RU2662916C1 - Способ терапии метастатического рака с использованием вируса Сендай - Google Patents
Способ терапии метастатического рака с использованием вируса Сендай Download PDFInfo
- Publication number
- RU2662916C1 RU2662916C1 RU2017119461A RU2017119461A RU2662916C1 RU 2662916 C1 RU2662916 C1 RU 2662916C1 RU 2017119461 A RU2017119461 A RU 2017119461A RU 2017119461 A RU2017119461 A RU 2017119461A RU 2662916 C1 RU2662916 C1 RU 2662916C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- patient
- tumor
- treatment
- content
- hsp70
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 216
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 title claims abstract description 32
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 235
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 176
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 58
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 55
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims abstract description 46
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 38
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 claims abstract description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 34
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims abstract description 28
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 14
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 14
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229940098197 human immunoglobulin g Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 101710163595 Chaperone protein DnaK Proteins 0.000 claims abstract 16
- 101710178376 Heat shock 70 kDa protein Proteins 0.000 claims abstract 16
- 101710152018 Heat shock cognate 70 kDa protein Proteins 0.000 claims abstract 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 81
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 74
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 71
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 54
- 101001068133 Homo sapiens Hepatitis A virus cellular receptor 2 Proteins 0.000 claims description 44
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 40
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 40
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 34
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 claims description 30
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 26
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 24
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 claims description 23
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 21
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 claims description 20
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 19
- 231100000987 absorbed dose Toxicity 0.000 claims description 17
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 claims description 17
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 claims description 16
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 claims description 16
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 claims description 15
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 claims description 15
- 102100040407 Heat shock 70 kDa protein 1B Human genes 0.000 claims description 14
- 101710181340 Chaperone protein DnaK2 Proteins 0.000 claims description 13
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 claims description 13
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 12
- 230000034994 death Effects 0.000 claims description 10
- 231100000517 death Toxicity 0.000 claims description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 9
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims description 8
- 229960001231 choline Drugs 0.000 claims description 8
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 7
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 6
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 6
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 claims description 6
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 claims description 5
- FFEARJCKVFRZRR-JJZBXVGDSA-N methionine c-11 Chemical compound [11CH3]SCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-JJZBXVGDSA-N 0.000 claims description 5
- 210000005088 multinucleated cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 4
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 239000002356 single layer Substances 0.000 claims description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000003281 pleural cavity Anatomy 0.000 claims description 2
- 241000907681 Morpho Species 0.000 claims 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 claims 1
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 claims 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 abstract description 116
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 abstract description 116
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 31
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 76
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 45
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 description 41
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 37
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 37
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 35
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 26
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 26
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 25
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 25
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 25
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 24
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 24
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 24
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 24
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 23
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 23
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 23
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 21
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 20
- 230000004044 response Effects 0.000 description 20
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 19
- 238000011161 development Methods 0.000 description 19
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 19
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 17
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 17
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 17
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 16
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 15
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 14
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 14
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 14
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 12
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 12
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 11
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 11
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 10
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 10
- 230000000174 oncolytic effect Effects 0.000 description 10
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 9
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 9
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 238000011160 research Methods 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 9
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 8
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 8
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 8
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 8
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 8
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 7
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 7
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 7
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 7
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 7
- 238000012636 positron electron tomography Methods 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 7
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 7
- 238000000316 virotherapy Methods 0.000 description 7
- 206010014824 Endotoxic shock Diseases 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 6
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 6
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 6
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 6
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 6
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 6
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 6
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 6
- 244000309459 oncolytic virus Species 0.000 description 6
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 6
- 230000008807 pathological lesion Effects 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 210000000614 rib Anatomy 0.000 description 6
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 6
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 6
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 5
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 5
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 description 5
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 5
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 5
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 5
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 5
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 5
- 210000001370 mediastinum Anatomy 0.000 description 5
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 5
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 5
- 206010065163 Clonal evolution Diseases 0.000 description 4
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 101710113864 Heat shock protein 90 Proteins 0.000 description 4
- 102100037907 High mobility group protein B1 Human genes 0.000 description 4
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 4
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 4
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 4
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 4
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 238000012760 immunocytochemical staining Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 4
- 210000003049 pelvic bone Anatomy 0.000 description 4
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 4
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 description 3
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 3
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 description 3
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 3
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- 102000005431 Molecular Chaperones Human genes 0.000 description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 3
- 229940126547 T-cell immunoglobulin mucin-3 Drugs 0.000 description 3
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 3
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 3
- 108010036226 antigen CYFRA21.1 Proteins 0.000 description 3
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 3
- 229940037642 autologous vaccine Drugs 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 230000004611 cancer cell death Effects 0.000 description 3
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 3
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 3
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 3
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 210000004224 pleura Anatomy 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 3
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 3
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 3
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100339431 Arabidopsis thaliana HMGB2 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 2
- 101100507655 Canis lupus familiaris HSPA1 gene Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102100031351 Galectin-9 Human genes 0.000 description 2
- 101710121810 Galectin-9 Proteins 0.000 description 2
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 108700010013 HMGB1 Proteins 0.000 description 2
- 101150021904 HMGB1 gene Proteins 0.000 description 2
- 108010027814 HSP72 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100034051 Heat shock protein HSP 90-alpha Human genes 0.000 description 2
- 101710083479 Hepatitis A virus cellular receptor 2 homolog Proteins 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 2
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 description 2
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 2
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 2
- 208000002151 Pleural effusion Diseases 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 201000005969 Uveal melanoma Diseases 0.000 description 2
- 238000011226 adjuvant chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 2
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 2
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 190000008236 carboplatin Chemical compound 0.000 description 2
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N chembl421 Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 208000030381 cutaneous melanoma Diseases 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 2
- 230000005059 dormancy Effects 0.000 description 2
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000037451 immune surveillance Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 2
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000010658 metastatic prostate carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 2
- 238000011369 optimal treatment Methods 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000007331 pathological accumulation Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 238000012831 peritoneal equilibrium test Methods 0.000 description 2
- 230000002974 pharmacogenomic effect Effects 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012877 positron emission topography Methods 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 201000005825 prostate adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000011472 radical prostatectomy Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 101150094969 rfp1 gene Proteins 0.000 description 2
- 201000003708 skin melanoma Diseases 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- VRYALKFFQXWPIH-PBXRRBTRSA-N (3r,4s,5r)-3,4,5,6-tetrahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CC=O VRYALKFFQXWPIH-PBXRRBTRSA-N 0.000 description 1
- HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 3,3'-diaminobenzidine Chemical compound C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010052747 Adenocarcinoma pancreas Diseases 0.000 description 1
- 239000012118 Alexa Fluor 750 Substances 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 101710145634 Antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010063104 Apoptosis Regulatory Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010565 Apoptosis Regulatory Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 102000052609 BRCA2 Human genes 0.000 description 1
- 108700020462 BRCA2 Proteins 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100023962 Bifunctional arginine demethylase and lysyl-hydroxylase JMJD6 Human genes 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241001598984 Bromius obscurus Species 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N Capecitabine Chemical compound C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N 0.000 description 1
- GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N Capecitabine Natural products C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1C1C(O)C(O)C(C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 1
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010050685 Cytokine storm Diseases 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710168537 High mobility group protein B1 Proteins 0.000 description 1
- 208000002291 Histiocytic Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001025337 Homo sapiens High mobility group protein B1 Proteins 0.000 description 1
- 101000971513 Homo sapiens Natural killer cells antigen CD94 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000726041 Human respirovirus 1 Species 0.000 description 1
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100033420 Keratin, type I cytoskeletal 19 Human genes 0.000 description 1
- 108010066302 Keratin-19 Proteins 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000002147 L01XE04 - Sunitinib Substances 0.000 description 1
- 239000002139 L01XE22 - Masitinib Substances 0.000 description 1
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 206010026673 Malignant Pleural Effusion Diseases 0.000 description 1
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 1
- 206010027452 Metastases to bone Diseases 0.000 description 1
- 206010027457 Metastases to liver Diseases 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100021462 Natural killer cells antigen CD94 Human genes 0.000 description 1
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 1
- 208000010359 Newcastle Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 238000012879 PET imaging Methods 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 241000588912 Pantoea agglomerans Species 0.000 description 1
- 241000711504 Paramyxoviridae Species 0.000 description 1
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 1
- 241000219000 Populus Species 0.000 description 1
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 description 1
- 108091007744 Programmed cell death receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 208000019155 Radiation injury Diseases 0.000 description 1
- 101100496572 Rattus norvegicus C6 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000702263 Reovirus sp. Species 0.000 description 1
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010062106 Respiratory tract infection viral Diseases 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 206010040914 Skin reaction Diseases 0.000 description 1
- 101710188689 Small, acid-soluble spore protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710188693 Small, acid-soluble spore protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710166422 Small, acid-soluble spore protein A Proteins 0.000 description 1
- 101710166404 Small, acid-soluble spore protein C Proteins 0.000 description 1
- 101710174019 Small, acid-soluble spore protein C1 Proteins 0.000 description 1
- 101710174017 Small, acid-soluble spore protein C2 Proteins 0.000 description 1
- 101710174574 Small, acid-soluble spore protein gamma-type Proteins 0.000 description 1
- 208000005250 Spontaneous Fractures Diseases 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 102100036407 Thioredoxin Human genes 0.000 description 1
- 229940127174 UCHT1 Drugs 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 229940110282 alimta Drugs 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124675 anti-cancer drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 230000007416 antiviral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000005735 apoptotic response Effects 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 229940120638 avastin Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009400 cancer invasion Effects 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229960004117 capecitabine Drugs 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000013170 computed tomography imaging Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 206010052015 cytokine release syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- -1 cytoplasm Proteins 0.000 description 1
- 238000011500 cytoreductive surgery Methods 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000005860 defense response to virus Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011404 fractionated radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 230000009395 genetic defect Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000003067 hemagglutinative effect Effects 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 230000001553 hepatotropic effect Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017898 histiocytic and dendritic cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 210000002758 humerus Anatomy 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 210000003692 ilium Anatomy 0.000 description 1
- 210000001621 ilium bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005746 immune checkpoint blockade Effects 0.000 description 1
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 230000010468 interferon response Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 201000005243 lung squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000018555 lymphatic system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 201000001439 malignant skin fibrous histiocytoma Diseases 0.000 description 1
- WJEOLQLKVOPQFV-UHFFFAOYSA-N masitinib Chemical compound C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3SC=C(N=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 WJEOLQLKVOPQFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004655 masitinib Drugs 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000713 mesentery Anatomy 0.000 description 1
- 238000010197 meta-analysis Methods 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000033607 mismatch repair Effects 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 1
- LBWFXVZLPYTWQI-IPOVEDGCSA-N n-[2-(diethylamino)ethyl]-5-[(z)-(5-fluoro-2-oxo-1h-indol-3-ylidene)methyl]-2,4-dimethyl-1h-pyrrole-3-carboxamide;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.CCN(CC)CCNC(=O)C1=C(C)NC(\C=C/2C3=CC(F)=CC=C3NC\2=O)=C1C LBWFXVZLPYTWQI-IPOVEDGCSA-N 0.000 description 1
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 description 1
- 230000004719 natural immunity Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 238000009099 neoadjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 201000002120 neuroendocrine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100001222 nononcogenic Toxicity 0.000 description 1
- 238000005025 nuclear technology Methods 0.000 description 1
- 238000012379 oncolytic virotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002669 organ and tissue protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 201000002094 pancreatic adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 1
- WBXPDJSOTKVWSJ-ZDUSSCGKSA-L pemetrexed(2-) Chemical compound C=1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2C=1CCC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C([O-])=O)C=C1 WBXPDJSOTKVWSJ-ZDUSSCGKSA-L 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 229940023041 peptide vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 108010077613 phosphatidylserine receptor Proteins 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 239000000092 prognostic biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011470 radical surgery Methods 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 230000028617 response to DNA damage stimulus Effects 0.000 description 1
- 238000012770 revaccination Methods 0.000 description 1
- 208000011581 secondary neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 210000002832 shoulder Anatomy 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 description 1
- 231100000430 skin reaction Toxicity 0.000 description 1
- 230000035483 skin reaction Effects 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 230000007958 sleep Effects 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- ILXAOQAXSHVHTM-UHFFFAOYSA-M sodium;2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;chloride Chemical compound [Na+].[Cl-].OCC(N)(CO)CO ILXAOQAXSHVHTM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 229940034785 sutent Drugs 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 238000012385 systemic delivery Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 1
- 208000019448 vaginal melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения метастатического рака у пациентов. Для этого предварительно у пациента определяют процентное содержание Т-цитотоксических лимфоцитов субпопуляции CD8 периферической крови с рецепторами программированной клеточной смерти (PD-1) по отношению к общему числу лимфоцитов указанной субпопуляции (содержание PD-1-позитивных Т-лимфоцитов). Лечение осуществляют в три этапа. На первом этапе осуществляют проведение комплексной процедуры, включающей воздействие на поверхность кожи пациента импульсно-периодическим лазерным излучением и последующее введение в зону указанного воздействия композиции, содержащей вирус Сендай, либо введение рекомбинантного человеческого БТШ70 (Препарат-1 БТШ70). На втором этапе повторно назначают указанные комплексные процедуры и дополнительно вводят гибридный белок на основе рчБТШ70 и Fc-фрагмента человеческого иммуноглобулина G (Препарат-2 БТШ70). На третьем этапе в зависимости от размера опухоли, метаболической активности опухолевой ткани, содержания PD-1-позитивных Т-лимфоцитов дополнительно пациенту назначают позитрон-излучающий радионуклид, конъюгированный с опухоль-специфической субстанцией. Изобретение обеспечивает лечение метастатического рака у пациента. 22 з.п. ф-лы, 22 табл., 8 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и иммунологии, точнее к способам комбинированной терапии онкопатологии с использованием биологических, лазерных и ядерных технологий, и может быть использовано для лечения больных с распространенным и метастатическим раком, в частности раком легкого, молочной железы, колоректальным раком, раком поджелудочной железы, почки, простаты, раком яичников, матки, желудка и т.п.
В настоящее время метастатический рак по-прежнему остается во многих случаях неизлечимым заболеванием. По официальной статистике, около трети жителей России, болеющих раком, умирают в течение года после того, как им поставили диагноз. Из этой трети 90% смертей связано с метастазированием опухолей. В целом у больных с метастазами злокачественных новообразований медиана выживаемости (время, к которому умирают 50% больных) составляет 147 дней [105].
Традиционные терапевтические схемы, основанные преимущественно на комплексном применении химио- и радиотерапии, остаются малоэффективными, особенно для больных с метастазами. В частности, в работах ряда исследователей приводятся данные, свидетельствующие о том, что лечебный эффект от химиотерапии проявляется у одного из четырех раковых больных; что химиотерапия практически не дает выраженного положительного результата при лечении, например плоскоклеточного рака легких или аденокарциномы поджелудочной железы; что эффективность химиотерапии в 5-летней выживаемости стремится к нулю при раке поджелудочной железы, яичников, мочевого пузыря, предстательной железы, почки, желудка и т.д. С другой стороны, классические виды терапии обладают целым рядом побочных эффектов, и, в первую очередь, выраженным иммунодепрессивным эффектом. Это обусловлено, тем, что принцип лечебного действия как химио-, так и радиотерапии, базируется на более высокой скорости развития опухолевой массы в сравнении с регенерирующими клетками здоровых органов и тканей, однако на практике химиопрепараты и облучение повреждают не только опухолевые клетки, но и быстро обновляющиеся клетки пищеварительного тракта, костного мозга, волосяных фолликулов и т.д., что может приводить к таким негативным последствиям как алопеция, изъязвление слизистых оболочек и т.п. [99, 100]. Отмечается также низкая эффективность классических методов терапии в плане предупреждения прогрессирования онкологических заболеваний [106].
В этой связи, в современных условиях особую актуальность приобретает создание оригинальных методов и средств, позволяющих повысить эффективность лечения онкопатологии при сокращении побочных эффектов.
Примером оригинального пути решения проблем в сфере терапии рака может служить способ позитронной терапии метаболически активного метастатического рака [24, 127], примененный в эксперименте на моделях меланомы, рака груди, рака толстой кишки. Предложенный способ предусматривает внутривенное введение пациенту позитрон-излучающего радиофармпрепарата (далее по тексту - «П-РФП») в качестве которого используют глюкозу, меченную 18F, или ее аналоги, в частности 2-фтор-[18F]-2-дезокси-D-глюкозу (18F-ФДГ), в дозе более 15 мКи, но не более 10 Ки на пациента.
18F-ФДГ традиционно применяется в качестве РФП для позитронной эмиссионной томографии (далее по тексту - «ПЭТ») при исследовании опухолей различной локализации [121, 122]. Использование 18F-ФДГ в качестве диагностического средства основано на том, что при внутривенном введении указанный П-РФП повторяет начальный этап метаболического пути глюкозы, проникая из сосудистого русла в клетки, где фосфорилируется фосфокиназами с образованием 18F-дезокси-глюкоза-6-фосфата, который не вступает в дальнейшие реакции и накапливается в клетках [24]. Соответственно, терапевтическое действие 18F-ФДГ в рассматриваемом способе-аналоге базируется на системной доставке радионуклида 18F как в первичные очаги, так и в зоны регионарного метастазирования, и взаимодействии испускаемых данным радионуклидом позитронов с окружающими тканями. Предполагается, что позитроны способны вызывать гибель раковых клеток, реализуя те же механизмы воздействия на живую клетку, что и электроны - повреждения структуры и функций ДНК, грубые нарушения свойств белков, цитоплазмы, ферментов, всех метаболических процессов, и, как следствие, индуцирование некроза/апоптоза неопластических клеток [24].
Однако известный способ-аналог не обеспечивает достижения технического результата заявленного способа. Учитывая, что 18F-ФДГ характеризуется низкой специфичностью (физиологически накапливается в ткани головного мозга и миокарде, а также в органах выделения) [24], использование в способе-аналоге доз облучения (до 370000 МБк), значительно превышающих диагностические дозы (130-550 МБк на пациента [122, 123]), существенно увеличивает вероятность развития лучевых поражений активно-функционирующих органов и тканей. Негативное влияние на эффективность лечения с использованием рассматриваемого способа-аналога может оказывать также наличие в популяции клеток опухоли (у абсолютного большинства опухолей) субпопуляции раковых стволовых клеток (далее по тексту - «РСК»), обладающих максимальной степенью независимости от внешних сигналов, мультипотентностью, самой высокой пролиферативной активностью среди всех опухолевых клеток, способностью к бесконечному самообновлению и восстановлению поврежденной ДНК. РСК чрезвычайно устойчивы ко всем известным видам лечения, в том числе к радиотерапии, в частности за счет их экстремальной устойчивости к апоптозу. Именно поэтому после, например, тяжелого ионизирующего облучения РСК не погибают, а активизируют восстановление повреждений ДНК и через какое-то время вновь приобретают способность к делению. Однако процесс репарации ДНК может сопровождаться новыми мутациями, в результате чего РСК становятся еще злокачественнее. Таким образом, субпопуляция РСК, которая обеспечивает радиорезистентность опухоли, с большой вероятностью может служить источником рецидива опухоли после облучения [123].
К числу наиболее перспективных направлений, где могут быть успешно реализованы принципиально новые подходы к решению основных проблем лечения онкопатологии, в настоящее время относят биотерапию, в частности иммунотерапию, вирусную терапию и вакцинотерапию рака.
Примером подобного подхода, названного «прорывным» в иммунотерапии, является применение моноклональных антител, блокирующих ключевые рецепторы, отвечающие, в частности, за программируемую гибель клеток. Разработка препаратов данной группы базировалась на том, что одной из стратегий ускользания рака от надзора иммунной системы является использование «тормозных» механизмов, которые в норме служат для контроля выраженности и длительности иммунного ответа, что позволяет предотвратить развитие аутоиммунной агрессии и повреждение собственных тканей. Это реализуется, в частности, благодаря существованию «Иммунологических контрольных точек» (от англ. «Immunological checkpoints))) - системы ингибиторных механизмов, которые регулируют активацию иммунного ответа, препятствуя запуску аутоиммунных процессов (далее по тексту - «ИКТ»). При прогрессии злокачественной опухоли ИКТ блокируют иммунную реакцию в отношении опухолевых клеток. В ответ на попытку иммунокомпетентной клетки уничтожить опухолевую клетку, последняя усиливает экспрессию находящихся на ее поверхности молекул-лигандов, в результате чего при взаимодействии этих лигандов с рецептором опухоль-специфического лимфоцита ингибирующие сигналы будут преобладать над ко-стимулирующими и лимфоцит не будет атаковать опухолевую клетку. Предотвращая таким образом активацию опухоль-специфических лимфоцитов, опухоль приобретет устойчивость к действию иммунной системы [2, 112, 64,].
К наиболее изученным из ИКТ относятся белок CTLA-4, белок программируемой клеточной гибели PD-1 (от англ. «Programmed cell Death 1») и белок Tim-3 (от англ. «Т cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule 3»). PD-1 экспрессируется на поверхности активированных эффекторных Т-лимфоцитов и имеет два лиганда PD-L1 и PD-L2. Взаимодействие рецептора с лигандом на поверхности антиген-презентирующих клеток или клеток-мишеней является стимулом, угнетающим активность Т-лимфоцитов, вызывающим их апоптоз. Tim-3 экспресируется на поверхности активированных эффекторных Т-лимфоцитов, преимущественно в сочетании с рецептором PD-1, и имеет четыре лиганда: галектин-9 (Gal-9), HMGB-1 (амфотерин), фосфатидилсерин (PtdSer) и молекула клеточной адгезии, относящаяся к карциноэмбриональному антигену-1 (Сеасат-1) [2, 72, 56, 49, 60].
В настоящее время известны способы иммунотерапии с применением препаратов (моноклональных антител), блокирующих рецептор PD-1 (ниволюмаб /Opdivo®/, пембролизумаб /Keytruda®/) или лиганд PD-L1 (атезолизумаб); рецептор CTLA-4 (ипилимумаб), у пациентов с метастатической меланомой, немелкоклеточным раком легкого, раком почек и раком мочевого пузыря [2, 111, 112, 113, 114]. Указанные анти-PD-1 и анти-PD-L1 моноклональные антитела вводят внутривенно курсами продолжительностью до 6 мес.Эффективность лечения, оцениваемая, в частности, по частоте объективных ответов, в зависимости от вида опухоли и конкретного препарата варьировала в диапазоне 10,9-40,0%, при этом токсичность, как частота нежелательных явлений всех степеней и частота нежелательных явлений 3-4 степени (далее по тексту - «ЧНЯ3-4»), находилась в пределах 42-52 и 7,6-42,0%, соответственно. Имеются сведения, что эффективность терапии возрастала с повышением дозы препарата, однако при этом ЧНЯ3-4 превышала 50%. В частности, имеются данные, что использование ипилимумаба в сочетании с ниволюмабом обеспечивало частоту объективных ответов 40%, при этом ЧНЯ3-4 возрастала до 62%.
Использование блокаторов ИКТ не позволяет получить технический результат заявленного изобретения по следующим причинам. Вмешательство в супрессорные механизмы приводит к тому, что стимулированная иммунная система может атаковать здоровые органы - кишечник, печень, легкие, почки, надпочечники, поджелудочную железу, сердце и т.д., вызывая их аутоиммунные поражения. Предполагается, что этот эффект связан с активацией синтеза противовоспалительного цитокина интерлейкина 10 (IL-10) [5, 7, 44].
В настоящее время считается признанным, что способность к индукции иммунного ответа у опухолей различна и определяется их биологическими свойствами [117]. Это является важным фактором, определяющим эффективность иммунотерапии, в том числе основанной на применении ингибиторов ИКТ. Так, по результатам клинических наблюдений установлено, что малоиммуногенные опухоли не отвечают на указанную терапию [2]. Одной из причин неимунногенности может являться отсутствие или низкий уровень экспрессии опухоль-ассоциированных антигенов опухолевыми клетками, что определяется биологическими особенностями данных клеток [117]. В этом случае активация реактивированных Т-клонов лимфоцитов в результате введения рассматриваемых препаратов может приводить к еще большей стимуляции аутоиммунной агрессии. Кроме того, вероятность высокого содержание Т-лимфоцитов с пониженной функциональной активностью, которое может быть обусловлено индивидуальным воздействием опухоли на иммунокомпетентные клетки, будет негативно влиять на эффективность данной терапии. Также предполагается [2], что каждый конкретный препарат подобного типа, основанный на нейтрализации ингибирующего сигнала, передающегося через определенную ИКТ, может приводить к реактивации противоопухолевого иммунного ответа только в случае, если сигнальные каскады в данной ИКТ способны оказывать доминантный эффект в неоплазии данного пациента.
И наконец, имеются сведения, что блокаторы PD-1 рецепторов могут вызывать прогрессирование (гиперпрогрессию) опухолей [68, 69]. Это связывают с компенсаторной активацией Tim-3 рецепторов на поверхности Т-лимфоцитов, особенно субпопопуляции CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, которые наиболее эффективно подавляют противоопухолевый иммунный ответ [70, 71].
Известно применение блокаторов ИКТ в сочетании с противовоспалительными препаратами, такими как блокаторы фактора некроза опухоли (TNF), интерлейкина 1 (IL-1), кортикостероиды [9, 10, 11]. На основании результатов клинических наблюдений авторами цитируемых источников информации сделан вывод, что подобная сочетанная терапия препятствует развитию серьезных аутоиммунных осложнений. Однако, по мнению авторов заявленного изобретения, введение противовоспалительных препаратов полностью исключает (особенно в случае неиммуногенных опухолей) или значимо снижает возможность достижения целевого противоопухолевого эффекта, что, соответственно, приводит к прогрессированию онкозаболевания.
Известен способ терапии опухолевых заболеваний, в частности опухолей мозга и меланомы, с применением рекомбинантного человеческого БТШ70 (далее по тексту - «рчБТШ70»), полученного с использованием штамма-продуцента Е. coli ВВ, трансформированного векторной плазмидой pMSHsp70 [3П]. Указанный препарат БТШ70 вводят в виде раствора интратуморально в однократной суточной дозе 0,5 мг белка. Лечение включает введение указанного препарата курсом из 5-8 инъекций с интервалом 1-2 дня. Интратуморальное введение БТШ70 в модели внутричерепной глиомы С6 у крыс приводило к замедлению роста опухоли, увеличению количества CD8+ лимфоцитов, специфических к клеткам опухоли, и, как следствие, увеличению продолжительности жизни животных. Технология внутриопухолевого введения препарата очищенного рчБТШ70 была использована в ограниченном исследовании на пациентах с опухолями мозга, которое показало безопасность технологии, ее пригодность и эффективность для нейроонкологических больных.
Экспериментально установлено, что терапевтический эффект таргетного введения экзогенного БТШ70 по способу-аналогу [3П] основывается на феномене транслокации внутриклеточного шаперона под влиянием экзогенного очищенного БТШ70. В рамках концепции противоопухолевого действия БТШ70, при введении в опухоль экзогенный БТШ70 проникает внутрь опухолевых клеток и вытесняет собственный эндогенный БТШ70 как на поверхность мембраны опухолевой клетки, так и в микроокружение опухоли. Мембранно-связанный БТШ70, взаимодействуя с рецептором CD94 на поверхности натуральных киллеров (NK-клеток), вызывает активацию их цитолитической функции, что свидетельствует об активации врожденного иммунного ответа. Внеклеточный БТШ70 в комплексе с опухолевыми пептидами может связываться с антиген-презентирующими клетками (ДК) с последующей презентацией опухолевых антигенов в комплексе с антигенами главного комплекса гистосовместимости класса 1 (МНС-1) и развитием специфического противоопухолевого иммунного ответа. Таким образом, опухолевые клетки уничтожают либо NK-клетки, узнавая антигены, находящиеся на поверхности опухоли, либо Т-лимфоциты по специфическому механизму (13, 124].
Однако указанный способ-аналог не позволяет получить технический результат, достигаемый при реализации заявленного способа, так как набор опухолевых антигенов, который выходит из раковых клеток с эндогенным БТШ70 представляет небольшую часть от их общего репертуара, недостаточную для получения целевого иммунного ответа. Клональная эволюция опухоли изменяет антигенный состав опухоли и ее метастазов, что приводит к снижению эффективности иммунотерапии рака (14, 15). Для ее повышения необходимо получить иммунную реакцию против расширенного спектра опухолевых антигенов с учетом его гетерогенности в опухоли и ее метастазах (50).
Известно применение белков теплового шока-70 (далее по тексту - «БТШ70»), в частности рчБТШ70), и гибридных белков на основе БТШ70, обладающих пролонгированным действием, для лечения рака, в частности меланомы в эксперименте [124, 125]. Гибридный белок на основе БТШ70 содержит молекулу БТШ70 и соединенный с ней Fc-фрагмент, идентичный нативному константному Fc-фрагменту иммуноглобулина G человека (IgG), которые дополнительно сшиты линкерным фрагментом (далее по тексту - «БТШ70-Fc»). Препараты БТШ70 и БТШ70-Fc вводили интратуморально в дозе 50 мкг/мышь на 12-й, 14-й и 16-й дни эксперимента. Установлено, что в группах животных, которым вводили указанные препараты БТШ70, значительно уменьшился (по сравнению с контролем) рост опухоли, увеличилось время выживания, снизилось количество случаев метастазирования и среднее число метастазов на одно животное. При этом снижение указанных показателей в группе мышей, получавших рчБТШ70-Fc, было существенно выше, чем у животных, получавших БТШ70.
Известно применение БТШ70 и БТШ70-Fc, меченных радиоактивными изотопами йода (1-123, 1-124, 1-125 или 1-131), для лечения рака, в частности меланомы в эксперименте [4П, 5П]. Препараты БТШ70 и БТШ70-Fc, меченные радиоактивными изотопами, были приготовлены путем йодирования в осадках тирозина и гистидина с использованием гранул радиоактивного йода. Результаты исследований биораспределения 123I-БТШ70 и 123I-БТШ70-Fc показали преимущественное накопление 123I-БТШ70-Fc в опухоли (12-ти кратное превышение по сравнению с накоплением другими исследуемыми органами). Двукратное внутривенное введение 131I-БТШР70 и 131I-БТШ70-Fc мышам двух групп (на 12 и 16 сут после введения опухолевых клеток, в дозе 2×18,5 МБк, которая обеспечивала поступление 49 Гр в опухоль) привело к значительному снижению роста опухоли, увеличению времени выживания, уменьшению количества животных с метастазами, а также числа метастазов на мышь. При этом эффективность применения меченных радиоактивным йодом БТШ70 и БТШ70-Fc превышала эффективность немеченых БТШ70 и БТШ70-Fc, а противоопухолевый эффект 131I-БТШ70-Fc был наиболее выражен в сравнении с другими препаратами.
Лечение рака с использованием гибридных белков пролонгированного действия на основе БТШ70 и Fc-фрагмента IgG позволяет получить более выраженный защитный противоопухолевый иммунный эффект в сравнении с немодифицированным БТШ70. Однако применение конъюгатов БТШ70 с радионуклидами сопряжено с относительно высоким риском поражения здоровых органов и тканей (печень, почки, миокард, головной мозг, мышцы) при неспецифическом накоплении в них этих конъюгатов.
Перспективным направлением биотерапии является вакцинотерапия, базирующаяся на использовании отдельных антигенов или их комплексов, и представляющая собой активную специфическую иммунотерапию, в основе которой лежит стимуляция иммунного ответа пациента на собственную опухоль. В настоящее время исследуются и проходят клинические испытания различные виды вакцин, в частности вакцины на основе цельных опухолевых клеток (аутологичных или аллогенных), пептидные вакцины, вакцины на основе ДК и т.п. Повышение иммуногенности вакцин может достигаться использованием адъювантов - компонентов или факторов, стимулирующих иммунный ответ на антиген и (или) модулирующих желательные иммунные реакции. Адъюванты могут быть непосредственно включены в состав вакцин, например вакцины на основе БТШ, вакцины на основе вирус-модифицированных опухолевых клеток и т.п.Адъюванты также могут представлять собой различного рода факторы, воздействующие на организм пациента в сочетании с введением вакцин, например лазерное облучение, дооперационная стимуляция организма пациента ВБН и т.п. Большинство подходов к созданию противоопухолевых вакцин направлено на предотвращение рецидивирования и метастизирования новообразований после их хирургического удаления, химио- или лучевой терапии [199, 44; 100; 101].
Так, известен способ лазерной вакцинации больных с метастатическими формами рака [122]. Согласно указанному способу-аналогу лазерную вакцинотерапию проводят после выполнения условно-радикальной хирургической операции. При этом, предварительно полученную из биопсийного материала культуру опухолевых клеток, инактивированную гамма-лучами, или лизат опухолевых клеток модифицируют излучением углекислотного лазера (CO2-лазера) или обработкой широкоапертурными импульсными электронными пучками (далее по тексту - «модифицированная излучением вакцина»). Воздействуют на 4-6 участков кожи спины пациента диаметром 5-15 мм излучением лазера на парах меди с длиной волны 510,6 и 578 нм при плотности мощности свыше 3 Вт/см2, длительности импульсов 10-20 нс и частоте следования импульсов 5-15 кГц или излучением инфракрасного лазера с длиной волны 830 нм при плотности мощности 1,5-15 Вт/см2. Через 24-48 ч после облучения в каждую из зон образования клеточного инфильтрата вводят внутрикожно модифицированную излучением вакцину (в суммарной дозе 3×106 клеток, содержащейся в 1 мл физиологического раствора). Процедуры лазерной вакцинации проводят один раз в неделю. Курс лечения 10-15 процедур. Применение у 42 больных модифицированной излучением вакцины с антигенами из операционного материала IV стадии показало отсутствие признаков прогрессирования заболевания в течение одного года у 62% больных (в группе сравнения, где применяли вакцину на основе ДК, стимулированных аутоантигенами из лизатов опухолей, - в 71% случаев), а также увеличение продолжительности жизни в 1,6 раза (по сравнению с группой сравнения), что сопровождалось развитием специфического Т-клеточного иммунного ответа.
Способ-аналог [122] основан на активации противоопухолевого иммунного ответа вследствие мобилизации эндогенных БТШ70 из клеток кожи под воздействием высокоинтенсивного импульсного лазерного излучения, активации ДК, миграции их в зону облучения (с повышенным содержанием БТШ) и захвате ДК введенных в зону клеточного инфильтрата аутологичных опухолевых антигенов с повышенной иммуногенностью с последующим представлением их иммунокомпетентным клеткам.
Невозможность достижения заявленного технического результата при реализации способа-аналога [122] обусловлена следующим. В рассматриваемом способе используется аутологичная вакцина, характерной особенностью которой является ее идентичность клеткам опухоли с соответствующими структурами, активирующими клеточный иммунный ответ. Присутствующий в такой вакцине широкий спектр опухолевых антигенов определяет возможность их использования при соответствующей опухоли без оценки экспрессии отдельных антигенных детерминант. Однако вакцина данного вида представляет собой живые аутологичные опухолевые клетки, пролиферативные способности которых ограничены гамма-излучением, либо лизирванные (многократным повтором процедур замораживания-размораживания) клетки. Подобное воздействие может изменять структуру и свойства опухолевых антигенов и, соответственно, снижать эффективность вакцины.
Вследствие фенотипической гетерогенности опухолевых клеток, а также их антигенной изменчивости, обусловленной клональной эволюцией опухоли, направленной, в первую очередь, на уничтожение клонов с более выраженной иммуногенностью и дальнейшее усиление злокачественности, антигенный профиль опухолевых клеток, полученных из разных мест (основная опухоль, метастазы, лимфоузлы), может существенно различаться. В этой связи, ограниченный набор опухолевых антигенов, представленный в конкретной аутологичной вакцине, будет составлять только незначительную часть от общего антигенного репертуара опухоли и ее метастазов, что в ряде случаев может оказаться недостаточным для получения выраженного продолжительного целевого иммунного ответа, несмотря на повышенную (с помощью лазерного воздействия) иммуногенность собственных опухолевых клеток [14, 15, 100]. Кроме того, высказано предположение [125], что часть опухолевых антигенов, из числа содержащихся в приготовленной вакцине, может быть представлена в контексте собственных МНС-антигенов, не имеющих отношения к цели вакцинации, при этом не исключается возможность их отрицательного воздействия на формирование специфического иммунного ответа. Все это обусловливает относительно низкую эффективность известного способа-аналога.
В настоящее время к числу ведущих направлений биотерапии относят терапию с использованием онколитических вирусов, которые способны вызывать специфическую гибель именно злокачественных, но не нормальных клеток (далее по тексту - «виротерапия рака»). Специфическое разрушение злокачественных клеток обусловлено способностью онколитического вируса к избирательной репликации в этих клетках и способностью воздействовать на регуляторные системы организма, ответственные за активацию противоопухолевого иммунного ответа [107]. Многопрофильность влияния вируса на клеточные процессы значимо снижает вероятность резистентности [104]. Несомненный интерес в плане клинического применения представляют непатогенные для человека, но обладающие высоким онколитическим потенциалом вакцинные штаммы парамиксовирусов (Paramyxoviridae) (далее по тексту - «ПМВ»), в частности вируса Сендай (вирус парагриппа мышей 1 типа или гемагглютинирующий японский вирус) (далее по тексту также - «СеВ»), вируса болезни Ньюкасла (далее по тексту - «ВБН»), вируса кори [103]. Виротерапию рака применяют на поздних стадиях онкологического процесса, когда возможности специализированного лечения ограничены или исчерпаны, а также для предотвращения развития метастазов и рецидивов.
В настоящее время установлено, что онколитическое действие ПМВ, в частности СеВ и ВБН, может реализоваться по нескольким потенциальным механизмам. При этом степень онколитического действия и запуск того или иного механизма зависят от ряда факторов.
Первый механизм разрушения опухолевых клеток - ПМВ могут оказывать прямое цитолитическое действие, возникающее в результате репликации вирусов в малигнизированных клетках. Это осуществляется за счет: продуцирования неопластическими клетками гликопротеинов, которые могут служить рецепторами для ПМВ; частых генетических дефектов раковых клеток в системе интерферонового и апоптозного ответов, которые создают режим благоприятствования репликации вирусов; образования многоядерных клеточных конгломератов (сцинтиев) из злокачественных клеток, что лишает клетки возможности делиться, обрекая их на коллективную гибель, а также позволяет вирусу ускользать от нейтрализующего воздействия антител. Указанные цитопатологические изменения (патология ядра и цитоплазмы), как правило, не совместимы с дальнейшим существованием этой клетки и, в конечном итоге, приводят к ее гибели.
Второй механизм - иммуномодулирующее действие ПМВ, которое заключается в их способности активировать Т-клеточное звено иммунитета, неспецифически индуцировать естественные защитные силы организма, изменять антигенные и иммуногенные характеристики опухолевых клеток, стимулировать синтез интерферонов (далее по тексту - «ИФН»), в частности ИФН-альфа и ИФН-гамма, в лейкоцитах периферической крови человека; стимулировать продукцию других цитокинов (TNF), что, в свою очередь, ведет к активации NK, макрофагов, сенсибилизированных Т-лимфоцитов, антигенпредставляющих ДК, а также подавлять опосредованную Т-лимфоцитами регуляторную иммуносупрессию путем секреции интерлейкина 6 (IL-6) зрелыми ДК [43, 104; 119].
Известно применение ВБН в комплексной терапии рака (химио- и лучевой терапии) у больных с диссеминированными солидными опухолями, в частности у пациентов с меланомой кожи, раком молочной железы, раком толстой кишки, раком шейки матки, раком яичников, с увеальной меланомой [119, С. 53-64]. Применяемый препарат ВБН изготавливали из живого вируса апатогенного штамма La Sota, выращиваемого в свободных от патогенной микрофлоры куриных эмбрионах, который очищали центрифугированнием. Препарат ВБН вводили пациентам в дозе (1-5)×107 под/внутрикожно в сочетании с человеческим рекомбинантным гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (Г-КСФ) раз в неделю в течение 4-х недель, начиная с 4-й по 8-ю недели после операции. В последующем курс продолжали аналогичными инъекциями раз в две недели в течение одного года, далее инъекции делали с возрастающим до трех мес.интервалом на протяжении 2,5 лет. При проведении комплексного лечения с включением курсов адъювантной химиотерапии и по показаниям лучевой терапии в течение 6 мес. Препарат ВБН получили 67 больных - до 16 внутрикожных введений при 6-ти месячном курсе лечения.
Эффективность лечения (по шкале RECIST) с использованием ВБН в комплексной терапии охарактеризована следующим образом: полный ответ - у 28,3% больных (при средней продолжительности эффекта 11 мес.); частичный ответ - у 26,8% больных (средняя продолжительность эффекта 11,7 мес.); стабилизация процесса - у 23,8% больных (средняя продолжительность эффекта 14 мес.); прогрессирование процесса - у 20,8% больных.
В качестве побочных эффектов лечения было зафиксировано следующее: лихорадка I и II степени наблюдалась практически у всех больных, сопровождалась кратковременным ухудшением самочувствия, не требовала какого-либо лечения и в течение суток самостоятельно купировалась. Локальные кожные реакции в месте введения вакцины, как при первичном, так и при повторных ее введениях; гиперемия и локальный отек в месте введения стихали в течение нескольких дней после вакцинации и не требовали дополнительного лечения. По мнению авторов рассматриваемого способа-аналога, подобные симптомы, как правило, традиционно наблюдаются при вакцинации разных типов. Возможные побочные эффекты при повторных вакцинациях (через 4-5 суток после вакцинации), которые могут проявляться вследствие выработки специфических антител (лихорадка, озноб, ощущение жара, кожной сыпи и т.п.), ни в одном из случаев зарегистрированы не были [119, С. 53-64].
Достижение терапевтического эффекта способа-аналога [119, С. 53-64; 2 X1] базируется на основных механизмах разрушения опухолевых клеток -прямом цитопатическом действии на опухолевые клетки в процессе вирусной репликации и индукции противоопухолевого звена иммунитета. Однако результаты клинических наблюдений авторов заявленного способа показали, что только приблизительно у 40% пациентов в системе in vitro определяется чувствительность опухолевых клеток к ВБН, что свидетельствует об относительно низкой вероятности запуска цитопатической составляющей. Вероятность высокого содержания лимфоцитов с пониженной функциональной активностью, что может быть обусловлено индивидуальными особенностями опухоли может препятствовать реализации иммунной составляющей ВБН. Кроме того, в условиях системного введения ВБН не исключается вероятность нейтрализации вируса клетками-эффекторами врожденного иммунитета (NK-клетками, макрофагами, полиморфноядерными лимфоцитами), что препятствует целевой доставке вирусных частиц и не позволяет обеспечить присутствие этих частиц в зонах опухолевых очагов в количестве, необходимом и достаточном для запуска цитопатической и иммунной составляющих вирусспецифических механизмов гибели раковых клеток и, соответственно, развития выраженного целевого противоопухолевого эффекта. Все это оказывает негативное влияние на возможность получения положительного результата лечения.
Известно применение вирусов в сочетании с ингибиторами блокирующих противоопухолевый иммунный ответ PD-1 и Tim-3 рецепторов ИКТ (25, 26; 27), лучевой терапией (28; 29) и бактериальными ЛПС (30; 31). Однако имеются сведения, что при сочетании онколитической виротерапии с ЛПС в 40% случаев у животных возникают летальные осложнения -септический шок, развивается «цитокиновая буря» из-за многократного повышения уровня воспалительных цитокинов ИЛ-6 и TNF (31). Это препятствует внедрению данного метода в практическую медицину.
Известно применение аутологичной, облученной и модифицированной ВБН вакцины на основе лизата или культуры опухолевых клеток (далее по тексту - «ВБН-вакцина») в комплексной терапии рака (химио- и лучевая терапия) у пациентов с меланомой кожи, меланомой влагалища, увеальной меланомой, раком молочной железы, раком толстой кишки, раком яичников [119, С. 53-64; 101]. Для приготовления ВБН-вакцины использовали опухолевые клетки, выделенные непосредственно в ходе удаления опухоли, или перевиваемые опухолевые линии, полученные из операционного или биопсийного материала, инактивированные гамма-излучением, замороженные в жидком азоте и обработанные ВБН (10-100 ID50 вируса на клетку опухоли) перед введением пациентам. ВБН-вакцину вводили пациентам в дозе (1-5)×107 под/внутрикожно в сочетании с Г-КСФ раз в неделю в течение 4-х недель, начиная с 4-й по 8-ю недели после операции. В последующем курс продолжали аналогичными инъекциями раз в две недели в течение одного года, далее инъекции делали с возрастающим до трех мес.интервалом на протяжении 2,5 лет. При проведении комплексного лечения с включением курсов адъювантной химиотерапии и по показаниям лучевой терапии в течение 6 мес. ВБН-вакцину получили 36 больных - от 8 до 16 внутрикожных инъекций при 6-ти месячном курсе лечения.
Эффективность лечения (по шкале RECIST) с использованием ВБН-вакцины в комплексной терапии охарактеризована следующим образом: полный ответ - у 19,4% больных (при средней продолжительности эффекта 11 мес.); частичный ответ - у 36,1% больных (средняя продолжительность эффекта 11,7 мес.); стабилизация процесса - у 36,1% больных (средняя продолжительность эффекта 12,7 мес.); прогрессирование процесса - у 8,3% больных. Полученные результаты исследований свидетельствовали о более выраженном противоопухолевом эффекте при использовании ВБН-вакцин в сравнении с ВБН в чистом виде в комплексной терапии рака. Побочные эффекты лечения были аналогичны описанным выше для способа-аналога, касающегося применения препарата ВБН в чистом виде [119. С. 53-64].
Невозможность получения заявленного технического результата с помощью способа-аналога [119, С. 53-64; 101] вызвана следующими причинами. Вследствие гетерогенности антигенного состава опухоли и ее метастазов, а также его изменений, обусловленных клональной эволюцией опухоли, и связанных, в первую очередь, с уничтожением клонов с более выраженной иммуногенностью и дальнейшим усилением злокачественности, антигенный профиль опухолевых клеток, полученных из разных мест (основная опухоль, метастазы, лимфоузлы), может существенно различаться. В этой связи, ограниченный набор из общего репертуара опухолевых антигенов, представленный в лизате или культуре аутологичных опухолевых клеток, инактивированных гамма-излучением, в ряде случаев оказывается недостаточным для получения выраженного продолжительного целевого иммунного ответа [14, 15, 100]. Повышение иммуногенности собственных опухолевых клеток с помощью вирусной модификации [119, С. 53-64; 101] не всегда является достаточной.
Известен способ лечения онкологических заболеваний, в частности рака молочной железы, включающий применение ВБН и аутологичной вакцины, представляющей собой сочетание белков теплового шока (БТШ) в комплексе с опухолевыми антигенами, выделенными из опухолевой ткани пациента (далее по тексту - «БТШ-вакцина») [132; 119, С. 99-107]. Применяемый препарат ВБН изготавливали из живого вируса апатогенного штамма La Sota, выращиваемого в свободных от патогенной микрофлоры куриных эмбрионах, который очищали центрифугированием. Указанный способ-аналог включал следующие этапы. Перед операцией (на этапе неоадъювантной терапии) производили инъекции препарата ВБН в дозе 1×109 внутрикожно (4-6 инъекций) в область передней брюшной стенки с интервалом 7-10 дней. Осуществляли хирургическое лечение. Получали БТШ-вакцину, используя обогащенную фракцию БТШ, выделенную из опухолевой ткани пациента до операции (БТШ70-, БТШ90- и БТШ96-пептидные комплексы). Затем проводили курс лечебной вакцинотерапии: БТШ-вакцину начинали вводить спустя двое суток после операции и повторяли с интервалами 7-10 дней в течение 4-6 мес. (8-10 раз) - амбулаторно.
Эффективность применения БТШ-вакцины оценивали по повышению уровня Т-цитотоксических лимфоцитов субпопуляции CD8 (CD3+CD8+), которое свидетельствовало о формировании специфического противоопухолевого иммунитета. Стимуляция специфического иммунного ответа получена в 7 случаях из 8. [119, С. 99-107].
В качестве побочных эффектов лечения отмечены следующие. При введении ВБН и БТШ-вакцины подкожно имела место умеренная болезненность, не требующая какого-либо лечения, припухлость в месте инъекции (местная реакция), повышение температуры, ухудшение общего самочувствия, озноб. Повышение температуры тела пациента до 38°C непосредственно после вакцинации (ревакцинации) считалось показателем адекватной реакции на вакцину и не требовало медикаментозного снижения температуры. При повышении температуры тела выше 38°C и в зависимости от самочувствия пациента предусмотрена симптоматическая медикаментозная коррекция.
Создание противоопухолевых вакцин на базе БТШ основано на способности БТШ связывать пептиды опухолевой клетки и фактически нести антигенный набор тех клеток, из которых они получены. Исследования показали, что клеточные БТШ, такие как БТШ70, БТШ90, БТШ96, в клетке связаны с целым спектром пептидов, включая опухоль-специфические. При извлечении комплексов БТШ-пептид из опухолевой клетки, они будут нести часть индивидуального специфического набора опухоли и при введении их назад пациенту будут формировать специфический иммунитет против того вида опухоли, из которых эти комплексы были выделены. По мнению авторов рассматриваемого способа-аналога [132; 119, С. 99-107], эффективность лечения обусловлена формированием специфического противоопухолевого иммунного ответа широкого спектра действия за счет обогащенной БТШ аутовакцины и дополнительной стимуляции неспецифического иммунитета в сочетании с усилением цитолитической активности за счет адъюванта (ВБН). Кроме того дооперационная стимуляция организма пациента ВБН способствует повышению экспрессии БТШ в опухоли, что повышает их уровень, обеспечивая тем самым возможность получения большего количества комплексов БТШ-опухолевый пептид из того же количества опухолевой ткани.
Однако способ-аналог [132; 119 С. 99-107] не позволяет получить технический результат, обеспечиваемый предложенным способом. Несмотря на то, что обогащенная БТШ аутовакцина повышает иммуногенность представляемых иммунной системе опухолевых антигенов, ограниченный набор последних, представленный в данной аутовакцине, может оказаться недостаточным (по причинам, изложенным выше при критике способа-аналога 128) для получения выраженного продолжительного целевого иммунного ответа опухолевых клеток [14, 15, 100]. Относительно низкая вероятность запуска цитопатической составляющей вирусспецифических механизмов гибели опухолевых клеток, как это было отмечено при критике способа-аналога [119, С. 53-64; 2 X1], а также вероятность высокого содержания лимфоцитов с пониженной функциональной активностью, препятствующего запуску иммунной составляющей ВБН, снижают вероятность получения выраженного целевого противоопухолевого эффекта. Не исключается также возможность инактивации вируса противовирусными антителами. Все это значимо снижает эффективность терапии с использованием указанного способа-аналога.
Наиболее близким к заявленному способу является способ лечения онкологических заболеваний с использованием фармацевтической композиции на основе онколитического вируса Сендай [7П]. Вакцинная композиция по данному изобретению содержит СеВ и фармацевтически приемлемый носитель (например, физиологический раствор), причем в одном варианте композиции используют изолированный, нативный, биологически активный штамм СеВ (Сендай-Москва), депонированный в американской коллекции клеточных культур АТСС под номером РТА-13024, а в другом варианте - генетически сконструированный, биологически активный штамм СеВ, сделанный на основе вирусного материала, депонированного как это указано выше. СеВ может быть размножен в куриных эмбрионах либо адаптирован к размножению в клеточной культуре. Предпочтительным является введение живого вируса, возможно также введение вируса, предварительно инактивированного при помощи ультрафиолетового излучения. Вирусный материал собирается из аллантоисной жидкости или из клеточной среды и вводится в композицию в форме суспензии в аллантоисной жидкости либо лиофилизированным. Оба указанных выше варианта композиции могут дополнительно содержать: инактивированные радиацией клетки, полученные дисперсией из опухолевого материала больного либо из иммуногенных опухолевых клеточных линий; клетки куриных эмбрионов или инактивированные радиацией клетки в комбинации с клетками куриных эмбрионов. Указанную вакцинную композицию (какого-либо из указанных вариантов) вводят пациенту (предпочтительно внутрь опухоли или внутрикожно, подкожно, внутримышечно и т.п.) в эффективном количестве. Вакцинный материал вводят небольшими дозами в 10 точек кожи по 100 мкл. При введении лиофилизированного препарата вируса титр вируса составляет от 6 до 7, а при введении нативного (нелиофилизированного) варианта - от 7 до 8 эмбриональной инфекционной дозы 50% (ЭИД 50%) на мл. Курс иммунотерапии включает 12 инъекций вакцинной композиции, причем инъекции производят с интервалом 7-10 дней. Указанный курс повторяют каждые 2-3 года. Применение рассматриваемой группы изобретений обеспечивает: после радикальных операций - выживание без признаков онкозаболеваний в 92% случаев (у 11 из 12 пациентов), после туморредуктивных операций - выживание без признаков прогрессии заболевания - в 27% случаев (у 4 из 5 пациентов).
Способ-прототип [133] основан на использовании специфических онколитических свойств вируса Сендай. Однако рассматриваемый способ не позволяет обеспечить достижение технического результата заявленного изобретения по следующим причинам. С одной стороны, ему присущи все слабые стороны аутовакцин (изложенные выше), обусловленные тем, что результат зависит от индивидуальных особенностей противоопухолевого иммунитета, формирующегося под влиянием опухоли, которая, в свою очередь, характеризуется не только множественностью антигенов, но и повышенной мутационной активностью с дальнейшим усилением признаков злокачественности [117, 14, 15]. Кроме того, необходимость использования в ходе приготовления вакцин инактивированных радиацией культур собственных раковых клеток уменьшает возможности применения способа из-за сложности получения этих культур. С другой стороны, при реализации заявленного способа имеет место ряд негативных эффектов, специфических для вирусной монотерапин. Так, не исключается вероятность инактивации вируса адаптивными противовирусными антителами (исходно существующими за счет ранее имевшего место контакта пациента с вирусом парагриппа или образованными за счет противовирусного гуморального иммунного ответа), а также нейтрализации клетками-эффекторами врожденного иммунитета (NK-клетки, макрофаги, полиморфноядерные лимфоциты). В результате этого снижается вероятность доставки вирусных частиц в патологические очаги в количестве, необходимом и достаточном для запуска и стабильного функционирования цитопатической и иммунной составляющих вирусспецифических механизмов гибели раковых клеток. Высокое содержание лимфоцитов с пониженной функциональной активностью, которое может быть обусловлено индивидуальными особенностями опухоли, может препятствовать реализации иммунной составляющей вируса Сендай. Не исключается возможность гиперстимуляции противоопухолевого иммунного ответа и развития аутоиммунных реакций. Все это препятствует получению выраженного специфического противоопухолевого ответа, что, в свою очередь, обусловливает относительно низкую эффективность способа-прототипа.
Таким образом, из уровня техники следует, что основной проблемой виротерапии является относительно низкая эффективность лечения при относительно высокой вероятности возникновения непрогнозируемых побочных эффектов. К числу проблем в этой сфере относятся также возможность развития противовирусного иммунного ответа и, как следствие, необходимость разработки более эффективных методов адресной доставки вируса в опухолевые очаги [5,2,1].
Решение технической проблемы в рамках изобретения достигается созданием персонализированного способа терапии онкологических заболеваний под контролем изменений индивидуальных показателей пациента в ходе лечения, обеспечивающего повышение эффективности лечения при снижении риска возникновения побочных эффектов.
Техническим результатом является обеспечение направленного синергического воздействия на биомишени, отражающие функциональную состоятельность Т-цитотоксических лимфоцитов периферической крови пациента, в условиях активной адресной доставки обладающего индивидуальной онколитической активностью вируса, как в первичный, так и во вторичные опухолевые очаги различной локализации, обусловливающего запуск цитопатической и иммунной составляющих вирусспецифических механизмов гибели раковых клеток и их стабильное сочетанное функционирование при различных индивидуально-вариабельных сценариях как реагирования опухолевых клеток, так и противоопухолевого иммунного ответа.
Технический результат достигается тем, что в способе терапии онкологических заболеваний, включающем введение пациенту композиции, содержащей вирус Сендай и фармацевтически приемлемый носитель, согласно изобретению, лечение включает три этапа, при этом предварительно определяют у пациента размер опухоли и метаболическую активность опухолевой ткани (далее по тексту - «морфо-функциональные показатели опухоли»), определяют в биологическом образце пациента процентное содержание Т-цитотоксических лимфоцитов субпопуляции CD8 периферической крови с рецепторами программированной клеточной смерти (PD-1) по отношению к общему числу лимфоцитов указанной субпопуляции (далее по тексту - «содержание PD-1-позитивных Т-лимфоцитов», «содержание CD3+CD8+PD-l+»). При содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов 40% и менее на первом этапе лечения воздействуют на поверхность кожи пациента импульсно-периодическим лазерным излучением при плотности мощности 0,5-5,0 Вт/см2, длительности импульсов 10-12 нс и частоте следования импульсов 5-20 кГц, а после завершения лазерного воздействия пациенту вводят композицию, содержащую вирус Сендай, внутрикожно в зону данного воздействия. Повторяют указанную процедуру (далее по тексту - «комплексная процедура») на 8-е сутки и через 4-5 суток после проведения второй комплексной процедуры считают первый этап лечения завершенным.
При содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% пациенту на первом этапе лечения вводят препарат БТШ70 в течение семи суток.
Через 1-2 суток после завершения первого этапа лечения повторно определяют содержание PD-1-позитивных Т-лимфоцитов и при его значении 40% и менее пациенту на втором этапе лечения проводят комплексные процедуры в течение последующих четырех недель при кратности их проведения один раз в неделю.
При значении указанного показателя более 40% дополнительно определяют в цитологических препаратах, полученных из биологического образца пациента, суммарное процентное содержание опухолевых клеток, имеющих вирус-индуцированные цитопатологические изменения, специфические для вируса Сендай, по отношению к общему количеству опухолевых клеток (далее по тексту - «содержание специфически измененных опухолевых клеток»).
При содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% и содержании специфически измененных опухолевых клеток более 20% пациенту на втором этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры и введение препарата БТШ70, и проводят терапию по указанной схеме в течение последующих четырех недель, причем кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, а препарат БТШ70 вводят после каждой из данных процедур.
При содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% и при содержании специфически измененных опухолевых клеток менее 6% пациенту на втором этапе лечения вводят препарат БТШ70 в течение последующих четырех недель.
Через 1-2 суток после завершения второго этапа лечения у пациента повторно определяют морфо-функциональные показатели опухоли и оценивают их количественное изменение в процентах по отношению к исходным показателям с учетом их направленности (далее по тексту, соответственно, - «уменьшение морфо-функциональных показателей», «увеличение морфо-функциональных показателей»), а также содержание PD-1-позитивных Т-лимфоцитов. При уменьшении размера опухоли более чем на 20% и метаболической активности опухолевой ткани более чем на 30% и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов 40% и менее пациенту на третьем этапе лечения проводят комплексные процедуры в течение последующих шести недель при кратности их проведения один раз в неделю.
При уменьшении размера опухоли более чем на 20% и метаболической активности опухолевой ткани более чем на 30% и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% пациенту на третьем этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры и введение препарата БТШ70, и проводят терапию по указанной схеме в течение последующих шести недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, а препарат БТШ70 вводят после каждой из данных процедур.
При уменьшении хотя бы одного из морфо-функциональных показателей, соответственно, размера опухоли - на 20% и менее, метаболической активности опухолевой ткани - на 30% и менее или их увеличении и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов 40% и менее пациенту на третьем этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры и введение препарата, содержащего позитрон-излучающий радионуклид, конъюгированный с опухоль-специфической субстанцией (далее по тексту - «опухоль-специфический позитрон-излучающий радиофармпрепарат», «ПОС-РФП»), и проводят терапию по указанной схеме в течение последующих шести недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, а ПОС-РФП вводят после комплексной процедуры.
При уменьшении хотя бы одного из морфо-функциональных показателей, соответственно, размера опухоли - на 20% и менее, метаболической активности опухолевой ткани - на 30% и менее или их увеличении и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% у пациента дополнительно определяют процентное содержание Т-цитотоксических лимфоцитов субпопуляции CD8 периферической крови с PD-1 и Tim-3 рецепторами по отношению к общему числу лимфоцитов указанной субпопуляции (далее по тексту - «содержание PD-1, Tim-3-дубль позитивных Т-лимфоцитов», «содержание CD3+CD8+PD-1+Tim-3+»), и при уменьшении хотя бы одного из морфо-функциональных показателей, соответственно, размера опухоли - на 20% и менее, метаболической активности опухолевой ткани - на 30% и менее или их увеличении, при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% и при содержании PD-1, Tim-3-дубль-позитивных Т-лимфоцитов 3% и менее пациенту на третьем этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры, введение препарата БТШ70 и введение ПОС-РФП в течение последующих шести недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, препарат БТШ70 вводят после каждой из данных процедур, а ПОС-РФП вводят после введения препарата БТШ70, сочетанного с проведением комплексной процедуры.
При уменьшении хотя бы одного из морфо-функциональных показателей, соответственно, размера опухоли - на 20% и менее, метаболической активности опухолевой ткани - на 30% и менее или их увеличении, при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% и при содержании PD-1, Tim-3-дубль-позитивных Т-лимфоцитов более 3% пациенту на третьем этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры, введение препарата БТШ70 и введение фракции липополисахарида продигиозана (далее по тексту - «ЛПС продигиозан») с молекулярной массой менее 10 кДа, обладающей способностью блокировать PD-1 и Tim-3 рецепторы Т-цитотоксических лимфоцитов субпопуляции CD8 периферической крови, полученной путем электронно-лучевой обработки ЛПС продигиозана с последующим фракционированием (далее по тексту - «фракция продигиозана-блокатор иммунных контрольных точек», «ФП-БИКТ», «заявленная ФП»), и проводят терапию по указанной схеме в течение последующих шести недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, препарат БТШ70 вводят после каждой из данных процедур, а ФП-БИКТ вводят после каждого введения препарата БТШ70, сочетанного с проведением комплексной процедуры.
В одном из вариантов осуществления изобретения в ходе комплексной процедуры воздействуют на поверхность кожи пациента импульсно-периодическим лазерным излучением в зеленом/желтом диапазоне, что достигается путем использования лазера на парах меди с длиной волны 510,6 и 578 нм при плотности мощности 1-5 Вт/см2 и времени экспозиции 1-5 мин.
В другом варианте заявленного способа в ходе комплексной процедуры воздействуют на поверхность кожи пациента импульсно-периодическим лазерным излучением в инфракрасном диапазоне на длинах волн 800-1500 нм, которое осуществляют с помощью полупроводникового инфракрасного лазера с длиной волны 830 нм при плотности мощности 1-4 Вт/см2 и времени экспозиции 1-4 мин.
Еще в одном варианте реализации заявленного способа в качестве биологического образца пациента, применяемого для определения содержания PD-1-позитивных Т-лимфоцитов, а также содержания PD-1, Tim-3-дублъ-позитивных Т-лимфоцитов, используют периферическую кровь пациента.
В другом варианте реализации изобретения в качестве биологического образца пациента, применяемого для получения цитологических препаратов, используют биопсийный материал. При этом, при наличии у пациента канцероматоза брюшины или/и плевры в качестве биопсийного материала используют аспирационную жидкость, полученную из брюшной или/и плевральной полостей пациента. При отсутствии указанной патологии в качестве биопсийного материала используют фрагмент солидной опухоли пациента, причем наиболее эффективным является применение пунктата, полученного при тонкоигольной аспирационной биопсии солидной опухоли пациента.
Еще в одном варианте осуществления предложенного способа содержание специфически измененных опухолевых клеток определяют в монослойных цитологических препаратах, полученных из биологического образца пациента.
В конкретном варианте выполнения заявленного способа определение в цитологических препаратах, полученных из биологического образца пациента, содержания специфически измененных опухолевых клеток включает подсчет многоядерных клеток, клеток с микроядрами, клеток с гигантскими ядрами и клеток с массивной вакуолизацией цитоплазмы с последующим суммированием их количества.
Еще в одном варианте осуществления заявленного способа в терапевтической схеме, применяемой, начиная со второго этапа лечения, и включающей комплексные процедуры и введение препарата БТШ70, пациенту вводят препарат БТШ70 через 1-1,5 ч после введения композиции, содержащей вирус Сендай.
В другом частном варианте осуществления изобретения в качестве препарата БТШ70 используют рчБТШ70 (далее по тексту - «Препарат-1 БТШ70»). При этом наиболее эффективным является применение Препарата-1 БТШ70 на первом этапе лечения в рамках терапевтической схемы, предусматривающей введение указанного препарата один раз в сутки внутривенно в дозе 0,005-0,05 мг/кг массы тела.
Еще в одном частном варианте реализации изобретения в качестве препарата БТШ70 используют производные рчБТШ70 пролонгированного действия. Наиболее эффективными является использование гибридных белков на основе рчБТШ70 и Fc-фрагмента человеческого IgG (далее по тексту - «Препарат-2 БТШ70»). При этом в терапевтических схемах, применяемых, начиная со второго этапа лечения, и включающих введение препарата БТШ70, пациенту вводят Препарат-2 БШ70 один раз в неделю внутривенно в дозе 0,005-0,05 мг/кг массы тела.
В конкретных вариантах реализации изобретения в качестве ПОС-РФП используют 11С-холин, 11С-метионин или 18F-холин (далее по тексту, соответственно, - «ПОС-РФП-1», «ПОС-РФП-2», «ПОС-РФП-3»).
В частном варианте осуществления заявленного способа в терапевтических схемах, применяемых на третьем этапе лечения и включающих введение ПОС-РФП, указанный препарат вводят пациенту внутривенно в дозе 250-500 МБк 1-2 раза в течение двух недель.
В другом частном варианте реализации изобретения в терапевтической схеме, применяемой на третьем этапе лечения и включающей комплексные процедуры и введение ПОС-РФП, указанный препарат вводят через 2-3 ч после введения композиции, содержащей вирус Сендай.
Еще в одном частном варианте осуществления заявленного способа в терапевтической схеме, применяемой на третьем этапе лечения и включающей комплексные процедуры, введение препарата БТШ70 и введение ПОС-РФП, пациенту вводят Препарат-2 БТШ70 один раз в неделю через 1-1,5 ч после введения композиции, содержащей вирус Сендай, а ПОС-РФП вводят через 1-1,5 ч после введения Препарата-2 БТШ70, сочетанного с проведением комплексной процедуры.
Также, в конкретном варианте осуществления изобретения в терапевтической схеме, применяемой на третьем этапе лечения и включающей комплексные процедуры, введение препарата БТШ70 и введение ФП-БИКТ, пациенту вводят Препарат-2 БТШ70 один раз в неделю через 1-1,5 ч после введения композиции, содержащей вирус Сендай, а ФП-БИКТ вводят после каждого введения Препарата-2 БТШ70, сочетанного с проведением комплексной процедуры.
Наиболее эффективным является использование ФП-БИКТ, в ходе получения которой электронно-лучевую обработку ЛПС продигиозана осуществляют с помощью широкоапертурных импульсных электронных пучков с энергией электронов 180-200 кэВ при поглощенной дозе 150 кГр.
В конкретном варианте реализации изобретения на третьем этапе лечения используют ФП-БИКТ, в ходе получения которой фракционирование осуществляют методом ультрафильтрации с применением мембран с порогом отсечения по молекулярной массе 10 кДа.
В частном варианте осуществления изобретения в терапевтической схеме, применяемой на третьем этапе лечения, ФП-БИКТ вводят пациенту внутривенно в дозе 0,005-0,01 мг/кг массы тела.
Выбор оптимальной тактики первого, второго и третьего этапа лечения осуществляли, базируясь на результатах предварительно проведенных авторами изобретения клинических исследований. В исследование были включены 64 пациента в возрасте 35-86 лет с распространенным и метастатическим раком
Для стимуляции противоопухолевого иммунного ответа всем пациентам проводили курсовое введение рчБТШ70, которое составляло 7 дней. По показаниям (в зависимости от результатов, полученных после завершения курса рчБТШ70) проводили дополнительную стимуляцию противоопухолевого иммунного ответа либо путем введения других лекарственных средств, либо путем пролонгирования курсового введения рчБТШ70. Все больные находились на амбулаторном лечении.
У 46 пациентов предварительно определяли содержание PD-1-позитивных опухоль-инфильтрующих Т-цитотоксических лимфоцитов (TIL) в субпопуляции CD8 (CD3+CD8+PD-1+), содержание PD-1, Tim-3-дубль-позитивных TIL в субпопуляции CD8 (CD3+CD8+PD-1+Tim-3+), содержание PD-1-позитивных Т-цитотоксических лимфоцитов в субпопуляции CD8 периферической крови (CD3+CD8+PD-1+), содержание PD-1, Tim-3-дубль-позитивных Т-цитотоксических лимфоцитов (содержание CD3+CD8+PD-1+Tim-3+), а также содержание перфорина и гранзима В (далее по тексту - «гранзим») в указанных лимфоцитах. Кроме того исследовали опухолевые клетки в опухолевом инфильтрате.
Клеточный материал - клетки асцитической жидкости и плеврального выпота от пациентов получали во время проведения терапевтических процедур по жизненным показаниям. Во время удаления асцитической жидкости и плеврального выпота часть удаляемой жидкой фракции помещали в стерильные емкости с гепарином. В лабораторных условиях отбирали надосадочную фракцию, а отстоявшуюся суспензию переносили в цитобакеты для цитоцентрифугирования. С помощью центрифуги CitoFuga (Германия) со скоростью 22g в течение 6 мин получали цитоцентрифугат на стандартном предметном стекле для цитопатологических и иммуноцитохимических исследований.
Для цитопатологических исследований препараты окрашивали азур II-эозином с одновременной фиксацией по Май-Грюнвальду для определения частоты встречаемости клеток с признаками апоптоза, метуоза и цитопатологических показателей (симпластов, многоядерных клеток, аутофагий, микронуклеации). В каждом препарате под иммерсией (увеличение 1000х, микроскоп Leica, Германия) было проанализировано по 500 клеток. Частоты встречаемости апоптоза и метуоза, а также всех видов цитопатологий выражали в процентах. Часть полученных цитоспиновых препаратов в дальнейшем были использованы для иммуноцитохимических окрашиваний.
Иммуноцитохимическое выявление рецепторов программированной смерти лимфоцитов PD-1 проводили методом ручного окрашивания в боксе-ламинаре. Фиксированные 96% этиловым спиртом, но неокрашенные цитоспиновые препараты еще раз дофиксировывали смесью спирт:ацетон в соотношении 1:1 в течение 10 мин и высушивали на воздухе.
Эндогенную пероксидазу в мазках инактивировали раствором 1% азида натрия (Merck) в течение 10 мин, затем промывали в двух сменах бидистиллированной воды и оставляли на 5 мин в Трис-NaCl буфере (pH 7,6). До нанесения свиной сыворотки (Novocastra) поле для иммуноцитохимического анализа обводили гидрофобным карандашом (DakoCytomation). По окончании инкубации с преиммунной сывороткой (30 мин при комнатной температуре) наносили моноклональные антитела к PD1 рецепторам лимфоцитов человека (Anti-PD1 antibody [NAT105], ab195885, Abeam, Англия) и инкубировали препараты в течение часа при 37°C. По завершении мечения первыми антителами препараты проводили в двух сменах буфера по 5 мин. Визуализацию PD1 проводили с помощью универсального кита ABC (Novocastra). Со вторыми антителами препараты инкубировали в течение 15 мин при комнатной температуре. Следующим этапом иммуноцитохимической процедуры, которому предшествовала отмывка препаратов в двух сменах буфера, являлось нанесение на 10 мин при комнатной температуре системы визуализации, состоящей из растворимого комплекса - авидин и биотинилированная пероксидаза хрена (DakoCytomation). В качестве субстрата для проявления иммуноцитохимической реакции использовали 3,3'-диаминобензидин (ДАБ) в формате от фирмы Novocastra. Затем препараты докрашивали гематоксилином.
Частоту встречаемости PD-1-позитивныхTIL (% от 100 клеток) определяли путем подсчета иммуноцитохимически окрашенных (включая слабо, умеренно и сильно окрашенных) лимфоцитов в ассоциациях с комплексами атипичных клеток. Ассоциированные с этими комплексами, но неокрашенные лимфоциты подсчитывались как PD-1-отрицательные.
Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови проводили методом проточной лазерной цитофлуориметрии в многоцветном анализе на проточных цитофлуориметрах с использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным антигенам на клетках иммунной системы. При этом использовали моноклональные антитела к CD8-FITC клон B9.11 (Кат. №А07756, Beckman-Coulter, США), к CD3-PE клон UCHT1 (Кат. №А07747, Beckman-Coulter, США), к CD279 (PD-1)-PC5.5 клон PD1.3 (Кат. №В36123, Beckman-Coulter, США), к CD366 (Tim-3)-APC, клон F-38-2E2 (Кат. №345011, Biolegend, США), к CD45-APC-Alexa Fluor 750 клон J.33 (Кат. №А79392, Beckman-Coulter, США). Пробоподготовку образца цельной крови в количестве 50 мкл, взятой из кубитальной вены натощак в вакутейнер с добавлением К3-ЭДТА, проводили согласно инструкциям фирм-производителей антител с последующим использованием реагента Optilyse С (Кат. №А11894, Beckman-Coulter, США) для лизиса эритроцитов и однократной отмывкой фосфатно-солевым буфером. Анализ пробы и негативного контроля по изотипу проводили на приборе Navios, оснащенном двумя диодными лазерами 488 и 635 нм (Beckman-Coulter, США). Подготовку образцов периферической крови и настройку протокола для анализа методом проточной цитометрии проводили согласно рекомендациям C.B. Хайдукова и др. [4ПР]. Анализировали 10000 лимфоцитов, выделенных на основании прямого, бокового светорассеяния и экспрессии панлейкоцитарного маркера CD45. Обработку цитофлуориметрических данных проводили при помощи программы Navios Software v. 1.2. Оценивали относительное количество Т-цитотоксических лимфоцитов (CD45+CD3+CD8+), экспрессирующих целевые маркеры CD279 (PD-1) и CD366 (Tim-3).
Содержание перфорина и гранзима в лимфоцитах периферической крови определяли следующим образом. Клеточный материал для исследований лимфоцитов получали из цельной гепаринизированной крови пациента. Для этого отстоявшуюся при комнатной температуре пробирку с кровью открывали и с помощью микродозатора забирали клеточный материал на границе плазмы и осевших эритроцитов, а затем переносили на предметные стекла для последующего иммуноцитохимического окрашивания на гранзим и перфорин. Иммуноцитохимические окрашивания осуществляли автоматизированным методом в автостейнере Bond (Leica, Германия) с применением первых антител к перфорину и гранзиму. Автоматический метод окрашивания в автостейнере осуществляли с использованием готовых наборов фирмы-производителя.
Микроскопирование полученных препаратов проводили на малом увеличении с использованием иммерсионного объектива (х40), на микроскопе Leica DM 4000 В (Leica Microsystems, Германия). Результаты иммуноцитохимической реакции на окрашенные автостейнером перфорин и гранзим в мазке обследуемого оценивались полуколичественным методом с подсчетом гистохимического индекса Histochemical Score (H-Score), разработанным McCarthy и соавт. [147]. Система подсчета включала интенсивность иммуногистохимической окраски, оцениваемой по 3-балльной шкале, и долю (%) окрашенных клеток и представляла собой сумму произведений процентов, отражающих долю клеток с различной интенсивностью окраски на балл, соответствующий интенсивности реакции. Интенсивность окраски: 0 - нет окрашивания, 1 - слабое окрашивание, 2 - умеренное и 3 - сильное окрашивание. Подсчет осуществляли по формуле:
где Pi - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью;
i - интенсивность окрашивания, выраженная в баллах от 0 до 3.
Подсчет проводили в трех когортах по 100 клеток в различных полях зрения. Результат HScore трактовался следующим образом: 0-10 баллов -низкий уровень перфорина (гранзима); 11-100 баллов - средний уровень перфорина (гранзима); 101-300 баллов - высокий уровень перфорина (гранзима).
Статистическую обработку данных проводили в соответствии с правилами вариационной статистики [6ПР]. Данные представляли в виде М±σ, где М - среднее арифметическое, σ - среднеквадратичное отклонение. Для оценки статистически значимых различий использовали критерий Стьюдента (t), критический уровень значимости (р) принимался меньшим или равным 0,05.
Результаты определений представлены в табл. 1-4.
Достижение обеспечиваемого изобретением технического результата обусловлено следующим.
На основании результатов многочисленных исследований доказано, что, с одной стороны, опухоль может развиваться в условиях абсолютно неизмененной иммунной системы, с другой стороны, даже на последних стадиях опухолевого процесса могут активироваться функции ряда клеток системы иммунитета, и наконец, бесспорным является факт возможности иммуностимуляции роста опухоли. Это позволило сделать вывод, что при опухолевом процессе изменения со стороны иммунологической системы во многих случаях обусловлены влиянием уже возникшей и развивающейся опухоли, т.е. вторичны [117].
Двойственную активность иммунной системы по отношению к опухоли отображает, в частности, концепция «иммунологического редактирования», согласно которой в процессе взаимодействия опухоли и организма-хозяина условно выделяют три фазы - элиминации, равновесия и уклонения. В фазе элиминации трансформированные клетки распознаются и уничтожаются с помощью клеток иммунной системы. «Дремлющее» состояние злокачественного новообразования, а также наличие длительной клинической ремиссии после проведенного лечения связывают с фазой равновесия, когда одновременно с формированием иммунной реакции происходит отбор вариантов опухолевых клеток со сниженной иммуногенностью, которым удается уклоняться от иммунного контроля, т.е. имеет место «иммунное редактирование» иммунологических свойств опухолевых клеток. На этой фазе иммунная система уже не может полностью уничтожить опухоль, но еще в состоянии эффективно ограничивать ее рост. В ходе третьей фазы опухолевые клетки, с помощью секретируемых ими продуктов, формируют благоприятное для себя клеточное микроокружение (далее по тексту - «КМ»), которое делает невозможным эффективное уничтожение аномальных клеток иммунной системой, создавая, тем самым, условия для метастазирования [107, 109].
Рассматривая гетерогенные изменения в системе иммунитета как одну из важных особенностей опухолевого процесса, предполагается [117], что на каждом этапе развития злокачественного новообразования необходимым является применение таких методов иммунологического исследования, которые отражают функциональное состояние клеток, формирующих противоопухолевую защиту.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1
Фракции ЛПС продигиозана получали следующим образом. Исходным продуктом служил ЛПС продигиозан - высокополимерный липополисахаридньш комплекс, выделяемый из микроорганизма - палочки Bacterium prodigiosum. Для целей заявленного изобретения использовали готовый препарат, поставленный ранее Производственным объединением «Мосмедпрепараты» имени Л.Я. Карпова (Россия) (далее по тексту - «препарат продигиозан»). Указанный препарат в количестве 8 мг активного вещества (во флаконе) растворяли в 8 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида (физраствора), после чего флакон с раствором в чашке Петри помещали в рабочую зону широкоапертурного линейного ускорителя электронов, который представлял собой экспериментальную лабораторную установку производства ФГУП «Научно-исследовательский институт электрофизической аппаратуры им. Д.В. Ефремова» / НИИЭФА им. Д.В. Ефремова/ (Россия), функционирующую в импульсном режиме, размер поля облучения 270×270, энергия электронов 180-200 кэВ и облучали при поглощенных дозах, варьировавших в диапазоне 50-250 кГр (с шагом 50 кГр). Промежуточные продукты, полученные в результате воздействия на препарат продигиозан электронных пучков при указанных поглощенных дозах, подвергали ультрафильтрации с использованием ультрафильтрационной кассетной системы Pellicon 2 Mini с мембранами Biomax® 10 (полиэфирсульфон) (Millipore, США) с получением целевых продуктов - фракций препарата продигиозана (далее по тексту -«ФП»). Выход ФП - целевого продукта при поглощенной дозе 150 кГр -составил 1,28 мг (16%).
Оптимальным считали режим электронно-лучевой обработки препарата продигиозана, обеспечивающий получение в качестве целевого продукта биологически активной ФП с выраженной биологической активностью, в частности, с наиболее выраженными защитными свойствами и сниженной токсичностью. Выбор указанного оптимального режима осуществляли с учетом данных высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), по результатам оценки токсичности различных доз ФП, а также анализа защитных свойств ФП в условиях экспериментального эндотоксического шока.
ВЭЖХ проводили с использованием Системы Dionex UltiMate® 3000 Rapid Separation LC (RSLC) (жидкостной хроматограф высокого давления), Zovbax С-18, 100×1 nm, size 1,8 μm (Thermo Scientific Dionex, США). В рамках ВЭЖХ исследовали воздействие электронного пучка при поглощенных дозах, варьировавших в диапазоне 50-250 кГр, на структуру целевых продуктов. Было установлено, что указанная электронно-лучевая обработка вызывала деградацию препарата продигиозана, приводящую к повышению содержания низкомолекулярных ФП (время удерживания менее 6 мин), которое коррелировало с увеличением поглощенной дозы, составляя, соответственно: 3,63 (препарат продигиозан); 10,8; 29,0; 43,6; 40,7; 37,5%, при поглощенных дозах: 0 (препарат продигиозан), 50, 100, 150, 200, 250 кГр.
Оценку токсичности анализируемых препаратов производили по выживаемости экспериментальных животных при введении различных доз препарата продигиозана и ФП, полученных путем воздействия на указанный препарат электронным пучком при поглощенных дозах, варьировавших в диапазоне 50-250 кГр (далее по тексту - «препараты ФП»). Предварительно определяли в эксперименте острую токсичность (в частности, по ЛД50) препарата продигиозана. При этом белым беспородным мышам массой 18-20 г вводили препарат продигиозан в физрастворе внутрибрюшинно из расчета 0,1 мл на 10 г массы тела животного. Дозы препарата продигиозана варьировали в диапазоне 1-8 мг/кг. Каждую дозу испытывали на группе из 6 животных (дозы свыше 8 мг/кг не испытывались). Выживаемость мышей определяли в течение 14 суток после введения исследуемого препарата. Затем экспериментально-расчетным путем с применением метода Литчфилда и Уилкоксона (модификация пробит-анализа) определяли ЛД50 препаратов ФП, после чего фиксировали выживаемость мышей (аналогично описанному выше для препарата продигиозана). При этом вводимые дозы препаратов ФП варьировали в диапазоне 1-80 мг/кг массы животного (при способе введения, аналогичном описанному выше для препарата продигиозана).
Результаты экспериментальных исследований выборочно представлены в табл. 14 и 15.
Из данных табл. 14 следует, что величина ЛД50, составляющая для препарата продигиозана 4 мг/кг, возрастала при его электронно-лучевой обработке, коррелируя с увеличением поглощенной дозы и достигая максимальных значений (62-64 мг/кг) для препаратов ФП, полученных при воздействии электронным пучком в дозах 150-250 кГр.
Данные, приведенные в табл.15, показывают, что полная выживаемость мышей была зарегистрирована при следующих дозах препаратов ФП (с учетом режима электронно-лучевой обработки): - 1-4 мг/кг - для фракций, полученных при использовании поглощенной дозы 50 кГр; 8-12 мг/кг - для фракций с поглощенной дозой 100 кГр; 12-16 мг/кг - для фракций с поглощенными дозами 150-200 кГр; 16-21 мг/кг - для фракций с поглощенной дозой 250 кГр.
Таким образом, анализ результатов оценки токсичности препаратов ФП с учетом данных хроматографических исследований показал, что наиболее эффективное снижение токсичности продигиозана (~ в 16 раз) имело место при его облучении электронным пучком в дозах 150-250 кГр, что коррелировало с наибольшим содержанием низкомолекулярных ФП.
Оценку защитных свойств анализируемых препаратов осуществляли с использованием модели эндотоксического шока, вызванного бактериальным эндотоксином, в качестве которого использовали ЛПС продигиозан. ЛПС продигиозан вводили мышам внутрибрюшинно в физрастворе (0,1 мл на 10 г массы тела животного) в дозе 2 ЛД50/мышь. Исследуемые препараты ФП вводили в дозе 0,1 ЛД50 за 1 ч до экспериментального эндотоксического шока. Каждую дозу испытывали на группе из 10 животных. В качестве контроля служили мыши (10 животных), которым за 1 ч до экспериментального эндотоксического шока вводили физраствор. Выживаемость мышей определяли в течение 14 суток после введения исследуемого препарата ФП.
Результаты эксперимента приведены в табл.16.
Данные табл.16 свидетельствуют о том, что ФП, полученная путем электронно-лучевой обработки препарата продигиозана при поглощенной дозе 150 кГр, обладала наиболее выраженными защитными свойствами при экспериментальном эндотоксическом шоке у мышей, вызванном бактериальным эндотоксином. ФП, полученные путем воздействия электронным пучком при меньших поглощенных дозах (100 и 50 кГр), обладали менее выраженным защитным эффектом. Это, по-видимому, связано с тем, что данные дозы облучения не позволяют обеспечить необходимое и достаточное содержание биологически активной фракции, определяющей наличие у препарата указанных свойств. Уменьшение защитных свойств ФП при увеличении дозы их электронно-лучевой обработки (200 и 250 кГр), может быть обусловлено, по мнению авторов изобретения, тем, что продукты радиохимической деградации ЛПС теряют биологическую активность, необходимую для предотвращения гибели животных при экспериментальном эндотоксическом шоке.
Сопоставление результатов оценки токсичности препаратов ФП, защитных свойств этих препаратов и данных хроматографических исследований позволяет сделать вывод, что оптимальным с точки зрения получения ФП с выраженной целевой биологической активностью является режим электронно-лучевой обработки препарата продигиозана при поглощенной дозе 150 кГр, что дает возможность считать указанную дозу оптимальной для получения заявленной ФП (ФП-БИКТ). Из этого следует также, что оптимальной дозой ФП в эксперименте является доза 12-16 мг/кг массы тела мыши.
Полученные результаты послужили основанием для проведения клинических исследований эффективности ФП, полученной с использованием оптимального режима электронно-лучевой обработки. Принимая во внимание фармакопейные дозы продигиозана (разовая доза для взрослых: 25-30 мкг, иногда до 50-100 мкг, т.е. от 0,00036-0,00043 до 0,00071-0,00143 мг/кг массы тела) и учитывая экспериментально установленный авторами изобретения коэффициент снижения (по сравнению с продигиозаном) токсичности заявленной ФП, составляющий (как было указано выше) 16, диапазон возможных терапевтических доз заявленной ФП был определен как 0,006-0,02 мг/кг массы. В клинических исследованиях на добровольцах было установлено, что предельно допустимая доза низкомолекулярной заявленной ФП составляет 0,02 мг/кг массы тела. При превышении указанной дозы в ряде случаев развивалась выраженная пирогенная реакция и коматоидное состояние. Таким образом, в качестве верхней границы диапазона терапевтических доз была принята величина 0,01 мг/кг массы тела.
Клинические исследования влияния различных доз заявленной ФП в диапазоне 0,025-0,01 мг/кг массы тела (вводили внутривенно на 250 мл физиологического раствора) на содержание CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, проведенные у больных с распространенным и метастатическим раком, показали, что, начиная с дозы 0,05 мг/кг значение указанного показателя достоверно отличалось от исходного значения. Таким образом, в качестве диапазона терапевтических доз был принят диапазон 0,005-0,01 мг/кг массы тела.
Пример 2
Больной Н., 73 года, масса тела 58 кг. Поступил на амбулаторное лечение с диагнозом: Распространенный метастатический рак предстательной железы. Четыре года тому назад выявлена аденокарцинома простаты. Принимал антиандрогены (флутамид, андрокур). Три года назад произведена радикальная простатэктомия. После операции уровень онкомаркера ПСА (простатический специфический антиген) - 0,8 нг/мл (норма 1-4 нг/мл). Через 9 месяцев после операции: уровень ПСА вырос до 420 нг/мл; выявлен метастаз в левую подвздошную кость (по данным компьютерной томографии /КТ/), что свидетельствовало о развитии рецидива заболевания.
В этой связи пациенту была назначена терапия заявленным способом (после подписания информированного согласия). Перед началом лечения проведено комплексное обследование больного (далее по тексту - «КО»), которое наряду с общеклиническими исследованиями включало специальный комплекс инструментальных, лучевых и лабораторных методов обследования, в том числе: ПЭТ-КТ; определение уровня онкомаркеров в сыворотке крови; определение содержания цитокинов в сыворотке крови (фактор некроза опухоли /TNF/, интерлейкин 6 /IL-6/, интерлейкин 10/IL-10/); иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови (определение абсолютного и относительного количества лимфоцитов с различными кластерами дифференцировки - CD) с последующим определением содержания PD-1-позитивных Т-лимфоцитов (CD3+CD8+PD-1+) и PD-1, Tim-3-дубль-позитивных Т-лимфоцитов (CD3+CD8+PD-l+Tim-3+), а также содержания перфорина и гранзима в лимфоцитах периферической крови.
ПЭТ-КТ выполняли с ПОС-РФП-1 (11C-холин) (предоставлен для исследований ФГБУ «Российский научный центр радиологии и хирургических технологий» МЗ РФ /РНЦРХТ/, Россия), который вводили пациенту внутривенно в дозе 269 МБк, по методике, принципы которой изложены, например в работах [1ПР, 2ПР, 3ПР]. ПЭТ-КТ выполняли на ПЭТ-КТ-томографе «Biograph» («Siemens», Германия), состоящем из компьютерного томографа и позитронно-эмиссионного томографа, совмещенных в единый диагностический комплекс. Использовали протокол «Whole body», включающий диагностическое КТ-сканирование с последующей ПЭТ. Анализ полученных данных проводили с учетом просмотра КТ, ПЭТ и ПЭТ/КТ изображений. КТ-томограммы оценивали визуально по трем проекциям с использованием мультиплоскостных реконструкций с обязательным измерением размеров очагов. Оценку ПЭТ данных осуществляли визуально с учетом интенсивности накопления ПОС-РФП по цветовым шкалам и полуколичественным методом с определением стандартизованного показателя захвата ПОС-РФП (Standart Uptake Value, SUV), представляющего собой отношение концентрации радиоактивности ПОС-РФП в зоне интереса/ к введенной активности ПОС-РФП, поделенной на массу тела, и характеризующего интенсивность накопления (гиперфиксации) ПОС-РФП в патологическом очаге и, следовательно, метаболическую активность данного очага. Для получения ПЭТ/КТ изображений применяли прикладной программный пакет «Fusion», позволяющий проводить совмещение ПЭТ и КТ данных в различном процентном соотношении. Основные характеристики патологических очагов включали: локализацию, контуры, размеры, соотношение с соседними структурами, наличие и интенсивность гиперфиксации ПОС-РФП. По результатам ПЭТ-КТ выявлены патологические очаги в двух ребрах и левой подвздошной кости с гиперфиксацией ПОС-РФП-1 размерами 1,3-4,2 см; SUV 2,7-4,0.
Содержание цитокинов в сыворотке крови (IL-6, IL-10, TNF), а также уровень онкомаркеров определяли с помощью коммерческих тест-систем для иммуноферментного анализа (ELISA) производства «Bender-Medsystems» (Австрия) в соответствии с инструкциями производителя. Уровень ПСА составил 468 нг/мл. Содержание TNF, IL-6, IL-10 - в пределах нормы.
Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови проводили методом проточной лазерной цитофлуориметрии в многоцветном анализе на проточных цитофлуориметрах с использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным антигенам на клетках иммунной системы, как это описано выше для выбора тактики лечения. Оценивали относительное количество Т-цитотоксических лимфоцитов (CD45+CD3+CD8+), экспрессирующих целевые маркеры CD279 (PD-1) и CD366 (Tim-3). По результатам проведенного анализа содержание CD3+CD8+PD-1+ составило 33,5%, а содержание CD3+CD8+PD-1+Tim-3+ - 0,7%.
Содержание перфорина и гранзима в лимфоцитах периферической крови путем иммуноцитохимического окрашивания на гранзим и перфорин, которое осуществляли автоматизированным методом в автостейнере Bond (Leica, Германия) с применением первых антител к перфорину и гранзиму, Автоматический метод окрашивания в автостейнере осуществляли с использованием готовых наборов фирмы-производителя.
Результаты иммуноцитохимической реакции на окрашенные автостейнером перфорин и гранзим в мазке обследуемого оценивались полуколичественным методом с подсчетом гистохимического индекса Histochemical Score (H-Score), разработанным McCarthy и соавт.[5ПР], как это было описано выше для выбора тактики лечения. По результатам выполненного анализа содержание перфорина и гранзима составило, соответственно, 257 и 241 (HScore).
С учетом полученного значения показателя (содержание CD3+CD8+PD-1+< 40%), являющегося определяющим для выбора тактики на первом этапе лечения заявленным способом, пациенту была назначена комплексная процедура, в ходе которой воздействовали на пять участков кожи пациента диаметром 5-10 мм лазером на парах меди «Систа-6» (НИИЭФА им. Д.В. Ефремова, Россия) (длина волны 510,6 и 578 нм, пиковые значения плотности мощности 10 кВт/см2, длительность импульсов 10-12 нс, частота следования импульсов 5-15 кГц) при плотности мощности 2 Вт/см2 и времени экспозиции лазерного излучения 3 мин.
Через 2 мин после завершения лазерного воздействия пациенту ввели вирус Сендай в составе фармацевтической композиции, в качестве которой использовали готовую фармацевтическую композицию для медицинских исследований (Charles River Laboratories Int. Inc., США) на базе штамма Сендай-Moscow (депонированного в коллекции клеточных культур АТСС, США под №РТА-13024), которая представляла собой суспензию с титром вируса 107,0-108,0 ТЦД50 (количество инфекционных единиц вируса, выраженных в тканевых цитопатогенных дозах; каждая из которых может вызвать гибель 50% клеток монослоя) в 1,0 мл аллантоисно-амниотической жидкости свободных от специфических патогенных контаминантов куриных эмбрионов (далее по тексту - «Композиция с вирусом Сендай»). 1,0 мл Композиции с вирусом Сендай разводили в 1,0 мл физраствора и вводили пациенту по 0,4 мл в каждую из пяти зон воздействия (суммарная доза вируса составила 107,0-108,0 ТЦД50). Комплексную процедуру проводили повторно через семь суток и через пять суток после проведения второй комплексной процедуры считали первый этап лечения завершенным.
Через сутки после завершения первого этапа лечения у пациента повторно определили содержание CD3+CD8+PD-1+, которое составило 31,2% (< 40%), в связи с чем на втором этапе лечения больному продолжено проведение комплексных процедур один раз в неделю в течение последующих четырех недель.
Через сутки после завершения второго этапа лечения пациенту повторно выполнена ПЭТ-КТ. В результате сопоставления размера каждого из патологических очагов и интенсивности гиперфиксации (накопления) в нем РФП-1 (SUV) с соответствующими исходными значениями выявлено уменьшение размера указанных очагов и снижение уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, на 48,4 и 74,3% (> 20% и > 30%). Содержание CD3+CD8+PD-1+ при повторном определении - 28,5% (< 40%). На основании полученных значений указанных показателей на третьем этапе лечения (в течение последующих шести недель) продолжена терапия по схеме второго этапа.
После завершения лечения (через 12 недель) проведено контрольное комплексное обследование пациента (далее по тексту - «ККО»), включающее ПЭТ-КТ; определение уровня онкомаркеров в сыворотке крови; определение содержания цитокинов в сыворотке крови (TNF, IL-6, IL-10); определение абсолютного и относительного количества лимфоцитов периферической крови с различными кластерами дифференцировки (CD) с последующим определением содержания CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+; а также содержания перфорина и гранзима в лимфоцитах периферической крови. По данным ПЭТ-КТ: выявлено исчезновение всех очагов патологического накопления РФП. Уровень ПСА снизился до 2,4 нг/мл; содержание TNF, IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 27,4% (< 40%) и 0,4% (< 3%), содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 263 и 244 (HScore). Результат лечения заявленным способом расценивался как «полный ответ» (CR) по шкалам RECIST и PERCIST.
ККО через 12 мес. после завершения лечения показало: очагов патологического накопления РФП-1 не выявлено (по данным ПЭТ-КТ); уровень ПСА - 0,001 нг/мл; содержание TNF, IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, -24,3% (< 40%) и 0,3% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 266 и 251 (HScore). Таким образом результаты ККО свидетельствовали об отсутствии прогрессирования заболевания.
Пример 3
Больная С., 34 года, масса тела 70 кг. Поступила на амбулаторное лечение с диагнозом: Распространенный метастатический рак яичника, T3N1M1, эндометриоидная низкодифференцированная аденокарцинома, канцероматоз брюшины и плевры, раковый асцит, двухсторонний плеврит, множественные метастазы в области малого таза, брюшной полости и средостения, распространенная лимфаденопатия. Заболевание выявлено 5 месяцев назад. До начала лечения уровень онкомаркера СА 125 4200 ед./мл (норма до 35 ед./мл). Прошла 5 курсов химиотерапии (платина + таксол) в сочетании с общей и локальной гипертермией. После завершения лечения проведено расширенное КО, дополнительно включавшее МРТ (магнитно-резонансную томографию), КТ, УЗИ брюшной полости. ПЭТ-КТ проводили аналогично примеру 2, при этом в качестве ПОС-РФП использовали 18F-ФДГ (предоставлена для исследований РНЦРХТ, Россия), которую вводили пациентке внутривенно в дозе 176 МБк. По данным MPT, КТ, УЗИ брюшной полости, ПЭТ-КТ - сохраняются множественные патологические очаги в брюшной и грудной полостях, средостении; по данным ПЭТ-КТ - размеры патологических очагов с гиперфиксацией 18F-ФДГ 1,0-6,2 см; SUV 1,2-4,6; нарастание асцита и ракового плеврита. Уровень онкомаркера СА 125 - 4000 ед./мл; содержание TNF - 1011 пг/мл (норма 0-50 пг/мл); содержание IL-6, IL-10, - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-l+Tim-3+, соответственно, - 28,1 и 0,9%; содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 259 и 243 (HScore). Результаты расширенного КО свидетельствовали об отсутствии положительного эффекта проведенного лечения.
Больной назначено лечение с применением заявленного способа (после подписания информированного согласия). С учетом полученного значения содержания CD3+CD8+PD-1+ (<40%), пациентке на первом этапе проведены две комплексные процедуры аналогично примеру 2. В ходе комплексных процедур лазерное воздействие осуществляли с использованием полупроводникового инфракрасного лазера (ФГБУН «Физико-технический институт имени А.Ф. Иоффе» РАН /ФТИ им. А.Ф. Иоффе /, Россия) (длина волны 830 нм, пиковые значения плотности мощности 20 кВт/см2, длительность импульсов 10 нс, частота следования импульсов 1-20 кГц) при плотности мощности 1 Вт/см2 и времени экспозиции излучения 4 мин.
Через сутки после завершения первого этапа лечения отмечено повышение содержания CD3+CD8+PD-1+ до 68,6%, в связи с чем для выбора оптимальной для следующего этапа тактики лечения у больной дополнительно определяли in vivo в цитологических препаратах, полученных из асцитической жидкости, содержание специфически измененных опухолевых клеток, которое составило 45,2%. По результатам цитологического исследования асцитической жидкости выявлено также развитие массивного апоптоза и некроза опухолевых клеток.
На основании полученных значений показателей - содержания CD3+CD8+PD-1+ > 40% и содержания специфически измененных опухолевых клеток > 20%, - больной была назначена терапевтическая схема, включающая комплексные процедуры и введение Препарата-2 БТШ70 в течение последующих четырех недель. Комплексные процедуры выполняли аналогично примеру 2 (кратность проведения - один раз в неделю), при этом применяемый лазер и режим воздействия соответствовали лазеру и режиму на первом этапе лечения. В качестве Препарата-2 БТШ70 использовали готовый препарат для медицинских исследований (ProMab Biotechnologies, Inc., США), который представлял собой гибридный белок на основе рчБТШ70 и Fc-фрагмента IgG, в виде раствора в буфере Трис-HCl (1,2 мг белка в 1 мл раствора) (далее по тексту - «Препарат-2 БШ70-МИ»). Расчетную дозу Препарата-2 БТШ70-МИ - 1,1 мг (0,015 мг/кг массы тела) разводили в 250 мл физраствора и вводили пациентке внутривенно через 1 ч после введения Композиции с вирусом Сендай. Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих четырех недель.
Через сутки после завершения второго этапа лечения у больной
выполнена ПЭТ-КТ аналогично примеру 2 с использованием 18F-ФДГ в дозе 176 МБк), которая выявила уменьшение размера метастатических очагов и снижение уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, - на 58,2 и 65,4% (> 20% и > 30%). Содержание CD3+CD8+PD-1+ при повторном определении - 29,1% (< 40%), на основании чего на третьем этапе была назначена терапевтическая схема, предусматривающая проведение комплексных процедур, которые выполняли аналогично примеру 2 (применяемый лазер и режим воздействия соответствовали описанным для первого этапа лечения настоящего примера). Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих шести недель (кратность проведения - один раз в неделю).
Результаты ККО после завершения лечения (через 12 недель) показали следующее. По данным ПЭТ-КТ выявлено уменьшение размеров метастатических очагов и снижение уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, - на 68,4 и 75,2% (> 30% и > 50%). Уровень онкомаркера CA125 снизился до 36 ед./мл; содержание TNF - 78 пг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 31,5% (< 40%) и 0,9% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 259 и 244 (HScore). Цитологическое исследование показало, что 82,0% опухолевых клеток в асцитической жидкости имели цитопатологические изменения (клетки с признаками апоптоза, клетки с массивной вакуолизаией цитоплазмы). Результат лечения предложенным способом расценивался как «частичный ответ» (PR) по шкалам RECIST и PERCIST.
По результатам ККО через 12 мес.после завершения лечения установлено: уменьшение размеров метастатических очагов и снижение уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, - на 69,3 и 81,6% (> 30%); уровень СА 125 - 48 ед./мл; содержание TNF - 62 пг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 36,5% (< 40%) и 1,7% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 253 и 238 (HScore). При цитологическом исследовании в асцитической жидкости опухолевые клетки не определялись. Таким образом, результаты ККО свидетельствовали об отсутствии прогрессирования заболевания.
Пример 4
Больной Б., 55 лет, масса тела 60 кг. Поступил на амбулаторное лечение с диагнозом: Распространенный метастатический светлоклеточный рак почки, мультифокальное вторичное поражение костных структур черепа, грудины, лопаток, плечевых костей, ребер, грудных, поясничных и крестцовых позвонков, костей таза. Патологические переломы пятого ребра справа, Th6, L3, L4 позвонков. В течение шести месяцев получал сутент и эксдживой, затем в течение пяти месяцев - ниволюмаб в сочетании с капецитабином и авастином. Затем в течение двух месяцев проведен курс лечения кометриком, после чего выявлено прогрессирование метастатических изменений в костях скелета, развитие канцероматоза плевры, левостороннего плеврита.
Больному назначено лечение заявленным способом (после подписания информированного согласия). Перед началом лечения проведено КО пациента аналогично примеру 2. ПЭТ-КТ выполняли с использованием П-РФП-4 (18F-ФДГ) (предоставлен РНЦРХТ, Россия), который вводили больному в дозе 270 МБк. По данным ПЭТ-КТ: размеры патологических очагов с гиперфиксацией П-РФП-4 (в пятом ребре справа, Th6, L3, L4 позвонках, грудине, лопатках, костях таза) - 0,8-3,5 см, SUV 1,2-3,1. Содержание TNF - 980 пг/мл, IL-6 - 158 пг/мл (норма 6-40 пг/мл), IL-10, - 1,2 пг/мл (норма -менее 9,1 пг/мл); содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 64,6 и 1,4%; содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 5,2 и 3,3 (HScore).
На основании полученного значения содержания CD3+CD8+PD-1+ (> 40%) пациенту на первом этапе лечения был назначен Препарат-1 БТШ70, в качестве которого использовали готовый препарат для медицинских исследований (ProMab Biotechnologies, Inc., США), представляющий собой рчБТШ70 в виде раствора в буфере Трис-HCl (1,2 мг белка в 1 мл раствора) (далее по тексту - «Препарат-1 БТШ70-МИ»). Расчетную дозу Препарата-1 БТШ70-МИ - 1,8 мг (0,03 мг/кг массы тела) разводили в 250 мл физраствора и вводили пациенту внутривенно в течение семи суток один раз в сутки.
Через двое суток после завершения первого этапа лечения у больного сохранялся высокий уровень CD3+CD8+PD-1+- 59,3% (> 40%), в связи с чем определили содержание специфически измененных опухолевых клеток in vitro в цитологических препаратах, полученных из плевральной жидкости.
Определение содержания специфически измененных опухолевых клеток проводили культуральным методом. Использовали среду DMEM с добавлением фетальной телячьей сыворотки. Аспирационную жидкость центрифугировали при 1000 об/мин в течение 7 мин с последующим посевом в подготовленные для культивирования 6-луночные пластиковые планшеты, содержащие среду DMEM с добавлением 20%-ной фетальной сыворотки (20% от объема среды). Все планшеты выдерживали до появления роста клеток при температуре 37°C, после чего накрывали прикрепившиеся клетки покровным стеклом. Инкубировали в CO2-инкубаторе в течение 3-х-4-х сут. (до образования монослоя). Затем в растущие культуры добавляли вирус Сендай, растворенный в натрий-фосфатном буфере (PBS) (в дозе по 0,5 мл 5×1010 клеток на лунку). Через 72 ч после добавления вируса клеточный рост в культуре останавливали. Выросшие в культуре клетки (прокультивированные с вирусом) снимали с подложки планшета раствором Трипсин:Версен. Полученную клеточную суспензию, содержащую среду DMEM, центрифугировали в центрифужных пробирках в течение 10 мин при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость сливали, после чего в центрифужные пробирки добавляли по 1,0 мл PBS. Полученную клеточную суспензию в PBS переносили в цитобакеты, заправленные предметными стеклами, и центрифугировали в цитоцентрифуге (жидкостная цитология) в течение 10 мин при 1000 об/мин. Предметные стекла вынимали из цитобакетов, высушивали на воздухе, фиксировали 96%-ным этиловым спиртом и окрашивали азур2-эозином по Романовскому-Гимзе.
Цитологическое исследование проводили в окрашенных центрифугатах под иммерсией в проходящем свете с использованием микроскопа Leika DM 4000 (фирма Leika, Германия). Было проанализировано 500 клеток. В клеточных популяциях определяли частоты встречаемости многоядерных клеток (симпластов), клеток с микроядрами, клеток с гигантскими ядрами и клеток с массивной вакуолизацией цитоплазмы. После проведенного цитологического исследования определяли суммарную частоту встречаемости клеток с указанными видами аномалий (в % от общего количества клеток). Содержание специфически измененных опухолевых клеток составило 78,1% (> 20%).
Полученные результаты обусловили назначение больному на втором этапе лечения терапевтической схемы, включающей комплексные процедуры, которые осуществлялись аналогично примеру 2, и введение Препарата-2 БТШ70-МИ. В ходе комплексных процедур лазерное воздействие осуществляли с использованием лазера на парах меди «Систа-6» (НИИЭФА им. Д.В. Ефремова, Россия) при плотности мощности 3 Вт/см2 и времени экспозиции излучения 2 мин. Препарат-2 БТШ70-МИ вводили пациенту один раз в неделю внутривенно в дозе 2,4 мг (0,04 мг/кг массы тела) через 1,5 ч после введения Композиции с вирусом Сендай. Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих четырех недель.
Через двое суток после завершения второго этапа лечения у больного выполнена ПЭТ-КТ аналогично описанной выше в настоящем примере (в рамках КО до начала лечения), которая выявила уменьшение размера метастатических очагов и уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, - на 38,2 и 56,7% (> 20% и > 30%). Содержание CD3+CD8+PD-1+ - 51,3% (> 40%). В этой связи на третьем этапе больному была продолжена терапия, включающая комплексные процедуры и введение Препарата-2 БТШ70-МИ в дозе 2,4 мг (0,04 мг/кг массы тела) аналогично схеме второго этапа. Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих шести недель.
ККО через 12 недель лечения показало следующее: размер метастатических очагов и их метаболическая активность уменьшились (по данным ПЭТ-КТ), соответственно, на 55,6 и 64,8% (> 30% и > 30%); содержание TNF- 78 пг/мл, IL-6 - 34 пг/мл, IL-10 - 68 пг/мл; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+ составили, соответственно, 33,2% (< 40%) и 1,2% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 253 и 240 (HScore); в плевральной жидкости опухолевые клетки не определялись (по результатам цитологического исследования). Результат лечения предложенным способом расценивался как «частичный ответ» (PR) по шкалам RECIST и PERCIST.
Через 2 мес.после завершения лечения заявленным способом по данным ККО прогрессирования заболевания не выявлено, опухолевые клетки в плевральной жидкости не определялись.
Пример 5
Больной М., 68 лет, масса тела 70 кг. Поступил на амбулаторное лечение с диагнозом: Нейроэндокринный рак верхней доли правого легкого (T1aN1M1b), метастазы в лимфатических узлах средостения, левом и правом легких, печени. Болен в течение 2,5 лет; проведено шесть курсов химиотерапии (карбоплатин + этопозид), иринотекан (6 мес.), метотрексат + эндоксан (метрономная терапия - последние 3 мес.), рефнот. По данным КТ и МРТ: прогрессирование заболевания - увеличение размеров метастазов в средостении, легких, печени и развитие ракового плеврита.
Больному назначено лечение заявленным способом (после подписания информированного согласия). Предварительно проведено КО пациента аналогично примеру 1. ПЭТ-КТ выполняли с использованием П-РФП-2 (11C-метионина) (предоставлен РНЦРХТ, Россия), который вводили пациенту в дозе 350 МБк, По данным ПЭТ-КТ выявлены множественные патологические очаги в легких, средостении, печени с гиперфиксацией П-РФП-2 размерами 2,4-4,6 см; SUV 1,8-3,9; признаки канцероматоза плевры. Уровень онкомаркера РЭА (раково-эмбриональный антиген) -48,5 пг/мл (норма - менее 6,3 пг/мл); содержание TNF - 810 пг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 58,4 и 1,9%; содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 7,9 и 5,1 (HScore).
Учитывая полученное значение содержания CD3+CD8+PD-1+ (>40%), на первом этапе лечения пациенту было назначено введение Препарата-1 БТШ70-МИ в дозе 1,1 мг (0,015 мг/кг массы тела), при этом продолжительность, кратность и способ введения указанного препарата были аналогичны описанным для первого этапа лечения примера 4.
Через сутки после завершения первого этапа лечения содержание CD3+CD8+PD-1+составило 50,8% (> 40%), в связи с чем дополнительно определяли аналогично примеру 4 in vitro в цитологических препаратах, полученных из плевральной жидкости больного, содержание специфически измененных опухолевых клеток, которое составило 34,2% (> 20%).
Полученные результаты обусловили назначение больному на втором этапе терапевтической схемы, включающей комплексные процедуры, которые проводились аналогично примеру 2, и введение Препарата-2 БТШ70-МИ. В ходе комплексных процедур лазерное воздействие осуществляли с использованием лазера на парах меди «Систа-6» (НИИЭФА им. Д.В. Ефремова, Россия) при плотности мощности 5 Вт/см2 и времени экспозиции излучения 1 мин. Препарат-2 БТШ70-МИ, вводили пациенту один раз в неделю внутривенно в дозе 1,8 мг (0,025 мг/кг массы тела) через 1 ч после введения Композиции с вирусом Сендай. Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих четырех недель.
Через сутки после завершения второго этапа лечения у больного выполнена ПЭТ-КТ аналогично описанной выше в настоящем примере (в рамках КО до начала лечения), которая выявила уменьшение размера первичной опухоли и метастатических очагов и снижение уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, на 8,4 и 12,5% (< 20% и < 30%). Содержание CD3+CD8+PD-1+- 34,2% (< 40%). В этой связи, на третьем этапе больному была назначена схема терапии, включающая комплексные процедуры и введение ПОС-РФП-2 (11C-метионина) один раз в неделю внутривенно в дозе 350 МБк через 2 ч после введения Композиции с вирусом Сендай. Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих шести недель.
После завершения третьего этапа лечения получены следующие результаты ККО: размер первичной опухоли и метастатических очагов и их метаболическая активность уменьшились (по данным ПЭТ-КТ), соответственно, на 44,5 и 69,1% (> 30% и > 30%); уровень РЭА - 9,8 пг/мл; содержание TNF - 102 пг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+ составили, соответственно, 28,7% (< 40%) и 0,6% (<3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно - 261 и 242 (HScore). Результат лечения заявленным способом расценивался как «частичный ответ» (PR) по шкалам RECIST и PERCIST.
Через 3 мес. после завершения лечения предложенным способом по данным ККО прогрессирования заболевания не выявлено, опухолевые клетки в плевральной жидкости не определялись (по результатам цитологического исследования).
Пример 6
Больная С, 68 лет, масса тела 62 кг. Поступила на амбулаторное лечение с диагнозом: Смешанный гепатоцеллюлярный-холангиоцеллюлярный метастатический рак печени. Первично-распространенный рак неустановленной первичной локализации с множественными метастазами в брюшной полости и органах малого таза. Выявлен два года назад. Через два месяца после выявления произведена циторедуктивная операция - экстирпация опухоли в печени, резекция толстой кишки, удалено 11 опухолевых очагов размером до 6 см из брюшной полости и малого таза. Онкомаркер АФП (альфа-фетопротеин) при выписке - 5300 ед./мл (норма - до 7 ед./мл).
Через 1 мес.после операции больной назначено лечение заявленным способом (после подписания информированного согласия). Предварительно пациентке было проведено КО аналогично примеру 1, дополнительно включающее МРТ с гепатотропным препаратом. По данным МРТ: резидуальные очаги по большой кривизне желудка, брыжейке толстой кишки, в межпетельном пространстве, на уровне запирательной ямки справа и параректально слева размерами 0,6-1,4 см. С помощью ПЭТ-КТ, проведенной аналогично примеру 1, с использованием ПОС-РФП-1 (11C-холин) (предоставлен РНЦРХТ, Россия) в дозе 250 МБк, выявлены патологические очаги с гиперфиксацией ПОС-РФП-1 размерами 0,5-1,3 см; SUV 1,6-2,4. Уровень АФП 4850 ед./мл; содержание TNF - 840 пг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 63,7 и 2,1%; содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 5,3 и 3,4 (HScore).
На основании полученного значения содержания CD3+CD8+PD-1+ (> 40%), на первом этапе лечения пациентке было назначено введение Препарата-1 БТШ70-МИ в дозе 1,9 мг (0,03 мг/кг массы тела), при этом продолжительность, кратность и способ введения указанного препарата были аналогичны описанным для первого этапа лечения примера 4.
Через сутки после завершения первого этапа лечения содержание CD3+CD8+PD-1+ составило 59,5% (> 40%), в связи с чем для выбора оптимальной для следующего этапа тактики лечения было дополнительно установлено содержание специфически измененных опухолевых клеток -4,1% (< 6%), которое определяли аналогично примеру 4 in vitro в цитологических препаратах, полученных из операционного материала больной. Биопсийный материал из солидной опухоли дезагрегировали до получения клеточной суспензии стандартным методом с использованием смеси Трипсин:Версен (1:1). Полученную суспензию центрифугировали при 1000 об/мин в течение 7 мин. Полученный осадок переносили в подготовленные для культивирования 6-луночные пластиковые планшеты, содержащие среду DMEM с добавлением 20%-ной фетальной сыворотки (20% от объема среды), и жидкость центрифугировали при 1000 об/мин в течение 7 мин с последующим посевом в 6-луночные пластиковые планшеты. Дальнейший ход определения аналогичен описанному в примере 4.
На основании значений указанных показателей на втором этапе лечения пациентке было назначено введение Препарата-2 БТШ70-МИ один раз в неделю внутривенно в дозе 2,2 мг (0,035 мг/кг массы тела. Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих четырех недель.
Через сутки после завершения второго этапа лечения у больной выполнена ПЭТ-КТ аналогично описанной выше в настоящем примере (в рамках КО до начала лечения), которая выявила уменьшение размера метастатических очагов и уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, на 9,4% (< 20%) и 31,7% (> 30%). Содержание CD3+CD8+PD-1+- 34,2% (< 40%). В этой связи, на третьем этапе больному была назначена схема терапии, включающая комплексные процедуры и введение ПОС-РФП-2 (11C-метионина). В ходе комплексных процедур лазерное воздействие осуществляли с использованием полупроводникового инфракрасного лазера (ФТИ им. А.Ф. Иоффе, Россия) при плотности мощности 2 Вт/см2 и времени экспозиции излучения 2 мин. П-РФП-2 вводили пациентке один раз в неделю внутривенно в дозе 350 МБк через 3 ч после введения Композиции с вирусом Сендай. Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих шести недель.
Результаты ККО после завершения лечения (через 12 недель) показали следующее: размер метастатических очагов и их метаболическая активность уменьшились (по данным ПЭТ-КТ), соответственно, на 58,0 и 70,2% (> 30%); уровень АФП 180 ед./мл; содержание TNF- 118 пг/мл, содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 29,5% (< 40%) и 0,7% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно - 262 и 241 (HScore). Результат лечения заявленным способом расценивался как «частичный ответ» (PR) по шкалам RECIST и PERCIST.
Через 1 год 9 мес. после завершения лечения заявленным способом по результатам ККО, дополнительно включающего МРТ, прогрессирования заболевания не выявлено. По данным МРТ: размеры резидуальных очагов в брюшной полости уменьшились в 1,9-2,2 раза; признаков избыточной целлюлярности не выявлено. По данным ПЭТ-КТ: уменьшение размеров метастатических очагов и снижение уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, - на 92,4% и 95,1%. Уровень АФП - 48 ед./мл; содержание TNF - 92 пг/мл; содержание EL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 28,1% (< 40%) и 0,3% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно, -258 и 241 (HScore).
Пример 7
Больной К., 59 лет, масса тела 55 кг. Поступил на амбулаторное лечение с диагнозом: Гормонально-резистентный распространенный метастатический рак предстательной железы. Четыре года назад произведена радикальная простатэктомия. Через два года после операции выявлен рецидив заболевания с развитием множественных метастазов в ребра, крестец, кости таза, позвоночник. Проведено 5 курсов химиотерапии (досетаксел + маситиниб) - без эффекта. Масса тела уменьшилась на 37 кг. Не может себя обслуживать самостоятельно.
Через два месяца после завершения химиотерапии больному назначено лечение с использованием заявленного способа (после подписания информированного согласия). Перед началом лечения проведено КО пациента аналогично примеру 2. ПЭТ-КТ выполняли с использованием П-РФП-3 (18F-холин) (предоставлен ФГБУ «Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина» Минздрава РФ / РОНЦ им. Н.Н. Блохина /, Россия), который вводили больному в дозе 500 МБк. По данным ПЭТ-КТ выявлены множественные патологические очаги с гиперфиксацией П-РФП-3 в ребрах, крестце, костях таза и позвоночнике размерами 0,8-2,2 см; SUV 1,4-3,6. Уровень ПСА - 512 нг/мл; содержание TNF - 911 пг/мл; содержание IL-6, IL-10, - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 78,1 и 1,9%; содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 3,1 и 2,3 (HScore).
На основании полученного значения содержания CD3+CD8+PD-1+ (> 40%), на первом этапе лечения пациенту было назначено введение Препарата-1 БТШ70-МИ в дозе 2,2 мг (0,04 мг/кг массы тела), при этом продолжительность, кратность и способ введения указанного препарата были аналогичны описанным для первого этапа лечения примера 3.
Через двое суток после завершения первого этапа лечения содержание CD3+CD8+PD-1+ оставалось высоким - 69,0% (> 40%), в связи с чем у больного дополнительно определили (аналогично примеру 4) in vitro в цитологических препаратах, полученных из биоптата метастатического очага, содержание специфически измененных опухолевых клеток, которое составило 38,1% (> 20%).
На основании полученных результатов на втором этапе больному назначена терапевтическая схема, включающая комплексные процедуры, которые проводили аналогично примеру 2, и введение Препарата-2 БТШ70-МИ. В ходе комплексных процедур лазерное воздействие осуществляли с использованием полупроводникового ИК лазера (ФТИ им. А.Ф. Иоффе, Россия) при плотности мощности 4 Вт/см2 и времени экспозиции излучения 1 мин. Препарат-2 БТШ70-МИ, вводили пациенту один раз в неделю внутривенно в дозе 2,8 мг (0,05 мг/кг массы тела) через 1,5 ч после введения Композиции с вирусом Сендай. Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих четырех недель.
Через двое суток после завершения второго этапа лечения у больного выполнена ПЭТ-КТ аналогично описанной выше в настоящем примере (в рамках КО до начала лечения), которая выявила уменьшение размера метастатических очагов с гиперфиксацией ПОС-РФП-3 и уровня их метаболической активности в среднем, соответственно, на 8,3 и 6,2% (< 20%). Содержание CD3+CD8+PD-1+ - 64,1% (> 40%). В этой связи, дополнительно определяли у больного содержание CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, которое составило 0,9% (< 3%). На основании полученных результатов определения (по трем показателям) на третьем этапе больному была назначена схема терапии, включающая комплексные процедуры, которые проводили аналогично примеру 2 (применяемый лазер и режим воздействия соответствовали описанным для второго этапа лечения настоящего примера), введение Препарата-2 БТШ70-МИ и введение П-РФП-3 (18F-холина). Препарат-2 БТШ70-МИ, вводили пациенту один раз в неделю внутривенно в дозе 2,8 мг (0,05 мг/кг массы тела) через 1,5 ч после введения Композиции с вирусом Сендай. П-РФП-3 вводили один раз в две недели внутривенно в дозе 500 МБк через 1 ч после введения Препарата-2 БТШ70-МИ.
По результатам ККО после завершения лечения (через 12 недель) выявлено следующее: размер метастатических очагов и их метаболическая активность уменьшились (по данным ПЭТ-КТ с П-РФП-3) в среднем, соответственно, на 78,4 и 85,0% (> 30%); уровень ПСА снизился до 8,6 нг/мл; содержание TNF- 96 пг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, 34,3% (< 40%) и 0,4% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно - 257 и 242 (HScore). Результат лечения заявленным способом расценивался как «частичный ответ» (PR) по шкале RECIST.
Через 1 год 2 мес.после завершения лечения заявленным способом по результатам ККО прогрессирования заболевания не выявлено. По данным ПЭТ-КТ: дальнейшее уменьшение размеров метастатических очагов и снижение уровня их метаболической активности - в среднем, соответственно, на 54,2% и 65,5%. Уровень ПСА - 5,3 нг/мл; содержание TNF - 5,6 пг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 29,4% (<40%) и 0,5% (<3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 262 и 240 (HScore). Масса тела увеличилась на 13,5 кг, может самостоятельно себя обслуживать.
Пример 8
Больная В., 67 лет, масса тела 52 кг. Поступила на амбулаторное лечение с диагнозом: Немелкоклеточный периферический рак легкого, 3В стадия, канцероматоз плевры. Опухоль выявлена 10 месяцев назад. Проведено девять курсов химиотерапии (гемцитабин/карбоплатин/алимта) - без эффекта. По результатам КТ выявлено новообразование в верхушке левого легкого диаметром 6,5 см. Наличие выраженной дыхательной недостаточности не позволило осуществить оперативное лечение. Химиотерапия прекращена из-за развития связанной с ней почечной недостаточности.
После прекращения химиотерапии у пациентки проведено КО аналогично примеру 1. ПЭТ-КТ выполняли с использованием П-РФП-4 (18F-ФДГ) (предоставлен РНЦРХТ, Россия), который вводили больной в дозе 240 МБк. По данным ПЭТ-КТ: размер патологического новообразования с гиперфиксацией П-РФП-4 8,5 см; SUV 3,6; выявлены признаки канцероматоза плевры. Уровень онкомаркера Cyfra 21-1(цитокератина 19 фрагмент) в крови 17,4 нг/мл (норма - до 3,3 нг,мл); содержание TNF -768 нг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 67,3 и 6,4%; содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 2,3 и 1,5 (HScore).
Больной назначено лечение заявленным способом (после подписания информированного согласия). На основании полученного значения содержания CD3+CD8+PD-1+ (> 40%) на первом этапе назначено введение Препарата-1 БТШ70-МИ в дозе 1,0 мг (0,02 мг/кг массы тела), при этом продолжительность, кратность и способ введения указанного препарата были аналогичны описанным для первого этапа лечения примера 3.
Через сутки после завершения первого этапа лечения, учитывая повышенное содержания CD3+CD8+PD-1+ 59,5% (> 40%), у больной дополнительно произведено исследование in vitro (аналогично примеру 4) цитологических препаратов, полученных из плевральной жидкости, с определением содержания специфически измененных опухолевых клеток, которое составило 4,5% (< 6%).
На основании полученных результатов определения на втором этапе лечения пациентке было назначено введение Препарата-2 БТШ70-МИ один раз в неделю внутривенно в дозе 1,6 мг (0,03 мг/кг массы тела). Терапию по указанной схеме проводили в течение последующих четырех недель.
После завершения второго этапа лечения (через сутки) у больной выполнена ПЭТ-КТ аналогично описанной выше в настоящем примере (в рамках КО до начала лечения), которая выявила уменьшение размера патологического новообразования и уровня его метаболической активности в среднем, соответственно, на 11,5 и 15,7% (< 20%) Содержание CD3+CD8+PD-1+ - 45,7% (> 40%). Полученные значения данных показателей привели к необходимости дополнительного определения содержания CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, которое составило 8,7% (> 3%). С учетом значений трех указанных показателей на третьем этапе пациентке была назначена схема терапии, включающая комплексные процедуры (аналогично примеру 2), введение Препарата-2 БТШ70-МИ и введение ФП. В ходе комплексных процедур лазерное воздействие осуществляли с использованием лазера на парах меди «Систа-6» (НИИЭФА им. Д.В. Ефремова, Россия) при плотности мощности 1 Вт/см2 и времени экспозиции излучения 5 мин. Препарат-2 БТШ70-МИ вводили пациентке один раз в неделю внутривенно в дозе 1,6 мг (0,03 мг/кг массы тела) через 1 ч после введения Композиции с вирусом Сендай. ФП водили внутривенно в дозе 0,4 мг (0,007 мг/кг массы тела) сразу после введения Препарата-2 БТШ70-МИ. Указанная схема терапии применялась в течение последующих шести недель.
ККО, выполненное у больной через 12 недель лечения, показало следующее. Выявлено уменьшение размера патологического очага и его метаболической активности (по данным ПЭТ-КТ) в среднем, соответственно, на 78,2 и 85,7% (> 30%); уровень Cyfra 21-1 - 3,1 нг/мл; содержание TNF -45 нг/мл; содержание IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ - 29,1% (< 40%); содержание CD3+CD8+PD-1+Tim-3+ - 1,4% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 275 и 251. В плевральной жидкости 88,6% опухолевых клеток имели цитопатологические изменения (по результатам цитологического исследования).
Через 1 год 2 мес. после завершения лечения заявленным способом по результатам ККО прогрессирования заболевания не выявлено. По данным ПЭТ-КТ: дальнейшее уменьшение размеров патологического очага и снижение уровня его метаболической активности - в среднем, соответственно, на 87,1% и 91,5%; признаков канцероматоза плевры не отмечено. Уровень Cyfra 21-1 - 2,8 нг/мл (в пределах нормы); содержание TNF, IL-6, IL-10 - в пределах нормы; содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, соответственно, - 34,8% (< 40%) и 1,9% (< 3%); содержание перфорина и гранзима, соответственно, - 252 и 246 (HScore); в плевральной жидкости опухолевые клетки не определялись (по результатам цитологического исследования).
Заявленный способ был использован для лечения 42 пациентов в возрасте 33-76 лет с распространенным и метастатическим раком, в том числе: с раком простаты - 10 человек, с колоректальным раком - 7 чел., с раком почки - 4 чел., с раком шейки матки - 2 чел., с раком матки - 2 чел., с раком поджелудочной железы - 5 чел., с раком яичника - 3 чел., с раком молочной железы - 2 чел., с немелкоклеточным раком легкого - 5 чел., с раком печени - 1 чел., с раком желудка - 1 чел. Все больные находились на амбулаторном лечении. Установлено, что при использовании иммуноонкологических препаратов (в том числе и препаратов на основе вирусов) на развитие противоопухолевого ответа требуется определенное время. Более того, после начала их применения опухолевые очаги могут даже увеличиться, но, как правило, это является проявлением инфильтрации опухоли иммунокомпетентными клетками. Однако затем развивается эффект и метастазы достаточно быстро уменьшаются или исчезают совсем [115]. В этой связи, оценку эффективности заявленного способа терапии проводили не только по шкале RECIST /версия 1.1/ (с применением критериев оценки ответа основных и дополнительных очагов опухолевого поражения /роста/) но также дополнительно использовали принятую в иммунотерапии PERCIST, базовыми показателями которой являются изменение размера опухоли и метаболической активности опухолевой ткани (SUV) в сравнении с исходными (ПЭТ- критерии опухолевого ответа). В качестве дополнительных критериев эффективности противоопухолевого иммунного ответа использовали критерии шкалы i-RECIST- у пациентовопределяли содержание CD3+CD8+PD-1+, и содержание CD3+CD8+PD-1+Tim-3+»);содержание перфорина и гранзима, а также динамику уровня онкомаркеров периферической крови [62,63,64,65].
Группу сравнения составили 77 больных в возрасте 36-73 лет с распространенным и метастатическим раком, леченных по методике способа-прототипа, в том числе: с раком простаты - 11 чел., с колоректальным раком - 13 чел., с раком почки - 8 чел., с раком шейки матки - 7 чел., с раком матки - 5 чел., с раком поджелудочной железы - 6 чел., с раком молочной железы -7 чел., с немелкоклеточным раком легкого - 13 чел., с раком желудка - 7 чел. Все больные группы сравнения лечились амбулаторно. Эффективность лечения оценивали по шкале RECIST, определяли также динамику уровня онкомаркеров периферической крови. такие дополнительные критерии как содержание CD3+CD8+PD-1+ и CD3+CD8+PD-1+Tim-3+, содержание перфорина и гранзима, ПЭТ-критерии - у пациентов группы сравнения не использовались.
Результаты сравнения эффективности терапии с использованием заявленного способа и способа-прототипа приведены в табл. 18.
Источники информации
1. Новые возможности регуляции противоопухолевого иммунного ответа / Кадагидзе З.Г. и др. // Злокачественные опухоли. 2015. №1. С. 24-30.
2. Иммунотерапия опухолей, основанная на блокировке иммунологических контрольных «точек» («чекпойнтов») / А.В. Боголюбова и др. // Медицинская иммунология. 2015. Т. 17, №5. С. 395-406. URL: http://mimmun.ru/mimmun/article/view/919/808 (дата обращения 28.04.2017).
3. Румянцев А.А., Тюляндин С.А. Эффективность ингибиторов контрольных точек иммунного ответа в лечении солидных опухолей Практическая онкология 2016. - Т. - 17. - №2. - с. 74-89
4. Dempke W.C.M, Fenchel K., Uciechowski P., Dale S.P. Second- and third-generation drugs for immuno-oncology treatment-The more the better? // Eur. J. Cancer. 2017. - vol. 74. - P.: 55-72.
5. Romano G1, Gawlinski A2. New frontiers in oncology: Immune checkpoint inhibitors in combination therapy // Drugs Today (Barc). - 2017. - vol. 53. - №2. - p.: 103-115
6. Milano G1. Resistance to immunotherapy: clouds in a bright sky. // Invest New Drugs. 2017 Apr 12. doi: 10.1007/s10637-017-0456-x
7. Champiat S., Lambotte O., Barreau E. et al. Management of immune checkpoint blockade dysimmune toxicities: a collaborative position paper. // Ann Oncol - 2016. - vol. 27. - №4. - p.: 559-574
8. Kostine M., Chiche L., Lazaro E. et al. Opportunistic autoimmunity secondary to cancer immunotherapy (OASI): An emerging challenge. // Rev Med Interne. 2017 Feb 14. pii: S0248-8663(17)30025-5. doi: 10.1016/j.revmed.2017.01.004.
9. Liu J. et al. Assessing Immune-Related Adverse Events of Efficacious Combination Immunotherapies in Preclinical Models of Cancer. // Cancer Res. - 2016. - vol. 76. - №18. - p: 5288-53301. Lu X.et al.
10. Effective combinatorial immunotherapy for castration-resistant prostate cancer. // Nature. 2017. - vol. 543. - №7647. - p.: 728-732.
11. Kumar V. et al. Current Diagnosis and Management of Immune Related Adverse Events (irAEs) Induced by Immune Checkpoint Inhibitor Therapy. // Front Pharmacol. 2017 Feb 8;8:49. doi: 10.3389/fphar.2017.00049. eCollection 2017
12. Ryan J.M. et al. Enhancing the safety of antibody-based immunomodulatory cancer therapy without compromising therapeutic benefit: Can we have our cake and eat it too?// Expert Opin Biol Ther. - 2016.. - vol. 16.. - №5.. - p: 655-674.
13. Гужова И.В. и соавт. Рекомбинантный белок теплового шока 70 кДа как стимулятор противоопухолевого иммунитета: от клеточных моделей до кли-нических испытаний // Успехи молекул, онкол. - 2016. - Т. 3. - №4. - С. 54-55.
14. Ибрагимова М.К, Циганов М.М., Литвяков Н.В. Естественная и вызванная химиотерапией клональная эволюция опухолей // Биохимия. - 2017. - Т. 82. - №4. - С. 413-425. doi: 10.1134/S0006297917040022.
15. Fidler I.J. Biological heterogeneity of cancer: implication to therapy // Hum Vaccin Immunother. - 2012. - vol. 8. - №8. - p: 1141-1142.
16. Schmid Т.Е., Multhoff G. Radiation-induced stress proteins - the role of heat shock proteins (HSP) in antitumor responses // Curr Med Chem. - 2012. - vol. 19. - №12. - p.: 1765-1770.
17. Jing W. et al. Combined immune checkpoint protein blockade and low dose whole body irradiation as immunotherapy for myeloma. // J Immunother Cancer. - 2015. - vol. 3. - №1. - p:2-4.
18. De Ruysscher D., Reynders K., Van Limbergen E., Lambrecht M. Radiotherapy in combination with immune checkpoint inhibitors. // Curr Opin Oncol. 2017 Jan 12. doi: 10.1097/CCO.0000000000000352
19. Ebner DK et al. The Immunoregulatory Potential of Particle Radiation in Cancer Therapy. // Front Immunol. 2017 Feb 6; 8:99. doi: 10.3389 / fimmu. 2017. 00099
21. Chen B. et al. Targeting Negative Surface Charges of Cancer Cells by Multi-functional Nanoprobes // Theranostics. - 2016. - vol. 6. - №11. - p.: 1887-1898.
22. Carter H.B., Coffey D.S. Cell surface charge in predicting metastatic potential of aspirated cells from the Dunning rat prostatic adenocarcinoma model. // J. Urol. - 1988.. - vol. 140.. - №1.. - p.:173-175.
23. Wakabayashi N. et al. A pH-dependent charge reversal peptide for cancer targeting. // Eur Biophys J. - 2017. - vol. 46. - №2. - p: 121-127.
24. Jaini S., Dadachova E. FDG for therapy of metabolically active tumors. // Semin Nucl Med. - 2012 - vol. 42. - №3. - p.: 185-189
25. Vilgelm A.E., Johnson D.B., Richmond A. Combinatorial approach to cancer immunotherapy: strength in numbers // J. Leukoc. Biol - 2016. - vol. 100 - №2. - P.: 275-290.
26. Ilett E. Et al. Prime-boost using separate oncolytic viruses in combination with checkpoint blockade improves anti-tumour therapy // Gene Ther. - 2017. - vol. 24. - №1. - p.: 21-30.
27. Hardcastle J. Et al. Immunovirotherapy with measles virus strains in combination with anti-PD-1 antibody blockade enhances antitumor activity in glioblastoma treatment. // Neuro Oncol. - 2016 Sep 23. pii: now179
28. Liu C. et al. Combination of measles virus virotherapy and radiation therapy has synergistic activity in the treatment of glioblastoma multiforme // Clin. Cancer Res. - 2007. - vol. 13. - №23. - p.: 7155-7165.
29. Martinov Т., Fife B.T. Fractionated radiotherapy combined with PD-1 pathway blockade promotes CD8 T cell-mediated tumor clearance for the treatment of advanced malignancies // Ann Transl Med. - 2016. - vol. 4. - №4. - p.: 82.
30. Шевцов М.А., Хачатрян В.А., Оникиенко С.Б., Маргулис Б.А. Молекулярные шапероны и бактериальный полисахарид как иммуномодулирующие факторы в противоопухолевой терапии новообразований головного мозга // Нейрохирургия и неврология детского возраста - 2011. - Т.2. - №11. - С. 73-84
31. Rommelfanger D.M. et al. The efficacy versus toxicity profile of combination virotherapy and TLR immunotherapy highlights the danger of administering TLR agonists to oncolytic virus-treated mice. // Mol Ther. - 2013. - vol. 21. - №2. - p: 348-357.
32. Isambert N et al. Phase I study of ОМ-174, a lipid A analogue, with assessment of immunological response, in patients with refractory solid tumors. // BMC Cancer. 2013 Apr 2; 13: 172. doi: 10.1186/1471-2407-13-172
33. Iribarren K et al. Trial Watch: Immunostimulation with Toll-like receptor agonists in cancer therapy. // Oncoimmunology. 2015 Sep 2; 5(3): e1088631.
34. Kuo W.T., Lee T.C., Yu L.C. Eritoran Suppresses Colon Cancer by Altering a Functional Balance in Toll-like Receptors That Bind Lipopolysaccharide // Cancer Res. - 2016. - vol. 76. - №16. - p.: 4684-4695.
35. Kabeer M. Potentiating immune response against cancer // US Pat. Appl. №20170007697, Filed Sep 26, 2016; Publ. Jan 12, 2017, 18 pp.
36. Morisrishima A., Inagawa H. Clinical Effects of Orally Administered Lipopolysaccharide Derived from Pantoea agglomerans on Malignant Tumors. // Anticancer Res - 2016. - vol. 36. - №7. - p.: 3747-3751.
37. Nerkar D.P. et al Radiation induced alterations in the endotoxin of S. Typhimurium // Int. J. Radiat. Biol. Relat. Stud. Phys. Chem. Med. - 1977. - vol. 32. - №3, - p.: 259-266.
38. L. Radio-detoxified endotoxin activates natural immunity: a review // Pathophysiology. - 2005. - vol. 12. - №2. - p.: 85-95.
39. Gowdy K.M. et al. Impaired CD8(+) T cell immunity after allogeneic bone marrow transplantation leads to persistent and severe respiratory viral infection // Transpl. Immunol. - 2015. - vol. 32. - №1. - p.: 51-60.
40. Kohlhapp F.J. et al. Non-oncogenic Acute Viral Infections Disrupt Anticancer Responses and Lead to Accelerated Cancer-Specific Host Death. // Cell. Rep. - 2016. - vol. 17 - №4. - p.: 957-965.
41. Tong Y., Qian W.. Targeting cancer stem cells with oncolytic virus // Stem Cell Investig. 2014 Nov 28; 1:20 doi: 10.3978/j.issn.2306-9759.2014. 11. 01
42. Ilett E.J. et al. Internalization of oncolytic reovirus by human dendritic cell carriers protects the virus from neutralization // Clin Cancer Res. - 2011. - vol. 17. - №9. - p.: 2767-2776.
43. Матвеева O.B. и соавт. Механизмы онколитического действия парамиксовируса Сендай // Acta Naturae - 2015. - Т.7. - №2(25). - С. 6-17.
44. Wieten L. et al. IL-10 is critically involved in mycobacterial HSP70 induced suppression of proteoglycan-induced arthritis // PLoS One. - 2009. - vol. 4. - №1: e4186. doi: 10.1371/journal.pone.0004186. Epub 2009 Jan 14.
45. Katoh H. et al. Heat Shock Protein 90 Ensures Efficient Mumps Virus Replication by Assisting with Viral Polymerase Complex Formation. // J Virol. 2017 Feb 28; 91(6). pii: e02220-16. doi: 10.1128/JVI.02220-16. Print 2017 Mar 15
46. Tang D. Et al. The antiinflammatory effects of heat shock protein 72 involve inhibition of high-mobility-group box 1 release and proinflammatory function in macrophages // J Immunol. 2007 - vol. 179. - №2. - p.: 1236-1244.
47. Hasegawa A. et al. Relationship between HMGB1 and tissue protective effects of HSP72 in a LPS-induced systemic inflammation model // J. Surg. Res. - 2011. - vol. 169. - №1. - p.: 85-91
48. Lopez V.et al. Bacterial Hsp70 (DnaK) and mammalian Hsp70 interact differently with lipid membranes // Cell Stress Chaperones. - 2016. - vol. 21. - №4. - p.: 609-616.
49. Dorfman D.M. et al. The phosphatidylserine receptors, T cell immunoglobulin mucin proteins 3 and 4, are markers of histiocytic sarcoma and other histiocytic and dendritic cell neoplasms // Hum Pathol. - 2010. - vol. 41. - №10. - p.: 1486-1494.
50. Патент РФ №2615346 Терапевтическая вакцина против рака // Хамар Б.М. и соавт. Заявл. 27.02.2012 Опубл. 04.04.2017, 15 с.
51. Suzuki М. Partners in Crime: Combining Oncolytic Viroimmunotherapy with Other Therapies // Mol Ther. - 2017. - vol. 25. - №4. - p: 836-838.
52. Chen X. Et al. A novel laser vaccine adjuvant increases the motility of antigen presenting cells. // PLoS One. - 2010. - vol. 29. - №5(10): e13776. doi: 10.1371/journal. pone. 0013776.
53. Kimizuka Y. et al., Semiconductor diode laser device adjuvanting intradermal vaccine Vaccine. - 2017. - vol. 35. - №18. - p.: 2404-2412.
54. Katoh H.et al. Heat Shock Protein 90 Ensures Efficient Mumps Virus Replication by Assisting with Viral Polymerase Complex Formation // J. Virol. - 2017. - vol. 91. - №6. - pii: e02220-16. doi: 10.1128/JVI.02220-16.
55. Huang F. et al. Oncolytic viruses against cancer stem cells: A promising approach for gastrointestinal cancer // World J. Gastroenterol. - 2016. - vol. 22. - №35. - p.: 7999-8009.
56. Tang D., Lotze M.T. Tumor immunity times out: TIM-3 and HMGB1.// Nat Immunol. -2012. - vol. 13. - №9. - p.: 808-810.
57. Huang AC et al. T-cell invigoration to tumour burden ratio associated with anti-PD-1 response. // Nature. 2017 Apr 10. doi: 10.1038 / nature22079. [
58. Jie H.B. et al. Increased PD-1+ and TIM-3+TILs during Cetuximab Therapy Inversely Correlate with Response in Head and Neck Cancer Patients // Cancer Immunol Res. 2017 Apr 13. doi: 10.1158/2326-6066.CIR-16-0333.
59. Wu T. et al. HMGB1 overexpression as a prognostic factor for survival in cancer: a meta-analysis and systematic review. // Oncotarget. - 2016. - vol. 7. - №31. - p.: 50417-50427.
60. Lea J. et al. Detection of phosphatidylserine-positive exosomes as a diagnostic marker for ovarian malignancies: a proof of concept study // Oncotarget. - 2017. - vol. 8. - №9. - p.: 14395-14407
61. Kamphorst A.O. Proliferation of PD-1+ CD8 T cells in peripheral blood after PD-1-targeted therapy in lung cancer patients. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2017. - pii: 201705327. doi: 10.1073/pnas. 1705327114.
62. Wahl R.L. et al. From RECIST to PERCIST: Evolving Considerations for PET response criteria in solid tumors.// J. Nucl. Med. 2009 May; 50 Suppl 1:122S-150S. doi: 10.2967/jnumed.108.057307
63. Wolchock J.D. et al. Guidelines for the Evaluation of Immune Therapy Activity in Solid Tumors: Immune-Related Response Criteria // Clin. Cancer Res. - 2009.- vol. 15. - №23. - p.: 7412-7420
64. Ades F., Yamaguchi N. WHO, RECIST, and immune-related response criteria: is it time to revisit pembrolizumab results? // ecancer 2015, 9:604 DOI: 10.3332 /ecancer. 2015.604
65. Braschi-Amirfarzan M. et al. Immune-Checkpoint Inhibitors in the Era of Precision Medicine: What Radiologists Should Know // Korean J. Radiol. - 2017. - vol. 18. - №1. - p.42-53
66. Hu C.Y. et al. Interleukin-2 reverses CD8(+) T cell exhaustion in clinical malignant pleural effusion of lung cancer. // Clin. Exp. Immunol. - 2016. - vol.186. - №1. - p.: 106-114.
67. Kieler M. et al. Case report: impressive response to pembrolizumab in a patient with mismatch-repair deficient metastasized colorectal cancer and bulky disease // ESMO Open. - 2016 - vol. 1. - №6: e000084. doi: 10.1136/esmoopen-2016-000084. eCollection 2016.
68. Chubachi S. et al. A Case of Non-Small Cell Lung Cancer with Possible "Disease Flare" on Nivolumab Treatment. // Case Rep Oncol Med. 2016; 2016: 1075641. doi: 10.1155/2016/1075641. Epub 2016 Dec 27.
69. Kato S. et al. Hyper-progressors after Immunotherapy: Analysis of Genomic Alterations Associated with Accelerated Growth Rate // Clin. Cancer Res. 2017 Mar 28. pii: clincanres.3133.2016. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-16-3133.
70. Shayan S. et al. Adaptive resistance to anti-PD1 therapy by Tim-3 upregulation is mediated by the PI3K-Akt pathway in head and neck cancer.// Oncoimmunology - 2016. - vol. 6. - №1: el261779. doi: 10.1080 / 2162402Х.2016. 1261779. eCollection 2017
71. Li J. et al. Tumor-infiltrating Tim-3+ T cells proliferate avidly except when PD-1 is co-expressed: Evidence for intracellular cross talk // Oncoimmunology.- 2016. - vol.5. - №10: e1200778. eCollection 2016
72. Du W. Et al. TIM-3 as a Target for Cancer Immunotherapy and Mechanisms of Action. // Int. J. Mol. Sci - 2017 - vol. 18. - №3 - pii: E645. doi: 10.3390/ijms 18030645
73. Kim J.E. et al. Combination Therapy with Anti-PD-1, Anti-TIM-3, and Focal Radiation Results in Regression of Murine Gliomas // Clin. Cancer Res. - 2017. - vol. 23. - №1. - p.: 124-136.
74. Zhang Y. et al. TIM-3 is a potential prognostic marker for patients with solid tumors: A systematic review and meta-analysis // Oncotarget. - 2017. - doi: 10.18632/oncotarget. 15954.
75. Zhao X., Subramanian S. Intrinsic Resistance of Solid Tumors to Immune Checkpoint Blockade Therapy // Cancer Res. - 2017. - vol. 77. - №4. - p.: 817-822.
76. Son B. et al. The role of tumor microenvironment in therapeutic resistance // Oncotarget. - 2017. - vol. 8. - №3. - p.: 3933-3945.doi: 10.18632/ oncotarget. 13907.
77. Shoham J. et al. Augmentation of tumor cell immunogenicity by viruses - an approach to specific immunotherapy of cancer // Nat. Immun. Cell Growth. Regul. - 1990. - №9. - №3. - p.: 165-172.
78. Von Hoegen P1, Weber E, Schirrmacher V. Modification of tumor cells by a low dose of Newcastle disease virus. Augmentation of the tumor-specific T cell response in the absence of an anti-viral response // Eur. J. Immunol. - 1988. - vol. 18. - №8. - p.: 1159-1166.
79. Schirrmacher V. et al. Long-term survival of a breast cancer patient with extensive liver metastases upon immune and virotherapy: a case report // Immunotherapy - 2015. - vol. 7. - №8. - p.: 855-860. doi: 10.2217/imt.15.48.
80. Schirrmacher V. et. al. Long-term remission of prostate cancer with extensive bone metastases upon immuno- and virotherapy: A case report // Oncol Lett. - 2014. - vol. 8. - №6. - p.: 2403-2406.
81. Larimer BM1 et al. Granzyme В PET Imaging as a Predictive Biomarker of Immunotherapy Response // Cancer Res. - 2017. - vol. 77. - №9. - p.: 2318-2327. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-16-3346.
82. Malinzi J., Sibanda P., Mambili-Mamboundou H. Analysis of virotherapy in solid tumor invasion // Math. Biosci. - 2015. - vol. 263. - p.: 102-110. doi: 10.1016/j.mbs.2015.01.015.
83. Takeishi S1, Nakayama KI1. To wake up cancer stem cells, or to let them sleep, that is the question // Cancer Sci. - 2016. - vol. 107. - №7. - p.: 875-881.
84. Bhatia A., Kumar Y2. Cancer stem cells and tumor immunoediting: putting two and two together // Expert Rev. Clin. Immunol. - 2016. - vol. 12. - №6. - p.: 605-607.
85. Bartosh T.J. Cancer cell cannibalism and the SASP: Ripples in the murky waters of tumor dormancy // Mol Cell Oncol. - 2016. - vol. 4. - №1. - : e1263715. doi: 10.1080/23723556.2016.1263715. eCollection 2017.
86. Mittal D1, Gubin MM2, Schreiber RD2, Smyth MJ3 // New insights into cancer immunoediting and its three component phases-elimination, equilibrium and escape // Curr Opin Immunol. 2014 Apr; 27: 16-25. doi: 10.1016/j.coi.2014.01.004. Epub 2014 Feb 14
87. Ribatti D. The concept of immune surveillance against tumors. The first theories // Oncotarget. - 2017. - vol. 8 - №4. - p.: 7175-7180
88. Desrichard A., Snyder A., Chan T.A. // Cancer Neoantigens and Applications for Immunotherapy // Clin. Cancer Res. - 2016 - vol. 22. - №4. - p.: 807-812.
89. Bartoch T.J. et al. Cancer cells enter dormancy after cannibalizing mesenchymal stem/stromal cells (MSCs).// Proc. Natl. Acad. Sci. U S A - 2016. Vol. 113. - №42. - p.: E6447-E6456.
90. Andreeva N.V. et al. Recombinant HSP70 and mild heat shock stimulate growth of aged mesenchymal stem cells.// Cell Stress Chaperones. - 2016. - vol. 21. - №4. - p.: 727-733.
91. Shaik S. et al. Inducing Heat Shock Proteins Enhances the Stermness of Frozen- Thawed Adipose Tissue-Derived Stem Cells // Stem Cells Dev. - 2017. - vol. 26. - №8. - p.: 608-616.
92. Lei F. Et al. Directed differentiation of induced pluripotent stem cells towards T lymphocytes // J. Vis. Exp. - 2012. - vol. 6.: e3986. doi: 10.3791/3986.
93. Kaneko S.. In Vitro Generation of Antigen-Specific T Cells from Induced Pluripotent Stem Cells of Antigen-Specific T Cell Origin // Methods Mol. Biol. - 2016. - №1393. - p.: 67-73. doi: 10.1007/978-1-4939-3338-9_6
94. Brauer P.M. et al. T Cell Genesis: In Vitro Veritas Est? // Trends Immunol. - 2016. - vol. 37. - №12. - p.: 889-901.
95. Janciak M. et al. Cancer immunotherapy: how low-level ionizing radiation can play a key role // Cancer Immunol. Immunother. - 2017. - doi: 10.1007/ s00262-017-1993-z.
96. Schaue D. A Century of Radiation Therapy and Adaptive Immunity // Front Immunol.- 2017. - vol. 8. - p: 431. doi: 10.33 89/fimmu.2017.00431. eCollection 2017.
97. Flowers Ch. et al. Intratumoral G100 to induce systemic immune responses and abscopal tumor regression in patients with follicular lympoma // ASCO Proc. - 2017. Abstr №7537.
98. Baig A.M., Khan N.A., Abbas F. Eukaryotic cell encystation and cancer cell dormancy: is a greater devil veiled in the details of a lesser evil?. // Cancer Biol. Med. - 2015. - vol. 12. - №1. - p.: 64-67.
99. Вирусы болезни Ньюкасла как перспективный агент для создания онколитических препаратов / Л.В. Шестопалова и др. // Вестник НГУ. Серия: Биология, клиническая медицина. 2012. Том 10, вып. 2. С. 232-242.
100. Горохов М.С., Корнеев М.Л. Основные виды противоопухолевых вакцин // электронный журнал Росмедпортал.ком / Rosmedportal.com Эпидемиология, гигиена и санитария / Профилактика 2010. Том 1. URL: http://www.rosmedportal.com/index.php?option=com_content&view=article&id=119 (дата обращения 09.10.2015).
101. Кешелава В.В. Противоопухолевые вакцины: возможности и перспективы применения / Вестник МЕДСИ. 2009. №5 (сентябрь-ноябрь). С. 16-23.
102. Онколитические вирусы: достижения и проблемы / С.В. Нетесов и др. // Медицинский алфавит. Эпидемиология и санитария. 2011. №3. С. 26-33.
103. Механизмы онколитического действия парамиксовируса Сендай / О.В. Матвеева и др. // Acta Naturae. 2015. Том 7, №2(25). С. 100-111.
104. Лэрд Г., Махони Д., Штойдль Д. Вирусы против рака / В мире науки. 2015. [01] январь. С. 102-108. URL: http://spkurdyumov.ru/uploads //2014/12/virusy-protiv-raka.pdf (дата обращения 24.08.2014).
105. Альтернативное лечение рака // сайт Лаборатория инновационных биомедицинских технологий. URL: http://www.limbt.com/page/64/ (дата обращения 28.04.2017).
106. Уразова Л. Н., Кузнецова Т. И. Онколитические вирусы в онкологии // Сибирский онкологический журнал. 2003. Выпуск №4. С. 28-35. URL: http://cyberleninka.ru/article/n/onkoliticheskie-virusy-v-onkologii (дата обращения 28.04.2017)
107. Леенман Е.Е., Мухина М.С.Клеточное микроокружение злокачественных опухолей и его значение в их прогнозе // Вопросы онкологии. 2013. Том 59, №4. С. 444-452. URL: http://www.niioncologii.ru/sites/default/files/files/20143101131816.pdf (дата обращения 28.04.2017).
108. Иммунофенотип лимфоцитов инфильтрирующих опухоль (TIL) у онкологических больных / Т.Н. Заботина и др.// Медицинская иммунология. 2015. Т. 17. Специальный выпуск. С. 159-160. URL: https://www.google.ru/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&ved=0ahUKEwjzxsbxgMnTAhWJFiwKHfS1AYsQFggnMAE&url=http%3A%2F%2Fmim mun.ru%2Fmimmun%2Farticle%2Fdownload%2F869%2F782&usg=AFQjCNHI-sFbcr-ycpySeaWlnB9q0Vf3GA (дата обращения 28.04.2017).
109. Ярилин А.А. Иммунология. М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010. 752 с. (С. 543-553).
110. Иммунотерапия опухолей, основанная на блокировке иммунологических контрольных «точек» («чекпойнтов») / А.В. Боголюбова и др. // Медицинская иммунология. 2015. Т. 17, №5. С. 395-406. URL: http://mimmun.ru/mimmun/article/view/919/808 (дата обращения 28.04.2017).
111. Моисеенко В.М., Волков Н.М. Важнейшие события в онкологии в 2014 году: Иммунотерапия злокачественных опухолей. // Практическая онкология. 2015. Т. 16, №1. С. 6-12. URL: http://practical-oncology.ru/assets/articles/62.pdf (дата обращения 28.04.2017).
112. Тюляндин С.А. Ингибиторы контрольных точек иммунного ответа доказали свое преимущество перед доцетакселом в качестве второй линии лекарственного лечения больных немелкоклеточным раком легкого// Новости онкологии. [Интернет-портал Российского общества клинической онкологии RosOnko Web]. Дата публикации: 08.08.2016. URL: http://www.rosoncoweb.ru/news/oncology/2016/08/08-1/ (дата обращения 28.04.2017).
113. Тюляндин С.А. Пембролизумаб выигрывает соревнование у химиотерапии больных немелкоклеточным раком легкого с гиперэкспрессией PD-L1 // Новости онкологии. [Интернет-портал Российского общества клинической онкологии RosQnko Web]. Дата публикации: 03.11.2016. URL: http://www.rosoncoweb.ru/news/oncology/2016/11/03/ (дата обращения 28.04.2017).
114. Тюляндин С.А. Исследование POPLAR демонстрирует преимущество атезолизумаба перед доцетакселом у больных немелкоклеточным раком легкого// Новости онкологии. [Интернет-портал Российского общества клинической онкологии RosOnko Web]. Дата публикации: 26.08.2016. URL: http://www.rosoncoweb.ru/news/oncology/2016/08/26/ (дата обращения 28.04.2017).
115. Артамонова Е.В. Иммунотерапия - прорыв в лечении онкозаболеваний // Актуальное интервью. [Сайт: Клиническая фармация]. Дата публикации 15.01.2016. URL: http://clinical-pharmacy.ru/digest/actualoeintervu/5781-immunoterapiya-proryv-v-lechenii-onkozabolevaniy.html (дата обращения 28.04.2017).
116. Последний прорыв в онкологии: иммунотерапия // [сайт: INCORPORE Medical center]. URL: http://www.in-corpore.ch/news/%D0%BF%D0%BE%D1%81%D0%BB%D0%B5%D0%B4%D0%BD%D0%B8%D0%B9-%D0%BF%D1%80%D0%BE%D1%80%D1%8B%D0%B2-%D0%B2-%D0%BE%D0%BD%D0%BA%D0%BE%D0%BB%D0%BE%D0%B3%D0%B8%D0%B8-%D0%B8%D0%BC%D0%BC%D1%83%D0%BD%D0%BE%D1%82/ (дата обращения 28.04.2017).
117. Проблемы онкоиммунологии / Интервью с Н.М. Бережной // Онкология. [Портал Медфарм]. Дата публикации: 05.05.2017. URL: http://medafarm.ru/page/stati-doktoru/onkologiya/problemy-onkoimmunologii (дата обращения 28.04.2017).
118. Иммунотерапия в комбинации с традиционными методами лечения рака: выбор пути (01 нояб. 2015) // Фармакогенетика и фармакогеномика. Дата публикации 08.05.2017. URL: http://www.pharmacogenetics-pharmacogenomics.ru/item/immunoterapiya-v-kombinatsii-s-traditsionnymi-metodami-lecheniya-raka-vybor-puti (дата обращения 28.04.2017).
119. Кешелава В. Рак. Реалии и возможности применения вируса болезни Ньюкасла. Виротерапия: обоснование, критерии, показания применения, эффективность. Саарбрюкен: Издательский дом Palmarium Academic publishing. 2014. 131 с.
120. Jaini S„ Dadachova E. FDG for therapy of metabolically active tumors. / Semin Nucl Med. 2012. May; 42(3): 185-189. doi: 10.1053 / Xsemnuclmed. 2011.12.001.
121. Радионуклидная диагностика в Санкт-Петербурге: текущее состояние и проблемы развития / И.А. Звонова и др. // Радиационная гигиена. 2015. Т. 8, №4. С. 32-41. URL: http://www.radhyg.ru/jour/article/view/255. (дата обращения 19.05.2017).
122. Дезоксиглюкоза-фтор 18F. Инструкция по применению // [Сайт Лекарственный справочник ГЭОТАР]. Дата обновления информации: 20.03.2017. URL: http://www.lsgeotar.ru/dezoxigliukoza-ftor-18f-2895.htm1#sostav (дата обращения 19.05.2017).
123. Bao, S. Glioma stem cell promote radioresistance by preferential activation of DNA damage response / S. Bao, Q. Wu, R.E. McLendon, Y. Hao, Q. Shi, A.B. Hjelmeland, M.W. Dewhirst, D.D. Bigner, J.N. Rich // Nature - 2006. - Vol. 444, No 7120. - P. 756-760. doi: 10.1038/nature05236.
124. Шевцов M.A. Иммуномодулирующие свойства рекомбинантного белка теплового шока HSP70 в терапии опухолей головного мозга: автореф. дис. … канд. биол. наук. СПб.: 2013. - 23 с. URL: http:// www.cytspb.rssi.ru/referates/2013_02_15_shevcov_autoref.pdf (дата обращения 19.05.2017).
125. Балдуева И.А., Моисеенко В.М. Вакцинотерапия злокачественных опухолей (молекулярно-генетические аспекты) // Материалы конгрессов и конференций: IX Российский онкологический конгресс.2005. [Интернет-портал Российского общества клинической онкологии RosOnko Web]. URL: htttp://www.rosoncoweb.ru/library/congress/ru/09/02.php (дата обращения 26.05.2017).
126. Продигиозан / Медицинская энциклопедия [Сайт: Aorta.ru]. URL: http://aorta.ru/drug/drug1263.shtml (дата обращения 26.05.2017).
127. Позитронная терапия воспалений, инфекций и заболеваний US 2006018827 A1 (DADACHOVA EKATERINA, MOADEL RENEE M), 26.01.2006.
128. Способ лазерной вакцинации больных с метастатическими формами рака RU 2345788 С2 (ООО «НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЙ ЦЕНТР МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРОБЛЕМ «ГОРМЕЗИС»), 10.02.2009.
129. Способ терапии опухолевых заболеваний RU 2597414 С2 (ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УНИТАРНОЕ ПРЕДПРИЯТИЕ «ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ОСОБО ЧИСТЫХ БИОПРЕПАРАТОВ» ФЕДЕРАЛЬНОГО МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКОГО АГЕНТСТВА), 10.09.2016.
130. Гибридные белки и белковые конъюгаты на основе БТШ70 и их применение US 9217018 В2 (SERGEI В ONIKIENKO et al.), 22.12.2015.
131. Гибридные белки и белковые конъюгаты на основе белков теплового шока-70 (БТШ70) и способы их применения (варианты) RU 2014117975 А (АЛТЕРНАТИВ ИННОВЕЙТИВ ТЕКНОЛОДЖИЗ ЛЛС и др.), 10.02.2016.
132. Способ лечения онкологических заболеваний RU 2379055 С1 (КЕШЕЛАВА ВИКТОР ВЛАДИМИРОВИЧ и др.), 20.01.2010.
133. Метод иммунотерапии онкологических заболеваний и фармацевтические композиции на основе онколитического вируса Сендай RU 2519763 С9 (МАТВЕЕВА ОЛЬГА ВЯЧЕСЛАВОВНА и др.), 20.06.2014
134. Swann J.B., Smyth M.J. Immune surveillance of tumors // The Journal of Clinical Investigation. - 2007. - Vol. 117, 5. - P. 1137-1146.
135. Schirrmacher V., Feuerer M., Beckhove P., Ahlert Т., Umannsky V. T cell memory, anergy and immunotherapy in breast cancer // J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. - 2002. - Vol. 7, 2. - P. 201-208.
136. Молчанов O.E., Гранов A.M. Прогнозирование эффективности лечения диссеминированных форм почечноклеточного рака на основе молекулярного мониторинга // Материалы XII Российского онкологического конгресса. - М., 2008. - С. 11-16.
137. Ehrke Jane М.. Immunomodulation in cancer therapeutics // International Immunopharmacology. Vol. 3., Iss.8., August 2003., P.1105-1119, Zitvogel L. et al., 2008.
138. Zitvogel L., Apetoh L., Ghiringhelli F., Kroemer. G. Immunological aspects of cancer chemotherapy // Nature Rev. Immunol. - 2008. - 8. - P. 59-73.
139. Curiel T.J. Treg and rethinking cancer immunotherapy // The Journal of Clinical Investigation. - 2007. - Vol. 117, 5. - P. 1167-1174.
140. Kelly E. History of oncolytic viruses: genesis to engineering, Mol. Ther. 15, 2007, p. 651-659.
141. Beier R., Hermiston Т., Mumberg D. Isolation of more potent oncolytic paramyxovirus by bioselection, Gene Ther., 23, 2012, p. 13.
142. Кешелава В.В. Противоопухолевые вакцины: возможности и перспективы применения / Вестник МЕДСИ. 2009. №5 (сентябрь-ноябрь). С. 16-23.
143. Анализ результатов работы первого регионального ПЭТ-центра в Российской Федерации / Важенин А.В. и др. // Вестник РНЦРР МЗ РФ 2011. №11. URL: http://vestnik.rncrr.ru/vestnik/v11/papers/vachenin_v11.htm (дата обращения 28.03.2017).
144. Рязанов В.В. Совмещенная позитронно-эмиссионная и компьютерная томография в определении морфофункциональных характеристик опухолей пищеварительного тракта автореф. дис. дмн СПб 2009. URL: http://www.dissercat.com/content/sovmeshchennaya-pozitronno-emissionnaya-i-kompyutemaya-tomografiya-v-opredelenii-morfofunkt#ixzz4cpGxXSLL (дата обращения 28.03.2017).
145. Рязанов В.В., Труфанов Г.Е. Совмещенная позитронно-эмиссионная и компьютерная томография в диагностике и стадировании опухолей толстой кишки // Трансляционная медицина. 2015. №2-3 (31-32). С. 121-127. URL: https://www.google.ru/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&ved=0ah UKEwib8anyxv7SAhUGYpoKHZmNDJ8QFgggMAE&url=http%3A%2F%2Ftra nsmed.almazovcentre.ru%2Fjour%2Farticle%2Fdownload%2F78%2F79&usg=AF QjCNHiMLtZ0QBR7aqj9G1YFFK_kU80xQ&bvm=bv.l51426398,bs.2,d.bGg (дата обращения 28.03.2017).
146. Стандартизованная технология «Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови с применением проточных цитофлюориметров-анализаторов» / Хайдуков С.В. и др. // Российский иммунологический журнал. 2014. т. 8(17), №4. С. 974-992. URL: http://naukams.com/standartizovannaya-tehnologiya-issledovanie-subpopulyatsionnogo-sostava-limfotsitov-perifericheskoy-krovi-s-primeneniem-p (дата обращения 28.03.2017)
147. Debra A. et al. Immunohistochemical Analyses of Estrogen Receptor in Endometrial Adenocarcinoma Using a Monoclonal Antibody // Cancer Research, 46: 5419-5425, October 1986.
148. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1999. 459 с.
Claims (23)
1. Способ терапии метастатического рака, включающий введение пациенту композиции, содержащей вирус Сендай и фармацевтически приемлемый носитель, отличающийся тем, что лечение включает три этапа, при этом предварительно определяют у пациента размер опухоли и метаболическую активность опухолевой ткани, именуемые в дальнейшем морфо-функциональными показателями опухоли, определяют в биологическом образце пациента процентное содержание Т-цитотоксических лимфоцитов субпопуляции CD8 периферической крови с рецепторами программированной клеточной смерти (PD-1) по отношению к общему числу лимфоцитов указанной субпопуляции, именуемое в дальнейшем содержанием PD-1-позитивных Т-лимфоцитов, и при значении указанного показателя 40% и менее на первом этапе лечения воздействуют на поверхность кожи пациента импульсно-периодическим лазерным излучением при плотности мощности 0,5-5,0 Вт/см2, длительности импульсов 10-12 нс, частоте следования импульсов 5-20 кГц и времени экспозиции 1-5 мин, после завершения лазерного воздействия пациенту вводят композицию, содержащую вирус Сендай в суммарной дозе 107,0-108,0 ТЦД50, внутрикожно в зону данного воздействия, повторяют указанную процедуру, именуемую в дальнейшем комплексной процедурой, на 8-е сутки и через 4-5 суток после проведения второй комплексной процедуры считают первый этап лечения завершенным, а при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% пациенту на первом этапе лечения вводят препарат, представляющий собой рекомбинантный человеческий БТШ70 (рчБТШ70), именуемый в дальнейшем Препаратом-1 БТШ70, внутривенно в дозе 0,005-0,05 мг/кг массы тела, один раз в сутки, в течение семи суток, через 1-2 суток после завершения первого этапа лечения повторно определяют содержание PD-1-позитивных Т-лимфоцитов и при его значении 40% и менее пациенту на втором этапе лечения проводят комплексные процедуры в течение последующих четырех недель при кратности их проведения один раз в неделю, а при значении указанного показателя более 40% дополнительно определяют в цитологических препаратах, полученных из биологического образца пациента, суммарное процентное содержание опухолевых клеток, имеющих вирус-индуцированные цитопатологические изменения, специфические для вируса Сендай, по отношению к общему количеству опухолевых клеток, именуемое в дальнейшем содержанием специфически измененных опухолевых клеток, и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% и содержании специфически измененных опухолевых клеток более 20% пациенту на втором этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры и введение препарата, представляющего собой гибридный белок на основе рчБТШ70 и Fc-фрагмента человеческого иммуноглобулина G (IgG), именуемого в дальнейшем Препаратом-2 БТШ70, один раз в неделю внутривенно в дозе 0,005-0,05 мг/кг массы тела, и проводят терапию по указанной схеме в течение последующих четырех недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, а Препарат-2 БТШ70 вводят после каждой из данных процедур, при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% и содержании специфически измененных опухолевых клеток менее 6% пациенту на втором этапе лечения вводят Препарат-2 БТШ70 в указанных выше дозировках и режиме в течение последующих четырех недель, через 1-2 суток после завершения второго этапа лечения у пациента повторно определяют морфо-функциональные показатели опухоли и оценивают их количественное изменение в процентах по отношению к исходным показателям с учетом их направленности, а также содержание PD-1-позитивных Т-лимфоцитов и при уменьшении размера опухоли более чем на 20% и метаболической активности опухолевой ткани более чем на 30%, и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов 40% и менее пациенту на третьем этапе лечения проводят комплексные процедуры в течение последующих шести недель при кратности их проведения один раз в неделю, при уменьшении размера опухоли более чем на 20% и метаболической активности опухолевой ткани более чем на 30% и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% пациенту на третьем этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры и введение Препарата-2 БТШ70 в указанных выше дозировках и режиме, и проводят терапию по указанной схеме в течение последующих шести недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, а Препарат-2 БТШ70 вводят после каждой из данных процедур, при уменьшении хотя бы одного из морфо-функциональных показателей, соответственно, размера опухоли - на 20% и менее, метаболической активности опухолевой ткани - на 30% и менее или их увеличении и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов 40% и менее пациенту на третьем этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры и введение препарата, содержащего позитрон-излучающий радионуклид, конъюгированный с опухоль-специфической субстанцией, именуемого в дальнейшем опухоль-специфическим позитрон-излучающим радиофармпрепаратом, и проводят терапию по указанной схеме в течение последующих шести недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, а опухоль-специфический позитрон-излучающий радиофармпрепарат вводят после комплексной процедуры, при уменьшении хотя бы одного из морфо-функциональных показателей, соответственно, размера опухоли - на 20% и менее, метаболической активности опухолевой ткани - на 30% и менее или их увеличении и при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% у пациента дополнительно определяют процентное содержание Т-цитотоксических лимфоцитов субпопуляции CD8 периферической крови с PD-1 и Tim-3 рецепторами по отношению к общему числу лимфоцитов указанной субпопуляции, именуемое в дальнейшем содержанием PD-1, Tim-3-дубль-позитивных Т-лимфоцитов, и при уменьшении хотя бы одного из морфо-функциональных показателей, соответственно, размера опухоли - на 20% и менее, метаболической активности опухолевой ткани - на 30% и менее или их увеличении, при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% и при содержании PD-1, Tim-3-дубль-позитивных Т-лимфоцитов 3% и менее пациенту на третьем этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры, введение Препарата-2 БТШ70 в указанных выше дозировках и режиме и введение опухоль-специфического позитрон-излучающего радиофармпрепарата в течение последующих шести недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, Препарат-2 БТШ70 вводят после каждой из данных процедур, а опухоль-специфический позитрон-излучающий радиофармпрепарат вводят после введения Препарата-2 БТШ70, сочетанного с проведением комплексной процедуры, а при уменьшении хотя бы одного из морфо-функциональных показателей, соответственно, размера опухоли - на 20% и менее, метаболической активности опухолевой ткани - на 30% и менее или их увеличении, при содержании PD-1-позитивных Т-лимфоцитов более 40% и при содержании PD-1, Tim-3-дубль-позитивных Т-лимфоцитов более 3% пациенту на третьем этапе лечения назначают терапевтическую схему, включающую комплексные процедуры, введение Препарата-2 БТШ70 в указанных выше дозировках и режиме и введение фракции липополисахарида продигиозана с молекулярной массой менее 10 кДа, обладающей способностью блокировать PD-1 и Tim-3 рецепторы Т-цитотоксических лимфоцитов субпопуляции CD8 периферической крови, полученной путем электронно-лучевой обработки указанного липополисахарида с последующим фракционированием, именуемой в дальнейшем фракцией продигиозана-блокатором иммунных контрольных точек (ИКТ), и проводят терапию по указанной схеме в течение последующих шести недель, при этом кратность проведения комплексных процедур составляет один раз в неделю, Препарат-2 БТШ70 вводят после каждой из данных процедур, а фракцию продигиозана-блокатор ИКТ вводят после каждого введения Препарата-2 БТШ70, сочетанного с проведением комплексной процедуры.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в ходе комплексной процедуры воздействуют на поверхность кожи пациента импульсно-периодическим лазерным излучением в зеленом/желтом диапазоне.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что воздействие импульсно-периодическим лазерным излучением осуществляют с использованием лазера на парах меди с длиной волны 510,6 и 578 нм при плотности мощности 1-5 Вт/см2 и времени экспозиции 1-5 мин.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в ходе комплексной процедуры воздействуют на поверхность кожи пациента импульсно-периодическим лазерным излучением в инфракрасном диапазоне на длинах волн 800-1500 нм.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что воздействие импульсно-периодическим лазерным излучением осуществляют с использованием полупроводникового инфракрасного лазера с длиной волны 830 нм при плотности мощности 1-4 Вт/см2 и времени экспозиции 1-4 мин.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве биологического образца пациента, применяемого для определения содержания PD-1-позитивных Т-лимфоцитов, а также содержания PD-1, Tim-3-дубль-позитивных Т-лимфоцитов, используют периферическую кровь пациента.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве биологического образца пациента, применяемого для получения цитологических препаратов, используют биопсийный материал.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что при наличии у пациента канцероматоза брюшины или/и плевры в качестве биопсийного материала используют аспирационную жидкость, полученную из брюшной или/и плевральной полостей пациента.
9. Способ по п. 7, отличающийся тем, что в качестве биопсийного материала используют фрагмент солидной опухоли пациента.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что в качестве биопсийного материала используют пунктат, полученный при тонкоигольной аспирационной биопсии солидной опухоли пациента.
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что содержание специфически измененных опухолевых клеток определяют в монослойных цитологических препаратах, полученных из биологического образца пациента.
12. Способ по пп. 1, 11, отличающийся тем, что определение в цитологических препаратах, полученных из биологического образца пациента, содержания специфически измененных опухолевых клеток включает подсчет многоядерных клеток, клеток с микроядрами, клеток с гигантскими ядрами и клеток с массивной вакуолизацией цитоплазмы с последующим суммированием их количества.
13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в терапевтической схеме, применяемой, начиная со второго этапа лечения, и включающей комплексные процедуры и введение Препарата-2 БТШ70, пациенту вводят Препарат-2 БТШ70 через 1-1,5 ч после введения композиции, содержащей вирус Сендай.
14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве опухоль-специфического позитрон-излучающего радиофармпрепарата используют 11С-холин.
15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве опухоль-специфического позитрон-излучающего радиофармпрепарата используют 11С-метионин.
16. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве опухоль-специфического позитрон-излучаюшего радиофармпрепарата используют 18F-холин.
17. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в терапевтических схемах, применяемых на третьем этапе лечения и включающих введение опухоль-специфического позитрон-излучающего радиофармпрепарата, данный препарат вводят пациенту внутривенно в дозе 250-500 МБк 1-2 раза в течение двух недель.
18. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в терапевтической схеме, применяемой на третьем этапе лечения и включающей комплексные процедуры и введение опухоль-специфического позитрон-излучающего радиофармпрепарата, данный препарат вводят через 2-3 ч после введения композиции, содержащей вирус Сендай.
19. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в терапевтической схеме, применяемой на третьем этапе лечения и включающей комплексные процедуры, введение Препарата-2 БТШ70 и введение опухоль-специфического позитрон-излучающего радиофармпрепарата, пациенту вводят Препарат-2 БТШ70 один раз в неделю через 1-1,5 ч после введения композиции, содержащей вирус Сендай, а опухоль-специфический позитрон-излучающий радиофармпрепарат вводят через 1-1,5 ч после введения Препарата-2 БТШ70, сочетанного с проведением комплексной процедуры.
20. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в терапевтической схеме, применяемой на третьем этапе лечения и включающей комплексные процедуры, введение Препарата-2 БТШ70 и введение фракции продигиозана-блокатора ИКТ, пациенту вводят Препарат-2 БТШ70 один раз в неделю через 1-1,5 ч после введения композиции, содержащей вирус Сендай, а фракцию продигиозана-блокатор ИКТ вводят после каждого введения Препарата-2 БТШ70, сочетанного с проведением комплексной процедуры.
21. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют фракцию продигиозана-блокатор ИКТ, в ходе получения которой электронно-лучевую обработку липополисахарида продигиозана осуществляют с помощью широкоапертурных импульсных электронных пучков с энергией электронов 180-200 кэВ при поглощенной дозе 150 кГр.
22. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют фракцию продигиозана-блокатор ИКТ, в ходе получения которой фракционирование осуществляют методом ультрафильтрации с применением мембран с порогом отсечения по молекулярной массе 10 кДа.
23. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в терапевтической схеме, применяемой на третьем этапе лечения, фракцию продигиозана-блокатор ИКТ вводят пациенту внутривенно в дозе 0,005-0,01 мг/кг массы тела.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017119461A RU2662916C1 (ru) | 2017-06-05 | 2017-06-05 | Способ терапии метастатического рака с использованием вируса Сендай |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017119461A RU2662916C1 (ru) | 2017-06-05 | 2017-06-05 | Способ терапии метастатического рака с использованием вируса Сендай |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2662916C1 true RU2662916C1 (ru) | 2018-07-31 |
Family
ID=63142394
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017119461A RU2662916C1 (ru) | 2017-06-05 | 2017-06-05 | Способ терапии метастатического рака с использованием вируса Сендай |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2662916C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10716809B2 (en) | 2013-03-01 | 2020-07-21 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Methods of producing enriched populations of tumor reactive T cells from peripheral blood |
RU2785993C2 (ru) * | 2018-09-14 | 2022-12-15 | Те Борд Оф Трастиз Оф Те Лилэнд Стэнфорд Джуниор Юниверсити | ГИБРИДНЫЕ БЕЛКИ ВАРИАНТА sPD-1—FC |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2345788C2 (ru) * | 2005-09-02 | 2009-02-10 | ООО "Научно-практический центр медико-биологических проблем "ГОРМЕЗИС" | Способ лазерной вакцинации больных с метастатическими формами рака |
US20130071432A1 (en) * | 2011-09-20 | 2013-03-21 | The Cleveland Clinic Foundation | Combination virotherapy for cancer |
RU2519763C1 (ru) * | 2012-11-26 | 2014-06-20 | Ольга Вячеславовна Матвеева | Метод иммунотерапии онкологических заболеваний и фармацевтические композиции на основе онкологического вируса сендай |
-
2017
- 2017-06-05 RU RU2017119461A patent/RU2662916C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2345788C2 (ru) * | 2005-09-02 | 2009-02-10 | ООО "Научно-практический центр медико-биологических проблем "ГОРМЕЗИС" | Способ лазерной вакцинации больных с метастатическими формами рака |
US20130071432A1 (en) * | 2011-09-20 | 2013-03-21 | The Cleveland Clinic Foundation | Combination virotherapy for cancer |
RU2519763C1 (ru) * | 2012-11-26 | 2014-06-20 | Ольга Вячеславовна Матвеева | Метод иммунотерапии онкологических заболеваний и фармацевтические композиции на основе онкологического вируса сендай |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
YONEMITSU Y at al., Immunostimulatory virotherapy using recombinant Sendai virus as a new cancer therapeutic regimen, Front Biosci. 2008 May 1;13:4953-9.-. * |
YONEMITSU Y at al., Immunostimulatory virotherapy using recombinant Sendai virus as a new cancer therapeutic regimen, Front Biosci. 2008 May 1;13:4953-9.-реферат. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10716809B2 (en) | 2013-03-01 | 2020-07-21 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Methods of producing enriched populations of tumor reactive T cells from peripheral blood |
US11679128B2 (en) | 2013-03-01 | 2023-06-20 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Methods of producing enriched populations of tumor reactive T cells from peripheral blood |
RU2785993C2 (ru) * | 2018-09-14 | 2022-12-15 | Те Борд Оф Трастиз Оф Те Лилэнд Стэнфорд Джуниор Юниверсити | ГИБРИДНЫЕ БЕЛКИ ВАРИАНТА sPD-1—FC |
RU2787724C1 (ru) * | 2021-12-09 | 2023-01-12 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Набор рекомбинантных плазмидных ДНК для получения рекомбинантных вирусов Сендай штамм Москва (варианты) |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Galli et al. | Relevance of immune cell and tumor microenvironment imaging in the new era of immunotherapy | |
Maiorino et al. | Innate immunity and cancer pathophysiology | |
Garg et al. | Integrating next-generation dendritic cell vaccines into the current cancer immunotherapy landscape | |
Prieto et al. | Immunological landscape and immunotherapy of hepatocellular carcinoma | |
Frankel et al. | The role of tumor microenvironment in cancer immunotherapy | |
Schijns et al. | First clinical results of a personalized immunotherapeutic vaccine against recurrent, incompletely resected, treatment-resistant glioblastoma multiforme (GBM) tumors, based on combined allo-and auto-immune tumor reactivity | |
Shevtsov et al. | Ex vivo Hsp70-activated NK cells in combination with PD-1 inhibition significantly increase overall survival in preclinical models of glioblastoma and lung cancer | |
Montico et al. | Exploiting a new strategy to induce immunogenic cell death to improve dendritic cell-based vaccines for lymphoma immunotherapy | |
Hersey et al. | A phase II, randomized, open-label study evaluating the antitumor activity of MEDI-522, a humanized monoclonal antibody directed against the human alpha v beta 3 (avb3) integrin,±dacarbazine (DTIC) in patients with metastatic melanoma (MM) | |
Bockel et al. | Combining radiation therapy and cancer immune therapies: From preclinical findings to clinical applications | |
Yannelli et al. | The large scale generation of dendritic cells for the immunization of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) | |
Perrin et al. | Targeted alpha particle therapy remodels the tumor microenvironment and improves efficacy of immunotherapy | |
Sun et al. | Anti-tumour effect of neo-antigen-reactive T cells induced by RNA mutanome vaccine in mouse lung cancer | |
RU2662916C1 (ru) | Способ терапии метастатического рака с использованием вируса Сендай | |
Wolf et al. | Implementing combinatorial immunotherapeutic regimens against cancer: The concept of immunological conditioning | |
Shimodaira et al. | Induction of antigen-specific cytotoxic T lymphocytes by chemoradiotherapy in patients receiving Wilms’ tumor 1-targetted dendritic cell vaccinations for pancreatic cancer | |
Kumar et al. | Substantial remission of prostate adenocarcinoma with dendritic cell therapy APCEDEN® in combination with chemotherapy | |
Digklia et al. | Cancer immunotherapy: a simple guide for interventional radiologists of new therapeutic approaches | |
Shimodaira et al. | Dendritic cell-based cancer immunotherapy targeting Wilms’ Tumor 1 for pediatric cancer | |
US20170095545A1 (en) | Inhibition of tumor angiogenesis by checkpoint inhibitors and active vaccination | |
Sangro et al. | Immunotherapy of hepatocellular carcinoma | |
Kretz-Rommel et al. | Immune evasion by CD200: New approaches to targeted therapies for chronic lymphocytic leukemia | |
Renner et al. | Tumour vaccines: a new immunotherapeutic approach in oncology | |
Kawiak et al. | Problems of cancer treatment. Part 2. Treatment based on modification of anticancer immunological responses in therapy | |
Ramakrishna et al. | Synergistic Role of TLR Agonists in T Cell-Mediated Immunity Induced by Mannose Receptor Antibody Targeting of Tumor Antigens to Human DCs |