RU2567046C1 - Method for producing biological reference material for producing standard blood composition samples containing toxic metal, and material prepared with using this method - Google Patents
Method for producing biological reference material for producing standard blood composition samples containing toxic metal, and material prepared with using this method Download PDFInfo
- Publication number
- RU2567046C1 RU2567046C1 RU2014145666/15A RU2014145666A RU2567046C1 RU 2567046 C1 RU2567046 C1 RU 2567046C1 RU 2014145666/15 A RU2014145666/15 A RU 2014145666/15A RU 2014145666 A RU2014145666 A RU 2014145666A RU 2567046 C1 RU2567046 C1 RU 2567046C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- water
- blood
- animal
- mercury
- cadmium
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Группа изобретений относится к биотехнологии, а именно к способу получения биологического референтного материала для производства стандартных образцов состава крови, содержащих ртуть, кадмий, свинец, а также к материалу, полученному предлагаемым способом, и может быть использовано в токсикологии, медицине, ветеринарии при определении содержания указанных токсичных металлов в крови.The group of inventions relates to biotechnology, and in particular to a method for producing a biological reference material for the production of standard samples of blood composition containing mercury, cadmium, lead, as well as to the material obtained by the proposed method, and can be used in toxicology, medicine, veterinary medicine in determining the content specified toxic metals in the blood.
В изобретении используется следующая терминология.The following terminology is used in the invention.
Биоматериал - часть органов, тканей, клеточных или субклеточных структур организма.Biomaterial - a part of organs, tissues, cellular or subcellular structures of the body.
Затравка - введение токсичного металла тем или иным способом в организм животного.Seeding - the introduction of a toxic metal in one way or another into the body of an animal.
Парентерально - введение вещества в организм, при котором оно минует желудочно-кишечный тракт.Parenteral - the introduction of a substance into the body, in which it bypasses the gastrointestinal tract.
Референтный материал - «в качестве материала (вещества) стандартного образца может быть использован референтный материал, т.е. материал (вещество) достаточно однородный и стабильный по отношению к одному или нескольким определенным свойствам, применяемый в соответствии с назначением в измерительном процессе [Р.50.2.056-2007.ГСИ. Образцы материалов и веществ стандартные. Термины и определения; ISO VIM: 1993»].Reference material - “the reference material may be used as the material (substance) of the standard sample, i.e. material (substance) is quite homogeneous and stable with respect to one or several specific properties, used in accordance with the purpose in the measuring process [R.50.2.056-2007.GSI. Samples of materials and substances are standard. Terms and Definitions; ISO VIM: 1993 ”].
Стандартный образец (состава) - [термин указан с учетом его определений, приведенных в ГОСТ 8.315-97, а также в международных нормативных документах] образец вещества или материала, химический состав или физические свойства которых:Standard sample (composition) - [the term is specified taking into account its definitions given in GOST 8.315-97, as well as in international regulatory documents] a sample of a substance or material whose chemical composition or physical properties are:
- типичны для конкретной группы веществ или материалов;- typical for a specific group of substances or materials;
- определены с необходимой точностью;- identified with the necessary accuracy;
- отличаются высоким постоянством;- differ in high constancy;
- удостоверены сертификатом.- certified by a certificate.
Токсичный - ядовитый, вызывающий негативные изменения в структурах и/или функциях молекулярных, надмолекулярных, клеточных образований, тканях, органах и организме в целом.Toxic - poisonous, causing negative changes in the structures and / or functions of molecular, supramolecular, cellular formations, tissues, organs and the body as a whole.
Токсичные металлы (далее - ТМ) - условная группа металлов, не несущих биологической функции в организме, но склонных к бионакоплению, токсичные даже в небольших количествах [Загрязнение Арктики 2002. Программа по мониторингу и оценке окружающей среды Арктики. АМАП. Осло. - 2002. - 110 с.], к которым относят свинец, ртуть, кадмий, мышьяк, таллий, ванадий, никель, хром, уран и иногда другие металлы.Toxic metals (hereinafter referred to as HM) are a conditional group of metals that do not have a biological function in the body, but are prone to bioaccumulation, toxic even in small quantities [Pollution of the Arctic 2002. Program for monitoring and evaluating the environment of the Arctic. AMAP. Oslo. - 2002. - 110 S.], which include lead, mercury, cadmium, arsenic, thallium, vanadium, nickel, chromium, uranium and sometimes other metals.
Мультиэлементный - содержащий несколько ТМ, в данном случае ртуть, кадмий и свинец.Multielement - containing several HM, in this case mercury, cadmium and lead.
Для определения содержания ТМ в различного вида материалах используются методы анализа, в частности, такие как нейтронно-активационный, атомно-эмиссионный с дугой постоянного тока, атомно-эмиссионный с индуктивно-связанной плазмой, масс-спектрометрический с индуктивно-связанной плазмой, атомно-абсорбционный с электротермической атомизацией, атомно-абсорбционный с атомизацией в пламени, инверсионный вольтамперометрический, которые требуют применения соответствующих материалов сравнения - стандартных образцов, содержащих анализируемый ТМ (аналит) в определенных количествах.To determine the content of HM in various types of materials, analysis methods are used, in particular, neutron activation, atomic emission with a direct current arc, atomic emission with inductively coupled plasma, mass spectrometric with inductively coupled plasma, atomic absorption with electrothermal atomization, atomic absorption with flame atomization, inversion voltammetric, which require the use of appropriate comparison materials - standard samples containing analysis my TM (analyte) in the specified amounts.
Для определения содержания ТМ известно использование стандартных образцов, изготовленных на основе водных растворов солей ТМ [см., например, Государственный Стандартный Образец Растворов Ртути (ГСО РР) - Госреестр №8004-93].To determine the content of HM, it is known to use standard samples made on the basis of aqueous solutions of salts of HM [see, for example, the State Standard Sample of Mercury Solutions (GSO RR) - State Register No. 8004-93].
Рассматриваемые стандартные образцы могут обеспечить надежность результатов анализа в тех случаях, когда исследуемый материал также представляет собой водный раствор ТМ или близок к таковому по своим свойствам.The considered standard samples can ensure the reliability of the analysis results in those cases when the test material is also an aqueous solution of TM or close to that in its properties.
Однако указанные стандартные образцы мало пригодны для анализа биоматериалов, которые далеки по свойствам от водных растворов и имеют сложную матричную структуру.However, these standard samples are of little use for the analysis of biomaterials, which are far from the properties of aqueous solutions and have a complex matrix structure.
Крайне важным для получения точных результатов анализа является обеспечение максимально возможного подобия матрицы стандартного образца и исследуемого материала, за счет чего достигается сходство условий (химические связи, валентности, молекулярные структуры и пр.), в которых находится ТМ (аналит) в стандартном образце и в исследуемом материале.It is extremely important to obtain accurate analysis results that the maximum possible similarity of the matrix of the standard sample and the material under study is achieved, due to which the similarity of conditions (chemical bonds, valencies, molecular structures, etc.) in which the TM (analyte) is located in the standard sample and in the studied material.
С этой точки зрения более надежными и перспективными являются референтные материалы для стандартных образцов состава крови, изготовленные из цельной крови.From this point of view, reference materials for standard samples of blood composition made from whole blood are more reliable and promising.
Так, известны биологические референтные материалы [СО состава крови, содержащей свинец, номер в госреестре ГСО 9104 - 2008, номер свидетельства 3677; СО состава крови, содержащей ртуть, номер в госреестре ГСО 9653 - 2010, номер свидетельства 1579], получаемые из крови животного или человека, в которую после отбора добавляют водорастворимые соли ТМ.So, biological reference materials are known [СО of blood composition containing lead, number in the state registry of GSO 9104 - 2008, certificate number 3677; RM of the composition of blood containing mercury, state registry number GSO 9653 - 2010, certificate number 1579], obtained from the blood of an animal or person, to which water-soluble salts of TM are added after selection.
Однако введенный в рассматриваемый референтный материал ТМ не проходит естественную ассимиляцию живым организмом, в связи с чем не достигается адекватность матрицы стандартных и исследуемых образцов.However, the TM introduced into the reference material under consideration does not undergo natural assimilation by a living organism, and therefore the adequacy of the matrix of standard and studied samples is not achieved.
Известны биологические референтные материалы, полученные из крови животного после предварительного алиментарного введения в его организм водорастворимых солей ТМ, таких как ртуть, кадмий, свинец [см., например, SRM 966 NIST, RU 2431665].Known biological reference materials obtained from the blood of an animal after preliminary alimentary introduction into its body of water-soluble salts of TM, such as mercury, cadmium, lead [see, for example, SRM 966 NIST, RU 2431665].
Получаемые из указанных референтных материалов стандартные образцы состава крови имеют матрицу, близкую к матрице исследуемых образцов крови, поскольку ТМ внедрены в референтный материал в результате естественной ассимиляции организмом животного.Standard samples of blood composition obtained from the indicated reference materials have a matrix close to the matrix of the studied blood samples, since HMs are introduced into the reference material as a result of natural assimilation by the animal’s body.
В качестве ближайших аналогов заявляемых способа и материала выбраны способ получения биологического референтного материала и референтный материал, описанные в RU 2431665.As the closest analogues of the claimed method and material, a method of obtaining a biological reference material and a reference material described in RU 2431665 are selected.
Рассматриваемый способ включает алиментарное введение в организм лабораторных крыс водорастворимых солей ртути или кадмия, декапитацию крыс и отбор крови, содержащей указанные токсиканты, а также замораживание отобранной крови и ее лиофилизацию.The method under consideration includes the alimentary administration of water-soluble salts of mercury or cadmium to laboratory rats, decapitation of rats and selection of blood containing these toxicants, as well as freezing and freezing of the blood sampled.
Рассматриваемый референтный материал представляет собой бурый кристаллический порошок органоминеральной матрицы (лиофилизат) крови и характеризуется тем, что он получен в соответствии с описанным выше способом.The reference material under consideration is a brown crystalline powder of an organomineral matrix (lyophilisate) of blood and is characterized in that it is obtained in accordance with the method described above.
Однако для алиментарного введения ТМ в организм животного, обеспечивающего ассимиляцию указанных токсикантов и их бионакопление в крови животного, требуются значительное время и большие трудозатраты. Так, для достижения концентрации ртути 41 мкг/дм3 в отобранной крови крыс требуется ежесуточная затравка животных указанным токсикантом в течение 30 дней. Такие же трудозатраты и длительность процесса затравки необходимы для достижения в крови крыс концентрации кадмия 39 мкг/дм3.However, for the alimentary introduction of TM into the animal’s body, which ensures the assimilation of these toxicants and their bioaccumulation in the animal’s blood, considerable time and labor are required. So, to achieve a mercury concentration of 41 μg / dm 3 in the selected blood of rats, a daily seed of animals with the indicated toxicant is required for 30 days. The same labor costs and the duration of the seed process are necessary to achieve a cadmium concentration of 39 μg / dm 3 in the blood of rats.
Задачей заявляемой группы изобретений является снижение трудозатрат и сокращение длительности процесса получения биологического референтного материала для приготовления стандартных образцов состава крови и получение указанного референтного материала.The task of the claimed group of inventions is to reduce labor costs and reduce the duration of the process of obtaining biological reference material for the preparation of standard samples of blood composition and obtain the specified reference material.
Сущность изобретения заключается в том, что согласно заявляемому способу, включающему введение в организм животного, по меньшей мере, одного токсичного металла в виде его водорастворимой соли, отбор крови животного после анализа на содержание в ней токсичного металла, а также замораживание отобранной крови и ее лиофилизацию, согласно изобретению введение в организм животного токсичного металла в виде его водорастворимой соли осуществляют парентерально путем инъекций животному водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, или водорастворимую соль кадмия, или водорастворимую соль свинца, или водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, водорастворимую соль кадмия и водорастворимую соль свинца.The essence of the invention lies in the fact that according to the claimed method, which includes introducing into the animal’s body at least one toxic metal in the form of its water-soluble salt, taking the blood of the animal after analysis of the toxic metal content in it, as well as freezing the selected blood and lyophilization , according to the invention, the introduction into the body of an animal of a toxic metal in the form of its water-soluble salt is carried out parenterally by injection of an aqueous solution of a mercury containing a water-soluble salt of mercury to the animal, or a water-soluble salt of cadmium, or a water-soluble salt of lead, or an aqueous solution containing a water-soluble salt of mercury, a water-soluble salt of cadmium and a water-soluble salt of lead.
В частном случае реализации способа осуществляют введение токсичного металла в организм животного путем инъекций ему водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, водорастворимую соль кадмия и водорастворимую соль свинца, а отбор крови осуществляют по достижении содержания в ней ртути от 20 мкг/дм3 до 60 мкг/дм3, кадмия от 10 мкг/дм3 до 50 мкг/дм3, свинца от 150 мкг/дм3 до 500 мкг/дм3.In the particular case of the implementation of the method, toxic metal is introduced into the animal’s body by injecting it with an aqueous solution containing a water-soluble mercury salt, a water-soluble cadmium salt and a water-soluble lead salt, and blood sampling is carried out when the mercury content in it is from 20 μg / dm 3 to 60 μg / dm 3 , cadmium from 10 μg / dm 3 to 50 μg / dm 3 , lead from 150 μg / dm 3 to 500 μg / dm 3 .
В частном случае реализации способа в качестве животного используют кролика, при этом применяют прижизненный отбор крови.In the particular case of the method, a rabbit is used as an animal, while intravital blood sampling is used.
Сущность изобретения в отношении биологического референтного материала заключается в том, что он получен заявляемым способом.The invention with respect to the biological reference material is that it is obtained by the claimed method.
В частном случае реализации изобретения биологический референтный материал получен из крови животного при введении в его организм токсичного металла путем инъекций животному водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, водорастворимую соль кадмия и водорастворимую соль свинца, по достижении в ней содержания ртути от 20 мкг/дм3 до 60 мкг/дм3, кадмия от 10 мкг/дм3 до 50 мкг/дм3, свинца от 150 мкг/дм3 до 500 мкг/дм3, при этом содержание ртути, кадмия и свинца в референтном материале составляет соответственно от 133 мг до 400 мг, от 66,7 мг до 333 мг и от 1000 мг до 3330 мг на один грамм лиофилизата.In the particular case of the invention, the biological reference material is obtained from the blood of an animal when a toxic metal is introduced into its body by injecting an aqueous solution of a mercury salt, a water-soluble cadmium salt, and a water-soluble lead salt into the animal after reaching a mercury content of 20 μg / dm 3 up to 60 μg / dm 3 , cadmium from 10 μg / dm 3 to 50 μg / dm 3 , lead from 150 μg / dm 3 to 500 μg / dm 3 , while the contents of mercury, cadmium and lead in the reference material are respectively from 133 mg to 400 mg, from 66.7 mg to 333 mg and from 1000 mg to 3330 mg per gram of lyophilisate.
В заявляемом способе используемые для приготовления референтного материала ТМ оказываются внедренными в его матрицу в результате естественных метаболических процессов, что обеспечивает высокую степень адекватности матрицы референтного материала и исследуемых образцов крови. При этом достигается естественное многообразие форм внедренных в матрицу референтного материала ТМ, в частности ртути, в которых ТМ может находиться в живом организме.In the inventive method, the TMs used to prepare the reference material are incorporated into its matrix as a result of natural metabolic processes, which provides a high degree of adequacy of the matrix of the reference material and the studied blood samples. At the same time, a natural diversity of forms of TM introduced into the matrix of the reference material is achieved, in particular mercury, in which the TM can be in a living organism.
Принципиально важным в заявляемом способе является то, что предварительное введение в организм животного ТМ осуществляют парентерально путем инъекций животному водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, или водорастворимую соль кадмия, или водорастворимую соль свинца, или водного раствора, содержащего водорастворимые соли трех указанных ТМ.It is fundamentally important in the inventive method that the preliminary introduction into the animal’s body of TM is carried out parenterally by injecting the animal with an aqueous solution containing a water-soluble salt of mercury, or a water-soluble salt of cadmium, or a water-soluble salt of lead, or an aqueous solution containing water-soluble salts of the three indicated TM.
Как показали исследования динамики бионакопления ТМ в крови животных, в частности крыс и кроликов, при инъекционном способе введения водорастворимых солей ртути, кадмия, свинца или солей трех указанных ТМ в организм животного происходит очень быстрое (в течение 1-2 дней) увеличение содержания указанных ТМ в крови животного, выход на стабильный уровень концентраций ТМ и сохранение достигнутого стабильного уровня концентраций в течение от 3 до 10 дней.Studies of the dynamics of bioaccumulation of TM in the blood of animals, in particular rats and rabbits, showed that with the injection method of introducing water-soluble salts of mercury, cadmium, lead or salts of these three TMs into the animal’s body, a very rapid (within 1-2 days) increase in the content of these TM in the animal’s blood, reaching a stable level of TM concentrations and maintaining the achieved stable level of concentrations for 3 to 10 days.
Таким образом, парентеральное введение животному указанных выше ТМ приводит к достаточно быстрому накоплению, в течение 3-х - 8-ми дней, в его крови ртути, кадмия, свинца. При этом заявляемый способ дает возможность получения референтного материала, содержащего один из указанных ТМ (моноэлеметный материал) или все три указанные ТМ (мультиэлементный материал).Thus, parenteral administration to the animal of the above TM leads to a fairly rapid accumulation, within 3 to 8 days, in its blood of mercury, cadmium, lead. Moreover, the inventive method makes it possible to obtain a reference material containing one of these TM (mono-element material) or all three of these TM (multi-element material).
Получаемый по заявляемому способу мультиэлементный референтный материала может быть использован для приготовления стандартных образцов мультиэлементного состава крови, применяемых при проведении наиболее востребованного в современной токсикологии анализа крови на содержание ртути, кадмия и свинца.Obtained according to the claimed method, the multi-element reference material can be used to prepare standard samples of the multi-element composition of the blood used in the analysis of blood most demanded in modern toxicology for the content of mercury, cadmium and lead.
В качестве животных - доноров для получения референтного материала в соответствии с заявляемым способом могут быть использованы такие животные, как крысы, кролики, козы и др.As animal donors for obtaining reference material in accordance with the claimed method can be used such animals as rats, rabbits, goats, etc.
Парентеральное введение указанного инъекционного раствора может осуществляться, в частности, с помощью внутримышечных, внутрибрюшинных инъекций.Parenteral administration of the indicated injection solution can be carried out, in particular, by intramuscular, intraperitoneal injection.
Конкретное требуемое содержание ТМ в референтном материале обеспечивается дозированным введением животному инъекционного раствора, содержащего определенное количество ТМ, и отбором крови по достижении содержания в ней ТМ, обеспечивающего требуемую концентрацию ТМ в референтном материале. Содержание ТМ в крови животного определяют путем анализа отбираемой крови.The specific required content of HM in the reference material is ensured by dosing an animal with an injection solution containing a certain amount of HM and taking blood to achieve the content of HM in it, which provides the required concentration of HM in the reference material. The content of TM in the blood of an animal is determined by analysis of the sampled blood.
Таким образом, техническим результатом, достигаемым при реализации изобретения в отношении заявляемого способа, является обеспечение быстрого контролируемого накопления в крови животных указанных выше ТМ, что является необходимым условием получения соответствующих референтных материалов, пригодных для изготовления стандартных образцов крови, содержащих ртуть, кадмии, свинец.Thus, the technical result achieved during the implementation of the invention in relation to the proposed method is to ensure rapid controlled accumulation in the blood of animals of the above TM, which is a necessary condition for obtaining the corresponding reference materials suitable for the manufacture of standard blood samples containing mercury, cadmium, lead.
Указанный технический результат обеспечивает значительное сокращение длительности процесса получения биологического референтного материала, уменьшение трудозатрат, поскольку в несколько раз сокращается время работы с животными, снижаются расходы по содержанию животных.The specified technical result provides a significant reduction in the duration of the process of obtaining biological reference material, reducing labor costs, since the time spent working with animals is reduced several times, and the cost of keeping animals is reduced.
Это особенно существенно при получении референтного материала с относительно большой требуемой концентрацией ТМ.This is especially significant when obtaining a reference material with a relatively large required concentration of HM.
В случае введения в организм животного водного раствора, содержащего водорастворимые соли ртути, кадмия и свинца, и осуществления отбора крови животного по достижении содержания в ней ртути от 20 мкг/дм3 до 60 мкг/дм3, кадмия от 10 мкг/дм3 до 50 мкг/дм3, свинца от 150 мкг/дм3 до 500 мкг/дм3, заявляемый способ обеспечивает получение мультиэлементного референтного материала с относительно большим содержанием указанных ТМ, пригодного для изготовления стандартных образцов мультиэлементного состава крови, используемых при диагностике интоксикаций ртутью, кадмием и свинцом.In the case of the introduction into the animal’s body of an aqueous solution containing water-soluble salts of mercury, cadmium and lead, and the selection of blood of the animal upon reaching a mercury content of 20 μg / dm 3 to 60 μg / dm 3 , cadmium from 10 μg / dm 3 to 50 μg / dm 3 , lead from 150 μg / dm 3 to 500 μg / dm 3 , the inventive method provides a multi-element reference material with a relatively high content of these TM, suitable for the manufacture of standard samples of the multi-element blood composition used in the diagnosis of intoxication mercury, cadmium and lead.
В случае использования в качестве животного кролика удается произвести прижизненный отбор крови, получить ее достаточный объем и использовать кролика в качестве донора многократно. Важно, что кровь кролика близка по свойствам к крови человека, что в большей степени обеспечивает адекватность матрицы референтного материала и исследуемых образцов крови.In the case of using a rabbit as an animal, it is possible to perform intravital blood sampling, to obtain a sufficient volume of it, and to use the rabbit repeatedly as a donor. It is important that the rabbit blood is close in properties to human blood, which to a greater extent ensures the adequacy of the matrix of the reference material and the studied blood samples.
Заявляемый биологический референтный материал представляет собой бурый кристаллический порошок органоминеральной матрицы (лиофилизат крови) с внедренным в указанную матрицу ртутью, или кадмием, или свинцом, или тремя указанными ТМ и характеризуется тем, что он получен в соответствии с заявляемым способом.The inventive biological reference material is a brown crystalline powder of an organomineral matrix (blood lyophilisate) with mercury, or cadmium, or lead, or three of these TMs embedded in the indicated matrix, and is characterized in that it is obtained in accordance with the claimed method.
Заявляемый референтный материал может иметь различное содержание ТМ, которое обеспечивает изготовление стандартных образцов состава крови с требуемой концентрацией ТМ.The inventive reference material may have a different content of TM, which ensures the production of standard samples of the blood composition with the required concentration of TM.
Таким образом, техническим результатом, достигаемым при реализации заявляемого изобретения в отношении материала, является получение референтного материала, содержащего ртуть, или кадмий, или свинец, или все три указанные ТМ, предназначенного для приготовления стандартных образцов состава крови, содержащих ТМ.Thus, the technical result achieved by the implementation of the claimed invention in relation to the material is to obtain a reference material containing mercury, or cadmium, or lead, or all three of these TM, intended for the preparation of standard samples of blood composition containing TM.
В случае, когда биологический референтный материал получен из крови животного, в организм которого токсичные металлы введены путем инъекций водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, водорастворимую соль кадмия и водорастворимую соль свинца, и в которой содержание ртути, кадмия и свинца составляет соответственно от 20 мкг/дм3 до 60 мкг/дм3, от 10 мкг/дм3 до 50 мкг/дм3 и от 150 мкг/дм3 до 500 мкг/дм3, обеспечивается относительно высокое содержание ртути, кадмия и свинца в мультиэлементом референтном материале соответственно от 133 мг до 400 мг, от 66,7 мг до 333 мг и от 1000 мг до 3330 мг на один грамм лиофилизата.In the case where the biological reference material is obtained from the blood of an animal into whose body toxic metals are injected by injecting an aqueous solution containing a water-soluble salt of mercury, a water-soluble salt of cadmium and a water-soluble salt of lead, and in which the content of mercury, cadmium and lead is respectively 20 μg / dm 3 to 60 μg / dm 3 , from 10 μg / dm 3 to 50 μg / dm 3 and from 150 μg / dm 3 to 500 μg / dm 3 , a relatively high content of mercury, cadmium and lead in the multi-element reference material, respectively from 133 m to 400 mg, from 66.7 mg to 333 mg, and 1000 mg to 3330 mg per gram of freeze-dried product.
Заявляемый способ осуществляют следующим образом.The inventive method is as follows.
Проводят подготовку животного к процессу получения биологического референтного материала, выдерживая животное в карантине в течение времени, необходимого для его адаптации к условиям содержания.The animal is prepared for the process of obtaining the biological reference material, keeping the animal in quarantine for the time necessary for its adaptation to the conditions of detention.
Выбирают суточную затравочную дозу - количество вводимого в течение суток ТМ на 1 кг массы животного. При этом величина затравочной дозы должна обеспечить требуемое содержание ТМ в референтном материале и определяется на основании опытных данных по изучению влияния величины дозы на содержание ТМ в крови экспериментального животного.Choose a daily seed dose - the amount of TM administered per day per 1 kg of animal weight. In this case, the seed dose should provide the required TM content in the reference material and is determined on the basis of experimental data on the influence of the dose on the TM content in the blood of an experimental animal.
Готовят инъекционный раствор, содержащий водорастворимую соль ртути, или водорастворимую соль кадмия, или водорастворимую соль свинца, или раствор, содержащий водорастворимые соли всех трех указанных ТМ.An injection solution is prepared containing a water-soluble salt of mercury, or a water-soluble salt of cadmium, or a water-soluble salt of lead, or a solution containing water-soluble salts of all three of these TM.
В качестве водорастворимых солей ртути, кадмия, свинца могут быть использованы, в частности, ацетаты или нитраты указанных ТМ, характеризующиеся достаточно высокой стойкостью и растворимостью в воде.As water-soluble salts of mercury, cadmium, lead can be used, in particular, acetates or nitrates of the indicated TM, characterized by a sufficiently high resistance and solubility in water.
Чтобы избежать инфильтрации тканей при инъекции, в качестве основы для инъекционного раствора используют физиологический раствор, в частности раствор, полученный из расчета растворения одной таблетки реактива Рингера-Локка в 100 см3 теплой дистиллированной воды (физиологический раствор Рингера-Локка).In order to avoid tissue infiltration during injection, physiological saline is used as the basis for the injection solution, in particular, the solution obtained by dissolving one tablet of the Ringer-Locke reagent in 100 cm 3 of warm distilled water (Ringer-Locke physiological solution).
Концентрацию водорастворимой соли ТМ в инъекционном растворе выбирают, исходя из величины суточной затравочной дозы с учетом обеспечения физиологически приемлемого объема инъекционного раствора для одной инъекции. Указанный объем, в частности, для кролика составляет 0,5 см3, а для крыс составляет 0,1 см3 на 1 кг массы животного.The concentration of the water-soluble salt of TM in the injection solution is selected based on the value of the daily seed dose, taking into account the physiologically acceptable volume of the injection solution for one injection. The specified volume, in particular, for a rabbit is 0.5 cm 3 and for rats is 0.1 cm 3 per 1 kg of animal weight.
Осуществляют парентеральное введение в организм животного ТМ путем инъекций животному водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, или водорастворимую соль кадмия, или водорастворимую соль свинца, или водорастворимые соли трех указанных ТМ.Parenteral administration of TM to the animal is carried out by injecting the animal with an aqueous solution containing a water-soluble salt of mercury, or a water-soluble salt of cadmium, or a water-soluble salt of lead, or water-soluble salts of the three indicated TM.
Отбор крови животного осуществляют по достижении в ней требуемой концентрации ТМ, которая определяется путем анализа крови на содержание в ней ТМ.The blood sampling of the animal is carried out upon reaching the required concentration of TM in it, which is determined by analyzing the blood for the content of TM in it.
Отобранную кровь расфасовывают и лиофилизуют.The collected blood is packaged and lyophilized.
В результате осуществления способа получают биологический референтный материал, представляющий собой лиофилизат цельной крови животного в виде красно-бурого порошка с требуемым содержанием ртути, или кадмия, или свинца или трех указанных ТМ.As a result of the method, a biological reference material is obtained, which is a lyophilizate of the whole blood of an animal in the form of a red-brown powder with the required content of mercury, or cadmium, or lead or three of these TM.
Материал хранят и транспортируют в укупоренной стеклянной таре при температуре +5±2°C.The material is stored and transported in a sealed glass container at a temperature of + 5 ± 2 ° C.
Ниже приведены примеры осуществления группы изобретений.The following are examples of the implementation of the group of inventions.
Пример 1Example 1
Получали биологический мультиэлементный референтный материал для приготовления стандартных образцов состава крови, содержащих свинец, кадмий и ртуть.Received a biological multi-element reference material for the preparation of standard samples of blood composition containing lead, cadmium and mercury.
В качестве животных использовали кроликов с массой тела от 2 до 3 кг.Rabbits with a body weight of 2 to 3 kg were used as animals.
Для парентерального введения на основе физиологического раствора Рингера-Локка готовили инъекционный раствор, содержащий водные растворы ацетатов свинца, ртути и кадмия, подкисленные для устойчивости в водной среде уксусной кислотой до рН 3,5-4,5.For parenteral administration, an injection solution containing aqueous solutions of lead, mercury and cadmium acetates acidified for stability in an aqueous medium with acetic acid to a pH of 3.5-4.5 was prepared on the basis of Ringer-Locke physiological saline.
В течение 3-х дней осуществляли ежесуточное парентеральное введение кролику (внутримышечно) в заднюю лапу из расчета 0,5 см3 на 1 кг массы животного инъекционного раствора, в котором концентрация свинца составляла 20 мг/мл, концентрация кадмия составляла 2,0 мг/мл и концентрация ртути составляла 0,6 мг/мл, что соответствовало суточной затравочной дозе указанных ТМ соответственно 10,0 мг; 1,0 мг и 0,3 мг на 1 кг массы животного (в пересчете на катион каждого из ТМ).For 3 days, a daily parenteral administration to the rabbit (intramuscularly) in the hind paw was carried out at the rate of 0.5 cm 3 per 1 kg of animal injection, in which the lead concentration was 20 mg / ml, the cadmium concentration was 2.0 mg / ml and the mercury concentration was 0.6 mg / ml, which corresponded to a daily seed dose of the indicated TM, respectively 10.0 mg; 1.0 mg and 0.3 mg per 1 kg of animal weight (in terms of the cation of each TM).
По окончании 3-х суток с начала процедуры затравки осуществляли отбор крови кролика. При этом предварительно кролика обездвиживали путем внутрибрюшинного введения ему 20-40% раствора уретана в физиологическом растворе Рингера-Локка. Вскрывали сонную артерию кролика и с помощью системы вакуумного забора собирали кровь в подготовленную емкость.At the end of 3 days from the beginning of the seed procedure, rabbit blood was sampled. In this case, the rabbit was previously immobilized by the intraperitoneal injection of a 20-40% solution of urethane in physiological Ringer-Locke saline. The rabbit carotid artery was opened and blood was collected in a prepared container using a vacuum sampling system.
Как показал анализ отобранной крови содержание в ней свинца, кадмия и ртути составляло соответственно 296±26,8 мкг/дм3, 43,7±57 мкг/дм3, 36,4±3,3 мкг/дм3.As shown by the analysis of the selected blood, the content of lead, cadmium and mercury in it was 296 ± 26.8 μg / dm 3 , 43.7 ± 57 μg / dm 3 , 36.4 ± 3.3 μg / dm 3, respectively.
Отобранную кровь расфасовывали по 3 мл в стеклянные флаконы, подвергали замораживанию в течение 10 часов при температуре не выше -15°C. Далее проводили лиофилизацию крови при давлении не более 0,200 mBar и температуре ниже -50°C до постоянного веса.The selected blood was packaged in 3 ml in glass bottles, subjected to freezing for 10 hours at a temperature not exceeding -15 ° C. Then, blood was lyophilized at a pressure of not more than 0.200 mBar and a temperature below -50 ° C to constant weight.
Получили мультиэлементный референтный материал, представляющий собой лиофилизат цельной крови животного в виде красно-бурого порошка с содержанием ртути 247 мкг, кадмия 291 мкг и свинца 1973 мкг на один грамм лиофилизата.A multi-element reference material was obtained, which was a lyophilisate of the whole blood of an animal in the form of a red-brown powder with a mercury content of 247 μg, cadmium 291 μg and lead 1973 μg per gram of lyophilisate.
Пример 2Example 2
Получали биологический мультиэлементный референтный материал для приготовления стандартных образцов состава крови, содержащих свинец, кадмий и ртуть.Received a biological multi-element reference material for the preparation of standard samples of blood composition containing lead, cadmium and mercury.
В качестве животных использовали кроликов с массой тела от 2 до 3 кг.Rabbits with a body weight of 2 to 3 kg were used as animals.
Для парентерального введения на основе физиологического раствора Рингера-Локка готовили инъекционный раствор, содержащий водные растворы нитратов свинца, ртути и кадмия.For parenteral administration, an injection solution containing aqueous solutions of lead, mercury and cadmium nitrates was prepared on the basis of Ringer-Locke physiological saline.
В течение 3 суток осуществляли ежесуточное парентеральное введение кролику внутримышечно в заднюю лапу по 0,5 см3 инъекционного раствора, в котором концентрация свинца составляла 50 мг/мл, концентрация кадмия составляла 2 мг/мл и концентрация ртути составляла 0,6 мг/мл, что соответствовало суточной затравочной дозе указанных ТМ соответственно 25 мг; 2,0 мг и 0,3 мг на 1 кг массы животного (в пересчете на катион каждого из ТМ).For 3 days, a daily administration of a 0.5 cm 3 injection solution of rabbit intramuscularly into the hind paw was carried out, in which the concentration of lead was 50 mg / ml, the concentration of cadmium was 2 mg / ml and the concentration of mercury was 0.6 mg / ml, which corresponded to a daily starting dose of the indicated TM, respectively 25 mg; 2.0 mg and 0.3 mg per 1 kg of animal weight (in terms of the cation of each TM).
По окончании 3 суток с начала процедуры затравки осуществляли отбор крови кролика. При этом предварительно кролика обездвиживали путем внутрибрюшинного введения ему 20-40% раствора уретана в физиологическом растворе Рингера-Локка. Вскрывали сонную артерию кролика и с помощью системы вакуумного забора кровь собирали в подготовленную емкость.At the end of 3 days from the start of the seed procedure, rabbit blood was sampled. In this case, the rabbit was previously immobilized by the intraperitoneal injection of a 20-40% solution of urethane in physiological Ringer-Locke saline. The rabbit carotid artery was opened and blood was collected in a prepared container using a vacuum sampling system.
Как показал анализ отобранной крови, содержание в ней свинца, кадмия и ртути составляло соответственно 163±26 мкг/дм3, 7,1±1,3 мкг/дм3 и 25,1±4,1 мкг/дм3.As the analysis of the selected blood showed, the content of lead, cadmium and mercury in it was 163 ± 26 μg / dm 3 , 7.1 ± 1.3 μg / dm 3 and 25.1 ± 4.1 μg / dm 3, respectively.
Отобранную кровь расфасовывали по 3 мл в стеклянные флаконы, подвергали замораживанию в течение 10 часов при температуре не выше -15°C. Далее проводили лиофилизацию крови при давлении не более 0,200 mBar и температуре ниже -50°C до постоянного веса.The selected blood was packaged in 3 ml in glass bottles, subjected to freezing for 10 hours at a temperature not exceeding -15 ° C. Then, blood was lyophilized at a pressure of not more than 0.200 mBar and a temperature below -50 ° C to constant weight.
Получили мультиэлементный референтный материал, представляющий собой лиофилизат цельной крови животного в виде красно-бурого порошка с содержанием свинца - 1087 мкг, кадмия - 47,3 мкг и ртути - 167 мкг на один грамм лиофилизата.A multi-element reference material was obtained, which is a lyophilizate of the whole blood of an animal in the form of a red-brown powder with lead content of 1087 μg, cadmium - 47.3 μg and mercury - 167 μg per gram of lyophilisate.
Пример 3Example 3
Получали биологический референтный материал для приготовления стандартных образцов состава крови, содержащих свинец.Received biological reference material for the preparation of standard blood samples containing lead.
В качестве животных-доноров использовали лабораторных белых крыс с массой тела от 180 г до 200 г.Laboratory white rats weighing 180 g to 200 g were used as donor animals.
Для парентерального введения на основе физиологического раствора Рингера-Локка готовили инъекционный раствор, включающий водный раствор ацетата свинца.For parenteral administration, an injection solution containing an aqueous solution of lead acetate was prepared on the basis of Ringer-Locke physiological saline.
Осуществляли один раз в сутки парентеральное (внутрибрюшинное) введение крысам по 0,1 см3 инъекционного раствора на килограмм массы животного, в котором концентрация свинца составляла 450 мг/мл, что соответствовало суточной затравочной дозе 45 мг на 1 кг массы животного (в пересчете на катион свинца).Parenteral (intraperitoneal) administration to rats of 0.1 cm 3 injection solution per kilogram of animal mass was carried out once a day, in which the lead concentration was 450 mg / ml, which corresponded to a daily seed dose of 45 mg per 1 kg of animal mass (in terms of lead cation).
Указанные инъекции проводили в течение 3 суток. На 4 день от начала процедуры затравки животных умерщвляли путем декапитации и осуществляли отбор крови.These injections were performed for 3 days. On day 4 from the start of the seed treatment, the animals were sacrificed by decapitation and blood was sampled.
Как показал анализ отобранной крови, содержание в ней свинца составляло 209 мкг/дм3.As shown by the analysis of the selected blood, the lead content in it was 209 μg / dm 3 .
Отобранную кровь расфасовывали по 3 мл в стеклянные флаконы, подвергали замораживанию в течение 10 часов при температуре не выше -15°C. Далее проводили лиофилизацию крови при давлении не более 0,200 mBar и температуре ниже -50°C до постоянного веса.The selected blood was packaged in 3 ml in glass bottles, subjected to freezing for 10 hours at a temperature not exceeding -15 ° C. Then, blood was lyophilized at a pressure of not more than 0.200 mBar and a temperature below -50 ° C to constant weight.
Получили референтный материал, представляющий собой лиофилизат цельной крови животного в виде красно-бурого порошка с содержанием свинца 1393 мкг на один грамм лиофилизата.Received a reference material, which is a lyophilisate of the whole blood of an animal in the form of a red-brown powder with a lead content of 1393 μg per gram of lyophilisate.
Пример 4Example 4
Получали биологический референтный материал для приготовления стандартных образцов состава крови, содержащих кадмий.Received biological reference material for the preparation of standard samples of blood composition containing cadmium.
В качестве животных-доноров использовали лабораторных белых крыс с массой тела от 180 г до 200 г.Laboratory white rats weighing 180 g to 200 g were used as donor animals.
Для парентерального введения на основе физиологического раствора Рингера-Локка готовили инъекционный раствор, включающий водный раствор нитрата кадмия.For parenteral administration, an injection solution containing an aqueous solution of cadmium nitrate was prepared on the basis of Ringer-Locke physiological saline.
Осуществляли один раз в сутки парентеральное (внутрибрюшинное) введение крысам по 0,1 см3 инъекционного раствора, в котором концентрация кадмия составляла 3,0 мг/мл, что соответствовало суточной затравочной дозе 0,3 мг на 1 кг массы животного (в пересчете на катион кадмия).Parenteral (intraperitoneal) administration of 0.1 cm 3 injection solution to rats was carried out once a day, in which the cadmium concentration was 3.0 mg / ml, which corresponded to a daily seed dose of 0.3 mg per 1 kg of animal weight (in terms of cadmium cation).
Указанные инъекции проводили в течение 3 суток. На 5 день от начала процедуры затравки животных умерщвляли путем декапитации и осуществляли отбор крови.These injections were performed for 3 days. On day 5 from the start of the seed treatment, the animals were sacrificed by decapitation and blood was sampled.
Как показал анализ отобранной крови, содержание в ней кадмия составляло 15 мкг/дм3.As the analysis of the selected blood showed, the cadmium content in it was 15 μg / dm 3 .
Отобранную кровь расфасовывали по 3 мл в стеклянные флаконы, подвергали замораживанию в течение 10 часов при температуре не выше -15°C. Далее проводили лиофилизацию крови при давлении не более 0,200 mBar и температуре ниже -50°C до постоянного веса.The selected blood was packaged in 3 ml in glass bottles, subjected to freezing for 10 hours at a temperature not exceeding -15 ° C. Then, blood was lyophilized at a pressure of not more than 0.200 mBar and a temperature below -50 ° C to constant weight.
Получили референтный материал, представляющий собой лиофилизат цельной крови животного в виде красно-бурого порошка с содержанием кадмия 100 мкг на один грамм лиофилизата.Received a reference material, which is a lyophilisate of the whole blood of an animal in the form of a red-brown powder with a cadmium content of 100 μg per gram of lyophilisate.
Пример 5Example 5
Получали биологический референтный материал для приготовления стандартных образцов состава крови, содержащих ртуть.Received a biological reference material for the preparation of standard samples of blood composition containing mercury.
В качестве животных-доноров использовали лабораторных белых крыс с массой тела от 180 г до 200 г.Laboratory white rats weighing 180 g to 200 g were used as donor animals.
Для парентерального введения на основе физиологического раствора Рингера-Локка готовили инъекционный раствор, включающий водный раствор ацетата ртути, подкисленный для обеспечения устойчивости в водной среде уксусной кислотой до рН 3,5-4,4.For parenteral administration, an injectable solution was prepared on the basis of Ringer-Locke physiological saline, including an aqueous solution of mercury acetate, acidified to ensure stability in aqueous media with acetic acid to pH 3.5-4.4.
Осуществляли один раз в сутки парентеральное (внутрибрюшинное) введение крысам по 0,1 см3 инъекционного раствора, в котором концентрация ртути составляла 6,0 мг/мл, что соответствовало суточной затравочной дозе 0,6 мг на 1 кг массы животного (в пересчете на катион ртути).Parenteral (intraperitoneal) administration of 0.1 cm 3 injection solution to rats was carried out once a day in which the mercury concentration was 6.0 mg / ml, which corresponded to a daily seed dose of 0.6 mg per 1 kg of animal weight (in terms of mercury cation).
Указанные инъекции проводили в течение 3 суток. На 4 сутки от начала процедуры затравки животных умерщвляли путем декапитации и осуществляли отбор крови.These injections were performed for 3 days. On the 4th day from the start of the seed treatment, the animals were sacrificed by decapitation and blood was sampled.
Как показал анализ отобранной крови, содержание в ней ртути составляло 67 мкг/дм3.As the analysis of the selected blood showed, the mercury content in it was 67 μg / dm 3 .
Отобранную кровь расфасовывали по 3 мл в стеклянные флаконы, подвергали замораживанию в течение 10 часов при температуре не выше -15°C. Далее проводили лиофилизацию крови при давлении не более 0,200 mBar и температуре ниже -50°C до постоянного веса.The selected blood was packaged in 3 ml in glass bottles, subjected to freezing for 10 hours at a temperature not exceeding -15 ° C. Then, blood was lyophilized at a pressure of not more than 0.200 mBar and a temperature below -50 ° C to constant weight.
Получили референтный материал, представляющий собой лиофилизат цельной крови животного в виде красно-бурого порошка с содержанием ртути 447 мкг на один грамм лиофилизата.Received a reference material, which is a lyophilisate of the whole blood of an animal in the form of a red-brown powder with a mercury content of 447 μg per gram of lyophilisate.
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014145666/15A RU2567046C1 (en) | 2014-11-13 | 2014-11-13 | Method for producing biological reference material for producing standard blood composition samples containing toxic metal, and material prepared with using this method |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014145666/15A RU2567046C1 (en) | 2014-11-13 | 2014-11-13 | Method for producing biological reference material for producing standard blood composition samples containing toxic metal, and material prepared with using this method |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2567046C1 true RU2567046C1 (en) | 2015-10-27 |
Family
ID=54362478
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014145666/15A RU2567046C1 (en) | 2014-11-13 | 2014-11-13 | Method for producing biological reference material for producing standard blood composition samples containing toxic metal, and material prepared with using this method |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2567046C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106370872A (en) * | 2016-08-30 | 2017-02-01 | 广州金域医学检验中心有限公司 | Method for adding high-concentration metallic elements in bovine whole blood and bovine whole blood quality control serum |
| RU2646161C1 (en) * | 2016-12-12 | 2018-03-01 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт токсикологии Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН ИТ ФМБА России) | Method of obtaining biological reference material for producing standard samples of composition of liquid biological medium and material obtained using said method |
| RU2803803C1 (en) * | 2022-06-29 | 2023-09-19 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-клинический центр токсикологии имени академика С.Н. Голикова Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУ НКЦТ им. С.Н. Голикова ФМБА России) | Method for obtaining multi-element reference material for manufacture of standard sample of composition of liquid biological media and material made by this method |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5468366A (en) * | 1992-01-15 | 1995-11-21 | Andcare, Inc. | Colloidal-gold electrosensor measuring device |
| RU2431665C2 (en) * | 2009-11-18 | 2011-10-20 | Федеральное государственное учреждение науки "ИНСТИТУТ ТОКСИКОЛОГИИ" Федерального медико-биологического агентства (ФГУН ИТ ФМБА России) | Method for preparing biological referent materials for producing material standards of compositions of these materials containing toxic metals and biological material produced by this method (versions) |
-
2014
- 2014-11-13 RU RU2014145666/15A patent/RU2567046C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5468366A (en) * | 1992-01-15 | 1995-11-21 | Andcare, Inc. | Colloidal-gold electrosensor measuring device |
| RU2431665C2 (en) * | 2009-11-18 | 2011-10-20 | Федеральное государственное учреждение науки "ИНСТИТУТ ТОКСИКОЛОГИИ" Федерального медико-биологического агентства (ФГУН ИТ ФМБА России) | Method for preparing biological referent materials for producing material standards of compositions of these materials containing toxic metals and biological material produced by this method (versions) |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| СИБИРЯКОВ В.К. и др. СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СРЕДСТВ И МЕТОДОВ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ТАЛЛИЯ В КРОВИ ЧЕЛОВЕКА, WWW.MEDLINE.RU ТОМ 15, КЛИНИЧЕСКАЯ ТОКСИКОЛОГИЯ, 7 МАЯ 2014, [он-лайн], [найдено 08.07.2015]. Найдено из Интернет: <URL: http://www.medline.ru/public/pdf/15_032.pdf>. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106370872A (en) * | 2016-08-30 | 2017-02-01 | 广州金域医学检验中心有限公司 | Method for adding high-concentration metallic elements in bovine whole blood and bovine whole blood quality control serum |
| CN106370872B (en) * | 2016-08-30 | 2018-04-13 | 广州金域医学检验中心有限公司 | A kind of method and ox Whole blood control of ox whole blood addition high concentration metallic element |
| RU2646161C1 (en) * | 2016-12-12 | 2018-03-01 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт токсикологии Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН ИТ ФМБА России) | Method of obtaining biological reference material for producing standard samples of composition of liquid biological medium and material obtained using said method |
| RU2803803C1 (en) * | 2022-06-29 | 2023-09-19 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-клинический центр токсикологии имени академика С.Н. Голикова Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУ НКЦТ им. С.Н. Голикова ФМБА России) | Method for obtaining multi-element reference material for manufacture of standard sample of composition of liquid biological media and material made by this method |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Fink et al. | PLASMA PROTEIN METABOLISM—NORMAL AND ASSOCIATED WITH SHOCK: OBSERVATIONS USING PROTEIN LABELED BY HEAVY NITROGEN IN LYSINE | |
| Dyer et al. | Urinary crystals and their relation to stone formation | |
| Jard et al. | Actions of vasotocin and some of its analogues on salt and water excretion by the frog | |
| Kohner et al. | Effect of diuretic therapy on glucose tolerance in hypertensive patients | |
| RU2567046C1 (en) | Method for producing biological reference material for producing standard blood composition samples containing toxic metal, and material prepared with using this method | |
| Robbins et al. | The use of the male North American frog (Rana pipiens) in the diagnosis of pregnancy | |
| RU2567047C1 (en) | Method of obtaining of biological referential material for production of standard urine composition samples containing toxic metal and material obtained by this method | |
| CN105663127B (en) | Injection is freeze-dried famotidine composition | |
| Cragg et al. | The action of metaldehyde on the slug Agriolimax reticulatus (Müller) | |
| Murray et al. | Production of anti-Rh in guinea pigs from human erythrocyte extracts | |
| RU2431665C2 (en) | Method for preparing biological referent materials for producing material standards of compositions of these materials containing toxic metals and biological material produced by this method (versions) | |
| RU2646161C1 (en) | Method of obtaining biological reference material for producing standard samples of composition of liquid biological medium and material obtained using said method | |
| Gammill et al. | Distribution of radioactive silver colloids in tissues of rodents following injection by various routes. | |
| RU2803803C1 (en) | Method for obtaining multi-element reference material for manufacture of standard sample of composition of liquid biological media and material made by this method | |
| CN109718240A (en) | A kind of construction method of Type I diabetes animal model | |
| Priestly et al. | Protein binding and the excretion of some azo dyes in rat bile | |
| Dontas et al. | Delivery of porphyrins through self-assembling peptide hydrogels for accelerated healing of experimental skin defects in vivo | |
| Leussink et al. | Bismuth biokinetics and kidney histopathology after bismuth overdose in rats | |
| Putnam et al. | The metabolism of DL-glutamic acid-1-C14 in man. | |
| BINE JR et al. | The Rate of Disappearance of Lanatoside C. and Digitoxin from the Blood of Rats | |
| RU2657775C1 (en) | Concentrated pharmaceutical composition and method of its production | |
| Ohneda et al. | Glucagon-induced insulin secretion in normal and diabetic subjects | |
| CN1454888A (en) | Rapid-dissoved ambroxol salt and preparing method thereof | |
| Hilton | Rate of the Enzymatic Breakdown of Digitoxin. | |
| SU1642394A1 (en) | Method of tolerance determination for ethanol in animals |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181114 |