RU2565449C1 - Method for selecting female patients with poor ovarian reserve for egg donation programme - Google Patents
Method for selecting female patients with poor ovarian reserve for egg donation programme Download PDFInfo
- Publication number
- RU2565449C1 RU2565449C1 RU2014126144/15A RU2014126144A RU2565449C1 RU 2565449 C1 RU2565449 C1 RU 2565449C1 RU 2014126144/15 A RU2014126144/15 A RU 2014126144/15A RU 2014126144 A RU2014126144 A RU 2014126144A RU 2565449 C1 RU2565449 C1 RU 2565449C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fsh
- stimulation
- amh
- patient
- ovarian
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и репродуктологии, и может быть использовано в программах ЭКО и ПЭ для определения показаний к проведению программы «Донация ооцитов».The invention relates to medicine, namely to gynecology and reproductology, and can be used in IVF and PE programs to determine indications for the Oocyte Donation program.
В настоящее время внимание всех репродуктологов мира направлено на поиск путей повышения эффективности программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Исход программы ЭКО во многом зависит от двух составляющих: состояния слизистой оболочки полости матки и качества переносимых в полость матки эмбрионов. Благодаря развитию гормональной стимуляции яичников в настоящее время в программе ЭКО получают большое число яйцеклеток (ооцитов), оплодотворение которых позволяет выбрать и перенести в полость матки эмбрионы лучшего качества. Эффективность ЭКО достигает 30-40%.Currently, the attention of all reproductologists in the world is aimed at finding ways to improve the effectiveness of assisted reproductive technology (ART) programs. The outcome of the IVF program largely depends on two components: the state of the mucous membrane of the uterine cavity and the quality of the embryos transferred to the uterine cavity. Due to the development of hormonal stimulation of the ovaries, a large number of eggs (oocytes) are currently being received in the IVF program, the fertilization of which allows the selection and transfer of the best quality embryos to the uterine cavity. The effectiveness of IVF reaches 30-40%.
Однако, несмотря на применение современных препаратов, у некоторых пациенток в программах ЭКО получают мало ооцитов, а в ряде случаев, если клетки не удается получить, программу прерывают. Малое количество ооцитов (менее 3-5 клеток) и неравноценность их по качеству (незрелые ооциты, нарушение структуры клеток) может быть причиной сбоев на этапе оплодотворения. При этом выбор эмбрионов для переноса в полость матки представляет определенные трудности. Часто возникает необходимость переноса эмбрионов в более ранние сроки, на 2-3 сутки культивирования (до стадии бластоцисты).However, despite the use of modern drugs, some patients receive few oocytes in IVF programs, and in some cases, if the cells cannot be obtained, the program is interrupted. A small number of oocytes (less than 3-5 cells) and their unequal quality (immature oocytes, impaired cell structure) can cause malfunctions at the stage of fertilization. At the same time, the choice of embryos for transfer to the uterine cavity presents certain difficulties. Often there is a need for transfer of embryos at an earlier date, for 2-3 days of cultivation (to the blastocyst stage).
Также выяснилось, что не у всех пациенток программ вспомогательных репродуктивных технологий фолликулярный аппарат яичников одинаково реагирует (отвечает) на вводимые стандартные дозы фолликулостимулирующего гормона при проведении контролируемой стимуляции яичников (КСЯ) с целью получения мультифолликулярного роста. Состояние, при котором регистрируется неадекватная ответная реакция яичников на стандартные дозировки вводимых гонадотропинов, получило название синдрома «слабого» ответа яичников (ССОЯ). При этом состоянии в протоколе стимуляции яичников достигается не более 3-5 преовуляторных фолликулов и/или ооцитов при пункции (Корсак B.C. и соавт., 1996, Боярский К.Ю., 1998, Краснопольская К.В., 2003, Дахно Ф.В., 2011).It was also found that not all patients with assisted reproductive technology programs have an ovarian follicular apparatus that responds (responds) equally to the administered standard doses of follicle-stimulating hormone during controlled ovarian stimulation (CSJ) in order to obtain multifollicular growth. The condition in which an inadequate response of the ovaries to standard dosages of the administered gonadotropins is recorded is called the syndrome of a “weak” ovarian response (SSC). In this condition, no more than 3-5 preovulatory follicles and / or oocytes during puncture are achieved in the ovarian stimulation protocol (Korsak BC et al., 1996, Boyarsky K.Yu., 1998, Krasnopolskaya KV, 2003, Dakhno F.V. ., 2011).
По данным статистики, пациентки со «слабым» ответом яичников на стимуляцию составляют около 1/3 всех пациенток программ ЭКО. В данной группе женщин частота наступления беременности наиболее низкая и составляет от 7,6 до 17,5%. При этом в 12-30% проведение программы ЭКО может быть прекращено из-за отсутствия ооцитов или эмбрионов, пригодных для переноса. Как правило, наиболее часто «слабый» ответ яичников в программе ЭКО наблюдается у женщин старшего репродуктивного возраста со сниженным овариальным резервом. Термин ″овариальный резерв″ характеризует запас ооцитов в яичниках женщины.According to statistics, patients with a “weak” response of the ovaries to stimulation account for about 1/3 of all patients with IVF programs. In this group of women, the frequency of pregnancy is the lowest and ranges from 7.6 to 17.5%. Moreover, in 12-30%, the IVF program can be stopped due to the lack of oocytes or embryos suitable for transfer. As a rule, the most often “weak” response of the ovaries in the IVF program is observed in women of older reproductive age with reduced ovarian reserve. The term "ovarian reserve" describes the stock of oocytes in the ovaries of a woman.
«Слабый» ответ яичников в программе ЭКО у пациенток молодого и старшего репродуктивного возраста в разной степени влияет на эффективность программы ЭКО. Это связано с качеством ооцитов. При одинаковом количестве ооцитов и эмбрионов эффективность программы у пациенток молодого возраста будет выше.The “weak” response of the ovaries in the IVF program in patients of young and older reproductive age to varying degrees affects the effectiveness of the IVF program. This is due to the quality of the oocytes. With the same number of oocytes and embryos, the effectiveness of the program in young patients will be higher.
Таким образом, «слабый» ответ яичников на стимуляцию можно предполагать в следующих случаях:Thus, a “weak” response of the ovaries to stimulation can be assumed in the following cases:
пациентка старше 37 лет;patient older than 37 years old;
уровень ФСГ на 2-3 день цикла более 10 МЕ/л;the level of FSH on the 2-3 day of the cycle more than 10 IU / l
количество антральных фолликулов при УЗИ на 2-4 день цикла менее 5;the number of antral follicles with ultrasound on 2-4 days of the cycle is less than 5;
уровень АМГ<1 нг/мл;AMH level <1 ng / ml;
избыточный вес (ИМТ>30 кг/м2);overweight (BMI> 30 kg / m 2 );
операции на яичниках в анамнезе;a history of ovarian surgery;
плохой ответ на стимуляцию в предыдущих программах.poor response to stimulation in previous programs.
Непосредственно в протоколе ЭКО о «слабом» росте фолликулов будет свидетельствовать определение при УЗИ менее 4 доминантных фолликулов после 6 дней стимуляции гонадотропинами с дозами ФСГ 300 ME (Охтырская Т. А., источник: http://www.babyplan.ru/biblioteka).Directly in the IVF protocol on “weak” follicular growth will be determined by ultrasound identification of less than 4 dominant follicles after 6 days of gonadotropin stimulation with FSH doses of 300 ME (Okhtyrskaya T. A., source: http://www.babyplan.ru/biblioteka) .
Такой ответ яичников на стимуляцию снижает результативность проводимых программ, приводя к высоким экономическим затратам на лечение.Such an ovarian response to stimulation reduces the effectiveness of ongoing programs, leading to high economic costs for treatment.
В связи с этим прогнозирование возможного ответа яичников на контролируемую стимуляцию является актуальной задачей современной репродуктологии. Имея возможность предвидеть ответ яичников на проводимые программы, врачи репродуктивной медицины могут своевременно проводить коррекцию лечения, меняя по мере необходимости его тактику и методики (Кулаков В.И., 2002, Милютина М.А., 2007).In this regard, predicting a possible response of the ovaries to controlled stimulation is an urgent task of modern reproductology. Having the ability to predict the response of the ovaries to ongoing programs, reproductive medicine doctors can timely correct treatment, changing its tactics and methods as necessary (Kulakov V.I., 2002, Milyutina MA, 2007).
Для оценки овариального резерва проводят гормональное обследование на 2-3 день цикла (ЛГ, ФСГ, эстрадиол, АМГ) и ультразвуковое исследование органов малого таза. Значения ФСГ от 3 до 8 МЕ/л предполагают хороший овариальный резерва и адекватный ответ яичников на стимуляцию в программе ЭКО. Повышение ФСГ может быть предиктором слабого ответа. В ряде случаев у молодых женщин на фоне нормальных показателей ФСГ возможно скрытое снижение овариального резерва, выявляемое только по низкому уровню АМГ. Другим критерием овариального резерва является объем яичников и количество фолликулов, определяемое при УЗИ на 2-4 день цикла. Наличие менее 5 фолликулов диаметром до 10 мм расценивается как косвенный признак сниженного овариального резерва (http://www.babyplan.ru/biblioteka/_/eko/slabyj-otvet-v-programmah-eko-sovremennyj-vzglyad-na-problemu#ixzz33ELw9NkT).To assess the ovarian reserve, a hormonal examination is performed on the 2-3 day of the cycle (LH, FSH, estradiol, AMG) and an ultrasound examination of the pelvic organs. FSH values from 3 to 8 IU / L suggest a good ovarian reserve and an adequate ovarian response to stimulation in the IVF program. An increase in FSH may be a predictor of a weak response. In some cases, in young women, against the background of normal FSH values, a hidden decrease in the ovarian reserve is possible, detected only by a low level of AMH. Another criterion for ovarian reserve is the volume of the ovaries and the number of follicles, determined by ultrasound on the 2nd-4th day of the cycle. The presence of less than 5 follicles with a diameter of up to 10 mm is regarded as an indirect sign of a decreased ovarian reserve (http://www.babyplan.ru/biblioteka/_/eko/slabyj-otvet-v-programmah-eko-sovremennyjjvzglyad-na-problemu# ixzz33ELw9NkT).
Наряду с перечисленными методами существуют дополнительные тесты, позволяющие уточнить функциональное состояние яичников - определение ингибина В, тесты с гонадотропинами (гонадотропин-рилизинг гормоном). Однако, как правило, функциональные тесты, являясь дорогостоящими и создающими нагрузку на работу яичников, не вносят значимый вклад в диагностику и зачастую приводят к появлению функциональных кист.Along with the above methods, there are additional tests to clarify the functional state of the ovaries - determination of inhibin B, tests with gonadotropins (gonadotropin-releasing hormone). However, as a rule, functional tests, being expensive and creating a burden on the work of the ovaries, do not make a significant contribution to the diagnosis and often lead to the appearance of functional cysts.
Из существующего уровня техники известен способ прогнозирования исходов программы ЭКО и ПЭ путем качественной и количественной оценки содержимого фолликулов, отличающийся тем, что в фолликулярной жидкости, аспирированной раздельно из правого и левого яичников, исследуют активность пептид-гидролаз и при ее уровне не менее 75 мг/мл/ч в одном из яичников прогнозируют благоприятный исход (патент РФ №2193777, 27.11.2002).From the existing level of technology there is a method for predicting the outcome of an IVF and PE program by qualitative and quantitative assessment of the contents of follicles, characterized in that the activity of peptide hydrolases is studied in a follicular fluid aspirated separately from the right and left ovaries and at a level of at least 75 mg / ml / h in one of the ovaries predict a favorable outcome (RF patent No. 2193777, 11/27/2002).
Недостатками данного технического решения являются:The disadvantages of this technical solution are:
1. Высокий риск возникновения осложнений, связанных с выполнением трансвагинальной пункции фолликулов, которая проводится под общим наркозом и может осложниться кровотечением.1. A high risk of complications associated with performing transvaginal puncture of the follicles, which is carried out under general anesthesia and may be complicated by bleeding.
2. Необходимость исследования двух образцов фолликулярной жидкости (из правого и левого яичников).2. The need to study two samples of follicular fluid (from the right and left ovaries).
3. Метод осуществляется на этапе пункции фолликулов, до которой значимая часть пациентов со «слабым» ответом яичников на гонадотропную стимуляцию не доходит, ввиду абсолютного отсутствия доминантных фолликулов.3. The method is carried out at the stage of follicle puncture, to which a significant part of patients with a “weak” response of the ovaries to gonadotropic stimulation does not reach, due to the absolute absence of dominant follicles.
4. Не позволяет отобрать пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников для проведения программ «Донация ооцитов».4. It does not allow selecting patients with the syndrome of “weak” ovarian response for the “Oocyte Donation” programs.
Известен способ прогнозирования исхода программы ЭКО и ПЭ путем исследования фолликулярной жидкости, отличающийся тем, что в фолликулярной жидкости проводят количественное определение содержания ФНО и ФРФ, рассчитывают прогностический индекс (ПИ) по формуле ПИ=0,0027·X+Y·(+8,9626·10-7·Y-3,0827·10-6·X)-0,1448, где X - количество ФНО, Y - количество ФРФ, и при значении ПИ, меньшем чем 0,3038, прогнозируют благоприятный исход оплодотворения in-vitro, а при значении, равном или большем чем 0,3038, прогнозируют неблагоприятный исход оплодотворения in-vitro (патент РФ №.2273031, 27.03.2006).There is a method for predicting the outcome of an IVF and PE program by examining a follicular fluid, characterized in that the follicular fluid is quantitatively determined for the content of TNF and RFF, and the prognostic index (PI) is calculated by the formula PI = 0.0027 · X + Y · (+8, 9626 · 10-7 · Y-3.0827 · 10-6 · X) -0.1448, where X is the number of TNF, Y is the amount of RFF, and with a PI value less than 0.3038, a favorable fertilization outcome is predicted in -vitro, and with a value equal to or greater than 0.3038, an unfavorable in-vitro fertilization outcome is predicted (RF patent No. 2273031, 27.03. 2006).
Недостатками данного технического решения являются:The disadvantages of this technical solution are:
1. Высокий риск возникновения осложнений, связанных с выполнением трансвагинальной пункции фолликулов, которая проводится под общим наркозом и может осложниться кровотечением.1. A high risk of complications associated with performing transvaginal puncture of the follicles, which is carried out under general anesthesia and may be complicated by bleeding.
2. Метод осуществляется на этапе пункции фолликулов и процесса оплодотворения in-vitro, до которых значимая часть пациентов со «слабым» ответом яичников на гонадотропную стимуляцию не доходит, ввиду абсолютного отсутствия доминантных фолликулов.2. The method is carried out at the stage of follicular puncture and in-vitro fertilization, to which a significant part of patients with a “weak” ovarian response to gonadotropic stimulation does not reach, due to the absolute absence of dominant follicles.
3. Не позволяет отобрать пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников для проведения программ «Донация ооцитов».3. It does not allow to select patients with the syndrome of "weak" ovarian response for the program "Oocyte donation".
Известен способ прогнозирования эффективности лечения бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения, включающий проведение трансвагинальной пункции фолликулов под контролем УЗИ с последующим исследованием полученной фолликулярной жидкости, отличающийся тем, что фолликулярную жидкость подвергают хемилюминесцентному анализу по стандартной методике, определяют свободнорадикальную активность образцов и по показателю общей антиоксидантной активности дают прогноз наступления беременности: при показателях общей антиоксидантной активности 0,05 и выше дают неблагоприятный прогноз, при показателях общей антиоксидантной активности ниже 0,05 дают благоприятный прогноз - вероятность наступления беременности более 50% (патент РФ №2357673, 10.06.2009).There is a method for predicting the effectiveness of the treatment of infertility by in vitro fertilization, including transvaginal puncture of the follicles under ultrasound control followed by examination of the obtained follicular fluid, characterized in that the follicular fluid is subjected to chemiluminescent analysis by a standard method, the free radical activity of the samples is determined and the total antioxidant activity is determined by the rate of activity, and the antioxidant is predicted the onset of pregnancy: with indicators of total antioxidant active activity of 0.05 and higher gives an unfavorable prognosis, with indicators of total antioxidant activity below 0.05 they give a favorable prognosis - the probability of pregnancy is more than 50% (RF patent No. 2357673, 10.06.2009).
Недостатками данного технического решения являются:The disadvantages of this technical solution are:
1. Высокий риск возникновения осложнений, связанных с выполнением трансвагинальной пункции фолликулов, которая проводится под общим наркозом и может осложниться кровотечением.1. A high risk of complications associated with performing transvaginal puncture of the follicles, which is carried out under general anesthesia and may be complicated by bleeding.
2. Метод осуществляется на этапе пункции фолликулов, до которой значимая часть пациентов со «слабым» ответом яичников на гонадотропную стимуляцию не доходит, ввиду абсолютного отсутствия доминантных фолликулов.2. The method is carried out at the stage of follicular puncture, to which a significant part of patients with a “weak” response of the ovaries to gonadotropic stimulation does not reach, due to the absolute absence of dominant follicles.
3. О прогнозе беременности может идти речь после получения ооцитов, оплодотворения, культивирования эмбрионов и переносе их в полость матки, что невозможно у женщин с отсутствием доминантных фолликулов на этапе гонадотропной стимуляции.3. The prognosis of pregnancy can be discussed after receiving oocytes, fertilization, culturing embryos and transferring them to the uterine cavity, which is impossible in women with a lack of dominant follicles at the stage of gonadotropic stimulation.
4. Не позволяет отобрать пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников для проведения программ «Донация ооцитов».4. It does not allow selecting patients with the syndrome of “weak” ovarian response for the “Oocyte Donation” programs.
Известен способ прогнозирования исхода программы экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов у женщин с бесплодием путем исследования в периферической венозной крови антигенов комплекса гистосовместимости до начала стимуляции суперовуляции, отличающийся тем, что в лейкоцитах определяют полиморфизм генов HLA II класса и при обнаружении носительства гаплотипов DQA1*0101-DQB1*0501 или DQA1*0102-DQB1*0502 прогнозируют неблагоприятный исход, а при отсутствии носительства гаплотипов DQA1*0101-DQB1*0501 и DQA1*0102-DQB1*0502 - благоприятный исход программы ЭКО и ПЭ (патент РФ №2474822, 10.02.2013).There is a method for predicting the outcome of the program of in vitro fertilization and embryo transfer in women with infertility by examining the histocompatibility complex antigens in peripheral venous blood prior to stimulation of superovulation, characterized in that class II HLA gene polymorphism is determined in leukocytes and when DQA1 * 0101-DQB haplotype carriers are detected * 0501 or DQA1 * 0102-DQB1 * 0502 predict an unfavorable outcome, and in the absence of carriage of the haplotypes DQA1 * 0101-DQB1 * 0501 and DQA1 * 0102-DQB1 * 0502 - a favorable outcome of the IVF program and PE (RF patent No. 2474822, 02/10/2013).
Недостатками данного технического решения являются:The disadvantages of this technical solution are:
1. Метод может быть использован только у пациенток с аутоиммунными заболеваниями, привычным невынашивание беременности, самопроизвольными абортами в анамнезе.1. The method can be used only in patients with autoimmune diseases, habitual miscarriage, spontaneous abortions in history.
2. Для анализа HLA-антигенов используется метод серологического гистотипирования, который основывается на реакции лизиса клеток с последующим микроскопированием, точность которого зависит от субъективной оценки исследователя.2. For the analysis of HLA antigens, the method of serological histotyping is used, which is based on the reaction of cell lysis with subsequent microscopy, the accuracy of which depends on the subjective assessment of the researcher.
3. Метод ориентирован на прогнозирование исходов завершенных программ ЭКО (после переноса эмбрионов в полость матки) и не учитывает пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников и отсутствия доминантных фолликулов на этапе гонад отропной стимуляции.3. The method is focused on predicting the outcome of completed IVF programs (after embryo transfer to the uterine cavity) and does not take into account patients with the syndrome of “weak” ovarian response and the absence of dominant follicles at the stage of gonad of otropic stimulation.
4. Не позволяет отобрать пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников для проведения программ «Донация ооцитов».4. It does not allow selecting patients with the syndrome of “weak” ovarian response for the “Oocyte Donation” programs.
Несмотря на то, что установлено несколько возможных этиологических факторов, снижение овариального резерва вероятнее всего является основной причиной «слабого» ответа яичников на проводимую стимуляцию суперовуляции (Булавенко О.В., 2011, Устинкина Т.И., Шустов С.Б., 2011, Питько В.А. и соавт., 2013), что, в свою очередь, ограничивает эффективность применения схем стимуляции суперовуляции как с применением агонистов, так и антагонистов ГнРГ, т.е. у женщин со сниженным ответом яичников на стимуляцию суперовуляции эффективность лечения бесплодия в большей степени зависит от состояния овариального резерва пациенток, чем от выбранных схем индукции суперовуляции.Despite the fact that several possible etiological factors have been established, a decrease in the ovarian reserve is most likely the main reason for the “weak” response of the ovaries to the stimulation of superovulation (Bulavenko O.V., 2011, Ustinkina T.I., Shustov SB, 2011 , Pitko V.A. et al., 2013), which, in turn, limits the effectiveness of superovulation stimulation schemes using both agonists and GnRH antagonists, i.e. in women with a reduced ovarian response to stimulation of superovulation, the effectiveness of the treatment of infertility depends more on the state of the ovarian reserve of patients than on the chosen schemes for inducing superovulation.
Не существует точного прогностического теста для оценки степени ответа яичников на стимуляцию суперовуляции, однако существует ряд тестов для определения овариального резерва с различной прогностической значимостью. Высокий уровень ФСГ (более 12-15 МЕ/л), повышенный уровень эстрадиола (более 30-75 пг/мл) и пониженный уровень ингибина В (менее 45 пг/мл) в сыворотке крови на 2-3 день менструального цикла рассматриваются в настоящее время основными прогностическими характеристиками. Кроме того, пониженная концентрация в сыворотке крови антимюллеровского гормона может служить еще одним индикатором старения яичника (Barri, P.N., Martinez, F., Coroleu, В., et al. Managing non-responders. Fertility and Reproductive Medicine// Proceedings of XVI World Congress on Fertility and Sterility. - 1998. - P.127-137.; Gorgy, A., Taramissi, M. Defining and predicting the poor responder// Fertil. Steril. - 2001. - V.75. - P.226-227.; Keay SD, Liversedge NH, Mathur RS, et al. Assisted conception following poor ovarian response to gonadotrophin stimulation// Br J Obstet Gynaecol. - 1997. - V.104(5). - P.521-527.; Mohamed KA, Davies WA, Allsopp J, et al. Agonist ″flare-up″ versus antagonist in the management of poor responders undergoing in vitro fertilization treatment// Fertil Steril. - 2005. - V.83(2). - P.331-335.).There is no accurate prognostic test to assess the degree of ovarian response to stimulation of superovulation, but there are a number of tests to determine the ovarian reserve with different prognostic significance. High levels of FSH (more than 12-15 IU / l), increased levels of estradiol (more than 30-75 pg / ml) and reduced levels of inhibin B (less than 45 pg / ml) in blood serum for 2-3 days of the menstrual cycle are considered now time basic prognostic characteristics. In addition, a low serum concentration of anti-Muller hormone can serve as another indicator of ovarian aging (Barri, PN, Martinez, F., Coroleu, B., et al. Managing non-responders. Fertility and Reproductive Medicine // Proceedings of XVI World Congress on Fertility and Sterility. - 1998. - P.127-137 .; Gorgy, A., Taramissi, M. Defining and predicting the poor responder // Fertil. Steril. - 2001. - V.75. - P.226 -227 .; Keay SD, Liversedge NH, Mathur RS, et al. Assisted conception following poor ovarian response to gonadotrophin stimulation // Br J Obstet Gynaecol. - 1997.- V.104 (5) .- P.521-527. ; Mohamed KA, Davies WA, Allsopp J, et al. Agonist ″ flare-up ″ versus antagonist in the management of poor responders undergoing in vitro fertilization treatment // Fertil Steril. - 2005. - V.83 (2). - P .331-335.).
Наиболее близким к заявленному техническому решению является метод, с помощью которого для оценки овариального резерва проводят гормональное обследование на 2-3 день цикла (ЛГ, ФСГ, эстрадиол, АМГ) и ультразвуковое исследование органов малого таза. Показатели ФСГ от 3 до 8 МЕ/л предполагают хороший овариальный резерва и адекватный ответ яичников на стимуляцию в программе ЭКО. Повышение ФСГ может быть предиктором «слабого» ответа. В ряде случаев у молодых женщин на фоне нормальных значений ФСГ возможно скрытое снижение овариального резерва, выявляемое только по низкому уровню АМГ. (http://www.babyplan.ru/biblioteka/_/eko/slabyj-otvet-v-programmah-eko-sovremennyj-vzglyad-na-problemu#ixzz33ELw9NkT).Closest to the claimed technical solution is the method by which to evaluate the ovarian reserve a hormonal examination is carried out on the 2-3 day of the cycle (LH, FSH, estradiol, AMG) and ultrasound examination of the pelvic organs. FSH values from 3 to 8 IU / L suggest a good ovarian reserve and an adequate ovarian response to stimulation in the IVF program. An increase in FSH may be a predictor of a “weak” response. In some cases, in young women, against the background of normal FSH values, a hidden decrease in the ovarian reserve is possible, which is detected only by a low level of AMH. (http://www.babyplan.ru/biblioteka/_/eko/slabyj-otvet-v-programmah-eko-sovremennyj-vzglyad-na-problemu#ixzz33ELw9NkT).
Недостатками данного технического решения являются:The disadvantages of this technical solution are:
1. Не учитывает возможный регресс антральных фолликулов под влиянием высоких доз ФСГ при низких значениях АМГ.1. Does not take into account the possible regression of antral follicles under the influence of high doses of FSH at low AMH values.
2. Не позволяет установить вероятность развития доминантных фолликулов или их отсутствия при гонадотропной стимуляции яичников пациенток с синдромом «слабого» ответа.2. It is not possible to establish the likelihood of developing dominant follicles or their absence during gonadotropic stimulation of the ovaries of patients with a “weak” response syndrome.
3. Не позволяет отобрать пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников для проведения программ «Донация ооцитов».3. It does not allow to select patients with the syndrome of "weak" ovarian response for the program "Oocyte donation".
Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение является получение прогностического и диагностического маркера, позволяющего до включения в программу ЭКО, выделить пациенток с отсутствием возможности достижения доминантных фолликулов на фоне гонадотропной стимуляции яичников и своевременно определить показания к использованию «донорских» ооцитов.The task to which the claimed invention is directed is to obtain a prognostic and diagnostic marker, allowing prior to inclusion in the IVF program, to identify patients with the inability to achieve dominant follicles on the background of gonadotropic stimulation of the ovaries and to timely determine the indications for the use of "donor" oocytes.
Поставленная задача решается тем, что способ отбора пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников для проведения программы «Донация ооцитов» включает исследование гормонов крови: у пациентки на 2-3-й дни менструального цикла, предшествующие проведению гонадотропной стимуляции исследуют в сыворотке крови уровень антимюллерова гормона (АМГ) и если уровень АМГ составит 0,1-0,5 нг/мл, дополнительно определяют концентрацию фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), рассчитывают соотношение абсолютных значений ФСГ/АМГ и, если величина полученного соотношения равна или превышает 51, пациентке осуществляют проведение программы «Донация ооцитов».The problem is solved in that the method of selecting patients with the syndrome of "weak" ovarian response for the program "Oocyte donation" includes the study of blood hormones: in the patient on the 2-3rd days of the menstrual cycle, prior to the gonadotropic stimulation, the antimuller level in the blood is examined hormone (AMG) and if the level of AMG is 0.1-0.5 ng / ml, the concentration of follicle-stimulating hormone (FSH) is additionally determined, the ratio of the absolute values of FSH / AMG is calculated, and if the value obtained a ratio equal to or greater than 51, the patient carries out "Donation of oocytes" program.
Техническим результатом, обеспечиваемым приведенной совокупностью признаков, является своевременная коррекция лечения пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников (с отсутствием вероятности получения собственных ооцитов в протоколах ЭКО), подбор оптимальной программы ВРТ с использованием «донорских» ооцитов без ущерба для здоровья этих женщин и существенных материальных затрат.The technical result provided by the given set of signs is the timely correction of treatment of patients with the syndrome of “weak” ovarian response (with no likelihood of receiving their own oocytes in IVF protocols), selection of the optimal ART program using “donor” oocytes without compromising the health of these women and significant material costs.
Антимюлеров гормон или ингибирующее вещество Мюллера - это гомодимерный гликопротеин, состоящий из 535 аминокислот и относящийся к семейству β - трансформирующих факторов роста. Этот нестероидный гормон у женщин вырабатывается только клетками гранулезы фолликулов от преантральной стадии до стадии больших антральных фолликулов, т.е. в стероиднезависимом периоде. Максимальное количество данного гормона выделяется клетками гранулезы преантральных и антральных фолликулов диаметром 4 мм. В фолликулах большего диаметра (6-8 мм) секреция данного вещества прекращается. В дальнейшем уровень АМГ резко падает, что приводит к росту активности ароматазы и увеличению продукции эстрадиола. Это говорит о существовании механизма обратной связи между синтезом гранулезой предоминантного фолликула эстрадиола и АМГ.The anti-Mühler hormone or Muller inhibitory substance is a homodimeric glycoprotein consisting of 535 amino acids and belongs to the family of β-transforming growth factors. This non-steroidal hormone in women is produced only by follicle granulosa cells from the preantral stage to the stage of large antral follicles, i.e. in the steroid-independent period. The maximum amount of this hormone is secreted by granulosa cells of preantral and antral follicles with a diameter of 4 mm. In follicles of a larger diameter (6-8 mm), the secretion of this substance stops. In the future, the level of AMH drops sharply, which leads to an increase in aromatase activity and an increase in estradiol production. This suggests the existence of a feedback mechanism between the synthesis of granulosis of the predominant follicle of estradiol and AMH.
АМГ имеет преимущественно 2 типа воздействия на яичник: подавляет первичные стадии роста фолликулов и фолликулостимулирующий гормонально-зависимый рост и селекцию преантральных и небольших антральных фолликулов. Таким образом, АМГ защищает гранулезную ткань растущих фолликулов от избыточного влияния ФСГ. При снижении уровня АМГ происходит более быстрый рост доминирующего фолликула. Эти фолликулы продуцируют гормон ингибин В, который определяет базальный уровень и более раннее влияние ФСГ с его негативным влиянием на антральные фолликулы. Дальнейшее уменьшение количества антральных фолликулов приводит к снижение уровня АМГ.AMH has mainly 2 types of effects on the ovary: it suppresses the primary stages of follicular growth and follicle-stimulating hormone-dependent growth and selection of preantral and small antral follicles. Thus, AMH protects the granulosa tissue of growing follicles from the excessive influence of FSH. With a decrease in the level of AMH, a more rapid growth of the dominant follicle occurs. These follicles produce the hormone inhibin B, which determines the basal level and earlier effect of FSH with its negative effect on antral follicles. A further decrease in the number of antral follicles leads to a decrease in the level of AMH.
Показано на основании полученных результатов исследования уровней антимюллерова гормона, что близкие значения его уровней у пациенток нормальным ответом яичников на стимуляцию и со слабым ответом не позволяют рассматривать антимюллеров гормон как абсолютный критерий ответа яичников в программах вспомогательных репродуктивных технологий (В.А. Питько и др., Определение антимюллерова гормона и допплерометрические исследования кровоснабжения яичников в диагностике синдрома слабого ответа яичников. - Международный медицинский журнал, 2013, №2, С.72-75)It was shown on the basis of the results of a study of the levels of anti-Muller hormone that close values of its levels in patients with a normal ovarian response to stimulation and with a weak response do not allow considering anti-Muller hormone as an absolute criterion for the response of the ovaries in assisted reproductive technology programs (V.A. Pitko et al. , Determination of anti-Muller hormone and Doppler studies of ovarian blood supply in the diagnosis of ovarian weak response syndrome. - International Medical Journal, 2 013, No. 2, S.72-75)
Снижение уровня АМГ является наиболее ранним и достоверным показателем старения репродуктивной системы и в совокупности с подсчетом количества антральных фолликулов и уровнем ФСГ может определять овариальный резерв.A decrease in the level of AMH is the earliest and most reliable indicator of aging of the reproductive system and, in combination with counting the number of antral follicles and the level of FSH, can determine the ovarian reserve.
Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ), или фоллитропин, вызывает рост и созревание фолликулов яичников и их подготовку к овуляции. ФСГ продуцируется гипофизом. У женщины ФСГ стимулирует образование фолликулов. Американские исследователи M. Soules et al. (2001) разработали достаточно стройную классификацию периодов репродуктивной функции женщины. Согласно этим данным, переход к менопаузе начинается при первом же статистически значимом повышении базального уровня ФСГ, что происходит в конце третьего - начале четвертого десятилетия жизни женщины. Возрастное уменьшение общего числа фолликулов приводит к снижению числа антральных фолликулов, из которых происходит селекция доминантных фолликулов. Эти фолликулы продуцируют гормон ингибин В, который определяет базальный уровень ФСГ. С возрастом уровень ингибина уменьшается, что приводит к повышению базального уровня ФСГ. В то же время, в более поздних работах было установлено, что наиболее ранним и достоверным показателем старения женской репродуктивной системы является снижение уровня АМГ. При исследовании различных факторов старения яичников (уровень АМГ, количество антральных фолликулов, базальные уровни ФСГ, ингибина В и эстрадиола), обнаружено, что только уровень АМГ и количество антральных фолликулов имеют четкую корреляцию с возрастом у женщин всех возрастных групп, тогда как уровни ФСГ и ингибина В обладали такой корреляционной связью только у пациенток после 40 лет, а уровень эстрадиола вообще не имел корреляционной связи (Булавенко О.В., 2011).Follicle-stimulating hormone (FSH), or follitropin, causes the growth and maturation of ovarian follicles and their preparation for ovulation. FSH is produced by the pituitary gland. In women, FSH stimulates the formation of follicles. American researchers M. Soules et al. (2001) developed a fairly coherent classification of periods of a woman's reproductive function. According to these data, the transition to menopause begins at the first statistically significant increase in the basal level of FSH, which occurs at the end of the third - beginning of the fourth decade of a woman's life. An age-related decrease in the total number of follicles leads to a decrease in the number of antral follicles from which the selection of dominant follicles occurs. These follicles produce the hormone inhibin B, which determines the basal level of FSH. With age, the level of inhibin decreases, which leads to an increase in the basal level of FSH. At the same time, in later works it was found that the earliest and most reliable indicator of the aging of the female reproductive system is a decrease in the level of AMH. In the study of various factors of ovarian aging (AMH level, the number of antral follicles, basal levels of FSH, inhibin B and estradiol), it was found that only the AMH level and the number of antral follicles have a clear correlation with age in women of all age groups, while FSH and inhibin B possessed such a correlation only in patients after 40 years, and the level of estradiol had no correlation at all (O. Bulavenko, 2011).
Но если говорить не о возрасте женщины, а о факте сниженного овариального резерва яичников, возникшего по различным причинам в течение репродуктивного периода (перенесенные операции на яичниках, аутоиммунные процессы, воспалительные процессы), становится понятным, что крайних минимальных значений изученных маркеров, указывающих на способность яичников женщины продуцировать полноценные ооциты до настоящего времени не установлено.But if we are not talking about the woman’s age, but about the fact of a reduced ovarian reserve of the ovaries, which arose for various reasons during the reproductive period (past surgery on the ovaries, autoimmune processes, inflammatory processes), it becomes clear that the extreme minimum values of the studied markers indicating ability A woman’s ovaries to produce complete oocytes have not yet been established.
Также нет четких критериев и их нижних нормативных границ, указывающих на возможность или невозможность получения доминантных фолликулов при гонадотропной стимуляции яичников в программах ЭКО (а, следовательно, и ооцитов, и эмбрионов) у пациенток со сниженным АМГ 0,1 до 0,5 нг/мл и нормальным или повышенным уровнем ФСГ. В результате этого значимая часть пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников, вынужденно подвергается необоснованному воздействию высоких доз гонадотропинов и в последующем снимается с протоколов стимуляции. Даже для последующих программ ВРТ (как минимум для второй) решение об очередной попытке стимуляции пациентка принимает самостоятельно, опираясь на мнение врача, о том, что только аналогичный отрицательный результат подтвердит необходимость «донации» ооцитов. Таким образом, пользуясь настойчивым желанием пациентки получить собственные ооциты, врачи, ввиду отсутствия убедительного маркера вынуждены назначать второй «бесполезный» протокол стимуляции с использованием еще более высоких доз гонадотропинов.There are also no clear criteria and their lower normative boundaries indicating the possibility or impossibility of obtaining dominant follicles during gonadotropic stimulation of the ovaries in IVF programs (and, consequently, oocytes and embryos) in patients with reduced AMH 0.1 to 0.5 ng / ml and normal or elevated levels of FSH. As a result, a significant proportion of patients with the syndrome of “weak” ovarian response are forced to unreasonably be exposed to high doses of gonadotropins and subsequently withdrawn from the stimulation protocols. Even for subsequent ART programs (at least for the second one), the patient makes the decision about the next attempt at stimulation, based on the doctor’s opinion, that only a similar negative result will confirm the need for “donation” of oocytes. Thus, taking advantage of the patient’s persistent desire to obtain their own oocytes, doctors, due to the lack of a convincing marker, are forced to prescribe a second “useless” stimulation protocol using even higher doses of gonadotropins.
Нечеткость диагностических критериев, определяющих «слабый» ответ яичников на стимуляцию, отсутствие комплексной оценки овариального резерва, позволяющей прогнозировать реакцию яичников на введение индукторов, затрудняют выбор наиболее эффективной программы ВРТ, что в конечном итоге ухудшает результаты лечения бесплодия у данного контингента больных и требует дальнейших исследований.The fuzzy diagnostic criteria that determine the “weak” response of the ovaries to stimulation, the lack of a comprehensive assessment of the ovarian reserve, which allows predicting the reaction of the ovaries to the induction of injectors, makes it difficult to choose the most effective ART program, which ultimately worsens the results of infertility treatment in this group of patients and requires further research .
При этом низкие показатели АМГ при неизменных или повышенных уровнях ФСГ могут отражать степень истощения яичников и в совокупности, по нашему мнению, являться прогностическими критериями целесообразности включения пациенток в программу ЭКО для достижения собственных ооцитов, либо выбора альтернативного метода лечения - программы «Донация ооцитов». Разработанный нами способ отбора пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников для проведения программы «Донация ооцитов» позволит врачу-репродуктологу, используя абсолютные значения ФСГ и АМГ, легко вывести коэффициент ФСГ/АМГ для определения дальнейшей тактики ведения конкретной больной - либо включение пациентки в протокол ВРТ для достижения собственных ооцитов, либо перевод пациентки на программу с использованием «донорских» ооцитов.At the same time, low AMH indicators at constant or elevated FSH levels can reflect the degree of ovarian depletion and, in our opinion, together are prognostic criteria for the feasibility of including patients in the IVF program to achieve their own oocytes, or for choosing an alternative treatment method - the Oocyte Donation program. The method we developed for selecting patients with the syndrome of “weak” ovarian response for the Oocyte Donation program will allow the reproductologist, using the absolute values of FSH and AMH, to easily derive the FSH / AMH coefficient to determine further tactics for the management of a particular patient — or inclusion of the patient in the protocol ART to achieve their own oocytes, or transfer the patient to a program using "donor" oocytes.
В ходе апробации разработанного нами метода, целенаправленно предложено использование абсолютных значений ФСГ и АМГ. Наши исследования показали, что расчет коэффициента с приведением к единой размерности не меняет сути предложенного способа, но снижает его диагностическую точность. Помимо этого, трудоемкость перевода единиц затрудняет широкое использование способа в клинической практике репродуктологов.During the testing of the method developed by us, the use of the absolute values of FSH and AMG was purposefully proposed. Our studies have shown that the calculation of the coefficient with a single dimension does not change the essence of the proposed method, but reduces its diagnostic accuracy. In addition, the complexity of unit conversion makes it difficult to widely use the method in the clinical practice of reproductologists.
Подробное описание способа и примеры его клинического выполненияA detailed description of the method and examples of its clinical implementation
Способ осуществляют следующим образом. У пациенток на 2-3 дни менструального цикла, предшествующие проведению гонадотропной стимуляции исследуют в сыворотке крови уровень антимюллерова гормона (АМГ) и если уровень АМГ составит 0,1-0,5 нг/мл, дополнительно исследуют сывороточные концентрации ФСГ (фолликулостимулирующего гормона) и рассчитывают соотношение абсолютных значений ФСГ/АМГ и, если величина полученного соотношения равна или превышает 51, пациентке осуществляют проведение программы «Донация ооцитов».The method is as follows. In patients, for 2-3 days of the menstrual cycle, preceding gonadotropic stimulation, the level of anti-Muller hormone (AMH) in the blood serum is examined and if the level of AMH is 0.1-0.5 ng / ml, serum FSH concentrations (follicle-stimulating hormone) are additionally examined and calculate the ratio of the absolute values of FSH / AMH and, if the value of the obtained ratio is equal to or exceeds 51, the patient is carried out the program "Donation of oocytes".
Трансвагинальное ультрасонографическое исследование органов малого таза и яичников проводят на аппарате «AlokaprosaundSSD - 3500 SX» (Япония).Transvaginal ultrasonographic examination of the pelvic organs and ovaries is carried out on the apparatus "AlokaprosaundSSD - 3500 SX" (Japan).
1. Определение содержание антимюллерова гормона (АМГ) в сыворотке крови.1. Determination of the content of antimüller hormone (AMH) in serum.
Определение в сыворотке крови содержания антимюллерова гормона выполняют с использованием иммуноферментного набора «AMHGenIIELISA» (BeckmanCoulterInc., США). Забор крови проводят утром натощак из локтевой вены.The determination of the content of antimuller hormone in blood serum is carried out using the enzyme immunoassay kit AMHGenIIELISA (BeckmanCoulter Inc., USA). Blood sampling is carried out in the morning on an empty stomach from the cubital vein.
Определение АМГ основано на принципе ферментно-усиленного «двухступенчатого» сэндвич - контроля. При проведении анализа стандарты, контроль и образцы пациентов инкубировались в микропланшетных ячейках, покрытых антителами к антимюллерову гормону. После инкубации и промывки ячейки обрабатывались биотинилированными антителами к антимюллерову гормону. После второй инкубации и последующей промывки добавлялся стрептавидин, конъюгированный с пероксидазой хрена. После третьей инкубации и последующей промывки ячейки инкубировались с субстратом хреногенного раствора. Затем добавлялся стоп-раствор и определялось количество превращенного фермента субстрата путем измерения оптической плотности при длинах волн 450 и между 600 и 630 нм. Измеренное поглощение прямо пропорционально концентрации присутствующего антимюллерова гормона. Набор стандартов антимюллерова гормона использовался для построения стандартной кривой поглощения, по которой можно было рассчитать его неизвестные концентрации в исследуемых образцах.The definition of AMG is based on the principle of enzyme-enhanced “two-stage” sandwich control. During the analysis, the standards, control and patient samples were incubated in microplate cells coated with anti-Muller hormone antibodies. After incubation and washing, the cells were treated with biotinylated anti-Muller hormone antibodies. After the second incubation and subsequent washing, streptavidin conjugated with horseradish peroxidase was added. After the third incubation and subsequent washing, the cells were incubated with a substrate of a horseradish solution. Then a stop solution was added and the amount of converted substrate enzyme was determined by measuring the optical density at wavelengths of 450 and between 600 and 630 nm. The measured absorption is directly proportional to the concentration of the antimuller hormone present. A set of standards of antimüller hormone was used to construct a standard absorption curve, from which it was possible to calculate its unknown concentrations in the studied samples.
2. Определение содержания фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) в сыворотке крови.2. Determination of the content of follicle-stimulating hormone (FSH) in serum.
Определение в сыворотке крови содержания фолликулостимулирующего гормона выполняют с использованием иммуноферментного набора «ГонадотропинИФА - ФСГ» («Алкор-Био», Россия). Забор крови проводят утром натощак из локтевой вены.Determination of the content of follicle-stimulating hormone in the blood serum is carried out using the Gonadotropin IFA-FSH immunoenzyme kit (Alkor-Bio, Russia). Blood sampling is carried out in the morning on an empty stomach from the cubital vein.
В наборе использован «сэндвич» - вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Для реализации методики использованы два моноклональных антитела с различной эпитопной специфичностью к ФСГ. Одно из них иммобилизовано на твердой фазе (внутренняя поверхность лунок), второе конъюгировано с пероксидазой хрена. В лунках, при добавлении исследуемого образца и конъюгата анти-ФСГ-пероксидаза, во время инкубации одновременно происходит иммобилизация ФСГ, содержащегося в исследуемом образце, и связывание образовавшегося комплекса с конъюгатом. Несвязывающиеся компоненты удаляются промывкой. Количество связывающегося конъюгата прямо пропорционально количеству ФСГ в исследуемом образце.The set uses a “sandwich” - a variant of enzyme-linked immunosorbent assay. To implement the technique, two monoclonal antibodies with different epitope specificity for FSH were used. One of them is immobilized on the solid phase (the inner surface of the holes), the second is conjugated to horseradish peroxidase. In the wells, when the test sample and the anti-FSH-peroxidase conjugate are added, during incubation, the FSH contained in the test sample is simultaneously immobilized and the complex formed is bound to the conjugate. Non-binding components are removed by washing. The amount of binding conjugate is directly proportional to the amount of FSH in the test sample.
Во время инкубации с раствором ТМБ происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна концентрации ФСГ в анализируемых пробах. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывается концентрация ФСГ в исследуемых образцах.During incubation with the TMB solution, the solution stains in the wells. The degree of color is directly proportional to the concentration of FSH in the analyzed samples. After measuring the optical density of the solution in the wells, the concentration of FSH in the test samples is calculated on the basis of a calibration graph.
Рассчитывают соотношение абсолютных значений ФСГ/АМГ и, если величина полученного соотношения равна или превышает 51, пациентке осуществляют проведение программы «Донация ооцитов».The ratio of the absolute values of FSH / AMH is calculated and, if the value of the obtained ratio is equal to or exceeds 51, the patient undergoes the program “Donation of oocytes”.
Работоспособность заявляемого способа подтверждается следующими клиническими примерами:The performance of the proposed method is confirmed by the following clinical examples:
Пример 1.Example 1
Больная Н-ева, 41 года, амбулаторная карта №513 обратилась в ООО «Центр репродукции человека и ЭКО» с целью проведения ей программы ИКСИ. Больная предъявляет жалобы на первичное бесплодие в течение 3,5 лет. Из анамнеза известно, что больная в 2011 году перенесла консервативную миомэктомию. В 2012 г при гистероскопии диагностирован аденомиоз. У супруга выявлена олигоастенозооспермия, лейкоспермия.Patient N-eva, 41 years old, outpatient card No. 513 applied to the Center for Human Reproduction and IVF, LLC with the aim of conducting her ICSI program. The patient complains of primary infertility for 3.5 years. From the anamnesis it is known that the patient in 2011 underwent a conservative myomectomy. In 2012, hysteroscopy was diagnosed with adenomyosis. The spouse revealed oligoastenozoospermia, leukospermia.
На этапе обследования перед программой по эндокринному статусу диагностирован синдром гиперандрогении надпочечникового генеза, назначена коррекция преднизолоном. По инфекционному фактору у пациентки выявлен дисбиоз цервикального канала, у супруга - дисбиоз семенной плазмы, проведено противовоспалительное лечение с эффектом.At the examination stage, before the program on endocrine status, the syndrome of hyperandrogenism of the adrenal genesis was diagnosed, correction with prednisolone was prescribed. According to the infectious factor, the patient revealed dysbiosis of the cervical canal, the spouse showed dysbiosis of the seminal plasma, anti-inflammatory treatment was carried out with the effect.
Перед включением в протокол стимуляции на 2 день менструального цикла определяли сывороточные концентрации ФСГ и АМГ, которые у пациентки составили 8,4 мМЕ/мл и 0,15 нг/мл, соответственно. Исходя из полученных значений, определяли коэффициент отношения ФСГ к АМГ - ФСГ/АМГ=56, что свидетельствовало, согласно нашему способу, о невозможности получения доминантных фолликулов в цикле гонадотропной стимуляции и необходимости дальнейшего лечения пациентки с использованием «донорских» ооцитов. Стимуляция суперовуляции проведена со 2 дня менструального цикла с использованием гонадотропных препаратов в суммарной дозе 2700 ME, в сочетании с антагонистами гонадотропин-рилизинг гормона, назначенными с 6 дня гонадотропной стимуляции яичников, продолжительность введения составила 5 дней. Гормональная стимуляция сопровождалась ультразвуковым и гормональным мониторингом. При 3-х кратном УЗ исследовании, проведенном на 5, 8 и 10 дни гонадотропной стимуляции лидирующие фолликулы не были визуализированы. Больной рекомендована отмена дальнейшей овариальной стимуляции, ввиду отсутствия ее эффекта. В дальнейшем успешно осуществлена программа «Донация ооцитов».Before inclusion in the stimulation protocol on the 2nd day of the menstrual cycle, serum concentrations of FSH and AMH were determined, which in the patient were 8.4 mIU / ml and 0.15 ng / ml, respectively. Based on the obtained values, the ratio of FSH to AMH was determined - FSH / AMG = 56, which indicated, according to our method, the impossibility of obtaining dominant follicles in the gonadotropic stimulation cycle and the need for further treatment of the patient using "donor" oocytes. Superovulation was stimulated from day 2 of the menstrual cycle using gonadotropic drugs in a total dose of 2700 ME, in combination with gonadotropin releasing hormone antagonists prescribed from day 6 of gonadotropic ovarian stimulation, the administration duration was 5 days. Hormonal stimulation was accompanied by ultrasound and hormonal monitoring. With a 3-fold ultrasound study conducted on days 5, 8 and 10 of gonadotropic stimulation, the leading follicles were not visualized. The patient is recommended to cancel further ovarian stimulation, due to the lack of its effect. In the future, the program "Donation of oocytes" was successfully implemented.
Пример 2.Example 2
Больная Д-ова, 34 лет, амбулаторная карта №488 обратилась в ООО «Центр репродукции человека и ЭКО» с целью проведения ей программы ИКСИ. Больная предъявляет жалобы на первичное бесплодие в течение 4 лет. Из анамнеза известно, что в 2012 году произведена лапароскопия в объеме сальпингоовариолизиса, резекции правого яичника, каутеризации левого яичника по поводу апоплексии правого яичника. В 2012 году проведено 8 искусственных инсеминаций спермой мужа, из них 6 на фоне стимуляции клостилбегитом, 2 - в естественном цикле. У супруга выявлена астенозооспермия. В 2013 году пациентка была включена в протокол стимуляции для проведения программы ИКСИ №1. На фоне гормональной стимуляции с использованием гонадотропинов в суммарной дозе 3500 ME, в сочетании с антагонистами гонадотропин-рилизинг гормона, назначенными с 6 дня гонадотропной стимуляции яичников, продолжительность введения составила 7 дней, программа была остановлена ввиду отсутствия доминантных фолликулов.Patient D-ova, 34 years old, outpatient card No. 488 applied to the Center for Human Reproduction and IVF, LLC in order to conduct her ICSI program. The patient complains of primary infertility for 4 years. From the anamnesis it is known that in 2012 a laparoscopy was performed in the amount of salpingo-ovariolysis, resection of the right ovary, cauterization of the left ovary due to apoplexy of the right ovary. In 2012, 8 artificial inseminations with the husband’s sperm were carried out, 6 of them against the background of stimulation with clostilbegit, 2 in the natural cycle. The spouse revealed asthenozoospermia. In 2013, the patient was included in the stimulation protocol for ICSI No. 1. Against the background of hormonal stimulation using gonadotropins in a total dose of 3500 ME, in combination with gonadotropin releasing hormone antagonists prescribed from day 6 of ovarian gonadotropin stimulation, the duration of administration was 7 days, the program was stopped due to the absence of dominant follicles.
На этапе обследования перед второй программой ИКСИ по эндокринному статуса патологии не выявлено. По инфекционному фактору у супруги выявлен кандидозный вагинит, у супруга - дисбиоз семенной плазмы, проведено противовоспалительное лечение с эффектом.At the stage of examination before the second ICSI program on the endocrine status of the pathology was not revealed. According to the infectious factor, spouse revealed candidal vaginitis, spouse had dysbiosis of seminal plasma, anti-inflammatory treatment was carried out with effect.
После 4-х месячного перерыва после 1 программы ИКСИ, перед включением в протокол стимуляции №2 на 2 день менструального цикла определяли сывороточные концентрации ФСГ и АМГ, которые у пациентки составили 5,1 мМЕ/мл и 0,1 нг/мл, соответственно. Исходя из полученных значений, определяли коэффициент отношения ФСГ к АМГ (ФСГ/АМГ=51). Что свидетельствовало, согласно нашему способу, о невозможности получения доминантных фолликулов в цикле гонадотропной стимуляции и необходимости дальнейшего лечения пациентки с использованием «донорских» ооцитов. Стимуляция суперовуляции проведена со 2 дня менструального цикла с использованием гонадотропных препаратов в суммарной дозе 2650 ME, в сочетании с антагонистами гонадотропин-рилизинг гормона, назначенными с 6 дня гонадотропной стимуляции яичников, продолжительность введения составила 5 дней. Гормональная стимуляция сопровождалась ультразвуковым и гормональным мониторингом. При 3-х кратном УЗ исследовании, проведенном на 5, 8 и 10 дни гонадотропной стимуляции лидирующие фолликулы не были визуализированы. Больной рекомендована отмена дальнейшей овариальной стимуляции, ввиду отсутствия ее эффекта. В дальнейшем успешно осуществлена программа «Донация ооцитов».After a 4-month break after 1 ICSI program, before being included in stimulation protocol No. 2 on the 2nd day of the menstrual cycle, serum concentrations of FSH and AMH were determined, which in the patient were 5.1 mIU / ml and 0.1 ng / ml, respectively. Based on the obtained values, the ratio of FSH to AMH was determined (FSH / AMG = 51). According to our method, this indicated the impossibility of obtaining dominant follicles in the cycle of gonadotropic stimulation and the need for further treatment of the patient using "donor" oocytes. Superovulation was stimulated from day 2 of the menstrual cycle using gonadotropic drugs in a total dose of 2650 ME, in combination with gonadotropin releasing hormone antagonists prescribed from day 6 of gonadotropic ovarian stimulation, the duration of administration was 5 days. Hormonal stimulation was accompanied by ultrasound and hormonal monitoring. With a 3-fold ultrasound study conducted on days 5, 8 and 10 of gonadotropic stimulation, the leading follicles were not visualized. The patient is recommended to cancel further ovarian stimulation, due to the lack of its effect. In the future, the program "Donation of oocytes" was successfully implemented.
Пример 3.Example 3
Больная Ч-ян, 37 лет амбулаторная карта №1473 обратилась в ООО «Центр репродукции человека и ЭКО» с целью проведения ей программы ИКСИ спермой донора. Больная предъявляет жалобы на первичное бесплодие в течение 10 лет. Из анамнеза известно, что с 2013 года страдает ревматоидным артритом. На этапе обследования перед программой выявлена гипофункция яичников.Patient Ch-yang, 37 years old, outpatient card No. 1473 applied to the Center for Human Reproduction and IVF LLC in order to conduct the ICSI program with donor sperm. The patient complains of primary infertility for 10 years. From the anamnesis it is known that since 2013 suffers from rheumatoid arthritis. At the stage of examination before the program revealed ovarian hypofunction.
Перед включением в протокол стимуляции на 2 день менструального цикла определяли сывороточные концентрации ФСГ и АМГ, которые у пациентки составили 15 мМЕ/мл и 0,3 нг/мл, соответственно. Исходя из полученных значений, определяли коэффициент отношения ФСГ к АМГ (ФСГ/АМГ=50), что свидетельствовало, согласно нашему способу, о возможности получения доминантных фолликулов на фоне гонадотропной стимуляции и собственных ооцитов в циклах ВРТ. Стимуляция суперовуляции проведена со 2 дня менструального цикла с использованием гонадотропных препаратов в суммарной дозе 2550 ME, в сочетании с агонистами гонадотропин-рилизинг гормона, назначенными с 6 дня гонадотропной стимуляции яичников, продолжительность введения составила 5 дней. На 11 день гонадотропной стимуляции введен триггер овуляции в дозе 10000 ME. Гормональная стимуляция сопровождалась ультразвуковым и гормональным мониторингом. У данной пациентки на момент проведения пункции было зарегистрировано 2 лидирующих фолликула в правом яичнике и 2 - в левом. Толщина эндометрия составила 11 мм.Before inclusion in the stimulation protocol on the 2nd day of the menstrual cycle, serum FSH and AMH concentrations were determined, which in the patient were 15 mIU / ml and 0.3 ng / ml, respectively. Based on the obtained values, the ratio of FSH to AMH was determined (FSH / AMH = 50), which indicated, according to our method, the possibility of obtaining dominant follicles against the background of gonadotropic stimulation and intrinsic oocytes in ART cycles. Superovulation was stimulated from day 2 of the menstrual cycle using gonadotropic drugs in a total dose of 2550 ME, in combination with gonadotropin releasing hormone agonists prescribed from day 6 of gonadotropic stimulation of the ovaries, the duration of administration was 5 days. On day 11 of gonadotropic stimulation, an ovulation trigger of 10,000 IU was administered. Hormonal stimulation was accompanied by ultrasound and hormonal monitoring. In this patient, at the time of the puncture, 2 leading follicles were registered in the right ovary and 2 in the left ovary. The thickness of the endometrium was 11 mm.
Аспирация ооцитов проведена через 36 часов после введения овуляторной дозы ХГ под контролем УЗ аппарата «ALOKA 3500» (Япония), оснащенного пункционной траекторией с использованием трансвагинального датчика с адаптером для пункционной иглы «COOK» (Австралия). При пункции было получено 3 ооцита. Произведен перенос 2 эмбрионов в полость матки.Oocyte aspiration was carried out 36 hours after the administration of an ovulatory dose of CG under the control of an ALOKA 3500 ultrasound apparatus (Japan) equipped with a puncture trajectory using a transvaginal probe with a COOK puncture needle adapter (Australia). During puncture, 3 oocytes were obtained. 2 embryos were transferred to the uterine cavity.
Результатом конкретной программы ИКСИ у данной пациентки явилась маточная беременность, диагностированная первоначально по сывороточному уровню ХГЧ в динамике через 14 и 17 дней после переноса эмбрионов и при УЗИ в 7-8 недель гестации.The result of a specific ICSI program in this patient was a uterine pregnancy, diagnosed initially by serum hCG in dynamics 14 and 17 days after embryo transfer and with ultrasound at 7-8 weeks of gestation.
В наше исследование было включено 29 пациенток. Критериями включения были: уровень АМГ 0,1-0,5 нг/мл, количество антральных фолликулов от 1 до 3 в каждом яичнике на момент включения в протокол стимуляции (2-3 дни менструального цикла) и настойчивое желание пациентки, направленное на получение собственных ооцитов в программах ВРТ. С целью выявления диагностического критерия, указывающего на крайнюю степень снижения овариального резерва, при котором на фоне гонадотропной стимуляции невозможно достичь развития фолликулов, ретроспективно, после завершения контролируемой овариальной стимуляции и протокола ВРТ пациентки были разделены на 3 клинические группы. В первую клиническую группу (n=9) были включены обследуемые, у которых на фоне гонадотропной стимуляции в протоколах ВРТ не удалось достичь развития фолликулов. Вторую клиническую группу (n=14) составили пациентки, у которых на фоне идентичных доз вводимых гонадотропинов удалось получить ответную реакцию яичников в виде развития доминантных фолликулов и получения при трансвагинальной пункции яичников не менее 1 ооцита. Однако эффекта после проведенной программы ВРТ (клинической беременности) не наступило. Третья группа (n=6) была сформирована из пациенток с диагностированной клинической беременностью после проведения протокола ВРТ с использованием аналогичной гонадотропной стимуляции.Our study included 29 patients. The inclusion criteria were: AMH level of 0.1-0.5 ng / ml, the number of antral follicles from 1 to 3 in each ovary at the time of inclusion in the stimulation protocol (2-3 days of the menstrual cycle) and the patient’s persistent desire to obtain their own oocytes in ART programs. In order to identify a diagnostic criterion that indicates an extreme degree of reduction in the ovarian reserve, in which, against the background of gonadotropic stimulation, it is impossible to achieve follicular development, retrospectively, after the completion of controlled ovarian stimulation and the ART protocol, the patients were divided into 3 clinical groups. The first clinical group (n = 9) included subjects in whom, against the background of gonadotropic stimulation, it was not possible to achieve follicular development in the ART protocols. The second clinical group (n = 14) consisted of patients who, against the background of identical doses of gonadotropins administered, were able to obtain an ovarian response in the form of the development of dominant follicles and receiving at least 1 oocyte during transvaginal ovarian puncture. However, the effect after the ART program (clinical pregnancy) did not occur. The third group (n = 6) was formed from patients with a diagnosed clinical pregnancy after the ART protocol using similar gonadotropic stimulation.
В качестве контроля было проведено аналогичное обследование у пациенток, включенных в программы ВРТ с нормативным уровнем АМГ от 1 до 2,5 нг/мл и с количеством антральных фолликулов более 5 в каждом из яичников на момент включения в программу. Ретроспективно были отобраны 10 пациенток с положительным результатом проведенных программ ВРТ (клинически подтвержденная беременность).As a control, a similar examination was conducted in patients included in ART programs with a standard level of AMH from 1 to 2.5 ng / ml and with the number of antral follicles more than 5 in each of the ovaries at the time of inclusion in the program. In retrospect, 10 patients were selected with a positive result of ART programs (clinically confirmed pregnancy).
В каждой из исследуемых групп на момент включения в программу на 2-3 дни менструального цикла определяли уровни ФСГ и АМГ. Вычисляли коэффициент отношения абсолютных значений ФСГ к АМГ (ФСГ/АМГ). Проведенный межгрупповой сравнительный анализ показал, что у обследуемых 1 клинической группы вариабельность коэффициента находилась в пределах от 51 до 118. Средний внутригрупповой коэффициент составил 84,8. Во второй клинической группе коэффициент отношения ФСГ/АМГ находился в пределах 24,2-50. Среднее значение коэффициента составило 39,1. В наиболее успешной третьей клинической группе колебания изучаемого коэффициента определялось пределами 11,6-50. При этом в среднем коэффициент составил 32,3. В контрольной группе коэффициент отношения ФСГ/АМГ колебался от 2,6 до 6,7, в среднем составив 4,4. Приведенные данные указывают на тот факт, что у пациенток с отсутствием ответной реакции яичников на гонадотропную стимуляцию яичников регистрировался наивысший коэффициент отношения ФСГ/АМГ, превышающий в 19,3 раза коэффициент в группе контроля. При менее выраженном истощении яичников (во 2 и 3 клинически группах) изучаемый коэффициент был соответственно в 2,2-2,6 раза меньше по сравнению с 1 группой и в 8,9-7,3 раза соответственно выше, чем в группе контроля.In each of the studied groups at the time of inclusion in the program for 2-3 days of the menstrual cycle, the levels of FSH and AMH were determined. The ratio of the absolute values of FSH to AMG (FSH / AMG) was calculated. The conducted intergroup comparative analysis showed that the examined patients of the 1st clinical group had coefficient variability ranging from 51 to 118. The average intragroup coefficient was 84.8. In the second clinical group, the FSH / AMH ratio was in the range of 24.2-50. The average value of the coefficient was 39.1. In the most successful third clinical group, fluctuations in the studied coefficient were determined by the limits of 11.6-50. Moreover, the average coefficient was 32.3. In the control group, the FSH / AMH ratio ranged from 2.6 to 6.7, averaging 4.4. These data indicate the fact that in patients with no response of the ovaries to gonadotropic stimulation of the ovaries, the highest FSH / AMH ratio was recorded, which is 19.3 times higher than the coefficient in the control group. With less pronounced ovarian depletion (in clinical groups 2 and 3), the studied coefficient was 2.2–2.6 times less, respectively, compared with group 1 and 8.9–7.3 times respectively higher than in the control group.
Анализ представленных данных позволил нам предложить коэффициент отношения ФСГ/АМГ в качестве оценки резервных возможностей яичников в протоколах ВРТ и выделения группы пациенток с критически выраженным истощением яичников с целью определения показаний к программе «Донация ооцитов».Analysis of the presented data allowed us to propose the FSH / AMH ratio as an estimate of the reserve capacity of the ovaries in the ART protocols and to identify a group of patients with critically expressed ovarian exhaustion in order to determine the indications for the Oocyte Donation program.
Заявленный способ позволяет:The claimed method allows you to:
- своевременно проводить коррекцию тактики лечения пациенток с синдромом «слабого» ответа яичников (с отсутствием вероятности получения собственных ооцитов в протоколах ЭКО),- timely correction of treatment tactics for patients with the syndrome of "weak" response of the ovaries (with no probability of getting their own oocytes in IVF protocols),
- определить объективные показания к проведению оптимальной программы ВРТ с использованием «донорских» ооцитов,- determine objective indications for the optimal ART program using "donor" oocytes,
- устранить необоснованное медикаментозное воздействие на организм пациенток,- eliminate unreasonable drug effects on the body of patients,
- снизить материальные затраты на лечение бесплодия.- reduce material costs for the treatment of infertility.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014126144/15A RU2565449C1 (en) | 2014-06-26 | 2014-06-26 | Method for selecting female patients with poor ovarian reserve for egg donation programme |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014126144/15A RU2565449C1 (en) | 2014-06-26 | 2014-06-26 | Method for selecting female patients with poor ovarian reserve for egg donation programme |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2565449C1 true RU2565449C1 (en) | 2015-10-20 |
Family
ID=54327205
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014126144/15A RU2565449C1 (en) | 2014-06-26 | 2014-06-26 | Method for selecting female patients with poor ovarian reserve for egg donation programme |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2565449C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2602456C1 (en) * | 2015-10-20 | 2016-11-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта" | Method of assessing of aromatase activity of ovarian follicles |
| RU2619345C1 (en) * | 2016-03-10 | 2017-05-15 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта" | Method for ovaries antral follicles aromatase activity assessment |
| RU2750159C1 (en) * | 2020-12-04 | 2021-06-22 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for diagnosis of premature ovarian insufficiency |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2309411C2 (en) * | 2005-11-24 | 2007-10-27 | Ростовский НИИ акушерства и педиатрии МЗ РФ | Method for selecting female patients with the syndrome of "empty" follicles for carrying out ecf and et program with donor oocytes |
-
2014
- 2014-06-26 RU RU2014126144/15A patent/RU2565449C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2309411C2 (en) * | 2005-11-24 | 2007-10-27 | Ростовский НИИ акушерства и педиатрии МЗ РФ | Method for selecting female patients with the syndrome of "empty" follicles for carrying out ecf and et program with donor oocytes |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Gleicher N, Weghofer A, Barad DH. Discordances between follicle stimulating hormone (FSH) and anti-MÜllerian hormone (AMH) in female infertility. Reproductive Biology and Endocrinology. 2010;8, article 64. Leader B, Hegde A, Baca Q, et al. High frequency of discordance between anti-MÜllerian hormone and follicle-stimulating hormone levels in serum from estradiol-confirmed days 2 to 4 of the menstrual cycle from 5,354 women in U.S. fertility centers. Fertility and Sterility. 2012;98:1037-1042. Leader B, Baca Q, Seifer D, Baker VL. Discordance between antimullerain hormone (AMH) and day 3 follicle stimulating hormone (FSH) levels in the assessment of ovarian reserve. Fertility and Sterility. 2010;94(supplement):p. 23. Abdallah H, Thum Y. Association of AMH and FSH levels with IVF treatment. Fertility and Sterility. 2008;90(supplement):p. 405. * |
| Nelson SM, Yates RW, Fleming R. Serum anti-MÜllerian hormone and FSH: prediction of live birth and extremes of response in stimulated cycles-implications for individualization of therapy. Human Reproduction. 2007;22(9):2414-2421. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2602456C1 (en) * | 2015-10-20 | 2016-11-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта" | Method of assessing of aromatase activity of ovarian follicles |
| RU2619345C1 (en) * | 2016-03-10 | 2017-05-15 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта" | Method for ovaries antral follicles aromatase activity assessment |
| RU2750159C1 (en) * | 2020-12-04 | 2021-06-22 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for diagnosis of premature ovarian insufficiency |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Iglesias et al. | Ethnicity as a determinant of ovarian reserve: differences in ovarian aging between Spanish and Indian women | |
| Yan et al. | Effect of adenomyosis on in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection outcomes in infertile women: a retrospective cohort study | |
| Wu et al. | Bone morphogenetic protein-15 in follicle fluid combined with age may differentiate between successful and unsuccessful poor ovarian responders | |
| Yang et al. | Exploration of the value of progesterone and progesterone/estradiol ratio on the hCG trigger day in predicting pregnancy outcomes of PCOS patients undergoing IVF/ICSI: a retrospective cohort study | |
| RU2565449C1 (en) | Method for selecting female patients with poor ovarian reserve for egg donation programme | |
| Pavone et al. | The progressive simplification of the infertility evaluation | |
| Ramer et al. | The serum brain-derived neurotrophic factor concentration prior to initiation of an in vitro fertilization cycle predicts outcome | |
| US20110002907A1 (en) | Methods, Systems, Compositions And Dosage Forms For Diagnosing And Treating Male Infertility | |
| Jiang et al. | Interaction networks between the fallopian tubes and the embryo in human tubal pregnancy: Current knowledge and perspectives | |
| Shao et al. | Predictive Value of Endometrial Receptivity for Pregnancy Outcomes of In-vitro Fertilization Embryo Transfer for Patients of Different Ages. | |
| Alsafi | The Correlation Between Female Age and Ovarian Reserve Biomarkers (FSH & AMH) and Its' Effect on The Response to Controlled Ovarian Hyper-stimulation (COS) and Pregnancy Rate Following Intracytoplasm sperm injection (ICSI) | |
| Mubarak et al. | Use of stimulated day 5 estradiol levels in a treatment cycle for the prediction of ovarian response in in vitro fertilization | |
| Timiadis | Clinical Aspects of Embryo Implantation | |
| RU2735218C1 (en) | Method for prediction of implantation in programs of ancillary reproductive technology in women of senior reproductive age with tuboperitoneal infertility factor | |
| RU2750159C1 (en) | Method for diagnosis of premature ovarian insufficiency | |
| RU2581027C1 (en) | Method for prediction of clinical outcomes of ef and et programs | |
| Ibis et al. | Testicular sperm retrieval for intracytoplasmic sperm injection: when to consider it after unsuccessful intracytoplasmic sperm injection with ejaculated sperm? | |
| Noghrehalipour et al. | The effect of altered Mucin1, FGF2, and HBEGF gene expression at the ectopic implantation site and endometrial tissues in the tubal pregnancy pathogenesis: a case-control study | |
| RU2567731C1 (en) | Method of predicting risk of miscarriage at early term after in vitro fertilisation and transfer of embryos in patients with infertility of tuboperitoneal genesis | |
| Wiweko et al. | Correlation between follicular fluid AMH levels and numbers of oocytes in polycystic ovarian syndrome patients undergoing in vitro fertilization | |
| RU2734840C1 (en) | Method for endometrial implantation potential evaluation in endometriosis-associated infertility | |
| Hasdemir et al. | A comparison of success rates of embryo transfer on weekdays and weekends | |
| Gahlot | Predictive value of basal FSH, Endometrial thickness, Pattern and Serum E2 in In-vitro Fertilization embryo transfer cycles success | |
| Gupta et al. | Study of genital tuberculosis and its impact on fertility in a tertiary care Centre | |
| Al Krayem et al. | Cryo-thawed embryo transfer. Artificial versus natural cycle. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160627 |