RU2612020C1 - Способ оценки угрозы для формирования органов плода при увеличении в плаценте содержания 17-гидроксипрогестерона на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции - Google Patents
Способ оценки угрозы для формирования органов плода при увеличении в плаценте содержания 17-гидроксипрогестерона на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2612020C1 RU2612020C1 RU2015152985A RU2015152985A RU2612020C1 RU 2612020 C1 RU2612020 C1 RU 2612020C1 RU 2015152985 A RU2015152985 A RU 2015152985A RU 2015152985 A RU2015152985 A RU 2015152985A RU 2612020 C1 RU2612020 C1 RU 2612020C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- case
- formation
- threat
- gestation
- organs
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы для формирования органов плода при повышении содержания 17-гидроксипрогестерона при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации. Для этого гистохимическим методом определяют активность 17-гидроксипрогестерондегидрогеназы на срезах ткани плаценты и измеряют титр антител к цитомегаловирусу в периферической крови, и при росте титра антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600 и повышении активности реакции на 17-гидроксипрогестерондегидрогеназу в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты до 42,6±3,08 пикселей/мкм2 создается угроза для формирования органов плода в период гестации. Способ позволяет оценить угрозу для формирования органов плода при простоте его исполнения. 2 ил.
Description
1. Цель изобретения - оценить характер влияния цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации на содержание 17-гидроксипрогестерона в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты, приводящей к нарушению формирования органов плода в период гестации.
2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке метода, позволяющего оценить влияние цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации на формирование органов плода на фоне увеличения содержания 17-гидроксипрогестерона в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре беременности.
3. Раскрытие изобретения
Во время гестации глюкокортикоиды продуцируются из холестерина через образование ряда предшественников, в том числе и 17-гидроксипрогестерона. Поэтому изменение количества 17-гидроксипрогестерона приведет к нарушению формирования глюкокортикоидных гормонов в фетоплацентарной системе. В третьем триместре беременности глюкокортикоиды необходимы для развития надпочечников плода, созревания легких. Они индуцируют дифференцировку альвеолярных клеток, синтез сурфактанта и его выделение в альвеолы. Кортизол индуцирует созревание ферментных систем печени плода, включая ферменты глюконеогенеза и аминотрансферазы. Глюкокортикоиды стимулируют созревание β-клеток поджелудочной железы, созревание эпителия тонкой кишки и активность щелочной фосфатазы плода [8]. Увеличение активности глюкокортикоидных гормонов создает угрозу для формирования органов плода в период гестации.
4. Новая техническая задача
Определить уровень содержания 17-гидроксипрогестерона в синцитиотрофобласте ворсинок при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации с целью оценки угрозы для формирования органов плода во время беременности.
5. В доступной литературе имеются упоминания об исследовании 17-гидроксипрогестерона иммунологическими методами [4, 5, 9], а также методами флуорометрии [3, 7] и высокоэффективной жидкостной хроматографии [7, 10]. При беременности содержание 17-гидроксипрогестерона анализируется в плазме периферической крови для изучения гиперандрогении методом ИФА [2], в гомогенате плаценты метаболизм стероида изучается с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрофотометрии [6, 11]. Недостатком вышеупомянутых методов является необходимость дорогостоящей регистрирующей аппаратуры и реактивов. Биохимические и иммунологические методы не дают представления о месте локализации вещества.
В отличие от вышеприведенных прототипов в данной работе имеются существенные отличия: 1. Анализ содержания 17-гидроксипрогестерона проводится с помощью гистохимической реакции, в качестве субстрата для которой используется 17-гидроксипрогестерон. 2. Изменения содержания 17-гидроксипрогестерона происходят под влиянием обострения цитомегаловирусной инфекции во время беременности. Метод прост в исполнении, не требует дорогостоящих реактивов, обладает хорошей разрешающей способностью и может быть рекомендован в проведении научно-исследовательских работ и лабораторной диагностики.
6. Осуществление изобретения
7.1. Обследованы 36 беременных женщин 18-25 лет с обострением хронической цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации, контрольную группу составили 30 беременных женщин с хронической цитомегаловирусной инфекцией в латентной стадии. У беременных женщин симптоматически цитомегаловирусная инфекция проявлялась в виде острого респираторного заболевания, сопровождающегося ринофарингитом. Клинический диагноз (обострение хронической цитомегаловирусной инфекции) устанавливается по результатам комплексного исследования периферической крови на наличие ДНК цитомегаловируса (ЦМВ), JgM или увеличение титра антител JgG в парных сыворотках (в 4 раза и более) в динамике через 10 суток, а также индекса авидности (более 65%). Исследования проводят с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в РФ, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.
7.2. Верификацию ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществляют методами ИФА на спектрофотометре «Stat Fax-2100» с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), ДНК ЦМВ выявляют методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).
7.3. Активность 17-гидроксипрогестерондегидрогеназы гистохимически определяют на криостатных срезах свежезамороженной нефиксированной ткани плаценты роженицы следующим методом. Метод основан на восстановлении соли тетразолия в формазан электронами, акцептируемыми от субстрата через кофермент НАДФ [1]. Субстратом служит 2 мМ раствор 17-гидроксипрогестерона «Sigma» (США). Для его приготовления 6 мг 17α-гидроксипрогестерона растворяют в 10 мл N,N-диметилформамида. Инкубационный раствор готовится на основе 0,1М фосфатного буфера рН 7,2-7,4 с добавлением нитросинего тетразолия фирмы «ICN Biomedicals)) (США) в конечной концентрации 5 ммоль, НАДФ+ фирмы «Applichem» (Германия) - 1 ммоль.
Состав инкубационной среды:
0,1 М фосфатный буфер рН 7,2-7,4 - 1 мл;
нитросиний тетразолий - 1 мг;
НАДФ+ - 1 мг;
2 мМ раствор 17-гидроксипрогестерона - 0,1 мл.
7.4. В 1 мл инкубационного раствора помещают свежеприготовленные срезы ткани. Инкубацию проводят при 37°С в течение 30 минут. По окончании инкубации срезы промывают дистиллированной водой, фиксируют в 10%-м нейтральном формалине при комнатной температуре, вновь промывают дистиллированной водой, подсушивают и заключают в глицерин-желатин. Контрольные срезы инкубировали в среде, содержащей вместо раствора 17-гидроксипрогестерона адекватное количество фосфатного буфера. Полученные гистологические препараты изучают цитофотометрическим компьютерным методом с помощью программы Scion (США) на цифровом микроскопе MEIJI (Япония).
7.5. Статистический анализ и обработка данных проводится с использованием пакета прикладных программ «Statistica 6.0». Характеристика вариационных рядов: средняя арифметическая (М), стандартная ошибка (m), коэффициент вариации 95%, доверительный интервал для средних значении М±m, где t определялось по таблице граничных значений критерия Стьюдента при доверительном уровне 95% и числе степеней свободы F=n1+n2-2. Для определения достоверности различий используется непарный параметрический критерий Стьюдента. Принимаются во внимание р<0,05; 0,01; 0,001. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений - непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни.
7. Полученные данные
В процессе исследования получены следующие результаты. На гистохимических препаратах плаценты рожениц, перенесших обострение хронической цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации, при регистрации роста титра антител класса G к цитомегаловирусу до 1:1600 отмечается увеличение активности реакции, отражающей содержание 17-гидроксипрогестерона до 42,б±3,08 пикселей/мкм2 (фигура 1) (контроль - 29,2±2,11 пикселей/мкм2 (фигура 2)).
Таким образом, при нарастании титра антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600 и повышении содержания 17-гидроксипрогестерона в плаценте до 42,б±3,08 пикселей/мкм2, создается угроза для формирования органов плода в период гестации.
Литература
1. Лойда З., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы: пер. с англ. М.: Мир, 1982. 272 с.
2. Суплотова Л.А., Храмова Е.Б., Старкова О.Б., Суплотов С.Н., Южакова Н.Ю., Фомина С.В. Референтные значения 17-гидроксипрогестерона и дегидроэпиандростерон-сульфата в период гестации // Проблемы эндокринологии. 2007. Т. 53, №4. С.19-22.
3. Boudi A., Giton F., Galons Н., Eulry В., Villette J.M., Soliman H., Boudou P., Fiet J. Development of a plasma 17-hydroxyprogesterone time resolved-fluorescence immunoassay involving a new biotinylated tracer // Steroids. 2000. Vol. 65, №2. P. 103-108.
4. Castracane V.D., Gimpel T. Comparison of three methods for 17-hydroxyprogesterone // J. Clin. Lab. Anal. 1997. Vol. 11, №4. P. 179-185.
5. Erhardt E., Solyom J., Homoki J., Juricskay S., Soltesz G. Correlation of blood-spot 17-hydroxyprogesterone daily profiles and urinary steroid profiles in congenital adrenal hyperplasia // J. Pediatr. Endocrinol. Metab. 2000. Vol. 13, №2. P. 205- 210.
6. Fokina V.M., Zharikova O.L., Hankins G.D., Ahmed M.S., Nanovskaya T.N. Metabolism of 17-alpha-hydroxyprogesterone caproate by human placental mitochondria // Reprod. Sci. 2012. Vol. 19, №3. P. 290-297.
7. Katayama M., Nakane R., Matsuda Y., Kaneko S., Hara I., Sato H. Determination of progesterone and 17-hydroxyprogesterone by high performance liquid chromatography after pre-column derivatization with 4,4-difluoro-5,7-dimethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene-3-propionohydrazide // Analyst. 1998. Vol. 123, №11. P. 2339-2342.
8. Korgun E.T., Ozmen A., Unek G., Mendilcioglu I. The effects of glucocorticoids onfetal and placental development. In: Glucocorticoids / Eds. X. Qian. Rijeka, Croatia: InTech, 2012. P. 305-336.
9. Nahoul K. Plasma 17-hydroxyprogesterone determination with two commercial immunoassays // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 1994. Vol. 50, №3-4. P. 197-203.
10. Saisho S., Shimozawa K., Yata J. Changes of several adrenal -4-steroids measured by HPLC-UV spectrometry in neonatal patients with congenital adrenal hyperplasia due to 21-hydroxylase deficiency // Horm. Res. 1990. Vol. 33, №1. P. 27-34.
11. Yan R., Nanovskaya T.N., Zharikova O.L., Mattison D.R., Hankins G.D., Ahmed M.S. Metabolism of 17alpha-hydroxyprogesterone caproate by hepatic and placental microsomes of human and baboons // Biochem. Pharmacol. 2008. Vol. 75, №9. P. 1848-1857.
Claims (1)
- Способ оценки угрозы для формирования органов плода при увеличении в плаценте содержания 17-гидроксипрогестерона на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции, включающий определение в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, выполнение гистохимической реакции на 17-гидроксипрогестерондегидрогеназу в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты, и при титре антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600, увеличении активности реакции на 17-гидроксипрогестерондегидрогеназу до 42,6±3,08 пикселей/мкм2 создается угроза для формирования органов плода в период гестации.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015152985A RU2612020C1 (ru) | 2015-12-09 | 2015-12-09 | Способ оценки угрозы для формирования органов плода при увеличении в плаценте содержания 17-гидроксипрогестерона на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015152985A RU2612020C1 (ru) | 2015-12-09 | 2015-12-09 | Способ оценки угрозы для формирования органов плода при увеличении в плаценте содержания 17-гидроксипрогестерона на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2612020C1 true RU2612020C1 (ru) | 2017-03-01 |
Family
ID=58459180
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015152985A RU2612020C1 (ru) | 2015-12-09 | 2015-12-09 | Способ оценки угрозы для формирования органов плода при увеличении в плаценте содержания 17-гидроксипрогестерона на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2612020C1 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2306564C1 (ru) * | 2006-05-10 | 2007-09-20 | ГОУ ВПО "Красноярская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ диагностики хронической фетоплацентарной недостаточности |
| US20080096795A1 (en) * | 1997-05-13 | 2008-04-24 | The Regents Of The University Of California | Novel Antiangiogenic Peptide Agents and Their Therapeutic and Diagnostic Use |
-
2015
- 2015-12-09 RU RU2015152985A patent/RU2612020C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20080096795A1 (en) * | 1997-05-13 | 2008-04-24 | The Regents Of The University Of California | Novel Antiangiogenic Peptide Agents and Their Therapeutic and Diagnostic Use |
| RU2306564C1 (ru) * | 2006-05-10 | 2007-09-20 | ГОУ ВПО "Красноярская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ диагностики хронической фетоплацентарной недостаточности |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЛУЦЕНКО М.Т. и др. "Морфофункциональная характеристика фетоплацентарного комплекса у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции, и патоморфологические изменения в органах плода"// Архив патологии, 2010, том 72, n.4,с.47-49. КAMILOVA N et al. Diagnostic indices of fetoplacental complex in pregnancy assessment of women with genital infections// Georgian Med News. 2008 Nov;(164):23-7. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hertig et al. | Steroid profiling in preeclamptic women: evidence for aromatase deficiency | |
| Travers et al. | Multiplexed steroid profiling of gluco-and mineralocorticoids pathways using a liquid chromatography tandem mass spectrometry method | |
| Dos Santos et al. | Adiponectin and leptin systems in human endometrium during window of implantation | |
| Kralisch et al. | Regulation of the novel adipokines/hepatokines fetuin A and fetuin B in gestational diabetes mellitus | |
| Gomez-Gomez et al. | Determination of the steroid profile in alternative matrices by liquid chromatography tandem mass spectrometry | |
| Smy et al. | Measuring estrogens in women, men, and children: Recent advances 2012–2017 | |
| Amaral et al. | Quantitative analysis of five sterols in amniotic fluid by GC–MS: Application to the diagnosis of cholesterol biosynthesis defects | |
| Lytvynenko et al. | Тriple-negative transformation of the endometrium, cervix and mammary gland on the background of immunodeficiency | |
| Deng et al. | The association of serum total bile acid with new-onset hypertension during pregnancy | |
| Chen et al. | The urinary bile acid profiling analysis of asymptomatic hypercholanemia of pregnancy: A pseudo-targeted metabolomics study | |
| Mikucka-Niczyporuk et al. | Role of sphingolipids in the pathogenesis of intrahepatic cholestasis | |
| RU2612020C1 (ru) | Способ оценки угрозы для формирования органов плода при увеличении в плаценте содержания 17-гидроксипрогестерона на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции | |
| Schrey et al. | The adipokine preadipocyte factor-1 is downregulated in preeclampsia and expressed in placenta | |
| Babinska et al. | Adipokine and cytokine levels in non-functioning adrenal incidentalomas (NFAI) | |
| Peña-Cano et al. | Omentin-1 and its relationship with inflammatory factors in maternal plasma and visceral adipose tissue of women with gestational diabetes mellitus | |
| Schuler | Steroid sulfates in domestic mammals and laboratory rodents | |
| Luo et al. | A pseudo-targeted metabolomics study based on serum bile acids profiling for the differential diagnosis of benign and malignant breast lesions | |
| Schöneshöfer et al. | Urinary excretion rates of 15 free steroids: potential utility in differential diagnosis of Cushing's syndrome. | |
| Han et al. | Accurate prediction of biliary atresia with an integrated model using MMP-7 levels and bile acids | |
| Yang et al. | Quantitative analysis of progesterone using isotope dilution-matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry as a reference procedure for radioimmunoassay | |
| Yin et al. | Reference intervals for LC-MS/MS measurements of plasma renin activity, aldosterone, angiotensin II, and 24-hour urinary aldosterone in northern Chinese han population | |
| EP0866969B1 (en) | Method of cancer detection | |
| RU2612024C1 (ru) | Способ оценки индуцирующего действия обострения цитомегаловирусной инфекции на содержание 7-дегидрохолестерина в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты на третьем триместре гестации | |
| RU2592243C1 (ru) | Способ оценки содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации | |
| Zhang et al. | Establishment and validation of a sensitive LC-MS/MS method for quantification of urinary estrogens in women with gestational diabetes mellitus |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20171210 |