RU2634396C2 - Microbial preparation for hydrocarbon contamination - Google Patents
Microbial preparation for hydrocarbon contamination Download PDFInfo
- Publication number
- RU2634396C2 RU2634396C2 RU2016110702A RU2016110702A RU2634396C2 RU 2634396 C2 RU2634396 C2 RU 2634396C2 RU 2016110702 A RU2016110702 A RU 2016110702A RU 2016110702 A RU2016110702 A RU 2016110702A RU 2634396 C2 RU2634396 C2 RU 2634396C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vkpm
- strain
- arc
- oil
- microorganisms
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
- B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Production Of Liquid Hydrocarbon Mixture For Refining Petroleum (AREA)
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION
Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды и представляет собой микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений, содержащий психроактивные микроорганизмы: штамм Arthrobacter rhombi ARC 8 ВКПМ Ac-1987, штамм Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351, штамм Salinibacterium amurskyense ARC 14 ВКПМ Ас-1993. Данный препарат позволяет производить эффективную очистку акваторий водоемов и береговой линии от нефти и нефтепродуктов в условиях низких температур и высокой солености воды.The invention relates to the field of biotechnology, microbiology, ecology, environmental protection and is a microbial preparation for the disposal of hydrocarbon contaminants containing psychoactive microorganisms: Arthrobacter rhombi strain ARC 8 VKPM Ac-1987, Psychrobacter cibarius strain ARC 13 VKPM B-12351, Salinibacterium amursky strain ARC 14 VKPM Ac-1993. This drug allows for the effective purification of water bodies of water bodies and the coastline from oil and oil products at low temperatures and high salinity of the water.
Уровень техникиState of the art
В настоящее время для ликвидации загрязнений нефтепродуктами успешно применяют биологические методы. Используемые биопрепараты включают различные нефтеокисляющие микроорганизмы - бактерии и реже грибы.Currently, biological methods are successfully used to eliminate oil pollution. Biological products used include various oil-oxidizing microorganisms - bacteria and, less commonly, fungi.
Известен способ отчистки водных поверхностей от нефтяного загрязнения, заключающийся во внесении бактериальной культуры, представляющей собой консорциум клеток микроорганизмов Bacillus brevis ИБ ДТ 5-1 и Arthrobacter species ИБ ДТ 5-3 в виде культуральной жидкости с общим титром не менее 108 КОЕ/мл в загрязненную нефтью и нефтепродуктами воду (патент РФ №2241032, приоритет 03.12.2002, опубл. 27.11.2004). Недостатком данного изобретения является то, что консорциум микроорганизмов применяется в виде культуральной жидкости, что не позволяет долговременно хранить консорциум. Также для поддержания жизнедеятельности аэробных микроорганизмов-нефтедеструкторов необходимо проводить аэрацию в водоеме, загрязненном нефтью или нефтепродуктами.A known method of cleaning water surfaces from oil pollution, which consists in introducing a bacterial culture, which is a consortium of cells of microorganisms Bacillus brevis IB DT 5-1 and Arthrobacter species IB DT 5-3 in the form of a culture fluid with a total titer of at least 10 8 CFU / ml water contaminated with oil and oil products (RF patent No. 2241032, priority 03.12.2002, publ. 27.11.2004). The disadvantage of this invention is that the consortium of microorganisms is used in the form of a culture fluid, which does not allow long-term storage of the consortium. Also, to maintain the vital activity of aerobic microorganisms-oil destructors, it is necessary to carry out aeration in a reservoir contaminated with oil or oil products.
Известен препарат для очистки воды и почвы от нефтяных загрязнений и способ его получения (патент РФ №2516412, приоритет 20.12.2011, опубл. 20.05.2014). Препарат содержит микроорганизмы - деструкторы нефти, сорбент, криопротектор - глицерин, микроудобрения - азотнокислый натрий 0,5% и фосфорнокислый калий 0,5%. В качестве деструкторов нефти препарат содержит ассоциацию нефтеокисляющих микроорганизмов: Bacillus subtilis ВКМ В-81, Pseudomonas spp. ВКМ В-892, Pseudomonas putida ВКМ В-1301, Rhodococcus sp. ВКМ Ас-950, Mycobacterium flavescens ВКМ Ас-1415 в количестве 75-85% от общего числа клеток, а также почвенные бактерии Agrobacteium radiobacter ВКМ В-1219 в количестве 15-25% от общего числа клеток. Недостатком указанного препарата является его многокомпонентный состав и сложный процесс его приготовления.A known drug for the purification of water and soil from oil pollution and the method for its production (RF patent No. 2516412, priority 20.12.2011, publ. 05.20.2014). The preparation contains microorganisms - oil destructors, sorbent, cryoprotectant - glycerin, micronutrient fertilizers - sodium nitrate 0.5% and potassium phosphate 0.5%. As oil destructors, the preparation contains an association of oil-oxidizing microorganisms: Bacillus subtilis VKM B-81, Pseudomonas spp. VKM B-892, Pseudomonas putida VKM B-1301, Rhodococcus sp. VKM Ac-950, Mycobacterium flavescens VKM Ac-1415 in the amount of 75-85% of the total number of cells, as well as soil bacteria Agrobacteium radiobacter VKM B-1219 in the amount of 15-25% of the total number of cells. The disadvantage of this drug is its multicomponent composition and the complex process of its preparation.
Ближайшим аналогом изобретения является биопрепарат для очистки объектов окружающей среды от углеводородного загрязнения, способ его получения и применения (патент РФ №2535978, приоритет 15.03.2013, опубл. 20.12.2014). Препарат представляет собой консорциум микроорганизмов, состоящий из следующих штаммов бактерий: Rhodococcus qingshengii БАК-ПАУ-1 ВКПМ АС-1946, Pusillimonas ginsegisoli БАК-ПАУ-2 ВКПМ В-11370, Shinella granuli БАК-ПАУ-3 ВКПМ В-11371, взятых в равных соотношениях. Биопрепарат применяется в жидкой форме или в форме иммобилизованной клеточной биомассы. Недостатком данного препарата является то, что он эффективно работает при температурах не ниже 22°C и солености среды не выше 7% NaCl.The closest analogue of the invention is a biological product for cleaning environmental objects from hydrocarbon pollution, a method for its production and use (RF patent No. 2535978, priority 03.15.2013, publ. 20.12.2014). The drug is a consortium of microorganisms consisting of the following bacterial strains: Rhodococcus qingshengii BAC-PAH-1 VKPM AC-1946, Pusillimonas ginsegisoli BAK-PAH-2 VKPM B-11370, Shinella granuli BAK-PAH-3 VKPM B-1137, VKPM B-11 equal ratios. The biological product is used in liquid form or in the form of immobilized cell biomass. The disadvantage of this drug is that it works effectively at temperatures not lower than 22 ° C and salinity of the medium not higher than 7% NaCl.
Раскрытие изобретенияDisclosure of invention
Задачей настоящего изобретения является получение микробного препарата на основе психроактивных микроорганизмов для утилизации углеводородных загрязнений в водной среде при температуре от+4 до +20°C и солености до 30 г/л.The objective of the present invention is to obtain a microbial preparation based on psychoactive microorganisms for the disposal of hydrocarbon contaminants in the aquatic environment at temperatures from + 4 to + 20 ° C and salinity up to 30 g / l.
Поставленная задача решается тем, что предложен микробный препарат для очистки водной среды, включающий ассоциацию психроактивных нефтеокисляющих микроорганизмов: штамм Arthrobacter rhombi ARC 8 ВКПМ Ac-1987, штамм Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351, штамм Salinibacterium amurskyense ARC 14 ВКПМ Ас-1993 в соотношении 1:1:1 с допустимой величиной отклонения от указанного значения не более 10%, способный утилизировать углеводородные загрязнения при температуре от +4 до +20°C и солености до 30 г/л.The problem is solved by the fact that a microbial preparation for purifying the aquatic environment is proposed, including the association of psychoactive oil-oxidizing microorganisms: Arthrobacter rhombi ARC 8 VKPM Ac-1987 strain, Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351 strain, Salinibacterium amurskyense ARC 14 1993 strain 1: 1: 1 ratio with a permissible deviation from the specified value of not more than 10%, capable of utilizing hydrocarbon contaminants at temperatures from +4 to + 20 ° C and salinity up to 30 g / l.
Преимуществом предлагаемого биопрепарата является то, что он способен утилизировать углеводородные загрязнения в условиях, бедных по питательным субстратам, при низких температурах и высокой солености среды. Эффективность работы биопрепарата в таких условиях позволяет его использовать для утилизации углеводородных загрязнений в условиях северных морей.The advantage of the proposed biological product is that it is able to utilize hydrocarbon contaminants in conditions that are poor in nutrient substrates, at low temperatures and high salinity. The effectiveness of the biological product in such conditions allows it to be used for the disposal of hydrocarbon contaminants in the northern seas.
Чистые культуры микроорганизмов выделены из нефтезагрязненных участков северных морей и депонированы во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИгенетика (ВКПМ, Москва, 1-й Дорожный пр., д. 1).Pure cultures of microorganisms isolated from oil-contaminated areas of the northern seas and deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms FSUE GosNIIgenetika (VKPM, Moscow, 1st Dorozhny pr., 1).
Штамм Arthrobacter rhombi ARC 8 ВКПМ Ac-1987. Колонии лимонно-желтые, округлые, блестящие, гладкие, выпуклые, с ровным краем, однородной структуры, мягкой консистенции. Размеры колонии до 1,5 мм. Клетки округлые, вытянутые в продольном направлении, размер 0,8-1,2×1,0-2,5 мкм. Окраска по Граму положительная. Штамм растет при температуре от +4 до +20°C, в аэробных условиях. Оптимум роста от +4 до +10°C. Растет при рН 4,0-8,0. Растет на плотных и жидких питательных средах с содержанием NaCl 30 г/л. Способен расти в жидкой среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.Strain Arthrobacter rhombi ARC 8 VKPM Ac-1987. The colonies are lemon yellow, round, shiny, smooth, convex, with a smooth edge, homogeneous structure, soft consistency. Colony sizes up to 1.5 mm. The cells are rounded, elongated in the longitudinal direction, size 0.8-1.2 × 1.0-2.5 microns. Gram stain is positive. The strain grows at temperatures from +4 to + 20 ° C, under aerobic conditions. The optimum growth is from +4 to + 10 ° C. Grows at pH 4.0-8.0. It grows on solid and liquid nutrient media with a NaCl content of 30 g / l. Able to grow in a liquid medium with hydrocarbons as the sole source of carbon and energy.
Штамм Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351. Колонии бледно-розовые, округлые, блестящие, однородной структуры, мягкой консистенции, с ровным краем. Размеры колонии до 1,2 мм. Клетки округлые, размером 0,9-1,3×1,5-2,0 мкм, неподвижные. Окраска по Граму отрицательная. Штамм растет при температуре от +4 до +20°C, в аэробных условиях. Оптимум роста от +4 до +10°C. Растет при рН 4,0-8,0. Растет на плотных и жидких питательных средах с содержанием NaCl 30 г/л. Способен расти в жидкой среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.Strain Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351. The colonies are pale pink, round, shiny, uniform in structure, soft consistency, with a smooth edge. Colony sizes up to 1.2 mm. The cells are round, 0.9-1.3 × 1.5-2.0 μm in size, motionless. Gram stain is negative. The strain grows at temperatures from +4 to + 20 ° C, under aerobic conditions. The optimum growth is from +4 to + 10 ° C. Grows at pH 4.0-8.0. It grows on solid and liquid nutrient media with a NaCl content of 30 g / l. Able to grow in a liquid medium with hydrocarbons as the sole source of carbon and energy.
Штамм Salinibacterium amurskyense ARC 14 ВКПМ Ас-1993. Колонии желтые, округлые, блестящие, гладкие, выпуклые, с ровным краем, однородной структуры, мягкой консистенции. Размеры колонии до 2,5 мм. Неподвижные короткие палочки. Окраска по Граму положительная. Штамм растет при температуре от +4 до +20°C, в аэробных условиях. Оптимум роста от +4 до +10°C. Растет при рН 4,0-8,0. Растет на плотных и жидких питательных средах с содержанием NaCl 30 г/л. Способен расти в жидкой среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.Strain Salinibacterium amurskyense ARC 14 VKPM Ac-1993. The colonies are yellow, rounded, shiny, smooth, convex, with a smooth edge, homogeneous structure, soft consistency. Colony sizes up to 2.5 mm. Fixed short sticks. Gram stain is positive. The strain grows at temperatures from +4 to + 20 ° C, under aerobic conditions. The optimum growth is from +4 to + 10 ° C. Grows at pH 4.0-8.0. It grows on solid and liquid nutrient media with a NaCl content of 30 g / l. Able to grow in a liquid medium with hydrocarbons as the sole source of carbon and energy.
Штаммы были выделены на плотной питательной среде modPCA следующего состава (г/л): K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; агар - 14; рН 7,0.The strains were isolated on a dense nutrient medium modPCA of the following composition (g / l): K 2 HPO 4 - 1.5; KH 2 PO 4 0.75; MgSO 4 - 1.0; (NH 4 ) 2 SO 4 - 4.0; NaCl - 30; casein hydrolyzate - 5.0; yeast extract - 2.5; D-glucose - 1.0; agar - 14; pH 7.0.
Культивирование микроорганизмов по отдельности ведется на среде выделения modPCA.The microorganisms are cultivated individually on a modPCA isolation medium.
Предлагаемый микробный препарат является естественной природной ассоциацией, выделенный из загрязненной нефтепродуктами среды. Состав консорциума стабилен во времени, соотношение штаммов может варьироваться в зависимости от условий культивирования микробного сообщества.The proposed microbial preparation is a natural association isolated from an environment contaminated with oil products. The composition of the consortium is stable over time, the ratio of strains may vary depending on the cultivation conditions of the microbial community.
Степень утилизации углеводородных загрязнений в водной среде предлагаемого микробного препарата показана в модельном эксперименте.The degree of utilization of hydrocarbon contaminants in the aquatic environment of the proposed microbial preparation is shown in a model experiment.
Для утилизации углеводородных загрязнений в водной среде используют готовый препарат в сухом, лиофильно высушенном виде. Для обработки водной поверхности, загрязненной нефтепродуктами в концентрации от 5 до 15 г/м2, наиболее предпочтительный расход препарата 3±1 г/м2.For the disposal of hydrocarbon contaminants in the aquatic environment, the finished product is used in a dry, freeze-dried form. For treating a water surface contaminated with oil products in a concentration of 5 to 15 g / m 2 , the most preferred flow rate of the drug is 3 ± 1 g / m 2 .
Пример 1. Исследование нефтеокисляющей активности биопрепарата.Example 1. The study of the oil-oxidizing activity of a biological product.
Биомассу микроорганизмов, выращенных на плотной питательной среде modPCA, смывали физраствором и оценивали оптическую плотность полученной суспензии на фотоэлектроколориметре при длине волны 540 нм. Далее доводили оптическую плотность до одинаковых значений, после чего вносили по 1 мл суспензии каждого штамма в питательную среду №1 следующего состава (г/л): К2НРО4 - 1,5; КН2РО4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 0,5; дрожжевой экстракт - 0,1; рН 7,0. В жидкой питательной среде в качестве углеводородного субстрата использовали смесь товарной нефти Возейского месторождения (плотность 37,9°АР1, сернистость 0,66%, характеризуется как тяжелая, вязкая, с высоким содержанием смол и асфальтенов) и дизельного топлива в соотношении 1:1 по объему. После проведения культивирования при температуре +4°C, 130 об/мин в течение 7 суток проводилась экстракция углеводородов гексаном согласно ГОСТ 31953-2012, хроматографическая оценка убыли углеводородов проводилась на приборе DSA 100 KRűS, оснащенном микрокапиллярной колонкой DB-lms, газ-носитель - гелий, расход газа - 39 мл/мин, детектор - ПИД, температура детектора - 320°C. Измерения проводили в условиях температурного градиента в термостате от 60 до 320°C. Результаты анализа были обработаны при помощи программного обеспечения OpenLAB CDS (Agilent).The biomass of microorganisms grown on a dense nutrient medium modPCA was washed with saline and the optical density of the resulting suspension was evaluated on a photoelectric colorimeter at a wavelength of 540 nm. Next, the optical density was adjusted to the same values, after which 1 ml of each strain suspension was added to the nutrient medium No. 1 of the following composition (g / l): K 2 NRA 4 - 1.5; KH 2 RO 4 - 0.75; MgSO 4 - 1.0; (NH 4 ) 2 SO 4 - 4.0; NaCl - 30; casein hydrolyzate - 0.5; yeast extract - 0.1; pH 7.0. In a liquid nutrient medium, a mixture of marketable oil from the Vozeyskoye field (density 37.9 ° AP1, sulfur content 0.66%, characterized as heavy, viscous, with a high content of resins and asphaltenes) and diesel fuel in a 1: 1 ratio was used as a hydrocarbon substrate volume. After cultivation at a temperature of + 4 ° C, 130 rpm for 7 days, hydrocarbons were extracted with hexane according to GOST 31953-2012, a chromatographic assessment of hydrocarbon losses was carried out on a DSA 100 KRűS instrument equipped with a DB-lms microcapillary column, carrier gas - helium, gas flow rate - 39 ml / min, detector - PID, detector temperature - 320 ° C. The measurements were carried out under a temperature gradient in a thermostat from 60 to 320 ° C. The analysis results were processed using OpenLAB CDS software (Agilent).
Суммарная убыль для среднекипящей и высококипящей фракции составляла не менее 50% за 7 суток культивирования при температуре +4°C и солености среды 30 г/л.The total decrease for the medium boiling and high boiling fractions was at least 50% for 7 days of cultivation at a temperature of + 4 ° C and salinity of the medium of 30 g / l.
Пример 2. Способ производства препарата на основе штаммов Arthrobacter rhombi ARC 8 ВКПМ Ас-1987, Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ B-12351, Salinibacterium amurskyense ARC 14 ВКПМ Ас-1993.Example 2. A method of manufacturing a preparation based on strains of Arthrobacter rhombi ARC 8 VKPM Ac-1987, Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351, Salinibacterium amurskyense ARC 14 VKPM Ac-1993.
Штаммы, полученные по Примеру 1, взятые в объемном соотношении 1:1:1, вносят в питательную среду следующего состава (г/л): К2НРО4 - 1,5; КН2РО4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; рН 7,0. Далее культивируют при температуре +10°C на орбитальном шейкере в течение 3 суток до получения суммарного конечного титра 109 КОЕ/мл. В полученную суспензию клеток в питательной среде вносят защитную среду (сухое обезжиренное молоко в количестве 10%). Далее полученную жидкую биомассу замораживают и обезвоживают методом лиофилизации. Полученную сухую биомассу микроорганизмов смешивают с питательным премиксом (сухое обезжиренное молоко) в соотношении 1:10.The strains obtained in Example 1, taken in a volume ratio of 1: 1: 1, contribute to the nutrient medium of the following composition (g / l): K 2 NRA 4 - 1.5; KH 2 RO 4 - 0.75; MgSO 4 - 1.0; (NH 4 ) 2 SO 4 - 4.0; NaCl - 30; casein hydrolyzate - 5.0; yeast extract - 2.5; D-glucose - 1.0; pH 7.0. Then they are cultivated at a temperature of + 10 ° C on an orbital shaker for 3 days until a total final titer of 10 9 CFU / ml is obtained. A protective medium (10% skimmed milk powder) is added to the resulting suspension of cells in a nutrient medium. Next, the resulting liquid biomass is frozen and dehydrated by lyophilization. The resulting dry biomass of microorganisms is mixed with a nutritious premix (skimmed milk powder) in a ratio of 1:10.
Таким образом, получен микробный препарат, способный утилизировать углеводородные загрязнения в условиях, бедных по питательным субстратам, при низких температурах и высокой солености среды, что позволяет его использовать для утилизации углеводородных загрязнений в условиях северных морей.Thus, we obtained a microbial preparation capable of utilizing hydrocarbon contaminants under conditions poor in nutrient substrates, at low temperatures and high salinity, which allows it to be used for the disposal of hydrocarbon contaminants in the conditions of the northern seas.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016110702A RU2634396C2 (en) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Microbial preparation for hydrocarbon contamination |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016110702A RU2634396C2 (en) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Microbial preparation for hydrocarbon contamination |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016110702A RU2016110702A (en) | 2017-09-28 |
| RU2634396C2 true RU2634396C2 (en) | 2017-10-26 |
Family
ID=60047580
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016110702A RU2634396C2 (en) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Microbial preparation for hydrocarbon contamination |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2634396C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697377C1 (en) * | 2018-11-15 | 2019-08-13 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" | Microbial preparation for recycling hydrocarbon contaminants |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2093478C1 (en) * | 1995-01-05 | 1997-10-20 | Уфимский государственный нефтяной технический университет | Method of water and soil treatment from oil, petroleum products and polymeric additions in drilling fluid |
| RU2129604C1 (en) * | 1996-08-06 | 1999-04-27 | Закрытое акционерное общество "Экогеос-1" | Consortium of microorganisms arthrobacter oxidants and pseudomonas putida used for treatment of soil and water from petroleum and petroleum products pollution |
| RU2241032C2 (en) * | 2002-12-03 | 2004-11-27 | Закрытое акционерное общество Научно-производственное предприятие "Биомедхим" | Method for treatment of aqueous surface against petroleum pollution |
| RU2535978C1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-12-20 | Ирина Анатольевна Афти | Biopreparation for cleaning environmental objects from hydrocarbon pollution, method of obtaining and application thereof |
-
2016
- 2016-03-23 RU RU2016110702A patent/RU2634396C2/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2093478C1 (en) * | 1995-01-05 | 1997-10-20 | Уфимский государственный нефтяной технический университет | Method of water and soil treatment from oil, petroleum products and polymeric additions in drilling fluid |
| RU2129604C1 (en) * | 1996-08-06 | 1999-04-27 | Закрытое акционерное общество "Экогеос-1" | Consortium of microorganisms arthrobacter oxidants and pseudomonas putida used for treatment of soil and water from petroleum and petroleum products pollution |
| RU2241032C2 (en) * | 2002-12-03 | 2004-11-27 | Закрытое акционерное общество Научно-производственное предприятие "Биомедхим" | Method for treatment of aqueous surface against petroleum pollution |
| RU2535978C1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-12-20 | Ирина Анатольевна Афти | Biopreparation for cleaning environmental objects from hydrocarbon pollution, method of obtaining and application thereof |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697377C1 (en) * | 2018-11-15 | 2019-08-13 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" | Microbial preparation for recycling hydrocarbon contaminants |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2016110702A (en) | 2017-09-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2624067C2 (en) | Strain nocardia coeliaca arc12 vkpm ac-1990 is destructor of oil and oil products | |
| RU2337069C1 (en) | Preparation for soil and water purufication from oil and oil products | |
| CN101139140A (en) | Aerugo microcapsule algae degradation method using animalcule | |
| RU2634396C2 (en) | Microbial preparation for hydrocarbon contamination | |
| RU2624053C2 (en) | Strain psychrobacter maritimus arc 7 vkpm v-12347-destructor of oil and oil products | |
| RU2624055C2 (en) | Strain psychrobacter fozii arc 5 vkpm b-12345 is destructor of oil and oil products | |
| RU2634399C2 (en) | Microbial preparation for hydrocarbon contamination disposal | |
| RU2699977C1 (en) | Psychrobacter cibarius arc 35 vkpm v-13081 strain destructor of oil and oil products | |
| RU2624065C1 (en) | Strain psychrobacter cibarius arc 13 vkpm b-12351 is destructor of oil and oil products | |
| RU2634397C2 (en) | Microbial preparation for hydrocarbon contamination disposal | |
| RU2694610C1 (en) | Pseudomonas extremaustralis arc 38 vkpm b-13084 strain - destructor of oil and oil products | |
| RU2624052C2 (en) | Strain arthrobacter rhombi arc 8 vkpm as-1987-destructor of oil and oil products | |
| RU2634403C2 (en) | Microbial preparation for hydrocarbon contamination disposal | |
| RU2633690C2 (en) | Microbial preparation for hydrocarbon contamination | |
| RU2624054C2 (en) | Strain leucobacter aridicollis arc 6 vkpm as-1992 destructor of oil and oil products | |
| RU2708959C1 (en) | Microbial preparation for recycling hydrocarbon contaminants | |
| RU2142997C1 (en) | Strain arthrobacter sp for degradation of crude oil and petroleum products | |
| RU2691689C1 (en) | Yarrowia lipolytica strain - an oil and oil product destructor | |
| RU2624051C2 (en) | Strain psychrobacter cibarius arc 9 bkpm b-12348 is destructor of oil and oil products | |
| RU2624058C2 (en) | Strain nocardia coeliaca arc 1 vkpm ac-1991 is destructor of oil and oil products | |
| RU2699990C1 (en) | Arthrobacter psychrochitiniphilus arc 42 vkpm as-2076 strain - destructor of oil and oil products | |
| RU2624059C2 (en) | Strain cobetia marina arc 11 vkpm b-12350 is destructor of oil and oil products | |
| RU2142996C1 (en) | Strain arthrobacter sp for degradation of crude oil and petroleum products | |
| RU2697381C1 (en) | Microbial preparation for recycling hydrocarbon contaminants | |
| RU2697278C1 (en) | Microbial preparation for recycling hydrocarbon contaminants |