RU2574204C1 - Способ определения эффективной терапевтической дозы противоэпилептического препарата и риска развития побочных эффектов - Google Patents
Способ определения эффективной терапевтической дозы противоэпилептического препарата и риска развития побочных эффектов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2574204C1 RU2574204C1 RU2014143718/10A RU2014143718A RU2574204C1 RU 2574204 C1 RU2574204 C1 RU 2574204C1 RU 2014143718/10 A RU2014143718/10 A RU 2014143718/10A RU 2014143718 A RU2014143718 A RU 2014143718A RU 2574204 C1 RU2574204 C1 RU 2574204C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- therapeutic dose
- risk
- effective therapeutic
- antiepileptic
- side effects
- Prior art date
Links
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 title claims abstract description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 230000003556 anti-epileptic Effects 0.000 title abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 20
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 claims description 19
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 claims description 19
- 101700044278 FABP2 Proteins 0.000 claims description 5
- 102100008837 FABP2 Human genes 0.000 claims description 5
- 101710009906 lbp-2 Proteins 0.000 claims description 5
- 102100014001 ABCB1 Human genes 0.000 claims description 4
- 108010047230 Member 1 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 claims description 4
- 102100010123 SLC22A12 Human genes 0.000 claims description 4
- 101710019755 SLC22A12 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100017887 UGT2B7 Human genes 0.000 claims description 4
- 101710011663 UGT2B7 Proteins 0.000 claims description 4
- 102200025741 PCSK1 S690T Human genes 0.000 claims description 3
- 102200010892 PPARG P12A Human genes 0.000 claims description 3
- 102100000050 SCN1A Human genes 0.000 claims description 3
- 101700001078 SCN1A Proteins 0.000 claims description 3
- 102100019184 SLC2A9 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710015651 SLC2A9 Proteins 0.000 claims description 3
- 101710006302 TDO2 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100009440 TPH2 Human genes 0.000 claims description 3
- 101700052002 TPH2 Proteins 0.000 claims description 3
- 102200043795 ATL1 V253I Human genes 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000003195 sodium channel blocking agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 abstract 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 16
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 description 14
- NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N Depacane Chemical compound CCCC(C(O)=O)CCC NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- KJADKKWYZYXHBB-XBWDGYHZSA-N Topiramic acid Chemical compound C1O[C@@]2(COS(N)(=O)=O)OC(C)(C)O[C@H]2[C@@H]2OC(C)(C)O[C@@H]21 KJADKKWYZYXHBB-XBWDGYHZSA-N 0.000 description 13
- 229960004394 topiramate Drugs 0.000 description 11
- 229960000604 valproic acid Drugs 0.000 description 9
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 7
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 7
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 6
- 206010039911 Seizure Diseases 0.000 description 6
- 230000002974 pharmacogenomic Effects 0.000 description 6
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 5
- FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N Carbamazepine Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2N(C(=O)N)C2=CC=CC=C21 FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 229960000623 carbamazepine Drugs 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 206010022489 Insulin resistance Diseases 0.000 description 4
- PYZRQGJRPPTADH-UHFFFAOYSA-N Lamotrigine Chemical compound NC1=NC(N)=NN=C1C1=CC=CC(Cl)=C1Cl PYZRQGJRPPTADH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 4
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 4
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 4
- 229960001848 lamotrigine Drugs 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 4
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 4
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L MgCl2 Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 206010029148 Nephrolithiasis Diseases 0.000 description 3
- 102200011039 YIPF7 A54T Human genes 0.000 description 3
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 230000002068 genetic Effects 0.000 description 3
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 3
- 230000003285 pharmacodynamic Effects 0.000 description 3
- 238000002205 phenol-chloroform extraction Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 206010015037 Epilepsy Diseases 0.000 description 2
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N Ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010024855 Loss of consciousness Diseases 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 210000003296 Saliva Anatomy 0.000 description 2
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 2
- 208000003443 Unconsciousness Diseases 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 2
- 230000000275 pharmacokinetic Effects 0.000 description 2
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 231100000197 serious side effect Toxicity 0.000 description 2
- 238000005353 urine analysis Methods 0.000 description 2
- 210000004556 Brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000001638 Cerebellum Anatomy 0.000 description 1
- 210000004720 Cerebrum Anatomy 0.000 description 1
- 210000003792 Cranial Nerves Anatomy 0.000 description 1
- LCGTWRLJTMHIQZ-UHFFFAOYSA-N Dibenzazepine Chemical class C1=CC2=CC=CC=C2NC2=CC=CC=C21 LCGTWRLJTMHIQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003414 Extremities Anatomy 0.000 description 1
- 208000002091 Febrile Seizure Diseases 0.000 description 1
- 206010071602 Genetic polymorphism Diseases 0.000 description 1
- 206010018659 Grand mal convulsion Diseases 0.000 description 1
- 206010071081 Idiopathic generalised epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- HPHUVLMMVZITSG-ZCFIWIBFSA-N Levetiracetam Chemical compound CC[C@H](C(N)=O)N1CCCC1=O HPHUVLMMVZITSG-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- 210000003205 Muscles Anatomy 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 description 1
- 208000007697 Partial Epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 206010061334 Partial seizure Diseases 0.000 description 1
- 102100001823 SLC6A4 Human genes 0.000 description 1
- 108060007763 SLC6A4 Proteins 0.000 description 1
- 208000005392 Spasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002435 Tendons Anatomy 0.000 description 1
- 229940035305 Topamax Drugs 0.000 description 1
- 208000005765 Traumatic Brain Injury Diseases 0.000 description 1
- 229940102566 Valproate Drugs 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 1
- 230000001054 cortical Effects 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 201000007186 focal epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 150000002231 fructose derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 201000001993 idiopathic generalized epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 230000002045 lasting Effects 0.000 description 1
- 229960004002 levetiracetam Drugs 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 230000000926 neurological Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 108091007521 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000001256 tonic Effects 0.000 description 1
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N tris acetate Chemical compound CC(O)=O.OCC(N)(CO)CO PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-M valproate Chemical compound CCCC(C([O-])=O)CCC NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения эффективной терапевтической дозы противоэпилептического препарата и риска развития побочных эффектов. Способ включает забор биологического материала, проведение полимеразной цепной реакции по генам-кандидатам, последующий анализ их аллельных вариантов и, путем сопоставления выявленного аллельного полиморфизма с данными о его влиянии на эффективную терапевтическую дозу и возникновении побочных эффектов, расчет эффективной терапевтической дозы противоэпилептического препарата и определение риска развития побочных эффектов. Предложенное изобретение позволяет с высокой точностью определять эффективную терапевтическую дозу и наличие риска развития побочных эффектов. 4 з.п. ф-лы, 5 табл., 2 пр.
Description
Область техники.
Изобретение относится к области молекулярной биологии, клинической генетике и фармакогеномике и может быть использовано в медицине, а именно в неврологии и психиатрии, для подбора лекарственной терапии при лечении эпилепсии и выявления риска развития побочных неблагоприятных эффектов.
Уровень техники.
В настоящее время при подборе противоэпилептической терапии используется комплексный подход, который включает в себя анамнез пациента, данные компьютерной томографии (КТ) или магнитно-резонансной томографии (МРТ), показатели электроэнцефалограммы (ЭЭГ) и результаты биохимических анализов. Однако даже с учетом совокупности данных сведений лишь у небольшого процента пациентов (3-10%) удается добиться контроля над приступами, тогда как до 85% пациентов в России получают противоэпилептическую фармакотерапию [Зеньков Л.Р. Место вальпроатов (Депакин) в фармакотерапии эпилепсии XXI века // Российский Медицинский Журнал т. 17, №11, 2009 г.].
Столь низкий процент ремиссий объясняется, прежде всего, индивидуальной реакцией пациента на препарат. При этом одну из ведущих ролей в формировании ответа на терапию играют генетические факторы. В то же время, в соответствии с действующей на сегодня практикой, подбор препарата осуществляется методом проб и ошибок без учета генетического профиля пациента. При данном сценарии поиск наиболее эффективной терапии для конкретного пациента может занимать несколько месяцев, при этом определенный процент пациентов не будет получать адекватную терапию или будет испытывать серьезные побочные эффекты.
Наиболее близким к заявляемому способу является способ диагностики индивидуальной чувствительности пациентов к противоэпилептическим препаратам (WO 2009/006793 A1, 15.01.2009) путем оценки аллельных вариантов гена SCN2, ассоциированных с резистентностью к противоэпилептической терапии, и суждения об ответе на противоэпилептическую терапию по наличию полиморфизма.
Однако выбор лишь одного гена (SCN2) и определение риска развития резистентности пациента ко всем противоэпилептическим препаратам не учитывает влияния полиморфизмов других генов, продукты которых связаны с фармакодинамическими характеристиками противоэпилептического препарата (ПЭП). Кроме того, для клинициста более важной является информация о диапазоне средней эффективной дозы для конкретного препарата, а также профиль переносимости препарата, что не учитывается при реализации этого способа. Следует также отметить, что в прототипе используется дорогостоящий метод микроэррей, что делает данный способ малодоступным для практического применения.
Раскрытие изобретения.
Задача настоящего изобретения заключалась в разработке способа диагностики индивидуальной чувствительности пациентов к противоэпилептическим препаратам, который обеспечивает выбор оптимальной дозы препарата, выявление риска развития побочных неблагоприятных эффектов для данного конкретного пациента.
При решении указанной задачи достигаются следующие технические результаты:
- уменьшение сроков проведения диагностики и подбора противоэпилептических препаратов;
- определение эффективной терапевтической дозы противоэпилептического препарата и риска развития побочных эффектов исходя из генотипа конкретного пациента и тендерного фактора;
- повышение процента пациентов, получающих адекватную противоэпилептическую терапию;
- снижение количества пациентов, испытывающих серьезные побочные эффекты при назначении противоэпилептических препаратов;
- выбор наиболее эффективного противоэпилептического препарата, за счет учета влияния полиморфизмов нескольких генов, продукты которых связаны с фармакодинамическими и (или) фармакокинетическими характеристиками противоэпилептического препарата;
- определение диапазона средней эффективной дозы конкретного противоэпилептического препарата;
- снижение стоимости диагностики за счет исключения дорогостоящих дополнительных исследований;
Для достижения указанных технических результатов у пациента проводят забор любого биологического материала, например крови или слюны, выделяют из этого материала ДНК и проводят полимеразную цепную реакцию (ПЦР) по определенным генам кандидатам (Таблица 1). Гены-кандидаты выбирают на основании имеющихся данных о зависимости ответа на терапию от аллельных вариантов генов, определяющих фармакокинетические и фармакодинамические характеристики противоэпилептического препарата. Затем проводят рестрикцию фрагментов выбранных генов кандидатов на выявление аллельных вариантов, присущих конкретному пациенту, и сопоставляют установленный аллельный вариант с эмпирически полученными данными об эффективной терапевтической дозе препарата и предрасположенностью пациента к развитию побочных эффектов и выносят суждение об оптимальной терапии.
В заявляемом способе, в качестве генов кандидатов (ДНК-маркеров), ассоциированных с расчетом эффективной терапевтической дозы ПЭП и риском прогнозирования побочных эффектов, предлагается использовать:
1) для противоэпилептических препаратов, относящихся к группе жирных кислот, на примере вальпроевой кислоты - ДНК-маркеры PPARy (Pro12Ala), PCKS1 (Ser690Thr) для выявления рисков развития побочных эффектов и FABP2 (Ala54Thr) для подбора и расчета адекватной терапевтической дозы;
2) для трициклических соединений с карбомоильной группой (производных иминостильбена), например карбамазепина - ДНК-маркер MDR1 (С3435Т) для подбора и расчета адекватной терапевтической концентрации;
3) для представителей блокаторов натриевых каналов, например ламотриджина - ДНК-маркер SCN1A (SCN1IVS5N (5G>A)) для подбора и расчета адекватной терапевтической дозы;
4) для противоэпилептических препаратов, относящихся к группе сахаров, например топирамата (производного фруктозы) - ДНК-маркеры Glut9 (Val253Ile), URAT1 (-788 Т>А), SERT (5HTTLPR), ТРН2 (rsl0748185) для выявления рисков развития побочных эффектов и UGT2B7 (С802Т) для подбора и расчета адекватной терапевтической дозы.
При разработке данных ДНК-маркеров было обследовано 400 пациентов старше 18 лет, принимавших противоэпилептические препараты такие как, например, топирамат, карбамазепин, вальпроевую кислоту или ламотриджин в режиме монотерапии с эффективным контролем над приступами (урежение приступов не менее чем на 50%). Все клинические эффекты, установленные в результате фармакогенетического тестирования и содержащиеся в описании способа, выдерживали уровень значимости p<0.05.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
У пациента производят забор биологического материала: 1 мл крови или 1 мл слюны и выделяют из него ДНК фенол-хлороформным методом (Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1989). Используя специфические праймеры к полиморфным локусам (Таблица 1) проводят полимеразную цепную реакцию (ПЦР) на термоциклерах, например, известных как Techne (UK), Perkin-Elmer Cetus (USA) или МС-2 "ДНК-технология" (Москва). Аллельные варианты определяют, например, путем рестрикционного анализа с последующим электрофорезом на горизонтальных пластинах 1-4% агарозного геля, приготовленного на буфере для электрофореза (Трис-ацетатный буфер ТАЕ) с добавлением бромистого этидия. Аллельные варианты определяют по критерию наличия или отсутствия сайта рестрикции и соответствующего фрагмента на электрофорезе с определенным молекулярным весом. Результаты визуализируют в ультрафиолетовом свете на трансиллюминаторе или с помощью системы гель-документирования, например, известной как "Vilber Laurmat". Аллельный вариант каждого гена определяет индивидуальную чувствительность пациента к противоэпилептической терапии. Таким образом, путем сопоставления выявленного аллельного варианта исследуемого гена с эмпирически полученными данными об эффективной терапевтической дозе, соответствующей данному аллельному варианту, выносится суждение о средней расчетной эффективной дозе противоэпилептического препарата, необходимой для конкретного пациента. В отношении определения риска развития побочных эффектов также следует руководствоваться сопоставлением выявленного аллельного варианта с эмпирическими данными о зависимости риска развития побочных эффектов от определенного аллельного варианта.
i) При приеме вальпроевой кислоты генотипирование осуществляется по генам PPARy, PCKS1 для выявления наличия риска развития побочных эффектов и по гену FABP2 для подбора и расчета адекватной терапевтической дозы вальпроевой кислоты:
- При выявлении генетического полиморфизма Ala54Thr гена FAPB2 (генотипы АА и AG (А+)) экспериментально установлено, что эффективными были средние дозы в 910 мг/сут, тогда как при наличии генотипа GG средние эффективные дозы составили 1131 мг/сут. Это свидетельствует о том, что для достижения терапевтического эффекта пациентам с GG генотипом требуется более высокая доза вальпроевой кислоты.
- Наличие гомозиготного аллельного варианта (Pro12Pro) по гену PPARy у женщин (но не у мужчин) свидетельствовало о наличии неблагоприятных побочных эффектов, в частности предрасположенности к набору веса и развитию инсулинорезистентности на фоне приема вальпроевой кислоты. Наличие остальных аллельных вариантов (Pro12Ala и Ala12Ala) не ассоциировано с набором веса и развитием инсулинорезистентности.
- Наличие гомозиготного аллельного варианта (Ser690Ser) по гену PCKS1 у женщин (но не у мужчин) свидетельствовало о предрасположенности к набору веса и развитию инсулинорезистентности на фоне приема вальпроевой кислоты. Наличие остальных аллельных вариантов (Ser690Thr и Thr690Thr) не ассоциировано с набором веса и развитием инсулинорезистентности.
ii) При приеме карбамазепина генотипирование проводится по гену MDR1 для подбора и расчета адекватной терапевтической концентрации карбамазепина:
- Экспериментально установлено, что у носителей ТТ генотипа по гену маркеру MDR1 (C3435T) средняя максимальная концентрация карбамазепина в крови составила 9,6±1 мкг/мл, а для СС - 5,6±0,7 мкг/мл. Таким образом, для достижения клинически значимого эффекта, пациентам с ТТ генотипом необходима в 1,8 раз более высокая концентрация препарата, чем носителям СС генотипа.
iii) При приеме ламотриджина генотипирование проводят по гену SCN1A для подбора и расчета адекватной терапевтической дозы препарата:
- Для достижения клинически значимого эффекта требуется повышение дозы ламотриджина в ряду носителей GG→GA→AA генотипов по полиморфному маркеру SCN1IVS5N (5G>A). Для носителей генотипа GG средняя эффективная доза составила 50-100 мг/сут. Для носителей GA генотипа - 50-200 мг/сут, для носителей АА генотипа - 50-300 мг/сут.
iv) При назначении топирамата генотипирование осуществляется по генам Glut9, URAT1, SERT, ТРН2 для выявления рисков развития нежелательных побочных эффектов и по гену UGT2B7 для подбора и расчета адекватной терапевтической дозы топирамата.
- Ассоциация неблагоприятных побочных эффектов (ПЭ) при терапии топираматом с полиморфизмами соответствующих генов представлена в Таблицах 2-5.
v) Для расчета средней эффективной дозы топирамата проводят генотипирование по гену маркеру UGT2B7 (С802Т):
- Экспериментально установленная эффективная средняя доза топирамата для пациентов группы (СС и СТ) составила 192 мг/сут, что в 1,8 раза выше, чем в группе ТТ (105 мг/сут). Таким образом, пациентам с ТТ генотипом требуется меньшая эффективная доза топирамата, чем для носителей СС и СТ генотипов.
Осуществление изобретения.
Сущность способа поясняется примерами.
Пример 1.
Больная Т., 19 лет, масса тела 68 кг. Диагноз: идиопатическая генерализованная эпилепсия с генерализованными судорожными приступами.
Жалобы: судорожные приступы с потерей сознания.
Анамнез заболевания. Больна с 17 лет, когда впервые появились генерализованные тонико-клонические приступы с выключением сознания. Приступы возникали ближе к вечеру. Частота приступов составляла 1-2 в месяц.
Анамнез жизни. Ребенок от первой физиологической беременности, роды самостоятельные, в срок. При рождении масса тела 3450 г, рост 47 см. Раннее развитие по возрасту. ЧМТ, нейроинфекции, фебрильные судороги отрицает. Семейный анамнез не отягощен.
Неврологический статус. Черепные нервы: в пределах нормы. Двигательная сфера: активные и пассивные движения конечностей в полном объеме, парезов нет. Мышечный тонус не изменен. Сухожильные и периостальные рефлексы с рук и ног живые, D=S. Координаторная сфера: координация не нарушена, в позе Ромберга устойчива. Чувствительная сфера: чувствительных нарушений нет. Интеллект сохранен.
Дополнительные методы исследования. МРТ: Очаговой патологии в веществе мозга больших полушарий, ствола и мозжечка не выявлено. ЭЭГ: На фоновой ЭЭГ определяются легкие общемозговые изменения в виде дезорганизации корковой ритмики с дисфункцией срединно-стволовых структур.
Лечение. Стартово больной был назначен депакин (активное вещество - вальпроевая кислота) 500 мг в сутки, без эффекта.
Для определения эффективной дозы вальпроевой кислоты у пациентки был произведен забор 1 мл крови с последующим выделением ДНК фенол-хлороформным методом [Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1989]. Затем проводили ПНР на амплификаторе «Терцик» («ДНК-технология», Россия) с использованием праймеров к гену FABP2 на выявление полиморфизма Ala54Thr: прямой - СТАCCGAGTТТТСТТСССАСС и обратный - ААТТАААССАТСCAATGAААТAGAGC. Реакционная смесь для амплификации объемом 25 мкл содержала 0.67 M Трис-HCl, pH 8.8; 16.7 мМ (NH4)2SO4; 0.01% твин-20; 0.2 мМ каждого dNTP; 0.1 мкг геномной ДНК; 20 пмолей каждого праймера; 2 ед. Taq полимеразы; MgCl2 в концентрации 1,5 мМ. Амплификация состояла из предварительной денатурации при 95°C - 4 минуты; 36 циклов, состоящих из денатурации при 94°C - 20 с, отжига праймеров при 62°C - 20 с, синтеза продукта при 72°C - 10 с; затем следовала стадия заключительного синтеза при 72°C - 5 мин. Получившийся фрагмент длиной 375 п.о. расщепляли ферментом BstHH I при температуре 50°. В случае аллеля G (Ala) образовывались фрагменты 200 и 175 п.о. Препараты ДНК разделяли посредством электрофореза в 4% агарозном геле. В качестве стандарта использовали ДНК плазмиды pBR322, расщепленную рестриктазами Mva I. Гели красили бромистым этидием и визуализировали с помощью системы гель-документирования "Vilber Laurmat". В результате детектирования был установлен фрагмент длиной 375 п.о., что свидетельствовало об отсутствии сайта рестрикции и указывало на наличие генотипа АА гена FABP2. Сопоставив установленный генотип с эмпирически полученными данными, определили, что средняя расчетная доза препарата должна составлять 910 мг/сут, что в 2 раза больше, чем изначально назначенная доза депакина. При последующем повышении дозы депакина до 1000 мг в сутки отмечен хороший терапевтический эффект. Медикаментозная ремиссия 8 месяцев.
Пример 2.
Мужчина, 25 лет.
В анамнезе неоднократные черепно-мозговые травмы, обратился с жалобами на приступы потери сознания, сопровождающиеся тонической судорогой, прикусом языка. Указанных приступов у больного было 2 за последние 5 мес. При сборе анамнеза выяснилось, что в течение последнего года стал отмечать состояния, при которых не помнил, «что делал», длящиеся несколько секунд, но в последние время данные состояния участились и по времени стали длиться несколько минут до 1-2 р. в 2 нед. Со слов родственников, отмечался «остекленевший взгляд», выполнял нецеленаправленные действия в «виде перекладывания бумаги», «пытался мыть посуду». Во время указанных состояний не реагировал на обращенную речь.
В соматическом статусе, у пациента отмечалось ожирение 2 ст.
В биохимическом анализе увеличение показателей АЛТ, ACT.
Диагноз заболевания: Симптоматическая фокальная эпилепсия.
С учетом показателей биохимического анализа, больному был назначен Топирамат (Топамакс) в дозе 200 мг/сутки (по 100 мг - 2 р.д.), с постепенной титрацией дозы по 25 мг каждую неделю до указанных цифр.
На фоне приема Топирамата отмечалась положительная динамика в виде полного прекращения ВГС приступов и снижения количества сложно-парциальных приступов до 1 в месяц. Через 6 мес. после прима топирамата при контрольном анализе мочи у больного появились соли в общем анализе мочи.
Для выявления риска развития побочного эффекта, в частности нефролитиаза, у больного был произведен забор 1 мл крови с последующим выделением ДНК фенол-хлороформным методом [Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1989]. Затем проводили ПНР на амплификаторе "Тэрцик-2" («ДНК-технология», Россия) с использованием праймеров к гену URAT1 на выявление полиморфизма (-788 Т>А; rs11602903): прямой -GCTTGGCCCCTGGTGGAT и обратный - TCTCTGTGTGGGCTTGGGTC. Реакционная смесь для амплификации объемом 25 мкл содержала 0.67 M Трис-HCl, pH 8.8; 16.7 мМ (NH4)2SO4; 0.01% твин-20; 0.2 мМ каждого dNTP; 0.1 мкг геномной ДНК; 20 пмолей каждого праймера; 2 ед. Taq полимеразы; MgCl2 в концентрации 1,5 мМ. Амплификация состояла из предварительной денатурации при 94°C - 4 минуты; 35 циклов, состоящих из денатурации при 94°C - 20 с, отжига праймеров при 62°C - 20 с, синтеза продукта при 72°C - 10 с; затем следовала стадия заключительного синтеза при 72°C - 5 мин. Получившийся фрагмент в 363 п.о. расщепляли ферментом Bso31I (Сибэнзим) и проводили электрофорез в 4% агарозном геле с последующей визуализацией результата на трансиллюминаторе. В результате детектирования были обнаружены фрагменты длиной в 223 и 140 п.о., что свидетельствовало о наличии генотипа ТТ у данного пациента. Сопоставив установленный генотип пациента с тендерной принадлежностью и эмпирически полученными данными о зависимости риска развития нефролитиаза от генотипа, риск развития нефролитиаза при терапии топираматом у данного пациента был подтвержден и больной был переведен на леветирацетам 2000 мг в сутки. Это позволило устранить выявленный побочный эффект.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет:
- заранее прогнозировать фармакологический ответ на терапию;
- подобрать оптимальный препарат, который не только будет эффективен для конкретного пациента, но позволит избежать побочных эффектов даже у успешных в плане эффективности действия препаратов пациентов;
- снизить финансовые затраты, связанные с подбором препаратов;
- сократить период, в течение которого заболевание не поддается/плохо поддается контролю;
- сократить время подбора эффективной дозы препарата;
- снизить количество визитов к врачу, так как эффективность терапии будет проявляться раньше.
Существенным фактом значится и то, что фармакогенетическое тестирование выполняется однократно, так как его результаты в течение жизни остаются неизменными.
Таким образом, фармакогенетическое тестирование может стать дополнительным диагностическим инструментом при подборе адекватной терапии каждому конкретному пациенту. Фармакогенетическое тестирование дает возможность вычислить пациентов с высоким риском развития токсического эффекта (а также тех, для кого необходимы более низкие терапевтические дозы лекарственных препаратов) и определить пациентов, которые с высокой степенью вероятности получат желаемый терапевтический эффект от того или иного препарата.
Немаловажно, что благодаря небольшой стоимости анализа и относительной простоте и быстроте его проведения заявляемый способ может найти широкое применение в учреждениях практического здравоохранения.
Заявляемый способ позволяет оптимизировать подбор адекватного противоэпилептического препарата (ПЭП) для каждого конкретного пациента, а также сократить время подбора эффективной дозы препарата и период, в течение которого заболевание не поддается/плохо поддается контролю, а следовательно, и связанные с этим финансовые затраты. Снижается количество визитов к врачу, так как эффективность терапии будет проявляться раньше. Более того, фармакогенетическое тестирование выполняется однократно, так как его результаты в течение жизни остаются неизменными.
Claims (5)
1. Способ определения эффективной терапевтической дозы противоэпилептического препарата и риска развития побочных эффектов, включающий забор биологического материала, проведение полимеразной цепной реакции по генам-кандидатам, последующий анализ их аллельных вариантов и, путем сопоставления выявленного аллельного полиморфизма с данными о его влиянии на эффективную терапевтическую дозу и возникновении побочных эффектов, расчет эффективной терапевтической дозы противоэпилептического препарата и определение риска развития побочных эффектов.
2. Способ по п. 1, в котором в качестве генов-кандидатов для препаратов из группы жирных кислот выбирают PPARy (Pro12Ala), PCKS1 (Ser690Thr), FABP2 (Ala54Thr).
3. Способ по п. 1, в котором в качестве генов-кандидатов для препаратов из группы трициклических соединений с карбомоильной группой выбирают MDR1 (С3435Т).
4. Способ по п. 1, в котором в качестве генов-кандидатов для препаратов из группы блокаторов натриевых каналов выбирают SCN1A (SCN1IVS5N (5G>A)).
5. Способ по п. 1, в котором в качестве генов-кандидатов для препаратов из группы сахаров выбирают Glut9 (Val253Ile), URAT1 (-788 Т>А), SERT (5HTTLPR), ТРН2 (rs10748185), UGT2B7 (C802T).
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2574204C1 true RU2574204C1 (ru) | 2016-02-10 |
Family
ID=
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2631613C1 (ru) * | 2016-06-03 | 2017-09-25 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научный центр неврологии" (ФГБНУ НЦН) | Способ определения топирамата в плазме крови |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001038564A2 (en) * | 1999-11-26 | 2001-05-31 | Mcgill University | Loci for idiopathic generalized epilepsy, mutations thereof and method using same to assess, diagnose, prognose or treat epilepsy |
WO2009006793A1 (en) * | 2007-07-06 | 2009-01-15 | The Chinese University Of Hong Kong | Polymorphisms of scn2a associated with resistance to antiepileptic drugs and use thereof |
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001038564A2 (en) * | 1999-11-26 | 2001-05-31 | Mcgill University | Loci for idiopathic generalized epilepsy, mutations thereof and method using same to assess, diagnose, prognose or treat epilepsy |
WO2009006793A1 (en) * | 2007-07-06 | 2009-01-15 | The Chinese University Of Hong Kong | Polymorphisms of scn2a associated with resistance to antiepileptic drugs and use thereof |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ЧУКАНОВА А.С. И ДР., Анализ связи полиморфизмов генов SERT и ТРН2 с побочными эффектами на фоне терапии Топираматом с учетом гендерных особенностей, Эпилепсия и пароксизмальные состояния, 2001, т.3, N 2, с.45-54. КРИКОВА Е.В. И ДР., Изучение ассоциации полиморфизма гена SCN1 с эффективной дозой ламотриджина, Журнал Неврологии и психиатрии, 2009, N 10, с.57-62. АБРАМОВ А.А. И ДР., Полиморфизм гена MDR1 и фармакорезистентность к противосудорожным препаратам при эпилепсии, Детская больница, 2011, N 4, с. 12-15. АКСЕНОВА М.Г. И ДР., Ассоциация полиморфизма С802Т гена глюкуронозилтрансферазы с эффективной дозой топирамата, Журнал неврологии и психиатрии, 2007, N 5, с. 63-64. АКСЕНОВА М.Г. И ДР., Анализ полиморфизма гена FABP2 в связи с эффективностью действия препаратов вальпроевой кислоты, Журнал неврологии и психиатрии, 2007, N 1, с. 42-45. ЧУКАНОВА А.С., автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук, КЛИНИКО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПОБОЧНЫХ ЭФФЕКТОВ ТОПИРАМА * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2631613C1 (ru) * | 2016-06-03 | 2017-09-25 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научный центр неврологии" (ФГБНУ НЦН) | Способ определения топирамата в плазме крови |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Kukshal et al. | Association study of neuregulin-1 gene polymorphisms in a North Indian schizophrenia sample | |
TW201326399A (zh) | 用於預測對格拉替雷(glatiramer)醋酸鹽之臨床反應之單核苷酸多型性之判定 | |
Lim et al. | Epilepsy phenotype associated with a chromosome 2q24. 3 deletion involving SCN1A: Migrating partial seizures of infancy or atypical Dravet syndrome? | |
Ng et al. | Association analysis of− 429T/C and− 374T/A polymorphisms of receptor of advanced glycation end products (RAGE) gene in Malaysian with type 2 diabetic retinopathy | |
Kasamo et al. | A PRIMPOL mutation and variants in multiple genes may contribute to phenotypes in a familial case with chronic progressive external ophthalmoplegia symptoms | |
Ouyang et al. | 16q-linked autosomal dominant cerebellar ataxia: a clinical and genetic study | |
CN101338337A (zh) | 多态性位点基因型预测抑郁症及药效的用途、方法和试剂盒 | |
Banchs et al. | Two Spanish families with Charcot–Marie–Tooth type 2A: Clinical, electrophysiological and molecular findings | |
CN105018602B (zh) | 抗精神病药物相关代谢综合征的易感基因及其应用 | |
RU2574204C1 (ru) | Способ определения эффективной терапевтической дозы противоэпилептического препарата и риска развития побочных эффектов | |
Tanji et al. | A novel tRNAVal mitochondrial DNA mutation causing MELAS | |
Setianingsih et al. | Phenotypic variability of Filipino β°‐thalassemia/HbE patients in Indonesia | |
Kubota et al. | A homozygous LAMA2 mutation of c. 818G> A caused partial merosin deficiency in a Japanese patient | |
RU2406450C1 (ru) | Способ прогнозирования риска развития тяжелой формы геморрагической лихорадки с почечным синдромом | |
Fu et al. | Investigation of JAK1 and STAT3 polymorphisms and their gene–gene interactions in nonspecific digestive disorder of rabbits | |
Layouni et al. | Genetic linkage study of an autosomal recessive form of juvenile myoclonic epilepsy in a consanguineous Tunisian family | |
Quaranta et al. | Psychotic symptoms in Alzheimer's disease and 5-HTTLPR polymorphism of the serotonin transporter gene: evidence for an association | |
Morar et al. | A novel GEFS+ locus on 12p13. 33 in a large Roma family | |
Leslie et al. | Pompe Disease Synonyms: Acid Alpha-Glucosidase Deficiency, Acid Maltase Deficiency, GAA Deficiency, Glycogen Storage Disease Type II (GSD II), Glycogenosis Type II | |
Feng et al. | Novel deletion of SPAST in a Chinese family with hereditary spastic paraplegia | |
Tanaka et al. | Genetic linkage analyses of Romano-Ward syndrome (RWS) in 13 Japanese families | |
Zhao et al. | Mutation analysis of four Chinese families with pure hereditary spastic paraplegia: pseudo-X-linked dominant inheritance and male lethality due to a novel ATL1 mutation | |
RU2285921C1 (ru) | Способ прогнозирования развития сахарного диабета типа 1 в популяциях народов башкортостана | |
RU2688208C1 (ru) | Способ прогнозирования развития сахарного диабета 2 типа у населения башкортостана | |
Cerino et al. | Genetic characterization of a French cohort of GNE-mutation negative inclusion body myopathy patients using exome sequencing |