation, and stellate cell activation in rats with alcoholic liver fibrosis. Environ Toxicol Pharmacol. 2016 Jul;45:170-8. *
BINGUL I et al.Betaine treatment decreased oxidative stress, inflammation, and stellate cell activation in rats with alcoholic liver fibrosis. Environ Toxicol Pharmacol. 2016 Jul;45:170-8. JIN, Y.L.et al. Tissue remodeling following submassive hemorrhagic necrosis in rat livers induced by an intraperitoneal injection of dimethylnitrosamine. Virchows Arch. - 2003. - Vol. 442, 1. - Р. 39-47. *
JIN, Y.L.et al. Tissue remodeling following submassive hemorrhagic necrosis in rat livers induced by an intraperitoneal injection of dimethylnitrosamine. Virchows Arch. - 2003. - Vol. 442, 1. - Р. 39-47. *
АРУТЮНЯН И.В. и др. Моделирование цирроза печени на лабораторных животных. Клиническая и экспериментальная морфология, 2012, N2, С. 45-50. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2740569C1 (en) * 2020-07-14 2021-01-15 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Северо-Осетинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for simulating chronic alcohol intoxication in experimental rats
RU2817175C1 (en) * 2023-11-11 2024-04-11 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный медицинский университет имени Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for simulating liver cirrhosis in experiment
RU2828542C1 (en) * 2024-05-03 2024-10-14 Лев Ильич Высоцкий Method for simulating experimental hepatic cirrhosis

Also Published As

Publication number Publication date
RU2016145857A3 (en) 2018-05-23
RU2016145857A (en) 2018-05-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Marquardt et al. Euthanasia of laboratory mice: Are isoflurane and sevoflurane real alternatives to carbon dioxide?
Wilson et al. Congenital malformations in nonhuman primates: spontaneous and experimentally induced
Oliveira et al. Maternal and developmental toxicity of ayahuasca in Wistar rats
Geerlofs et al. Repeated dose (90 days) oral toxicity study of ursolic acid in Han-Wistar rats
Reddy et al. Comparative toxicity studies in birds using nimesulide and diclofenac sodium
RU2669024C2 (en) Method of modeling experimental liver cirrhosis
RU2598351C1 (en) Method of simulating non-alcoholic steatohepatitis in rats
Trahair et al. Regulation of gastrointestinal growth in fetal sheep by luminally administered insulin-like growth factor-I
JP4598593B2 (en) Drugs for the prevention and treatment of microcirculatory disturbance caused by ischemia / reperfusion
RU2494397C1 (en) Method for assessing degree of severity of oral mucosal oxidative changes in patients with oral lichen acuminatis with underlying lipid storage disease
Stegeman et al. Nephroblastoma in a Koi (Cyprinus carpio)
Cui et al. Histology from a clinical perspective
JP2006349457A (en) Screening method of curative medicine of non-alcoholic fatty liver
Frias et al. Vertical exposition to Luffa operculata extract deregulates behavior and hypothalamus neurotransmitters in juvenile rats
RU2600476C1 (en) Method of simulating non-alcoholic fatty liver disease in rats
WO2017150566A1 (en) Non-human animal having dystrophy caused by protein aggregation
Vigneault et al. Evaluation of the safety of multiple intramuscular doses of ketoprofen in bearded dragons (Pogona vitticeps)
Marciniak1abcdef et al. Effects of gastrectomy or colectomy on liver metabolism and liver morphology in an experimental rat model
Mammadov et al. Effects of sodium fluoride on neural tube development in chick embryos
Семененко et al. THE ASSESSMENT OF SUBCHRONIC TOXICITY OF PHYTOGLINOL AT THE STAGE OF PRECLINICAL STUDY
Matta Mesolimbic dopamine, its receptors and social learning
Franse Modeling human intestinal disease: Ontogeny of postembryonic zebrafish intestinal morphology
Abbass et al. The effect of olive oil (Olea europaea) on ibuprofen induced hepatotoxicity in female rats.
MACKAY et al. Lipoid nephrosis: report of a case of unusual duration
RU2343556C1 (en) Method of modelling chronic toxic hepatopathy

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20181123