RU2571219C2 - Preparation for biodegradation of petroleum products "bioionit" and method of obtaining thereof - Google Patents
Preparation for biodegradation of petroleum products "bioionit" and method of obtaining thereof Download PDFInfo
- Publication number
- RU2571219C2 RU2571219C2 RU2013128882/10A RU2013128882A RU2571219C2 RU 2571219 C2 RU2571219 C2 RU 2571219C2 RU 2013128882/10 A RU2013128882/10 A RU 2013128882/10A RU 2013128882 A RU2013128882 A RU 2013128882A RU 2571219 C2 RU2571219 C2 RU 2571219C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vkpm
- pseudomonas putida
- preparation
- vkm
- oil
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области охраны окружающей среды, в частности к биотехнологии и экологии, а именно к композициям для биодеградации загрязнений окружающей среды (почвы, грунтов, морских, пресных и минерализованных вод), а также технологических конструкций углеводородами нефти и нефтепродуктов с одновременным восстановлением физико-химических свойств и естественного биоценоза почв и акваторий.The invention relates to the field of environmental protection, in particular to biotechnology and ecology, and in particular to compositions for biodegradation of environmental pollution (soil, soil, marine, fresh and mineralized waters), as well as technological structures, hydrocarbons of oil and oil products with the simultaneous restoration of physical chemical properties and natural biocenosis of soils and water areas.
До настоящего времени нефть остается одним из самых востребованных источников энергии как в России, так и во всем мире, однако в то же время она является и основным загрязнителем окружающей среды. Аварийные разливы нефти происходят при разведке, добыче, транспортировке и ее переработке достаточно часто, поэтому серьезный ущерб, наносимый при этом окружающей среде, требует принятия экстренных мер по устранению подобных загрязнений. При этом наряду с ликвидацией последствий аварийных разливов достаточно остро стоит проблема очистки емкостей для хранения и перевозки нефтепродуктов от нефтяных остатков и ликвидации нефтешламов в амбарах при бурении и добыче нефти и в шламонакопителях на нефтеперерабатывающих заводах.To date, oil remains one of the most popular sources of energy both in Russia and around the world, but at the same time it is also the main environmental pollutant. Emergency oil spills occur during exploration, production, transportation and its processing quite often, therefore, serious damage to the environment caused by this requires urgent measures to eliminate such pollution. At the same time, along with the elimination of the consequences of accidental spills, the problem of cleaning the tanks for storing and transporting oil products from oil residues and eliminating oil sludges in barns during drilling and oil production and in sludge collectors at oil refineries is quite acute.
Следует отметить, что традиционные физико-химические методы очистки природной среды являются, как правило, недостаточно эффективными, в частности их применение не позволяет полностью очистить загрязненные участки от следов нефтепродуктов и восстановить их биоценоз, поэтому они все чаще дополняются или заменяются (в зависимости от степени загрязнения) биологическими методами.It should be noted that traditional physicochemical methods for cleaning the environment are, as a rule, not effective enough, in particular, their use does not completely clear the contaminated areas from traces of oil products and restore their biocenosis, therefore they are increasingly supplemented or replaced (depending on the degree of pollution) by biological methods.
К биодеградации нефтепродуктов способны многие микроорганизмы (бактерии, дрожжи, микроскопические грибы). Так, известно использование для биодеградации нефтепродуктов и токсических органических соединений таких микроорганизмов, как Aspergillus niger, Candida Tropical, Pseudomonas pulida и т.д. (Карасевич Ю.А. Основы селекции микроорганизмов, утилизирующих синтетические органические соединения. М.: Наука, 1982. с. 46; J. Bacterid., 1976, v. 125, 3, p. 818; Agr. Biol. Chem., 1968, v. 32, 8, p. 1033-1039).Many microorganisms (bacteria, yeast, microscopic fungi) are capable of biodegradation of oil products. So, it is known to use microorganisms such as Aspergillus niger, Candida Tropical, Pseudomonas pulida, etc. for biodegradation of oil products and toxic organic compounds. (Yu. A. Karasevich. Fundamentals of the selection of microorganisms utilizing synthetic organic compounds. M: Nauka, 1982. p. 46; J. Bacterid., 1976, v. 125, 3, p. 818; Agr. Biol. Chem., 1968, v. 32, 8, p. 1033-1039).
Следует отметить, что сложный химический состав нефти и нефтепродуктов, имеющих многочисленные вариации структуры углеводородов, обуславливают неодинаковую степень их доступности воздействию микроорганизмов. При этом основными агентами биодеградации нефти и нефтепродуктов являются бактерии. Объясняется это тем, что использование углеводородов (особенно с длинной углеродной цепью) в качестве источника углерода для роста и развития микроорганизмов среди бактерий распространено достаточно широко. Установлено, в частности, что алканы, нафтены и ароматические компоненты достаточно активно метаболизируются микроорганизмами, причем более легкие фракции указанных соединений могут полностью расщепляться. Более тяжелые, более конденсированные циклические углеводороды достаточно устойчивы к бактериальному воздействию. Так, адаптированные углеводородокисляющие бактерии в жидкой среде за 30 дней расщепляют до 83% суммарных углеводородов нефти. Фракционный анализ показал, что бактерии деградировали 69,7% нормальных углеводородов, 23,6% ароматических соединений с моно- и дициклической структурой, 53,2% углеводородов с трициклической и полициклической структурой (Atlas R.M. Bacteria and bioremediation of marine oil spills//Oceanus.- 1993 - 36, - 2. - C. 71).It should be noted that the complex chemical composition of petroleum and petroleum products having numerous variations in the structure of hydrocarbons determine the unequal degree of their availability to microorganisms. At the same time, the main agents of biodegradation of oil and oil products are bacteria. This is explained by the fact that the use of hydrocarbons (especially with a long carbon chain) as a carbon source for the growth and development of microorganisms among bacteria is quite widespread. It was established, in particular, that alkanes, naphthenes, and aromatic components are quite actively metabolized by microorganisms, and the lighter fractions of these compounds can be completely split. Heavier, more condensed cyclic hydrocarbons are quite resistant to bacterial action. So, adapted hydrocarbon-oxidizing bacteria in a liquid medium break down up to 83% of total oil hydrocarbons in 30 days. Fractional analysis showed that bacteria degraded 69.7% of normal hydrocarbons, 23.6% of aromatic compounds with a mono- and dicyclic structure, 53.2% of hydrocarbons with a tricyclic and polycyclic structure (Atlas RM Bacteria and bioremediation of marine oil spills // Oceanus .- 1993 - 36, - 2. - C. 71).
Известны разнообразные коммерческие биопрепараты, разработанные для очистки почв от нефтяных загрязнений, в частности такие, как Авалон, Бациспецин, Валентис, Деворойл, Достроил, Нафтокс, Никаойл, Петролан, Путидойл, Родер, Универсал и другие (WO 01/98435; RU 2077397, RU 20532054, RU 2023686, WO 93/00045, RU 2053205, SU 1428809, RU 2174496). Самым известным из них и давно применяющимся на практике является биопрепарат Путидойл (RU 2023686), представляющий собой смесь культуральной жидкости (КЖ), содержащую штаммы Pseudomonas putida 36 в высушенном состоянии. Препарат получают глубинным культивированием бактерии в питательной среде при 30°C, в аэробных условиях, с последующей распылительной сушкой либо лиофилизацией полученной культуральной жидкости (SU 1428809). Однако указанный препарат обладает не очень высокой эффективностью, в частности, в отношении мазутов и асфальтеновых соединений нефти, а при наличии в составе среды тяжелых металлов (Cu++, Pb++, Cd++) в концентрации 50 до 100 мг/литр данный препарат не функционирует.A variety of commercial biological products are known designed to clean soils from oil pollution, in particular, such as Avalon, Batsispetsin, Valentis, Devoroil, Dostroil, Naftoks, Nikoil, Petrolan, Putidul, Roder, Universal and others (WO 01/98435; RU 2077397, RU 20532054, RU 2023686, WO 93/00045, RU 2053205, SU 1428809, RU 2174496). The most famous of them and has long been used in practice is the biological product Putidul (RU 2023686), which is a mixture of culture fluid (QOL) containing strains of Pseudomonas putida 36 in a dried state. The drug is obtained by deep cultivation of bacteria in a nutrient medium at 30 ° C, under aerobic conditions, followed by spray drying or lyophilization of the obtained culture fluid (SU 1428809). However, this preparation is not very effective, in particular with respect to fuel oils and asphaltene oil compounds, and in the presence of heavy metals (Cu ++ , Pb ++ , Cd ++ ) in a concentration of 50 to 100 mg / liter, this the drug is not functioning.
Препарат "Бациспецин", полученный на основе природного штамма Bacillus sp. 729 (RU 2077397), также показал низкую эффективность по рекультивации земли, загрязненной нефтепродуктами, основную часть которых составляют смолистые вещества и полициклические соединения.The drug "Bacispecin" obtained on the basis of a natural strain of Bacillus sp. 729 (RU 2077397), also showed low efficiency in the restoration of land contaminated with oil products, the bulk of which are resinous substances and polycyclic compounds.
Больший потенциал и более широкий спектр действия на углеводороды имеют препараты, содержащие два и более штамма микроорганизмов. Так, в состав препарата Деворойл входят штаммы Pseudomonas stutzeri, Rhodococcus erythropolis, Rhodococcus maris, Rhodococcus sp., Yarrowia lipolytica (ранее Candida sp.) (RU 2023686, WO 93/00045). Деворойл получают глубинным культивированием входящих в его состав микроорганизмов с последующим высушиванием полученной биомассы.Preparations containing two or more strains of microorganisms have greater potential and a wider spectrum of action on hydrocarbons. Thus, the composition of the drug Devoroil includes strains of Pseudomonas stutzeri, Rhodococcus erythropolis, Rhodococcus maris, Rhodococcus sp., Yarrowia lipolytica (formerly Candida sp.) (RU 2023686, WO 93/00045). Devoroil is obtained by deep cultivation of its microorganisms, followed by drying of the resulting biomass.
Известен препарат, содержащий смесь бактерий Pseudomonas putida, Pseudomonas alcaligenes, Pseudomonas acruginasa и Arihrodacier cristallopoietes (Hazardous Waste & Hazardous Mater, 1989, v. 6, 2, p. 145-154), способный утилизировать дизельное топливо.A known preparation containing a mixture of bacteria Pseudomonas putida, Pseudomonas alcaligenes, Pseudomonas acruginasa and Arihrodacier cristallopoietes (Hazardous Waste & Hazardous Mater, 1989, v. 6, 2, p. 145-154), capable of utilizing diesel fuel.
Недостатком препаратов является низкая степень деградации ароматических углеводородов, нестабильность препарата при применении в практике, например в полевых условиях, и отсутствие резистентности к тяжелым металлам.The disadvantage of the drugs is the low degree of degradation of aromatic hydrocarbons, the instability of the drug when used in practice, for example in the field, and the lack of resistance to heavy metals.
Наиболее близким по технической сущности к заявляемой группе изобретений является препарат Авалон (Foght J.M., Westlake W.S. Bioremidiation of oil spills //Spill Technol. Nenslet. - 1992. - 17, N 3. - C. 1-10), который содержит клетки Ps. fluorescens и Serratia marcescens, либо Serratia marcescens и Acidovorax delafieldii, выращенных на вспененном стеклообразном метафосфатном носителе при 20°C в течение 72-96 ч.The closest in technical essence to the claimed group of inventions is the drug Avalon (Foght JM, Westlake WS Bioremidiation of oil spills // Spill Technol. Nenslet. - 1992. - 17, N 3. - C. 1-10), which contains Ps cells . fluorescens and Serratia marcescens, or Serratia marcescens and Acidovorax delafieldii grown on a foamed glassy metaphosphate support at 20 ° C for 72-96 h.
Недостатком препаратов является низкая эффективность при деградации тяжелых фракций нефти, особенно загрязненных тяжелыми металлами, а также неэффективность при использовании при загрязнении нефтепродуктами водоемов.The disadvantage of drugs is the low efficiency in the degradation of heavy fractions of oil, especially contaminated with heavy metals, as well as inefficiency when used in the contamination of oil products by water.
Задачей, решаемой авторами, являлось создание более универсального и более эффективного биопрепарата - нефтедеструктора.The problem solved by the authors was the creation of a more universal and more effective biological product - oil destructor.
Технической задачей являлось создание композиции микроорганизмов, способных не только перерабатывать нефтепродукты, но и одновременно облагораживать обработанную среду.The technical task was to create a composition of microorganisms capable of not only refining petroleum products, but also simultaneously ennoble the treated medium.
Технический результат достигался созданием ассоциации культур бактерий Bacillus megaterium ВКМ В-396, Bacillus subtilis ВКПМ В-5328, Pseudomonas putida ВКМ В-1301, Pseudomonas putida ВКПМ В-5624, Rhodococcus erythropolis ВКПМ АС-1269 с титром 109 мкл/г иммобилизованных на природном сорбенте-ионообменнике, универсальном калийном удобрении с титром 109 мкл/г.The technical result was achieved by creating an association of bacterial cultures of Bacillus megaterium VKM B-396, Bacillus subtilis VKPM B-5328, Pseudomonas putida VKM B-1301, Pseudomonas putida VKPM B-5624, Rhodococcus erythropolis VKPM AC-1269 with a titer of 10 9 μl / g natural sorbent-ion exchanger, universal potash fertilizer with a titer of 10 9 μl / g.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к биологическому препарату для очистки загрязненной нефтью и нефтепродуктами почвы, воды и технологических конструкций хранения и переработки нефтепродуктов с одновременным восстановлением физико-химических свойств и естественного биоценоза почв и акваторий. Биопрепарат-нефтедеструктор состоит из ассоциации культур нефтеокисляющих и ростостимулирующих бактерий Bacillus megaterium ВКМ В-396, Bacillus subtilis ВКПМ В-5328, Pseudomonas putida ВКМ В-1301, Pseudomonas putida ВКПМ В-5624, Rhodococcus erythropolis ВКПМ АС-1269, иммобилизованных на природном сорбенте-ионообменнике, универсальном калийном удобрении с титром живых клеток 109 мкл/г.The invention relates to biotechnology, and in particular to a biological preparation for purification of soil, water contaminated with oil and oil products, and technological structures for storing and processing oil products while restoring the physicochemical properties and natural biocenosis of soils and water areas. A petrochemical biological preparation consists of an association of cultures of oil-oxidizing and growth-stimulating bacteria Bacillus megaterium VKM B-396, Bacillus subtilis VKPM B-5328, Pseudomonas putida VKM B-1301, Pseudomonas putida VKPM B-5624, Rhodocis pompent -ion exchanger, universal potash fertilizer with a titer of living cells 10 9 μl / g
В настоящее время известно большое число биопрепаратов-нефтедеструкторов, в месте с тем ни один из этих препаратов не обладает одновременно способностью сорбировать (купировать) и утилизировать загрязнение широкого диапазона, использоваться как для очистки почв и воды, так и различных конструкций хранения и переработки углеводородов, и, что самое важное, способностью эффективно стимулировать рост зеленной массы на обрабатываемом участке и тем самым усиливать воздействие аборигенной микрофлоры в широком диапазоне температур от 4°C до 40°C и с загрязненностью до 40%.At present, a large number of petrodestructive biological products are known; in addition, none of these preparations has the ability to sorb (stop) and utilize a wide range of pollution at the same time, it can be used both for cleaning soil and water, and for various hydrocarbon storage and processing designs, and, most importantly, the ability to effectively stimulate the growth of green mass in the treated area and thereby enhance the impact of indigenous microflora in a wide temperature range from 4 ° C to 40 ° C and with pollution up to 40%.
Известен штамм Bacillus megaterium ВКМ В-396 (RU №2147181, A01N 63/00, C05F 11/08, 10.04.2000), входящий в состав биопрепарата «Альбит», повышающего урожай растений и защищающего их от болезней, однако он представлен в виде гидролизата бактериальных клеток.The known strain of Bacillus megaterium VKM B-396 (RU No. 2147181, A01N 63/00, C05F 11/08, 10.04.2000), which is part of the biological product "Albit", which increases the yield of plants and protects them from diseases, but it is presented in the form hydrolyzate of bacterial cells.
Bacillus subtilis ВКПМ В-5328 в доступных для анализа патентах не представлен и ранее не применялся.Bacillus subtilis VKPM B-5328 is not presented in the patents available for analysis and has not been previously applied.
Штаммы бактерий Pseudomonas putida ВКМ В-1301 и Pseudomonas putida ВКПМ В-5624 в доступных для анализа патентах не представлены и ранее не применялись, вместе с тем в (RU 2122980, кл. c02f 3/34, 12.04.94 г.) штаммы Pseudomonas putida характеризуются как продуценты поверхностно-активных веществ для деградации полициклических ароматических углеводородов и углеводородов нефти.The bacterial strains of Pseudomonas putida VKM B-1301 and Pseudomonas putida VKPM B-5624 are not presented in the patents available for analysis and have not been previously used, however, strains of Pseudomonas in (RU 2122980, class c02f 3/34, 04/12/94) putida are characterized as producers of surfactants for the degradation of polycyclic aromatic hydrocarbons and petroleum hydrocarbons.
Штамм Rhodococcus erythropolis ВКПМ АС-1269 в доступных для анализа патентах не представлен и ранее не применялся, однако бактерии Rhodococcus erythropolis способны активно деструктировать углеводороды нефтепродуктов, что может найти широкое применение в технологиях биоремедиации окружающей среды (Костина Е.Г., Атыкян Н.А., Ревин В.В. Изучение возможности использования Rhodococcus erythropolis для деградации дизельного топлива // Современные наукоемкие технологии. - 2008. - №2 - С. 91-91).The strain Rhodococcus erythropolis VKPM AC-1269 is not presented in the patent available for analysis and has not been used before, however, the bacteria Rhodococcus erythropolis are able to actively destroy hydrocarbons of petroleum products, which can be widely used in environmental bioremediation technologies (Kostina E.G., Atykyan N.A. ., Revin VV Study of the possibility of using Rhodococcus erythropolis for the degradation of diesel fuel // Modern high technology. - 2008. - No. 2 - P. 91-91).
Например, известен биопрепарат-нефтедеструктор, используемый для очистки грунтов и почвы от нефти и нефтепродуктов, содержащий биомассу консорциума нефтеокисляющих микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species ИБ ДТ-5, биомассу аэробных азотфиксирующих микроорганизмов Azotobacter vinelandii ИБ 4 и биомассу аэробных спорообразующих микроорганизмов Bacillus species 739 в массовом соотношении, равном 1:1:0,5÷1 (см. патент РФ на изобретение №2323970, МПК C12N 1/26, В09С 01/10, опубл. 10.05.2008 г.). Недостатком известного биопрепарата-нефтедеструктора является неполное разложение нефти из-за его избирательного действия на определенные фракции нефтепродуктов. Кроме того, обеспечивается эффективность только при поверхностном загрязнении почвы, не более 20%. При этом происходит разрушение только верхних слоев загрязнения (0-20 см), что не обеспечивает рекультивацию почв.For example, a biological product-oil destructor is known that is used to clean soils and soils from oil and oil products, containing the biomass of a consortium of oil-oxidizing microorganisms Bacillus brevis and Arthrobacter species IB DT-5, the biomass of aerobic nitrogen-fixing microorganisms Azotobacter vineland bacteria I 4 and 4 mass ratio equal to 1: 1: 0.5 ÷ 1 (see RF patent for the invention No. 2323970, IPC C12N 1/26, B09C 01/10, publ. 05/10/2008). A disadvantage of the known biological product-oil destructor is the incomplete decomposition of oil due to its selective action on certain fractions of petroleum products. In addition, efficiency is ensured only with surface soil pollution, not more than 20%. In this case, only the upper layers of pollution (0-20 cm) are destroyed, which does not ensure soil restoration.
Тем самым защищаемая ассоциация бактерий нефтедеструкторов и стимуляторов роста уникальна, имеет новизну.Thus, the protected association of bacteria of oil destructors and growth stimulants is unique and novel.
Известен способ (RU 2410170 С2, В09С 1/10, C12N /26 10.07.2010), включающий внесение в грунт сорбента, активных по отношению к имеющемуся в грунте органическому загрязнителю микроорганизмов и азотного минерального удобрения с последующим увлажнением. Причем в качестве сорбента используют термически обработанную при температуре 200-300°C глауконитовую породу с содержанием глауконита 40-90%, а в качестве микроорганизмов используют бактериальный препарат в виде лиофильно высушенного сухого порошка с активностью, равной численности углеводородокисляющих клеток 1-100 млрд в 1 г препарата, при этом сорбент и бактериальный препарат перемешивают при соотношении 500-1000 г бактериального препарата на 1 т сорбента.The known method (RU 2410170 C2, B09C 1/10, C12N / 26 07/10/2010), comprising introducing into the soil a sorbent that is active in relation to the organic pollutant of microorganisms and nitrogen mineral fertilizer present in the soil, followed by moistening. Moreover, glauconite rock with a glauconite content of 40-90% thermally processed at a temperature of 200-300 ° C is used as a sorbent, and a bacterial preparation in the form of a lyophilized dried dry powder with an activity equal to the number of hydrocarbon-oxidizing cells 1-100 billion in 1 is used as microorganism g of the drug, while the sorbent and the bacterial preparation are mixed at a ratio of 500-1000 g of the bacterial preparation per 1 ton of sorbent.
Недостатками данного способа являются низкая выживаемость микроорганизмов на поверхности азотных удобрений и, как следствие, завышенная начальная концентрация клеток, а также непродолжительный срок хранения биопрепарата.The disadvantages of this method are the low survival of microorganisms on the surface of nitrogen fertilizers and, as a result, the overestimated initial concentration of cells, as well as the short shelf life of the biological product.
Известен способ получения сухой формы биопрепарата на основе микроорганизма-нефтедеструктора рода Pseudomonas или Rhodococcus для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами. При этом бактерии рода Pseudomonas или Rhodococcus культивируют в жидкой питательной среде. Затем суспензию бактерий смешивают с защитной средой. При этом защитную среду готовят на основе 0,05 М натрий-калиевого фосфатного буфера pH 6,8 при следующем соотношении компонентов: 4% полиглюкина, 10% сахарозы, 4% тиомочевины, 2% аскорбиновой кислоты с последующим титрованием 45% раствором гидроксида натрия до pH 6,8-7,2. Полученную смесь добавляют к сорбенту - вспученному перлитовому песку. Затем проводят контактную сушку препарата при t=37°C до постоянной массы. Способ позволяет повысить выживаемость бактериальных клеток микроорганизмов-нефтедеструкторов родов Pseudomonas и Rhodococcus до 44% и 81% соответственно (RU №2434059, В09С, C02F C12N, 27.05.2010). Недостатками данного способа являются низкая сорбирующая способность перлитового песка, отсутствие ионообменных свойств, низкая рабочая концентрация клеток и нефтедеструктирующая активность клеток микроорганизмов, недостаточная для проведения нефтеочистки почвы в районах с коротким тепловым периодом.A known method of obtaining a dry form of a biological product based on a microorganism-oil destructor of the genus Pseudomonas or Rhodococcus for cleaning territories from pollution by oil and oil products. In this case, bacteria of the genus Pseudomonas or Rhodococcus are cultured in a liquid nutrient medium. Then the suspension of bacteria is mixed with a protective medium. In this case, a protective medium is prepared on the basis of 0.05 M sodium potassium phosphate buffer pH 6.8 with the following ratio of components: 4% polyglucin, 10% sucrose, 4% thiourea, 2% ascorbic acid, followed by titration with a 45% sodium hydroxide solution to pH 6.8-7.2. The resulting mixture is added to the sorbent - expanded perlite sand. Then conduct contact drying of the drug at t = 37 ° C to constant weight. The method allows to increase the survival of bacterial cells of microorganisms, oil destructors of the genera Pseudomonas and Rhodococcus up to 44% and 81%, respectively (RU No. 2434059, B09C, C02F C12N, 05.27.2010). The disadvantages of this method are the low sorbing capacity of perlite sand, the absence of ion-exchange properties, the low working concentration of cells and the oil-degrading activity of microorganism cells, insufficient for oil purification of the soil in areas with a short thermal period.
Недостатками известных биологических способов очистки загрязненных грунтов являются: высокая стоимость; использование биологических способов очистки ограничено теплым временем года (весенне-летним периодом); требуется значительное время на переработку опасных отходов (2-4 месяца); необходимость создания специальных полигонов (система биоячеек), требующих больших площадей.The disadvantages of the known biological methods for cleaning contaminated soils are: high cost; the use of biological cleaning methods is limited to the warm season (spring-summer period); significant time is required for the processing of hazardous waste (2-4 months); the need to create special polygons (a system of biocells) requiring large areas.
Наиболее близким к заявляемому препарату является композиция (RU2181701, 2000), которая содержит пористый носитель - вспененные стеклообразные метафосфаты и штаммы микроорганизмов-деструкторов Serratia marcescens PL-1, Pseudomonas fluorescens biovar II10-1, Acidovorax delafieldii 3-1 в концентрации 1012 клеток/г, иммобилизованные в поры носител. Для получения посевного материала штаммы выращивали раздельно, в ферментере вели совместное культивирование микроорганизмов при Т=20°C, pH 6,5-7,0 в течение 24-36 часов в аэробных условиях. В качестве индуктора использовали 0,02% сырую нефть. После этого проводят иммобилизацию микроорганизмов на носителе путем смешивания его с культуральной жидкостью, содержащей микроорганизмы с титром 2-5,109 кл/мл. Недостатком препарата являлась его относительно невысокая активность.Closest to the claimed drug is a composition (RU2181701, 2000), which contains a porous carrier - foamed glassy metaphosphates and strains of microorganisms-destructors Serratia marcescens PL-1, Pseudomonas fluorescens biovar II10-1, Acidovorax delafieldii 3-1 at a concentration of 10 12 cells / g immobilized in the pores of the carrier. To obtain seed, the strains were grown separately; in the fermenter, microorganisms were co-cultured at T = 20 ° C, pH 6.5-7.0 for 24-36 hours under aerobic conditions. As an inductor, 0.02% crude oil was used. After that, immobilization of microorganisms on the carrier is carried out by mixing it with a culture fluid containing microorganisms with a titer of 2-5.10 9 cells / ml. The disadvantage of the drug was its relatively low activity.
Технической задачей, решаемой авторами изобретения, являлось расширение спектра нефтедеградирующих препаратов путем создания более эффективного комплексного препарата, способного наряду с переработкой нефтепродуктов улучшать плодородие обрабатываемой почвы, а также эффективного для обработки нефтяных загрязнений водной среды.The technical problem solved by the inventors was to expand the range of oil-degrading drugs by creating a more effective integrated product, which, along with the processing of petroleum products, can improve the fertility of the treated soil, as well as effective for the treatment of oil pollution of the aquatic environment.
Техническая задача решалась путем создания ассоциации бактерий Bacillus megaterium ВКМ В-396, Bacillus subtilis ВКПМ В-5328, Pseudomonas putida ВКМ В-1301, Pseudomonas putida ВКПМ В-5624, Rhodococcus erythropolis ВКПМ АС-1269, иммобилизованной на глауконитсодержащем носителе при концентрации микроорганизмов 108-1010 клеток/г, и технологии получения нового биопрепарата.The technical problem was solved by creating an association of bacteria Bacillus megaterium VKM B-396, Bacillus subtilis VKPM B-5328, Pseudomonas putida VKM B-1301, Pseudomonas putida VKPM B-5624, Rhodococcus erythropolis VKPM AC-1269, immobilized at a concentration of 10 8 -10 10 cells / g, and a new technology for obtaining a biological product.
Доля клеток отдельных бактерий в препарате составляет: Bacillus subtilis ВКПМ В-5328 - 15-25%, Pseudomonas putida ВКМ В-1301 - 15-25%, Pseudomonas putida ВКПМ В-5624 - 15-25%, Rhodococcus eryth ropolis ВКПМ АС-1269 - 15-25%, Bacillus megaterium ВКМ В-396 - 15-25%.The proportion of cells of individual bacteria in the preparation is: Bacillus subtilis VKPM B-5328 - 15-25%, Pseudomonas putida VKM B-1301 - 15-25%, Pseudomonas putida VKPM B-5624 - 15-25%, Rhodococcus eryth ropolis VKPM AC- 1269 - 15-25%, Bacillus megaterium VKM B-396 - 15-25%.
Увеличение концентрации клеток (больше 1010 мкл/г) не приведет к значительному увеличению скорости деструкции загрязнителя, однако неоправданно увеличит стоимость работ по очистке, так как увеличение скорости биодеструкции будет незначительным по сравнению с увеличением стоимости препарата. При концентрации клеток микроорганизмов меньше 108 КОЕ/г в биопрепарате технический результат не достигается вследствие снижения требуемой скорости биодеструкции загрязнителя.An increase in the concentration of cells (more than 10 10 μl / g) will not lead to a significant increase in the rate of destruction of the pollutant, however, it will unreasonably increase the cost of cleaning work, since the increase in the rate of biodegradation will be insignificant compared to the increase in the cost of the drug. When the concentration of microorganism cells is less than 10 8 CFU / g in the biological product, the technical result is not achieved due to a decrease in the required rate of biodegradation of the pollutant.
Все штаммы биопрепарата выделены из почвы и не патогенны для теплокровных животных и гидробионтов, депонированы во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов (ВКМ) и Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ).All strains of the biological product are isolated from the soil and are not pathogenic for warm-blooded animals and aquatic animals, deposited in the All-Russian State Collection of Microorganism Strains (VKM) and the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms (VKPM).
Наиболее эффективным и экономически выгодным является препарат с одинаковой долей каждого микроорганизма и клеточным титром 109 колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 г препарата, получивший условное наименование «Биоионит».The most effective and cost-effective is the drug with the same proportion of each microorganism and a cell titer of 10 9 colony forming units (CFU) in 1 g of the drug, which received the code name "Bioionite".
Используемый в составе препарата глауконит является алюмосиликатом, в котором катионы находятся в легкоизвлекаемой форме. Катионы, входящие в состав глауконита, легко замещаются находящимися в избытке в окружаемой среде элементами. Слоистая структура минерала, его ионообменные свойства предопределяют его высокие сорбционные свойства по отношению к нефтепродуктам, радионуклидам и токсичным элементам. Способность глауконита депонировать воду и низкая десорбция (медленное высвобождение) позволяют эффективно иммобилизовать на его поверхности микроорганизмы и их метаболиты. При этом скорость химической реакции связывания такова, что глауконит способен в течение незначительного времени перевести загрязнители в связанное безопасное состояние, а микробное сообщество удобно может их утилизировать. Еще одно преимущество глауконита, то что он увеличивает диффузию кислорода и влаги в почве, что обеспечивает оптимальный водный, газовоздушный и тепловой режим для роста численности микроорганизмов, иммобилизованных на нем. При этом усиливается активность метаболитных ферментов и значительно увеличивается энергия всех биохимических процессов. Вместе с тем глауконит содержит значительное количество биогенных элементов - подвижного калия, фосфора и микроэлементов, необходимых для жизнедеятельности микроорганизмов и роста растений. Так как он в итоге представляет собой минеральное удобрение, то после применения биопрепарата отпадает необходимость его утилизации.The glauconite used in the preparation is an aluminosilicate in which the cations are in easily removable form. The cations that make up glauconite are easily replaced by elements abundant in the environment. The layered structure of the mineral, its ion-exchange properties determine its high sorption properties in relation to petroleum products, radionuclides and toxic elements. The ability of glauconite to deposit water and low desorption (slow release) can effectively immobilize microorganisms and their metabolites on its surface. At the same time, the rate of the chemical binding reaction is such that glauconite is able to transfer pollutants into a bound safe state for a short time, and the microbial community can conveniently utilize them. Another advantage of glauconite is that it increases the diffusion of oxygen and moisture in the soil, which provides optimal water, gas, air and thermal conditions for the growth of the number of microorganisms immobilized on it. At the same time, the activity of metabolite enzymes is enhanced and the energy of all biochemical processes is significantly increased. However, glauconite contains a significant amount of nutrients - mobile potassium, phosphorus and trace elements necessary for the vital activity of microorganisms and plant growth. Since it ultimately is a mineral fertilizer, then after the use of a biological product there is no need for its disposal.
В качестве глауконитсодержащего носителя может использоваться как чистый глауконит, так и глауконитовая порода, содержащая от 30 до 80% глауконита.As a glauconite-containing carrier, both pure glauconite and glauconite rock containing from 30 to 80% glauconite can be used.
Препарат получают следующим образом. Микроорганизмы биопрепарата Bacillus megaterium ВКМ В-396, Bacillus subtilis ВКПМ В-5328, Pseudomonas putida ВКМ В-1301, Pseudomonas putida ВКПМ В-5624, Rhodococcus erythropolis ВКПМ АС-1269 выращиваются раздельно в биореакторе до содержания 1011-1012 мкл/мл, известными способами, затем готовят микробную ассоциацию смешиванием в одной емкости расчетных долей культуральных жидкостей до содержания 1012 мкл/мл с последующим капиллярно-химическим обезвоживанием смеси путем ее напыления в виде аэрозоля в специальном смесителе на сорбент. При иммобилизации смесь постоянно фонтанирует в смесителе за счет подачи подогретого до 38°C воздуха, и при достижение влажности в конечном биопрепарате 5% процесс прекращается. Дополнительная термическая обработка глауконита не требуется, так как удаляемая внешняя влага только увеличивает гигроскопичность и осложняет условия проведения процесса.The drug is prepared as follows. Bacillus megaterium microorganisms biopreparation VKM B-396, Bacillus subtilis VKPM B-5328, Pseudomonas putida VKM B-1301, Pseudomonas putida strain VKPM B-5624, Rhodococcus erythropolis VKPM-1269 AC separately grown in the bioreactor in a content October 11 -10 12 .mu.l / ml by known methods, then the microbial association is prepared by mixing in one container the calculated proportions of the culture fluids to a content of 10 12 μl / ml followed by capillary-chemical dehydration of the mixture by spraying it in the form of an aerosol in a special sorbent mixer. When immobilized, the mixture constantly gushes in the mixer due to the supply of air preheated to 38 ° C, and when the humidity in the final biological product reaches 5%, the process stops. Additional heat treatment of glauconite is not required, since the removed external moisture only increases the hygroscopicity and complicates the process conditions.
Наиболее экономически оправдано проводить процесс при содержании глауконита в носителе не менее 60%, хотя иммобилизация возможна при его 30% содержании в породе, хотя при этом срок обработки существенно возрастает.It is most economically justified to carry out the process when the content of glauconite in the carrier is at least 60%, although immobilization is possible with its 30% content in the rock, although the processing time is significantly increased.
За счет реализации существенных признаков изобретения достигаются важные новые свойства объекта, позволяющие получить эффективный биопрепарат - нефтедеструктор с высокой нефтедеструктирующей активностью, для очистки загрязненной нефтью и нефтепродуктами почвы, воды и технологических конструкций хранения и переработки нефтепродуктов с одновременным восстановлением физико-химических свойств и естественного биоценоза почв и акваторий.Due to the implementation of the essential features of the invention, important new properties of the object are achieved, which make it possible to obtain an effective biological product - an oil destructor with high oil destructive activity, for the purification of soil, water contaminated with oil and oil products, and oil and gas product storage and processing technological constructions while restoring the physicochemical properties and natural soil biocenosis and water area.
Сущность изобретения поясняется примерами.The invention is illustrated by examples.
Пример 1. Препарат получают следующим образом. Микроорганизмы биопрепарата выращивают раздельно при условиях: Bacillus megaterium ВКМ В-396 (штамм-1) (культивирование на сусло-агаре при pH 7,0, 30°C, в течение 48 часов), Bacillus subtilis ВКПМ В-5328 (штамм-2) (культивирование на L-среде (г/л): дрожжевой экстракт - 5,0, пептон - 15,0, вода до 1,0 л при pH 7,0, 36°C в течение 42 часов), Pseudomonas putida ВКМ В-1301 (штамм-3) (культивирование на мясопептонном агаре (г/л): пептон - 10,0, хлористый натрий - 5,0, мясной экстракт - 3,0, агар-агар - 20,0, вода до 1 л, при pH 7,0, 28°C в течение 48 часов), Pseudomonas putida ВКПМ В-5624 (штамм-4) (культивирование на среде (г/л): дрожжевой экстракт - 5,0, пептон - 15,0, хлористый натрий - 5,0, агар 15,0, вода до 1 л при pH 7,0, 22-28°C в течение 48 часов), Rhodococcus erythropolis ВКПМ АС-1269 (штамм-5) (культивирование на МПА с глюкозой (г/л): мясная вода - 1,0, хлористый натрий - 5,0, пептон -10,0, глюкоза 1%, агар - 20,0 при pH 6,8-7,0, 30°C в течение 46 часов) до содержания 1011-1012 мкл/мл каждого штамма, затем в реакторе при 36°С смешивается определенное соотношение культуральных жидкостей (15, 15, 20, 20, 30 массовых частей), полученную микробную ассоциацию захолаживают в реакторе при температуре 14-16°C. Глауконит препарата измельчается на шаровой мельнице до 50% содержания частиц размером 10-50 мкм, просеивается через сита №50 и досушивается до остаточной влажности 2% при температуре 160°C в сушильных шкафах. Приготовление биопрепарата осуществляется методом капиллярно-химического обезвоживания на глауконите, смешивание ассоциации с глауконитом осуществляется в специализированном смесителе, обеспечивающем смешивание в одном объеме расчетных долей культуральных жидкостей с глауконитом до содержания 109 мкл/мл. Процесс в смесителе осуществляется напылением расчетного количества (10 л) микробного аэрозоля ассоциации микроорганизмов на фонтанирующий слой глауконита (50 кг) при температуре теплоносителя - воздуха (стерильного) 40°C и скорости 3-5 м/с. Иммобилизация завершается при достижении влажности в конечном биопрепарате 5% и содержания живых бактериальных клеток 109 мкл/г. Биопрепарат расфасовывается в полимерные ведра по 5 кг.Example 1. The drug is prepared as follows. The microorganisms of the biological product are grown separately under the conditions: Bacillus megaterium VKM B-396 (strain-1) (cultivation on wort agar at pH 7.0, 30 ° C, for 48 hours), Bacillus subtilis VKPM B-5328 (strain-2 ) (cultivation on L-medium (g / l): yeast extract - 5.0, peptone - 15.0, water up to 1.0 l at pH 7.0, 36 ° C for 42 hours), Pseudomonas putida VKM B-1301 (strain 3) (cultivation on meat and peptone agar (g / l): peptone - 10.0, sodium chloride - 5.0, meat extract - 3.0, agar-agar - 20.0, water up to 1 l, at pH 7.0, 28 ° C for 48 hours), Pseudomonas putida VKPM B-5624 (strain 4) (cultivation on medium (g / l): yeast ext act - 5.0, peptone - 15.0, sodium chloride - 5.0, agar 15.0, water up to 1 liter at pH 7.0, 22-28 ° C for 48 hours), Rhodococcus erythropolis VKPM AC- 1269 (strain 5) (cultivation on MPA with glucose (g / l): meat water - 1.0, sodium chloride - 5.0, peptone-10.0, glucose 1%, agar - 20.0 at pH 6 , 8-7.0, 30 ° C for 46 hours) to a content of 10 11 -10 12 μl / ml of each strain, then a certain ratio of culture liquids is mixed in the reactor at 36 ° C (15, 15, 20, 20, 30 mass parts), the resulting microbial association is chilled in a reactor at a temperature of 14-16 ° C. The glauconite of the preparation is crushed in a ball mill to 50% content of particles with a size of 10-50 microns, sieved through No. 50 sieves and dried to a residual moisture content of 2% at a temperature of 160 ° C in ovens. Preparation of a biological product is carried out by the method of capillary-chemical dehydration on glauconite, mixing of association with glauconite is carried out in a specialized mixer, which provides mixing in one volume of the calculated fractions of culture liquids with glauconite to a content of 10 9 μl / ml. The process in the mixer is carried out by spraying the calculated amount (10 l) of the microbial aerosol of the association of microorganisms onto the glauconite gushing layer (50 kg) at a coolant temperature - air (sterile) of 40 ° C and a speed of 3-5 m / s. Immobilization is completed when the moisture content in the final biological product reaches 5% and the content of live bacterial cells is 10 9 μl / g. The biological product is packaged in 5 kg plastic buckets.
Пример 2. По технологии примера 1 было получено 9 вариантов препарата с различным соотношением клеток Bacillus megaterium ВКМ В-396, Bacillus subtilis ВКПМ В-5328, Pseudomonas putida ВКМ В-1301, Pseudomonas putida ВКПМ В-5624, Rhodococcus erythropolis ВКПМ АС-1269, с концентрацией клеток от 108 до 1010 мкл/г, так как более высокое содержание неоправданно повышает стоимость препарата и незначительно влияет на его качество, а более низкий показатель не обеспечивает требуемой степени очистки.Example 2. According to the technology of Example 1, 9 variants of the preparation were obtained with different ratios of Bacillus megaterium VKM B-396 cells, Bacillus subtilis VKPM B-5328, Pseudomonas putida VKM B-1301, Pseudomonas putida VKPM B-5624, Rhodococcus erythropolis VKPM AC-1269 , with a cell concentration of 10 8 to 10 10 μl / g, since a higher content unnecessarily increases the cost of the drug and slightly affects its quality, and a lower rate does not provide the required degree of purification.
Состав препаратов приведен в таблице 1.The composition of the drugs are shown in table 1.
Испытания проводились по следующей технологии. Колбы Эрленмейера (объемом 750 мл) заполняли 100 мл морской воды с концентрацией соли 21% и содержащей 0,53% нефти, затем к содержимому колбы добавили 20 мг выбранного сухого биопрепарата. Колбы инкубировали на качалке (100 об/мин) при 5°C, 18 и 30°C при pH 7,0. Через 48 ч наблюдался осадок загрязнителя на дне колб. Степень очистки приведена в таблице 1.The tests were carried out using the following technology. Erlenmeyer flasks (750 ml) were filled with 100 ml of sea water with a salt concentration of 21% and containing 0.53% oil, then 20 mg of the selected dry biological product was added to the contents of the flask. The flasks were incubated on a shaker (100 rpm) at 5 ° C, 18 and 30 ° C at pH 7.0. After 48 hours, a contaminant precipitate was observed at the bottom of the flasks. The degree of purification is shown in table 1.
Лучшие результаты были получены для препаратов 4 и 5. Так как различие между ними несущественно, дальнейшие испытания проводили с препаратом 5.The best results were obtained for preparations 4 and 5. Since the difference between them is not significant, further tests were carried out with preparation 5.
Полученные результаты свидетельствуют о перспективности биопрепарата для очистки морской воды, сточных вод и других водных объектов от сырой нефти, в том числе и для очистки донных отложений.The results obtained indicate the promise of a biological product for the purification of sea water, wastewater and other water bodies from crude oil, including for cleaning bottom sediments.
Пример 3. В 10 колб Эрленмейера вносили по 100 мл дистиллированной воды с начальным значением pH 4-12. В каждую колбу добавляли 3% нефти и вносили по 1 г биопрепарата 6. Колбы инкубировали на качалке (120 об/мин) при 18-20°C. Через 4 сут в каждой колбе определяли содержание нефти. Результаты представлены в табл. 2.Example 3. In 10 Erlenmeyer flasks were added 100 ml of distilled water with an initial pH of 4-12. 3% oil was added to each flask and 1 g of biological product 6 was added. The flasks were incubated on a shaker (120 rpm) at 18-20 ° C. After 4 days, the oil content was determined in each flask. The results are presented in table. 2.
Как видно из табл. 1, биопрепарат способен утилизировать нефть в широком интервале значений pH, что позволяет использовать его для очистки почв и воды различной кислотности без их предварительной нейтрализации.As can be seen from the table. 1, the biological product is able to utilize oil in a wide range of pH values, which allows it to be used to clean soils and water of various acidity without their preliminary neutralization.
Пример 4. Участок тундровой почвы был загрязнен сырой нефтью с начальным содержанием нефти 60 г на 1 кг почвы. Для очистки почвы на 1 м обрабатываемой площади вносится 1 л озерной воды, 1 г биопрепарата 6 и 6 г нитроаммофоски. Средняя температура в период обработки составляла 13°C. Через 1,5 месяца содержание нефти в почве составляло 5,8-6 г на 1 кг почвы, т.е. около 90% нефти было разрушено.Example 4. A plot of tundra soil was contaminated with crude oil with an initial oil content of 60 g per 1 kg of soil. To clean the soil on 1 m of cultivated area, 1 l of lake water, 1 g of biological product 6 and 6 g of nitroammophoska are introduced. The average temperature during the treatment was 13 ° C. After 1.5 months, the oil content in the soil was 5.8-6 g per 1 kg of soil, i.e. about 90% of the oil was destroyed.
Пример 5. Обрабатывали амбар отстойника на нефтяной скважине объем 100 т, площадь 100 м2 (Север России, тундра). Исходное содержание нефти в воде амбара составляло 14,5 мг/л. На поверхностью амбара нанесли биопрепарат 6 (0,5 кг/т) и нитроаммофоску в концентрации 1,4 г/л с таким расчетом, чтобы на 1 м2 обрабатываемой поверхности расходовался 1 кг. Через 20 дней после однократной обработки содержание нефтепродуктов в воде снизилось до 0,07 мг/л.Example 5. The barn of the sump in an oil well was treated with a volume of 100 tons, an area of 100 m 2 (North of Russia, tundra). The initial oil content in the barn water was 14.5 mg / L. Biological product 6 (0.5 kg / t) and nitroammophoska in a concentration of 1.4 g / l were applied on the barn surface so that 1 kg was consumed per 1 m 2 of the treated surface. 20 days after a single treatment, the oil content in the water decreased to 0.07 mg / L.
Пример 6. Испытание биопрепарата проводили с использованием в качестве источника загрязнения моторного масла, содержащего флотский мазут в концентрации 0,5% и депарафинизат дизельного топлива в концентрации 10 об.%. К содержимому добавляли сухой порошок биопрепарата 6 (20,0 мг). Температура выращивания составляла 30°C, pH среды 7,0. В результате получили степень утилизации нефтепродуктов 98%. Это свойство биопрепарата позволяет рекомендовать его для очистки нефтешлама, почв, емкостей и др. объектов от нефтезагрязнений.Example 6. The test of a biological product was carried out using a motor oil containing marine fuel oil at a concentration of 0.5% and diesel dewaxing at a concentration of 10 vol.% As a source of contamination. Dry biopreparation 6 powder (20.0 mg) was added to the contents. The growing temperature was 30 ° C, pH of 7.0. As a result, a 98% degree of oil product utilization was obtained. This property of a biological product allows us to recommend it for cleaning oil sludge, soils, tanks and other objects from oil pollution.
Пример 7. Дерново-подзолистую почву с содержанием мазута 10% помещали в кювету. К содержимому добавляли соли азота и фосфора в соотношении N:P=1:2,3 и сухой порошок биопрепарата. Температура культивирования 25°C, pH среды 7,0. Почву периодически рыхлили и поддерживали влажность на уровне 60-80%. В течение 30 дней степень очистки составила 99%, титр клеток биопрепарата составил 108 мкл/г живых клеток. Это свойство биопрепарата позволяет рекомендовать его для очистки почв от нефтепродуктов.Example 7. Sod-podzolic soil with a fuel oil content of 10% was placed in a cuvette. To the contents were added salts of nitrogen and phosphorus in the ratio N: P = 1: 2.3 and dry powder of the biological product. The temperature of cultivation 25 ° C, pH of 7.0. The soil was periodically loosened and maintained at a moisture level of 60-80%. Within 30 days, the degree of purification was 99%, the titer of the biological product cells was 10 8 μl / g of living cells. This property of the biological product allows us to recommend it for cleaning soils from oil products.
По сравнению с аналогами заявляемый биопрепарат характеризуется высокой степенью очистки на уровне 99% и уменьшением времени культивирования, а также более высокой скоростью утилизации углеводородов и широкой областью применения для очистки от нефтепродуктов водной поверхности (морей, океанов), сточных вод нефтеперерабатывающей, нефтедобывающей, машиностроительной промышленности, пищевой промышленности (для очистки от масел), почвы и т.д.Compared with analogues, the claimed biological product is characterized by a high degree of purification at the level of 99% and a reduction in cultivation time, as well as a higher rate of hydrocarbon utilization and a wide range of applications for purification of oil from the water surface (seas, oceans), wastewater from the oil refining, oil producing, and machine-building industries , food industry (for cleaning from oils), soil, etc.
Биопрепарат апробирован в природных условиях. Нормы расхода препарата приведены в таблице 3.The biological product is tested in natural conditions. The consumption rates of the drug are shown in table 3.
Приведенные данные показали, что при использовании изобретения удалось создать эффективный, простой и экономичный биопрепарат - нефтедеструктор с высокой нефтедеструктирующей активностью, свойствами минерального удобрения и ростостимулирующим эффектом, с простым и рентабельным режимом получения, перспективный для очистки нефтезагрязненных почв, шламов, донных илов, осадка сточных вод, водоемов и резервуаров, в районах с коротким тепловым периодом.The above data showed that when using the invention it was possible to create an effective, simple and economical biological product - an oil destructor with high oil destructive activity, mineral fertilizer properties and growth-promoting effect, with a simple and cost-effective production mode, promising for cleaning oil-contaminated soils, sludges, bottom sludge, sewage sludge waters, reservoirs and reservoirs, in areas with a short thermal period.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013128882/10A RU2571219C2 (en) | 2013-06-25 | 2013-06-25 | Preparation for biodegradation of petroleum products "bioionit" and method of obtaining thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013128882/10A RU2571219C2 (en) | 2013-06-25 | 2013-06-25 | Preparation for biodegradation of petroleum products "bioionit" and method of obtaining thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013128882A RU2013128882A (en) | 2014-12-27 |
| RU2571219C2 true RU2571219C2 (en) | 2015-12-20 |
Family
ID=53278630
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013128882/10A RU2571219C2 (en) | 2013-06-25 | 2013-06-25 | Preparation for biodegradation of petroleum products "bioionit" and method of obtaining thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2571219C2 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2681831C2 (en) * | 2016-12-20 | 2019-03-12 | Акционерное общество "Альфахимпром" | Preparation for biodegradation of petroleum products and method for preparation thereof |
| RU2763428C1 (en) * | 2021-05-27 | 2021-12-29 | Общество с ограниченной ответственностью «Научно-производственное объединение «Волга-Экология» | Preparation for biodegradation of oil and oil products (oil destructor) |
| RU2779935C1 (en) * | 2022-03-24 | 2022-09-15 | Общество с ограниченной ответственностью "ЭкоСорбент" (ООО "ЭкоСорбент") | Means based on glauconite for immobilization of living bacterial cells |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2181701C2 (en) * | 2000-06-20 | 2002-04-27 | Лимбах Иван Юрьевич | Biological preparation "avalon" for cleaning environmental objects to remove petroleum and petroleum derivatives, and method of preparation thereof |
| RU2361686C2 (en) * | 2007-08-13 | 2009-07-20 | Институт химии нефти Сибирского отделения Российской академии наук | Biopreparation for cleaning soil and water from oil and oil products |
| RU2442668C1 (en) * | 2010-06-01 | 2012-02-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Волгоградский государственный университет" | Preparation for the biological treatment of the soil contaminated by chloroorganic substances attributed to emissions of chemical enterprises |
| WO2013007398A1 (en) * | 2011-07-13 | 2013-01-17 | BIOLAND, Ltd | Biological product for clearing of water, industrial wastewater and soil from chemicals, which are resistant to degradation and method for using the same |
-
2013
- 2013-06-25 RU RU2013128882/10A patent/RU2571219C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2181701C2 (en) * | 2000-06-20 | 2002-04-27 | Лимбах Иван Юрьевич | Biological preparation "avalon" for cleaning environmental objects to remove petroleum and petroleum derivatives, and method of preparation thereof |
| RU2361686C2 (en) * | 2007-08-13 | 2009-07-20 | Институт химии нефти Сибирского отделения Российской академии наук | Biopreparation for cleaning soil and water from oil and oil products |
| RU2442668C1 (en) * | 2010-06-01 | 2012-02-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Волгоградский государственный университет" | Preparation for the biological treatment of the soil contaminated by chloroorganic substances attributed to emissions of chemical enterprises |
| WO2013007398A1 (en) * | 2011-07-13 | 2013-01-17 | BIOLAND, Ltd | Biological product for clearing of water, industrial wastewater and soil from chemicals, which are resistant to degradation and method for using the same |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2681831C2 (en) * | 2016-12-20 | 2019-03-12 | Акционерное общество "Альфахимпром" | Preparation for biodegradation of petroleum products and method for preparation thereof |
| RU2763428C1 (en) * | 2021-05-27 | 2021-12-29 | Общество с ограниченной ответственностью «Научно-производственное объединение «Волга-Экология» | Preparation for biodegradation of oil and oil products (oil destructor) |
| RU2779935C1 (en) * | 2022-03-24 | 2022-09-15 | Общество с ограниченной ответственностью "ЭкоСорбент" (ООО "ЭкоСорбент") | Means based on glauconite for immobilization of living bacterial cells |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2013128882A (en) | 2014-12-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Atlas et al. | Stimulated petroleum biodegradation | |
| Huesemann | Guidelines for land‐treating petroleum hydrocarbon‐contaminated soils | |
| JPH0436758B2 (en) | ||
| JP2010516233A (en) | Bioremediation method for accelerated biodegradation of petroleum hydrocarbons in polar regions covered with sea ice, and a mixture of bacteria and enzymes as agents to perform the method | |
| Nduka et al. | Utilization of different microbes in bioremediation of hydrocarbon contaminated soils stimulated with inorganic and organic fertilizers | |
| FR2904248A1 (en) | Bio-assisted treatment of ground contaminated by hydrocarbons, comprises isolating and adding micro-organisms that release oil from contaminated soil, adding oil degrading micro-organisms and nitrifying and ventilating the micro-organisms | |
| WO2011074007A2 (en) | Process and composition for bioremediation of oily sludge | |
| RU2076150C1 (en) | Strain of bacterium acinetobacter species (bicoccum) used for soil and water treatment from petroleum products, strain of bacterium arthrobacter species used for soil and water treatment from petroleum products, strain of bacterium rhodococcus species used for soil and water treatment from petroleum products, method of biological treatment from petroleum pollution (variants) | |
| Sozina et al. | Microbiological remediation of oil-contaminated soils | |
| RU2681831C2 (en) | Preparation for biodegradation of petroleum products and method for preparation thereof | |
| RU2571219C2 (en) | Preparation for biodegradation of petroleum products "bioionit" and method of obtaining thereof | |
| Narmanova et al. | Biological products for soil and water purification from oil and petroleum products | |
| RU2516412C2 (en) | Preparation for purification of water and soil from oil pollution and method of obtaining thereof | |
| Wemedo et al. | Biodegradation potential of bacteria isolated from crude oil polluted site in South South, Nigeria | |
| RU2093478C1 (en) | Method of water and soil treatment from oil, petroleum products and polymeric additions in drilling fluid | |
| RU2317162C1 (en) | Preparation for microbiological treatment of oil slimes and ground polluted by petroleum products | |
| Bordoloi et al. | Analysis of recent patenting activities in the field of bioremediation of petroleum hydrocarbon pollutants present in the environment | |
| Raja et al. | Bioremediation by using of microbes and algae with special reference to coastline environment | |
| RU2114174C1 (en) | Consortium of yeast candida maltosa for biodegradation of petroleum pollution | |
| Titah et al. | Biodegradation of crude oil spill using Bacillus subtilis and Pseudomonas putida in sequencing method | |
| TWI589694B (en) | Acinetobacter junii ds44 isolate having the benzene and/or naphthalene degrading ability and uses of the same | |
| RU2678528C2 (en) | Preparation for methanol biodegradation and method for its manufacturing | |
| RU2191753C2 (en) | Biological preparation for removing crude oil and petroleum products from water and ground | |
| RU2402495C2 (en) | Method of processing acid tar (versions) | |
| RU2763428C1 (en) | Preparation for biodegradation of oil and oil products (oil destructor) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20150410 |
|
| FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20150805 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160626 |