RU2648452C1 - Способ получения индивидуальных каротиноидов - Google Patents
Способ получения индивидуальных каротиноидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2648452C1 RU2648452C1 RU2016148100A RU2016148100A RU2648452C1 RU 2648452 C1 RU2648452 C1 RU 2648452C1 RU 2016148100 A RU2016148100 A RU 2016148100A RU 2016148100 A RU2016148100 A RU 2016148100A RU 2648452 C1 RU2648452 C1 RU 2648452C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- carotenoids
- natural sources
- hexane
- acetone
- hydrobionts
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/56—Materials from animals other than mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/56—Materials from animals other than mammals
- A61K35/612—Crustaceans, e.g. crabs, lobsters, shrimps, krill or crayfish; Barnacles
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D11/00—Solvent extraction
- B01D11/02—Solvent extraction of solids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения индивидуальных каротиноидов из природных источников, таких как растительное сырье, гидробионты. Способ получения индивидуальных каротиноидов из природных источников, таких как растительное сырье, гидробионты, методом жидкостной экстракции с последующим разделением каротиноидов методом колоночной хроматографии с сорбентом - оксидом алюминия, при этом при жидкостной экстракции природных источников используется один из растворителей - спирт этиловый 96%, ацетон, хлороформ, гексан, выдерживается гидромодуль 1:5, кратность экстракции - 3, первичный экстракт обрабатывают раствором натрия гидрокарбоната с концентрацией от 4% до 10%, промывают до нейтральной реакции среды, объединяют экстракты, удаляют избыток растворителей, полученный сухой экстракт растворяют в н-гексане, разделение фракций на индивидуальные каротиноиды проводят методом колоночной хроматографии, дополнительно используя второй сорбент - магния оксид и следующие элюенты: петролейный эфир, диэтиловый эфир, ацетон, спирт этиловый 96%. Вышеописанный способ не требует сложного и дорогостоящего технического оснащения, позволяет эффективно получать индивидуальные каротиноиды из растительного сырья, гидробионтов.
Description
Изобретение относится к фармации, в частности к химико-фармацевтической отрасли, и касается способа получения индивидуальных каротиноидов, а также может найти применение для получения лекарственных препаратов на основе индивидуальных каротиноидов.
Каротиноиды, как правило, получают путем микробиологического или химического синтеза и/или выделением из природных источников.
При микробиологическом синтезе каротиноидов традиционно, в качестве продуцентов, используются мицелиальный гриб Blakeslea trispora и дрожжи, принадлежащие роду Phaffia, в частности Phaffia rhodozyma [Промышленная микробиология / под ред. Н.С. Егорова. - М.: Высшая школа, 1989. С. 310-322; заявка на выдачу патента РФ на изобретение № 99120113].
Для повышения выхода целевого продукта штаммы продуценты (штаммы бактерий, грибов, водорослей или растений) подвергают генной модификации с применением различных мутагенных факторов [заявка на выдачу патента РФ на изобретение №2004126703; заявка на выдачу патента РФ на изобретение №; патент РФ на изобретение №2005125072].
Недостатком этого подхода является наличие соответствующих штаммов, официально разрешенных для производства каротиноидов, а также необходимость создания специальных условий для содержания штаммов и сложность контроля химической чистоты целевого продукта. Решение этой проблемы достигается генной модификацией штаммов и использованием других культур, что является достаточно трудоемким и затратным подходом [заявка на выдачу патента РФ на изобретение №2011110739; патент РФ на изобретение №2385925; патент РФ на изобретение №2115678; патент РФ на изобретение №2126806].
Сравнительно небольшое количество исследований посвящено проблеме химического синтеза каротиноидов: известен способ синтеза кантаксантана и астаксантина, основанный на окислении β-каротина до кантаксантина, а лютеина и зеаксантина до астаксантина [заявка на выдачу патента РФ на изобретение №2008110066]. Нужный уровень чистоты целевого продукта при химическом синтезе достигается путем высокой затратности технологии.
Чаще всего каротиноиды выделяют из различных природных источников экстракционными способами.
Описаны способы экстракции каротиноидов из гидробионтов. Например, для получения каротиноидов криля предлагается использовать ацетон или другие кетоновые растворители [патент РФ на изобретение № 2236441], которые необходимо будет нормировать в конечном фармацевтическом продукте.
В ряде патентов [патенты РФ на изобретение №2292163, №2398590, №2522831] технологическая схема предусматривает долговременную - от 1 до 7 часов, термическую обработку исходного сырья, что, вероятней всего, приведет к частичной деструкции каротиноидов, их изомеризации и, как следствие, к их инактивации.
Известен способ выделения ксантофиллов из растительного сырья [патент РФ на изобретение №2436771], согласно которому предлагается выделять ксантофиллы экстракцией н-гексаном или петролейным эфиром при комнатной температуре с последующим добавлением в экстракт силикагеля. Далее силикагель с адсорбированными ксантофиллами отделяют от раствора и удаляют остатки растворителя. Для получения целевого продукта силикагель с адсорбированными на нем ксантофиллами переносят в любое растительное масло и проводят десорбцию, перемешивая смесь до обесцвечивания силикагеля.
Описан способ получения концентрата каротиноидов, предусматривающий экстракцию сухого, измельченного жома плодов рябины обыкновенной Sorbus aucuparia L. 4-кратным объемом дихлордифторметана в течение 3 часов [патент РФ на изобретение №1557716]. Авторы заявки предлагают получать концентрат каротиноидов из кожицы томатов экстракцией хлористым метиленом (дихлорметаном) в присутствии сефадекса [заявка на выдачу патента РФ на изобретение №92005168].
Существенным недостатком описанных выше способов является то, что в природе не существует источников, содержащих или только каротины, или только ксантофиллы. Растворимость каротиноидов такова, что невозможно только путем экстракции разделить эти подклассы каротиноидов, кроме того, использованные растворители экстрагируют не только каротиноиды, но и другие фракции липофильных соединений. Предлагаемые силикагель и сефадекс не являются селективными адсорбентами для каротиноидов, поэтому в конечном продукте будут содержаться все липофильные соединения, а это значит, что прямая адсорбция каротиноидов на поверхности сорбента, добавленного в первичный экстракт, не позволяет получить целевой продукт высокой степени чистоты.
Все же, получение каротиноидов из природных источников является подходом, позволяющим использовать масштабный экологичный ресурс и проводить ресурсосберегающую политику в процессе переработки сельскохозяйственных культур. При этом остается открытым вопрос о чистоте конечного полученного продукта.
Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ получения каротиноидов из растительного сырья [Курегян А.Г., Печинский С.В. Способ получения каротиноидов из растительного сырья // Современная медицина актуальные вопросы, Новосибирск: СибАК. 2013. С. 94-99], который принят за прототип. Согласно прототипу исходное сырье без предварительной сушки измельчают в присутствии натрия гидрокарбоната в массовом соотношении 1:10. Далее однократную первичную экстракцию проводят смесью ацетона и метилового спирта (3:1), экстракты фильтруют и уменьшают объем в роторном испарителе примерно в два раза. К полученному раствору прибавляют гексан, полученный суммарный экстракт растворяют в спирте этиловом 96%. К полученному экстракту добавляют раствор калия гидроксида 50%. Раствор помещают в темное место на 8-10 часов. Далее полученный экстракт промывают до полного удаления калия гидроксида. Объем полученного экстракта уменьшают в роторном испарителе до 0,5 мл. Разделение суммы каротиноидов проводят на колонке, заполненной алюминия оксидом, элюент - гексан, смесь гексан - диэтиловый эфир (1:1) и смесь диэтиловый эфир и спирт этиловый 96% (20:1).
Заявляемое изобретение ставит своей целью разработку унифицированного способа получения индивидуальных каротиноидов из различных природных источников, в частности растительных и гидробионтов.
Сущность предлагаемого изобретения заключается в следующем: все виды исходного сырья (мякоть плодов тыквы, корнеплоды моркови, плоды томатов, плоды облепихи, панцири креветок, зерна кукурузы и др.) предварительно сушат до содержания влаги не более 15% в сушильном шкафу при температуре не более 30°C, предохраняя таким образом нативные каротиноиды от деструкции. Далее сырье измельчают до размеров частиц не более 0,5 мм, используя смешенный тип измельчения (продольно-поперечная резка). Извлечение суммы каротиноидов проводят методом многоступенчатой жидкостной экстракции, а именно трехкратной экстракцией одним из растворителей: спирт этиловый 95%, ацетон, хлороформ, гексан, выдерживая величину гидромодуля 1:5. Полученный первичный экстракт обрабатывают раствором натрия гидрокарбоната с концентрацией от 4% до 10%, промывают до нейтральной реакции среды (по универсальному индикатору), объединяют, удаляют избыток растворителей в вакуумном испарителе. Полученный сухой экстракт растворяют в н-гексане. Разделение суммарного экстракта на индивидуальные каротиноиды проводят методом колоночной хроматографии, используя два сорбента - магния оксид и алюминия оксид, подвижной фазой являются петролейный эфир, диэтиловый эфир, ацетон, спирт этиловый 96%. Полученные индивидуальные каротиноиды сушат в вакуумном испарителе, упаковывают в ампулы темного стекла, маркируют.
Таким образом, отличительными признаками изобретения являются следующие особенности:
- все исходное сырье необходимо сушить до содержания остаточной влаги не более 15%;
- первичную экстракцию проводят одним из растворителей: спиртом этиловым 96%, ацетоном, хлороформом, гексаном, выдерживая соотношение сырье:растворитель 1:5;
- кратность экстракции - 3;
- первичный экстракт обрабатывают раствором натрия гидрокарбоната с концентрацией от 4% до 10%;
- разделение фракций на индивидуальные каротиноиды проводят на колонке, заполненной двумя сорбентами: алюминия оксидом для хроматографии III степени активности и магния оксидом, используя в качестве элюентов петролейный эфир, диэтиловый эфир, ацетон, спирт этиловый 96%.
Предлагаемый способ позволяет получить индивидуальные каротиноиды из различных видов сырья методом жидкостной экстракции, которые могут быть использованы для создания лекарственных средств. Способ не требует сложного и дорогостоящего технического оснащения и при необходимости может быть использован для получения суммы каротиноидов, что важно при оценке качества сырьевых источников.
Claims (1)
- Способ получения индивидуальных каротиноидов из природных источников, таких как растительное сырье, гидробионты, методом жидкостной экстракции с последующим разделением каротиноидов методом колоночной хроматографии с сорбентом - оксидом алюминия, отличающийся тем, что при жидкостной экстракции природных источников используется один из растворителей - спирт этиловый 96%, ацетон, хлороформ, гексан, выдерживается гидромодуль 1:5, кратность экстракции - 3, первичный экстракт обрабатывают раствором натрия гидрокарбоната с концентрацией от 4% до 10%, промывают до нейтральной реакции среды, объединяют экстракты, удаляют избыток растворителей, полученный сухой экстракт растворяют в н-гексане, разделение фракций на индивидуальные каротиноиды проводят методом колоночной хроматографии, дополнительно используя второй сорбент - магния оксид и следующие элюенты: петролейный эфир, диэтиловый эфир, ацетон, спирт этиловый 96%.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016148100A RU2648452C1 (ru) | 2016-12-07 | 2016-12-07 | Способ получения индивидуальных каротиноидов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016148100A RU2648452C1 (ru) | 2016-12-07 | 2016-12-07 | Способ получения индивидуальных каротиноидов |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2648452C1 true RU2648452C1 (ru) | 2018-03-26 |
Family
ID=61707959
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016148100A RU2648452C1 (ru) | 2016-12-07 | 2016-12-07 | Способ получения индивидуальных каротиноидов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2648452C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2761524C1 (ru) * | 2021-03-09 | 2021-12-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) | Способ получения каротиноидного комплекса из морских звезд |
RU2811762C1 (ru) * | 2023-04-24 | 2024-01-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Северо-Кавказский федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделия" | Способ получения концентрата каротиноидов из выжимок томатов |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2224012C2 (ru) * | 1998-05-11 | 2004-02-20 | Зигфрид ПЕТЕР | Способ извлечения каротина из каротиносодержащих материалов |
CN101209985A (zh) * | 2006-12-29 | 2008-07-02 | 河南农业大学 | 超临界co2提取烟叶中类胡萝卜素的方法及其在卷烟加香中的应用 |
RU2475541C1 (ru) * | 2011-09-26 | 2013-02-20 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ЮЖНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДЕИНОКСАНТИНА - КАРОТИНОИДА МИКРООРГАНИЗМА Deinococcus radiodurans |
-
2016
- 2016-12-07 RU RU2016148100A patent/RU2648452C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2224012C2 (ru) * | 1998-05-11 | 2004-02-20 | Зигфрид ПЕТЕР | Способ извлечения каротина из каротиносодержащих материалов |
CN101209985A (zh) * | 2006-12-29 | 2008-07-02 | 河南农业大学 | 超临界co2提取烟叶中类胡萝卜素的方法及其在卷烟加香中的应用 |
RU2475541C1 (ru) * | 2011-09-26 | 2013-02-20 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ЮЖНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДЕИНОКСАНТИНА - КАРОТИНОИДА МИКРООРГАНИЗМА Deinococcus radiodurans |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Курегян А.Г. и др. Способ получения каротиноидов из растительного сырья // Современная медицина актуальные вопросы, Новосибирск: СибАк. 2013., стр.94-99. * |
Курегян А.Г. и др. Способ получения каротиноидов из растительного сырья // Современная медицина актуальные вопросы, Новосибирск: СибАк. 2013., стр.94-99. Курегян А.Г. Изучение каротиноидов тыквы методами спектрофотометрии и тонкослойной хроматографии //Современные проблемы науки и образования, N1, часть 2, 2015. * |
Курегян А.Г. Изучение каротиноидов тыквы методами спектрофотометрии и тонкослойной хроматографии //Современные проблемы науки и образования, N1, часть 2, 2015. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2761524C1 (ru) * | 2021-03-09 | 2021-12-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) | Способ получения каротиноидного комплекса из морских звезд |
RU2811762C1 (ru) * | 2023-04-24 | 2024-01-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Северо-Кавказский федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделия" | Способ получения концентрата каротиноидов из выжимок томатов |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Chan et al. | Characterization, extraction and purification of lutein produced by an indigenous microalga Scenedesmus obliquus CNW-N | |
Kehili et al. | Supercritical CO2 extraction and antioxidant activity of lycopene and β-carotene-enriched oleoresin from tomato (Lycopersicum esculentum L.) peels by-product of a Tunisian industry | |
Mezzomo et al. | Carotenoids functionality, sources, and processing by supercritical technology: a review | |
Mendiola et al. | Screening of functional compounds in supercritical fluid extracts from Spirulina platensis | |
Gilbert-López et al. | Downstream processing of Isochrysis galbana: a step towards microalgal biorefinery | |
Castro-Puyana et al. | Optimization of clean extraction methods to isolate carotenoids from the microalga Neochloris oleoabundans and subsequent chemical characterization using liquid chromatography tandem mass spectrometry | |
Wu et al. | Supercritical fluid extraction and determination of lutein in heterotrophically cultivated Chlorella pyrenoidosa | |
Crupi et al. | Determination of fucoxanthin isomers in microalgae (Isochrysis sp.) by high‐performance liquid chromatography coupled with diode‐array detector multistage mass spectrometry coupled with positive electrospray ionization | |
Deli et al. | Carotenoid composition of three bloom-forming algae species | |
US9315434B2 (en) | Method for preparing a composition rich in lutein produced by microalgae | |
Gallego et al. | Simultaneous extraction and purification of fucoxanthin from Tisochrysis lutea microalgae using compressed fluids | |
Kuczynska et al. | Isolation and purification of all-trans diadinoxanthin and all-trans diatoxanthin from diatom Phaeodactylum tricornutum | |
EP2246327A9 (en) | A process for isolation of lutein and zeaxanthin crystals from plant sources | |
Vendruscolo et al. | Development of a new method for simultaneous extraction of chlorophylls and carotenoids from microalgal biomass | |
Low et al. | An optimized strategy for lutein production via microwave-assisted microalgae wet biomass extraction process | |
RU2648452C1 (ru) | Способ получения индивидуальных каротиноидов | |
Gayathri et al. | Spectral characterization of β, ε-carotene-3, 3′-diol (lutein) from marine microalgae Chlorella salina | |
JP3944532B2 (ja) | 高純度β−クリプトキサンチンの製造方法 | |
Kharkongor et al. | Spatial and temporal variation of carotenoids in four species of Trentepohlia (Trentepohliales, Chlorophyta) | |
KR20120114577A (ko) | 클로렐라의 배양방법 및 클로렐라로부터 베타카로틴을 추출하는 방법 | |
da Silva Andrade et al. | Production of β-carotene by a newly isolated Rhodotorula Glutinis UCP1555 strain and cytotoxic effect evaluation | |
CN110229089B (zh) | 一种双溶剂结合中压液相色谱分纯化高纯度斑蝥黄的方法 | |
Riggi | Recent patents on the extraction of carotenoids | |
Kumari et al. | Extraction and estimation of provitamin A carotenoids from carrot | |
Ghahari et al. | Isolation, Purification and Identification of β-carotene from Azolla Pinnata R. Br. as a New Carotenoid Wealthy Source |