RU2532352C2 - Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики - Google Patents
Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики Download PDFInfo
- Publication number
- RU2532352C2 RU2532352C2 RU2012127077/15A RU2012127077A RU2532352C2 RU 2532352 C2 RU2532352 C2 RU 2532352C2 RU 2012127077/15 A RU2012127077/15 A RU 2012127077/15A RU 2012127077 A RU2012127077 A RU 2012127077A RU 2532352 C2 RU2532352 C2 RU 2532352C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibodies
- specific antibodies
- sample
- test
- antigen
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 24
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 12
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 5
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 239000013566 allergen Substances 0.000 abstract description 3
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 abstract description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 3
- -1 for instance Substances 0.000 abstract description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 abstract 4
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 5
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 5
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 101710123661 Venom allergen 5 Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000010030 laminating Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000005312 nonlinear dynamic Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к иммунологии и медицинской диагностике и представляет собой способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики. Предложенное изобретение предназначено для иммунохроматографического определения в жидких пробах антител к возбудителям инфекционных заболеваний или другим антигенам, например, таким как аллергены. Отличительной особенностью предлагаемого способа определения антител является то, что раствор для разбавления пробы содержит специфические антитела против иммобилизованной в аналитической зоне тест-полоски антигена (или антигенов). Используемая концентрация антител в разбавляющем растворе меньше нижнего предела определения антител данным методом при использовании разбавляющего раствора, не содержащего специфических антител, вследствие чего в отсутствие специфических антител в пробе окрашивания аналитической зоны тест-полоски не наблюдается. Если же проба содержит специфические антитела, то наличие в разбавляющем растворе дополнительного количества специфических антител приводит к усилению интенсивности окраски аналитической зоны тест-полоски. Применение изобретения позволяет регистрировать суммарную концентрацию специфических антител в пробе и в разбавляющем растворе, что приводит к снижению предела обнаружения анализа вследствие смещения рабочего диапазона определяемых тестом концентраций в область более низких значений. 3 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к иммунологии и медицинской диагностике и представляет собой способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики. Наличие в сыворотке крови антител, специфичных к возбудителю определенного заболевания, или иному антигену, например, такому как аллерген, является эффективным критерием, позволяющим с высокой достоверностью диагностировать соответствующее инфекционное заболевание или аллергию (Резникова Л.С., Эпштейн-Литвак Р.В., Леви М.И. / Серологические методы исследования при диагностике инфекционных болезней - М., Медгиз, 1962; Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник для студентов медицинских ВУЗов / Под ред. А.А Воробьева. - М.: ООО «Медицинское информационное агенство», 2006). В случае диагностики инфекционных заболеваний преимуществами данного подхода по сравнению с непосредственным выявлением и идентификацией возбудителя является определенность при выборе тестируемой пробы (сыворотка крови, тогда как возбудитель может на данной стадии инфекции преимущественно локализоваться в самых разных органах и тканях), а также возможность быстрой детекции достаточно высокого уровня антител, индуцированного контактом с антигеном, в то время как для выявления антигена могут потребоваться довольно продолжительные стадии доращивания до достижения им регистрируемой концентрации. Хотя в настоящее время активно используются как микробиологические, так и иммунологические способы диагностики инфекционных заболеваний, для проведения массового первичного скрининга оптимально иммунологическое определение наличия в сыворотке крови специфических антител (серодиагностика), которое может быть реализовано с высокой экспрессностью и производительностью. Особенный интерес вызывают серодиагностические подходы в тех случаях, когда в силу особенностей роста микроорганизмов получение результатов микробиологического тестирования может потребовать значительного времени. В случае диагностики аллергии антитела против определенного аллергена являются главным маркером данного функционального расстройства (IgE антитела в случае аллергии немедленного типа и IgG антитела в случае аллергии замедленного типа), поэтому методы лабораторной диагностики аллергии зачастую сводятся к определению антител, или выявлению реакции организма, связанной с наличием данных антител (как в случае провокационной пробы) (Паттерсон Р., Грэммер Л.К., Гринбергер П.А. Аллерические болезни: диагностика и лечение / Перевод с англ., под ред. акад. РАМН А.Г. Чучалина (гл. ред.), чл.-корр. РАМН И.С. Гущина (отв. ред.). - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2000). Эти причины определяют значительный интерес к серодиагностическим методам.
Благодаря экспрессности, достаточно высокой чувствительности и специфичности серологические тесты незаменимы при массовых обследованиях. Кроме того, гуморальный иммунный ответ отражает активный инфекционный процесс, и поэтому результаты иммунохимического тестирования достоверно отражают именно случаи заболевания, дискриминируя их от бактерионосительства.
Иммунохимический анализ может быть реализован в различных форматах. Однако, поскольку для массовых обследований первоочередное значение имеют скорость и производительность тестирования, в данной ситуации несомненными преимуществами обладает иммунохроматографический анализ, для которого все необходимые реагенты предварительно нанесены на мембранные компоненты тест-полоски и ее контакт с тестируемой пробой непосредственно инициирует движение фронта жидкости по мембранам, протекание специфических реакций и формирование иммунных комплексов, которые благодаря включению в их состав окрашенного маркера могут детектироваться визуально или с помощью оптического детектора (Рис.1).
Применительно к серодиагностике (определению антител, специфичных к определенному антигену или группе антигенов) общая схема иммунохроматографии заключается в следующем.
Проба, потенциально содержащая специфические антитела, при контакте с тест-полоской под действием капиллярных сил перемещается вдоль тест-полоски. При этом она вначале взаимодействует с окрашенными частицами, на поверхности которых адсорбирован (конъюгирован) компонент, предназначенный для связывания с антителами. Часто в качестве такового компонента выбирают антивидовые антитела (иммуноглобулины, выделенные из сыворотки животного, иммунизированного препаратом иммуноглобулинов человека или другого организма, для которого проводится серодиагностика), белок A из Staphylococcus aureus, белок G из Streptococcus spp. или другие реагенты для связывания антител. В качестве метки наиболее часто используется коллоидное золото, а в качестве метода конъюгации - простая физическая адсорбция белка на поверхности с последующим отделением неадсорбированных молекул с помощью осаждения частиц коллоидного золота центрифугированием. Затем фронт жидкости преодолевает аналитическую (тестовую) зону, которая представляет собой участок мембраны с иммобилизованным антигеном (нативным или специально модифицированным для эффективной сорбции), в результате взаимодействия с которым формируются комплексы из молекул антигена/антигенов, специфических к ним антител и конъюгата с коллоидным золотом. Степень связывания маркера с иммобилизованным антигеном и, соответственно, интенсивность окрашивания мембраны определяются концентрацией специфических антител в пробе. Для проверки качества реагентов и сохранения функциональности тест-системы используется расположенная далее контрольная зона, в которой компонент, сорбированный на окрашенной частице, связывается с соответствующим иммобилизованным на мембране реагентом.
Ниже представлена информация о методике, реализуемой в тест-системе «TB-Check-1» фирмы «Vedalab» (Франция) - см. http://http://www.sanitamedikal.com/Assets/MD_220002_m3_TB_l408_c.pdf. Данная методика определения антител к возбудителю туберкулеза рассматривается в настоящей заявке в качестве прототипной.
Метод основан на комбинации антител к иммуноглобулинам человека, конъюгированных с хромогеном, и высокоочищенного БЦЖ-белка. При прохождении исследуемого образца через адсорбционную зону тестового устройства конъюгат, содержащий меченые антитела, связывается с IgG, образуя комплекс «антиген-антитело». Этот комплекс взаимодействует с высокоочищенным БЦЖ-белком в тестовой зоне устройства и, если концентрация специфического IgG к возбудителю туберкулеза превышает 350 Е/мл, образует окрашенную полосу. При низкой концентрации антител окрашенная полоса в тестовой зоне не образуется. Несвязавшийся конъюгат взаимодействует с реагентом в контрольной зоне тестового устройства, образуя окрашенную полосу, что указывает на правильное проведение теста. Процедура исследования: заполнить одноразовую пипетку сывороткой или плазмой и внести 1 каплю в окно для пробы тестового устройства. Добавить в окно для пробы 5-6 полных капель разбавляющего раствора (дилюента). Через 10-15 мин произвести учет результатов.
Одной из наиболее важных задач в иммунохроматографии является повышение чувствительности анализа. Применительно к серодиагностике это означает минимизацию ложноотрицательных результатов теста в случае, если антитела в пробе содержатся в диагностически значимых концентрациях, но ниже предела детекции метода. Заявителями предлагается подход для решения этой задачи, основанный на добавлении в пробу дополнительного количества специфических антител в концентрациях ниже, чем предел детекции метода при использовании разбавляющего раствора, не содержащего специфических антител. В этом случае суммарная концентрация антител в пробе и добавленных антител может превысить предел детекции и проба будет диагностирована как положительная. Таким образом, повышается чувствительность метода за счет смещения диапазона определяемых концентраций в область более низких значений.
Предложенный подход был реализован заявителями для серодиагностики туберкулеза с использованием антигена 38 кДа (Ag78, antigen 5, PhoS, Rv0934) M. tuberculosis. Ниже представлено описание способа получения тест-полосок и проведения иммунохроматографического анализа, а также полученные результаты.
Пример:
Для формирования тест-системы использовали набор мембран «mdi Easypack» фирмы «Advanced Microdevices» (Индия), включающий рабочую мембрану CNPC-SN12 L2-P25 (размер пор 15 мкм), подложку под конъюгат PT-R5, мембрану для нанесения образца GFB-R4, адсорбирующую мембрану AP 045 и ламинирующую защитную пленку МТ-1.
На мембраны были нанесены следующие реагенты:
1. Рекомбинантный антиген 38 кДа М. tuberculosis (Rv0934), фирма «Arista Biologicals Inc.» (США), кат. № AGMTB-0220.
2. Конъюгат коллоидного золота со средним диаметром частиц 30 нм и рекомбинантного антигена 38 кДа М. tuberculosis.
3. Моноклональные антитела НТМ81 против рекомбинантного антигена 38 кДа М. tuberculosis, Центр молекулярной диагностики и терапии, Москва (Россия).
Для формирования аналитической зоны использовали антиген 38 кДа, контрольной зоны - антитела против антигена 38 кДа. На 1 см полосы наносили 2 мкл раствора антигена (1,0 мг/мл в 50 мМ фосфатном буфере, pH 7,4) и 2 мкл раствора антител (0,5 мг/мл в том же буфере). Конъюгат коллоидного золота с антигеном 38 кДа наносили в разведении, соответствующем D520=2,0, в объеме 8 мкл на 1 см полосы. Для нанесения реагентов использовали диспенсер «IsoFlow» фирмы «Imagene Technology)) (США). Листы мембран с нанесенными иммунореагентами нарезали на индивидуальные тест-полоски шириной 4 мм.
Иммунохроматографический анализ проводили при комнатной температуре. Тест-полоску погружали в пробу на 1 мин в вертикальном положении, а затем извлекали и помещали на горизонтальную поверхность. Детекцию связывания коллоидного золота осуществляли через 10 мин визуально или получая цифровое изображение тест-полоски с помощью сканера и количественно оценивая интенсивность окраски аналитической зоны с помощью программы «Nonlinear Dynamics TotalLab TL120 v2009».
Путем тестирования растворов, содержащих фиксированные концентрации специфических антител (моноклональных антител НТМ81) построена калибровочная кривая и определен предел визуальной детекции метода (Рис.2). Затем были протестированы сыворотки крови от пациента, зараженного туберкулезом и от здорового донора (Рис.3, A), в этом случае положительных результатов тестирования не наблюдалось. После добавления в пробы дополнительного количества специфических антител в концентрации, соответствующей пределу визуальной детекции (5 мкг/мл), в сыворотке больного пациента наблюдается отчетливое окрашивание аналитической зоны (Рис.3, Б). Таким образом, предложенный подход позволил избежать ложноотрицательного результата теста.
Рис.1. Принцип иммунохроматографического анализа.
Рис.2. Калибровочная кривая определения специфических антител против антигена 38 кДа М. tuberculosis методом иммунохроматографии.
Рис.3. Тестирование сывороток крови больного туберкулезом и здорового донора без добавления дополнительного количества специфических антител (А) и после добавления специфических антител в концентрации 5 мкг/мл (Б).
Claims (1)
- Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики, в котором на мембранной тест-полоске наносят антиген или антигены и частицы коллоидного золота, конъюгированные с реагентом для связывания антител, отличающийся тем, что раствор для разбавления пробы содержит специфические антитела против используемого антигена или антигенов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012127077/15A RU2532352C2 (ru) | 2012-06-28 | 2012-06-28 | Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012127077/15A RU2532352C2 (ru) | 2012-06-28 | 2012-06-28 | Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012127077A RU2012127077A (ru) | 2014-02-10 |
| RU2532352C2 true RU2532352C2 (ru) | 2014-11-10 |
Family
ID=50031668
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012127077/15A RU2532352C2 (ru) | 2012-06-28 | 2012-06-28 | Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2532352C2 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2712249C1 (ru) * | 2018-11-28 | 2020-01-27 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Синтэко-Групп" | Способ проведения количественного иммунохроматографического анализа |
| RU2741199C1 (ru) * | 2020-09-25 | 2021-01-22 | Федеральное государственное учреждение"Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук" (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Способ иммунохроматографической серодиагностики с последовательным добавлением реагентов |
| RU2753237C1 (ru) * | 2020-10-14 | 2021-08-12 | Федеральное государственное учреждение «Федеральный исследовательский центр «Фундаментальные основы биотехнологии» Российской академии наук» (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Способ иммунохроматографического анализа для серодиагностики с комбинированной схемой связывания антител |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20060105400A1 (en) * | 2002-08-29 | 2006-05-18 | Matthias Dettloff | Elisa kits for detecting collagenase 3 as a proenzyme and in an activated form in body fluids and cell culture supernatants |
| RU2395092C2 (ru) * | 2008-09-17 | 2010-07-20 | Институт биохимии имени А.Н. Баха Российской академии наук | Способ определения антител к возбудителю туберкулеза |
| WO2011068844A1 (en) * | 2009-12-01 | 2011-06-09 | Temple Douglas | Borrelia burgdorferi bacterial antigen diagnostic test using polymeric bait containing capture particles |
| RU2420740C1 (ru) * | 2010-03-24 | 2011-06-10 | Федеральное Государственное Унитарное Предприятие "Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения" (ФГУП Гос НИИ БП) | Способ иммунохроматографического анализа для детектирования аналитов в образце |
-
2012
- 2012-06-28 RU RU2012127077/15A patent/RU2532352C2/ru active IP Right Revival
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20060105400A1 (en) * | 2002-08-29 | 2006-05-18 | Matthias Dettloff | Elisa kits for detecting collagenase 3 as a proenzyme and in an activated form in body fluids and cell culture supernatants |
| RU2395092C2 (ru) * | 2008-09-17 | 2010-07-20 | Институт биохимии имени А.Н. Баха Российской академии наук | Способ определения антител к возбудителю туберкулеза |
| WO2011068844A1 (en) * | 2009-12-01 | 2011-06-09 | Temple Douglas | Borrelia burgdorferi bacterial antigen diagnostic test using polymeric bait containing capture particles |
| RU2420740C1 (ru) * | 2010-03-24 | 2011-06-10 | Федеральное Государственное Унитарное Предприятие "Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения" (ФГУП Гос НИИ БП) | Способ иммунохроматографического анализа для детектирования аналитов в образце |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2712249C1 (ru) * | 2018-11-28 | 2020-01-27 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Синтэко-Групп" | Способ проведения количественного иммунохроматографического анализа |
| RU2741199C1 (ru) * | 2020-09-25 | 2021-01-22 | Федеральное государственное учреждение"Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук" (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Способ иммунохроматографической серодиагностики с последовательным добавлением реагентов |
| RU2753237C1 (ru) * | 2020-10-14 | 2021-08-12 | Федеральное государственное учреждение «Федеральный исследовательский центр «Фундаментальные основы биотехнологии» Российской академии наук» (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Способ иммунохроматографического анализа для серодиагностики с комбинированной схемой связывания антител |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012127077A (ru) | 2014-02-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2020233741B2 (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| JP6742978B2 (ja) | ラテラルフローおよび関連する免疫アッセイにおけるシグナル増幅 | |
| US9372192B2 (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| US10379121B2 (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| EP2335072B1 (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| US8962260B2 (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| US20070059682A1 (en) | Method to increase specificity and/or accuracy of lateral flow immunoassays | |
| US20210389318A1 (en) | Lateral flow assays for differential isotype detection | |
| US20210072235A1 (en) | Method for diagnosing tuberculosis | |
| RU2532352C2 (ru) | Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики | |
| RU2395092C2 (ru) | Способ определения антител к возбудителю туберкулеза | |
| IL274768B1 (en) | A method and kit for distinguishing between viral and bacterial infections | |
| RU2545909C2 (ru) | Способ иммунохроматографического определения специфических антител | |
| RU2741199C1 (ru) | Способ иммунохроматографической серодиагностики с последовательным добавлением реагентов | |
| Byzova et al. | Manufacturing lateral flow tests for tuberculosis diagnosis: choosing a reactants completion and sensing regime | |
| HK1214308B (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160629 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20170725 |