RU2636194C1 - Method for stimulation of reparative liver regeneration after its resection - Google Patents
Method for stimulation of reparative liver regeneration after its resection Download PDFInfo
- Publication number
- RU2636194C1 RU2636194C1 RU2016146064A RU2016146064A RU2636194C1 RU 2636194 C1 RU2636194 C1 RU 2636194C1 RU 2016146064 A RU2016146064 A RU 2016146064A RU 2016146064 A RU2016146064 A RU 2016146064A RU 2636194 C1 RU2636194 C1 RU 2636194C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- liver
- resection
- regeneration
- reparative
- peptide
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
Предлагаемый способ относится к медицине, а именно к гепатологии и патофизиологии, и может быть использован для стимуляции репаративной регенерации печени крыс после ее резекции.The proposed method relates to medicine, namely to hepatology and pathophysiology, and can be used to stimulate the reparative regeneration of rat liver after its resection.
В настоящее время резекции ткани широко применяются при лечении очаговых новообразований печени (Вишневский В.А. Операции на печени: руководство для хирургов. 2003. М.: Миклош. - 155 с.). Наиболее часто встречающимся новообразованием печени является первичный рак (Дзидзава И.И., Слободяник А.В., Ионцев В.И. Осложнения после обширных резекций печени// Вестник Российской военно-медицинской академии.- 2015. - Т. 51, №3. - С. 261-266). Распространенность этой формы патологии зависит от частоты встречаемости вирусных гепатитов В и С и составляет от 3 до 25 случаев заболеваний на 100000 населения (там же). Однако даже в странах с низким уровнем заболеваемости отмечается ее рост. Однако выполнение массивных резекций печени часто сопровождается развитием тяжелого осложнения - пострезекционной печеночной недостаточности (Вишневский В.А., Коваленко Ю.А., Андрейцева О.И., Икрамов Р.З., Ефанов М.Г., Назаренко Н.А., Тупикин К.А. Пострезекционная печеночная недостаточность: современные проблемы определения, эпидемиологии, патогенеза, оценки факторов риска, профилактики и лечения// Украинский журнал хирургии.- 2013. - №3. - С. 172-183). Летальность при таких вмешательствах колеблется в широких пределах, но по-прежнему остается достаточно высокой. Одним из эффективных путей снижения тяжести пострезекционных осложнений является стимуляция восстановления объема функционирующей ткани, поскольку известно, что печеночная ткань обладает высокой регенераторной активностью (Mangnall D., Bird N.C., Majeed A.W. The molecular physiology of liver regeneration following partial hepatectomy// Liver International. - 2003.- V. 23, N. - P. 124-138). Регенерация печени после обширной гепатэктомии осуществляется за счет пролиферации оставшихся гепатоцитов, при этом утраченные доли не формируются заново (Сидорова В.Ф., Рябинина З.А., Лейкина Е.М. Регенерация печени у млекопитающих. 1966 г. М.: Медицина. 205 с.). Ранее показано, что способностью к регенерации обладают не только гепатоциты, но клетки билиарных протоков, Купферовские, звездчатые, эндотелиальные клетки (Fausto N. Liver regeneration// Hepatology. 2000.- V. 32. - P. 19-31). Восстановление объема органа идет за счет ускорения митотического деления, полиплоидизации и гипертрофии гепатоцитов (Stanger B.Z. Organ size determination and the limits of regulation// Cell Cycle.- 2008. - V. 7, N 3. - P. 318-324). Известно, что процесс регенерации печени после частичной гепатэктомии контролируется целым каскадом ростовых факторов, цитокинов, транскрипционных факторов, однако наиболее важными из них являются фактор роста гепатоцитов, эпидермальный фактор роста, трансформирующий фактор роста-альфа, ангиогенные факторы (Mangnall D., Bird N.C., Majeed A.W. The molecular physiology of liver regeneration following partial hepatectomy// Liver International. - 2003. - V. 23, N. - P. 124-138) Фактор роста гепатоцитов играет ключевую роль, поскольку индуцирует переход гепатоцитов в фазу митотического цикла (Ельчанинов А.В., Фахрутдинов Т.Х., Макаров А.В., Глинкина В.В., Большакова Г.Б. Регенерация печени млекопитающих// Клиническая и экспериментальная морфология. 2012. - №4. - С. 57-61). В неактивном состоянии он присутствует в матриксе ткани печени в значительных количествах, и после гепатэктомии под влиянием урокиназы и ферментов семейства металлопротеаз фактор роста гепатоцитов активируется и запускает деление гепатоцитов. Интересным представляется факт, что эпидермальный фактор роста действует в основном на начальной стадии регенерации печени, а трансформирующий фактор роста-альфа - на поздних этапах. Ранее показано, что регенерация ткани печени сопровождается сокращением длительности фаз митотического цикла (там же). Пролиферация гепатоцитов характеризуется определенными особенностями и зависит от возраста животных (там же). У молодых особей латентный период начала пролиферации клеток печени значительно короче по сравнению со взрослыми. Пик пролиферативной активности у них достигается значительно быстрее. Кроме того, у новорожденных особей наблюдаются 2 таких пика (Fausto N. Liver regeneration// Hepatology. 2000. - V. 32. - P. 19-31). Другой особенностью пролиферации гепатоцитов является зависимость скорости митозов от времени суток (Сидорова В.Ф., Рябинина З.А., Лейкина Е.М. Регенерация печени у млекопитающих. 1966. М: Медицина. 205 с.). Наибольшая интенсивность пролиферации клеток печени регистрируется в период с 6 до 9 часов утра и устанавливается в течение месяца после рождения, что совпадает с типом секреции генов биологических часов: Bmal-1, Clock, Per 1-2, Cry 1-2) в печени.Currently, tissue resections are widely used in the treatment of focal neoplasms of the liver (Vishnevsky V.A. Liver operations: a guide for surgeons. 2003. M .: Miklosh. - 155 p.). The most common liver neoplasm is primary cancer (Dzidzava II, Slobodyanik A.V., Iontsev V.I. Complications after extensive liver resections // Bulletin of the Russian Military Medical Academy. - 2015. - V. 51, No. 3 - S. 261-266). The prevalence of this form of pathology depends on the frequency of occurrence of viral hepatitis B and C and ranges from 3 to 25 cases of diseases per 100,000 population (ibid.). However, even in countries with a low incidence rate, its growth is observed. However, the implementation of massive resections of the liver is often accompanied by the development of a serious complication - postresection liver failure (Vishnevsky V.A., Kovalenko Yu.A., Andreitseva OI, Ikramov RZ, Efanov MG, Nazarenko N.A. , Tupikin K.A. Postresection liver failure: current problems of determination, epidemiology, pathogenesis, risk factor assessment, prevention and treatment // Ukrainian Journal of Surgery.- 2013. - No. 3. - S. 172-183). Mortality in such interventions varies widely, but still remains quite high. One of the effective ways to reduce the severity of post-resection complications is to stimulate restoration of the volume of functioning tissue, since it is known that liver tissue has high regenerative activity (Mangnall D., Bird NC, Majeed AW The molecular physiology of liver regeneration following partial hepatectomy // Liver International. - 2003.- V. 23, N. - P. 124-138). Liver regeneration after extensive hepatectomy is carried out by proliferation of the remaining hepatocytes, while the lost lobes are not formed anew (Sidorova V.F., Ryabinina Z.A., Leikina E.M. Liver regeneration in mammals. 1966. M .: Medicine. 205 s.). It was previously shown that not only hepatocytes, but also biliary duct cells, Kupffer, stellate, endothelial cells (Fausto N. Liver regeneration // Hepatology. 2000.- V. 32. - P. 19-31) have the ability to regenerate. The restoration of organ volume is due to the acceleration of mitotic division, polyploidization and hypertrophy of hepatocytes (Stanger B.Z. Organ size determination and the limits of regulation // Cell Cycle.- 2008. - V. 7, N 3. - P. 318-324). It is known that the process of liver regeneration after partial hepatectomy is controlled by a whole cascade of growth factors, cytokines, transcription factors, but the most important of them are hepatocyte growth factor, epidermal growth factor, transforming growth factor-alpha, angiogenic factors (Mangnall D., Bird NC, Majeed AW The molecular physiology of liver regeneration following partial hepatectomy // Liver International. - 2003. - V. 23, N. - P. 124-138) The growth factor of hepatocytes plays a key role, since it induces the transition of hepatocytes to the phase of the mitotic cycle (Yelchaninov A.V., Fakhr tdinov TH, Makarov AV, VV Glinkina, Bol'shakova GB mammalian liver regeneration // Clinical and Experimental Morphology 2012. -. №4 -. pp 57-61). In an inactive state, it is present in significant amounts in the liver tissue matrix, and after hepatectomy, hepatocyte growth factor is activated and starts the division of hepatocytes under the influence of urokinase and enzymes of the metalloprotease family. An interesting fact is that the epidermal growth factor acts mainly at the initial stage of liver regeneration, and the transforming growth factor alpha in the later stages. It was previously shown that liver tissue regeneration is accompanied by a reduction in the duration of the phases of the mitotic cycle (ibid.). Hepatocyte proliferation is characterized by certain features and depends on the age of the animals (ibid.). In young individuals, the latent period of the onset of proliferation of liver cells is significantly shorter than in adults. The peak of proliferative activity in them is achieved much faster. In addition, in newborns, 2 such peaks are observed (Fausto N. Liver regeneration // Hepatology. 2000. - V. 32. - P. 19-31). Another feature of hepatocyte proliferation is the dependence of the rate of mitosis on the time of day (Sidorova V.F., Ryabinina Z.A., Leikina E.M. Liver regeneration in mammals. 1966. M: Medicine. 205 p.). The highest proliferation rate of liver cells is recorded from 6 to 9 a.m. and is established within a month after birth, which coincides with the type of secretion of biological clock genes: Bmal-1, Clock, Per 1-2, Cry 1-2) in the liver.
В связи с вышесказанным становится очевидной актуальность поиска новых средств, активирующих регенераторную способность ткани печени.In connection with the foregoing, the relevance of the search for new agents that activate the regenerative ability of liver tissue becomes obvious.
Наиболее близким является способ стимуляции репаративных процессов с помощью трипептида H2N-Gly-L-His-L-Lys-COOH, запатентованного как средство, стимулирующее репаративные процессы при воздействии токсических факторов (Смахтин М.Ю., Швейнов А.И., Конопля А.А., Северьянова Л.А., Бобынцев И.И.//Способ стимуляции физиологической и репаративной регенерации печени. - патент РФ №2214269, 2002).The closest is a method of stimulating reparative processes using the tripeptide H 2 N-Gly-L-His-L-Lys-COOH, patented as a means of stimulating reparative processes when exposed to toxic factors (Smakhtin M.Yu., Shveinov A.I., Konoplya A.A., Severyanova L.A., Bobyntsev I.I. // Method for stimulating physiological and reparative regeneration of the liver. - RF patent No. 2214269, 2002).
Применение трипептида H2N-Gly-L-His-L-Lys-COOH, кратко именуемого Gly-His-Lys, в дозах 1,5 мкг/кг, 50 мкг/кг и 150 мкг/кг оказывает стимулирующее влияние на физиологическую регенерацию печени, что подтверждается повышением митотического индекса гепатоцитов. Причем эффект применяемого пептида не зависел от использованной дозы, однако с увеличением дозы пептида отмечалось усиление дистрофических процессов в паренхиме печени.The use of tripeptide H 2 N-Gly-L-His-L-Lys-COOH, briefly referred to as Gly-His-Lys, in doses of 1.5 μg / kg, 50 μg / kg and 150 μg / kg has a stimulating effect on physiological regeneration liver, as evidenced by an increase in the mitotic index of hepatocytes. Moreover, the effect of the applied peptide did not depend on the dose used, however, with an increase in the dose of the peptide, an increase in degenerative processes in the liver parenchyma was noted.
При токсическом отравлении тетрахлорметаном применение трипептида Gly-His-Lys в дозах 1,5 мкг/кг, 50 мкг/кг и 150 мкг/кг стимулировало репаративную регенерацию гепатоцитов, что проявлялось повышением митотического индекса клеток. Эффект пептида в дозе 1,5 мкг/кг характеризовался уменьшением степени дистрофических изменений гепатоцитов.In toxic poisoning with carbon tetrachloride, the use of Gly-His-Lys tripeptide at doses of 1.5 μg / kg, 50 μg / kg and 150 μg / kg stimulated the reparative regeneration of hepatocytes, which was manifested by an increase in the mitotic index of cells. The effect of the peptide at a dose of 1.5 μg / kg was characterized by a decrease in the degree of degenerative changes in hepatocytes.
Недостатком предложенного способа является то, что указанное средство может быть использовано для стимуляции физиологической или репаративной регенерации печени при ее токсических поражениях. Авторами не представлено данных о влиянии трипептида на репаративную регенерацию печени после резекции части органа. В то же время все более широкое распространение получает оперативное лечение заболеваний печени, когда выполняются обширные резекции органа.The disadvantage of the proposed method is that the specified tool can be used to stimulate the physiological or reparative regeneration of the liver with its toxic lesions. The authors did not provide data on the effect of the tripeptide on the reparative regeneration of the liver after resection of a part of the organ. At the same time, surgical treatment of liver diseases is becoming more widespread when extensive organ resections are performed.
Технический результат изобретения - разработать способ стимуляции репаративной регенерации печени с целью восстановления ее функциональной активности при резекциях печени.The technical result of the invention is to develop a method of stimulating reparative regeneration of the liver in order to restore its functional activity in liver resections.
Технический результат изобретения достигается тем, что экспериментальному животному (крысе), которому была выполнена частичная гепатэктомия (резекция 70% ткани печени), парентерально (внутрибрюшинно) вводят растворенный в физиологическом растворе (ФР) хлорида натрия пептид динорфин А (1-13) (Н-Тир-Гли-Гли-Фен-Лей-Арг-Арг-Иле-Арг-Про-Лиз-Лей-Лиз) в дозе 20,1 мкг/кг массы тела пятикратно с интервалом в 24 часа между инъекциями. Изучение увеличения массы печени на разных сроках после частичной гепатэктомии свидетельствует о стимуляции репаративной регенерации.The technical result of the invention is achieved in that an experimental animal (rat) that underwent partial hepatectomy (resection of 70% of the liver tissue) is injected parenterally (din 13) peptide dinorphin A (1-13) (N) dissolved in physiological saline (RF) with parenteral (intraperitoneal) -Tir-Gli-Gli-Fen-Lei-Arg-Arg-Ile-Arg-Pro-Liz-Lei-Liz) at a dose of 20.1 μg / kg body weight five times with an interval of 24 hours between injections. The study of an increase in liver mass at different times after partial hepatectomy indicates stimulation of reparative regeneration.
В разработанном авторами способе стимуляции репаративной регенерации печени используется селективный агонист опиоидных каппа-рецепторов динорфин А (1-13), обладающий гепатопротективным действием при стрессе, и подобраны такая доза и кратность введения, при которых проявляется стимулирующий эффект пептида на репаративную регенерацию печени. Динорфин А (1-13) легко проникает через гемато-энцефалический барьер (Лишманов Ю.Б., Маслов Л.Н., Райс К. Проницаемость гематоэнцефалического барьера для лигандов опиоидных рецепторов. Экспериментальная и клиническая фармакология.- 2002. - Т. 65, №4. - С. 71-77), а значит, его эффекты связаны с активацией как центральных, так и периферических рецепторов. Ранее показано, что динорфин А (1-13) оказывает наиболее выраженное по сравнению с селективными агонистами других классов опиоидных рецепторов антиоксидантное действие в ткани печени (Солин А.В., Ляшев Ю.Д. Влияние опиоидных пептидов на содержание продуктов ПОЛ и активность антиоксидантной системы в печени крыс, подвергшихся иммобилизационному стрессу// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2012. - Т. 153, №6. - с. 803-805, Солин А.В., Ляшев Ю.Д. Влияние опиоидных пептидов на процессы перекисного окисления липидов при длительном стрессе// Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - 2012. - Т. 98, №8. - С. 1016-1020).In the method developed by the authors for stimulating the reparative regeneration of the liver, the selective agonist of the opioid kappa receptors dynorphin A (1-13), which has a hepatoprotective effect under stress, is used and such a dose and frequency of administration are selected that show the stimulating effect of the peptide on the reparative regeneration of the liver. Dynorphin A (1-13) easily penetrates the blood-brain barrier (Lishmanov Yu.B., Maslov LN, Rice K. Permeability of the blood-brain barrier for opioid receptor ligands. Experimental and clinical pharmacology. - 2002. - T. 65. , No. 4. - S. 71-77), which means that its effects are associated with the activation of both central and peripheral receptors. It was previously shown that dinorphin A (1-13) has the most pronounced antioxidant effect in the liver tissue compared to selective agonists of other classes of opioid receptors (Solin A.V., Lyashev Yu.D. Effect of opioid peptides on the content of lipid peroxidation products and antioxidant activity systems in the liver of rats subjected to immobilization stress // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2012. - T. 153, No. 6. - pp. 803-805, Solin A.V., Lyashev Yu.D. Effect of opioid peptides on processes lipid peroxidation during prolonged stress // Ro Russian physiological journal named after IM Sechenov. - 2012. - T. 98, No. 8. - S. 1016-1020).
В настоящий момент поскольку точно известна химическая формула этого пептида, он может быть синтезирован в любой лаборатории синтеза пептидов либо куплен у фирм, занимающихся поставкой биологически активных соединений (Sigma, ICN, Merk и др.). Нами использован препарат, синтезированный в лаборатории синтеза пептидов Кардиологического научного центра РАН, г. Москва).Currently, since the chemical formula of this peptide is precisely known, it can be synthesized in any laboratory for the synthesis of peptides or purchased from companies that supply biologically active compounds (Sigma, ICN, Merk, etc.). We used a preparation synthesized in the laboratory of peptide synthesis of the Cardiological Scientific Center of the Russian Academy of Sciences, Moscow).
Изобретение поясняется следующими фигурами.The invention is illustrated by the following figures.
На фиг. 1. Представлена гистограмма, демонстрирующая стимулирующий эффект динорфина А(1-13) на репаративную регенерацию печени после обширной гепатэктомии. В каждой группе было по 6 животных. * - р<0,05 по сравнению с контрольной группой; *** - р<0,001 по сравнению с контрольной группой.In FIG. 1. A histogram is presented that demonstrates the stimulating effect of dinorphin A (1-13) on the reparative regeneration of the liver after extensive hepatectomy. In each group there were 6 animals. * - p <0.05 compared with the control group; *** - p <0.001 compared with the control group.
На фиг. 2. Представлена фотография брюшной полости крысы после выполненной 70% гепатэктомии. Хорошо виден купол диафрагмы, культи резецированных долей печени, правая и хвостатые доли печени, желудок, петли кишечника.In FIG. 2. A photograph of the abdominal cavity of a rat after 70% hepatectomy is presented. The dome of the diaphragm, the stump of the resected lobes of the liver, the right and caudate lobes of the liver, stomach, and intestinal loops are clearly visible.
На фиг. 3. Представлена микрофотография участка печени крысы на 7 сутки после резекции. Дистрофия гепатоцитов. Двуядерные гепатоциты. Гепатоциты, содержащие несколько ядрышек. Окраска гематоксилин + эозин. Увеличение ×400.In FIG. 3. A micrograph of a portion of the rat liver on the 7th day after resection is presented. Dystrophy of hepatocytes. Binuclear hepatocytes. Hepatocytes containing several nucleoli. Hematoxylin + eosin stain. Magnification × 400.
Способ осуществляется следующим образом. В качестве модели частичной гепатэктомии авторами выбрана модель, предложенная Higgins G. М. и Anderson R.M. (1931). Согласно этому методу масса хирургически удаленной ткани печени составляет 70%. Указанная модель традиционно используется в экспериментальных исследованиях, связанных с резекцией ткани печени.The method is as follows. As a model of partial hepatectomy, the authors chose a model proposed by Higgins G. M. and Anderson R.M. (1931). According to this method, the weight of the surgically removed liver tissue is 70%. This model is traditionally used in experimental studies related to resection of liver tissue.
В экспериментах по стимуляции репаративной регенерации печени использован пептид динорфина А (1-13), растворенный в изотоническом растворе хлорида натрия и разведенный до получения необходимой дозы 20,1 мкг/кг массы тела. Выбор указанной дозы объясняется предшествующими экспериментами, показавшими высокую антиоксидантную активность динорфина А (1-13), и торможение при его введении перекисного окисления липидов в ткани печени при стрессе (Солин А.В., Ляшев Ю.Д. Влияние опиоидных пептидов на содержание продуктов ПОЛ и активность антиоксидантной системы в печени крыс, подвергшихся иммобилизационному стрессу// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2012. - Т. 153, №6. - с. 803-805, Солин А.В., Ляшев Ю.Д. Влияние опиоидных пептидов на процессы перекисного окисления липидов при длительном стрессе// Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - 2012. - Т. 98, №8. - С. 1016-1020). В этих работах проводилось сравнительное изучение влияния селективных агонистов отдельных классов опиоидных рецепторов на перекисное окисление липидов, поэтому изучаемые опиоидные пептиды, в том числе и динорфин А (1-13), применяли в эквимолярных дозах. Для динорфина А (1-13) такая доза составила 20,1 мкг/кг.In experiments on stimulating reparative regeneration of the liver, dinorphin A peptide (1-13) was used, dissolved in an isotonic sodium chloride solution and diluted to obtain the required dose of 20.1 μg / kg body weight. The choice of this dose is explained by previous experiments that showed high antioxidant activity of dinorphin A (1-13), and inhibition of lipid peroxidation in liver tissue during stress (Solin A.V., Lyashev Yu.D. Effect of opioid peptides on the content of products LPO and antioxidant system activity in the liver of rats subjected to immobilization stress // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2012. - V. 153, No. 6. - pp. 803-805, Solin A.V., Lyashev Yu.D. Influence opioid peptides on peroxidation processes I lipids during prolonged stress // Russian Journal of Physiology Sechenov -.. 2012. - T. 98, №8 -. pp 1016-1020). A comparative study of the effect of selective agonists of certain classes of opioid receptors on lipid peroxidation was carried out in these studies; therefore, the studied opioid peptides, including dinorphin A (1-13), were used in equimolar doses. For dinorphin A (1-13), this dose was 20.1 μg / kg.
Динорфин А (1-13) вводили внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл экспериментальному животному, которому предварительно была выполнена частичная гепатэктомия (удаление 70% массы органа), один раз в день на протяжении 5 суток с интервалом 24 часа. В результате проведенных исследований установлено, что применение динорфина А (1-13) в дозе 20,1 мкг/кг вызывает увеличение массы печени на 1, 3 и 7 сутки после выполнения частичной гепатэктомии. Гистологическое изучение препаратов ткани печени экспериментальных животных, которым была выполнена частичная гепатэктомия, в разные периоды после операции (1, 3, 7 сутки) показало, что увеличение массы органа связано с регенерацией гепатоцитов. Можно утверждать, что такой стимулирующий эффект на пролиферацию гепатоцитов носит положительный характер, так как ускоряет восстановление массы органа и предупреждает развитие печеночной недостаточности.Dynorphin A (1-13) was administered intraperitoneally in a volume of 0.2 ml to an experimental animal that had previously undergone partial hepatectomy (removal of 70% of the organ mass), once a day for 5 days with an interval of 24 hours. As a result of the studies, it was found that the use of dinorphin A (1-13) at a dose of 20.1 μg / kg causes an increase in liver mass on days 1, 3, and 7 after partial hepatectomy. A histological study of liver tissue preparations of experimental animals that underwent partial hepatectomy at different periods after surgery (1, 3, 7 days) showed that an increase in organ mass is associated with the regeneration of hepatocytes. It can be argued that such a stimulating effect on the proliferation of hepatocytes is positive, since it accelerates the restoration of organ mass and prevents the development of liver failure.
Пример конкретного выполненияConcrete example
Пример. Стимуляция репаративной регенерации печени путем применения динорфина А (1-13) в дозе 20,1 мкг/кг.Example. Stimulation of reparative regeneration of the liver by the use of dinorphin A (1-13) at a dose of 20.1 μg / kg.
Крысам Вистар была выполнена частичная гепатэктомия - резекция 70% массы печени по методу, описанному Higgins G. М. и Anderson R.M. (1931). Операция заключается в удалении левой боковой и медиальной долей, что составляет около 70% ткани печени (Фиг. 2). Правая и хвостатая доли после операции начинают регенерировать. Восстановление массы органа связано с увеличением массы именно этих долей.Partial hepatectomy was performed in Wistar rats - resection of 70% of the liver mass according to the method described by Higgins G. M. and Anderson R.M. (1931). The operation consists in removing the left lateral and medial lobes, which is about 70% of the liver tissue (Fig. 2). The right and caudate lobes after surgery begin to regenerate. The restoration of the mass of the organ is associated with an increase in the mass of precisely these shares.
Выжившие после операции крысы были разделены на 2 группы по 18 особей в каждой. Контрольной группе внутрибрюшинно вводили физиологический раствор в объеме 0,2 мл. Опытной группе - динорфин А (1-13) в дозе 20,1 мкг/кг. Пептид предварительно растворяли в физиологическом растворе и вводили внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл. И раствор динорфина А (1-13), и физиологический раствор вводили один раз в день в течение пяти дней, начиная со дня выполнения резекции. Животных выводили из эксперимента на 1, 3 и 7 сутки после частичной гепатэктомии. Определяли относительную массу хвостатой и правой долей и печени, а также выполняли микроскопическое исследование срезов печени, окрашенных гематоксилином и эозином.The rats who survived the operation were divided into 2 groups of 18 animals each. The control group was intraperitoneally injected with saline in a volume of 0.2 ml. The experimental group - dinorphin A (1-13) at a dose of 20.1 μg / kg. The peptide was previously dissolved in physiological saline and administered intraperitoneally in a volume of 0.2 ml. Both dinorphin A solution (1-13) and physiological saline were administered once a day for five days, starting from the day the resection was performed. Animals were removed from the experiment on days 1, 3, and 7 after partial hepatectomy. The relative mass of the caudate and right lobes and the liver was determined, and microscopic examination of liver sections stained with hematoxylin and eosin was performed.
У контрольных животных уже на 3 сутки отмечается практически двукратное увеличение относительной массы печени (отношение массы органа в день забоя к исходной массе органа, выраженное в процентах). А на 7 сутки относительная масса органа составляла 86,2±1,7%. В группе крыс Вистар, которым была выполнена частичная гепатэктомия и получавших динорфин А (1-13) в дозе 20,1 мкг/кг, относительная масса печени была на 22,2% выше, чем в контрольной группе (р<0,001) уже на первые сутки после операции. Эта тенденция наблюдалась и на 3 сутки эксперимента - относительная масса печени превышала аналогичный показатель в контрольной группе на 7,6% (р<0,05). На 7 сутки относительная масса печени у крыс, которым вводили динорфин А (1-13), не только статистически достоверно (р<0,001) была выше, чем в контрольной группе, но и превышала исходную масса печени до операции. При микроскопическом исследовании установлено, что увеличение массы печени связано с репаративной регенерацией паренхимы органа, что проявлялось статистически достоверным увеличением числа двуядерных гепатоцитов. Как показывают представленные результаты, динорфин А (1-13) проявляет стимулирующий эффект на репаративную регенерацию печени после частичной гепатэктомии (Фиг. 3).In control animals, already on the 3rd day, an almost twofold increase in the relative mass of the liver is observed (the ratio of the mass of the organ on the day of slaughter to the initial mass of the organ, expressed in percent). And on the 7th day, the relative mass of the organ was 86.2 ± 1.7%. In the group of Wistar rats that underwent partial hepatectomy and received dynorphin A (1-13) at a dose of 20.1 μg / kg, the relative liver mass was 22.2% higher than in the control group (p <0.001) already first day after surgery. This trend was also observed on the 3rd day of the experiment — the relative mass of the liver exceeded that in the control group by 7.6% (p <0.05). On day 7, the relative liver mass in rats injected with dinorphin A (1-13) was not only statistically significant (p <0.001) higher than in the control group, but also exceeded the initial liver mass before surgery. Microscopic examination revealed that an increase in liver mass is associated with reparative regeneration of the organ parenchyma, which was manifested by a statistically significant increase in the number of binuclear hepatocytes. As the presented results show, dynorphin A (1-13) exhibits a stimulating effect on the reparative regeneration of the liver after partial hepatectomy (Fig. 3).
Таким образом, пептид динорфин А (1-13) в дозе 20,1 мкг/кг массы тела, введенный пятикратно с интервалом в 24 часа между инъекциями, может быть использован для стимуляции репаративной регенерации печени при ее резекциях у экспериментальных животных.Thus, the peptide dinorphin A (1-13) at a dose of 20.1 μg / kg body weight, administered five times with an interval of 24 hours between injections, can be used to stimulate the reparative regeneration of the liver during its resection in experimental animals.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016146064A RU2636194C1 (en) | 2016-11-23 | 2016-11-23 | Method for stimulation of reparative liver regeneration after its resection |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016146064A RU2636194C1 (en) | 2016-11-23 | 2016-11-23 | Method for stimulation of reparative liver regeneration after its resection |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2636194C1 true RU2636194C1 (en) | 2017-11-21 |
Family
ID=63853130
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016146064A RU2636194C1 (en) | 2016-11-23 | 2016-11-23 | Method for stimulation of reparative liver regeneration after its resection |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2636194C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2798133C1 (en) * | 2022-09-15 | 2023-06-15 | государственное автономное учреждение здравоохранения "Кузбасская клиническая больница скорой помощи им. М.А.Подгорбунского" (ГАУЗ ККБСМП) | Method of prevention of post-resection liver failure |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2214269C1 (en) * | 2002-03-07 | 2003-10-20 | Курский государственный медицинский университет | Method for stimulation of physiological and reparative regeneration of liver |
| RU2232550C2 (en) * | 2002-07-22 | 2004-07-20 | Плеханов Александр Николаевич | Method for postresectional hepatic regeneration in an experiment |
| US8329661B2 (en) * | 2003-06-18 | 2012-12-11 | Instiut National de la Santéet de la Recherche Médicale (INSERM) | Method for using HIP/PAP polypeptide composition for liver regeneration and prevention of liver failure |
-
2016
- 2016-11-23 RU RU2016146064A patent/RU2636194C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2214269C1 (en) * | 2002-03-07 | 2003-10-20 | Курский государственный медицинский университет | Method for stimulation of physiological and reparative regeneration of liver |
| RU2232550C2 (en) * | 2002-07-22 | 2004-07-20 | Плеханов Александр Николаевич | Method for postresectional hepatic regeneration in an experiment |
| US8329661B2 (en) * | 2003-06-18 | 2012-12-11 | Instiut National de la Santéet de la Recherche Médicale (INSERM) | Method for using HIP/PAP polypeptide composition for liver regeneration and prevention of liver failure |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| ASSIMAKOPOULOS SF et al. Stimulation of oval cell and hepatocyte proliferation by exogenous bombesin and neurotensin in partially hepatectomized rats. World J Gastrointest Pathophysiol. 2011 Dec 15; 2(6): 146-54. * |
| СОЛИН А.В. и др. Влияние опиоидных пептидов на перекисное окисление липидов и активность антиоксидантных ферментов у крыс, перенесших плавательный стресс. Российский физиологический журнал, 2015, N 8, с. 929-935. * |
| СОЛИН А.В. и др. Влияние опиоидных пептидов на перекисное окисление липидов и активность антиоксидантных ферментов у крыс, перенесших плавательный стресс. Российский физиологический журнал, 2015, N 8, с. 929-935. ЧИКОТЕЕВ С.П. Современные взгляды на регенерацию печени. Обзор. Хирургия, 2001, N 6, 59-62. ЛИ В.С. Стимуляция процессов регенерации и коррекция функциональной активности печени при ее частичной резекции и токсических поражениях Вестник Российской АМН, 1996, N 5, с. 36-41. ASSIMAKOPOULOS SF et al. Stimulation of oval cell and hepatocyte proliferation by exogenous bombesin and neurotensin in partially hepatectomized rats. World J Gastrointest Pathophysiol. 2011 Dec 15; 2(6): 146-54. * |
| ЧИКОТЕЕВ С.П. Современные взгляды на регенерацию печени. Обзор. Хирургия, 2001, N 6, 59-62. ЛИ В.С. Стимуляция процессов регенерации и коррекция функциональной активности печени при ее частичной резекции и токсических поражениях Вестник Российской АМН, 1996, N 5, с. 36-41. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2798133C1 (en) * | 2022-09-15 | 2023-06-15 | государственное автономное учреждение здравоохранения "Кузбасская клиническая больница скорой помощи им. М.А.Подгорбунского" (ГАУЗ ККБСМП) | Method of prevention of post-resection liver failure |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Malhi et al. | Apoptosis and necrosis in the liver: a tale of two deaths? | |
| AU2007219568B2 (en) | Pharmaceutical composition containing GHRP-6 capable of preventing and eliminating fibrosis and other forms of pathological deposit in tissue | |
| Wilhelm et al. | Hepatoprotective effect of 3-alkynyl selenophene on acute liver injury induced by D-galactosamine and lipopolysaccharide | |
| US7659249B2 (en) | Membrane-permeable NFAT inhibitory peptide | |
| US11534475B2 (en) | Carbohydrate-based peritoneal dialysis fluid comprising glutamine residue | |
| EP1492545A1 (en) | Agents for treating i flaviviridae /i infections | |
| THOMFORD et al. | Homotransplantation of the canine liver: Survival and histology with and without azathioprine | |
| RU2636194C1 (en) | Method for stimulation of reparative liver regeneration after its resection | |
| Rad et al. | Current senolytics: mode of action, efficacy and limitations, and their future | |
| RU2456678C1 (en) | Method for preventing and treating hepatic consequences of ischemia | |
| RU2640133C1 (en) | APPLICATION OF Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro PEPTIDE (SELANK) FOR TOXIC HEPATITIS PREVENTION AND TREATMENT | |
| Lee et al. | The effects of freshwater clam (corbicula fluminea) extract on activated hepatic stellate cells | |
| RU2214269C1 (en) | Method for stimulation of physiological and reparative regeneration of liver | |
| KR20200118851A (en) | A method for reducing apoptosis induced by ischemia-reperfusion with novel aminothiol | |
| JP2021511358A5 (en) | A composition comprising ferrous amino acid particles, and an agent comprising the composition for treating or ameliorating a pancreas-related disease. | |
| JP3703828B2 (en) | Use of calcium-activated neutral protease inhibitors in pharmaceutical formulations | |
| Drachuk et al. | Comparative analysis of the nephroprotective action of ademetioninee and glutathione in ischemia-reperfusion acute kidney injury | |
| RU2715679C1 (en) | Method of reducing pro-oxidant action of anticonvulsants in experiment | |
| Fernández et al. | Anticalcineurinics: role of mitochondrial transition pore on nephrotoxicity | |
| Hua | Size regulation of portally deprived liver lobe and future liver remnant following simultaneous portal vein ligation and partial hepatectomy | |
| RU2717674C1 (en) | Therapeutic agent for enhancing tissue oxygenation in diabetic foot, and a method for use thereof | |
| Silva et al. | To proliferate, not to proliferate or to die. The liver itself decides as needed | |
| RU2563796C1 (en) | Method of treating ischemic hepatic injuries | |
| Dzygal et al. | Proteolytic system activity dysfunction in case of experimental liver cirrhosis | |
| Shatat et al. | Liver protection from acetaminophen hepatotoxicity using copper (I)-nicotinic acid complex |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181124 |