RU2657821C1 - Способ выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом - Google Patents
Способ выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом Download PDFInfo
- Publication number
- RU2657821C1 RU2657821C1 RU2017135742A RU2017135742A RU2657821C1 RU 2657821 C1 RU2657821 C1 RU 2657821C1 RU 2017135742 A RU2017135742 A RU 2017135742A RU 2017135742 A RU2017135742 A RU 2017135742A RU 2657821 C1 RU2657821 C1 RU 2657821C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gene
- phenol
- mthfr
- children
- sultiai
- Prior art date
Links
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 103
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 32
- 238000011109 contamination Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 title abstract description 5
- 230000007257 malfunction Effects 0.000 title abstract 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 65
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 35
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 35
- 101000587058 Homo sapiens Methylenetetrahydrofolate reductase Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 102100029684 Methylenetetrahydrofolate reductase Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 102200088972 rs1801133 Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 claims description 17
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 claims description 8
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 abstract description 3
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 22
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 20
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 18
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 13
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000011161 development Methods 0.000 description 12
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 10
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 9
- 108090001033 Sulfotransferases Proteins 0.000 description 8
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 102000004896 Sulfotransferases Human genes 0.000 description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 7
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 7
- 229910052712 strontium Inorganic materials 0.000 description 7
- CIOAGBVUUVVLOB-UHFFFAOYSA-N strontium atom Chemical compound [Sr] CIOAGBVUUVVLOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 101150019913 MTHFR gene Proteins 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- -1 16GNG3 Proteins 0.000 description 5
- 206010001497 Agitation Diseases 0.000 description 5
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 5
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 5
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 5
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 101150100998 Ace gene Proteins 0.000 description 4
- 101150070360 Agt gene Proteins 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 101150008789 GNB3 gene Proteins 0.000 description 4
- 101001128156 Homo sapiens Nanos homolog 3 Proteins 0.000 description 4
- 101001124309 Homo sapiens Nitric oxide synthase, endothelial Proteins 0.000 description 4
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- 108010030837 Methylenetetrahydrofolate Reductase (NADPH2) Proteins 0.000 description 4
- 102100028452 Nitric oxide synthase, endothelial Human genes 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 4
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 4
- 101150059573 AGTR1 gene Proteins 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010003830 Automatism Diseases 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101150117357 F2 gene Proteins 0.000 description 3
- 206010071602 Genetic polymorphism Diseases 0.000 description 3
- 101000826399 Homo sapiens Sulfotransferase 1A1 Proteins 0.000 description 3
- 101150044523 ITGB3 gene Proteins 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 3
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 101100083853 Homo sapiens POU2F3 gene Proteins 0.000 description 2
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150031207 NOS3 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100058850 Oryza sativa subsp. japonica CYP78A11 gene Proteins 0.000 description 2
- 101150059175 PLA1 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100026466 POU domain, class 2, transcription factor 3 Human genes 0.000 description 2
- 102100023986 Sulfotransferase 1A1 Human genes 0.000 description 2
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 208000006218 bradycardia Diseases 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 231100000481 chemical toxicant Toxicity 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 231100000824 inhalation exposure Toxicity 0.000 description 2
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 2
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 2
- 238000012502 risk assessment Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 2
- MGWGWNFMUOTEHG-UHFFFAOYSA-N 4-(3,5-dimethylphenyl)-1,3-thiazol-2-amine Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C=2N=C(N)SC=2)=C1 MGWGWNFMUOTEHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150092476 ABCA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000017920 ADRB1 Human genes 0.000 description 1
- 101150037123 APOE gene Proteins 0.000 description 1
- 102000055510 ATP Binding Cassette Transporter 1 Human genes 0.000 description 1
- 108700005241 ATP Binding Cassette Transporter 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100022089 Acyl-[acyl-carrier-protein] hydrolase Human genes 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 102100030988 Angiotensin-converting enzyme Human genes 0.000 description 1
- 101710185050 Angiotensin-converting enzyme Proteins 0.000 description 1
- 102100037320 Apolipoprotein A-IV Human genes 0.000 description 1
- 102100040197 Apolipoprotein A-V Human genes 0.000 description 1
- 108010061118 Apolipoprotein A-V Proteins 0.000 description 1
- 102100029470 Apolipoprotein E Human genes 0.000 description 1
- 101150022344 BDKRB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000964894 Bos taurus 14-3-3 protein zeta/delta Proteins 0.000 description 1
- 206010049765 Bradyarrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 102100031151 C-C chemokine receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710149815 C-C chemokine receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000008144 Cytochrome P-450 CYP1A2 Human genes 0.000 description 1
- 108010074922 Cytochrome P-450 CYP1A2 Proteins 0.000 description 1
- 206010012559 Developmental delay Diseases 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 102100033902 Endothelin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101150036441 F5 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100031509 Fibrillin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100031752 Fibrinogen alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100027581 Forkhead box protein P3 Human genes 0.000 description 1
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 101000824278 Homo sapiens Acyl-[acyl-carrier-protein] hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 101000806793 Homo sapiens Apolipoprotein A-IV Proteins 0.000 description 1
- 101000892264 Homo sapiens Beta-1 adrenergic receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000925493 Homo sapiens Endothelin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000846893 Homo sapiens Fibrillin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000846244 Homo sapiens Fibrinogen alpha chain Proteins 0.000 description 1
- 101000861452 Homo sapiens Forkhead box protein P3 Proteins 0.000 description 1
- 101001015004 Homo sapiens Integrin beta-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000990902 Homo sapiens Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 101000629622 Homo sapiens Serine-pyruvate aminotransferase Proteins 0.000 description 1
- 101000633605 Homo sapiens Thrombospondin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000611023 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000690425 Homo sapiens Type-1 angiotensin II receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000890951 Homo sapiens Type-2 angiotensin II receptor Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 108010013563 Lipoprotein Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102100022119 Lipoprotein lipase Human genes 0.000 description 1
- 108010018650 MEF2 Transcription Factors Proteins 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- 101100366137 Mesembryanthemum crystallinum SODCC.1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100021148 Myocyte-specific enhancer factor 2A Human genes 0.000 description 1
- 102100030710 NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-3, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010015181 PPAR delta Proteins 0.000 description 1
- 101100096142 Panax ginseng SODCC gene Proteins 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 208000001300 Perinatal Death Diseases 0.000 description 1
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102100038824 Peroxisome proliferator-activated receptor delta Human genes 0.000 description 1
- 101710096328 Phospholipase A2 Proteins 0.000 description 1
- 102100026918 Phospholipase A2 Human genes 0.000 description 1
- 208000032236 Predisposition to disease Diseases 0.000 description 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 108091005770 SIRT3 Proteins 0.000 description 1
- 101150074490 SULT1A1 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- 102100026842 Serine-pyruvate aminotransferase Human genes 0.000 description 1
- 102220520997 Single-stranded DNA-binding protein, mitochondrial_F91A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 208000004301 Sinus Arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 206010040741 Sinus bradycardia Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102220563688 Sulfotransferase 1A1_R213H_mutation Human genes 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029529 Thrombospondin-2 Human genes 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- 108010078814 Tumor Suppressor Protein p53 Proteins 0.000 description 1
- 102100040372 Type-2 angiotensin II receptor Human genes 0.000 description 1
- 101100083933 Vaccinia virus (strain Copenhagen) B2R gene Proteins 0.000 description 1
- 101100083934 Vaccinia virus (strain Western Reserve) VACWR184 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010053099 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 238000003915 air pollution Methods 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 238000002583 angiography Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003403 autonomic nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000036471 bradycardia Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 206010006475 bronchopulmonary dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001451 cardiotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N dATP Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N dATP Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J dCTP(4-) Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)C1 RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J 0.000 description 1
- HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N dGTP Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N dTTP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000012850 discrimination method Methods 0.000 description 1
- 230000009429 distress Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 1
- 238000002565 electrocardiography Methods 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 230000006353 environmental stress Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001308 heart ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 108010022197 lipoprotein cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000051 modifying effect Effects 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 201000010193 neural tube defect Diseases 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000955 neuroendocrine Effects 0.000 description 1
- JCXJVPUVTGWSNB-UHFFFAOYSA-N nitrogen dioxide Inorganic materials O=[N]=O JCXJVPUVTGWSNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 238000011897 real-time detection Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000001020 rhythmical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 101150017120 sod gene Proteins 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 description 1
- 150000003871 sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 239000006163 transport media Substances 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000002264 triphosphate group Chemical class [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 230000003966 vascular damage Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- ABDKAPXRBAPSQN-UHFFFAOYSA-N veratrole Chemical compound COC1=CC=CC=C1OC ABDKAPXRBAPSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002676 xenobiotic agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины и биологии. Способ выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом включает отбор пробы крови у ребенка и определение в пробе содержания фенола, отбор пробы буккального эпителия и осуществление выделения из указанной пробы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), генотипирование полиморфизма генов MTHFR и SULTIAI, исследование генотипов гена MTHFR С677Т (rs1801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), при одновременном выполнении следующих условий: наличие вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена MTHFR С677Т (rs1801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), и при превышении концентрации фенола в крови выше фонового уровня более чем в 1,5 раза, диагностируют у ребенка наличие ранних нарушений физиологической функции сердца в виде функциональной кардиопатии, связанной с контаминацией фенолом. 1 табл.
Description
Изобретение относится к области медицины и биологии, в частности, к исследованиям ксенобиотиков, а именно, фенола, вызывающего нарушение состояния сердечно-сосудистой системы у детей, проживающих в районах экологического неблагополучия, и может быть использовано для ранней диагностики и прогнозирования токсического действия фенола на нарушение физиологической функции сердца у пациента.
Изобретение может быть использовано для постановки предварительного диагноза как в специализированных клиниках при обследовании пациентов, так и в обычных учреждениях здравоохранения. Результаты указанных обследования необходимы для разработки индивидуальных программ наблюдения и лечения в зависимости от тяжести нарушения физиологической функции сердца ребенка, а, кроме того, могут быть использованы при формировании санитарно-гигиенических мероприятий по предупреждению и устранению воздействия вредных химических веществ, обуславливающих формирование функциональной кардиопатии у детей.
В настоящее время в атмосферном воздухе промышленных центров присутствует смесь химических загрязнителей от предприятий и автотранспорта, включающая взвешенные вещества, оксид углерода, диоксид азота, бензол, фенол, формальдегид и другие. Несмотря на то, что в последние годы в Пермском крае отмечается снижение уровня загрязнения атмосферного воздуха, в 2014-2015 году регистрировался повышенный уровень взвешенных частиц 1,2-2,8 ПДКм.р., фенола 1,4-2,5 ПДКм.р., формальдегида 1,5-2,5 ПДКм.р. в атмосферном воздухе Выявлено, что повышенная концентрация в среде обитания техногенныххимических факторов, тройных к сердечно-сосудистой системе, создает риск развития функциональных нарушений в сосудах и сердце у детей.
Для задач ранней диагностики нарушений здоровья детей, а также для оценки эффективности профилактики и лечения, актуальным является выделение маркерных показателей генетического статуса, обеспечивающих функционирование сердечно-сосудистой системы, которые можно использовать в качестве дополнительных диагностических критериев, характеризующих ответ организма на специфическое средовое окружение.
Под физиологической функцией сердца понимается нагнетание крови из вены в артерию в ритмичном темпе, при котором создается градиент давления, что влечет за собой ее бесперебойное движение. Поэтому гемодинамическую функцию сердца можно отнести к одной из его главных физиологических функций. К другим функциям сердца можно отнести возбудимость, способность проводить возбуждение, сократимость, автоматизм и др.
Наблюдаемые у ребенка отклонения в функционировании сердца характеризуются рядом клинических состояний, к которым относятся малые аномалии развития сердца (МАРС), под которым понимают анатомическое изменение сердца и магистральных сосудов, не приводящие к грубым нарушениям функций сердечно-сосудистой системы. МАРС - многочисленная группа заболеваний сердца, возникающих в результате неправильного развития соединительной ткани. Так причиной дополнительной хорды в сердечном желудочке является генетическая предрасположенность.
При этом экотоксиканты, в частности, фенол, способны вызывать изменения со стороны центральной нервной системы, почек, печени, органов дыхания и сердечно-сосудистой системы, что может способствовать нарушению не только адаптационных возможностей организма, но и возникновению отклонений со стороны основных функций сердца - нарушение автоматизма, возбудимости и проводимости, диффузные поражения миокарда (Вредные химические вещества. Галоген- и кислородсодержащие органические соединения. В.А. Филов и др. СПб - Химия 1994 г.). Этим и обусловлена потребность в установлении нарушения физиологической функции сердца, модифицированной фенолом.
В настоящее время хорошо изучены факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний, к которым относятся высокий уровень артериального давления крови, избыток массы тела, сахарный диабет и др. Разработаны клинические и биохимические маркеры повышенного риска сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ): высокий уровень общего холестерина и холестерина липопротеидов низкой плотности, низкий уровень холестерина липопротеидов высокой плотности, высокий уровень глюкозы сыворотки крови и др.
В настоящее время риск ССЗ оценивается по данным клинико-инструментальных методов (измерение уровня артериального давления крови, эхо- и электрокардиография, ангиография и т.д.), биохимических показателей (липидный спектр крови, уровень глюкозы крови), с учетом воздействия вредных внешне-средовых факторов.
Из уровня техники известно, что в настоящее время большинство способов диагностики нарушений сосудисто-сердечной системы основано на использовании в качестве маркеров показателей крови и генетические критерии. Причем известно, что при этом в качестве маркерного показателя используют ген MTHFR С677Т.
Из уровня техники (Патент РФ №2376372) известен способ генетической диагностики подверженности к сердечно-сосудистым заболеваниям. Способ может быть использовано для диагностики наследственной предрасположенности к сердечно-сосудистым заболеваниям у человека и основан на определении генотипов по полиморфным вариантам А1166С гена AGTR1, А-240Т и A2350G гена АСЕ, С677Т гена MTHFR, Т174М гена AGT, С825Т гена GNB3, VNTR4a/b и G894T гена NOS3, G1691A гена F5, PLA1/A2 гена ITGB3, G20210A гена F2 и оценке риска путем суммирования количества баллов, присвоенных каждому генотипу. При этом генотипам «низкого» риска сердечно-сосудистой патологии присваивается 0 баллов, к ним относятся генотипы 1166АА гена AGTR1, -240АА, 2350АА гена АСЕ, 677СС гена MTHFR, 174ТТ гена AGT, 825СС гена GNB3, VNTR4bb и 894GG гена NOS3, 1691GG гена F5, PLA1/A1 гена ITGB3, 20210GG гена F2. Генотипам «среднего» риска присваивается 0,5 баллов, к ним относятся генотипы 1166АС гена AGTR1, -240АТ и 2350AG гена АСЕ, 677СТ гена MTHFR, 174ТМ гена AGT, 825СТ гена GNB3, VNTR4ab и 894GT гена NOS3. Генотипам «высокого» риска присваивается 1 балл, к ним относятся генотипы 1166СС гена AGTR1, -240ТТ и 2350GG гена АСЕ, 677ТТ гена MTHFR, 174ММ гена AGT, 825ТТ гена GNB3, VNTR4aa и 894GT гена NOS3, 1691GA и 1691АА гена F5, PLA1/A2 и PLA2/A2 гена ITGB3, 20210GA и 20210АА гена F2. Риск сердечно-сосудистых болезней считается «низким» при сумме баллов от 0 до 3, средним - от 3,5 до 6, высоким - от 6,5 до 11 баллов.
Недостатком указанного способа является то, что он не позволяет ответить на вопрос о реализации заявленного риска (уровне экспрессируемых геном белков, например, гомоцистеина) и не отвечает на вопрос о факторе, который мог бы вызвать сердечно-сосудистую патологию (инфекционный, химический агент).
Известен способ расширенного скрининга предрасположенности к сердечно-сосудистым заболеваниям и биочип для осуществления этого способа (Патент РФ №2453606). Способ включает стадию выделения геномной ДНК из клинического образца, амплификацию участков генов АСЕ, АРОА4, АРОА5, АРОВ, EDN1, MEF2A, FGA, ADRB1, TNBS4, АРОЕ, FBN1, AGXT, MTHFR, CCR2, F5, F2, F7, АВСА1, ITGB3, AGTR2, B2R, DES, TLR4, NOS3, KDR, ММР9, THBS2, LPL, МРО, содержащих последовательности полиморфных локусов, перечисленные в SEQ ID 1-672 и получение одноцепочечного флюоресцентно меченого продукта методом ник-трансляции и рестрикции. Приготавливают биочип для скрининга предрасположенности к заболеваниям сердечно-сосудистой системы, содержащий набор иммобилизованных олигонуклеотидов SEQ ID 1-672. Осуществляют гибридизацию меченого амплифицированного продукта на указанном биочипе. Регистрируют результаты при длине волны 635 нм и 532 нм для красителей Су5 и Су3 соответственно. Интерпретируют результаты гибридизации путем сравнения интенсивности флюоресцентных сигналов, полученных при совершенной и несовершенной гибридизации. Известное изобретение позволяет получить комплексную оценку генетических предрасположенностей пациента к сердечно-сосудистым заболеваниям и оценить риски развития сердечно-сосудистых заболеваний.
Однако его недостатком является то, что в биочип не включен участок гена SULT1A1, а значит не оценивался риск токсического воздействия на сердечно-сосудистую систему фенолсодержащих соединений, в метаболизме которых принимает участие сульфотрансфераза.
Также известно использование в способах диагностики заболеваний в качестве критерия гена SULTIAI Arg213His. В патенте РФ №2607031 описан способ выявления кандидатных генов для проведения популяционных исследований генетического полиморфизма у детей, проживающих в условиях стронциевой геохимической провинции. При осуществлении указанного способа производят отбор пробы крови у детей, проживающих в стронциевой геохимической провинции. Из этой пробы выделяют ДНК и создают библиотеку коротких отрезков ДНК. Проводят их гибридизацию с набором заданных праймеров, представляющих в совокупности жидкий ДНК-биочип. Затем гибридизованные участки подвергают секвенированию, устанавливая фактическую последовательность нуклеотидов, составляющих гены, и сравнивают эту последовательность с референтной последовательностью нуклеотидов в генах. Устанавливают отклонения в последовательности, принимая такие отклонения, как ассоциированные с возможными нарушениями здоровья ребенка под действием стронция. В качестве указанных генов используют: CYP1A2, TLR4, TERT, FAS, FOXP3, ТР53, MTHFR, SULT1A1, VEGF, ZMPSTE, SOD, SIRT3, NOS3, PPARD и СРОХ. В последовательности нуклеотидов каждого из указанных генов идентифицируют количество однонуклеотидных полиморфизмов, и в случае наличия таких полиморфизмов в гене в количестве 6 и более прогнозируют связь такого измененного гена с воздействующей на ребенка стронциевой экспозицией в условиях стронциевой геохимической провинции. Этот ген принимают в качестве кандидатного гена для проведения последующих популяционных исследований генетического полиморфизма у детей, проживающих в условиях стронциевой геохимической провинции. Настоящее изобретение позволяет обеспечить возможность выявления через генетический полиморфизм кандидатных генов у детей, ассоциированных с воздействием стронция, и использования в дальнейшем полученной информации для популяционных исследований с целью установлении на ранней стадии определенных заболеваний, обусловленных нарушенным геном.
Однако этот известный способ не предназначен для диагностики ранних нарушений в сердечно-сосудистой системе ассоциированных с фенолом.
При этом из уровня техники не были выявлены известные способы диагностики ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом, поэтому сделать выбор ближайшего аналога к заявляемому объекту не представляется возможным.
Технический результат, достигаемый предлагаемым изобретением, заключается в обеспечении точности оценки влияния фенола на наличие нарушения физиологической функции сердца в виде функциональной кардиопатии, с обеспечением возможности в последующем судить о развитии таких состояний у детей уже на ранних стадиях их формирования.
Указанный технический результат достигается предлагаемым Способом выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом, характеризующимся тем, что производят отбор пробы крови у ребенка, и определяют в пробе содержание фенола, также у указанного ребенка отбирают пробу буккального эпителия, осуществляют выделение из указанной пробы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), затем на детектирующем амплификаторе с использованием полимеразной цепной реакции ПЦР в режиме реального времени проводят генотипирование полиморфизма генов MTHFR и SULTIAI, используя в качестве праймера участок ДНК путем исследования генотипов гена MTHFR С677Т (rsl801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), устанавливая при этом для каждого из указанных генов одно из следующих его состояний: гетерозиготное, или нормальное гомозиготное, или вариантное гомозиготное, и при одновременном выполнении следующих условий: наличие вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена MTHFR С677Т (rsl801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), и при превышении концентрации фенола в крови выше фонового уровня более чем в 1,5 раза, диагностируют у ребенка наличие ранних нарушений физиологической функции сердца в виде функциональной кардиопатии, связанной с контаминацией фенолом.
Поставленный технический результат достигается за счет следующего.
В качестве критерия нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом рекомендуется использовать гетерозиготные или вариантные (патологические) гомозиготные генотипы гена MTHFR С677Т (rs1801133), фенотипирующего гомоцистеин, вызывающего повреждение эндотелиальной ткани и нарушения развития соединительной ткани, и гетерозиготные или вариантные гомозиготные генотипы гена SULTIAI G2663A (rs9282861), ответственного за экспрессию сульфотрансферазы, метаболизирующей (инактивирущей) фенолы.
Согласно данным ряда исследований функциональное состояние сердечно-сосудистой системы объективно отражает уровень адаптированности организма к факторам среды обитания. Присутствие техногенных химических веществ в организме приводит к развитию нарушений в сосудах и сердце, которые обуславливают развитие преморбидных состояний и способствуют прогрессированию хронических заболеваний.
Наряду с дыхательной системой в патологический процесс нередко вовлекается и сердечно-сосудистая система, что связано как с прямым кардиотоксичным действием ароматических и кислородсодержащих углеводородов, так и с опосредованным, обусловленным нарушением функции внешнего дыхания и изменением функционирования вегетативной нервной системы под действием техногенных химических факторов. Показано, что длительное воздействие фенола и формальдегида нарушают процессы тканевого метаболизма, что в дальнейшем приводит к дистрофическим изменениям тканей и органов-мишеней (Сенаторова А.С., Логвинова О.Л., Бойченко А.Д., Галдина И.М. Состояние диастолической функции левого желудочка у детей с бронхолегочной дисплазией // Международный журнал педиатрии, акушерства и гинекологии. - 2013. - Том 4. - №2. - С. 28-33).
Установлено, что хроническое ингаляционное воздействие формальдегида и фенола формирует опасность развития нарушений со стороны органов дыхания (индекс опасности HI - до 3,73), центральной нервной системы (HI - до 2,33) и сердечно-сосудистой системы (ССС) (HI - до 2,31).
Одной из причин формирования у ребенка патологии ССС, в т.ч. функциональных кардиопатий, являются замены в гене метилентетрагидрофолатредуктазы - MTHFR, как в промоторной, так и в экзонных областях гена. Функция белкового продукта гена метилентетрагидрофолатредуктаза (MTHFR С677Т) является основным ферментом метаболизма гомоцистеина.
Гомоцистеин - продукт метаболизма метионина - одной из 8 незаменимых аминокислот организма. В норме он не накапливается. Обладает выраженным токсическим действием на клетку. Циркулируя в крови, повышенный гомоцистеин повреждает сосуды, тем самым повышая свертываемость крови и образование микротромбов в сосудах.
Снижение активности метилентетрагидрофолатредуктазы - одна из важных причин накопления гомоцистеина в крови.
Интерпретация аллелей и генотипов, гомозиготных по данной мутации (генотип ТТ), отмечает термолабильность MTHFR и снижение активности фермента примерно до 35% от среднего значения. Наличие этой мутации сопровождается повышением уровня гомоцистеина в крови. Генотип СС является нормой.
Ген метилентетрагидрофолатредуктазы MTHFR С677Т: Фермент является ключевым звеном фолатного цикла и катализирует реакцию превращения гомоцистеина в метионин. Гомоцистеин - серосодержащая аминокислота, являющаяся продуктом переработки в организме так называемой незаменимой аминокислоты метионина. Гомоцистеин под воздействием фолиевой кислоты и витамина В-12 возвращается обратно в метионин, или под влиянием витамина В-6 превращается в следующий продукт обмена - цистотионин.
Повышение уровня гомоцистеина крови на 5 мкмоль/л приводит к увеличению риска атеросклеротического поражения сосудов на 80% у женщин и на 60% у мужчин. У людей с повышенным уровнем гомоцистеина повышается риск возникновения болезни Альцгеймера и старческого слабоумия.
При сочетании повышения гомоцистеина крови и сахарного диабета чаще возникают сосудистые осложнения - заболевания периферических сосудов, нефропатия, ретинопатия и другие.
Причиной повышенного уровня гомоцистеина крови является следующее. Вариант С/Т в гене MTHFR является мутацией. Замена цитозина на тимин в 677 положении указанного гена приводит к снижению функциональной активности фермента до 35% от среднего значения. Полиморфизм 677С>Т широко распространен в различных популяциях и связан по крайней мере с двумя группами многофакторных заболеваний: васкулярными заболеваниями и дефектами развития нервной трубки у плода.
Дефекты в данном гене часто приводят к совершенно различным заболеваниям с широким спектром клинических симптомов: умственное и физическое отставание в развитии, перинатальная смерть, васкулярные и нейродегенеративные заболевания, диабет, рак и другие.
Назначение фолиевой кислоты может значительно снизить риск последствий данного варианта полиморфизма. Данные о полиморфизме: частота встречаемости гомозиготы в популяции - 10-12%; частота встречаемости гетерозиготы в популяции - 40%.
Функция гена сульфотрансферазы SULT1A1:
Деградация фенолов происходит при участии фермента цитозоля - сульфотрансферазы. Реакция сульфатной конъюгации происходит с участием специального фермента сульфотрансферазы, γ-аминомасляная кислота (ГАМК) образуется из глутамата. Сульфогруппы вводятся в молекулы протеогликанов сульфотрансферазами. Сульфотрансферазой осуществляется сульфирование андрогенов, стероидов де ново- агонистов и антагонистов ГАМК, одновременно они участвуют в модуляции нейроэндокринной регуляции, гамма-аминомасляная кислота (ГАМК) используется для лечения сосудистых заболеваний головного мозга.
В качестве критерия ранних нарушений ССС в условиях контаминации фенолом рекомендуется использовать измененный генотип гена фермента метилентетрагидрофолатредуктазы MTHFR С677Т (rs1801133), отвечающего за экспрессию гомоцистеина и состояние сосудистого эндотелия; измененный генотип гена сульфотрансферазы SULT1A1 G2663A (rs9282861), отвечающего за метаболизм и конъюгацию фенолов, и уровень фенола в крови. Реализующим процесс сосудистых нарушений и функциональной кардиопатии (малых аномалий развития сердца) служит экспозиция фенола, превышающая фоновую концентрацию (фоновый уровень фенола в крови 0,01±0,01 мг/л). Подтверждающим фактором эндотелиальных нарушений служит нарастание сосудистых изменений по критерию содержания гомоцистеина (повышение), что характеризует вероятность возникновения функциональной кардиопатии.
Благодаря тому, что в заявляемом способе в качестве диагностических критериев предлагается использовать именно полиморфизм гена MTHFR С677Т (rsl801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), обеспечивается точность исследования, т.к. у ребенка учитывается детерминация вероятных нарушений функции сердечно-сосудистой системы (экспрессия гомоцистеина), а также предрасположенность к нарушению функции детоксикации кардитропного токсиканта фенола, способного реализовать (инициировать) или усугубить имеющийся дефект (полиморфизм) гена метилентетрагидрофолатредуктазы. Поэтому по этим показателям можно судить о генетически детерминированном характере функциональных нарушений сердечно-сосудистой системы и разрабатывать индивидуальные программы диагностики и коррекции.
Благодаря использованию в качестве исследуемого материала пробы крови, а также стандартных методик изучения иммунологических параметров, обеспечивается простота, надежность и доступность исследований, а также получение результатов нужной информативности.
Установление содержания химического контаминанта - фенола, именно в крови обусловлено тем, что кровь является самой гомеостатичной средой (управляемость и регулируемость концентраций составляющих ее компонентов), имеющей реферируемые (фоновые) уровни в отношении техногенных химических веществ.
Благодаря использованию в качестве исследуемого материала буккального эпителия (пробы биологического материала со слизистой щеки), обеспечивается простота и надежность исследований, а также получение нужной информативности в плане выделения из указанной пробы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) и посредством полимеразной цепной реакции (ГЩР) проведения генотипирования полиморфизма указанных генов MTHFR и SULTIAI. При этом предлагается использовать в качестве праймера участок ДНК гена MTHFR С677Т (rsl801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), устанавливая при этом для каждого гена одно из следующих его состояний: гетерозиготное, или нормальное гомозиготное, или вариантное гомозиготное.
У гена MTHFR С677Т 2 аллеля (1 пара аллелей), С и Т (С - дикий или нормальный, Т - мутантный или вариантный), причем полиморфные генотипы - СТ (гетерозиготный) или ТТ (вариантный гомозиготный). У гена SULTIAI G2663A 2 аллеля (1 пара аллелей) G и A (G - дикий или нормальный, А - мутантный или вариантный), причем полиморфные генотипы - GA (гетерозиготный) или АА (вариантный гомозиготный).
Таким образом, при оценке влияния фенола на нарушение ССС в предлагаемом способе рекомендуется использовать следующие критерии: наличие вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена MTHFR С677Т (rs1801133) и наличие вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена гена SULTIAI G2663A (rs9282861), и превышение концентрации фенола в крови по отношению к фоновому уровню более чем в 1,5 раза.
Именно благодаря расширению информационных показателей, связанных с полиморфными вариантами генов, ассоциированных с тропной к ССС аминокислотой гомоцистеином и метаболизирующим фенол ферментом сульфотрансферазой и одновременно с количеством химического токсиканта - фенола, в крови, и будет обеспечена точность оценки модифицирующего влияния фенола на нарушение физиологической функции сердца.
Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод, что поставленный технический результат обеспечивается за счет совокупности операций предлагаемого способа, их последовательности и режимов его реализации.
Предлагаемый способ реализуется следующим образом.
1. Выбирают территорию экологического риска, характеризующуюся наличием химических токсикантов, обусловленных экологической средой обитания. Исследования были проведены на территории одного из городов Пермского края, характеризующейся наличием в атмосферном воздухе повышенных концентраций фенола (2,2 ПДКм.р.)
2. На указанной территории производят отбор группы детей одной этнической популяции. Затем производят отбор пробы крови у обследуемого ребенка в специальные пробирки с антикоагулянтом ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота) (0,05М раствор ЭДТА в соотношении 500 мкл крови на 50 мкл антикоагулянта) - для определения содержания фенола. При этом определение фенола в крови проводят методом газовой хроматографии на приборе Кристалл-5000 в соответствии с требованиями СТО, М. 12-2013 и устанавливают, имеется ли превышение концентрации этого контаминанта в пробе крови над его фоновым уровнем (в примере конкретного осуществления на территории Пермского края фоновым значением по фенолу был показатель равный 0,01±0,01 мг/л).
3. Также у указанного ребенка отбирают пробу буккального эпителия (в виде мазка со слизистой оболочки щеки), причем забор осуществляют сухими стерильными зондами с ватными тампонами вращательными движениями без травматизации после предварительного полоскания полости рта водой. После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную пробирку типа «Эппендорф» с 500 мкл транспортной среды (стерильный 0,9%-ный раствор NaCl). Конец зонда отламывают или отрезают, с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.
Далее производят выделение ДНК из пробы. Для этого пробы в количестве 100 мкл лизируют 300 мкл лизирующего раствора, представляющего собой 0,5%-ный раствор саркозила и протеиназы К (20 мг/мл) в ацетатном буфере (рН 7,5). Затем добавляют сорбент (каолин) и последовательными процедурами промывки отмывают фосфатно-солевым буфером (рН 7,2) пробы от белков и смесью изопропиловый спирт: ацетон от липидов. Нуклеиновые кислоты остаются при этом на сорбенте. Далее адсорбированные на сорбенте ДНК из пробы экстрагируют ТЕ-буфером, представляющим собой смесь 10 мМ трис-HCl и 1 мМ ЭДТА (рН 8,0). Экстракт подвергают центрифугированию. После центрифугирования пробирки надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК.
Полученный материал готов к постановке полимеразной цепной реакции (ПЦР). Полимеразную цепную реакцию проводят на детектирующем амплификаторе с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» с использованием готовых наборов праймеров и зондов производства ЗАО «Синтол», Россия, в котором в качестве праймеров использовались участки ДНК генов MTHFR C677T (rsl801133) и SULTIAI G2663A (rs9282861).
Проводят реакцию амплификации, это достигается тем, что для исследования аллельного состояния каждого гена у отдельного человека готовят свою реакционную смесь. В каждую пробирку вносят 0,1 мкл готовой смеси праймеров (принятый в генетике термин, обозначающий конечные нуклеотиды с меткой, ограничивающие (отрезающие) амплифицируемую цепочку нуклеотидов гена) и зондов для выбранных генов MTHFR С677T (rsl801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861) (использованы Наборы реагентов для определения полиморфизма MTHFR С677Т (rsl801133) и полиморфизма гена SULTIAI G2663A (rs9282861) ЗАО «Синтол», Россия). В каждую пробирку добавляют остальные компоненты необходимые для осуществления ПЦР: нуклеотиды (дезоксинуклеозидтрифосфаты: по 10 мМ дАТФ, дТТФ, дГТФ, дЦТФ), буфера (100 мМ трис-НСl-буфера, 500 мМ KCl, 40 мМ MgCl2) и Tag F-полимеразы. Вносят пробу в количестве 10 мкл. Таким образом, общий объем реакционной смеси составляет 25 мкл. Каждая пробирка плотно закрывается пробкой и устанавливается в амплификатор.
При проведении ПЦР амплификацию и детекцию проводят на детектирующем амплификаторе CFX96 фирмы Bio-Rad.
Используется универсальная программа амплификации, подобранная производителем реактивов. Она включает в себя несколько этапов: 1 этап - активация TaqF-полимеразы (режим «горячего старта») продолжается 15 мин при 95°С; 2 этап - установочные циклы амплификации без измерения флуоресценции (5 циклов); 3 этап - рабочие циклы амплификации с измерением флюоресценции (40 циклов).
Каждый цикл амплификации включает в себя денатурацию ДНК (5 с при 95°С), отжиг праймеров (20 с при 60°С) и саму реакцию полимеризации ДНК (15 с при 72°С).
Регистрация сигнала флюоресценции, возникающего при накоплении продуктов амплификации участков ДНК проводится в режиме «реального времени» после стадии отжига праймеров для выбранных генов по каналу VIC - для детекции одного из аллельных вариантов генов, и по каналу FAM - для альтернативного варианта.
Результаты интерпретируются на основании наличия (или отсутствия) пересечения кривой флюоресценции с установленной на заданном уровне пороговой линией, что соответствует наличию (или отсутствию) значения порогового цикла (N) в соответствующей графе в таблице результатов, отображаемой в программном обеспечении для амплификатора CFX96.
По соотношению пороговых циклов, полученных по двум каналам детекции, определяют состояние гена MTHFR в исследуемом участке ДНК С677Т (rs1801133), а также гена SULTIAI в исследуемом участке ДНК G2663A (rs9282861) (метод аллельной дискриминации). Возможных вариантов состояния гена было два: гомозиготное - в случае, когда одно из значений порогового цикла не определяется (ниже пороговой линии) и гетерозиготное - в случае, когда получено два значения пороговых циклов и по этим каналам получены параболические кривые флюоресценции. В зависимости от того, накопление какого продукта амплификации происходит в реакции, устанавливается гетерозиготное, или нормальное гомозиготное, или вариантное гомозиготное состояние генов MTHFR C677T (rsl801133) и SULTIAI G2663A (rs9282861).
4. И при выполнении следующих условий: наличие вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов генов MTHFR С677Т (rsl801133) и SULTIAI G2663A (rs9282861) и при превышении концентрации фенола в крови не менее, чем в 1,5 раза выше фонового уровня, диагностируют наличие у ребенка нарушения физиологической функции сердца в виде функциональной кардиопатии, под воздействием фенола.
При проведении испытаний по реализации предлагаемого способа выполнено исследование детского населения, проживающего в различных по содержанию фенола условиях среды обитания.
Были сформированы две группы: группа наблюдения, дети которой проживали на неблагополучной в отношении фенола территории, и группа сравнения, проживающая в условиях санитарно-гигиенического благополучия. В группу наблюдения вошли 112 детей (средний возраст 6,05±0,41 года; 49,1% мальчиков и 50,9% девочек). В группу сравнения вошли 88 детей (средний возраст 6,22±0,21 года; 45,5% мальчиков и 54,5% девочек). Группы были сопоставимы по тендерному, возрастному и социальным критериям.
На территориях проживания детей группы наблюдения отмечено превышение содержания фенола до 2,2 ПДК м.р.
Оценка риска здоровью детей показала, что при хронической экспозиции контаминантов коэффициенты опасности для фенола составили - до 1,12. Установлено, что хроническое ингаляционное воздействие фенола формирует опасность развития нарушений со стороны органов дыхания (индекс опасности HI - до 3,73), центральной нервной системы (HI - до 2,33) и сердечно-сосудистой системы (HI - до 2,31).
Оценка риска развития заболеваний осуществляется по стандартизованной методике в соответствии с «Руководством по оценке риска для здоровья населения при воздействии химических веществ, загрязняющих окружающую среду» (Р 2.1.10.1920-04);
Исследование содержания в крови детей химических веществ техногенного происхождения показало, что концентрация фенола в крови детей группы наблюдения была достоверно более чем в 1,5 раза выше фоновых значений и в 1,8 раза выше этого показателя группы сравнения (0,031±0,002 мг/дм3 и 0,017±0,012 мг/дм3 соответственно, р=0,001).
Функциональное исследование состояния сердечно-сосудистой системы показало, что среднегрупповое значение систолического и диастолического артериального давления у обследованных детей не имело достоверных различий (р=0,38-0,74) и соответствовало физиологической возрастной норме (р=0,42-0,87).
В тоже время, у 7,5% у детей, проживающих на территориях с неудовлетворительным качеством атмосферного воздуха по санитарно-химическим показателям, выявлено повышенное артериальное давление, отсутствующее в группе сравнения (р=0,039).
Относительный риск нарушений функциональных возможностей сердечно-сосудистой системы (адаптационного резерва) у детей группы наблюдения был в 4,7 раза выше (отношение шансов OR=4,68; доверительный интервал DI=0,94-23,22; вероятность р=0,08).
Сравнительный анализ среднегрупповых показателей электрокардиограммы у обследованных детей показал, что все параметры временных критериев зубца Р, сегмента QRS, интервалов (PQ и QT) и положения электрической оси сердца находились в пределах нормальных физиологических значений. Однако, у детей группы наблюдения частота сердечных сокращений была достоверно ниже группы сравнения аналогичной возрастной категории (80,3±5,3 уд. в мин и 88,5±3,1 уд. в мин соответственно, р=0,009).
Установлена обратная корреляционная зависимость между частотой сердечных сокращений и уровнем фенола в крови (r=-0,322, р=0,001), то есть при повышении концентрации фенола отмечается брадикардия (урежение частоты сердечных сокращений).
Исследования состояния процессов возбудимости, проводимости и автоматизма миокарда показали, что отклонения показателей от физиологической нормы зафиксированы у 73,5% детей группы наблюдения, в то время как в группе сравнения у 52,2% (р=0,005).
Наиболее частым видом патологии у детей группы наблюдения являлись нарушения процессов возбудимости в виде синусовой брадиаритмии (32,3%), которая встречалась достоверно чаще в 2,2 раза, чем в группе сравнения (14,4%, р=0,004). Синусовая брадикардия также преобладала в группе наблюдения, однако достоверных различий по частоте встречаемости со сравниваемой группой не отмечено (26,5% против 19,8% соответственно, р=0,29). В то же время, синусовая аритмия регистрировалась в 6,6 раза чаще у детей группы наблюдения по сравнению с группой сравнения (9,9% против 1,5% соответственно, р=0,029).
Относительный риск возникновения нарушений процессов возбудимости миокарда у детей группы наблюдения был в 2,5 раза выше, чем у детей, проживающих на территории санитарно-гигиенического благополучия (OR=2,54; DI=1,32-4,891; р=0,008).
Таким образом было доказано влияние фенола на возникновение нарушений у детей со стороны ССС.
Для доказательства возможности реализации предлагаемого способа и достоверности получаемых результатов, ниже приведена таблица 1, в которой представлены результаты генетических исследований детей и подтверждающий показатель - уровень гомоцистеина, вызывающего повреждение эндотелиальной ткани и нарушение развития соединительной ткани, процессов определяющих развитие функциональных нарушений сердца.
Для доказательства достоверности и точности предлагаемого способа, всем детям проведены ультразвуковые исследования сердца. Наличие МАРС (дополнительной хорды левого желудочка), служило подтверждением функциональных нарушений сердца (функциональной кардиопатии). Наличие нарушений физиологической функции сердца (наличие функциональной кардиопатии) в условиях контаминации фенолом у всех детей с данной патологией сопровождается одновременной идентификацией вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена MTHFR С677Т (rsl801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), а также превышением концентрации фенола в крови выше фонового уровня более чем в 1,5 раза.
При этом подтверждающий наличие изменений в функционировании эндотелиальной и соединительной ткани ССС уровень гомоцистеина в крови не всегда характеризовался его повышением в случае УЗИ-идентифицированной кардиопатологии (опыт 7 таблица 1), что указывает на низкую чувствительность данного теста (по гомоцистеину), не позволяющего отнести его к маркерам ранних нарушений физиологической функции сердца.
Полиморфизм гена MTHFR С677Т реализуется развитием функциональных нарушений сердца (функциональной кардиопатии) даже без фенотипически повышенного уровня гомоцистеина (опыт 10 таблица 1) при наличии дополнительно полиморфно измененного гена SULTIAI G2663A, который перестает контролировать действие внешнесредового стресс-фактора, в качестве которого выступает фенол.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет с достаточной достоверностью установить ранние нарушения физиологической функции сердца, ассоциированные с влиянием фенола, по заявляемым генетическим критериям и содержанию фенола в крови.
Claims (1)
- Способ выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом, характеризующийся тем, что производят отбор пробы крови у ребенка и определяют в пробе содержание фенола, также у указанного ребенка отбирают пробу буккального эпителия, осуществляют выделение из указанной пробы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), затем на детектирующем амплификаторе с использованием полимеразной цепной реакции ПЦР в режиме реального времени проводят генотипирование полиморфизма генов MTHFR и SULTIAI, используя в качестве праймера участок ДНК путем исследования генотипов гена MTHFR С677Т (rs1801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), устанавливая при этом для каждого из указанных генов одно из следующих его состояний: гетерозиготное, или нормальное гомозиготное, или вариантное гомозиготное, и при одновременном выполнении следующих условий: наличие вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена MTHFR С677Т (rs1801133) и гена SULTIAI G2663A (rs9282861), и при превышении концентрации фенола в крови выше фонового уровня более чем в 1,5 раза, диагностируют у ребенка наличие ранних нарушений физиологической функции сердца в виде функциональной кардиопатии, связанной с контаминацией фенолом.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017135742A RU2657821C1 (ru) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Способ выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017135742A RU2657821C1 (ru) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Способ выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2657821C1 true RU2657821C1 (ru) | 2018-06-15 |
Family
ID=62620108
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017135742A RU2657821C1 (ru) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Способ выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2657821C1 (ru) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2523418C1 (ru) * | 2013-06-06 | 2014-07-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" (ФБУН "ФНЦ медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения") | Способ оценки нарушений клеточного иммунитета при воздействии фенола |
-
2017
- 2017-10-05 RU RU2017135742A patent/RU2657821C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2523418C1 (ru) * | 2013-06-06 | 2014-07-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" (ФБУН "ФНЦ медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения") | Способ оценки нарушений клеточного иммунитета при воздействии фенола |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Е.Н.БЕРЕЗИКОВА. КЛИНИКО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ И НЕЙРОГОРМОНАЛЬНЫЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ ИШЕМИЧЕСКОГО РЕМОДЕЛИРОВАНИЯ, АПОПТОЗА МИОКАРДА И СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ: ИННОВАЦИОННАЯ СТРАТЕГИЯ ПЕРСОНАЛИЗИРОВАННОЙ ДИАГНОСТИКИ, ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ / Авто дисс. на соис. уч. степ. д.м.н., Томск, 2014. * |
Е.Н.БЕРЕЗИКОВА. КЛИНИКО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ И НЕЙРОГОРМОНАЛЬНЫЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ ИШЕМИЧЕСКОГО РЕМОДЕЛИРОВАНИЯ, АПОПТОЗА МИОКАРДА И СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ: ИННОВАЦИОННАЯ СТРАТЕГИЯ ПЕРСОНАЛИЗИРОВАННОЙ ДИАГНОСТИКИ, ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ / Автореферат дисс. на соис. уч. степ. д.м.н., Томск, 2014. Т.И. Мещерякова и др. Изучение влияния полиморфизма C677T гена MTHFR на риск формирования несиндромальных орофациальных расщелин / РОССИЙСКИЙ ВЕСТНИК ПЕРИНАТОЛОГИИ И ПЕДИАТРИИ, 2013, 3, стр. 38-41. * |
Т.И. Мещерякова и др. Изучение влияния полиморфизма C677T гена MTHFR на риск формирования несиндромальных орофациальных расщелин / РОССИЙСКИЙ ВЕСТНИК ПЕРИНАТОЛОГИИ И ПЕДИАТРИИ, 2013, 3, стр. 38-41. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101679971A (zh) | 青光眼恶化风险的判定方法 | |
US20210024999A1 (en) | Method of identifying risk for autism | |
US20120053070A1 (en) | Genetic Risk Analysis In Reward Deficiency Syndrome | |
RU2287158C1 (ru) | Способ прогнозирования развития гипертонической болезни по генетическим факторам риска | |
EP4403646A2 (en) | Dna targets as tissue-specific methylation markers | |
US20230120076A1 (en) | Dual-probe digital droplet pcr strategy for specific detection of tissue-specific circulating dna molecules | |
WO2009150221A1 (en) | A method for autism prediction | |
JP5828407B2 (ja) | 精神疾患の検査方法および精神疾患用の検査キット | |
CN108715893B (zh) | 一组与放疗引起的放射性脑损伤相关的snp标志物及其应用 | |
WO2009150218A1 (en) | A combination of risk alleles associated with autism | |
RU2458131C1 (ru) | Тест-система для определения мутаций в генах фумарилацетоацетат гидролазы и альфа-1-антитрипсина человека | |
RU2657821C1 (ru) | Способ выявления у детей ранних нарушений физиологической функции сердца в условиях контаминации фенолом | |
CN107557468B (zh) | 一种与原发性肺癌辅助诊断相关的癌-睾丸基因遗传标志物及其应用 | |
RU2469096C2 (ru) | Способ определения наследственной предрасположенности к развитию инфаркта миокарда у лиц без клинических проявлений ишемической болезни сердца | |
US20070148656A1 (en) | Method for detecting the risk of cancer, coronary heart disease, and stroke by analysing a catalase gene | |
TW201311908A (zh) | 診斷犬之青光眼的方法及套組 | |
Oh et al. | Association between common genetic variants of α2A-, α2B-, and α2C-adrenergic receptors and ischemic stroke | |
WO2015168252A1 (en) | Mitochondrial dna copy number as a predictor of frailty, cardiovascular disease, diabetes, and all-cause mortality | |
Ikeda et al. | Use of LightCycler mutation analysis to detect type II adenine phosphoribosyltransferase deficiency in two patients with 2, 8-dihydroxyadeninuria | |
EP4230736A1 (en) | Method for detecting genetic polymorphism | |
RU2688208C1 (ru) | Способ прогнозирования развития сахарного диабета 2 типа у населения башкортостана | |
WO2015037681A1 (ja) | 抗甲状腺薬誘発性無顆粒球症リスクを判定するための検査方法及び判定用キット | |
RU2650867C1 (ru) | Способ определения генетической предрасположенности к развитию панического расстройства | |
KR101981204B1 (ko) | 감각신경성 난청 진단을 위한 마커 pold1 및 그의 용도 | |
JP6829878B2 (ja) | 加齢黄斑変性の発症リスクの評価方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191006 |