RU2640133C1

RU2640133C1 - APPLICATION OF Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro PEPTIDE (SELANK) FOR TOXIC HEPATITIS PREVENTION AND TREATMENT

Info

Publication number: RU2640133C1
Application number: RU2017128760A
Authority: RU
Inventors: Людмила Александровна Андреева; Евгений Алимович Немерский; Алексей Константинович Петровский; Анастасия Юрьевна Петровская; Николай Алексеевич Смирнов; Владимир Николаевич Федоров; Татьяна Борисовна Федорова
Original assignee: Общество с ограниченной ответственностью "Меданика"
Priority date: 2017-08-11
Filing date: 2017-08-11
Publication date: 2017-12-26

Abstract

FIELD: medicine.SUBSTANCE: application of a peptide of the formula Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (selank) as a hepatoprotective agent is proposed. The method of the invention comprises administration of a drug based on the heptapeptide of the general formula Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (selank) by application to the mucosa.EFFECT: application of the inventions allows to reliably reduce lethality, cytolysis level, metabolic disturbances, increase the activity of the detoxification process, prevent the development of significant changes in liver morphology and cytoarchitectonics.2 cl, 9 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, физиологии, патофизиологии, и может быть использовано для гепатопротекторного воздействия при токсическом поражении печени химическими агентами.The invention relates to medicine, namely to hepatology, physiology, pathophysiology, and can be used for hepatoprotective effects in toxic liver damage by chemical agents.

Многие авторы указывают, что печень является одним из главных органов мишеней при токсическом действии многих химических соединений, включая и лекарственные средства [Ковтун А.В и др. Лекарственно-индуцированные поражения печени. Диагностика и лечение // Лечащий врач. Гастроэнтерология. - 2011. - №2. - С. 2-7]. В связи с высокими темпами развития химической и фармацевтической промышленности, широким внедрением их продукции во все сферы жизни человека, злоупотреблением алкоголем и его суррогатами в настоящее время все большую актуальность приобретает проблема токсических гепатитов. Согласно статистическим данным, только от побочных эффектов применения медикаментозных средств в мире ежегодно страдают 1 млн человек, причем в 180 тыс. случаев именно негативное побочное действие лекарств является непосредственной причиной летального исхода [Бабак О.Я. Медикаментозные токсические поражения печени: пути фармакологической коррекции // Здоровье Украины. - 2009. - №19/1. - С. 26; Assis D.N., Navarro V.J. Human drug hepatotoxicity: a contemporary clinical perspective // Expert Opinion on Drug Metabolism & Toxicology 2009, vol. 5, n 5, p. 463-473]. Повреждения печени химическими веществами в дальнейшем могут привести к развитию токсического гепатита, а учитывая важнейшую роль печени в поддержании гомеостаза, это будет отрицательно сказываться на функциональном состоянии организма вплоть до летального исхода.Many authors indicate that the liver is one of the main target organs in the toxic effect of many chemical compounds, including drugs [Kovtun A.V. et al. Drug-induced liver damage. Diagnosis and treatment // Attending physician. Gastroenterology. - 2011. - No. 2. - S. 2-7]. In connection with the high rates of development of the chemical and pharmaceutical industries, the widespread introduction of their products in all spheres of human life, the abuse of alcohol and its substitutes, the problem of toxic hepatitis is becoming increasingly urgent. According to statistics, only 1 million people suffer annually from the side effects of the use of drugs in the world, and in 180 thousand cases it is the negative side effect of drugs that is the direct cause of death [Babak O.Ya. Drug toxic liver damage: pathways of pharmacological correction // Health of Ukraine. - 2009. - No. 19/1. - S. 26; Assis D.N., Navarro V.J. Human drug hepatotoxicity: a contemporary clinical perspective // Expert Opinion on Drug Metabolism & Toxicology 2009, vol. 5, n 5, p. 463-473]. Damage to the liver by chemicals in the future can lead to the development of toxic hepatitis, and given the crucial role of the liver in maintaining homeostasis, this will adversely affect the functional state of the body until death.

В структуре острых и хронических заболеваний печени лекарственно-индуцируемые поражения печени (ЛИПП) составляют от 0,7% до 20%, причем каждый седьмой больной погибает [Топчий Н.В., Топорков А.С. Гепатотоксичность - наиболее вероятные причины и возможности оптимальной коррекции Гептралом // РМЖ, 2013, №5, 249-254; Chalasani N., Fontana R.J., Bonkovsky H.L. et al. For the DILIN Study Group. Causes, clinical features, and outcomes from a prospective study of drug-induced liver injury in the United + States // Gastroenterology. 2008. Vol. 135. P. 1924-1934]. Лекарственная гепатотоксичность является лидирующей причиной развития печеночной недостаточности, требующей пересадки печени [Ковтун А.В и др. Лекарственно-индуцированные поражения печени. Диагностика и лечение // Лечащий врач. Гастроэнтерология. - 2011. - №2. - С. 2-7; Russo M.W., Galanko J.A., Shrestha R. et al. Liver transplantation for acute liver failure from drug-induced liver injury in the United States // Liver Transplantation. 2004. Vol. 10. P. 1018-1233].In the structure of acute and chronic liver diseases, drug-induced liver damage (LIPP) ranges from 0.7% to 20%, and every seventh patient dies [Topchiy N.V., Toporkov A.S. Hepatotoxicity - the most likely causes and possibilities of optimal correction by Heptral // BC, 2013, No. 5, 249-254; Chalasani N., Fontana R.J., Bonkovsky H.L. et al. For the DILIN Study Group. Causes, clinical features, and outcomes from a prospective study of drug-induced liver injury in the United + States // Gastroenterology. 2008. Vol. 135. P. 1924-1934]. Hepatotoxicity is the leading cause of liver failure requiring liver transplantation [A. Kovtun et al. Drug-induced liver damage. Diagnosis and treatment // Attending physician. Gastroenterology. - 2011. - No. 2. - S. 2-7; Russo M.W., Galanko J.A., Shrestha R. et al. Liver transplantation for acute liver failure from drug-induced liver injury in the United States // Liver Transplantation. 2004. Vol. 10. P. 1018-1233].

В странах Европы и в США побочные эффекты лекарственных средств выступают в роли причинного фактора желтухи у 2-5% госпитализированных больных; 40% острых гепатитов у пациентов старше 40 лет и 13-25% случаев фульминантной печеночной недостаточности - это токсическое действие лекарств на печень [Бурков С.Г., Егорова Н.В., Аронова О.В., Годунова С.А., Кикта С.В., Леонова В.И., Чугунникова Л.И. Применение препарата Прогепар® в клинической практике // РМЖ, 2011, №31, с. 1969-1975].In Europe and the USA, side effects of drugs act as a causative factor of jaundice in 2-5% of hospitalized patients; 40% of acute hepatitis in patients older than 40 years and 13-25% of cases of fulminant liver failure is the toxic effect of drugs on the liver [Burkov SG, Egorova NV, Aronova OV, Godunova SA, Kikta S.V., Leonova V.I., Chugunnikova L.I. The use of Progepar® in clinical practice // breast cancer, 2011, No. 31, p. 1969-1975].

Повреждение печени описано у нескольких тысяч химических веществ, из которых можно выделить не менее 1000 лекарственных препаратов. С препаратами, провоцирующими ЛИПП, сталкивается врач практически любого профиля. Это противоинфекционные средства, препараты, воздействующие на ЦНС, опорно-двигательный аппарат (в частности, нестероидные противовоспалительные средства), желудочно-кишечный тракт и другие [Полунина Т.Е., Маев И.В. Клиника, диагностика и коррекция острого лекарственного гепатита // Лечащий врач; Суханов Д.С, Иванов А.К., Романцов М.Г., Коваленко А.Л. Лечение гепатотоксических осложнений противотуберкулезной терапии сукцинатсодержащими препаратами // РМЖ, 2009, №6, с. 1-4; Chalasani N., Fontana R.J., Bonkovsky H.L. et al. For the DILIN Study Group. Causes, clinical features, and outcomes from a prospective study of drug-induced liver injury in the United States // Gastroenterology. 2008; 135: 1924-1934].Liver damage has been described in several thousand chemicals, of which at least 1000 drugs can be distinguished. A doctor of almost any profile is faced with drugs that provoke LIPP. These are anti-infective agents, drugs that affect the central nervous system, the musculoskeletal system (in particular, non-steroidal anti-inflammatory drugs), the gastrointestinal tract and others [Polunina T.E., Mayev I.V. Clinic, diagnosis and correction of acute drug hepatitis // Attending physician; Sukhanov D.S., Ivanov A.K., Romantsov M.G., Kovalenko A.L. Treatment of hepatotoxic complications of anti-tuberculosis therapy with succinate-containing drugs // breast cancer, 2009, No. 6, p. 1-4; Chalasani N., Fontana R.J., Bonkovsky H.L. et al. For the DILIN Study Group. Causes, clinical features, and outcomes from a prospective study of drug-induced liver injury in the United States // Gastroenterology. 2008; 135: 1924-1934].

Развитие и течение токсического гепатита связано с формированием многозвеньевого патогенеза. Независимо от причин заболевания обязательными этапами патологического процесса являются активация свободнорадикального пути окисления субстратов, нарушение функций клеточных и митохондриальных мембран, дезорганизация обменных процессов и гибель гепатоцитов. На фоне патологии процессы нормальной регенерации заторможены (или вообще невозможны), что провоцирует развитие в печени соединительнотканных элементов с последующим формированием фиброза и цирроза. И все это происходит на фоне выраженного медиаторно-гормонального дисбаланса, усугубляющего поражение органа [Радченко В.Г., Шабров А.В., Зиновьева Е.Н. Основы клинической гепатологии. - СПб., 2005, 234 с.; Махов В.М. Алкогольная болезнь печени и неалкогольная жировая болезнь печени - общность и различия // Лечащий доктор, 2012, №7, с. 34-37; Чиркин А.А. Молекулярные механизмы повреждения печени // Иммунология, аллергология, инфектология. - 2000. - №3. - С. 12-16].The development and course of toxic hepatitis is associated with the formation of multi-link pathogenesis. Regardless of the causes of the disease, the mandatory stages of the pathological process are activation of the free radical pathway for oxidation of substrates, impaired functions of cell and mitochondrial membranes, disorganization of metabolic processes and death of hepatocytes. Against the background of pathology, the processes of normal regeneration are inhibited (or impossible at all), which provokes the development of connective tissue elements in the liver with the subsequent formation of fibrosis and cirrhosis. And all this happens against the background of a pronounced mediator-hormonal imbalance, exacerbating organ damage [Radchenko V.G., Shabrov A.V., Zinovieva E.N. The basics of clinical hepatology. - SPb., 2005, 234 p .; Makhov V.M. Alcoholic liver disease and non-alcoholic fatty liver disease - community and differences // Attending doctor, 2012, No. 7, p. 34-37; Chirkin A.A. Molecular mechanisms of liver damage // Immunology, allergology, infectology. - 2000. - No. 3. - S. 12-16].

Метаболические процессы в печени регулируются многочисленными физиологически активными веществами, ведущая роль из которых принадлежит моноаминам, в частности катехоламинам и их метаболитам [Крыжановский Г.Н. Дисрегуляционная патология // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2002. - №3. - С. 2-19]. Так, катехоламины вызывают изменение тонуса гладкой мускулатуры сосудов, стимулируют окислительные процессы (особенно адреналин), влияют на жировой и белковый обмены, гликогенолиз и глюконеогенез. При ряде заболеваний, в том числе и токсического (лекарственного) генеза, происходит нарушение числа или соотношения адренорецепторов, сопряжения рецепторов с внутриклеточными структурами, что оказывает неблагоприятное влияние на функциональные возможности печени и приводит, в итоге, к структурным нарушениям органа [Ситников И.Г. Биохимические маркеры хронизации парентеральных гепатитов // «Инфекционные болезни». - 2005. - №3 (т. 3). - С. 23-27; Ситников И.Г., Федоров В.Н., Шошин А.А. Препараты гепатопротективного действия. Ярославль, 2004, 58 с.]. При длительном повышении содержания вазоспастических катехоламинов возможно развитие так называемых «катехоламиновых» повреждения тканей. Высвобождающиеся катехоламины накапливаются во внеклеточном пространстве, нарушая коллатеральную циркуляцию, способствуя возникновению отека и прогрессированию гипоксии и ишемии ткани, что приводит к энергетическому дефициту, оксидативному стрессу и провоцирует печеночный апоптоз [Ситников И.Г. Биохимические маркеры хронизации парентеральных гепатитов // «Инфекционные болезни». - 2005. - №3 (т. 3). - с. 23-27].Metabolic processes in the liver are regulated by numerous physiologically active substances, the leading role of which belongs to monoamines, in particular catecholamines and their metabolites [Kryzhanovsky GN Dysregulatory pathology // Pathological physiology and experimental therapy. - 2002. - No. 3. - S. 2-19]. So, catecholamines cause a change in the tone of the smooth muscles of blood vessels, stimulate oxidative processes (especially adrenaline), affect fat and protein metabolism, glycogenolysis and gluconeogenesis. In a number of diseases, including toxic (drug) genesis, there is a violation of the number or ratio of adrenoreceptors, the conjugation of receptors with intracellular structures, which adversely affects the functional capabilities of the liver and leads, as a result, to structural disorders of the organ [Sitnikov I.G. . Biochemical markers of chronic parenteral hepatitis // Infectious Diseases. - 2005. - No. 3 (t. 3). - S. 23-27; Sitnikov I.G., Fedorov V.N., Shoshin A.A. Hepatoprotective drugs. Yaroslavl, 2004, 58 p.]. With a prolonged increase in the content of vasospastic catecholamines, the development of so-called "catecholamine" tissue damage is possible. The released catecholamines accumulate in the extracellular space, disrupting collateral circulation, contributing to the occurrence of edema and the progression of tissue hypoxia and ischemia, which leads to energy deficiency, oxidative stress and provokes hepatic apoptosis [Sitnikov I.G. Biochemical markers of chronic parenteral hepatitis // Infectious Diseases. - 2005. - No. 3 (t. 3). - from. 23-27].

Исходя из вышеизложенного, можно предположить, что фармакологические вещества, препятствующие цитолизу (гибели гепатоцитов) и предупреждающие нарушение печеночных функций, могут оказывать гепатопротекторный эффект.Based on the foregoing, it can be assumed that pharmacological substances that interfere with cytolysis (death of hepatocytes) and prevent impaired hepatic function may have a hepatoprotective effect.

Гепатопротекторы - группа лекарственных средств, предотвращающих повреждение гепатоцита и восстанавливающих нарушения структуры и функции печени. Их действие направлено на восстановление гомеостаза в печени, повышение устойчивости органа к действию патогенных факторов, нормализацию функциональной активности и стимуляцию репаративно-регенерационных процессов [Рациональная фармакотерапия в гепатологии / ред. В.Т. Ивашкина. М.: Литтерра, 2009. - 296 с.; Абдурахманов Д.Т., Моисеев С.В. Лекарственные поражения печени // Фарматека. - 2011. - №17 - С. 67-73; Кучерявый Ю.А., Морозов С.В. Гепатопротекторы: рациональные аспекты применения. М., 2012; Вялов С.С. Поражение печени и сопутствующая патология: рациональная комбинация гепатопротекторов. // Российский медицинский журнал, 1621].Hepatoprotectors - a group of drugs that prevent damage to the hepatocyte and restore violations of the structure and function of the liver. Their action is aimed at restoring homeostasis in the liver, increasing the organ's resistance to the action of pathogenic factors, normalizing functional activity and stimulating reparative-regenerative processes [Rational pharmacotherapy in hepatology / ed. V.T. Ivashkina. M .: Litterra, 2009 .-- 296 p .; Abdurakhmanov D.T., Moiseev S.V. Medicinal lesions of the liver // Farmateka. - 2011. - No. 17 - S. 67-73; Kucheryavy Yu.A., Morozov S.V. Hepatoprotectors: rational aspects of application. M., 2012; Vyalov S.S. Liver damage and concomitant pathology: a rational combination of hepatoprotectors. // Russian Medical Journal, 1621].

Многообразным защитным действием обладают соединения, созданные на основе регуляторных пептидов. Регуляторные пептиды (РП) - группа биологически активных веществ олигопептидной природы. Их основными признаками являются полифункциональность, каскадный механизм действия и способ образования из полипептида-предшественника. Регуляторные пептиды выполняют важные нейромедиаторные, модулирующие и интегративные задачи, формируют единый функциональный континуум и являются связующим звеном между основными информационными системами (нервная, эндокринная, иммунная). Их значимость возрастает при воздействии на организм негативных факторов (стрессы, повреждения и пр.) [Мясоедов Н.Ф. Инновационные лекарства: от фундаментальных исследований к производству // Вестник Российской академии наук, 2016, т. 86, №6, 488-494; Ашмарин И.П., Незавибатьков Н.Н., Мясоедов Н.Ф., Каменский А.А. и др. Ноотропный аналог адренокортикотропина 4-10 - Семакс (15-летний опыт разработки и изучения) // Журнал высшей нервной деятельности. - 1997. - Т. 47. - С. 419-425; Ашмарин И.П., Каменский А.А., Ляпина Л.А., Самонина Г.Е., Мясников Н.Ф. Глипролины как самостоятельные регуляторы и стабилизаторы других пептидов // Вопр. биологии, медицины и фармацевтической химии. 2002, №1, с. 24-27].Compounds based on regulatory peptides have a diverse protective effect. Regulatory peptides (RPs) are a group of biologically active substances of an oligopeptide nature. Their main features are polyfunctionality, a cascade mechanism of action, and a method of forming a precursor polypeptide. Regulatory peptides fulfill important neurotransmitter, modulating and integrative tasks, form a single functional continuum and are a link between the main information systems (nervous, endocrine, immune). Their importance increases when negative factors (stress, damage, etc.) are exposed to the body [Myasoedov N.F. Innovative medicines: from basic research to production // Bulletin of the Russian Academy of Sciences, 2016, v. 86, No. 6, 488-494; Ashmarin I.P., Nezavibatkov N.N., Myasoedov N.F., Kamensky A.A. et al. Nootropic analogue of adrenocorticotropin 4-10 - Semax (15 years of experience in development and study) // Journal of Higher Nervous Activity. - 1997. - T. 47. - S. 419-425; Ashmarin I.P., Kamensky A.A., Lyapina L.A., Samonina G.E., Myasnikov N.F. Glyprolins as independent regulators and stabilizers of other peptides // Vopr. biology, medicine and pharmaceutical chemistry. 2002, No 1, p. 24-27].

При различных заболеваниях регуляторные пептиды активируют процессы саморегуляции и самовосстановления нарушенных функций пораженных органов и систем. Важным моментом применения регуляторных олигопептидов является их способность к нормализации уровня тканевых трофических факторов (например, в мозговой ткани), которые, с одной стороны, угнетают различные механизмы патологического каскада, а с другой - стимулируют репаративные процессы [Алтунбаев Р.А. Нейропептиды (регуляторные пептиды головного мозга) в лечении цереброваскулярных заболеваний // Медицинский советник, 2013, 7, 63-64].In various diseases, regulatory peptides activate the processes of self-regulation and self-healing of impaired functions of affected organs and systems. An important point in the use of regulatory oligopeptides is their ability to normalize the level of tissue trophic factors (for example, in brain tissue), which, on the one hand, inhibit various mechanisms of the pathological cascade, and on the other, stimulate reparative processes [Altunbaev R.A. Neuropeptides (regulatory peptides of the brain) in the treatment of cerebrovascular diseases // Medical Advisor, 2013, 7, 63-64].

Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (селанк) - гептапептид, являющийся комбинацией гликопролина и молекулы тафцина. Глипролин (Pro-Gly-Pro) - фрагмент коллагена, который при присоединении к другим олигопептидам с С-конца способен повышать устойчивость конечной молекулы к действию протеаз. Тафцин (Thr-Lys-Pro-Arg) - синтетический аналог короткого фрагмента тяжелой цепи иммуноглобулина G - является неспецифическим иммуномодулятором, обладающим защитным действием на ЦНС [Зозуля А.А., Незнамов Г.Г., Сюняков Т.С. и др. Эффективность и возможные механизмы действия нового пептидного анксиолитика Селанка при терапии генерализованного тревожного расстройства и неврастении // Журн. неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2008. - Т. 108, №4. - С. 38-49].Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (selank) is a heptapeptide that is a combination of glycoproline and a molecule of tafcin. Glyprolin (Pro-Gly-Pro) is a collagen fragment that, when attached to other oligopeptides from the C-terminus, can increase the resistance of the final molecule to the action of proteases. Tuftsin (Thr-Lys-Pro-Arg) - a synthetic analogue of a short fragment of the heavy chain of immunoglobulin G - is a non-specific immunomodulator with a protective effect on the central nervous system [Zozulya AA, Neznamov GG, Syunyakov TS et al. Efficiency and possible mechanisms of action of the new peptide anxiolytic Selank in the treatment of generalized anxiety disorder and neurasthenia // Zh. neurology and psychiatry. S.S. Korsakova. - 2008. - T. 108, No. 4. - S. 38-49].

В медицинской практике Селанк используется как анксиолитик с антидепрессивной активностью, антиастеническим действием и положительным влиянием на мнестические функции. Селанк также обладает стресспротективной и вегетостабилизирующей активностью [Козловская М.М., Козловский И.И., Вальдман Е.А., Середенин С.Б. Селанк и короткие пептиды семейства тафтсина в регуляции адаптивного поведения при стрессе. Рос. физиол. Журн. 2002. 88 (6): 751-761; Козловская М.М. Влияние гептапептида селанка на депрессию поведения высоко- и низкотревожных мышей BALB/c и C25BL/6 и крыс с наследуемой депрессивностью поведения WAG/RIJ. / М.М. Козловская, К.Ю. Саркисова, И.И. Козловский // Психофармакология и биологическая наркология. - 2005. - Т. 5. - №3. - С. 989-996; Зозуля А.А., Незнамов Г.Г., Сюняков Т.С и др. Эффективность и возможные механизмы действия нового пептидного анксиолитика Селанка при терапии генерализованного тревожного расстройства и неврастении // Журн. неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2008. - Т. 108, №4. - С. 38-49].In medical practice, Selank is used as an anxiolytic with antidepressant activity, anti-asthenic effect and a positive effect on mnemonic functions. Selank also has stress-protective and vegetative stabilizing activity [Kozlovskaya M.M., Kozlovsky II, Valdman EA, Seredenin SB Selank and short peptides of the tuftsin family in the regulation of adaptive stress behavior. Grew up. fiziol. Zhurn. 2002.88 (6): 751-761; Kozlovskaya M.M. The effect of selank heptapeptide on depression of behavior of high and low anxiety mice BALB / c and C25BL / 6 and rats with inherited depressive behavior of WAG / RIJ. / M.M. Kozlovskaya, K.Yu. Sarkisova, I.I. Kozlovsky // Psychopharmacology and biological narcology. - 2005. - T. 5. - No. 3. - S. 989-996; Zozulya A.A., Neznamov G.G., Syunyakov T.S. et al. Efficacy and possible mechanisms of action of the new peptide anxiolytic Selank in the treatment of generalized anxiety disorder and neurasthenia // Journal. neurology and psychiatry. S.S. Korsakova. - 2008. - T. 108, No. 4. - S. 38-49].

Селанк обладает протекторными противоязвенными свойствами, проявляющимися повышением устойчивости слизистой оболочки желудка к действию различных ульцерогенных факторов. Помимо протекторного эффекта селанк обладает терапевтическим действием, ускоряя заживление ацетатных язв. Этот эффект обусловлен как непосредственным действием на слизистую оболочку желудка, так и на структуры нервной системы, участвующие в поддержании гомеостаза слизистой [Павлов Т.С. Селанк и его метаболиты поддерживают гомеостаз слизистой оболочки желудка / Т.С. Павлов, Т.Е. Самонина, З.В. Бакаева, Ю.А. Золотарев, А.А. Гусева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2007. - Т. 143. - №1. - С 57-59. Самонина Г.Е. Трипептид Pro-Gly-Pro и гомеостаз слизистой оболочки желудка / Г.Е. Самонина, Г.Н. Копылова, Б.А. Умарова // Нейрохимия. - 2008. - Т. 25. - №1. - С. 128-131].Selank has protective anti-ulcer properties, manifested by increased resistance of the gastric mucosa to the action of various ulcerogenic factors. In addition to the protective effect, Selank has a therapeutic effect, accelerating the healing of acetate ulcers. This effect is due to both a direct effect on the gastric mucosa and on the structures of the nervous system involved in maintaining mucosal homeostasis [Pavlov TS Selank and its metabolites support homeostasis of the gastric mucosa / T.S. Pavlov, T.E. Samonina, Z.V. Bakaev, Yu.A. Zolotarev, A.A. Gusev // Bulletin of experimental biology and medicine. - 2007. - T. 143. - No. 1. - C 57-59. Samonina G.E. Tripeptide Pro-Gly-Pro and homeostasis of the gastric mucosa / G.E. Samonina, G.N. Kopylova, B.A. Umarova // Neurochemistry. - 2008. - T. 25. - No. 1. - S. 128-131].

Селанк обладает цитокинрегулирующими свойствами, реализуемыми путем подавления экспрессии гена ИЛ-6 лейкоцитов периферической крови, что позволяет рассматривать его в качестве иммуномодулятора для коррекции иммунодефицитных состояний, лечения и профилактики вирусных инфекций [Учакина О.Н. Иммуномодулирующие свойства Селанка у людей с тревожно-астеническими расстройствами / О.Н. Учакина, П.Н. Учакин, Н.Ф. Мясоедов и др. // Журн. неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2008. - №5. - С. 71-75. Мезенцева М.В. Нейротропный пептид, обладающий антивирусной активностью в отношении гриппа человека и птиц и герпесвирусной инфекции / М.В. Мезенцева, Л.А. Андреева, Р.Я. Подчерняева и др. // Инфекция и иммунитет. - 2011. - Т. 1. - №1. - С. 81-84].Selank possesses cytokine-regulating properties, realized by suppressing the expression of the IL-6 gene of peripheral blood leukocytes, which allows us to consider it as an immunomodulator for the correction of immunodeficiency states, treatment and prevention of viral infections [Uchakina ON. Immunomodulating properties of Selank in people with anxiety-asthenic disorders / O.N. Uchakina, P.N. Uchakin, N.F. Myasoedov et al. // Journal. neurology and psychiatry. S.S. Korsakova. - 2008. - No. 5. - S. 71-75. Mezentseva M.V. Neurotropic peptide with antiviral activity against human and avian influenza and herpes virus infection / M.V. Mezentseva, L.A. Andreeva, R.Ya. Podchernyaeva et al. // Infection and immunity. - 2011. - T. 1. - No. 1. - S. 81-84].

В ЦНС и на периферии селанк нормализует кругооборот катехоламинов и серотонина, что обусловлено его влиянием на активность ключевых ферментов, контролирующих биосинтез моноаминов de novo (тирозин- и триптофангидроксилазу). Селанк также является ингибитором энкефалиназ, что препятствует ускоренному распаду энкефалинов [Козловская М.М., Незнамов Г.Г., Кошелев В.В., Телешова Е.С., Бочкарев В.К. Результаты клинико-фармакологического исследования пептидного препарата Селанк в качестве анксиолитического средства // Социальная и клиническая психиатрия, 2003. - N 4. - С. 28-36; Сюняков Т.С. Клинико-фармакологическая характеристика анксиолитического действия нового пептидного препарата селанк. Автореферат канд. диссертации, М., 2010, 24 с.; Клодт П.М., Кудрин B.C., Наркевич В.Б., Козловская М.М., Майский А.И., Раевский К.С. Содержание моноаминов и их метаболитов в структурах мозга крыс. Психофарм. биол. наркология. 2005. 5 (3): 1012-1015]. Повышая на периферии уровень лей- и метэнкефалинов, селанк влияет на симпатическую и парасимпатическую регуляцию внутренних органов и кровеносных сосудов (эндотелий-независимый сосудорасширяющий эффект), предотвращая гиперактивацию симпатической нервной системы, например, при хроническом стрессе [Кост Н.В. Опиоидергические механизмы тревожных расстройств и эффектов анксиолитических препаратов. Автореферат докт. диссертации. М., 2007, 49 с.].In the central nervous system and on the periphery, selank normalizes the circulation of catecholamines and serotonin, due to its effect on the activity of key enzymes that control the biosynthesis of de novo monoamines (tyrosine and tryptophan hydroxylase). Selank is also an inhibitor of enkephalinases, which prevents the accelerated breakdown of enkephalins [Kozlovskaya M.M., Neznamov G.G., Koshelev V.V., Teleshova E.S., Bochkarev V.K. The results of clinical and pharmacological studies of the peptide drug Selank as an anxiolytic agent // Social and Clinical Psychiatry, 2003. - N 4. - P. 28-36; Syunyakov T.S. Clinical and pharmacological characteristics of the anxiolytic effect of the new peptide drug Selank. Abstract of Cand. dissertations, M., 2010, 24 pp .; Klodt P.M., Kudrin B.C., Narkevich V.B., Kozlovskaya M.M., Maysky A.I., Raevsky K.S. The content of monoamines and their metabolites in the brain structures of rats. Psychopharm. biol. narcology. 2005.5 (3): 1012-1015]. By increasing the level of lei- and methenkephalins on the periphery, selank affects the sympathetic and parasympathetic regulation of internal organs and blood vessels (endothelium-independent vasodilating effect), preventing the hyperactivation of the sympathetic nervous system, for example, in chronic stress [Kost N.V. The opioidergic mechanisms of anxiety disorders and the effects of anxiolytic drugs. Abstract of the doctor. dissertations. M., 2007, 49 p.].

Введение селанка способствует активизации пептидергической системы организма и синтезу широкого спектра регуляторных пептидов [Соловьев В.Б. Роль пептидергической системы в адаптационных процессах и регуляции метаболизма при физической работе / Автореф. докт. дисс. М., 2011, 39 с.; Соловьев В.Б., Генгин М.Т., Соллертинская Т.Н., Латынова И.В., Живаева Л.В. Влияние семакса на активность карбоксипептидазы Н в отделах мозга и надпочечниках крыс // Нейрохимия. - 2011. - Т. 28. - №2. - С. 169-172] и, в частности, соединений, обладающих трофическими свойствами. Сложное биологическое действие селанка на организм, по крайней мере частично, обусловлено его действием на экспрессию генома в различных органах [Т.А. Коломин, М.И. Шадрина, Я.В. Агниуллин, С.И. Шрам, П.А. Сломинский, С.А. Лимборская, академик РАН Н.Ф. Мясоедов. Транскриптомный ответ клеток гиппокампа и селезенки крысы на однократное и курсовое введение пептида селанка // ДАН, 2010, 1, 127-129].The introduction of selank contributes to the activation of the peptidergic system of the body and the synthesis of a wide range of regulatory peptides [Soloviev VB The role of the peptidergic system in adaptation processes and the regulation of metabolism during physical work / Abstract. Doct. diss. M., 2011, 39 p .; Soloviev V.B., Gengin M.T., Sollertinskaya T.N., Latynova I.V., Zhivaeva L.V. The effect of semax on the activity of carboxypeptidase N in the brain and adrenal glands of rats // Neurochemistry. - 2011. - T. 28. - No. 2. - S. 169-172] and, in particular, compounds with trophic properties. The complex biological effect of Selank on the body, at least in part, is due to its effect on the expression of the genome in various organs [T.A. Kolomin, M.I. Shadrina, Y.V. Agniullin, S.I. Scar, P.A. Slominsky, S.A. Limborskaya, Academician of the Russian Academy of Sciences N.F. Meat eaters. The transcriptome response of rat hippocampus and spleen cells to a single and course administration of the selank peptide // DAN, 2010, 1, 127-129].

Тем не менее, использование пептида Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (селанк) для гепатопротекторного воздействия в условиях применения гепатотоксичных агентов не изучено.However, the use of the Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro peptide (selank) for hepatoprotective effects under conditions of hepatotoxic agents has not been studied.

Задача, решаемая при создании настоящего изобретения, состоит в расширении арсенала средств для гепатопротекторного воздействия при лечении и профилактике токсического гепатита. Техническим результатом, достигаемым при решении такой задачи, является повышение эффективности лечения и профилактики токсического гепатита.The problem to be solved when creating the present invention is to expand the arsenal of funds for hepatoprotective effects in the treatment and prevention of toxic hepatitis. The technical result achieved in solving this problem is to increase the effectiveness of treatment and prevention of toxic hepatitis.

Для достижения поставленного результата предлагается в качестве гепатопротекторного средства при лечении и профилактике токсического гепатита применять пептид общей формулы Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (селанк).To achieve the result, it is proposed to use a peptide of the general formula Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (selank) as a hepatoprotective agent in the treatment and prevention of toxic hepatitis.

Предметом изобретения может также являться способ профилактики или лечения токсического гепатита, заключающийся в ведении пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества лекарственного препарата, содержащего пептид формулы Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (селанк), наносимого на слизистую оболочку.The subject of the invention may also be a method for the prevention or treatment of toxic hepatitis, which is to administer to a patient in need thereof an effective amount of a medicament containing a peptide of the formula Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (selank) applied to the mucous membrane .

Химическая формула данного пептида Селанк известна. Был использован препарат, синтезированный в ЗАО «Инновационный научно-производственный центр «Пептоген». Растворенный в изотоническом растворе хлорида натрия пептид вводили экспериментальным животным (крысы) интраназально в дозе 200 мкг/кг.The chemical formula of this Selank peptide is known. The drug was synthesized at ZAO Peptogen Innovation Research and Production Center. The peptide dissolved in an isotonic sodium chloride solution was administered intranasally to experimental animals (rats) at a dose of 200 μg / kg.

Экспериментальные животные содержались в помещении при температуре воздуха 22-24°C, световом режиме: 12 часов - свет, 12 часов - темнота и получали стандартный гранулированный корм и воду в свободном доступе с соблюдением всех правил и Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997), в соответствии с действующими "Правилами лабораторной практики" [Приказ Минздравсоцразвития РФ от 23 августа 2010 г. №708н «Об утверждении Правил лабораторной практики»] и «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [Москва, 2005]. На момент выполнения эксперимента все животные были здоровыми, изменений поведения, аппетита, режима сна и бодрствования не выявлено.The experimental animals were kept indoors at an air temperature of 22-24 ° C, light mode: 12 hours - light, 12 hours - darkness and received standard granular food and water in the public domain in compliance with all rules and the International Recommendations of the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals, used in experimental research (1997), in accordance with the current "Rules of laboratory practice" [Order of the Ministry of Health and Social Development of the Russian Federation of August 23, 2010 No. 708n “On the approval of the Rules of laboratory practice”] and “Hands dstvom on experimental (preclinical) study of new pharmacological substances "[Moscow, 2005]. At the time of the experiment, all animals were healthy, changes in behavior, appetite, sleep and wakefulness were not detected.

Пример конкретного выполнения №1An example of a specific implementation No. 1

Для воспроизведения острого токсического гепатита применялась модель с введением четыреххлористого углерода (CCl₄) [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Ремедиум, 2000. - 598 с.]. Перед моделированием гепатита у белых крыс была определена острая токсичность CCl₄ [Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1963. - 153 с.] при внутрижелудочном введении. Дозы минимальной токсичности (ДМТ) 16%, 50%, 84% и 100% летальности (DL₁₆, DL₅₀, DL₈₄ и DL₁₀₀), которые, соответственно, были равны 5,8; 7,1; 9,6; 12,1 и 15,1 мл/кг. Подопытным крысам вводилась доза DL₅₀ - 9,6 мл/кг.To reproduce acute toxic hepatitis, a model with the introduction of carbon tetrachloride (CCl ₄ ) was used [Guide to the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances. - M .: Remedium, 2000. - 598 p.]. Before modeling hepatitis in white rats, acute toxicity of CCl ₄ was determined [Belenky, M.L. Elements of a quantitative assessment of the pharmacological effect. - L., 1963. - 153 p.] With intragastric administration. Doses of minimal toxicity (DMT) 16%, 50%, 84% and 100% mortality (DL ₁₆ , DL ₅₀ , DL ₈₄ and DL ₁₀₀ ), which, respectively, were equal to 5.8; 7.1; 9.6; 12.1 and 15.1 ml / kg. In experimental rats, a dose of DL _{50 of} 9.6 ml / kg was administered.

Опыты были поставлены на 45 белых крысах-самцах, массой 240-260 г, разделенных на 3 группы. Над животными первой группы никаких манипуляций не производилось (интактная группа). Вторая (контрольная) группа животных однократно внутрижелудочно получила 9,6 мл/кг CCl₄. Третья группа дополнительно к CCl₄ получала селанк - пептид растворяли в изотоническом растворе хлорида натрия и вводили экспериментальным животным интраназально в дозе 200 мкг/кг ежедневно в течение 14 дней, пока шло наблюдение за животными. Контрольным животным вводили эквивалентные объемы физиологического раствора. На 15-й день животных выводили из эксперимента путем обескровливания под эфирным наркозом. Анализируемыми критериями являлись процент выживаемости, продолжительность жизни погибших животных, весовой коэффициент печени у выживших крыс.The experiments were performed on 45 white male rats weighing 240-260 g, divided into 3 groups. No manipulations were performed on animals of the first group (intact group). The second (control) group of animals once intragastrically received 9.6 ml / kg CCl ₄ . The third group, in addition to CCl _4, received selank - the peptide was dissolved in an isotonic sodium chloride solution and was administered intranasally to experimental animals at a dose of 200 μg / kg daily for 14 days while the animals were being monitored. Control animals were injected with equivalent volumes of saline. On the 15th day, the animals were withdrawn from the experiment by bleeding under ether anesthesia. The analyzed criteria were the percentage of survival, the life expectancy of dead animals, and the weight coefficient of the liver in surviving rats.

Исследование показало (табл. 1), что селанк обладает выраженной гепатопротекторной активностью: выживаемость животных повысилась с 53 до 80%, в два раза увеличилась продолжительность жизни погибших белых крыс, повышение весового коэффициента печени у выживших животных существенно снизилось.The study showed (Table 1) that selank has a pronounced hepatoprotective activity: animal survival increased from 53 to 80%, the life expectancy of dead white rats doubled, and the increase in liver weight in surviving animals decreased significantly.

*) достоверная разница с интактными животными*) significant difference with intact animals

**) достоверная разница с контрольными животными**) significant difference with control animals

Пример конкретного выполнения №2. Для создания подострого токсического гепатита применялась модификация методики, предложенная в 1989 году Сливкой Ю.И., основанная на применении комбинации: изониазид + пиразинамид + рифампицин [патент RU 2197984 от 02.10. 2003, патент RU 2189817 от 27. 09. 2002]. Основными особенностями примененной модели являлось повышение дозировок изониазида (100 мг/кг, внутрижелудочно) и рифампицина (125 мг/кг, внутрижелудочно), удлинение срока воздействия с двух до трех недель, а также добавление в качестве потенцирующего фактора этанола в виде 25% раствора (3 г/кг, внутрибрюшинно).An example of a specific implementation No. 2. To create subacute toxic hepatitis, a modification of the method proposed in 1989 by Y. Slivka was used, based on the use of the combination: isoniazid + pyrazinamide + rifampicin [patent RU 2197984 from 02.10. 2003, patent RU 2189817 from 27. 09. 2002]. The main features of the applied model were an increase in the dosages of isoniazid (100 mg / kg, intragastrically) and rifampicin (125 mg / kg, intragastrically), lengthening the exposure period from two to three weeks, and adding ethanol as a potentiating factor in the form of a 25% solution ( 3 g / kg, intraperitoneally).

Опыты были поставлены на 30 белых крысах-самцах, массой 230-250 г, разделенных на 3 группы. Над животными первой группы никаких манипуляций не производилось (интактная группа). Вторая (контрольная) группа животных ежедневно внутрижелудочно получала комбинацию изониазида (100 мг/кг) с рифамицином (125 мг/кг), а также ежедневные внутрибрюшинные инъекции 25% раствора этанола в дозировке 3 г/кг. Третья группа дополнительно к данным препаратам получала селанк - пептид растворяли в изотоническом растворе хлорида натрия и вводили экспериментальным животным интраназально в дозе 200 мкг/кг ежедневно в течение 21 дня, пока вводились гепатотоксические средства. Контрольным животным вводили эквивалентные объемы физиологического раствора. Наблюдение за животными проводилось в течение трех недель. На 22-й день эксперимента животных выводили из эксперимента путем обескровливания под эфирным наркозом.The experiments were performed on 30 white male rats weighing 230-250 g, divided into 3 groups. No manipulations were performed on animals of the first group (intact group). The second (control) group of animals was administered intragastrically daily with a combination of isoniazid (100 mg / kg) with rifamycin (125 mg / kg), as well as daily intraperitoneal injections of 25% ethanol in a dosage of 3 g / kg. The third group, in addition to these drugs, received selank - the peptide was dissolved in an isotonic sodium chloride solution and was administered intranasally to experimental animals at a dose of 200 μg / kg daily for 21 days while hepatotoxic drugs were administered. Control animals were injected with equivalent volumes of saline. Observation of the animals was carried out for three weeks. On the 22nd day of the experiment, the animals were removed from the experiment by bleeding under ether anesthesia.

Функциональное состояние печени оценивали по ряду стандартизированных биохимических показателей крови, которые объединялись по функцинальным группам: маркеры цитолиза гепатоцитов (активность аспартаттрансаминазы-АСТ, аланинтрансаминазы-АЛТ и лактатдегидрогеназы-ЛДГ), показатели синтетической активности и белкового обмена (общий белок, альбумины, глобулины), углеводного обмена (активность альфа-амилазы общей и панкреатической, содержание глюкозы), липидного обмена (активность липазы, содержание триглицеридов, общего холестерина, в также холестерина липопротеидов низкой плотности - ХС ЛПНП и холестерина липопротеидов высокой плотности - ХС ЛПВП), дезинтоксикационной функции печени (прямой билирубин). Уровень катехоламинов (КА) крови [адреналина (АД), норадреналина (НА), дофамина (ДА)] определяли дифференциально-флюориметрическим методом В.О. Осинской [Осинская В.О. Исследования обмена адреналина и норадреналина в тканях животного организма // Биохимия. - 1977. - №3. - С. 537-539; Камышников, B.C. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика: Справочник: В 2 т. Т. 2 / B.C. Камышников - Минск: Интерпрессервис, 2003 - 463 с.]. Об активности перекисного окисления липидов и функции клеточных мембран судили по уровню осмотической резистентности эритроцитов (ОРЭ), которая изучалась стандартизированым методом [Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник РАМН. - 1998. - №8. - С. 43-51]. Для гистоморфологического исследования печени использовали окраску препаратов гематоксилином и эозином, коллагеновые волокна выявляли, прибегая к окраске по Массону; эластические волокна окрашивали фукселином по Харту, а ретикулиновые - путем импрегнации серебром по Футу. Стереометрическое исследование печени проводили для определения соотношений различных тканевых компонентов. Статистическую обработку результатов производили с использованием t-критерия Стьюдента.The functional state of the liver was assessed by a number of standardized biochemical blood parameters, which were combined according to functional groups: hepatocyte cytolysis markers (aspartate transaminase-AST, alanine transaminase-ALT and lactate dehydrogenase-LDH activity), synthetic activity and protein metabolism (total globulin, albumin) carbohydrate metabolism (total and pancreatic alpha-amylase activity, glucose content), lipid metabolism (lipase activity, triglycerides, total cholesterol, in t Also low-density lipoprotein cholesterol - LDL cholesterol and high-density lipoprotein cholesterol - HDL cholesterol), detoxification function of the liver (direct bilirubin). The level of catecholamines (CA) in blood [adrenaline (AD), norepinephrine (NA), dopamine (DA)] was determined by the differential fluorimetric method of V.O. Osinsky [Osinsky V.O. Studies of the adrenaline and norepinephrine metabolism in the tissues of an animal organism // Biochemistry. - 1977. - No. 3. - S. 537-539; Kamyshnikov, B.C. Clinical and biochemical laboratory diagnostics: Reference: In 2 t. T. 2 / B.C. Kamyshnikov - Minsk: Interpresservis, 2003 - 463 p.]. The activity of lipid peroxidation and the function of cell membranes was judged by the level of osmotic resistance of red blood cells (REM), which was studied by a standardized method [Vladimirov Yu.A. Free radicals and antioxidants // Vestnik RAMS. - 1998. - No. 8. - S. 43-51]. For a histomorphological study of the liver, hematoxylin and eosin staining was used, collagen fibers were detected using Masson staining; elastic fibers were stained with fuchselin according to Hart, and reticulin ones were stained with silver impregnation according to Foote. A stereometric study of the liver was performed to determine the ratios of various tissue components. Statistical processing of the results was carried out using t-student test.

Анализ динамики активностей цитолитических ферментов в крови показал (табл. 2), что на фоне токсического гепатита имело место достоверное повышение активности у ACT и АЛТ на 46% и 21% и тенденция к повышению на 15% общей активности ЛДГ. Селанк препятствовал повышению активностей цитолитических ферментов в крови.Analysis of the dynamics of the activity of cytolytic enzymes in the blood showed (Table 2) that, against toxic hepatitis, there was a significant increase in activity in ACT and ALT by 46% and 21% and a tendency to increase by 15% in total LDH activity. Selank prevented an increase in the activity of cytolytic enzymes in the blood.

*) - достоверная разница с интактными животными (при p<0,05)*) - significant difference with intact animals (at p <0.05)

При поражениях печени нарушение белкового обмена типичное явление. У контрольных крыс 21-дневное введение гепатотоксических препаратов (табл. 3) вызывало в крови достоверное снижение уровня общего белка на 16% за счет падения концентрации альбуминов (-23%, p<0,05); концентрация глобулинов крови достоверно не изменялась. Селанк нормализовал все нарушенные показатели.With liver damage, a violation of protein metabolism is a typical phenomenon. In control rats, a 21-day administration of hepatotoxic drugs (Table 3) caused a significant decrease in the level of total protein in the blood by 16% due to a decrease in the concentration of albumin (-23%, p <0.05); the concentration of blood globulins did not significantly change. Selank normalized all broken indicators.

**) достоверная разница с контрольными животными (при p<0,05)**) significant difference with control animals (at p <0.05)

При моделировании гепатита имело место достоверное падение амилазной активности на 17% при нормальном содержании глюкозы в крови (табл. 4). Введение селанка вызвало нормализацию амилазной активности.When modeling hepatitis, there was a significant drop in amylase activity by 17% with normal blood glucose (Table 4). The introduction of selank caused the normalization of amylase activity.

При моделировании токсического гепатита (табл. 5) у крыс имело место снижение липазной активности крови (-57% при p<0,05) на фоне достоверного повышения в ней концентрации триглицеридов (+43%) и тенденции к увеличению уровня общего холестерина (+20% при p>0,05). Селанк препятствовал развитию отрицательной динамики показателей липидного обмена.When modeling toxic hepatitis (Table 5) in rats, there was a decrease in blood lipase activity (-57% at p <0.05) against the background of a significant increase in its concentration of triglycerides (+ 43%) and a tendency to increase the level of total cholesterol (+ 20% at p> 0.05). Selank prevented the development of negative dynamics of lipid metabolism.

На фоне формирования гепатита уровень прямого билирубина в крови достоверно возрастал на 27% (табл. 6), что является свидетельством нарушения пигментного обмена и развития холестаза. Введение селанка нивелирует эти нарушения.Against the background of the formation of hepatitis, the level of direct bilirubin in the blood significantly increased by 27% (Table 6), which is evidence of a violation of pigment metabolism and the development of cholestasis. The introduction of Selank eliminates these disorders.

Осмотическая резистентность эритроцитов (ОРЭ) является интегральным показателем устойчивости организма к ПОЛ [Крылов В.И., Жмуров В.А., Иванова Е.Е. и др. Метаболизм перекисных соединений липидов при заболеваниях почек у детей // Механизмы регуляции обмена веществ в норме и патологии. - Свердловск, 1982. - С. 14-18]. Нарастание свободно-радикальных процессов приводит к снижению резистентности клеточных мембран, показателем чего является падение осмотической резистентности эритроцитов. Поскольку имеет место тесная связь между изменением проницаемости эритроцитарных мембран и мембран клеток, пораженных патологическим процессом органов [Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты [Текст] / Ю.А. Владимиров // Вестник РАМН. - 1998. - №8. - С. 43-51], исследовалась осмотическая резистентность эритроцитов при их инкубации в 0,5% растворе NaCl.The osmotic resistance of red blood cells (REM) is an integral indicator of the body's resistance to lipid peroxidation [Krylov V.I., Zhmurov V.A., Ivanova E.E. et al. Metabolism of lipid peroxidic compounds in children with kidney diseases // Metabolism regulation mechanisms in norm and pathology. - Sverdlovsk, 1982. - S. 14-18]. The growth of free-radical processes leads to a decrease in the resistance of cell membranes, an indicator of which is a decrease in the osmotic resistance of red blood cells. Since there is a close relationship between the change in the permeability of erythrocyte membranes and cell membranes affected by the pathological process of organs [Vladimirov, Yu.A. Free radicals and antioxidants [Text] / Yu.A. Vladimirov // Vestnik RAMS. - 1998. - No. 8. - S. 43-51], the osmotic resistance of erythrocytes was studied during their incubation in a 0.5% NaCl solution.

При моделировании токсического гепатита у животных имело место достоверное снижение ОРЭ на 30% (табл. 7). Селанк препятствовал повышению уровня гемолиза эритроцитов в гипоосмотических условиях, что можно связывать с его антирадикальной активностью.When modeling toxic hepatitis in animals, there was a significant decrease in the WEM by 30% (Table 7). Selank prevented an increase in the level of erythrocyte hemolysis under hypoosmotic conditions, which can be associated with its antiradical activity.

Моделирование лекарственного гепатита выявило выраженные гистоморфологические изменения структуры печени. В органе развивалось резкое полнокровие артериальной и венозной сети, отмечалось расширение синусоидов и лимфатического русла. Одновременно происходила инфильтрация внедольковой стромы исследуемого органа мононуклеарами, нейтрофилами и эозинофилами, а также наблюдалось разрастание грубоволокнистой соединительной ткани, в том числе в сосудах (артерии и ветви воротной вены) и желчных протоках. Это указывало на наличие склероза портальных трактов, отмеченного увеличением их удельной площади, что продемонстрировано с помощью стереометрии. Гепатоциты подвергались гидропической белковой дистрофии, иногда переходящей в фокальные некрозы, что приводило к снижению удельной площади паренхимы. Нередко полиморфноклеточный инфильтрат из стромы выходил через пограничную пластинку в дольку, формируя характерные «ступенчатые» некрозы. Удельная площадь гепатоцитов, по сравнению с контрольной серией, уменьшалась в 1,3 (p<0,001) раза. И, наоборот, удельная площадь синусоидов увеличивалась в 1,3 (p<0,001) раза, а площадь стромы возрастала в 1,2 (p<0,05) раза. В целом, морфологическую картину можно охарактеризовать как хронический активный гепатит с фиброзом стромы, а воспроизводимый в эксперименте гепатит по своим структурным проявлениям вполне соответствовал таковому, наблюдаемому в клинической практике.Modeling of drug hepatitis revealed pronounced histomorphological changes in the structure of the liver. The organ developed sharp plethora of the arterial and venous network, there was an expansion of sinusoids and the lymphatic channel. At the same time, the extravascular stroma of the organ under investigation was infiltrated by mononuclear cells, neutrophils, and eosinophils, and the growth of coarse-fibrous connective tissue was also observed, including in vessels (arteries and branches of the portal vein) and bile ducts. This indicated the presence of sclerosis of the portal tracts, marked by an increase in their specific area, as demonstrated by stereometry. Hepatocytes underwent hydropic protein dystrophy, sometimes passing into focal necrosis, which led to a decrease in the specific area of the parenchyma. Often, polymorphic cell infiltrate from the stroma exits through the border plate in a lobule, forming characteristic "stepwise" necrosis. The specific area of hepatocytes, compared with the control series, decreased by 1.3 (p <0.001) times. And, on the contrary, the specific area of sinusoids increased by 1.3 (p <0.001) times, and the stroma area increased by 1.2 (p <0.05) times. On the whole, the morphological picture can be characterized as chronic active hepatitis with stromal fibrosis, and the experimentally reproduced hepatitis in its structural manifestations completely corresponded to that observed in clinical practice.

На фоне введения селанка у крыс с моделированным гепатитом резко уменьшалась воспалительная гиперемия сосудов притока и оттока крови от печени, а также синусоидов; хорошо подвергались снижению склеротические изменения стенок артерий, ветвей воротной вены, а тонус данных сосудов возвращался к норме. Кроме того, полностью сохранялась привычная дольковая архитектоника печени, а также отсутствовали признаки повреждения печеночных клеток в виде дистрофии и некроза. Также отмечалось усиление регенеративных процессов паренхимы печени, что выражалось в увеличении, гиперхроматозе ядер клеток и появлении двуядерных форм. Следовательно, на фоне лечения крыс селанком наблюдался не только явный регресс патологических изменений печеночной ткани, но и создавались условия для ее восстановления.Against the background of the introduction of selank in rats with simulated hepatitis, inflammatory hyperemia of blood vessels of the inflow and outflow of blood from the liver, as well as sinusoids, sharply decreased; sclerotic changes in the walls of arteries and branches of the portal vein were well reduced, and the tone of these vessels returned to normal. In addition, the usual lobular architectonics of the liver was completely preserved, and there were no signs of damage to the liver cells in the form of dystrophy or necrosis. An increase in the regenerative processes of the liver parenchyma was also noted, which was expressed in an increase in hyperchromatosis of the nuclei of cells and the appearance of binuclear forms. Therefore, against the background of treatment of rats with Selank, not only a clear regression of pathological changes in the liver tissue was observed, but also conditions were created for its recovery.

Стереометрическое исследование показало (табл. 8), что селанк препятствовал достоверному снижению удельной площади гепатоцитов (повышая ее по отношению к контролю на 22% при p<0,01) и замещению их соединительнотканными элементами, т.к. он препятствовал увеличению площади стромы (снижал на 14% по отношению к контролю при p<0,01).A stereometric study showed (Table 8) that selank prevented a significant decrease in the specific area of hepatocytes (increasing it relative to the control by 22% at p <0.01) and replacing them with connective tissue elements, because it prevented an increase in the area of the stroma (reduced by 14% with respect to the control at p <0.01).

**) - достоверная разница с контрольными животными (при p<0,05)**) - significant difference with control animals (at p <0.05)

Летальность животных - наиболее важный интегральный показатель действия токсических агентов на организм. На фоне моделирования токсического гепатита имела место 20%-я летальность животных. Введение селанка ее предупреждало.Mortality of animals is the most important integral indicator of the effect of toxic agents on the body. Against the background of modeling toxic hepatitis, there was a 20% mortality rate in animals. The introduction of the Selank warned her.

Развитие лекарственного гепатита приводило у животных к значимому дисбалансу симпатоадреналовой системы (табл. 9), который, прежде всего, характеризовался повышением в крови концентрации норадреналина на 88% и уменьшением содержания дофамина на 45%; уровень АД практически не менялся. Снижение значений коэффициента АД/НА в крови почти в 2 раза (p<0,05) свидетельствовало том, что при лекарственном гепатите происходит преимущественная активация нейрональной компоненты симпатоадреналовой системы, а не эндокринной. Падение значения «дофаминового» коэффициента [ДА/(АД+НА)] в 2,6 раза указывало о превалировании активности вазоконстрикторных катехоламинов над вазодилятирующими и, в итоге, о снижении кровотока в паренхиматозных органах.The development of drug hepatitis in animals led to a significant imbalance of the sympathoadrenal system (Table 9), which was primarily characterized by an increase in blood concentration of norepinephrine by 88% and a decrease in dopamine by 45%; the level of blood pressure remained virtually unchanged. The decrease in the blood pressure / blood pressure ratio by almost 2 times (p <0.05) indicated that with drug hepatitis, the neuronal component of the sympathoadrenal system predominantly activates, rather than the endocrine one. A 2.6-fold drop in the “dopamine” coefficient [DA / (AD + HA)] indicated a predominance of vasoconstrictor catecholamine activity over vasodilating and, as a result, a decrease in blood flow in parenchymal organs.

Применение селанка положительно влияло на динамику уровня катехоламинов в крови больных животных. Он препятствовал нарастанию концентрации норадреналина и падению содержания дофамина крови, способствовал нормализации значений адреналинового и дофаминового коэффициентов.The use of Selank positively influenced the dynamics of the level of catecholamines in the blood of sick animals. It prevented an increase in the concentration of norepinephrine and a drop in the blood dopamine content, and contributed to the normalization of the values of adrenaline and dopamine coefficients.

* - достоверная разница (p<0,05) с интактной группой* - significant difference (p <0.05) with the intact group

** - достоверная разница (p<0,05) с группой острого гепатита** - significant difference (p <0.05) with the acute hepatitis group

Таким образом, результаты выполненных исследований показали, что пептид Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (селанк) оказывает выраженный гепатопротекторный эффект при токсическом гепатите.Thus, the results of the studies showed that the peptide Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (selank) has a pronounced hepatoprotective effect in toxic hepatitis.

Claims

1. The use of a peptide of the formula Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (Selank) as a hepatoprotective agent in the prevention and treatment of toxic hepatitis.

2. A method for treating toxic hepatitis, comprising administering a heptapeptide drug of the general formula Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (selank) through the mucous membrane, wherein the method comprises applying said drug to the mucous membrane.