RU2640596C2 - Терапевтическое применение соединений - Google Patents
Терапевтическое применение соединений Download PDFInfo
- Publication number
- RU2640596C2 RU2640596C2 RU2013127187A RU2013127187A RU2640596C2 RU 2640596 C2 RU2640596 C2 RU 2640596C2 RU 2013127187 A RU2013127187 A RU 2013127187A RU 2013127187 A RU2013127187 A RU 2013127187A RU 2640596 C2 RU2640596 C2 RU 2640596C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vpa
- acid
- compounds
- fatty acids
- effect
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 117
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 title description 11
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 56
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 28
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 22
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- OARDBPIZDHVTCK-UHFFFAOYSA-N 2-butyloctanoic acid Chemical compound CCCCCCC(C(O)=O)CCCC OARDBPIZDHVTCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 239000001131 (4R)-4-methylnonanoic acid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- SHTJBHFHMAKAPT-UHFFFAOYSA-N 3-methylundecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(C)CC(O)=O SHTJBHFHMAKAPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- PWKJMPFEQOHBAC-UHFFFAOYSA-N 4-Ethyloctanoic acid Chemical compound CCCCC(CC)CCC(O)=O PWKJMPFEQOHBAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- WQTZCQIRCYSUBQ-UHFFFAOYSA-N 4-Methylnonanoic acid Chemical compound CCCCCC(C)CCC(O)=O WQTZCQIRCYSUBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 claims description 44
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 claims description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 132
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 38
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 abstract description 6
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 abstract description 2
- 208000007101 Muscle Cramp Diseases 0.000 abstract 1
- NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N Valproic acid Chemical compound CCCC(C(O)=O)CCC NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 429
- 229960000604 valproic acid Drugs 0.000 description 212
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 82
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 82
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 82
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 81
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 78
- 150000003906 phosphoinositides Chemical class 0.000 description 58
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 57
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 56
- 150000003907 phosphatidylinositol monophosphates Chemical class 0.000 description 47
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 39
- 241000224495 Dictyostelium Species 0.000 description 37
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 37
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 36
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 31
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 30
- 239000001706 (4R)-4-methyloctanoic acid Substances 0.000 description 29
- VUDQSRFCCHQIIU-UHFFFAOYSA-N 1-(3,5-dichloro-2,6-dihydroxy-4-methoxyphenyl)hexan-1-one Chemical compound CCCCCC(=O)C1=C(O)C(Cl)=C(OC)C(Cl)=C1O VUDQSRFCCHQIIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- LEGGANXCVQPIAI-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-octanoic acid Chemical compound CCCCC(C)CCC(O)=O LEGGANXCVQPIAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 28
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 28
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 26
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 24
- 208000020925 Bipolar disease Diseases 0.000 description 20
- 230000001787 epileptiform Effects 0.000 description 20
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 15
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 15
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 14
- 238000011161 development Methods 0.000 description 14
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 14
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 208000005809 status epilepticus Diseases 0.000 description 14
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 13
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 239000003358 phospholipase A2 inhibitor Substances 0.000 description 13
- 208000019695 Migraine disease Diseases 0.000 description 12
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 12
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 11
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 11
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 11
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 11
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 11
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 10
- 206010027599 migraine Diseases 0.000 description 10
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 9
- 102000003993 Phosphatidylinositol 3-kinases Human genes 0.000 description 9
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N coenzime A Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000005516 coenzyme A Substances 0.000 description 9
- 229940093530 coenzyme a Drugs 0.000 description 9
- KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N dephosphocoenzyme A Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 9
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- -1 phosphatidylinositol diphosphate Chemical class 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 101710144867 Inositol monophosphatase Proteins 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 8
- CWRVKFFCRWGWCS-UHFFFAOYSA-N Pentrazole Chemical compound C1CCCCC2=NN=NN21 CWRVKFFCRWGWCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 8
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 8
- 102000006029 inositol monophosphatase Human genes 0.000 description 8
- 229960005152 pentetrazol Drugs 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 7
- RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N CoASH Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N 0.000 description 7
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 7
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 7
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 7
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 7
- BMQNWLUEXNQIGL-UHFFFAOYSA-N nonanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCC(O)=O BMQNWLUEXNQIGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 7
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 7
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 7
- 206010008748 Chorea Diseases 0.000 description 6
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 206010026749 Mania Diseases 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 206010043275 Teratogenicity Diseases 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 208000012601 choreatic disease Diseases 0.000 description 6
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 6
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 6
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 6
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 6
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 6
- FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N noncarboxylic acid Natural products CCCCCCCCC(O)=O FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 6
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 6
- 231100000211 teratogenicity Toxicity 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 229960001930 valpromide Drugs 0.000 description 6
- OMOMUFTZPTXCHP-UHFFFAOYSA-N valpromide Chemical compound CCCC(C(N)=O)CCC OMOMUFTZPTXCHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YCYMCMYLORLIJX-UHFFFAOYSA-N 2-propyloctanoic acid Chemical compound CCCCCCC(C(O)=O)CCC YCYMCMYLORLIJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000006096 Attention Deficit Disorder with Hyperactivity Diseases 0.000 description 5
- 208000036864 Attention deficit/hyperactivity disease Diseases 0.000 description 5
- 101150047344 Plaa gene Proteins 0.000 description 5
- MMWCIQZXVOZEGG-HOZKJCLWSA-N [(1S,2R,3S,4S,5R,6S)-2,3,5-trihydroxy-4,6-diphosphonooxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@H]1OP(O)(O)=O MMWCIQZXVOZEGG-HOZKJCLWSA-N 0.000 description 5
- 208000015802 attention deficit-hyperactivity disease Diseases 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 5
- 230000004129 fatty acid metabolism Effects 0.000 description 5
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- GYSCBCSGKXNZRH-UHFFFAOYSA-N 1-benzothiophene-2-carboxamide Chemical compound C1=CC=C2SC(C(=O)N)=CC2=C1 GYSCBCSGKXNZRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N Decanoic acid Natural products CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101001095266 Homo sapiens Prolyl endopeptidase Proteins 0.000 description 4
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000018463 Myo-Inositol-1-Phosphate Synthase Human genes 0.000 description 4
- 108091000020 Myo-Inositol-1-Phosphate Synthase Proteins 0.000 description 4
- 102000056251 Prolyl Oligopeptidases Human genes 0.000 description 4
- 108010079194 Type C Phospholipases Proteins 0.000 description 4
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 4
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 4
- KEMQGTRYUADPNZ-UHFFFAOYSA-N heptadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O KEMQGTRYUADPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 230000009038 pharmacological inhibition Effects 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000003390 teratogenic effect Effects 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000001373 (E)-2-methylpent-2-enoic acid Substances 0.000 description 3
- JJYWRQLLQAKNAD-UHFFFAOYSA-N 2-Methyl-2-pentenoic acid Natural products CCC=C(C)C(O)=O JJYWRQLLQAKNAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JJYWRQLLQAKNAD-PLNGDYQASA-N 2-methyl-2-pentenoic acid Chemical compound CC\C=C(\C)C(O)=O JJYWRQLLQAKNAD-PLNGDYQASA-N 0.000 description 3
- ODPKTGAWWHZBOY-UHFFFAOYSA-N 2-propan-2-ylpentanoic acid Chemical compound CCCC(C(C)C)C(O)=O ODPKTGAWWHZBOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 3
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- 101100226905 Dictyostelium discoideum fcsA gene Proteins 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 102000017343 Phosphatidylinositol kinases Human genes 0.000 description 3
- 108050005377 Phosphatidylinositol kinases Proteins 0.000 description 3
- 102000014384 Type C Phospholipases Human genes 0.000 description 3
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000003816 axenic effect Effects 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000002920 convulsive effect Effects 0.000 description 3
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 210000001353 entorhinal cortex Anatomy 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 210000000020 growth cone Anatomy 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 229930193708 latrunculin Natural products 0.000 description 3
- 230000034701 macropinocytosis Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 3
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 3
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000016515 regulation of signal transduction Effects 0.000 description 3
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 3
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IGIDLTISMCAULB-YFKPBYRVSA-N (3s)-3-methylpentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)CC(O)=O IGIDLTISMCAULB-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 125000006552 (C3-C8) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000001798 (E)-2,4-dimethylpent-2-enoic acid Substances 0.000 description 2
- DMHLGGQHOSTMJG-XQRVVYSFSA-N (z)-2,4-dimethylpent-2-enoic acid Chemical compound CC(C)\C=C(\C)C(O)=O DMHLGGQHOSTMJG-XQRVVYSFSA-N 0.000 description 2
- 108010052341 1-phosphatidylinositol-4-phosphate 5-kinase Proteins 0.000 description 2
- FLTJDUOFAQWHDF-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylhexane Chemical compound CCCCC(C)(C)C FLTJDUOFAQWHDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVSWJIKNEAIKJW-UHFFFAOYSA-N 2-Methylheptane Chemical compound CCCCCC(C)C JVSWJIKNEAIKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XMVBHZBLHNOQON-UHFFFAOYSA-N 2-butyl-1-octanol Chemical compound CCCCCCC(CO)CCCC XMVBHZBLHNOQON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVBFMEVBMNZIBR-UHFFFAOYSA-N 2-methylvaleric acid Chemical compound CCCC(C)C(O)=O OVBFMEVBMNZIBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DIVCBWJKVSFZKJ-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-hexanoic acid Chemical compound CCC(C)CCC(O)=O DIVCBWJKVSFZKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHPUGCYGQWGLJL-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-hexanoic acid Chemical compound CC(C)CCCC(O)=O MHPUGCYGQWGLJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 102100037458 Dephospho-CoA kinase Human genes 0.000 description 2
- 241000168726 Dictyostelium discoideum Species 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001036711 Gallus gallus Heat shock protein beta-1 Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019851 Hepatotoxicity Diseases 0.000 description 2
- 102000003964 Histone deacetylase Human genes 0.000 description 2
- 108090000353 Histone deacetylase Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 2
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 2
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 2
- 102100037611 Lysophospholipase Human genes 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- KWKZCGMJGHHOKJ-ZKWNWVNESA-N Methyl Arachidonyl Fluorophosphonate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCP(F)(=O)OC KWKZCGMJGHHOKJ-ZKWNWVNESA-N 0.000 description 2
- 108010058864 Phospholipases A2 Proteins 0.000 description 2
- 241000588746 Raoultella planticola Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 238000010162 Tukey test Methods 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- IGIDLTISMCAULB-UHFFFAOYSA-N anteisohexanoic acid Natural products CCC(C)CC(O)=O IGIDLTISMCAULB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001773 anti-convulsant effect Effects 0.000 description 2
- 229960003965 antiepileptics Drugs 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 108010049285 dephospho-CoA kinase Proteins 0.000 description 2
- AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N diazepam Chemical compound N=1CC(=O)N(C)C2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003529 diazepam Drugs 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- QAOXMQCWUWZZNC-UHFFFAOYSA-N gamma-Methyl-alpha-butylen-alpha-carbonsaeure Natural products CC(C)C=CC(O)=O QAOXMQCWUWZZNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007686 hepatotoxicity Effects 0.000 description 2
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 2
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-N isocaproic acid Chemical compound CC(C)CCC(O)=O FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 2
- 230000006372 lipid accumulation Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- GYHFUZHODSMOHU-UHFFFAOYSA-N nonanal Chemical compound CCCCCCCCC=O GYHFUZHODSMOHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 2
- NUJGJRNETVAIRJ-UHFFFAOYSA-N octanal Chemical compound CCCCCCCC=O NUJGJRNETVAIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- HUPQYPMULVBQDL-UHFFFAOYSA-N pentanoic acid Chemical compound CCCCC(O)=O.CCCCC(O)=O HUPQYPMULVBQDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- GOZDTZWAMGHLDY-UHFFFAOYSA-L sodium picosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC(OS(=O)(=O)[O-])=CC=C1C(C=1N=CC=CC=1)C1=CC=C(OS([O-])(=O)=O)C=C1 GOZDTZWAMGHLDY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 231100000378 teratogenic Toxicity 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 2
- 229930195735 unsaturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QCHFTSOMWOSFHM-WPRPVWTQSA-N (+)-Pilocarpine Chemical compound C1OC(=O)[C@@H](CC)[C@H]1CC1=CN=CN1C QCHFTSOMWOSFHM-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- OBETXYAYXDNJHR-SSDOTTSWSA-M (2r)-2-ethylhexanoate Chemical compound CCCC[C@@H](CC)C([O-])=O OBETXYAYXDNJHR-SSDOTTSWSA-M 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSJBHWGZQXGMNL-UHFFFAOYSA-N 1,2,2,3-tetramethylcyclopropane-1-carboxylic acid Chemical compound CC1C(C)(C)C1(C)C(O)=O KSJBHWGZQXGMNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010029190 1-Phosphatidylinositol 4-Kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000001556 1-Phosphatidylinositol 4-Kinase Human genes 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- INAPMGSXUVUWAF-UOTPTPDRSA-N 1D-myo-inositol 1-phosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O INAPMGSXUVUWAF-UOTPTPDRSA-N 0.000 description 1
- IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 2,2'-piperazine-1,4-diylbisethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLFAFRJZNUBKDM-UHFFFAOYSA-N 2,2,3,3-tetramethylcyclopropane-1-carboxamide Chemical compound CC1(C)C(C(N)=O)C1(C)C JLFAFRJZNUBKDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGUAPYRHJPWVEM-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethyl-4-pentenoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)(C)CC=C BGUAPYRHJPWVEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEITVXXUGPNCQP-UHFFFAOYSA-N 2,2-diphenylacetic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C(=O)O)C1=CC=CC=C1.C=1C=CC=CC=1C(C(=O)O)C1=CC=CC=C1 LEITVXXUGPNCQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 2,4-Hexadienoic acid, potassium salt (1:1), (2E,4E)- Chemical compound [K+].CC=CC=CC([O-])=O CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZSDQQJHSRVEGTJ-UHFFFAOYSA-N 2-(6-amino-1h-indol-3-yl)acetonitrile Chemical compound NC1=CC=C2C(CC#N)=CNC2=C1 ZSDQQJHSRVEGTJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XULHFMYCBKQGEE-MRXNPFEDSA-N 2-Hexyl-1-decanol Natural products CCCCCCCC[C@H](CO)CCCCCC XULHFMYCBKQGEE-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 1
- JNSSVMGPTZYYIW-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-6-methyl-1-oxidopyridin-1-ium Chemical compound CC1=CC=CC(Cl)=[N+]1[O-] JNSSVMGPTZYYIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XULHFMYCBKQGEE-UHFFFAOYSA-N 2-hexyl-1-Decanol Chemical compound CCCCCCCCC(CO)CCCCCC XULHFMYCBKQGEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CVKMFSAVYPAZTQ-UHFFFAOYSA-N 2-methylhexanoic acid Chemical compound CCCCC(C)C(O)=O CVKMFSAVYPAZTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLNIVBFEUDBHBP-UHFFFAOYSA-N 2-propan-2-ylpentanamide Chemical compound CCCC(C(C)C)C(N)=O PLNIVBFEUDBHBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LASHFHLFDRTERB-UHFFFAOYSA-N 2-propylpentan-1-ol Chemical compound CCCC(CO)CCC LASHFHLFDRTERB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MLMQPDHYNJCQAO-UHFFFAOYSA-N 3,3-dimethylbutyric acid Chemical compound CC(C)(C)CC(O)=O MLMQPDHYNJCQAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OILUAKBAMVLXGF-UHFFFAOYSA-N 3,5,5-trimethyl-hexanoic acid Chemical compound OC(=O)CC(C)CC(C)(C)C OILUAKBAMVLXGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZDIXEQISPGRDEB-UHFFFAOYSA-N 3-Methyl-nonanoic acid Chemical compound CCCCCCC(C)CC(O)=O ZDIXEQISPGRDEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GSZKHLKKYPBXKM-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-2-propan-2-ylbutanoic acid Chemical compound CC(C)C(C(C)C)C(O)=O GSZKHLKKYPBXKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNPZXLANENFTFK-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-4-pentenoic acid Chemical compound C=CC(C)CC(O)=O QNPZXLANENFTFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXDRRSIWCCBLOE-UHFFFAOYSA-N 3-methylbutanoic acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O.CC(C)CC(O)=O OXDRRSIWCCBLOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMCZNMMGLSHOHY-UHFFFAOYSA-N 3-methylpentanoic acid Chemical compound CC(CC(=O)O)CC.CC(CC(=O)O)CC BMCZNMMGLSHOHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KJWHPHLLQVDZFV-UHFFFAOYSA-N 4-methylpentanoic acid Chemical compound CC(C)CCC(O)=O.CC(C)CCC(O)=O KJWHPHLLQVDZFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFYBLWOFVHMUAZ-UHFFFAOYSA-N 4-propyldodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(CCC)CCC(O)=O AFYBLWOFVHMUAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXHYRVBSBMMHPS-UHFFFAOYSA-N 4-propylnonanoic acid Chemical compound CCCCCC(CCC)CCC(O)=O KXHYRVBSBMMHPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006112 ATPases Proteins 0.000 description 1
- 102100022089 Acyl-[acyl-carrier-protein] hydrolase Human genes 0.000 description 1
- 102000057290 Adenosine Triphosphatases Human genes 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000244203 Caenorhabditis elegans Species 0.000 description 1
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N Caprylic acid Natural products CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 1
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 101100226906 Dictyostelium discoideum fcsB gene Proteins 0.000 description 1
- 241001400238 Dictyostelium medium Species 0.000 description 1
- 108010039731 Fatty Acid Synthases Proteins 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 101710113802 Inositol-3-phosphate synthase Proteins 0.000 description 1
- 102100036881 Inositol-3-phosphate synthase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710090028 Inositol-3-phosphate synthase 1 Proteins 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012828 PI3K inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000007990 PIPES buffer Substances 0.000 description 1
- 108010014865 PLIalpha Proteins 0.000 description 1
- 102000014160 PTEN Phosphohydrolase Human genes 0.000 description 1
- 108010011536 PTEN Phosphohydrolase Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 244000025272 Persea americana Species 0.000 description 1
- 235000008673 Persea americana Nutrition 0.000 description 1
- CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N Phenytoin Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123898 Phospholipase A2 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 1
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- QCHFTSOMWOSFHM-UHFFFAOYSA-N SJ000285536 Natural products C1OC(=O)C(CC)C1CC1=CN=CN1C QCHFTSOMWOSFHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010052164 Sodium Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000018674 Sodium Channels Human genes 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N Valeric acid Natural products CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000021017 Weight Gain Diseases 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N [(2r,3s,5r,6r)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical compound OC1[C@H](O)[C@@H](O)C(OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KNYAHOBESA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] dihydroxyphosphoryl hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)O[32P](O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KNYAHOBESA-N 0.000 description 1
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 1
- 229940124532 absorption promoter Drugs 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000001171 adenosinetriphosphoric effect Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- OBETXYAYXDNJHR-UHFFFAOYSA-N alpha-ethylcaproic acid Natural products CCCCC(CC)C(O)=O OBETXYAYXDNJHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CEGOLXSVJUTHNZ-UHFFFAOYSA-K aluminium tristearate Chemical compound [Al+3].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CEGOLXSVJUTHNZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940063655 aluminum stearate Drugs 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003574 anti-allodynic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- GONOPSZTUGRENK-UHFFFAOYSA-N benzyl(trichloro)silane Chemical compound Cl[Si](Cl)(Cl)CC1=CC=CC=C1 GONOPSZTUGRENK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006696 biosynthetic metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229960000623 carbamazepine Drugs 0.000 description 1
- FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N carbamazepine Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2N(C(=O)N)C2=CC=CC=C21 FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005392 carboxamide group Chemical group NC(=O)* 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 239000013000 chemical inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 238000004296 chiral HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- HABLENUWIZGESP-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCC(O)=O HABLENUWIZGESP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001947 dentate gyrus Anatomy 0.000 description 1
- GXGAKHNRMVGRPK-UHFFFAOYSA-N dimagnesium;dioxido-bis[[oxido(oxo)silyl]oxy]silane Chemical compound [Mg+2].[Mg+2].[O-][Si](=O)O[Si]([O-])([O-])O[Si]([O-])=O GXGAKHNRMVGRPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- WLGSIWNFEGRXDF-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCC(O)=O WLGSIWNFEGRXDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008579 epileptogenesis Effects 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000010448 genetic screening Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229960005150 glycerol Drugs 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 1
- JLRBNGCMXSGALP-UHFFFAOYSA-N heptanoic acid Chemical compound CCCCCCC(O)=O.CCCCCCC(O)=O JLRBNGCMXSGALP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000013403 hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 208000035231 inattentive type attention deficit hyperactivity disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 229940102213 injectable suspension Drugs 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- OAOABCKPVCUNKO-UHFFFAOYSA-N isodecanoic acid Natural products CC(C)CCCCCCC(O)=O OAOABCKPVCUNKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N isopentane Chemical compound CCC(C)C QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- NSHPHXHGRHSMIK-IWQSFCKSSA-N latrunculin B Natural products C[C@H]1CC[C@@H]2C[C@@H](C[C@@](O)(O2)[C@@H]3CSC(=O)N3)OC(=O)C=C(C)/CCC=C/1 NSHPHXHGRHSMIK-IWQSFCKSSA-N 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000391 magnesium silicate Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940099273 magnesium trisilicate Drugs 0.000 description 1
- 229910000386 magnesium trisilicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019793 magnesium trisilicate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000003990 molecular pathway Effects 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- RDTKJSMWDWTJLP-UHFFFAOYSA-N n,2,2,3,3-pentamethylcyclopropane-1-carboxamide Chemical compound CNC(=O)C1C(C)(C)C1(C)C RDTKJSMWDWTJLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- HNBDRPTVWVGKBR-UHFFFAOYSA-N n-pentanoic acid methyl ester Natural products CCCCC(=O)OC HNBDRPTVWVGKBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000344 non-irritating Toxicity 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- ACXGEQOZKSSXKV-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC(O)=O ACXGEQOZKSSXKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 125000004817 pentamethylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:1] 0.000 description 1
- JZZRXECTAQPLNI-UHFFFAOYSA-N pentanal Chemical compound CCCCC=O.CCCCC=O JZZRXECTAQPLNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 1
- 230000000858 peroxisomal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012660 pharmacological inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 229960002036 phenytoin Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229940043441 phosphoinositide 3-kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229960001416 pilocarpine Drugs 0.000 description 1
- 101150111743 po gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000013105 post hoc analysis Methods 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000004302 potassium sorbate Substances 0.000 description 1
- 235000010241 potassium sorbate Nutrition 0.000 description 1
- 229940069338 potassium sorbate Drugs 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- AJYNZTLCODJWQR-UHFFFAOYSA-N propyl 2-methylpentanoate Chemical compound CCCOC(=O)C(C)CCC AJYNZTLCODJWQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 1
- 239000012857 radioactive material Substances 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000013333 regulation of fatty acid metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000011663 regulation of signaling Effects 0.000 description 1
- 230000001020 rhythmical effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000013222 sprague-dawley male rat Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YBRBMKDOPFTVDT-UHFFFAOYSA-N tert-butylamine Chemical compound CC(C)(C)N YBRBMKDOPFTVDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 230000005919 time-dependent effect Effects 0.000 description 1
- NIDHFQDUBOVBKZ-NSCUHMNNSA-N trans-hex-4-enoic acid Chemical compound C\C=C\CCC(O)=O NIDHFQDUBOVBKZ-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- YIYBQIKDCADOSF-ONEGZZNKSA-N trans-pent-2-enoic acid Chemical compound CC\C=C\C(O)=O YIYBQIKDCADOSF-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940048102 triphosphoric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000007473 univariate analysis Methods 0.000 description 1
- QRCJOCOSPZMDJY-UHFFFAOYSA-N valnoctamide Chemical compound CCC(C)C(CC)C(N)=O QRCJOCOSPZMDJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/06—Antimigraine agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Psychology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к применению соединения формулы (I), где R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 7-11 атомов углерода, возможно разветвленную в любом положении атома углерода в основной цепи, где разветвление представляет собой боковую C1-6 алкильную группу, причем алкильная группа основной цепи и/или боковые алкильные группы возможно содержат один или более гетероатомов, причем указанное соединение выбрано из 4-этилоктановой кислоты, 2-бутилоктановой кислоты, 4-метилнонановой кислоты и 3-метилундекановой кислоты или его фармацевтически приемлемая соль, амид или эфир, для лечения или профилактики заболевания или биомедицинского состояния, выбранного из расстройств, связанных с судорогами. 1 з.п. ф-лы, 9 ил., 3 табл.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к применению соединений. В частности, изобретение относится к применению соединений для лечения или профилактики заболеваний или биомедицинских состояний, таких как, расстройства, связанные с судорогами, биполярные расстройства, мания, депрессия, мигрень, синдром дефицита внимания и гиперактивности, латентная ВИЧ-инфекция, болезнь Альцгеймера, хорея и шизофрения, ишемия, рак и фатальная кровопотеря.
Уровень техники
Эпилепсия является широко распространенным серьезным нейрологическим состоянием, вызывающим существенные личные, социальные и экономические проблемы. Эпилепсией поражено 0,5-1% населения, у 30% из которого эпилепсия адекватно не лечится существующими антиэпилептическими лекарствами (Bialer и White 2010). У этих пациентов высок уровень смертности и заболеваемости. Клеточные и молекулярные аспекты, приводящие к эпилептическим припадкам, не ясны, хотя проводимые исследования сфокусированы на определении молекулярных путей, что необходимо для развития и разработки новых методов лечения для контроля припадков.
Вальпроевая кислота (VPA; 2-пропилпентановая кислота; Epilim®), жирная кислота с короткой разветвленной цепью, является наиболее распространенным, широко используемым в мире антиэпилептическим лекарственным средством, однако механизм ее действия при контроле припадков остается довольно неясным в течение более 40 лет (Lagace et al., 2005; Perucca, 2002). После того как было неожиданно обнаружено, что VPA эффективна для контроля припадков (Carraz G., 1967), она сейчас также используется для лечения биполярных расстройств и мигрени, дополнительно к разнообразным новым терапиям, включая рак и ВИЧ. Ранее было показано, что VPA обладает длительным эффектом при контроле дефицита инозитола (Williams et al., 2006; Williams, 2005), и этот длительный эффект вероятно обусловлен ее эффективностью в отношении биполярных расстройств.
Что касается лечения эпилепсии, предполагают, что терапевтические эффекты VPA основаны на прямом усилении выработки гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) (Lagace et al., 2005) и ингибировании активности натриевых каналов (Costa et al., 2006). Ключевым аспектом в механизме действия VPA при лечении эпилепсии является то, что она быстро блокирует активность припадка - в течение 30 минут после введения, что соответствует пиковой концентрации VPA в мозге после внутривенной инъекции (Aly и bdel-Latif, 1980). Кроме такого быстрого действия, предполагающего прямое воздействие на каналы или биохимическую (а не транскрипционную) мишень эпилепсии, были обнаружены некоторые быстрые эффекты VPA (Lagace et al., 2005), которые обуславливают большое терапевтическое значение быстрых VPA-катализируемых эффектов. Такие эффекты VPA были недавно проанализированы с использованием простой модели Dictyostelium (Xu et al., 2007). Было продемонстрировано, что VPA вызывает ингибирование продукции фосфатидилинозитол-(3,4,5)-трифосфата (PIP3) и снижение фосфорилирования фосфатидилинозитол-монофосфата (PIP) и фосфатидилинозитол-дифосфата (PIP2).
Посмертные образцы мозга с биполярным расстройством также показали измененные уровни ферментов, связанные с метаболизмом жирных кислот (Kim et al., 2009), а также измененные жирные кислоты в клеточных мембранах (Chiu et al., 2003). Большое количество исследований показало повышение высвобождения арахидоновой кислоты (АА) после припадка, катализированного повышенной активностью PLA2 (фосфолипазы A2) (Siesjo et al., 1982, Rintala et al., 1999, Bazan et al., 2002, Basselin et al., 2003), а ослабление этого процесса может улучшить контроль припадков и эпилептогенез (Rapoport и Bosetti, 2002).
Было показано, что VPA снижает метаболизм AA в мозге, но механизм этого процесса неизвестен (Chang et al., 2001). AA является незаменимой жирной кислотой, которая является основной полиненасыщенной жирной кислотой в большинстве мембранных фосфолипидов (Svennerholm, 1968) и играет центральную роль в передаче сигналов воспаления (Yedgar et al., 2006). Осталось неясным, связан ли эффект VPA на метаболизм AA с особыми состояниями, которые лечат с помощью VPA. Например, этот эффект может относится к профилактике биполярного расстройства (Rapoport, 2008b), поскольку аналогичное снижение передачи сигнала AA также наблюдали при лечении других структурно независимых биполярных расстройств, таких как чувствительные к литию (Basselin et al., 2005) и карбамазепину (Bazinet et al., 2006a).
Хотя VPA используется для лечения множества заболеваний, она имеет ряд нежелательных побочных эффектов, включая тератогенность и гепатотоксичность. Поэтому имеется срочная потребность в более сильных антиэпилептических лекарствах со сниженными побочными эффектами.
В международной заявке WO 99/02485 описано семейство аналогов VPA для лечения эпилепсии, мигрени, биполярных расстройств и боли. Конкретные соединения, раскрытые в WO 99/02485, включают 2-пропилгептилуксусную кислоту, 2-пропилдеканилуксусную кислоту и I-O-стеароил-2-пропилгептилацетоил-sn-глицеро-3-фосфотидилхолин.
С использованием биомедицинской модели Dictyostelium, авторы изобретения обнаружили, что эффект VPA заключается в том, что она вызывает быстрое снижение метаболизма фосфоинозитида, и этот эффект не основан на прямом ингибировании активности фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) и не вызывается регуляцией рециклинга инозитола. Она также обнаружили, что VPA индуцирует как снижение высвобождения, так и повышение накопления радиомеченых AA и пальмитиновой кислоты (насыщенной жирной кислоты с длинной цепью). Этот эффект, катализируемый VPA, не вызван снижением активации жирных кислот.
Кроме того, исследования зависимости активности от структуры (SAR) показали высокую структурную специфичность этих механизмов действия. Это позволило определить группу соединений, демонстрирующих терапевтический потенциал, аналогичный VPA, но со сниженными побочными эффектами и/или с повышенной терапевтической эффективностью.
Раскрытие изобретения
В соответствии с первым аспектом изобретения предложено соединение формулы
где R1 представляет собой алкильную или алкенильную группу, имеющую основную цепь из 7-11 атомов углерода, возможно разветвленную в любом положении атома углерода в основной цепи, где разветвление представляет собой боковую C1-6 алкильную группу, причем алкильная или алкенильная группы основной цепи и/или боковые алкильные группы возможно содержат один или более гетероатомов,
при условии, что, когда R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 7 атомов углерода, разветвление не состоит только из гексильной группы у α-атома углерода R1, или только из метильной группы у γ-атома углерода R1, или только из единственных метильных групп у обоих β и ω-1 атомов углерода R1, и при условии, что, когда R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 8 или 11 атомов углерода, разветвление не состоит только из пропильной группы у α-атома углерода R1,
или его фармацевтически приемлемая соль, амид или эфир,
для применения в лечении или профилактике заболевания или биомедицинского состояния, выбранного из расстройств, связанных с судорогами, биполярных расстройств, мании, депрессии, мигрени, синдрома дефицита внимания и гиперактивности, латентной ВИЧ-инфекции, болезни Альцгеймера, хореи, шизофрении, ишемии, рака и фатальной кровопотери, при условии, что когда соединение представляет собой 2-метил-2-пентеновую кислоту, заболевание или состояние не является биполярным расстройством или эпилепсией.
Было обнаружено, что соединения, описанные в данной заявке, вызывают быстрое снижение метаболизма фосфоинозитола и/или снижение метаболизма жирных кислот. Поскольку было определено, что снижение метаболизма фосфоинозитола и жирных кислот является механизмом действия VPA, эти соединения могут потенциально использоваться для лечения или профилактики состояний, которые лечатся VPA, таких как расстройства, связанные с судорогами, биполярные расстройства, мания, депрессия, мигрень, синдром дефицита внимания и гиперактивности, латентная ВИЧ-инфекция, болезнь Альцгеймера, хорея и шизофрения, в частности, эпилепсия, биполярные расстройства и мигрень.
В варианте осуществления изобретения, когда R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 7 атомов углерода, разветвление не состоит только из метильной группы у ω-1-атома углерода R1, и предпочтительно не содержит метильную группу у ω-1-атома углерода R1.
Соединения, которые могут использоваться для целей изобретения, включают нонановую кислоту, декановую кислоту, 4-этилоктановую кислоту, 2-пропилоктановую кислоту, 2-бутилоктановую кислоту, 4-метилнонановую кислоту, 8-метилнонановую кислоту, 3-метилнонановую кислоту и 3-метилундекановую кислоту, но не ограничены ими.
Термин «алкильная группа, имеющая основную цепь из x-y атомов углерода», использованный в данном описании, относится к линейной насыщенной углеводородной группе, содержащей от x до y атомов углерода. Например, алкильная группа, имеющая основную цепь из 1-4 атомов углерода, означает неразветвленную насыщенную углеводородную группу, содержащую 1-4 атома углерода. Примеры алкильной группы, имеющей основную цепь из 1-4 атомов углерода, включают метил, этил, пропил и бутил.
Термин «алкенильная группа, имеющая основную цепь из x-y атомов углерода», использованный в данном описании, относится линейной ненасыщенной углеводородной группе, содержащей от x до y атомов углерода и по меньшей мере одну (например, 1, 2, 3 или 4) двойную связь. Например, алкенильная группа, имеющая основную цепь из 3-5 атомов углерода, означает неразветвленную ненасыщенную углеводородную группу, содержащую 3-5 атомов углерода. Примеры алкенильной группы, имеющей основную цепь из 3-5 атомов углерода, включают пропилен, бутилен и пентилен.
Термины «α-атом углерода R1», «β-атом углерода R1» и «γ-атом углерода R1» относятся соответственно к первому, второму и третьему атому углерода в цепи атомов углерода, образующих R1, считая от, но не включая группу COOH в формуле (I). Термин ʺω-1-атом углерода R1ʺ относится к предпоследнему атому углерода в цепи атомов углерода, образующих R1, также считая от группы COOH в формуле (I). Другими словами, ʺω-1-атом углерода R1ʺ - это атом углерода рядом с концевой метильной или метиленовой группой в R1.
Термин «Cx-y алкильная группа», использованный в данном описании, относится к разветвленной или неразветвленной насыщенной углеводородной группе, содержащей от x до y атомов углерода. Например, C1-4 алкильная группа относится к разветвленной или неразветвленной насыщенной углеводородной группе, содержащей 1-4 атома углерода. Примеры C1-4 алкильной группы включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил.
Понятие «фармацевтически приемлемая соль» соединения согласно настоящему изобретению включает соли с неорганическими основаниями, соли с органическими основаниями, соли с неорганическими кислотами, соли с органическими кислотами и соли с основными и кислотными аминокислотами. Соли с основаниями могут быть, в частности, использованы в различных формах. Соединение согласно настоящему изобретению может быть либо в гидратированной, либо негидратированной форме.
Понятие «фармацевтически приемлемые амиды» соединений согласно настоящему изобретению означает производные, в которых карбоксил (т.е. группы -C(O)OH) указанных соединений) модифицирован реакцией с амином -NHR1'R2' с получением групп -C(O)NR1'R2', где R1' и R2' могут быть независимо выбраны из H, C1-8 алкила (н-р C1-6 алкила), арила, гетероарила и C3-8 циклоалкила.
Понятие «фармацевтически приемлемые эфиры» соединений согласно настоящему изобретению означает производные, в которых карбоксил (т.е. группы -C(O)OH) указанных соединений) модифицирован реакцией со спиртовой группой W-OH с получением группы -C(O)OW, где W может представлять собой C1-18 алкил (н-р C1-6 алкил), арил, гетероарил или C3-8 циклоалкил.
Общие способы получения солей, амидов и эфиров хорошо известны специалистам. Фармацевтическая приемлемость солей, амидов и эфиров будет зависеть от множества факторов, включая характеристики обрабатываемости композиций и поведение in vivo, и специалист способен оценить такие факторы с учетом настоящего раскрытия.
Когда соединения согласно изобретению существуют в различных энантиомерных и/или диастереомерных формах (включая геометрическую изомерию относительно двойных связей), эти соединения можно получить в виде смесей изомеров или рацематов, хотя изобретение относится ко всем таким энантиомерам или изомерам, независимо от того, присутствуют они в оптически чистой форме или в виде смесей с другими изомерами. Индивидуальные энантиомеры или изомеры можно получить известными способами, такими как оптическое разделение конечных продуктов или промежуточных продуктов (например, хиральное храматографическое разделение (н-р, хиральная ВЭЖХ)), или энантиомерный синтез. Аналогично, когда соединения согласно изобретению могут существовать в виде альтернативных таутомерных форм, изобретение относится к индивидуальным таутомерам и к смесям таутомеров в любом соотношении.
В некоторых вариантах осуществления изобретения R1 представляет собой алкильную группу.
В некоторых вариантах осуществления изобретения R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 7-10 атомов углерода.
В некоторых вариантах осуществления изобретения R1 представляет собой алкильную группу, имеющую по меньшей мере одну точку разветвления, например одну, две или три точки разветвления.
В некоторых вариантах осуществления изобретения R1 представляет собой алкенильную группу, имеющую основную цепь из 7-10 атомов углерода, имеющую разветвление в любом положении основной цепи, предпочтительно у α, β, γ или ω-1 атома углерода R1.
В некоторых вариантах осуществления изобретения разветвление представляет собой C1-4 алкильную группу, такую как метил, этил, пропил или бутил, предпочтительно метил, этил или пропил.
В некоторых вариантах осуществления изобретения R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 7 атомов углерода, имеющую разветвление в виде этила, пропила или бутила.
В некоторых вариантах осуществления изобретения R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 8 атомов углерода, имеющую разветвление в виде метила.
В некоторых вариантах осуществления изобретения R1 является неразветвленной алкильной группой.
В некоторых вариантах осуществления изобретения R1 представляет собой C8-9 неразветвленную алкильную группу.
В некоторых вариантах осуществления изобретения один или более гетероатомов в алкильных или алкенильных группах выбран из группы, состоящей из кислорода, серы и азота. Предпочтительно, одним или более гетероатомами является кислород.
В некоторых вариантах осуществления изобретения соединение, используемое для изобретения, назначают отдельно, одновременно или последовательно в комбинации с другим фармацевтически приемлемым агентом, который известен как полезный в лечении или профилактике заболевания или биомедицинского состояния, выбранного из расстройств, связанных с судорогами, биполярных расстройств, мании, депрессии, мигрени, синдрома дефицита внимания и гиперактивности, латентной ВИЧ-инфекции, болезни Альцгеймера, хореи, шизофрении, ишемии, рака и фатальной кровопотери, или их сочетания.
В некоторых вариантах осуществления изобретения два или более соединений, используемых согласно первому аспекту изобретения, могут быть использованы отдельно, одновременно или последовательно в комбинации.
Согласно второму аспекту изобретения предложен способ лечения или профилактики заболевания или биомедицинского состояния, выбранного из расстройств, связанных с судорогами, биполярных расстройств, мании, депрессии, мигрени, синдрома дефицита внимания и гиперактивности, латентной ВИЧ-инфекции, болезни Альцгеймера, хореи, шизофрении, ишемии, рака и фатальной кровопотери, в частности, эпилепсии, биполярных расстройств и мигрени, где способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения согласно первому аспекту изобретения.
Соединение можно вводить с одним или более обычными нетоксичными фармацевтически приемлемыми носителями, адъювантами или наполнителями. Фармацевтически приемлемыми носителями, адъювантами и наполнителями, которые можно использовать в изобретении, являются обычно используемые в фармацевтических композициях и включают сахара, сахарные спирты, крахмалы, ионообменники, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки, такие как человеческий сывороточный альбумин, буферные вещества, такие как фосфаты, глицерин, сорбиновую кислоту, сорбат калия, смеси частичных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как протамин сульфат, динатрий гидрофосфат, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный диоксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропиленовые блоксополимеры, полиэтиленгликоль и ланолин, но не ограничены указанными веществами. Соединение можно вводить перорально, парентерально, путем ингаляции, ректально, назально, буккально, вагинально или из имлантированного резервуара. Используемый в данном описании термин «парентерально» включает подкожное, внутрикожное, внутривенное, внутримышечное, интраартикулярное, внутрисуставное, интрастернальное, внутриоболочечное, внутриочаговое и внутричерепное введение посредством инъекции или инфузии.
Соединение, используемое в изобретении, можно вводить в форме стерильного инъецируемого препарата, например, в виде стерильной инъецируемой водной или масляной суспензии. Такая суспензия может быть приготовлена известными методами с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов (таких как, например, Tween 80) и суспендирующих агентов. Стерильный инъецируемый препарат также может быть стерильным инъецируемым раствором или суспензией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых наполнителей и растворителей можно использовать маннит, воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для этой цели можно использовать любые мягкие нелетучие масла, включая моно- и диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицериды, пригодны для получения инъецируемых препаратов, также как и природные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло или касторовое масло, особенно в их полиоксиэтилированной форме. Такие масляные растворы или суспензии также могут содержать длинноцепочечный спирт в качестве разбавителя или диспергента, такой как описано в Фармакопее Швейцарии, или другой аналогичный спирт.
Соединение, используемое в изобретении, можно вводить перорально в любой перорально пригодной лекарственной форме, включая капсулы, таблетки, порошки, гранулы и водные суспензии и эмульсии, но не ограничиваясь этим. Эти лекарственные формы готовят известными способами для приготовления фармацевтических препаратов. Для таблеток для перорального введения носители, которые обычно используют, включают лактозу и кукурузный крахмал. Также обычно добавляют смазывающие агенты, такие как стеарат магния. Для перорального введения в форме капсул пригодные носители включают лактозу и сухой кукурузный крахмал. Когда водные суспензии вводят перорально, активный ингредиент объединяют с эмульгирующими и суспендирующими агентами. При необходимости, можно добавлять определенные подсластители и/или корригенты, и/или красители.
Соединение, используемое в изобретении, можно вводить в форме суппозиториев для ректального введения. Для этой цели соединение можно смешивать с пригодным нераздражающим эксципиентом, который является твердым при комнатной температуре и жидким при ректальной температуре, поэтому он плавится в прямой кишке и высвобождает активные компоненты. Подходящие материалы включают масло какао, пчелиный воск и полиэтиленгликоли, но не ограничены этим.
Соединение, используемое в изобретении, можно вводить в форме назального аэрозоля или ингаляции. Для этой цели соединение можно приготовить известными методами для получения фармацевтических препаратов в виде раствора в физиологическом растворе с использованием бензилового спирта или других пригодных консервантов, промоторов абсорбции для усиления биодоступности, фтороуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих агентов, известных из уровня техники.
Соединение, используемое в изобретении, можно вводить в количестве от примерно 1 до примерно 20000 мкг/кг на дозу, в зависимости от состояния, которое требуется лечить или предупреждать, и характеристик субъекта, которому вводят соединение. Во многих случаях это количество может быть от примерно 1 до примерно 1500 мкг/кг на дозу. Режим дозирования может быть легко определен специалистом на основании настоящего раскрытия.
В соответствии с третьим аспектом изобретения предложено применение соединения согласно первому аспекту изобретения для получения лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или биомедицинского состояния, выбранного из расстройств, связанных с судорогами, биполярных расстройств, мании, депрессии, мигрени, синдрома дефицита внимания и гиперактивности, латентной ВИЧ-инфекции, болезни Альцгеймера, хореи, шизофрении, ишемии, рака и фатальной кровопотери.
Краткое описание графических материалов
Далее изобретение описано более подробно посредством примеров со ссылками на фигуры, описанные ниже.
На фиг.1 показан время- и дозо-зависимый эффект VPA на ослабление передачи сигнала фосфоинозитидом на модели Dictyostelium. Определение меченого фосфоинозитида осуществляли путем введения радиоактивного фосфата во вновь образованные липиды, после которого проводили экстракцию, разделение тонкослойной хроматографией (ТСХ) и количественное определение с использованием прибора Phosphorimager Typhoon (Pawolleck & Williams 2009). (a) Анализ метаболизма PIP и PIP2 в клетках, обработанных VPA (0,5 мМ), для указанного времени. (b) Анализ метаболизма PIP и PIP2 в клетках, обработанных 9 минут различными концентрациями VPA. Представлены результаты из трехкратных опытов с двумя образцами ± SD (среднеквадратическое отклонение), где *P<0,05; **P<0,01; ***P<0,001 для уровней PIP.
На фиг.2 представлены данные, демонстрирующие участие фосфоинозитида в передаче сигнала и чувствительность к VPA у особей дикого типа (wt) и нокаутных (в «выключенным» геном) мутантах, у которых отсутствовала фосфолипидкиназа и ферменты, участвующие в рециклинге инозитола, обработанных в течение 9 минут VPA (0,5 мМ), или без такой обработки. (a) Сравнение уровней фосфоинозитида у необработанных изогенных мутантных линий, у которых отсутствовала активность фосфолипидкиназы: пять генов 1-фосфатидилинозитол-3-киназы (5xPI3K; DBS0252654); ген фосфатидилинозитол-4-фосфат-5-киназы (rPKA; DDB0191443); и ген фосфатидилинозитол-4-фосфат-5-киназы (PIPKinA; DDB0185056). Чувствительность к VPA и ингибитору PI3K определяли с использованием 0,5 мМ VPA или 50 мкМ LY2946004 соответственно для: (b) 5xPI3K мутанта; (c) rPKA мутанта и (d) PIPKinA мутанта. (e) Схематическое изображение фосфоинозитидной сигнализации, где показана роль фосфолипазы C (PLC), пролилолигопептидазы (РО), инозитол-монофосфатазы (IMPase) и миоинозитолсинтазы (INO1) в генерации и рециклинге фосфоинозитидов. (f) Удаление генов PLC и РО не изменяло VPA-аттенуированную PIP и PIP2 сигнализацию (g) пролонгированная обработка с помощью VPA (60 мин, 0,5 мМ) дополнительно снижала фосфоинозитидную сигнализацию, причем этот эффект не изменялся последующей сверхэкспрессией инозитол-монофосфатазы. Представлены результаты из трехкратных опытов с двумя образцами ± SD, где *P<0,05; **P<0,01; ***P<0,001 для уровней PIP.
На фиг.3 показаны данные, касающиеся контроля судорог с помощью VPA и фосфоинозитид-аттенуирующих соединений с использованием модели острой судорожной активности, вызванной введением пентилентетразола (PTZ) in vitro, и модели с низким содержанием магния. (a) Объединенный препарат среза энторинальной области коры и гиппокампа помещали в погруженную регистрирующую камеру и осуществляли перфузию искусственной цереброспинальной жидкостью с высоким содержанием [K+] и PTZ для индуцирования эпилептиформной активности перед добавлением VPA или новых соединений с концентрацией 1 мМ. (b) Иллюстрация следов эпилептиформных разрядов после применения VPA, 4-метилоктановой кислоты (4-МО), 2-пропилоктановой кислоты (2-РО) и 2-бутилоктановой кислоты (2-ВО)). (c) Частота эпилептиформных разрядов после применения лекарств в зависимости от времени. Лекарства применяли в течение времени от 0 до 40 минут. (d) Образцы следов и (e) частота эпилептиформных разрядов после применения нонановой кислоты (NA) и декановой кислоты (DA) с более длинными прямыми цепями. (f) Иллюстрация образцов следов эпилептиформных разрядов, индуцированных низкой концентрацией магния, после применения VPA (1 мМ), 4-метилоктановой кислоты (4-МО, 1 мМ). (g) Частота эпилептиформных разрядов, индуцированных низкой концентрацией магния, после применения лекарств (VPA 1 мМ, n=5; 4-МО 1 мМ, n=5). Частота эпилептиформных разрядов, индуцированных низкой концентрацией магния, изображена в зависимости от времени. Лекарства применяли в течение времени от 0 до 40 минут. Применение VPA существенно снижало частоту эпилептиформных разрядов (72,7±3,6% от базовой линии, n=5, 30-40 минут после применения, эффект супрессии обратим после промывки), а применение 4-МО устраняло эпилептиформные разряды (1,6±3,1% от базовой линии, n=5, p<0,01 по сравнению с контролем; P<0,01 по сравнению с VPA). Эпилептиформная активность в обоих случаях обработки восстанавливалась после вымывания лекарства (n=5 для каждого лекарства). (h) Сравнение средней частоты эпилептиформных разрядов, индуцированных низкой концентрацией Mg2+ за последние 10 минут в течение применения лекарства при различных обработках, которое демонстрирует значительный эффект всех соединений, снижающий судорожную активность. *P<0,05, **P<0,01 по сравнению с контролем; +P<0,05, ++P<0,01, по сравнению с группой, обработанной VPA. Данные представлены в виде среднего ± SEM (стандартная погрешность средней величины).
На фиг.4 показаны данные, касающиеся контроля судорог с помощью фосфоинозитид-аттенуирующих соединений с использованием модели судорожной активности in vitro. (a) краткое описание процедуры: электрическая индукция самоподдерживающегося эпилептического статуса (status epilepticus) (SSSE). Крыс стимулировали через перфорирующий путь электрическим током 4-5 мА, монополярными импульсами по 50 мкс с частотой 20 Гц в течение 2 часов для индукции SSSE через 7 дней после имплантации электродов. Через три дня после индукции SSSE крысам вводили диазепам (10 мг/кг) интраперитониальной инъекцией (i.p.) для прекращения судорожной активности. (b) Иллюстративные образцы ЭЭГ у животных с эпилептическим статусом. Введение VPA (400 мг/кг) или 4-метилоктановой кислоты (400 мг/кг) привело к ослаблению судорожной активности, а диметилсульфоксид (DMSO) не имел эффекта. (c) Временная зависимость эффектов введения DMSO (n=5), VPA (n=7) и 4-МО (n=7) на амплитуду пиков. (d) Временная зависимость эффектов введения DMSO (n=5), VPA (n=7) и 4-МО (n=7) на частоту повторения спонтанных пиков.
На фиг.5 продемонстрировано, что VPA вызывает изменения в поглощении и высвобождении жирных кислот время- и дозозависимым образом. Клетки Dictyostelium дикого типа (Ах2) предварительно инкубировали в меченых 3H арахидоновой кислоты (AA) или пальмитиновой кислоты - РаА (С), и высвобождение метки 3H во внешний буфер показано в присутствии/отсутствии VPA. Поглощение жирных кислот было измерено путем инкубации клеток в присутствии или отсутствии VPA и 3H AA (B) или пальмитиновой кислоты (D) одновременно. Показано поглощение 3H осадком клеток Dictyostelium. Все результаты выражены в виде % от контроля за период 60 минут. Графики на вставках показывают кривые доза-ответ. Статистические кривые и кривые доза-ответ были рассчитаны с использованием программного обеспечения Graphpad Prizm™. Все данные являются результатами по меньшей мере трех независимых опытов и выражены как среднее ± SEM.
На фиг.6 продемонстрировано, что VPA вызывает эндоцитоз-независимое накопление капель липидов, меченых бор-дипиррометеном (bodipy), в клетках Dictyostelium. (а) Снимки, демонстрирующие накопление жирных кислот, меченых bodipy, в клетках Dictyostelium при отсутствии (i) или в присутствии (ii) 0,5 мМ VPA. VPA значительно повысила яркость и средний диаметр капель липидов по сравнению с контролем; (b) (метод Стьюдента, ***p<0,001, *p<0,05). Латрункулин (LatB), ингибитор актиновой полимеризации, в количестве 10 мкМ полностью не ингибировал индуцированное VPA повышение поглощения 3H арахидоновой кислоты. Все данные являются результатами по меньшей мере трех независимых опытов и выражены как среднее ± SEM.
Фиг.7 демонстрирует, что нокаутные клетки PlaA защищены от индуцированного VPA замедления развития. (A) Выравнивание белковой последовательности PlaA от Dictyostelium discoideum (XP_642421.1) и белковой последовательности iPLA2 от Homo sapiens (AAD08847). Эти последовательности показали сохраненную гомологию сайтов связывания АТФ и липазных сайтов. Выравнивание проводили с использованием программного обеспечения BLAST. (В) Высвобождение радиоактивной метки из клеток дикого типа (wt) и клеток PlaA показали аналогичное снижение высвобождения в присутствии VPA. (C) Снимки, показывающие развитие клеток Dictyostelium дикого типа (Ах2) или клеток PlaA через 30 часов при отсутствии и в присутствии 1 мМ VPA (как указано). Отрезки, указывающие масштаб, отражают длину 500 мкм.
Фиг.8 демонстрирует, что ингибиторы PLA2 фенокопируют индуцированное VPA 3H высвобождение из клеток с мечеными жирными кислотами. (A) Компетентные клетки Dictyostelium дикого типа (Ах2) были предварительно инкубированы с 3H AA, показано высвобождение 3H во внешний буфер в присутствии и при отсутствии ингибиторов PLA2. Ингибитор x=80 мкМ BEL, Са2+ - ингибитор PLA2, y=20 мкМ ВРВ, общий ингибитор PLA2 и z=50 мкМ MAFP, а Са2+ - зависимый и Са2+ - независимый цитозольный ингибитор PLA2. Смесь = смесь всех ингибиторов. (В) Ингибиторы PLA2 не имитируют VPA-зависимое поглощение жирных кислот. Клетки инкубировали в присутствии VPA и смеси ингибиторов PLA2 (см. Методы). Показано поглощение 3H в клетках Dictyostelium. (C) VPA-индуцированное поглощение 3H арахидоновой кислоты не зависит от активации коэнзима A (СоА). Количественное определение СоА-активинованной пальмитиновой кислоты в клетках дикого типа, клетки дикого типа +0,5 мМ VPA или fcsA -/- Dictyostelium (однофакторный дисперсионный анализ (one way ANOVA), Апостериорный анализ Дуннета (Dunnet's post hoc) ***p<0,001). (D) Поглощение 3H арахидоновой кислоты в клетках дикого типа fcsA -/- или fcsB -/- при отсутствии или в присутствии of 0,5 мМ VPA (однофакторный дисперсионный анализ, Апостериорный анализ Бонферрони (Bonferroni post hoc), ***p<0,001).
На Фиг.9 показан эффект аналогов VPA на поглощение и высвобождение 3H арахидоновой кислоты. VPA индуцировала параллельное повышенное поглощение и сниженное высвобождение радиоактивной метки, эти эффекты были усилены 2-изопропилпентановой кислотой (PIA) и снижены 4-метилоктановой кислотой. Коктейль ингибиторов PLA2 ингибировал как поглощение, так и высвобождение радиоактивной метки (однофакторный дисперсионный анализ, Апостериорный анализ Бонферрони, ns = не значимо, ***p<0,001).
Осуществление изобретения 1.
Материалы и методы
1.1 Реактивы и мутанты
Все реактивы были получены у компании Sigma UK Ltd. Препараты вальпроевой кислоты были предоставлены компаниями Sigma Aldrich UK, Alfa Aesar/Avocado, ChemSampCo, ChemCo, The NCI/DTP Open Chemical Repository (http://dtp.cancer.gov) или TCI europe. Радиомеченая АТФ (аденозинтрифосфорная кислота) была предоставлена компанией Perkin Elmer Ltd. Мутанты Dictyostelium были предоставлены компанией Dictybase.org, кроме пятикратного нокаутного штамма PI3K (и PTEN) и rPKA, которые были любезно предоставлены господами R.Kay (Cambridge, UK) и A.Noegel (Koeln, Germany). Среда Dictyostelium (аксеническая) была получена у компании Formedium (Norfolk, UK). 3Н арахидоновая кислота была куплена у Hartmann analytic (Germany) и 3Н пальмитиновая кислота - у Perkin Elmer (Cambridge, UK).
1.2 Клетки и выращивание культуры
Клетки Dictyostelium были выращены в аксенической среде или на планшетах со средой Sussmans вместе с Raoultella planticola (Drancourt et al., 2001). Для всех культур использовали встряхивание (120 об/мин) при 22°C, и для развития клеток добавляли цАМФ (циклический аденозинмонофосфат) (до конечной концентрации 25 нМ) каждые 6 минут в течение 4 часов при 2,5×106 клеток/мл в фосфатном буфере (16,5 мМ KH2PO4, 3,8 мМ K2HPO4 pH 6,2),как было описано ранее (Boeckeler et al., 2006).
1.3 Введение метки в фосфолипиды Dictyostelium и анализ инозитола
Для этих опытов с Dictyostelium был принят протокол пермеабилизации клеток на основе сапонина (Pawolleck & Williams, 2009). Клетки Dictyostelium АХ2 выращивали 5 часов, как описано ранее (Boeckeler et al., 2006) (добавление цАМР до достижения концентрации 25 нМ), переносили в чашки (2,5 см), оставляли осаждаться до получения конфлюэнтного монослоя в КК2 (20 мМ буфер фосфата калия, pH 6,1) и предварительно обрабатывали соединением (0,5 мМ VPA или соответствующим соединением, или 50 мкМ LY294002) в течение 3 минут. Через равные промежутки времени буфер замещали метящим раствором (139 мМ глутамата натрия, 5 мМ глюкозы, 5 мМ ЭДТА, 20 мМ PIPES pH 6,6, 1 мМ MgSO4.2H2O, 0,25% (масс./об.) сапонина, 1х фосфатаза-ингибиторных коктейлей 1 и 2 (Roche Ltd), и 1 мкКи/мл γ[32Р]АТФ), в котором содержались соединения при заданных концентрациях.
После 6-минутной инкубации метящий раствор удаляли, клетки лизировали в подкисленном метаноле, фосфолипиды отделяли, как описано ранее (Williams et al., 1999). Количество меченых фосфолипидов оценивали с использованием прибора Phosphor-lmager Typhoon. Равномерность загрузки определяли путем окрашивания липидов сульфатом меди. Уровни инозитола измеряли в клетках после 5-часового развития (аналогично введению метки в фосфолипиды), после лиофилизации, как описано ранее (Maslanski & Busa, 1990).
1.4 Модель эпилепсии in vitro
После умерщвления интраперитониальной инъекцией высокой дозой пентобарбитона (500 мг/кг) у крыс (р21) отделяли головы. Головной мозг извлекали, помещали в ледяной раствор сахарозы (в мМ): NaCl 87, KCl 2,5, MgCl2 7, CaCl2 0,5, NaH2PO4 1,25, сахароза 75, глюкоза 25, уравновешенный газом 95% O2/5% CO2 (pH 7,4). Горизонтальные объединенные срезы энторинальной области коры и гиппокампа (350 мкм) готовили с использованием вибратома Leica (Leica VT1200S) и помещали в камеру, содержащую раствор искусственной цереброспинальной жидкости (aCSF), содержащий в мМ: NaCl 119, KCl 2,5, MgSO4 4, CaCl2 4, NaHCO3 26,2, NaH2PO4 1, глюкозу 11, и продутый газом 95% O2/5% CO2. Через 1 час выдерживания образцы переносили в регистрационную камеру, которую постоянно промывали карбонизированным раствором aCSF для регистрации. Измерение потенциала поля проводили путем помещения стеклянных микроэлектродов (~1-2 МОм), заполненных раствором aCSF в stratum radiatum СА1. Для подтверждения жизнеспособности срезов биполярные стимулирующие электроды помещали на пути коллатераль Шеффера/ комиссуральные волокна в stratum radiatum. В PTZ модели острых судорог, PTZ (2 мМ) добавляли к перфузату и увеличивали концентрацию [K+] до 6 мМ для индукции эпилептиформной активности (Armand et al., 1998). В модели острых судорог, индуцированных низким Mg2+, для генерации ритмичных коротких рекуррентных разрядов использовали Mg2+, не содержащий aCSF. После того, как частота и амплитуда эпилептиформных разрядов стала стабильной в течение 10 минут, добавляли новые противосудорожные средства. Противосудорожные эффекты оценивали путем измерения изменений частоты разрядов каждую минуту. Эти данные, собранные за 30-40 минут после применения новых противосудорожных средств, сравнивали методом ANOVA, после которого проводили апостериорный анализ с использованием теста Tukey, с использованием статистического анализа (SPSS).
1.5 Эпилептический статус in vivo
Этот метод описан подробно ранее (Walker et al., 1999). Кратко, самцы крыс Sprague Dawley (300-400 мг) были анестезированы 1-2% изофлурана в O2. Заземляющий электрод вводили подкожно, однополярный регистрирующий электрод имплантировали стереотактично в правую долю гиппокампа (координаты: 2,5 мм сбоку и 4 мм снизу от брегмы). Биполярный стимулирующий электрод имплантировали в правое полушарие и протягивали в угловой пучок (координаты: 4,4 мм сбоку и 8,1 мм снизу от брегмы) для стимуляции перфорирующего пути. Глубина установки электродов была подобрана для максимизации наклона потенциала поля гранулярных клеток зубчатой извилины (Guo et al., 1999). Электроды удерживались на месте с помощью зубчатых акриловых и черепных винтов. Животным давали возможность выйти из состояния анестезии. Через семь дней перфорирующий путь стимулировали электрическим током 4-5 мА однополярными импульсами по 50 мксек с частотой 20 Гц в течение 2 часов; это вызывало самоподдерживающийся эпилептический статус (status epilepticus). Через 10 минут самоподдерживающегося status epilepticus, вводили соединение или носитель и проводили мониторинг поведенческих судорог и ЭЭГ в течение 3 часов. После этого всем животным вводили диазепам (10 мг/кг) для остановки status epilepticus. Группы сравнивали методом ANOVA, после которого проводили тест апостериорный анализ с использованием теста Tukey, с использованием SPSS.
1.6 Поглощение и высвобождение жирных кислот
Клетки Dictyostelium метили тритированными жирными кислотами путем двухкратной обработки встряхиваемой клеточной культуры при концентрации 1,5×106 клеток/мл с активностью 0,5 мкКю 3Н меченых жирных кислот в 0,5% BSA (бычий сывороточный альбумин) (BSA не содержал жирных кислот). Образцы отбирали в указанные моменты времени путем отбора 4,5×106 клеток, однократной промывки в фосфатном буфере и ресуспендирования в фосфатном буфере перед сцинтилляционными измерениями. Для опытов по высвобождению жирных кислот клетки подвергали импульсам тока, как описано выше, в течение 4 часов, затем клетки ресуспендировали в фосфатном буфере с BSA, не содержащим жирных кислот (0,5%), при концентрации 1,5×106 клеток/мл, моменты времени выбирали в течение часа. Клетки (4,5×106 в момент времени) были промыты для удаления несвязанного радиоактивного вещества и в указанные моменты времени, супернатант подвергали сцинтилляционным измерениям. Результаты обрабатывали с использованием программного обеспечения Graphpad Prism. Подвергнутые импульсам тока в течение 4 часов клетки метили бор-дипиррометеном (bodipy), инкубировали с флуоресцентными жирными кислотами (Invitrogen) 30 минут в присутствии или отсутствии VPA (0,5 мМ), изображения, полученные с помощью микроскопа с инвертированной флуоресценцией Olympus IX 71, регистрировали камерой Retiga FastA 1394 и анализировали с использованием программного обеспечения ImagePro™.
1.7 Выделение, рекапитуляция и рост мутантов
Скрининг библиотеки методом REMI (от англ. restriction enzyme mediated integration) проводили, как описано ранее (Kuspa & Loomis, 2006), с использованием фона Ах2, и выбирали VPA-устойчивые мутанты на основании их способности развиваться в присутствии 1 мМ VPA на R. planticola. Идентификация вырезанного гена, обеспечивающего рекапитуляцию идентифицированного PLAa (DDB_G0278525), с использованием гомологичной рекомбинации нокаутной кассеты. В качестве праймеров для амплификации области в открытой рамке считывания гена, использовали (5' ATGGGAGATAATAAAAAAGAAAATATCAG и 3' TAAGAATTCATGGGAGATAA TAAAAAAGAAAATATCAG, клонированные pCR2.1 ТОРО (Invitrogen Ltd)), который клонировали в pUC19 с использованием расщепления EcoR1, и расщепленный фрагмент Smal от pBLPblp (Faix et al, 2004) был введен в сайт EcoRV вставки. Отсутствие гена было подтверждено ПЦР-анализом. Устойчивость роста к VPA оценивалась путем заселения клеток (1×106) на 47 мм нитроцеллюлозные фильтры (Millipore), пропитанные фосфатным буфером, содержащим либо 1 мМ VPA, либо контроль, рост клеток регистрировали через 30 часов, если не указано иное. Выращенные культуры наблюдали в микроскоп Leica CLS 150Х, изображения культур регистрировали с использованием камеры QICAM FAST 1394.
Активацию жирных кислот определяли методом, описанным авторами Wilson et al. (Wilson et al, 1982) с небольшими изменениями. Кратко, экстракты готовили путем седиментации 1×107 клеток, выращенных в аксенной культуре, их промывки в 10 мл предварительно охлажденного раствора 1 М Tris-HCl (pH 7,5) и их лизирования в течение 30 минут в 100 мкл раствора 1 М Tris-HCl (pH 7,5), содержащего 1% Тритона и коктейля протеазного ингибитора (Р8340, Sigma-Aldrich, Germany) при 4°C. Разбавляли 20 мкг белкового экстракта в 140 мкл в 400 мкл буфера, содержащего 250 мМ Tris-HCl (pH 7,5), 10 мМ MgCl2, 3 мМ АТФ, 0,6 мМ ЭДТА, 0,25% Тритона, и 2,5 мМ DTT. В качестве субстрата использовали 40 мкл немеченой пальмитиновой кислоты (Р9767, Sigma-Aldrich, Germany) из 100 мкМ метанольного маточного раствора и 5 мкл 3Н-пальмитиновой кислоты (20 мкМ, 1 мКю/мл). Реакция была инициирована добавлением 20 мкл 10 мМ раствора коэнзима А (СоА) и инкубирована при 35°C. Для прекращения реакции через 10 минут добавляли 500 мкл среды Dole (0,4 мл изопропанола, 0,1 мл н-гептана, 10 мкл H2SO4). Разделение фаз осуществляли путем центрифугирования в течение 30 сек при 14000 об/мин в настольной центрифуге. Органическую фазу отделяли, а водную фазу промывали 6 раз 300 мкл н-гептана для удаления неактивированных жирных кислот перед измерением радиоактивности ацил-СоА тиоэфира, оставшегося в водной фазе, с использованием 2 мл жидкости Lumasafe™ Plus (Lumac LSC, Groningen, Нидерланды) в сцинтилляционном счетчике.
2. Результаты
2.1 VPA ослабляет фосфоинозитидную сигнализацию
Поскольку ранее не был охарактеризован быстрый эффект VPA на фосфоинозитидную сигнализацию, авторы изобретения сначала исследовали зависимость действия лекарства от времени и концентрации на модели Dictyostelium (фиг.1). Наблюдали быстрое снижение фосфорилирования фосфоинозитида после обработки 0,5 мМ VPA, причем 49%-ное снижение метаболизма обоих радиомеченых PIP и PIP2 наступало через 6 минут после обработки VPA, которое увеличивалось до 94%-ного снижения метаболизма каждого фосфоинозитидного соединения через 60 минут после обработки (фиг.1а). Эти значения указывают на комбинацию процессов синтеза и разрушения внутри клетки, т.е. отражают метаболизм фосфоинозитида, хотя активность фосфатазы была блокирована коктейлем ингибиторов. Этот эффект имеет острую природу и происходит с такой же скоростью, как и контроль судорог после внутривенного введения VPA на мышиной модели судорог (Honack & Loscher, 1992). Снижение фосфоинозитидной сигнализации также зависело от концентрации - наблюдали 25% и 42% ингибирование метаболизма PIP и PIP2 соответственно при концентрации 0,25 мМ VPA через 9 минут после обработки, которое увеличивалось до 68% и 79%-ного снижения при концентрации 0,5 мМ VPA соответственно (фиг.1b) - эти концентрации были определены при терапевтическом применении VPA (0,4-0,7 мМ в плазме) (DSM IV, 2000). При этих условиях такой ингибирующий эффект VPA дает ЕС50=154 мкМ и не зависит от поглощения (поскольку клетки пермеабилизованы сапонином). Быстрое, сильное ингибирование фосфоинозитидной сигнализации, вызванное VPA, имеет потенциальное терапевтическое значение.
Сначала считали, что быстрое снижение фосфорилирования фосфоинозитида происходит благодаря ингибированию неопределенной липидкиназной активности. Традиционно анализ липидкиназ включает использование фармакологического ингибирования соединениями, специфичными к определенному классу ферментов, однако такие исследования являются сложными из-за большого количества фосфатидилинозитолкиназ и наложения эффектов разных ингибиторов. Поскольку предыдущие исследования предположили роль VPA в ослаблении фосфатидилинозитол-3-киназного (PI3K) сигнального пути (Xu et al., 2007), изобретатели проанализировали эффект удаления генов пяти различных типов 1 PI3K в одной клеточной линии (Hoeller & Kay, 2007) на фосфоинозитидную сигнализацию (фиг.2а). Эти клетки показали 28% и 44%-ное снижение образования PIP и PIP2 соответственно по сравнению с клетками дикого типа, что предполагает основную роль этих ферментов в пути фосфоинозитидной сигнализации. Для тестирования VPA-катализируемого снижения фосфоинозитида в зависимости от PI3K к клеткам добавляли VPA (0,5 мМ). Было обнаружено, что через 9 минут после обработки VPA снижала продукцию PIP и PIP2 на 48% и 70% соответственно по сравнению с необработанными клетками (фиг.2b), что означает, что эти пять аблированных ферментов не являются мишенью для VPA в снижении метаболизма фосфоинозитида.
Для исследования роли других липидкиназ в VPA-катализируемом снижении метаболизма фосфоинозитида изобретатели проанализировали две другие неродственные фосфатидилинозитолкиназы: нокаутный мутант rPKA, не содержащий эндосомальный рецептор, сопряженный с G-белком, содержащий домен фосфатидилинозитол-5-киназы (PIP5K) (Bakthavatsalam et al., 2006); и мутант PIPKinA, не обладающий активностью ядерной фосфатидилинозитол-4/5-киназы (Guo et al., 2001). Удаление rPKA (фиг.2а) показало 30% и 54%-ное снижение продукции PIP и PIP2 соответственно по сравнению с клетками дикого типа, причем обработка VPA вызвала дополнительное 72% и 33%-ное снижение по сравнению с необработанными клетками (фиг.2с). Удаление PIPKinA показало значительное изменение в продукции PIP и PIP2 (фиг.2а), причем обработка вызвала 54% и 68%-ное снижение синтеза PIP и PIP2 соответственно по сравнению с необработанными клетками (фиг.2d). Все три клеточные линии остались чувствительными к фармакологическому ингибированию активности PI3K (с использованием 50 мкМ LY294006 - ингибитора активности PI3K), что подтверждает, что эти варианты имеют отношение к сниженному метаболизму фосфоинозитида (фиг.2b-d). Сниженная чувствительность всех трех липидкиназных мутантов предполагает общий механизм действия VPA, не зависящий от специфичной активности фосфатидилинозитолкиназ.
Поскольку другой механизм регуляции фосфоинозитидной сигнализации - это рециклинг фосфатидилинозитола через инозитолфосфаты (фиг.2е), изобретатели проанализировали метаболизм фосфоинозитида в изогенных мутантах, в которых путь рециклинга был блокирован или активирован. Клетки, не содержащие одного гена фосфолипазы C (Drayer et al., 1994) не показали существенного снижения метаболизма PIP и PIP2 по сравнению с клетками дикого типа (фиг.2f), и показали VPA-катализируемое снижение PIP и PIP2 сигнализации, близкое клеткам дикого типа (73 и 75% для PIP и PIP2 соответственно). Клетки, имеющие почти в 3 раза большее содержание инозитолтрифосфата (InsP3), вызванного удалением пролилолигопептидазы (РО; Williams et al., 1999, Williams et al., 2002), показали слабое уменьшение уровней PIP в необработанных клетках (и отсутствие существенных изменений уровней PIP2), и VPA-катализируемое снижение сигнализации PIP и PIP2, составляющее 66% и 68% соответственно. Более того, изобретатели ранее показали, что ингибирование активности инозитолмонофосфатазы (IMPase), вызванное 10 мМ лития, не снижает фосфоинозитидную сигнализацию после быстрой обработки (9 мин) (King et al., 2009), однако длительная обработка литием (60 мин) снизила уровни PIP и PIP2, и этот эффект был подавлен сверхэкспрессией IMPase (King et al., 2009). Для сравнения, сверхэкспрессия IMPase не подавляет эффект длительной обработки VPA (60 мин; 0,5 мМ) (фиг.2g). Эти результаты предполагают, что повышение и снижение рециклинга инозитола через инозитолфосфатный сигнальный путь не играет основной регуляторной роли в быстрой продукции фосфоинозитида и не подавляет VPA-катализируемое быстрое снижение фосфоинозитидной сигнализации в этой модели. Таким образом, эти результаты являются серьезным доказательством механизма действия VPA, независящим от снижения уровней инозитола, на фосфоинозитидную сигнализацию.
2.2 Идентификация новых соединений, демонстрирующих повышенное снижение метаболизма фосфоинозитида
Выявление быстрого эффекта VPA на снижение фосфоинозитидной сигнализации сделало возможным исследование структурных требований для обеспечения этого эффекта. Эффект соединений, протестированных на предмет снижение метаболизма фосфоинозитида для целей изобретения, обобщен ниже в Таблице 1.
Таблица 1. | ||||
Химическая категория | Химическое наименование (тривиальное) сокращенное обозначение | Химическое наименование по номенклатуре IUPAC | Уровень PIP (% от контроля) | SD |
Вальпроевая кислота (VPA) | 2-пропилпентановая кислота | 32,0 | 8,7 | |
Кислоты с основной цепью короче, чем 5 атомов углерода (самая длинная алифатическая боковая цепь) | ||||
Изовалериановая кислота | 3-метилбутановая кислота | 37 | 9 | |
3-метилбутановая | 99,1 | 11,4 | ||
ГАМК | 4-аминобутановая кислота | 60,8 | 3,8 | |
ТВА | трет-бутилуксусная кислота | 21,4 | 4,1 | |
PIA | пропилизопропилуксусная кислота | 15,4 | 2,2 | |
DIA | диизопропилуксусная кислота | 18,6 | 4,5 | |
Кислоты с основной цепью из 5 атомов углерода | ||||
4-метилпентановая кислота | 60 | 11,8 | ||
2-метил-2-пентеновая кислота | 14,8 | 3,8 | ||
4-метил-2-пентеновая кислота | 54,8 | 14,1 | ||
2,4-диметил-2-пентеновая кислота | 38,4 | 6,8 | ||
транс-пент-2-еновая кислота | 50,4 | 9,1 | ||
2-метилпентановая кислота | 59 | 7,3 | ||
3-метилпентановая кислота | 64 | 13,6 | ||
4-метил-2-пентеновая кислота | 121 | 25 | ||
2,4-диметил-2-пентеновая кислота | 94 | 14 | ||
3-метилвалериановая кислота | 3-метилпентановая кислота | 66 | 12 | |
4-метилвалериановая кислота | 4-метилпентановая кислота | 102 | 18 | |
3-метилпентановая кислота | 67 | 16 | ||
2,2-диметил-4-пентеновая кислота | 60 | 7 | ||
3-метил-4-пентеновая кислота | 84 | 6 | ||
Кислоты с основной цепью из 6 атомов углерода | ||||
4-метилгексановая кислота | 68 | 3 | ||
2-метилгексановая кислота | 68,1 | 14,8 | ||
5-метилгексановая кислота | 7,2 | 0,7 | ||
2-этилгексановая кислота | 22,2 | 5,3 | ||
2,2-диметилгексановая | 29,7 | 9,7 | ||
3,5,5-триметилгексановая кислота | 32 | 13 | ||
4-гексеновая кислота, (цис+транс) | 58 | 15 | ||
Кислоты с основной цепью из 7-9 атомов углерода | ||||
2-метилгептановая | 16,1 | 6,4 | ||
4-метилоктановая кислота | 12 | 1,3 |
4-этилоктановая кислота | 13,2 | 1,8 | ||
4-метилнонановая кислота | 45 | 16 | ||
Кислоты с основной цепью из 11 атомов углерода | ||||
3-метилундекановая кислота | 50 | 0 | ||
Кислоты с прямой цепью | ||||
валериановая кислота | пентановая кислота | 66,9 | 7,8 | |
н-капроновая кислота | гексановая кислота | 49,2 | 10,1 | |
энантовая кислота | гептановая кислота | 31,2 | 5 | |
каприловая кислота | октановая кислота | 16,7 | 3,4 | |
пеларгоновая кислота | нонановая кислота | 8 | 1,7 | |
каприновая кислота | декановая кислота | 12,9 | 1,4 | |
лауриновая кислота | додекановая кислота | 42 | 3 | |
маргариновая кислота | гептадекановая кислота | 92,3 | 2,8 | |
Другие кислоты | ||||
Дифенилуксусная кислота | 2,2-дифенилуксусная кислота | 39 | 11 | |
ТМСА | Тетраметилциклопропан-карбоновая кислота | 33,9 | 7,7 | |
Производные карбоновых кислот (амиды) | ||||
вальпромид (VPD) | 2-пропилпентамид | 69,3 | 13,3 | |
вальнокатмид (VCD) | 2-этил-3-метилвалерамид | 64 | 2,9 | |
TMCD | тетраметилциклопропан-карбоксамид | 72,5 | 7,2 | |
MTMCD | N-метил-тетраметил-циклопропан карбоксамид | 50,8 | 6,9 | |
PID | пропилизопропилацетамид | 59 | 12,2 | |
трет-бутил амид | 47,6 | 12 | ||
н-пропил 2-метилвалерат | 121 | 13,6 | ||
Альдегиды | метилвалерат | 46 | 5,5 | |
валеральдегид | пентаналь | 52 | 10,8 | |
октаналь | 260 | 199 | ||
нонаналь | 99 | 13 | ||
Спирты | 2-пропил-1-пентанол | 101 | 13 | |
2-бутил-1-октанол | 93 | 53 | ||
2-гексил-1-деканол | 191 | 38 |
Хотя большая часть проанализованных соединений показала некоторый ингибирующий эффект на метаболизм фосфоинозитида (Таблица 1), ряд структур показал значительно более сильное ингибирование фосфоинозитидной сигнализации, чем эффект VPA. Эти высоко активные соединения разделены на две структурные группы: первая группа включает разветвленные жирные кислоты со структурой грубо напоминающей структуру VPA; вторая группа включает новые соединения, содержащие или не содержащие боковые цепи в различных положениях основной цепи. В этой последней группе жирные кислоты показали сильную зависимость от длины цепи, где кислоты с основной цепью из 8-10 атомов углерода являются высоко активными (н-р, 4-метилоктановая кислота снижает PIP и PIP2 сигнализацию на 88% и 93% соответственно, и нонановая кислота - на 92% и 93% соответственно; Таблица 1), более длинная или более короткая основная цепь снижает активность. Все высоко активные кислоты этой группы являются нетератогенными жирными кислотами (Eickholt et al., 2005) и демонстрируют положительную связь с липофильностью. Этот эффект также не зависит от силы кислоты, поскольку показана отличающаяся активность у кислот с прямой цепью, имеющих эквивалентную кислотность (pKa в Таблице 2, где показано сравнение снижения метаболизма фосфоинозитида и значений pKA для VPA и кислот с прямой цепью на модели Dictyostelium). Эти структурные отличия обеспечивают особенности соединений, родственных VPA, влияющие на снижение метаболизма фосфоинозитида. Интересно, что ранее была показана высокая структурная специфичность жирных кислот как в отношении противосудорожной активности, так и в отношении противоаллодинической активности (Kaufmann et al., 2009). Предварительные исследования поведения на животных моделях одного из исследуемых соединений не предполагают сильного седативного эффекта.
Было обнаружено, что VPA является ингибитором биосинтеза инозитола, косвенно блокируя продукцию инозитол-1-фосфата из глюкозо-6-фосфата (Shaltiel et al., 2004, Shaltiel et al., 2007а, Vaden et al., 2001). Роль VPA в снижении участия инозитола в передаче сигнала была широко показана на моделях от дрожжей (Vaden et al, 2001) и Dictyostelium (Williams et al., 1999, Williams 2002) до Caenorhabditis elegans (Tokuoka et al., 2008), крыс и человека (Shaltiel et al., 2007a, Shaltiel ef al., 2007b). Чтобы показать снижение уровней инозитола, использовали измерение уровней инозитола и трифосфата инозитола (InsP3) и инозитол-зависимого расширения конуса роста млекопитающих. Поскольку было не ясно, может ли VPA-индуцированное снижение уровней инозитола привести к быстрому ингибированию фосфоинозитидной сигнализации, продемонстрированному в данной заявке, изобретатели проанализировали метаболизм фосфоинозитида с использованием соединений, родственных VPA, для которых была показана их активность на снижение уровней инозитола. Соединения, показавшие сильное снижение уровней InsP3 на модели Dictyostelium с одновременным расширением конусов роста млекопитающих, зависимым от снижения уровней инозитола, включают 2-метил-2-пентеновую кислоту (Eickholt et al., 2005), причем это соединение показало более сильное снижение уровня фосфоинозитида, чем VPA. Интересно, что замещение карбоксильной группы в соединениях, показавших высокое снижение уровня фосфоинозитида (VPA), карбоксамидной группой (с получением соответствующего амида (VPD)) снижает ингибирующий эффект на метаболизм фосфоинозитида и снижает расширение конуса роста млекопитающих, причем VPD показал слабое ингибирование человеческой мио-инозитол-синтазы, предложенной в качестве мишени для VPA при снижении уровней инозитола (MIP синтазы (Shaltiel et al., 2004, Shaltiel et at., 2007a)). Эти соединения, снижающие уровни инозитола и фосфоинозитида, находятся, в основном, в первой структурной группе соединений (описанной выше), и также включают ряд потенциальных противосудорожных средств второго поколения относительно VPA, которые в настоящее время исследуются (Bialer & Yagen, 2007). Ни одно из соединений нового семейства с длинной основной цепью, идентифицированных в этом исследовании, не было проанализировано в отношении влияния на снижение уровней инозитола.
Поскольку снижение уровней инозитола может обеспечивать механизм этих соединений на снижение метаболизма фосфоинозитида, изобретатели проанализировали уровни инозитола в обработанных клетках Dictyostelium с использованием ряда соединений из обеих структурных групп, демонстрирующих различное снижение метаболизма фосфоинозитида. В этих опытах VPA не показала значительного снижения уровней инозитола за период времени, в течение которого происходит снижение метаболизма фосфоинозитида (9 мин), как же как и другие протестированные соединения, следовательно, отсутствует корреляция между снижением метаболизма фосфоинозитида и снижением уровней инозитола. Этот вывод находится в соответствии с ранее полученными данными на модели Dictyostelium, показывающими, что быстрое ингибирование инозитол-монофосфатазы (литием) не усиливает снижение метаболизма фосфоинозитида (King et al., 2009), и снижение уровней трифосфата инозитола в этой модели с VPA требует 6-ти часовой обработки (Williams et al., 1999), что значительно дольше, чем периоды времени, использованные в этой работе. Следовательно, эти исследования предполагают, что снижение метаболизма фосфоинозитида обусловливает новый эффект VPA на модели Dictyostelium и выявляют группу соединений, имеющих повышенную эффективность этого эффекта. Поскольку повышенные уровни PIP и PIP2 наблюдали в течение судорог на животных моделях (Van Rooijen et al., 1986), изобретатели открыли новое семейство соединений, вызывающих такой эффект.
2.3 Новые соединения показали повышенную эффективность на эпилептиформных моделях in vitro
Поскольку невозможно повторить опыты с радиоактивной меткой на животных моделях in vivo, чтобы подтвердить обнаруженные изобретателями механизмы на моделях более высокого порядка, изобретатели проанализировали эффективность нового семейства соединений в отношении контроля судорог. Для этих опытов они использовали VPA-чувствительную модель эпилептиформной активности in vitro, вызванной введением пентилентетразола (PTZ) (Armand et al., 1998), для анализа трех соединений из нового семейства (Fig 3a, b), имеющих основную цепь из 8 атомов углерода с боковыми цепями различной длины в различных положениях. VPA значительно снижала частоту эпилептиформных разрядов (Armand et al., 1998; фиг.3b; VPA: 75,1±1,7%). Применение эквимолярных концентраций каждого из соединений, имеющих основную цепь из 8 атомов углерода, также сильно снижало частоту разрядов со значительно большей эффективностью, чем VPA (фиг.3b, 3c). Применение всех трех новых соединений значительно снижало частоту судорог (4-метилоктановая кислота - 49,1±4,4%, 2-пропилоктановая кислота - 5,3±3,3 и 2-бутилоктановая кислота - 5,2±5,0%, для всех Р=0,005 по сравнению с VPA). Изобретатели также расширили круг соединений, чтобы показать аналогичную эффективность для соединений, имеющих прямую основную цепь из 9-10 атомов углерода (нонановая кислота, 20,9±7,5%, Р=2×10-6 по сравнению с VPA; декановая кислота 0,23±0,23%, Р=2×10-6 по сравнению с VPA фиг.3d, е). Такая активность не наблюдалась для соединений с более короткими основными цепями (н-р, для пентановой кислоты, у которой цепь содержит 5 атомов углерода - данные не показаны). Эти высоко активные соединения ранее не ассоциировались с контролем судорог и для них не были предсказаны тератогенные эффекты (Guo et al., 1999).
Чтобы показать, что эффект этих соединений не является специфичным к модели судорог, изобретатели дополнительно исследовали эффект одного из этих соединений in vitro на модели судорог, вызванных низким Mg2+ (фиг.3f, g, h). Изобретатели выбрали 4-метилоктановую кислоту, поскольку она является эндогенной в животных системах (Johnson et al., 1977). VPA (1 мМ) слабо снижала частоту рекуррентных коротких разрядов в этой модели. Применение 4-метилоктановой кислоты почти прекратило рекуррентные короткие разряды через 30-40 минут после обработки. Таким образом, эти данные показывают более высокую активность 4-метилоктановой кислоты по сравнению с VPA в различных моделях эпилептиформной активности in vitro.
2.4 Новые соединения продемонстрировали улучшенный контроль эпилептического статуса (status epilepticus)
Чтобы показать дополнительную эффективность этих соединений на животных моделях судорог, изобретатели протестировали 4-метилоктановую кислоту на модели status epilepticus in vivo (фиг.4). Для этого исследования status epilepticus индуцировали стимуляцией перфорирующего пути у бодрствующих, свободно движущихся крыс, как описано ранее (Holtkamp et al., 2001, Walker et al., 1999; фиг.4a). Изобретатели ранее обнаружили, что VPA эффективна на этой модели в высокой дозе (400 мг/кг). Поэтому изобретатели сравнили эффективность 4-метилоктановой кислоты (400 мг/кг) по сравнению с VPA (400 мг/кг). 4-метилоктановая кислота имеет более высокую молекулярную массу (MW=158), чем VPA (MW=144), поэтому эта доза представляет немного более низкую молярную дозу 4-метилоктановой кислоты. VPA сильно снижала судороги в этой модели через 2 часа после обработки, причем эффективность снижалась через 3 часа после обработки (фиг.4b), а 4-метилоктановая кислота защитила от судорог в течение всего периода исследования. Оба соединения снизили амплитуду и частоту пиков (Fig 4): VPA снизила амплитуду пиков (75,2±9,2% через первый час; 61,1±8,3% через второй час; 55,1±6,6% через третий час) (фиг.4e, f). В сравнении, 4-метилоктановая кислота показала значительно более лучший контроль, что выразилось в снижении средней частоты пиков 39,3±11,3% через первый час (значительно лучше, чем VPA p<0,05); 18,1±10,3% через второй час (p<0,05 по сравнению с VPA) и 26,9±12,3% через третий час (фиг.4e, f). 4-метилоктановая кислота прекратила status epilepticus (что определяется как частота пиков менее 1 Гц) у всех животных со status epilepticus. Кроме того, 4-метилоктановая кислота полностью остановила судороги у всех 7 животных через 2 часа, a VPA снизила силу судорог, но не остановила их (P=0,0003, тест Фишера), причем этот эффект сохранялся у пяти из семи животных, которым давали 4-метилоктановую кислоту, в течение 3 часов (P=0,01, тест Фишера).
2.5 VPA регулирует поглощение и высвобождение жирных кислот
Для анализа роли арахидоновой кислоты в регуляции высвобождения, опосредованного VPA, на модели Dictyostelium изобретатели разработали методику, основанную на высвобождении со временем радиоактивной метки из клеток, содержащих тритированные жирные кислоты. С использованием этой методики изобретатели показали, что после мечения клеток 3Н-АА, высвобождение радиоактивной метки в среду было линейным в течение 45 минут (фиг.5А). Эффект VPA на высвобождение радиоактивной метки из АА-меченых клеток был быстрым и дозо-зависимым, причем VPA индуцировала снижение высвобождения с IC50, составляющей 89 мкМ. Этот эффект не был специфичным в отношении АА, поскольку высвобождение тритированной пальмитиновой кислоты также замедлялось в присутствии VPA с IC50, составляющей 163 мкМ (фиг.5С). Быстрота этого эффекта продемонстрирована значительным ингибированием через 30 минут воздействия (p<0,05).
Поскольку сниженное высвобождение меченых жирных кислот может быть вызвано их включением в липиды, изобретатели также измерили поглощение жирных кислот путем измерения меченых жирных кислот в клетках. Подобно высвобождению жирных кислот, включение тритированной АА было линейным в течение 30 минут (фиг.5В), однако, VPA вызвала дозо-зависимое повышение поглощения АА с ЕС50, составляющей 47 мкМ. Этот эффект также наблюдался при использовании пальмитиновой кислоты с ЕС50, составляющей 160 мкМ (фиг.5D), и был значительным в через 30 минут после обработки (p<0,05).
Для проверки того, происходят ли описанные эффекты из-за простого включения жирных кислот в мембрану, изобретатели визуализировали поглощение жирных кислот с использованием соединения, содержащего цепь жирной кислоты с 12 атомами углерода, связанную с флуоресцентной меткой (bodipy; фиг.6А) (Worsfold et al., 2004). После инкубации клеток и липида, меченого bodipy, 0,5 мМ VPA вызвала повышение интенсивности и диаметра капель флуоресцентных липидов в клетках по сравнению с необработанными клетками (фиг.6В). Эти результаты показывают, что VPA также повышает поглощение этих жирных кислот, и что лекарство повышает удерживание жирных кислот в каплях липидов.
2.6 VPA-индуцированное поглощение жирных кислот происходит независимо от динамики актина
Поглощение (и высвобождение) соединений в модели Dictyostelium, вероятно, регулируется клеточными механизмами, контролирующими макропиноцитоз, поэтому изменения включения жирных кислот могут быть результатом простой регуляции этого процесса. Чтобы это проверить, и поскольку макропиноцитоз зависит от полимеризации актина, изобретатели использовали латрункулин (10 мкМ), ингибитор полимеризации актина (de Oliveira и Mantovani, 1988), для наблюдения эффектов на поглощение жирных кислот. Ингибирование полимеризации актина снизило поглощение в контрольных клетках. Однако, латрункулин не снизил VPA-индуцированное поглощение АА, что предполагает, что VPA-индуцированная регуляция жирных кислот не зависит от динамики визикул (фиг.6С).
2.7 Генетическая абляция активности PLA2 не восстанавливает нарушение метаболизма жирных кислот
Для обнаружения особых генов, контролирующих влияние VPA в этой модели, изобретатели провели скрининг мутантов, полученных способом опосредованной рестриктазами интеграции (REMI), чтобы идентифицировать локусы, контролирующие эффект VPA в процессе развития (Kuspa и Loomis, 2006). VPA ингибирует развитие Dictyostelium при концентрациях, обнаруженных в плазме пациентов, принимающих лечение VPA (0,28-0,7 мМ; (Silva et al., 2008)) (фиг.7В). Один мутант, выделенный в этом скрининге, содержал ген без PLA2 (van Haastert et al., 2007), с кодированным белком, схожим с Са2+ - независимыми ферментами и содержащим сохраненную АТФазу и фрагменты липазы (фиг.7А), этот мутант показал частичную устойчивость к VPA в процессе развития (фиг.7В). Однако, ноуаутная клеточная линия не снижала высвобождение радиоактивной метки из клеток (фиг.7С), что предполагает, что хотя нарушение PLA2 гена привело к частичной устойчивости к VPA в процессе развития, она не была достаточной, чтобы полностью предотвратить VPA-индуцированное высвобождение жирных кислот.
2.8 VPA-регуляция передачи сигнала жирными кислотами не фенокопируется ингибированием PLA2
Поскольку предполагают, что VPA регулирует передачу сигнала, опосредованную фосфолипазой A2 (PLA2) (Rao et al., 2008), и поскольку удаление одного PLA2 гена обеспечило только частичную устойчивость к VPA в процессе развития и отсутствие эффекта на полное высвобождение или поглощение меченых жирных кислот (фиг.7), изобретатели оценили роль фармакологического ингибирования PLA2 на регуляцию АА. Химические ингибиторы, специфичные к различным классам PLA2 (BEL [80 мкМ], Са2+ - независимый PLA2 ингибитор (Ackermann et al., 1995); MAFP [50 мкМ], Ca2+ - зависимый и Са2+ - независимый ингибитор цитозольной PLA2 (Balsinde и Dennis, 1996, Lio et al., 1996); и BPB [20 мкМ], ингибитор фосфолипазы А2 (Mitchell et al., 1976) - все снижали высвобождение радиоактивной метки из клеток 3Н-АА аналогичным образом, как и обработка VPA (фиг.8). Была показана различающаяся специфичность этих ингибиторов, поскольку коктейль всех трех ингибиторов обеспечил кумулятивное ингибирование высвобождения. В отличие от действия VPA на высвобождение (вызывающего повышение содержания жирных кислот с течением времени), химическое ингибирование активности PLA2 вызвало снижение поглощения жирных кислот (фиг.8). Эти данные предполагают, что ингибирование PLA2 частично фенокопирует эффект VPA на изменение АА-сигнализации, но VPA имеет более общий эффект на передачу сигнала жирными кислотами.
2.9 VPA-индуцированное поглощение жирных кислот не зависит от активации жирных кислот
Для проверки того, зависит ли включение жирных кислот от активации, изобретатели сначала протестировали способность клеточных экстрактов активировать пальмитиновую кислоту с образованием РаА-СоА. В этих опытах инкубация клеточных экстрактов с 3Н-РаА и коэнзимом A обеспечила активацию жирных кислот, которые затем были разделены на основе различной растворимости в растворителях и определены количественно (von Lohneysen et al., 2003). Включение VPA (1,0 мМ) либо с клеточными экстрактами в процессе опыта по активации, либо путем предварительной обработки клеток перед приготовлением экстрактов (10 мин, 1 мМ), не имело влияния на активацию жирных кислот, а отсутствие пероксисомального фермента СоА синтазы A жирных кислот (FcsA) - фермента, ответственного за активацию CoA жирных кислот в эндосомах - показало значительное снижение синтеза РаА-СоА (фиг.8) по сравнению с клетками дикого типа. Более того, клеточные линии, не содержащие fcsA (DDB_G0269242; (von Lohneysen et al., 2003)), показали аналогичное VPA-индуцированное повышение поглощения жирных кислот, как в клетках дикого типа (фиг.8). Эти результаты предполагают, что эффект VPA в регуляции передачи сигнала жирными кислотами не зависит от активации СоА жирных кислот, как предполагалось ранее (Bazinet et al., 2006b).
2.10 Структурная специфичность индуцированного высвобождения жирных кислот
Исследования SAR определяют физические требования для соединений, вызывающие эффект, и эти исследования могут помочь отличить отдельные эффекты соединения. Чтобы оценить структурную зависимость VPA на высвобождение меченого вещества после включения 3Н-АА, изобретатели использовали ряд соединений, родственных VPA, которые имели различные длины основных и боковых цепей, концевые группы, энантиомерную специфичность и степень насыщения, и измерили высвобождение через 30 минут после обработки 0,5 мМ вещества. Полученные результаты приведены в Таблице 3 ниже.
Протестированные соединения показали диапазон ингибирующей активности с высокой структурной специфичностью, причем степень активности не зависела от силы кислоты и липофильности (значений pKA и logP соответственно).
Поскольку VPA показала снижение активности 50% от контроля, изобретатели определили соединения, такие как 2-пропилоктановая кислота, как высоко активные, поскольку они снижали активность до 45% или менее. Этими высоко активными соединениями являются карбоновые кислоты (поскольку вальпромид не показал ингибирующего эффекта, данные не показаны), разветвленные у второго атома углерода, причем наиболее активные соединения содержат изопропильную группу. В отличие от тератогенности (Eickholt et al. 2006), кислоты с четвертично-замещенным вторым (C2) атомом углерода еще показали активность, а жирные кислоты с длинными и средними цепями еще были активными. Соединения с разветвленной цепью были сильнее, чем соответствующие соединения с прямой цепью, причем предпочтительными были соединения с более длинными боковыми цепями (пропил в боковой цепи показал более сильное ингибирование, чем метил). Наконец, ненасыщенные соединения показали снижение ингибирующей активности. Это исследование SAR является новым описанием VPA-катализируемого эффекта.
Для подтверждения того, что двойной эффект сниженного высвобождения жирных кислот и повышенного поглощения жирных кислот имеет место одновременно, изобретатели проанализировали два соединения, демонстрирующие либо сильный, либо слабый ингибирующий эффект на высвобождение радиоактивной метки (изопропилпентановую кислоту и 4-метилоктановую кислоту, соответственно), на влияние на поглощение 3Н-АА (фиг.9). Согласно этим экспериментам повышенное ингибирование высвобождения радиоактивной метки соответствовало повышенному поглощению жирных кислот в клетках по сравнению с VPA, и сниженный эффект на высвобождение соответствовал сниженному эффекту на поглощение. Эти данные предполагают единственный, высоко структурно-специфичный сайт, на который действуют VPA и родственные соединения, в регуляции передачи сигнала жирными кислотами.
3. Обсуждение
VPA используют для лечения медицинских состояний, включая эпилепсию, биполярные расстройства и мигрень, и ее роль, возможно, распространяется на лечение рака (Blaheta et al., 2006), ВИЧ и болезни Альцгеймера (Qing et al. 2008) (обсуждается в работах Lagace et al., 2005, Terbach & Williams, 2009, Bialer & Yagen, 2007), ишемии (Costa et al. 2006) и фатальной кровопотери (Alam et al. 2009). Было доказано, что очень сложным является понимание того, как эти состояния можно контролировать посредством VPA, поскольку она запускает разнообразие клеточных изменений с неизвестными первичными мишенями, и эти изменения не были отнесены к конкретным клиническим состояниям, и было проведено несколько испытаний зависимости структура-функция (обсуждается в работах Lagace et al., 2005, Terbach & Williams, 2009, Bialer & Yagen, 2007, Nalivaeva et al., 2009).
3.1 Эффект на фосфоинозитольную сигнализацию
Изобретатели показали, что VPA вызывает дозо-зависимое снижение уровней PIP и PIP2 (Фиг.s 1а и b) на биомедицинской модели Dictyostelium, и оно обуславливает один из нескольких эффектов VPA, которые происходят в короткий период времени, что было показано при защите от индуцированных судорог (Фиг.1b; Honack & Loscher, 1992). Огромное большинство исследований механизмов активности VPA осложнялось длительным временем обработки, приводящим к изменениям экспрессии генов (возможно опосредованных тератогенными эффектами (Gurvich ef al., 2004, Phiel et al., 2001)) или временем, позволяющим регуляцию многих косвенных мишеней. Поэтому быстрое ингибирование фосфоинозитидной сигнализации обеспечивает существенное понимание быстрой функции VPA. В свете повышенных уровней фосфоинозитида в течение судорог (Van Rooijen et al., 1986) раскрытые результаты обеспечивают волнующий прорыв в понимании контроля судорог.
Очень трудно определить мишени для лекарства, модулирующего метаболизм фосфоинозитида in vivo у млекопитающих, из-за большого количества киназ и фосфатаз, и обещающего выбора природы субстратов для липидкиназ. Предпочтительный подход, облегчаемый моделью Dictyostelium, заключается в применении изогенных мышиных линий с вырезанными киназными генами. Поскольку, как показано ранее, VPA снижает продукцию PIP3 (Xu et al., 2007), изобретатели проанализировали метаболизм фосфоинозитида в клеточных линиях, не имеющих всех типов активности 1 PI3K (Hoeller & Kay, 2007), и в двух нуль-мутантах с полностью выключенным геном липидкиназ (фосфатидилинозитол-5-киназы, связанной с рецептором (rPKA) (Bakthavatsalam et al., 2006); и ядерной фосфатидилинозитол-4/5-киназы (PIPKinA) (Guo et al., 2001; Фиг.2). Все три мутантных клеточных линии показали значительное снижение метаболизма PIP после обработки VPA по сравнению с клетками дикого типа, что указывает на то, что эти ферменты не могут быть прямой мишенью при ингибировании фосфоинозитида посредством VPA, и что проверка других киназ не будет иметь большого успеха.
Теория элиминации инозитола (Berridge et al., 1989) является хорошо доказанной теорией действия VPA при профилактике биполярных расстройств (Williams et al., 2002, Williams, 2005) потенциально посредством непрямого ингибирования фермента, ответственного за новый биосинтез инозитола, мио-инозитол-1-фосфат-синтазы (MIP). Сильный ингибирующий эффект на активность MIP также был показан на ограниченном круге соединений, родственных VPA (Shaltiel et al., 2004; Shaltiel et al., 2007), предполагая, что регуляция инозитола может относится к контролю судорог. Однако, вновь открытые соединения, демонстрирующие улучшенный контроль судорог (н-р 4-МО и нонановая кислоты), не снижают быстро уровень инозитола за время для контроля судорог, что оспаривает роль инозитольной сигнализации в таком клиническом лечении. Einat et al., 2008 также показали, что фармакологическое ингибирование MIP (соединениями, структурно отличными от VPA) не контролирует судороги, чувствительные к инозитолу, на модели, индуцированной пилокарпином. Наоборот, представленные здесь данные добавляют доказательства того, что фосфоинозитидная сигнализация играет ключевую роль в возникновении судорог (Backman et al., 2001) и предполагают, что влияние VPA на метаболизм фосфоинозитида и контроль судорог не связано с элиминацией инозитола.
Большинство исследований, касающихся мишеней для VPA и клинической эффективности, было сфокусировано на соединениях, имеющих основную цепь из 5 атомов углерода (с точкой разветвления у второго атома углерода) или на циклических производных (Bialer & Yagen, 2007). Поэтому открытие новой группы соединений с более длинными основными цепями, демонстрирующими ингибирование метаболизма фосфоинозитида и контроль судорог, является существенным шагом вперед в развитии новых терапевтических средств. Эта новая группа соединений включает соединения, имеющие разветвления у второго и четвертого атомов углерода, что предполагает эффективность соединений с различными разветвлениями, и, таким образом, предлагает новую большую группу соединений, представляющих потенциальный клинический интерес.
В данной работе изобретатели протестировали эффективность пяти соединений из этой новой группы жирных кислот на модели эпилептиформной активности in vitro, которая является ключевой моделью для скрининга противоэпилептических лекарств (Piredda et al., 1985). Все соединения обеспечили сильное, но обратимое увеличение снижения эпилептиформной активности на модели PTZ (см. Фиг.3). Этот эффект не является специфичным к модели, поскольку одно соединение (4-метилоктановая кислота) показало эффективность на модели с низким Mg2+. Однако, эффективность на моделях in vitro не обязательно предполагает эффективность in vivo, поскольку другие факторы, такие как метаболизм лекарства, проникновение в мозг и доступ к целевой мишени, играют важную роль. Поэтому изобретатели дополнительно протестировали 4-метилоктановую кислоту на модели эпилептического статуса in vivo (Фиг.4), где был доказан более сильный эффект, чем у VPA. Ранее было показано, что эта модель устойчива к фенитоину и отвечает только высоким дозам противосудорожных средств (Chang et al., 2009). Поэтому эти результаты предполагают, что эта группа соединений может обеспечить новый агент для контроля судорог с повышенной эффективностью, и, поскольку предполагают, что эти соединения не являются тератогенными, они также могут иметь сниженные побочные эффекты по сравнению с лечением VPA.
Эти исследования определили механизм действия VPA на ингибирование метаболизма фосфоинозитида на простой биомедицинской модели Dictyostelium и показали, что этот эффект имеет место, не зависимо от ряда фосфоинозитид-киназных ферментов, рециклинга и элиминации инозитола. Изобретатели использовали эту систему для определения новой группы соединений, демонстрирующих повышенное ингибирование фосфоинозитида. Это исследование на простой модели было перенесено на несколько клинических моделей контроля судорог, и было показано сильное повышение эффективности для пяти соединений по сравнению с VPA на модели эпилептиформной активности на срезах энторинальной области коры и гиппокампа, и одного из этих соединений на полной животной модели status epilepticus. Поэтому эти исследования предполагают более высокую эффективность контроля судорог для этой новой группы соединений, имеющих более длинную основную цепь и боковые цепи различной длины и находящиеся у различных атомов углерода основной цепи, по сравнению с VPA. Продолжающийся анализ путей биосинтеза, контролирующих фосфоинозитидную сигнализацию, может дать значительный прогресс в понимании эпилепсии и других расстройств, которые лечат VPA, таких как биполярные расстройства и мигрень.
3.2 Эффект на метаболизм жирных кислот
Предыдущие исследование предположили, что возможный механизм действия VPA заключается в ингибировании метаболизма арахидоновой кислоты (Chang et al., 2001). В данной работе изобретатели продемонстрировали на модели Dictyostelium discoideum, что VPA значительно снижает высвобождение радиоактивной метки после введения 3Н-АА. Изобретатели также неожиданно обнаружили, что поглощение 3Н-АА усиливается в присутствии VPA. Поскольку арахидоновая кислота не является эндогенной жирной кислотой в Dictyostelium, изобретатели также проверили эти результаты с пальмитиновой кислотой, жирной кислотой, которая обнаружена в Dictyostelium (Weeks, 1976). Аналогичные результаты, полученные для полиненасыщенных и насыщенных жирных кислот, предполагают общий механизм модуляции метаболизма жирных кислот посредством VPA. Сходство этих результатов, продемонстрированное в данной работе, а также результатов на животной модели in vivo, таких как сниженный метаболизм АА (Chang et al., 2001) и повышенное накопление липидов (Kesterson et al., 1984), предполагают, что модель Dictyostelium может быть полезной в исследовании VPA-индуцированной динамики жирных кислот.
Некоторые исследования регуляции жирных кислот посредством VPA на животных моделях протестировали роль VPA в усилении транспорта жирных кислот в клетки. Таким образом, для проверки этого и поскольку поглощение экстраклеточных нутриентов в Dictyostelium регулируется динамикой везикул (макропиноцитоз), изобретатели показали, что блокирование функции везикул путем ингибирующей полимеризации не ингибирует VPA-катализируемое повышение поглощения жирных кислот. Эти результаты подтверждаются предыдущими результатами, поскольку они показали, что VPA-обработка также ингибирует динамику везикул в Dictyostelium (Xu et al., 2007), следовательно, эти результаты указывают на влияние VPA на регуляцию передачи сигнала жирными кислотами, которая не зависит от поглощения.
Метаболизм полиненасыщенных жирных кислот главным образом регулируется PLA2-катализируемым расщеплением липидов с высвобождением свободных жирных кислот, и ранее предполагалось, что VPA регулирует PLA2-зависимую сигнализацию (Rapoport и Bosetti, 2002). Была предсказана роль PLA2 в VPA-зависимой сигнализации на нашей модели, когда при скрининге мутантов, устойчивых к действию VPA в процессе развития, было обнаружено, что удаление одного гена PLA2 дает частичную устойчивость к VPA. Это обеспечило связь с потенциальным клиническим действием VPA, поскольку были определены повышенные уровни PLA2 у пациентов с биполярным расстройством (Ross et al., 2006) и с судорогами (Siesjo et al., 1982; Rintala et al., 1999a; Bazan et al., 2002; Basselin et al., 2003a). Однако, удаление одной изоформы PLA2, идентифицированной в генетическом скрининге, не оказало влияния на полное изменение VPA-индуцированного высвобождения радиоактивной метки (фиг.8В). Это может быть потому, что в геноме присутствуют 18 других генов, родственных гену PLA2 (Fey et al., 2009), поскольку активности продуктов этих генов в полноклеточных опытах, возможно, нивелируют небольшие изменения, вызванные удалением только одного гена. Однако, идентифицированный ген может играть критическую, целевую роль в хемотаксисе и развитии Dictyostelium - как было показано (Chen et al., 2007, Kortholt и van Haastert, 2008), и поэтому VPA-опосредованные эффекты развития были частично преодолены. Такое VPA-зависимое ингибирование развития может быть не видно в проведенных исследованиях, поскольку эти исследования не были дифференцированы между особыми функциями клеток, а также не было рассмотрено множество временных точек в процессе развития.
Для дополнительного исследования сигнализации PLA2 в связи с наблюдаемым эффектом VPA изобретатели использовали фармакологические ингибиторы активности PLA2 и показали, что они снижают высвобождение радиоактивной метки из клеток, меченых 3Н-АА, таким образом было подтверждено, что VPA имитирует эффект ингибирования PLA2 в этой модели. Однако, этот эффект VPA происходит не через прямое ингибирование PLA2, поскольку VPA-индуцированное повышение поглощения жирных кислот не воспроизводилось ингибиторами PLA2 (фиг.9). Эти данные предполагают, что этот эффект VPA, подобный эффекту ингибирования PLA2, может быть только одной стороной лекарственного действия на регуляцию метаболизма жирных кислот, и подтверждают, что PLA2 не является главной мишенью VPA в этом эффекте.
Если PLA2 не является фармакологической мишенью для VPA, наблюдаемое частичное фенокопирование ингибиторов PLA2 может указывать на нарушение метаболизма липидов. Например, сниженная активность ацил-СоА синтазы жирных кислот может вызвать сниженное включение радиомеченых жирных кислот в фосфолипиды, в результате будет снижено высвобождение радиомеченых жирных кислот (что напоминает PLA2-ингибирующий эффект). Изобретатели показали, что VPA не ингибирует активацию СоА жирных кислот, ни прямо, ни опосредованно. Более того, генетическое удаление обеих СоА синтаз жирных кислот (FcsA и FcsB) показало VPA-зависимую регуляцию поглощения АА, что подтверждает, что активация жирных кислот не является мишенью для VPA в этом эффекте, в отличие от того, что сообщали в связи с высокими концентрациями VPA (Bazinet et al., 2006b).
Наконец, изобретатели использовали исследование SAR для проверки VPA-индуцированной регуляции жирных кислот. Этот подход обеспечил весьма важное понимание действия VPA, поскольку VPA используется для терапевтического лечения большого круга заболеваний (Terbach и Williams, 2009), при этом большое количество клеточных эффектов остаются не соотнесенными с каждым из терапевтических действий, и для очень малого количества из этих эффектов определена первичная мишень (Lagace и Eisch, 2005, Terbach и Williams, 2009). Исследования SAR могут быть использованы, чтобы дифференцировать терапевтическое действие, механизмы и мишени. Например, было показано, что родственное VPA соединение, демонстрирующее ингибирование гистондеацетилазы в качестве клеточной функции, вызывает тератогенность в качестве биомедицинского действия, и определение структуры сейчас позволяет предсказать тератогенность новых соединений (Phiel et al., 2001). На основании исследований SAR в отношении метаболизма жирных кислот показано, что этот эффект не имеет отношения к тератогенности, поскольку некоторые соединения показали сильную регуляцию жирных кислот, но не показали предсказанной тератогенности (Radatz et al., 1998). Другой клеточный эффект VPA в Dictyostelium и нейронах млекопитающих заключается в ингибировании передачи сигнала, опосредованной инозитолом (Williams et al., 2002, Eickholt et al., 2005, Shimshoni et al., 2007). Хотя некоторые соединения (н-р, изопропилпентановая кислота) являются высоко активными как в отношении ингибирования передачи сигнала, опосредованной инозитолом, так и в отношении регуляции жирных кислот, эти эффекты не являются общими для всех соединений, что указывает на то, что эффекты сигнализации, опосредованной жирными кислотами и инозитолом, являются независимыми. Таким образом, регуляция жирных кислот, ингибирование гистондеацетилазы и снижение уровней инозитола обеспечивают три независимых механизма действия VPA. Следовательно, применение VPA-структур, демонстрирующих повышенную или пониженную активность в регуляции жирных кислот, может привести к повышению терапевтической активности или снижению нежелательных побочных эффектов при лечении состояний, которые лечат посредством VPA.
Одно клиническое следствие этой работы показано на образовании капель липидов, зависимого от VPA. Этот эффект был показан в системах, начиная от S. cerevisiae (Sun et al., 2007) до гиппокампа и коры головного мозга крыс (Sobaniec-Lotowska, 2005), что ясно указывает на то, что описанные наблюдаемые эффекты скорее всего не являются специфичными к модели. Более того, образование капель липидов связано с гепатотоксичностью, хотя механизм этого остается неясным (Fujimura et al., 2009). Определение структурной специфичности для этого эффекта в регуляции липидов обеспечивает потенциальный механизм для выбора новых терапевтических средств, не имеющих этого эффекта. Структурное выделение VPA- зависимого повышенного накопления липидов также может предложить подход к объяснению набора массы тела у пациентов, которых лечат VPA (Wirrell, 2003, Masuccio et al., 2010, Verrotti et al., 2010).
В заключение следует отметить, что изобретатели описали модель для изучения регуляции жирных кислот, индуцированной VPA. Ингибирование PLA2 фенокопирует некоторые, но не все из этих эффектов, зависящих от VPA, однако, маловероятно, что PLA2 является первичной мишенью для VPA. Роль этого эффекта, вероятно, заключается в действии как в отношении лечения биполярных расстройств, так и в отношении контроля судорог, поскольку повышенная активность PLA2 подразумевается в обоих состояниях (Yegin et al., 2002, Rao et al., 2007). Определение новых структур для этого эффекта, включая карбоновые кислоты с короткими (5 атомов углерода) и средними (9 атомов углерода) основными цепями и боковыми цепями (этил или пропил), имеющие разветвление у второго атома углерода основной цепи, обеспечивает потенциальные новые терапевтические средства для лечения обоих состояний. Последующее определение первичного места действия для этого эффекта значительно поможет нашему пониманию VPA и родственных терапевтических средств.
Все цитируемые документы во всей полноте включены в данное описание посредством ссылки.
Список литературы:
Ackermann EJ, Conde-Frieboes K, Dennis EA, Journal of Biological Chemistry 270, 445-450 (1995).
Alam et al. Surgery 146, 325-333 (2009)
Armand, V., Louvel, J., Pumain, R., & Heinemann, U. Epilepsy Res. 32, 345-355 (1998).
Backman, S.A. et al. Nat. Genet. 29, 396-403 (2001).
Bakthavatsalam, D., Meijer, H.J., Noegel, A.A., & Govers, F. Trends Microbiol. 14, 78-382 (2006).
Blaheta, Michaelis, Driever & Cinatl Med. Res. Rev. 25, 383-397 (2005). 3. Deubzer et al. Leuk. Res. 30, 1167-1175 (2006)
Balsinde J, Dennis EA, Journal of Biological Chemistry 271, 6758-6765 (1996).
Basselin M, Chang L, Bell JM, Rapoport SI, Neuropsychopharmacology 31, 1659-1674 (2005).
Basselin M, Chang L, Seemann R, Bell JM, Rapoport SI, J. Neurochem. 85, 1553-1562 (2003).
Bazan NG, Tu B, Rodriguez de Turco EB, Prog. Brain. Res. 135, 175-185 (2002).
Bazinet RP, Rao JS, Chang L, Rapoport SI, Lee HJ, Biol. Psychiatry 59, 401-407 (2006a).
Bazinet RP, Weis MT, Rapoport SI, Rosenberger ТА, Psychopharmacology (Berl) 184, 122-129 (2006b).
Berridge, M.J., Downes, C.P., & Hanley, M.R. Cell 59, 411-419 (1989).
Bialer, M. & White, H.S. Nat Rev Drug Discov. 9, 68-82 (2010).
Bialer, M. & Yagen, B. Neurotherapeutics. 4, 130-137 (2007).
Boeckeler K, Adley K, Xu X, Jenkins A, Jin T, Williams RS, Eur. J. Cell Biol. 85, 1047-1057 (2006).
Chang, P., Chandler, K.E., Williams, R.S., & Walker, M.C. Epilepsia (2009).
Chang MC, Contreras MA, Rosenberger ТА, Rintala JJ, Bell JM, Rapoport SI, J. Neurochem. 77, 796-803 (2001).
Chapman, A.G., Meldrum, B.S., & Mendes, E. Life Sci. 32, 2023-2031 (1983).
Chen CT, Green JT, Orr SK, Bazinet RP Prostaglandins Leukot Essent. Fatty Acids 79, 85-91 (2008).
Chen L, lijima M, Tang M, Landree MA, Huang YE, Xiong Y, Iglesias PA, Devreotes PN, Dev. Cell 12, 603-614 (2007).
Chiu CC, Huang SY, Su KP, Lu мл, Huang MC, Chen CC, Shen WW, Eur. Neuropsychopharmacol 13, 99-103 (2003).
Costa et al. Stroke 37, 1319-1326 (2006)
de Oliveira CA, Mantovani B, Life Science 43, 1825-1830 (1988).
Deutsch, J., Rapoport, S.I., & Rosenberger, T.A. Neurochem. Res. 28, 861-866 (2003).
Drancourt M, Bollet C, Carta A, Rousselier P, Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 51, 925-932 (2001).
Drayer, A.L., Van Der, K.J., Mayr, G.W., & Van Haastert, P.J. EMBO J. 13, 1601-1609 (1994).
DSMV IV American Psychiatric Association: Diagnostic u statistical manual of mental disorders (American Psychiatric Association, Washington DC, 2000).
Eickholt BJ, Towers GJ, Ryves WJ, Eikel D, Adley K, Ylinen LM, Chadborn NH, Harwood AJ, Nau H, Williams RS, Mol. Pharmacol. 67, 1426-1433 (2005).
Eikel D, Lampen A, Nau H, Chem. Res. Toxicol. 19, 272-278 (2006).
Einat, H., Tian, F., Belmaker, R.H., & Frost, J.W. J. Neural Transm. 115, 55-58 (2008).
Eyal S, Yagen B, Shimshoni J, Bialer M, Biochem. Pharmacol. 69, 1501-1508 (2005).
Faix J, Kreppel L, Shaulsky G, Schleicher M, KimMel AR, Nucleic Acids Research 32, e143 (2004).
Fey P, Gaudet P, Curk T, Zupan B, Just EM, Basu S, Merchant SN, Bushmanova YA, Shaulsky G, Kibbe WA, Chisholm RL, Nucleic Acids Research 37, D515-519 (2009).
Fujimura H, Murakami N, Kurabe M, Toriumi W, J. Appl. Toxicol. 29, 356-363 (2009).
Guo, Q. et al. Nat Med. 5, 101-106 (1999).
Gurvich, N., Tsygankova, O.M., Meinkoth, J.L., & Klein, P.S. Cancer Res. 64, 1079-1086 (2004).
Hoeller, O. & Kay, R.R. Curr. Biol. 17, 813-817 (2007).
Honack, D. & Loscher, W. Epilepsy Res. 13, 215-221 (1992).
Holtkamp, M., Tong, X., & Walker, M.C. Ann. Neurol. 49, 260-263 (2001).
Isoherranen, N., Yagen, В., & Bialer, M. Curr. Opin. Neurol. 16, 203-211 (2003).
Johnson C.B., Wong E., & Birch E.J. Lipids 12: 340-347 (1977).
Kaufmann, D., Bialer, M., Shimshoni, J.A., Devor, M., & Yagen, B.J. Med. Chem. 52, 7236-7248 (2009).
Keane, P.E., Simiand, J., Mendes, E., Santucci, V., & Morre, M. Neuropharmacology 22, 875-879 (1983).
Kesterson JW, Granneman GR, Machinist JM, Hepatology 4, 1143-1152 (1984).
Kim HW, Rapoport SI, Rao JS, Mol. Psychiatry (2009).
King, J.S. et al. Dis. Model. Mech. 2, 306-312 (2009).
Kortholt A, van Haastert PJ, Cell Signal 20, 1415-1422 (2008).
Kuspa A, Loomis WF, Methods Mol. Biol. 346, 15-30 (2006).
Lagace DC, Eisch AJ, Psychiatr. Clin. North Am. 28, 399-414 (2005).
Lands W, Crawford C, New York: John Wiley & Sons (1976).
Lio YC, Reynolds LJ, Balsinde J, Dennis EA, Biochim. Biophys. Acta. 1302, 55-60 (1996).
Liu, M.J. & Pollack, G.M. P Epilepsia 35, 234-243 (1994).
Loscher, W., Fisher, J.E., Nau, H., & Honack, D.J. Pharmacol. Exp. Ther. 250, 1067-1078 (1989).
Loscher W, Nau H, Neuropharmacology 24, 427-435 (1985).
Maslanski, J.A. & Busa, W.B. Methods in Inositide Research (ed. Irvin, R.F.) 113-126 (Raven Press Ltd., New York, 1990).
Masuccio F, Verrotti A, Chiavaroli V, de Giorgis T, Giannini C, Chiarelli F, Mohn A, J. Child Neurol. (2010).
Meunier H, Carraz G, Neunier Y, Eymard P, Aimard M, Therapie 18, 435-438 (1963).
Mitchell SM, Poyser NL, Wilson NH, Br. J. Pharmacol. 58, 295P (1976).
Mora, A., Gonzalez-Polo, R.A., Fuentes, J.M., Soler, G., & Centeno, F. Eur J. Biochem. 266, 886-891 (1999).
Mora, A., Sabio, G., Alonso, J.C., Soler, G., & Centeno, F. Bipolar Disord. 4, 195-200 (2002).
Nalivaeva, N.N., Belyaev, N.D., & Turner, A.J. Trends Pharmacol. Sci. 30, 509-514 (2009).
Pawolleck, N. & Williams, R.S. Methods Mol. Biol. 571, 283-290 (2009).
Phiel, C.J. et al. J. Biol. Chem. 276, 36734-36741 (2001).
Piredda, S., Yonekawa, W., Whittingham, T.S., & Kupferberg, H.J. Epilepsia 26, 167-174 (1985).
Qing et al. J. Exp. Med. 205, 2781-2789 (2008)
Radatz M, Ehlers K, Yagen B, Bialer M, Nau H, Epilepsy Research 30, 41-48 (1998).
Rao JS, Ertley RN, Rapoport SI, Bazinet RP, Lee HJ, J. Neurochem. 102, 1918-1927 (2007).
Rao JS, Lee HJ, Rapoport SI, Bazinet RP, Mol. Psychiatry 13, 585-596 (2008).
Rapoport SI, J. Nutr. 138, 2515-2520 (2008a).
Rapoport SI, Prostaglandins Leukot Essent. Fatty Acids 79, 153-156 (2008b).
Rapoport SI, Bosetti F, Arch. Gen. Psychiatry 59, 592-596 (2002).
Rintala J, Seemann R, Chandrasekaran K, Rosenberger ТА, Chang L, Contreras MA,
Rapoport SI, Chang MC, Neuroreport 10, 3887-3890 (1999).
Ross BM, Hughes B, Kish SJ, Warsh JJ, Bipolar Disord. 8, 265-270 (2006).
Shaltiel, G., Mark, S., Kofman, O., Belmaker, R.H., & Agam, G. Pharmacol. Rep.59, 402-407 (2007a).
Shaltiel, G., Dalton, E.C., Belmaker, R.H., Harwood, A.J., & Agam, G. Bipolar. Disord. 9, 281-289 (2007b).
Shaltiel, G. et al. Valproate decreases inositol biosynthesis. Biol. Psychiatry 56, 868-874 (2004).
Shimshoni, J.A. et al. Mol. Pharmacol. 71, 884-892 (2007).
Siesjo BK, Ingvar M, Westerberg E, J. Neurochem. 39, 796-802 (1982).
Silva MF, Aires CC, Luis PB, Ruiter JP, Ijlst L, Duran M, Wanders RJ, Tavares de Almeida I, J. Inherit. Metab. Dis. (2008).
Sobaniec-Lotowska ME, Int. J. Exp. Pathol. 86, 91-96 (2005).
Storey, N.M., O'Bryan, J.P., & Armstrong, D.L. Curr. Biol. 12, 27-33 (2002).
Sun Q, Bi L, Su X, Tsurugi K, Mitsui K, FEBS Lett. 581, 3991-3995 (2007).
Terbach N, Williams RS, Biochem. Soc. Trans. 37, 1126-1132 (2009).
Tokuoka, S.M., Saiardi, A., & Nurrish, S.J. Mol. Biol. Cell 19, 2241-2250 (2008).
Vaden, D.L., Ding, D., Peterson, В., & Greenberg, M.L. J. Biol. Chem. 276, 15466-15471 (2001).
van Haastert PJ, Keizer-Gunnink I, Kortholt A, J. Cell Biol. 177, 809-816 (2007).
Van Rooijen, L.A., Vadnal, R., Dobard, P., & Bazan, N.G. Biochem. Biophys. Res. ComMun. 136, 827-834 (1986).
Verrotti A, Manco R, Agostinelli S, Coppola G, Chiarelli F, Epilepsia 51, 268-273 (2010).
von Lohneysen K, Pawolleck N, Ruhling H, Maniak M, Eur. J. Cell Biol. 82, 505-514 (2003).
Walker, M.C. et al. Epilepsia 40, 359-364 (1999).
Weeks G, Biochim. Biophys. Acta. 450, 21-32 (1976).
Williams, R.S.B. Clinical Neuroscience Research 4, 233-242 (2005).
Williams RS, Cheng L, Mudge AW, Harwood AJ, Nature 417, 292-295 (2002).
Williams RS, Eames M, Ryves WJ, Viggars J, Harwood AJ, EMBO J. 18, 2734-2745 (1999).
Wilson DB, Prescott SM, Majerus PW (1982) Discovery of arachidonoyl coenzyme A synthetase in human platelets. J Biol Chem 257: 3510-3515
Wirrell EC, Pediatr. Neurol. 28, 126-129 (2003).
Worsfold O, Toma C, Nishiya T, Biosens. Bioelectron. 19, 1505-1511 (2004).
Xu X, Muller-Taubenberger A, Adley KE, Pawolleck N, Lee VW, Wiedemann C, Sihra TS, Maniak M, Jin T, Williams RS, Eukaryot. Cell 6, 899-906 (2007).
Yedgar S, Cohen Y, Shoseyov D, Biochim. Biophys. Acta. 1761, 1373-1382 (2006).
Yegin A, Akbas SH, Ozben T, Korgun DK, Acta. Neurol. Scand. 106, 258-262 (2002).
Claims (6)
1. Применение соединения формулы
где R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 7-11 атомов углерода, возможно разветвленную в любом положении атома углерода в основной цепи, где разветвление представляет собой боковую C1-6 алкильную группу, причем алкильная группа основной цепи и/или боковые алкильные группы возможно содержат один или более гетероатомов,
причем указанное соединение выбрано из 4-этилоктановой кислоты, 2-бутилоктановой кислоты, 4-метилнонановой кислоты и 3-метилундекановой кислоты
или его фармацевтически приемлемая соль, амид или эфир, для лечения или профилактики заболевания или биомедицинского состояния, выбранного из расстройств, связанных с судорогами.
2. Применение по п. 1, при котором расстройство, связанное с судорогами, представляет собой эпилепсию.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB1020133.3A GB201020133D0 (en) | 2010-11-26 | 2010-11-26 | Therapeutic use of compounds |
GB1020133.3 | 2010-11-26 | ||
PCT/GB2011/001646 WO2012069790A1 (en) | 2010-11-26 | 2011-11-24 | Therapeutic use of compounds |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017137767A Division RU2806629C2 (ru) | 2010-11-26 | 2011-11-24 | Терапевтическое применение соединений |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2013127187A RU2013127187A (ru) | 2015-01-10 |
RU2640596C2 true RU2640596C2 (ru) | 2018-01-10 |
Family
ID=43500742
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013127187A RU2640596C2 (ru) | 2010-11-26 | 2011-11-24 | Терапевтическое применение соединений |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US10548866B2 (ru) |
EP (3) | EP2737901B1 (ru) |
JP (1) | JP6085801B2 (ru) |
CN (2) | CN103327973A (ru) |
AU (2) | AU2011333534B2 (ru) |
BR (1) | BR112013013039A2 (ru) |
CA (1) | CA2819021C (ru) |
ES (2) | ES2758783T3 (ru) |
GB (1) | GB201020133D0 (ru) |
MX (1) | MX356266B (ru) |
RU (1) | RU2640596C2 (ru) |
WO (1) | WO2012069790A1 (ru) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB201210699D0 (en) * | 2012-06-15 | 2012-08-01 | Vitaflo Ltd | Nutritional food |
US9561206B2 (en) * | 2015-01-07 | 2017-02-07 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy | Use of heptadecanoic acid (C17:0) to detect risk of and treat hyperferritinemia and metabolic syndrome |
EP3383383A1 (en) | 2015-12-04 | 2018-10-10 | Nestec S.A. | Medium chain triglyceride compositions |
MX2019012050A (es) * | 2017-04-10 | 2020-08-17 | Vitaflo Int Ltd | Composicion para usar en el tratamiento de la epilepsia. |
AU2018354090A1 (en) | 2017-10-23 | 2020-03-12 | Epitracker, Inc. | Fatty acid analogs and their use in the treatment of conditions related to metabolic syndrome |
RU2672887C1 (ru) * | 2018-03-13 | 2018-11-20 | Акционерное общество "Всесоюзный научный центр по безопасности биологически активных веществ (АО "ВНЦ БАВ") | N-(5-Этил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-пропилпентанамид, обладающий противоэпилептической и обезболивающей активностями |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0632008A1 (en) * | 1993-06-01 | 1995-01-04 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Pentanoic acid derivatives |
WO1999002485A1 (en) * | 1997-07-09 | 1999-01-21 | D-Pharm Ltd. | Branched chain fatty acids, their derivatives and use in the treatment of central nervous system disorders |
WO1999053086A1 (en) * | 1998-04-14 | 1999-10-21 | Zhenhua Yang | Small molecule anticancer compounds and related production process |
RU2260423C2 (ru) * | 1999-01-27 | 2005-09-20 | Лэксдейл Лимитед | Этил-эпк с высокой степенью чистоты и другие производные эпк для психиатрических и неврологических расстройств |
WO2006094704A2 (en) * | 2005-03-03 | 2006-09-14 | Chemcom S.A. | Natural ligand of g protein coupled receptor rcc356 and uses thereof |
EP2204172A1 (en) * | 2007-09-19 | 2010-07-07 | Nagoya Industrial Science Research Institute | Agent having neurotrophic factor-like activity |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IL72381A (en) * | 1983-07-20 | 1988-03-31 | Sanofi Sa | Pharmaceutical composition based on valproic acid |
US6642398B2 (en) | 1999-06-10 | 2003-11-04 | Warner-Lambert Company | Mono-and disubstituted 3-propyl gamma-aminobutyric acids |
JP4706950B2 (ja) | 2000-07-18 | 2011-06-22 | 小野薬品工業株式会社 | アストロサイト機能改善剤を有効成分として含有するパーキンソン病治療剤 |
JP2002180082A (ja) * | 2000-12-11 | 2002-06-26 | Maruha Corp | 摂取物 |
JP2006143708A (ja) * | 2004-10-19 | 2006-06-08 | Ono Pharmaceut Co Ltd | 神経変性疾患治療用医薬 |
-
2010
- 2010-11-26 GB GBGB1020133.3A patent/GB201020133D0/en not_active Ceased
-
2011
- 2011-11-24 AU AU2011333534A patent/AU2011333534B2/en active Active
- 2011-11-24 CN CN2011800570141A patent/CN103327973A/zh active Pending
- 2011-11-24 EP EP14153334.9A patent/EP2737901B1/en active Active
- 2011-11-24 EP EP11794206.0A patent/EP2642990B1/en active Active
- 2011-11-24 WO PCT/GB2011/001646 patent/WO2012069790A1/en active Application Filing
- 2011-11-24 MX MX2013005945A patent/MX356266B/es active IP Right Grant
- 2011-11-24 CA CA2819021A patent/CA2819021C/en active Active
- 2011-11-24 RU RU2013127187A patent/RU2640596C2/ru active
- 2011-11-24 JP JP2013540429A patent/JP6085801B2/ja active Active
- 2011-11-24 BR BR112013013039-3A patent/BR112013013039A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2011-11-24 EP EP19190433.3A patent/EP3636259A1/en active Pending
- 2011-11-24 US US13/989,360 patent/US10548866B2/en active Active
- 2011-11-24 ES ES11794206T patent/ES2758783T3/es active Active
- 2011-11-24 CN CN201810235138.8A patent/CN108403680A/zh active Pending
- 2011-11-24 ES ES14153334T patent/ES2873885T3/es active Active
-
2017
- 2017-07-18 AU AU2017206186A patent/AU2017206186A1/en not_active Abandoned
-
2019
- 2019-12-20 US US16/723,241 patent/US11419839B2/en active Active
- 2019-12-20 US US16/722,340 patent/US11491127B2/en active Active
-
2022
- 2022-09-06 US US17/903,372 patent/US20230146709A1/en active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0632008A1 (en) * | 1993-06-01 | 1995-01-04 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Pentanoic acid derivatives |
WO1999002485A1 (en) * | 1997-07-09 | 1999-01-21 | D-Pharm Ltd. | Branched chain fatty acids, their derivatives and use in the treatment of central nervous system disorders |
WO1999053086A1 (en) * | 1998-04-14 | 1999-10-21 | Zhenhua Yang | Small molecule anticancer compounds and related production process |
RU2260423C2 (ru) * | 1999-01-27 | 2005-09-20 | Лэксдейл Лимитед | Этил-эпк с высокой степенью чистоты и другие производные эпк для психиатрических и неврологических расстройств |
WO2006094704A2 (en) * | 2005-03-03 | 2006-09-14 | Chemcom S.A. | Natural ligand of g protein coupled receptor rcc356 and uses thereof |
EP2204172A1 (en) * | 2007-09-19 | 2010-07-07 | Nagoya Industrial Science Research Institute | Agent having neurotrophic factor-like activity |
Non-Patent Citations (22)
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2011333534A1 (en) | 2013-07-11 |
AU2017206186A1 (en) | 2017-08-03 |
EP2642990A1 (en) | 2013-10-02 |
AU2011333534B2 (en) | 2017-04-13 |
EP2737901A1 (en) | 2014-06-04 |
CA2819021A1 (en) | 2012-05-31 |
CN108403680A (zh) | 2018-08-17 |
RU2017137767A (ru) | 2019-02-11 |
US20200268699A1 (en) | 2020-08-27 |
US20200197344A1 (en) | 2020-06-25 |
EP3636259A1 (en) | 2020-04-15 |
US10548866B2 (en) | 2020-02-04 |
EP2737901B1 (en) | 2021-03-03 |
JP2013543882A (ja) | 2013-12-09 |
ES2758783T3 (es) | 2020-05-06 |
EP2642990B1 (en) | 2019-09-18 |
AU2011333534A2 (en) | 2013-08-01 |
US11491127B2 (en) | 2022-11-08 |
GB201020133D0 (en) | 2011-01-12 |
US11419839B2 (en) | 2022-08-23 |
WO2012069790A1 (en) | 2012-05-31 |
CA2819021C (en) | 2018-09-25 |
JP6085801B2 (ja) | 2017-03-01 |
ES2873885T3 (es) | 2021-11-04 |
CN103327973A (zh) | 2013-09-25 |
US20130303616A1 (en) | 2013-11-14 |
US20230146709A1 (en) | 2023-05-11 |
RU2017137767A3 (ru) | 2021-03-17 |
RU2013127187A (ru) | 2015-01-10 |
MX2013005945A (es) | 2013-10-28 |
MX356266B (es) | 2018-05-21 |
BR112013013039A2 (pt) | 2021-04-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11491127B2 (en) | Therapeutic use of compounds | |
Naquet et al. | Regulation of coenzyme A levels by degradation: the ‘Ins and Outs’ | |
Hsu et al. | Regulation of autophagy by mitochondrial phospholipids in health and diseases | |
Ho et al. | ‘Entourage’effects of N‐palmitoylethanolamide and N‐oleoylethanolamide on vasorelaxation to anandamide occur through TRPV1 receptors | |
Farooqui et al. | Inhibitors of brain phospholipase A2 activity: their neuropharmacological effects and therapeutic importance for the treatment of neurologic disorders | |
Elharram et al. | Deuterium‐reinforced polyunsaturated fatty acids improve cognition in a mouse model of sporadic Alzheimer's disease | |
US20220133753A1 (en) | Compositions and methods useful for treating diseases characterized by insufficient pantothenate kinase activity | |
Schaeffer et al. | Requirement of hippocampal phospholipase A 2 activity for long-term memory retrieval in rats | |
RU2806629C2 (ru) | Терапевтическое применение соединений | |
Takahashi et al. | Involvement of the nitric oxide cascade in melatonin-induced inhibition of long-term potentiation at hippocampal CA1 synapses | |
Kanno et al. | Indomethacin activates protein kinase C and potentiates α7 ACh receptor responses | |
EP1613298A2 (en) | Lysophosphatidic acid analogs and inhibition of neointima formation | |
KR102411189B1 (ko) | 항-염증 화합물에 대한 구조화된 분자 벡터 및 이의 용도 | |
JP5158715B2 (ja) | 平滑筋収縮抑制剤 | |
LAYCHOCK | Coordinate Interactions of Cyclic Nucleotide and Phospholipid Metabolizing Pathways in |