RU2619214C1 - METHOD FOR PREDICTION OF MODERATELY DIFFERENTIATED ENDOMETRIOID UTERINE BODY T1N0M0 CARCINOMA COURSE IN CASE OF PRIMARY TUMOUR SIZE WITHIN 1 cm - Google Patents

METHOD FOR PREDICTION OF MODERATELY DIFFERENTIATED ENDOMETRIOID UTERINE BODY T1N0M0 CARCINOMA COURSE IN CASE OF PRIMARY TUMOUR SIZE WITHIN 1 cm Download PDF

Info

Publication number
RU2619214C1
RU2619214C1 RU2015156528A RU2015156528A RU2619214C1 RU 2619214 C1 RU2619214 C1 RU 2619214C1 RU 2015156528 A RU2015156528 A RU 2015156528A RU 2015156528 A RU2015156528 A RU 2015156528A RU 2619214 C1 RU2619214 C1 RU 2619214C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
topoisomerase
alpha
course
t1n0m0
moderately differentiated
Prior art date
Application number
RU2015156528A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Олег Иванович Кит
Сергей Сергеевич Тодоров
Татьяна Ивановна Моисеенко
Иван Сергеевич Никитин
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority to RU2015156528A priority Critical patent/RU2619214C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2619214C1 publication Critical patent/RU2619214C1/en

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: in case of primary tumour size within 1 cm, uterus tumour cells expressing Ki-67, 2 alpha topoisomerase are determined, 2 alpha topoisomerase/Ki-67 correlation coefficient is calculated, and at coefficient value less than or equal to 0.8, favorable outcome without adjuvant therapy is predicted. At coefficient value of more than 0.8, unfavorable course of the disease is predicted, and adjuvant therapy is recommended.
EFFECT: use of the invention allows to improve the accuracy and information content of moderately differentiated endometrioid uterine carcinomas course prediction.
1 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, онкологии, гинекологии, и может быть использовано для прогноза течения умереннодифференцированных эндометриоидных карцином тела матки T1N0M0 и последующего обоснования целесообразности адьювантной терапии.The invention relates to medicine, namely to pathological anatomy, oncology, gynecology, and can be used to predict the course of moderately differentiated endometrioid carcinomas of the uterine body T1N0M0 and the subsequent justification of the feasibility of adjuvant therapy.

В течение последних лет активно изучаются различные молекулярные маркеры, такие как циклооксигеназы (СОХ-2, СОХ-1), муцины (MUC-1, MUC-2), рецепторы эстрогенов (ER) и прогестерона (PR), антиген Ki-67, онкобелок HER2/neu при самой распространенной разновидности рака тела матки эндометриоидной аденокарциноме (см. интернет-ресурс: http://cyberleninka.ru/article/n/molekulyarnye-markery-raka-sheyki-i-tela-matki-kak-prognosticheskie-faktory#ixzz3stSZ3Dsp). Белок Ki-67 относится к семейству ядерных белков и отражает участие клеток в процессах пролиферации.In recent years, various molecular markers have been actively studied, such as cyclooxygenases (COX-2, COX-1), mucins (MUC-1, MUC-2), estrogen receptors (ER) and progesterone (PR), Ki-67 antigen, oncoprotein HER2 / neu with the most common type of cancer of the uterine body, endometrioid adenocarcinoma (see Internet resource: http://cyberleninka.ru/article/n/molekulyarnye-markery-raka-sheyki-i-tela-matki-kak-prognosticheskie- faktory # ixzz3stSZ3Dsp). Protein Ki-67 belongs to the family of nuclear proteins and reflects the participation of cells in proliferation processes.

Высокая степень экспрессии Ki-67 свидетельствует о неблагоприятном прогнозе у больных раком тела матки (см. «Молекулярные маркеры рака шейки и тела матки как прогностические факторы», Кайрбаев М.Р., Чингисова Ж.К., Кукубасов Е.К., Клиническая медицина Казахстана, №3 (29), 2013, ст. 42-46).A high degree of Ki-67 expression indicates an unfavorable prognosis in patients with uterine body cancer (see "Molecular markers of cervical and uterine cancer as prognostic factors", Kairbaev MR, Chingisova Zh.K., Kukubasov E.K., Clinical medicine of Kazakhstan, No. 3 (29), 2013, Art. 42-46).

Белок топоизомераза 2 альфа (Topoisomerase IIα, (ТОР2альфа)) представляет собой фермент, который контролирует и определяет топологические состояния ДНК во время транскрипции и репликации, с ним связывают развитие лекарственной резистентности при химиотерапии опухолей.The protein topoisomerase 2 alpha (Topoisomerase IIα, (TOP2 alpha)) is an enzyme that monitors and determines the topological state of DNA during transcription and replication, and it is associated with the development of drug resistance during tumor chemotherapy.

Известно применение маркера Ki-67 для повышения точности прогнозирования пятилетней выживаемости без прогрессирования у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения (см. патент RU №2281698 С1, МПК А61В 10/00, G01N 33/53 «Способ прогнозирования пятилетней выживаемости без прогрессирования у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения», опубл. 20.08.2006, Бюл. №23). Авторы изобретения в биоптате подсчитывают количество Ki-67 антиген-положительных клеток в не менее чем пятнадцати полях зрения и определяют индекс пролиферации, рассчитывая его среднее, минимальное и максимальное значения, рассчитывают показатель пятилетней выживаемости без прогрессирования рака (S) по формуле: S=0,38×Кi-67M+0,02×Ki-67Min-0,24×Ki-67Max, где Ki-67Min - минимальное значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения, Ki-67Max - максимальное значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения, Ki-67M - среднее значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения. При значениях S<22 прогнозируют пятилетнюю выживаемость без прогрессирования рака. Однако, на наш взгляд, предлагаемый авторами способ оценки неспецифичен для эндометриоидных карцином тела матки.It is known to use the Ki-67 marker to increase the accuracy of predicting five-year progression-free survival in patients with cancer of the renal pelvis and ureter after radical surgical treatment (see patent RU No. 2281698 C1, IPC АВВ 10/00, G01N 33/53 “Method for predicting five-year survival without progression in patients with cancer of the renal pelvis and ureter after radical surgical treatment ", publ. 08/20/2006, Bull. No. 23). The inventors in a biopsy count the number of Ki-67 antigen-positive cells in at least fifteen fields of view and determine the proliferation index, calculating its average, minimum and maximum values, calculate the five-year survival rate without cancer progression (S) by the formula: S = 0 , 38 × Ki-67M + 0.02 × Ki-67Min-0.24 × Ki-67Max, where Ki-67Min is the minimum value of the Ki-67 proliferation index after examining 15 fields of view, Ki-67Max is the maximum value of the Ki proliferation index -67 after examination of 15 fields of view, Ki-67M - average value and Dex proliferation Ki-67 after examining 15 fields of view. At S <22, five-year survival without cancer progression is predicted. However, in our opinion, the method of assessment proposed by the authors is not specific for endometrioid carcinomas of the uterus.

Также из патентных источников известно использование маркеров Ki-67 и топоизомеразы 2 альфа (Topoisomerase IIα) для прогнозирования общей выживаемости больных с лейомиосаркомой тела матки I-II стадии (см. заявка на изобретение №2013140844/15 «Способ прогнозирования общей выживаемости больных с лейомиосаркомой тела матки I-II стадии», приоритет от 04.09.2013, дата публикации заявки: 10.04.2015. Бюл. №10). Способ включает в себя определение степени злокачественности, размера опухоли и проведение иммуногистохимического определения экспрессии маркера Ki 67. Сущностью способа является то, что определяют стадию FIGO после экстирпации матки с придатками, степень злокачественности по FNCLCC и дополнительно проводят иммуногистохимические исследование уровня экспрессии маркеров BrdU, CD31, Topoisomerase IIα, HSP70, исследование рецепторного статуса опухоли на эстрогены и прогестерон; плоидометрию; гистохимическое исследование ядрышковых организаторов (AgNORs) опухолевых клеток и эндотелия на степень зрелости сосудов опухоли; определяют плотность микроциркуляторного русла перитуморозной зоны опухоли и рассчитывают прогностическую значимость каждого параметра по формуле с вычислением клинико-морфо-биомолекулярного показателя (КМБП): КМБП=Х1+Х2+Х3…+Х12, где X - это клинико-морфологические и биомолекулярные параметры, а характеристики и значения экспрессии исследованных параметров выражают в баллах: Х1 - (ПМЦР) перитуморозной зоны до 62,4 в 2 мм2 - 0 баллов, более 62,4 в мм2 - 9 баллов; Х2 - плоидность ядер до 9,4 с - 0, более 9,4 с - 9 баллов; Стр.: 1 RU 2013140844 A, RU 2013140844 А; Х3 - число AgNORs ядер до 22,1 - 0 баллов, более 22,1 - 3 балла; Х4 - экспрессия BrdU до 6,3% - 0 баллов, более 6,3% - 3 балла; Х5 - зрелые сосуды опухоли 0 баллов, незрелые сосуды опухоли 3 балла; Х6 - степень злокачественности по FNLCC G1 - 0 баллов, G2 - 2 балла, G3 - 3 балла; Х7 - реакция HSP70 цитоплазматическая, ядерно-цитоплазматическая - 0 баллов, реакция HSP70 ядерно-ядрышковая - 3 балла; Х8 - экспрессия Ki-67 до 16,2% - 0 баллов, более 16,2% - 3 балла; Х9 - интенсивность Topoisomerase II +, ++ - 0 баллов, +++ - 3 балла; X10 - рецепторный статус (по РП) позитивный - 0 баллов, негативный - 3 балла; X11 - стадия FIGO I - 0 баллов, II - 3 балла; X12 - размер опухоли до 7 см - 0 баллов, более 7 см - 3 балла; и в зависимости от суммы баллов прогнозируют общую выживаемость больных с ЛМС: I группа - от 0 до 20 баллов с благоприятным прогнозом, II группа - от 21 до 40 баллов с относительно неблагоприятным (промежуточным) прогнозом, III группа - более 40 баллов с неблагоприятным прогнозом.The use of Ki-67 markers and topoisomerase 2 alpha (Topoisomerase IIα) for predicting the overall survival of patients with stage I-II uterine leiomyosarcoma is also known from patent sources (see patent application No. 20133140844/15 “Method for predicting the overall survival of patients with body leiomyosarcoma uterus of the I-II stage ", priority from 09/04/2013, application publication date: 04/10/2015. Bull. No. 10). The method includes determining the degree of malignancy, tumor size and conducting an immunohistochemical determination of the expression of the Ki 67 marker. The essence of the method is that the FIGO stage is determined after hysterectomy with appendages, the degree of malignancy by FNCLCC and immunohistochemical studies of the expression level of BrdU, CD31 markers are carried out, Topoisomerase IIα, HSP70, study of the receptor status of a tumor for estrogen and progesterone; ploidometry; histochemical examination of the nucleolar organizers (AgNORs) of tumor cells and endothelium by the degree of maturity of the tumor vessels; determine the density of the microvasculature of the peritumor zone of the tumor and calculate the prognostic significance of each parameter by the formula with the calculation of the clinico-morpho-biomolecular index (BMI): BMI = X1 + X2 + X3 ... + X12, where X is the clinical, morphological and biomolecular parameters, and characteristics and expression values of the studied parameters are expressed in points: X1 - (PMR) of the peritumor zone up to 62.4 in 2 mm 2 - 0 points, more than 62.4 in mm 2 - 9 points; X2 - nucleus ploidy up to 9.4 s - 0, more than 9.4 s - 9 points; Page: 1 RU 2013140844 A, RU 2013140844 A; X3 - the number of AgNORs nuclei up to 22.1 - 0 points, more than 22.1 - 3 points; X4 - expression of BrdU up to 6.3% - 0 points, more than 6.3% - 3 points; X5 - mature vessels of the tumor 0 points, immature vessels of the tumor 3 points; X6 - malignancy according to FNLCC G1 - 0 points, G2 - 2 points, G3 - 3 points; X7 - reaction HSP70 cytoplasmic, nuclear cytoplasmic - 0 points, reaction HSP70 nuclear-nucleolar - 3 points; X8 - expression of Ki-67 to 16.2% - 0 points, more than 16.2% - 3 points; X9 - intensity of Topoisomerase II +, ++ - 0 points, +++ - 3 points; X10 - receptor status (according to RP) positive - 0 points, negative - 3 points; X11 - stage FIGO I - 0 points, II - 3 points; X12 - tumor size up to 7 cm - 0 points, more than 7 cm - 3 points; and depending on the total score, the overall survival of patients with LMS is predicted: group I - from 0 to 20 points with a favorable prognosis, group II - from 21 to 40 points with a relatively unfavorable (intermediate) prognosis, group III - more than 40 points with a poor prognosis .

Критерии выбора метода адьювантной специальной терапии у нерепродуктивных больных раком тела матки T1N0M0 G2 эндометриоидной аденокарциномы основываются на площади поражения опухолью не более 1 см и глубины инвазии до

Figure 00000001
стенки матки, что не отражает биологических потенций самой опухоли (см. Диагностика и лечение злокачественных новообразований. М., 2013 г., 413 с.).The criteria for the selection of the adjuvant special therapy method for non-reproductive patients with uterine body cancer T1N0M0 G2 endometrioid adenocarcinoma are based on a tumor lesion area of not more than 1 cm and an invasion depth of up to
Figure 00000001
 walls of the uterus, which does not reflect the biological potencies of the tumor itself (see Diagnosis and treatment of malignant neoplasms. M., 2013, 413 pp.).

Также известно применение топоизомеразы 2 альфа в качестве прогностического биомаркера в химиотерапии рака (см. Human topoisomerase II alpha as a prognostic biomarker in cancer chemotherapy. Интернет-ресурс: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26482620). Значения экспрессии топоизомеразы 2 альфа помогают в диагностике рака и в прогнозе прогрессирования заболевания, общей выживаемости пациентов и позволяют рассчитать ответ на терапию.The use of topoisomerase 2 alpha as a prognostic biomarker in cancer chemotherapy is also known (see Human topoisomerase II alpha as a prognostic biomarker in cancer chemotherapy. Internet resource: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26482620) . The expression values of topoisomerase 2 alpha help in the diagnosis of cancer and in predicting the progression of the disease, the overall survival of patients and can calculate the response to therapy.

Из других литературных источников известно использование топоизомеразы 2 альфа как предиктора эффективности адъювантной химиотерапии при раке эндометрия (см. интернет-ресурс: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26588239). Авторами установлено, что у больных с гиперэкспрессией топоизомеразы 2 альфа можно прогнозирвать худший прогноз по сравнению с теми, у кого не наблюдается экспрессии топоизомеразы 2 альфа.From other literature sources, the use of topoisomerase 2 alpha is known as a predictor of the effectiveness of adjuvant chemotherapy for endometrial cancer (see Internet resource: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26588239). The authors found that patients with overexpression of topoisomerase 2 alpha can predict a worse prognosis than those who do not show expression of topoisomerase 2 alpha.

Известна роль таких показателей как ER, PR, C-ErbB-2 и Ki-67 в развитии карциномы эндометрия и их соотношение с клинико-морфологическими особенностями (интернет-ресурс: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26434913). Аномальная экспрессия ER, PR, C-erbB2 и Ki-67 может играть важную роль в злокачественной трансформации и дифференциации клеток эндометрия, поэтому их совместное обнаружение может быть важным и иметь большое значение для прогноза карциномы эндометрия.The role of such indicators as ER, PR, C-ErbB-2 and Ki-67 in the development of endometrial carcinoma and their relationship with clinical and morphological features is known (Internet resource: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed / 26434913). Abnormal expression of ER, PR, C-erbB2 and Ki-67 can play an important role in the malignant transformation and differentiation of endometrial cells, therefore, their joint detection can be important and of great importance for the prognosis of endometrial carcinoma.

Техническим результатом предлагаемого нами изобретения является повышение точности и информативности прогноза течения умереннодифференцированных эндометриоидных карцином матки, позволяющего обосновать целесообразность и объем адъювантной терапии.The technical result of our invention is to increase the accuracy and informativeness of the prognosis of the course of moderately differentiated uterine endometrioid carcinomas, which allows us to justify the feasibility and extent of adjuvant therapy.

Технический результат достигают тем, что при размерах первичной опухоли в пределах 1 см определяют клетки опухоли матки, экспрессирующие Ki-67, топоизомеразу 2 альфа, рассчитывают коэффициент соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 и при значении коэффициента менее или равно 0,8 прогнозируют благоприятный исход без проведения адъювантной терапии, а при значении коэффициента более 0,8 прогнозируют неблагоприятное течение заболевания и рекомендуют проведение адъювантной терапии.The technical result is achieved when uterine tumor cells expressing Ki-67, topoisomerase 2 alpha are determined at the size of the primary tumor within 1 cm, the ratio of topoisomerase 2 alpha / Ki-67 is calculated and, if the coefficient is less than or equal to 0.8, a favorable outcome without adjuvant therapy, and if the coefficient value is more than 0.8, an unfavorable course of the disease is predicted and adjuvant therapy is recommended.

Выбор в качестве маркеров эндометриоидных карцином матки таких белков, как Ki-67, топоизомеразы 2 альфа обусловлен их ролью в определении пролиферативной, митотической активности опухолевой ткани.The choice of proteins such as Ki-67 and topoisomerase 2 alpha as markers of uterine endometriotic carcinomas is due to their role in determining the proliferative, mitotic activity of tumor tissue.

Выбранный нами набор белков позволил оценить биологические потенции умереннодифференцированных эндометриоидных карцином тела матки T1N0M0 в зависимости от уровня коэффициента соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 менее или равно 0,8 или более 0,8.Our set of proteins made it possible to estimate the biological potencies of moderately differentiated endometrioid carcinomas of the uterine body T1N0M0 depending on the level of the ratio coefficient of topoisomerase 2 alpha / Ki-67 less than or equal to 0.8 or more than 0.8.

В таблице 1 представлены результаты сравнительного исследования иммуногистохимических маркеров рецепторов к белку пролиферации Ki-67, топоизомеразе 2 альфа в срезах умереннодифференцированных эндометриоидных карцином тела матки у 20 пациенток при коэффициенте соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 менее или равно 0,8 (1 группа) и у 20 пациенток с умереннодифференцированными аденокарциномами при коэффициенте соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 более 0,8 (2 группа).Table 1 presents the results of a comparative study of immunohistochemical markers of the Ki-67 proliferation protein, topoisomerase 2 alpha in sections of moderately differentiated endometrioid carcinomas of the uterine body in 20 patients with a ratio of topoisomerase 2 alpha / Ki-67 of less than or equal to 0.8 (group 1) and in 20 patients with moderately differentiated adenocarcinomas with a ratio of topoisomerase 2 alpha / Ki-67 ratio of more than 0.8 (group 2).

При сравнении результатов исследования между двумя группами пациенток обнаружено, что у пациенток первой группы индекс пролиферации Ki-67 составил не более 20% ядер клеток, отмечался низкий уровень активности топоизомеразы 2 альфа (не более 10% ядер клеток), коэффициент соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 составил не более 0,8.When comparing the results of the study between two groups of patients, it was found that in the patients of the first group, the Ki-67 proliferation index amounted to no more than 20% of the cell nuclei, a low level of topoisomerase 2 alpha activity (not more than 10% of the cell nuclei), topoisomerase ratio 2 alpha / Ki-67 was not more than 0.8.

Во второй группе пациенток с эндометриодными карциномами тела матки имелось повышение уровня пролиферативной активности опухоли Ki-67 (80-90%), гиперэкспрессия топоизомеразы 2 альфа (65-75%), коэффициент соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 составил более 0,8.In the second group of patients with endometriotic carcinomas of the uterus, there was an increase in the level of proliferative activity of the Ki-67 tumor (80-90%), overexpression of topoisomerase 2 alpha (65-75%), the coefficient of topoisomerase 2 alpha / Ki-67 ratio was more than 0.8 .

Figure 00000002
Figure 00000002

Подобных иммуногистохимических исследований при комплексной иммуногистохимической оценке умереннодифференцированных эндометриоидных карцином тела матки в доступной нам научно-медицинской и патентной литературе не встречалось.Similar immunohistochemical studies in a comprehensive immunohistochemical evaluation of moderately differentiated endometrioid carcinomas of the uterus in the available medical, scientific and patent literature were not found.

Сравнительный анализ известных способов комплексной оценки предлагаемого нами способа позволяет выявить его новизну и отличия от известных.A comparative analysis of the known methods for a comprehensive assessment of our proposed method allows us to identify its novelty and differences from the known.

Новизна способа комплексной иммуногистохимической оценки умереннодифференцированных эндометриоидных карцином эндометрия заключается в определении коэффициента соотношения маркеров топоизомераза 2 альфа/Ki-67 с целью повышения точности и информативности прогноза течения умереннодифференцированных эндометриоидных карцином матки, что, в свою очередь, обосновывает необходимость проведения профилактической адъювантной терапии.The novelty of the method for complex immunohistochemical evaluation of moderately differentiated endometrioid carcinomas of the endometrium consists in determining the ratio of the markers of topoisomerase 2 alpha / Ki-67 markers in order to increase the accuracy and informativeness of the prognosis of the course of moderately differentiated endometrioid carcinomas of the uterus, which, in turn, justifies the need for preventive therapy.

Предлагаемый нами способ оценки осуществляют следующим образом.Our proposed evaluation method is as follows.

1. После хирургического удаления матки, из ткани опухоли готовили стандартные блоки, 2 парафиновых среза толщиной 3-5 микрон по стандартной методике, депарафинировали в ксилоле и регидратировали в батарее спиртов. Два среза использовали для проведения иммуногистохимической реакции с маркерами Ki-67, топоизомеразы 2 альфа.1. After surgical removal of the uterus, standard blocks were prepared from the tumor tissue, 2 paraffin sections 3-5 microns thick according to the standard method, were dewaxed in xylene and rehydrated in a battery of alcohols. Two sections were used to carry out an immunohistochemical reaction with markers Ki-67, topoisomerase 2 alpha.

Последовательность этапов проведения реакции с каждым из маркеров совпадала.The sequence of stages of the reaction with each of the markers coincided.

2. Иммуногистохимическое исследование по оценке экспрессии Ki-67, топоизомеразы 2 альфа проводили по стандартной методике. Для открытия антигенных детерминант проводили обработку срезов в цитратном буфере [рН 6,0] в течение 30 минут при 95°С на водяной бане.2. An immunohistochemical study evaluating the expression of Ki-67, topoisomerase 2 alpha was carried out according to standard methods. To open antigenic determinants, sections were processed in citrate buffer [pH 6.0] for 30 minutes at 95 ° C in a water bath.

3. Инкубацию с первичными антителами проводили в течение ночи при 4°С. В качестве первичных антител при оценке экспрессии Ki-67 топоизомеразы 2 альфа использовали мышиные моноклональные антитела к данным маркерам (фирма производитель DAKO Corp).3. Incubation with primary antibodies was performed overnight at 4 ° C. Mouse monoclonal antibodies to these markers (manufactured by DAKO Corp) were used as primary antibodies in assessing the expression of Ki-67 topoisomerase 2 alpha.

4. Для визуализации реакции антиген-антитело использовали стрептавидин-биотиновую тест-систему [DAKO Corp] согласно инструкции. В качестве хромогена использовали ДАБ+[DAKO Corp].4. To visualize the antigen-antibody reaction, the streptavidin-biotin test system [DAKO Corp] was used according to the instructions. DAB + [DAKO Corp] was used as a chromogen.

5. Затем срезы докрашивали гематоксилином и заключали в бальзам.5. Then the sections were stained with hematoxylin and enclosed in a balm.

6. Реакцию оценивали с применением светового микроскопа (увеличение ×40) по следующим критериям. Количество положительных клеток оценивали в зонах, содержащих их максимальное количество. В качестве негативного контроля использовали иммуногистохимическую реакцию без добавления первичных антител.6. The reaction was evaluated using a light microscope (magnification × 40) according to the following criteria. The number of positive cells was evaluated in areas containing their maximum number. An immunohistochemical reaction without the addition of primary antibodies was used as a negative control.

Показано, что у пациенток с умереннодифференцированными эндометриоидными карциномами тела матки T1N0M0 имелись два типа иммуногистохимических изменений Ki-67, топоизомеразы 2 альфа и их соотношения (менее или равно 0,8 и более 0,8).It was shown that in patients with moderately differentiated endometrioid carcinomas of the uterine body T1N0M0, there were two types of immunohistochemical changes in Ki-67, topoisomerase 2 alpha, and their ratio (less than or equal to 0.8 and more than 0.8).

У пациенток первой группы в опухолях матки индекс пролиферации Ki-67 составил не более 20% ядер клеток, низкий уровень активности топоизомеразы 2 альфа (не более 10% ядер клеток), коэффициент соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 составил не более 0,8.In patients of the first group in uterine tumors, the Ki-67 proliferation index was no more than 20% of the cell nuclei, low topoisomerase 2 alpha activity (no more than 10% of the cell nuclei), the topoisomerase 2 alpha / Ki-67 ratio was not more than 0.8 .

У пациенток второй группы в опухолях матки отмечалось значительное повышение уровня пролиферативной активности опухоли Ki-67 (80-90%), гиперэкспрессия топоизомеразы 2 альфа (65-75%), коэффициент соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 составил более 0,8.In patients of the second group, uterine tumors showed a significant increase in the level of Ki-67 tumor proliferative activity (80-90%), overexpression of topoisomerase 2 alpha (65-75%), the ratio of topoisomerase 2 alpha / Ki-67 ratio was more than 0.8.

Приводим клинические примеры использования способаHere are clinical examples of the use of the method

Пример 1. Больная X., 1964 года рождения, с верифицированным на догоспитальном этапе диагнозом: рак тела матки (эндометриоидная карцинома) T1N0M0, оперирована по стандартной методике: пангистерэктомия, тазовая лимфаденэтомия.Example 1. Patient X., born in 1964, with a diagnosis verified at the prehospital stage: cancer of the uterus (endometrioid carcinoma) T1N0M0, was operated on according to the standard method: panhisterectomy, pelvic lymphadenomy.

Макроскопически первичная опухоль располагалась в верхнем сегменте матки и по протяженности не превышала в диаметре 1,0 см.Macroscopically, the primary tumor was located in the upper segment of the uterus and did not exceed 1.0 cm in diameter.

Послеоперационное морфологическое исследование выявило наличие G2 эндометриоидной карциномы в виде трубчатых структур, выстланных атипическими железистым эпителием; глубина инвазии опухоли в миометрий до

Figure 00000003
толщины стенки матки; в удаленных лимфатических узлах метастазов опухоли не обнаружено.Postoperative morphological examination revealed the presence of G2 endometrioid carcinoma in the form of tubular structures lined with atypical glandular epithelium; depth of tumor invasion in the myometrium to
Figure 00000003
 uterine wall thickness; no tumor metastases were found in the removed lymph nodes.

Ядерный индекс в опухолевых железах составил не более 0,4. Индекс пролиферации Ki-67 составил 18%, экспрессия топоизомеразы 2 альфа 10%, коэффициент соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 составил 0,55, что позволило установить низкие агрессивные потенции G2 эндометриоидной аденокарциномы у данной больной и не проводить пациентке превентивную адъювантную лучевую терапию. Подобная тактика не протоворечит стандарту лечения больных с T1N0M0G2 эндометриоидной аденокарциномы.The nuclear index in the tumor glands was not more than 0.4. The Ki-67 proliferation index was 18%, topoisomerase 2 alpha expression was 10%, the topoisomerase 2 alpha / Ki-67 ratio was 0.55, which made it possible to establish low aggressive potencies of G2 endometrioid adenocarcinoma in this patient and prevent the patient from receiving preventive adjuvant radiation therapy . Such tactics do not contradict the standard of treatment for patients with T1N0M0G2 endometrioid adenocarcinoma.

Срок наблюдения пациентки 29 месяцев без признаков рецидива и метастазов.The observation period of the patient is 29 months without signs of relapse and metastases.

Пример 2. Больная Ж., 1968 года рождения с верифицированным амбулаторно диагнозом: рак тела матки T1NxM0, прооперирована в объеме пангистерэктомии, тазовой лимфаденэтомии.Example 2. Patient J., born in 1968 with a verified outpatient diagnosis: cancer of the uterine body T1NxM0, was operated on in the scope of panhisterectomy, pelvic lymphadenomy.

Макроскопически опухоль располагалась в области дна, размерами 0,8×1,1 см.Macroscopically, the tumor was located in the bottom, with dimensions of 0.8 × 1.1 cm.

Послеоперационное патогистологическое исследование выявило наличие G2 эндометриоидной аденокарциномы с инвазией менее 50% толщины стенки матки; лимфатические узлы интактны. Ядерный индекс в опухолевых железах составил более 0,7; индекс пролиферации Ki-67 составил 65%, а экспрессия топоизомеразы 2 альфа 70%, коэффициент соотношения топоизомераза 2 альфа / Ki-67 составил 1,07 - более 0,8 референтного значения.Postoperative histopathological examination revealed the presence of G2 endometrioid adenocarcinoma with an invasion of less than 50% of the thickness of the uterine wall; the lymph nodes are intact. The nuclear index in the tumor glands was more than 0.7; the Ki-67 proliferation index was 65%, and topoisomerase 2 alpha expression was 70%, the topoisomerase 2 alpha / Ki-67 ratio was 1.07 - more than 0.8 of the reference value.

Несмотря на небольшие размеры первичной опухоли, инвазию в миометрий менее

Figure 00000004
толщины стенки матки, отсутствия метастатического поражения тазовых лимфоузлов, что соответствовало T1N0M0 распространенности рака эндометрия, приняв во внимание агрессивный вариант G2 эндометриоидной аденокарциномы - больной проведена превентивная адъювантная лучевая терапия по стандартной методике.Despite the small size of the primary tumor, the invasion of the myometrium is less
Figure 00000004
uterine wall thickness, lack of metastatic lesion of the pelvic lymph nodes, which corresponded to T1N0M0 prevalence of endometrial cancer, taking into account the aggressive G2 variant of endometrioid adenocarcinoma - the patient underwent preventive adjuvant radiation therapy according to standard methods.

Больная наблюдается 34 месяца без признаков рецидивов и метастазов.The patient is observed for 34 months without signs of relapse and metastases.

Подобным способом был уточнен прижизненный диагноз 40 больным раком тела матки T1N0M0.In a similar way, a lifetime diagnosis of 40 patients with cancer of the uterine body T1N0M0 was clarified.

Разработанный способ определения агрессивного поведения умерееннодифференцированных эндометриоидных карцином тела матки T1N0M0 при размерах первичной опухоли в пределах 1 см является промышленно применимым. С помощью этих прогностических факторов можно прогнозировать течение заболевания и планировать лечебные мероприятия.The developed method for determining the aggressive behavior of moderately differentiated endometrioid carcinomas of the uterine body T1N0M0 with the size of the primary tumor within 1 cm is industrially applicable. Using these prognostic factors, you can predict the course of the disease and plan treatment measures.

Claims (1)

Способ прогнозирования течения умереннодифференцированных эндометриоидных карцином тела матки T1N0M0, отличающийся тем, что при размерах первичной опухоли в пределах 1 см определяют клетки опухоли матки, экспрессирующие Ki-67, топоизомеразу 2 альфа, рассчитывают коэффициент соотношения топоизомераза 2 альфа/Ki-67 и при значении коэффициента менее или равно 0,8 прогнозируют благоприятный исход без проведения адъювантной терапии, а при значении коэффициента более 0,8 прогнозируют неблагоприятное течение заболевания и рекомендуют проведение адъювантной терапии.A method for predicting the course of moderately differentiated endometrioid carcinomas of the uterine body T1N0M0, characterized in that when the size of the primary tumor is within 1 cm, uterine tumor cells expressing Ki-67, topoisomerase 2 alpha are determined, the ratio of topoisomerase 2 alpha / Ki-67 is calculated and the coefficient value is less than or equal to 0.8 predict a favorable outcome without adjuvant therapy, and with a coefficient value of more than 0.8 predict an unfavorable course of the disease and recommend vantnoy therapy.
RU2015156528A 2015-12-28 2015-12-28 METHOD FOR PREDICTION OF MODERATELY DIFFERENTIATED ENDOMETRIOID UTERINE BODY T1N0M0 CARCINOMA COURSE IN CASE OF PRIMARY TUMOUR SIZE WITHIN 1 cm RU2619214C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015156528A RU2619214C1 (en) 2015-12-28 2015-12-28 METHOD FOR PREDICTION OF MODERATELY DIFFERENTIATED ENDOMETRIOID UTERINE BODY T1N0M0 CARCINOMA COURSE IN CASE OF PRIMARY TUMOUR SIZE WITHIN 1 cm

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015156528A RU2619214C1 (en) 2015-12-28 2015-12-28 METHOD FOR PREDICTION OF MODERATELY DIFFERENTIATED ENDOMETRIOID UTERINE BODY T1N0M0 CARCINOMA COURSE IN CASE OF PRIMARY TUMOUR SIZE WITHIN 1 cm

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2619214C1 true RU2619214C1 (en) 2017-05-12

Family

ID=58716068

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015156528A RU2619214C1 (en) 2015-12-28 2015-12-28 METHOD FOR PREDICTION OF MODERATELY DIFFERENTIATED ENDOMETRIOID UTERINE BODY T1N0M0 CARCINOMA COURSE IN CASE OF PRIMARY TUMOUR SIZE WITHIN 1 cm

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2619214C1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007022214A2 (en) * 2005-08-16 2007-02-22 Genentech, Inc. Apoptosis sensivity to ap02l/trail by testing for galnac-t14 expression in cells/tissues
RU2299690C1 (en) * 2006-02-08 2007-05-27 ФГУ Центральный научно-исследовательский рентгенорадиологический институт Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (ФГУ ЦНИРРИ) Method for predicting survival rate in patients with endometrioid cancer of uterine body
RU2504326C1 (en) * 2012-12-13 2014-01-20 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Челябинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России) Method of predicting unfavourable course of locally spread forms of human papilloma virus-associated cervical cancer

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007022214A2 (en) * 2005-08-16 2007-02-22 Genentech, Inc. Apoptosis sensivity to ap02l/trail by testing for galnac-t14 expression in cells/tissues
RU2299690C1 (en) * 2006-02-08 2007-05-27 ФГУ Центральный научно-исследовательский рентгенорадиологический институт Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (ФГУ ЦНИРРИ) Method for predicting survival rate in patients with endometrioid cancer of uterine body
RU2504326C1 (en) * 2012-12-13 2014-01-20 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Челябинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России) Method of predicting unfavourable course of locally spread forms of human papilloma virus-associated cervical cancer

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
БОЖЕНКО В.К. Профиль экспрессии генов как фактор прогноза при пролиферативных заболеваниях органов репродуктивной системы//Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии Минздрава России, 2012, Т2, N12 он лайн, найдено в Интернет на (http://cyberleninka.ru/article/n/profil-ekspressii-genov-kak-faktor-prognoza-pri-proliferativnyh-zabolevaniyah-organov-reproduktivnoy-sistemy) 12.12.2016. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kitson et al. Ki-67 in endometrial cancer: scoring optimization and prognostic relevance for window studies
Chen et al. Clinicopathological significance of overexpression of TSPAN1, Ki67 and CD34 in gastric carcinoma
Huang et al. Progress in the study of lymph node metastasis in early-stage cervical cancer
Monteiro et al. EMMPRIN expression in oral squamous cell carcinomas: correlation with tumor proliferation and patient survival
AU2015344858B2 (en) Biomarkers for disease progression in melanoma
Xia et al. Expression of AEG-1 and microvessel density correlates with metastasis and prognosis of oral squamous cell carcinoma
Yin et al. The levels of Ki-67 positive are positively associated with lymph node metastasis in invasive ductal breast cancer
Xu et al. Significance of TFF3 protein and Her-2/neu status in patients with gastric adenocarcinoma
Wu et al. Frequent and increased expression of human METCAM/MUC18 in cancer tissues and metastatic lesions is associated with the clinical progression of human ovarian carcinoma
Li et al. Reduced E-cadherin expression is associated with lymph node metastases in laryngeal squamous cell carcinoma
CN102216470A (en) Methods for diagnosing cancer and determining the overall survival and disease-free survival of cancer patients
Salzano et al. The prognostic role of the pre-treatment neutrophil to lymphocyte ratio (NLR) and tumor depth of invasion (DOI) in early-stage squamous cell carcinomas of the oral tongue
Wasuthit et al. Predictive factors of axillary lymph node metastasis in breast cancer
JP6417602B2 (en) How to determine the prognosis of colorectal cancer
Meng et al. Expression of human epidermal growth factor receptor-2 in resected rectal cancer
RU2299690C1 (en) Method for predicting survival rate in patients with endometrioid cancer of uterine body
RU2619214C1 (en) METHOD FOR PREDICTION OF MODERATELY DIFFERENTIATED ENDOMETRIOID UTERINE BODY T1N0M0 CARCINOMA COURSE IN CASE OF PRIMARY TUMOUR SIZE WITHIN 1 cm
Madeira et al. Comparison of immunohistochemical analysis with estrogen receptor SP1 and 1D5 monoclonal antibodies in breast cancer
Cho et al. Poor prognostic factors in surgically resected stage I non-small cell lung cancer: histopathologic and immunohistochemical analysis
WO2013132001A1 (en) Prognostic biomarkers for survival after treatment of a cancer disease with radiotherapy and/or chemotherapy
RU2762493C1 (en) Method for preoperative prediction of the risk of recurrence in patients with stage t1 endometrial cancer
WO2019077080A1 (en) Evaluation of the risk of metastatic relapse in breast cancer patients
US11360094B2 (en) Method for measuring MRE11 in tissues to predict cystectomy or bladder sparing surgery plus chemoradiation therapy
RU2708786C1 (en) Method for predicting the outcome of squamous cell carcinoma of the tongue and oropharynx
EP3580570B1 (en) Method for determining breast cancer risk

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20171229