RU2538219C2 - Method of determining platelet resistance to acetylsalicylic acid - Google Patents
Method of determining platelet resistance to acetylsalicylic acid Download PDFInfo
- Publication number
- RU2538219C2 RU2538219C2 RU2013116658/15A RU2013116658A RU2538219C2 RU 2538219 C2 RU2538219 C2 RU 2538219C2 RU 2013116658/15 A RU2013116658/15 A RU 2013116658/15A RU 2013116658 A RU2013116658 A RU 2013116658A RU 2538219 C2 RU2538219 C2 RU 2538219C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- values
- points
- correspond
- aggregation
- asa
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к актуальной проблеме современной клинической и профилактической персонифицированной медицины - определению индивидуальных особенностей реакции тромбоцитов на лекарственные средства, а именно к методам превентивной in vitro диагностики резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте (АСК).The invention relates to the urgent problem of modern clinical and prophylactic personified medicine - the determination of individual characteristics of the reaction of platelets to drugs, and in particular to methods of preventive in vitro diagnosis of platelet resistance to acetylsalicylic acid (ASA).
В связи с несомненной профилактической эффективностью при сердечнососудистых заболеваниях и ценовой доступностью АСК является самым часто назначаемым антитромботическим препаратом [Волков В.И., Рябуха В.В., Запровальная О.Е., Ладный А.И. Диагностика резистентности к аспирину у больных ишемической болезнью сердца. Укр. кардиол. журн., 6 января 2006 г. [он-лайн]. Найдено в Интернет: <URL: http://rq1.net.ua/cardio_j/2006/3/IMAG306/volkkov.gif>]. Однако известно, что достичь адекватного снижения агрегации тромбоцитов и предотвратить повторный тромбоз и возникновение сердечно-сосудистых катастроф удается не у всех пациентов, принимающих АСК [Ашихмин, Я.И. Феномен резистентности к антитромботическому действию аспирина и пути его преодоления / Я.И. Ашихмин О.М. Драпкина // Российские медицинские вести, 2008. - Т.13. - №2]. По данным ряда авторов такое явление, называемое «резистентностью» к АСК, распространено среди населения с частотой встречаемости от 5 до 48% [Hankey, G. Aspirin resistance / G. Hankey, J. Eikelboom // Lancet, 2006 - Vol.367]. Одной из важнейших проблем, возникающих при попытке каким-либо образом измерить (оценить) степень ингибирования функции тромбоцитов после воздействия фармакологических агентов состоит в том, что ни один из существующих лабораторных тестов не включает в себя оценку всей многогранности функции тромбоцитов [Бугаенко, В.В. Современные принципы антитромбоцитарной терапии у больных с ишемической болезнью сердца. Часть 2. Переносимость и возможные побочные эффекты / В.В. Бугаенко // Кардиологический журнал, 2009. - №5]. При этом in vitro диагностика эффективности АСК не оценивает механизмы снижения функции тромбоцитов, которые могут обусловливаться дефектами такого важного структурно-функционального компонента тромбоцитов как гранулы [Воробьев А.И. Руководство по гематологии / А.И. Воробьев. - М.: Медицина, 1985]. Нарушенное функционирование этих специфических органелл тромбоцитов является патогенетической основой ряда заболеваний, при которых прием АСК противопоказан. Известно, что при некоторых патологических состояниях кроветворения наблюдается неадекватная реакция тромбоцитов на прием ацетилсалициловой кислоты, выражающаяся в появлении геморрагии [Avram, S., Lupu, A. Abnormalities of platelet aggregation in chronic myeloproliferative disorders / S. Avram, A. Lupu // J. Cell. Mol. Med., 2001 - Vol 5]. Использование АСК вызывает повышенный риск желудочно-кишечных кровотечений и геморрагических инсультов [He J., Whelton P.К. Aspirin and risk of haemorrhagic stroke: a meta-analysis of randomized controlled trials // JAMA. 1998. Vol.280. P.1930-1935]. В связи с этим весьма актуальным является разработка диагностических тестов проводимых до начала приема препарата пациентом с целью прогноза индивидуальной реактивности тромбоцитов к действию АСК, в том числе включающей оценку секреторной активности.Due to the undoubted prophylactic effectiveness in cardiovascular diseases and affordability, ASA is the most commonly prescribed antithrombotic drug [Volkov V.I., Ryabukha V.V., Zaprovalnaya O.E., Ladny A.I. Diagnosis of aspirin resistance in patients with coronary heart disease. Ukr. cardiol. Magazine, January 6, 2006 [on-line]. Found on the Internet: <URL: http://rq1.net.ua/cardio_j/2006/3/IMAG306/volkkov.gif>]. However, it is known that not all patients taking ASA can achieve an adequate decrease in platelet aggregation and prevent re-thrombosis and the occurrence of cardiovascular catastrophes [Ashikhmin, Ya.I. The phenomenon of resistance to the antithrombotic action of aspirin and ways to overcome it / Ya.I. Ashikhmin O.M. Drapkina // Russian Medical News, 2008. - T. 13. - No. 2]. According to some authors, this phenomenon, called “resistance” to ASA, is common among the population with a frequency of occurrence of 5 to 48% [Hankey, G. Aspirin resistance / G. Hankey, J. Eikelboom // Lancet, 2006 - Vol.367] . One of the most important problems when trying to measure (evaluate) the degree of inhibition of platelet function after exposure to pharmacological agents is that none of the existing laboratory tests includes an assessment of the multifaceted nature of platelet function [Bugaenko, V.V. . Current principles of antiplatelet therapy in patients with coronary heart disease.
Известен способ определения резистентности к АСК посредством измерения параметров светопропускания при индуцированной агрегации тромбоцитов в плазме крови [Патент РФ №2413953C1, G01N 33/86 (2006.01). Опубл. 10.03.2011. Бюл. №7]. Метод позволяет количественно оценивать амплитуду процесса агрегации in vitro. Для изучения антиагрегационных свойств в пробирку с обогащенной тромбоцитами плазмой предварительно вносили раствор АСК и инкубировали. Затем вносился индуктор - АДФ и регистрировалась амплитуда агрегации. Результаты сравнивались с показателями агрегации, вызванной индуктором без предварительного воздействия АСК, с вычислением коэффициента ингибирования агрегации (КИА).There is a method of determining resistance to ASA by measuring the parameters of light transmission during induced platelet aggregation in blood plasma [RF Patent No. 2413953C1, G01N 33/86 (2006.01). Publ. 03/10/2011. Bull. No. 7]. The method allows to quantify the amplitude of the in vitro aggregation process. To study anti-aggregation properties, an ASA solution was preliminarily added to a tube with platelet-rich plasma and incubated. Then, an inductor, ADP, was introduced and the amplitude of aggregation was recorded. The results were compared with the indicators of aggregation induced by the inducer without prior exposure to ASA, with the calculation of the aggregation inhibition coefficient (KIA).
Диагностическая ценность этого способа ограничена очевидными недостатками: 1) длительность, трудоемкость и недостаточная стандартизация процесса приготовления богатой тромбоцитами плазмы; 2) в ходе центрифугирования кровяные пластинки подвергаются значительным механическим воздействиям, которые существенно изменяют их функциональную состоятельность; 3) на этапе пробоподготовки нарушается естественное окружение тромбоцитов, что не позволяет учитывать влияние на них других форменных элементов крови, модулирующих функции тромбоцитов; 4) увеличивается вероятность значительного снижения концентрации лабильных медиаторов к моменту измерения. Все это не позволяет создать оптимальные стандартные условия, необходимые для обеспечения полной реализации функций тромбоцитов после стимулирования индуктором. Существенным недостатком оптической агрегатометрии является также невозможность исследовать кровь больных с выраженной гиперлипидемией, часто встречающейся в кардиологической практике. Кроме того, измерение вышеуказанным методом пропускает 67% пациентов с дефектом накопления гранул и угрозой геморрагических осложнений при терапии [Научное общество "Клиническая гемостазиология". Диагностика [он-лайн]. Найдено в Интернет: <URL:http://www.hemostas.ru/society/diagnostics/ecomeds/index.shtml>].The diagnostic value of this method is limited by obvious disadvantages: 1) the duration, complexity and insufficient standardization of the preparation of platelet-rich plasma; 2) during centrifugation, the blood plates are subjected to significant mechanical stresses that significantly change their functional viability; 3) at the stage of sample preparation, the natural environment of platelets is disrupted, which does not allow taking into account the influence on them of other shaped blood elements that modulate the function of platelets; 4) the probability of a significant decrease in the concentration of labile mediators by the time of measurement increases. All this does not allow to create optimal standard conditions necessary to ensure the full realization of platelet functions after stimulation with an inductor. A significant drawback of optical aggregatometry is also the inability to examine the blood of patients with severe hyperlipidemia, which is often found in cardiological practice. In addition, 67% of patients with a defect in the accumulation of granules and the risk of hemorrhagic complications during therapy miss the measurement by the above method [Scientific Society "Clinical Hemostasiology". Diagnostics [on-line]. Found on the Internet: <URL: http: //www.hemostas.ru/society/diagnostics/ecomeds/index.shtml>].
Известен другой способ диагностики резистентности к АСК, который заключается в исследовании функциональной активности тромбоцитов до и после инкубации образца биологического материала с ацетилсалициловой кислотой, при этом агрегационную активность тромбоцитов определяют в цельной крови импедансным методом с вычислением ингибирующей способности АСК в процентах [Патент РФ №2379684 C2, G01N 33/48 (2006.01). Опубл. 20.01.2010. (прототип)]. Данный способ позволяет прогнозировать резистентность к АСК до начала терапии, однако не дает информации о состоянии гранулярного аппарата тромбоцитов, важного для их функционирования в системе гемостаза.There is another method for the diagnosis of resistance to ASA, which consists in studying the functional activity of platelets before and after incubation of a sample of biological material with acetylsalicylic acid, while the aggregation activity of platelets is determined in whole blood by the impedance method with the calculation of the inhibitory ability of ASA in percent [RF Patent No. 2379684 C2 G01N 33/48 (2006.01). Publ. 01/20/2010. (prototype)]. This method allows predicting resistance to ASA before starting therapy, but does not provide information about the state of the granular apparatus of platelets, which is important for their functioning in the hemostatic system.
Технический результат предлагаемого изобретения заключается в проведении быстрой комплексной диагностики резистентности тромбоцитов к АСК с оценкой функционального состояния гранул тромбоцитов до начала лечения и возможности предотвращении развития нежелательных тромботических или геморрагических осложнений.The technical result of the invention consists in conducting a quick comprehensive diagnosis of platelet resistance to ASA with an assessment of the functional state of platelet granules before treatment and the possibility of preventing the development of unwanted thrombotic or hemorrhagic complications.
Технический результат достигается тем, что в способе определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте (АСК) путем импедансного исследования агрегационной функции тромбоцитов in vitro, при котором исследуют агрегационную активность после инкубации образца биологического материала с АСК с использованием индуктора агрегации новым является то, что агрегацию тромбоцитов индуцируют коллагеном в оптимальной концентрации 2 мг/мл и одновременно с измерением импеданса проводят определение динамики освобождения гранул тромбоцитов люминесцентным методом, где перед проведением агрегации пробы калибруются с помощью стандарта аденозинтрифосфата (АТФ), по полученным агрегатограммам определяют значения амплитуды агрегации в Омах и присваивают полученным значениям баллы: значения <6 соответствуют 0 баллов, значения 7-9 соответствуют 1 баллу, значения 10-12 соответствуют 2 баллам, значения >12 соответствуют 3 баллам; затем определяют интенсивность высвобождения АТФ из гранул тромбоцитов в нмолях и присваивают полученным значениям баллы: значения <0,5 соответствуют 0 баллам, значения 0,5-1.0 соответствуют 1 баллу, значения 1,0-1,5 соответствуют 2 баллам, значения >1,5 соответствуют 3 баллам, и далее рассчитывают индекс резистивности (ИР) по формуле:The technical result is achieved by the fact that in the method for determining platelet resistance to acetylsalicylic acid (ASA) by impedance studies of platelet aggregation function in vitro, in which the aggregation activity after incubation of a sample of biological material with ASA using an aggregation inducer is investigated, it is new that platelet aggregation is induced collagen in an optimal concentration of 2 mg / ml and simultaneously with the measurement of impedance, the dynamics of the release of thrombo granules is determined it using the luminescent method, where, before aggregation, the samples are calibrated using the standard of adenosine triphosphate (ATP), the aggregation amplitudes in Ohms are determined from the obtained aggregograms and the points are assigned to the values obtained: values <6 correspond to 0 points, values 7-9 correspond to 1 point, values 10 -12 correspond to 2 points, values> 12 correspond to 3 points; then, the intensity of ATP release from platelet granules in nmoles is determined and the obtained values are assigned points: values <0.5 correspond to 0 points, values 0.5-1.0 correspond to 1 point, values 1.0-1.5 correspond to 2 points, values> 1 , 5 correspond to 3 points, and then the resistance index (IR) is calculated by the formula:
ИР=Би+Бл,IR = B and + B l ,
где Би и Бл - степень чувствительности к АСК в баллах в импедансном и люминесцентном тестах соответственно, при этом значение показателя ИР более 4 указывает на наличие аспиринорезистентности тромбоцитов.wherein B and D and L - the degree of sensitivity to ASA scores in impedance and luminescence assays, respectively, the value of the index MFI greater than 4 indicates a aspirinorezistentnosti platelets.
Предложенный способ отличается от прототипа тем, что определение резистентности к АСК проводят in vitro путем исследования функциональной активности тромбоцитов только после инкубации образца биологического материала с АСК, при этом агрегационную активность тромбоцитов и состояние их гранул определяют в цельной крови комплексным импеданс-люминесцентным методом, что позволяет получать дополнительный диагностический параметр - степень влияния АСК на показатели высвобождения содержимого тромбоцитарных гранул и позволяет более объективно подходить к оценке индивидуальной чувствительности пациента к препарату АСК.The proposed method differs from the prototype in that the determination of resistance to ASA is carried out in vitro by examining the functional activity of platelets only after incubation of a sample of biological material with ASA, while the aggregation activity of platelets and the state of their granules is determined in whole blood by a complex impedance-luminescent method, which allows receive an additional diagnostic parameter - the degree of influence of ASA on the indicators of the release of the contents of platelet granules and allows more lens but approach the assessment of individual patient sensitivity to ASA.
Таким образом, перечисленные выше отличительные от прототипа признаки позволяют сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «новизна». Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, не выявлены в других технических решениях и, следовательно, обеспечивают заявляемому решению соответствие критерию «изобретательский уровень».Thus, the above characteristics that are distinctive from the prototype allow us to conclude that the claimed technical solution meets the criterion of "novelty." Signs that distinguish the claimed technical solution from the prototype are not identified in other technical solutions and, therefore, provide the claimed solution with the criterion of "inventive step".
Сущность изобретения поясняется с помощью графических материалов:The invention is illustrated using graphic materials:
На фиг. 1 представлены кривые коллаген-индуцированной агрегации и кривые высвобождения гранул тромбоцитов в цельной крови до (1-2) и после (3-4) инкубации проб с АСК для индивидуума, чувствительного к АСК.In FIG. Figure 1 shows the curves of collagen-induced aggregation and the release curves of platelet granules in whole blood before (1-2) and after (3-4) incubation of samples with ASA for an individual sensitive to ASA.
На фиг. 2 представлены кривые коллаген-индуцированной агрегации и кривые высвобождения гранул тромбоцитов в цельной крови до (1-2) и после (3-4) инкубации проб с АСК для индивидуума, резистентного к АСК (1 - исходная кривая агрегации, 2 - исходная кривая интенсивности высвобождения гранул, 3 - кривая агрегации после инкубирования с АСК, 4 - кривая интенсивности высвобождения гранул после инкубации проб крови с АСК).In FIG. Figure 2 shows the curves of collagen-induced aggregation and the release curves of platelet granules in whole blood before (1-2) and after (3-4) incubation of samples with ASA for an ASA-resistant individual (1 - initial aggregation curve, 2 - initial intensity curve granule release, 3 - aggregation curve after incubation with ASA, 4 - intensity curve of granule release after incubation of blood samples with ASA).
Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.
Образцы крови получают из локтевой вены и стабилизируются 3,8% раствором цитрата натрия в объемном отношении 9:1. В процессе исследования кровь сохраняют в закрытых пластиковых пробирках при комнатной температуре с соблюдением общепринятых мер предосторожности при работе с клетками крови.Blood samples are obtained from the ulnar vein and stabilized with a 3.8% sodium citrate solution in a volume ratio of 9: 1. During the study, the blood is stored in closed plastic tubes at room temperature in accordance with generally accepted precautions when working with blood cells.
Анализ функциональной активности тромбоцитов осуществляют не ранее чем через 15 минут и не позднее чем через 3 часа после получения крови с помощью люми-агрегометра при 37°C и перемешивании содержимого кювет со скоростью вращения мешалки 1000 об/мин. Соотношение объемов пробы крови и индуктора при этом составляет 100:1.The analysis of the functional activity of platelets is carried out no earlier than 15 minutes and no later than 3 hours after receiving blood using a lumi-aggregometer at 37 ° C and mixing the contents of the cuvettes with a stirrer speed of 1000 rpm. The ratio of the volume of the blood sample and the inductor in this case is 100: 1.
Перед проведением агрегации люминесцентным методом пробы калибруются с помощью стандарта АТФ. При этом устанавливается индивидуальное для пациента усиление (в %) реакции люминесценции. Далее регистрируется интенсивность высвобождения АДФ из гранул тромбоцитов (в нмоль) с одновременной регистрацией параметров импеданса индуцированной агрегации тромбоцитов в этой же кювете.Before luminescent aggregation, samples are calibrated using the ATP standard. In this case, the individual (for%) enhancement of the luminescence reaction is established for the patient. Then, the intensity of ADP release from platelet granules (in nmol) is recorded with simultaneous recording of the impedance parameters of the induced platelet aggregation in the same cuvette.
Для индуцирования агрегации используют раствор коллагена в конечной концентрации 2,0 мг/мл, поставляющийся готовым к использованию.To induce aggregation, a collagen solution in a final concentration of 2.0 mg / ml is used, which is supplied ready for use.
Исследования функциональной активности тромбоцитов у каждого пациента проводят в одной пробе - после предварительной инкубации крови с АСК.Studies of the functional activity of platelets in each patient are carried out in one sample - after preliminary incubation of blood with ASA.
Инкубацию проводят в течение 15 минут при температуре 37°C. При этом в опытную пробу цельной крови добавляют 40 мкл 3,36 мМ раствора АСК.Incubation is carried out for 15 minutes at a temperature of 37 ° C. In this case, 40 μl of a 3.36 mM ASA solution is added to the test sample of whole blood.
Обработка агрегатограмм производится по общепринятым характерным точкам кривых агрегации с определением максимальной амплитуды нарастания импеданса в Омах к 5-й минуте от момента внесения в измерительную ячейку индуктора - коллагена и с определением интенсивности люминесценции при высвобождении АТФ из гранул тромбоцитов в нмолях. Выявление исходно низких показателей высвобождения гранул может свидетельствовать о патологии тромбоцитов и противопоказании к назначению АСК. Наряду с рутинными параметрами оценки агрегатограммы рассчитывается индекс резистентности (ИР). Данный параметр представляет собой сумму баллов, характеризующих степень чувствительности пациента в импедансном тесте и люминесцентном тесте по максимальным амплитудам агрегации и высвобождения гранул, и рассчитывается по формуле: ИР=Би+Бл, где Би и Бл - степень чувствительности к АСК в баллах в импедансном и люминесцентном тесте соответственно. Этот параметр характеризует итоговую степень индивидуальной чувствительности к АСК и включает в себя совокупную оценку ингибирующего действия АСК на процесс накопления АТФ, интенсивности высвобождения гранул, динамику мембранного потенциала тромбоцитов и агрегационно-адгезивную способность. ИР позволяет определить индивидуальную чувствительность пациента к АСК в абсолютных единицах шкалы, что может служить критерием для выявления лиц как с повышенной, так и с пониженной реакцией на препарат. Это позволит назначать терапию аспирином, обоснованную своевременной предиктивной лабораторной оценкой, и избежать нежелательных последствий неадекватного лечения.Aggregation patterns are processed according to generally accepted characteristic points of the aggregation curves with determining the maximum amplitude of the impedance increase in Ohms by the 5th minute from the moment of introducing collagen into the measuring cell and with determining the luminescence intensity during the release of ATP from platelet granules in nmoles. Identification of initially low rates of release of granules may indicate platelet pathology and contraindications to the appointment of ASA. Along with the routine parameters for evaluating the aggregatogram, a resistance index (IR) is calculated. This parameter represents the number of points that characterize the degree of sensitivity of the patient in the impedance test and the fluorescent test of maximum amplitudes aggregation and release of granule, and is calculated by the formula: TS = B u + B n where B and C, and B L - degree of sensitivity to ASA points in the impedance and luminescent test, respectively. This parameter characterizes the final degree of individual sensitivity to ASA and includes a cumulative assessment of the inhibitory effect of ASA on the process of ATP accumulation, granule release rate, dynamics of platelet membrane potential and aggregation-adhesive ability. IR allows you to determine the individual sensitivity of the patient to ASA in absolute units of the scale, which can serve as a criterion for identifying individuals with both increased and decreased reaction to the drug. This will allow prescribing aspirin therapy, justified by timely predictive laboratory assessment, and avoid the undesirable consequences of inadequate treatment.
Примеры получаемых агрегатограмм с оценкой индивидуальной резистентности к АСК приведены на фиг. 1-2.Examples of aggregates obtained with an assessment of individual resistance to ASA are shown in FIG. 1-2.
Степень резистентности определяют в соответствии с предложенной шкалой:The degree of resistance is determined in accordance with the proposed scale:
В таблице 1 представлены результаты обследования 13 клинически здоровых людей, проведенного на базе Красноярского филиала ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России. По предлагаемому способу определяли величину ИР. В пробах десяти пациентов значение этого показателя было ниже 4. У трех человек по результатам тестирования ИР был равен или более 4.Table 1 presents the results of a survey of 13 clinically healthy people, conducted on the basis of the Krasnoyarsk branch of the FSBI Hematology Research Center of the Russian Ministry of Health. The proposed method was determined by the value of IR. In samples of ten patients, the value of this indicator was lower than 4. In three people, according to the results of testing, IR was equal to or more than 4.
Поскольку у здоровых лиц, не принимавших АСК, значения ИР исходно без проведения инкубации с АКС были равны или более 4, то данный уровень значений ИР был принят как критерий резистентности. После того, как пациентами была принята per os разовая доза АСК в количестве 125 мг/сут, на следующий день вновь определяли показатели агрегации в пробе свежей крови без предварительных инкубаций. У трех пациентов выявленных по результатам предварительного тестирования с инкубацией in vitro ИР вновь был более 4, как и до приема препарата. Это подтверждает, что предлагаемое техническое решение позволяет выявлять пациентов с резистентностью к антитромбоцитарному действию АСК. Напротив, среди лиц, имеющих показатель ИР менее 4, разовый прием 125 мг АСК вызывал существенное ингибирование показателей агрегации, что свидетельствует об их чувствительности к данному препарату.Since in healthy individuals who did not take ASA, the IR values at baseline without incubation with ACS were equal to or more than 4, this level of IR values was adopted as a resistance criterion. After the patients received a single dose of ASA per os in an amount of 125 mg / day, the aggregation parameters in the fresh blood sample were again determined the next day without preliminary incubations. In three patients identified by preliminary testing with incubation in vitro, IR was again more than 4, as before taking the drug. This confirms that the proposed technical solution allows to identify patients with resistance to antiplatelet action of ASA. On the contrary, among individuals with an IR index of less than 4, a single dose of 125 mg of ASA caused a significant inhibition of aggregation indicators, which indicates their sensitivity to this drug.
Полученный результат свидетельствует о высоких диагностических возможностях предлагаемого способа и клинической пользе использования превентивного определения антитромботического действия АСК in vitro комплексным импеданс-люминисцентным методом.The obtained result indicates the high diagnostic capabilities of the proposed method and the clinical benefits of using the prophylactic determination of the antithrombotic action of ASA in vitro by a complex impedance-luminescent method.
Claims (1)
ИР=Би+Бл,
где Би и Бл - степень чувствительности к АСК в баллах в импедансном и люминесцентном тестах соответственно, при этом значение показателя ИР более 4 указывает на наличие аспиринорезистентности тромбоцитов. A method for determining platelet resistance to acetylsalicylic acid (ASA) by an impedance study of platelet aggregation function in vitro, in which the aggregation activity is examined after incubation of a sample of biological material with ASA using an aggregation inductor, characterized in that platelet aggregation is induced by collagen 2 at optimal concentration ml and simultaneously with the measurement of impedance determine the dynamics of the release of platelet granules by the luminescent method, where before By aggregation, the samples are calibrated using the standard of adenosine triphosphate (ATP), the aggregation amplitudes in Ohms are determined from the obtained aggregograms and the points are assigned to the values obtained: values ≤6 correspond to 0 points, values 7–9 correspond to 1 point, values 10–12 correspond to 2 points, values> 12 correspond to 3 points; then determine the intensity of the release of ATP from platelet granules in nmoles, and assign points to the obtained values: values <0.5 correspond to 0 points, values 0.5-1.0 correspond to 1 point, values 1.0-1.5 correspond to 2 points, values> 1.5 correspond to 3 points, and then the resistance index (IR) is calculated by the formula:
IR = B and + B l ,
wherein B and D and L - the degree of sensitivity to ASA scores in impedance and luminescence assays, respectively, the value of the index MFI greater than 4 indicates a aspirinorezistentnosti platelets.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013116658/15A RU2538219C2 (en) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Method of determining platelet resistance to acetylsalicylic acid |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013116658/15A RU2538219C2 (en) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Method of determining platelet resistance to acetylsalicylic acid |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013116658A RU2013116658A (en) | 2014-11-10 |
| RU2538219C2 true RU2538219C2 (en) | 2015-01-10 |
Family
ID=53288389
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013116658/15A RU2538219C2 (en) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Method of determining platelet resistance to acetylsalicylic acid |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2538219C2 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2686700C1 (en) * | 2018-08-01 | 2019-04-30 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for determining thrombocyte resistance to antiaggregant preparations in patients with ischemic heart disease |
| RU2710272C1 (en) * | 2019-07-05 | 2019-12-25 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method of determining thrombocyte resistance to double antiplatelet therapy in patients with ischemic heart disease |
| RU2743808C1 (en) * | 2020-07-06 | 2021-02-26 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for determining high residual reactivity of thrombocytes in patients with ischemic heart disease, which are on antiaggregant therapy |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2379684C2 (en) * | 2007-11-29 | 2010-01-20 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии имени В.А. Алмазова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Method of determining anti-thrombotic effect of acetylsalicylic acid |
| RU2413953C1 (en) * | 2009-08-17 | 2011-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" | Method of diagnosing resistance to acetylsalicylic acid |
| UA64437U (en) * | 2011-04-04 | 2011-11-10 | Государственное Учреждение "Институт Геронтологии Им. Д.Ф. Чеботарева" Намн Украины | Method for diagnostics of secondary resistance to acetylsalicylic acid in patients of elderly age suffering on ischemic cardiac disease |
-
2013
- 2013-04-11 RU RU2013116658/15A patent/RU2538219C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2379684C2 (en) * | 2007-11-29 | 2010-01-20 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии имени В.А. Алмазова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Method of determining anti-thrombotic effect of acetylsalicylic acid |
| RU2413953C1 (en) * | 2009-08-17 | 2011-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" | Method of diagnosing resistance to acetylsalicylic acid |
| UA64437U (en) * | 2011-04-04 | 2011-11-10 | Государственное Учреждение "Институт Геронтологии Им. Д.Ф. Чеботарева" Намн Украины | Method for diagnostics of secondary resistance to acetylsalicylic acid in patients of elderly age suffering on ischemic cardiac disease |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ашихмин Я.И. Феномен резистентности к антитромботическому действию аспирина и пути его преодоления. Российские медицинские вести, 2008. - Т.13. - N2 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2686700C1 (en) * | 2018-08-01 | 2019-04-30 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for determining thrombocyte resistance to antiaggregant preparations in patients with ischemic heart disease |
| RU2710272C1 (en) * | 2019-07-05 | 2019-12-25 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method of determining thrombocyte resistance to double antiplatelet therapy in patients with ischemic heart disease |
| RU2743808C1 (en) * | 2020-07-06 | 2021-02-26 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for determining high residual reactivity of thrombocytes in patients with ischemic heart disease, which are on antiaggregant therapy |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2013116658A (en) | 2014-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gattas et al. | Procalcitonin as a diagnostic test for sepsis: health technology assessment in the ICU | |
| Sahin et al. | Association of red blood cell distribution width levels with severity of coronary artery disease in patients with non-ST elevation myocardial infarction | |
| Hume | Fibrinolysis in myocardial infarction | |
| PT2215480E (en) | Diagnostic and therapeutic tools for diseases altering vascular function | |
| CN105765382B (en) | For predicting the method and kit of the risk with cardiovascular disease or cardiovascular event | |
| CN106461677A (en) | Method of testing for pulmonary hypertension | |
| RU2538219C2 (en) | Method of determining platelet resistance to acetylsalicylic acid | |
| Qiu et al. | Association between hs-CRP levels and the outcomes of patients with small-artery occlusion | |
| RU2583939C1 (en) | Method for laboratory diagnosis of stages of hepatic fibrosis in chronic viral hepatitis c | |
| JPWO2011152012A1 (en) | Examination method of disease severity | |
| RU2379684C2 (en) | Method of determining anti-thrombotic effect of acetylsalicylic acid | |
| RU2486523C1 (en) | Method for estimating clinical effectiveness of antiaggregant therapy in patients with acute coronary syndrome | |
| BORAS et al. | The significance of red cell distribution width and homocysteine values in STEMI patients undergoing PCI in the population of Bosnia and Herzegovina. | |
| Majoy et al. | Platelet activation in a population of critically ill dogs as measured with whole blood flow cytometry and thromboelastography | |
| CN114438191A (en) | Application of hypoxia inducible factor 1alpha as marker in depression recurrence diagnosis | |
| Haines et al. | Establishment of reference ranges and evaluation of in vitro concentration‐dependent platelet inhibition by acetylsalicylic acid for multiple electrode impedance aggregometry in healthy dogs | |
| RU2419800C1 (en) | Method of assessing risk of recurrent thrombotic events in patients with acute coronary syndrome | |
| RU2639772C1 (en) | Method of individual prognosis of clinical effectiveness of dual antiplatelet therapy in patients with acute coronary syndrome | |
| Kamal et al. | Serum beta-2 microglobulin is a reliable biomarker to predict diabetic nephropathy | |
| RU2699569C1 (en) | Method of determining thrombocyte sensitivity to acetylsalicylic acid | |
| RU2761138C1 (en) | Method for assessing the risk of developing a severe course of coronavirus infection in women | |
| RU2768598C1 (en) | Method for assessing efficiency of liver cancer chemotherapy | |
| Polgár et al. | Platelet impedance adhesiometry: A novel technique for the measurement of platelet adhesion and spreading | |
| Seyis et al. | Relationship between Tei index and prognosis in patients with non ST segment elevation myocardial infarction | |
| WO2022255348A1 (en) | Method for evaluating risk of acute cerebral vascular disease using soluble clec2 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190412 |