RU2520091C2 - Способ стимуляции цитотоксического иммунного ответа против клеток опухолевой линии аденокарциномы молочной железы, экспрессирующих специфические антигены, с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной днк-конструкцией - Google Patents
Способ стимуляции цитотоксического иммунного ответа против клеток опухолевой линии аденокарциномы молочной железы, экспрессирующих специфические антигены, с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной днк-конструкцией Download PDFInfo
- Publication number
- RU2520091C2 RU2520091C2 RU2012135124/10A RU2012135124A RU2520091C2 RU 2520091 C2 RU2520091 C2 RU 2520091C2 RU 2012135124/10 A RU2012135124/10 A RU 2012135124/10A RU 2012135124 A RU2012135124 A RU 2012135124A RU 2520091 C2 RU2520091 C2 RU 2520091C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- adherent
- mncs
- breast cancer
- immune response
- Prior art date
Links
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 title claims abstract description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims description 16
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims description 16
- 230000028993 immune response Effects 0.000 title abstract description 7
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 title abstract description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 title description 5
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 title 1
- 210000001787 dendrite Anatomy 0.000 title 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 15
- 102000011786 HLA-A Antigens Human genes 0.000 claims description 9
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 claims description 9
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims description 9
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 claims description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 2
- 101000960954 Homo sapiens Interleukin-18 Proteins 0.000 claims 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims 1
- 102000043959 human IL18 Human genes 0.000 claims 1
- 229940040731 human interleukin-12 Drugs 0.000 claims 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 12
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000007402 cytotoxic response Effects 0.000 description 4
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000050 cytotoxic potential Toxicity 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к иммунологии, медицине и биотехнологии. Предложен способ стимуляции специфического противоопухолевого иммунного ответа против клеток рака молочной железы с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной ДНК-конструкцией. Полученные из периферической крови условно-здоровых доноров, трансфецированные полиэпитопной конструкцией, культивируются с неприлипшей фракцией мононуклеарных клеток. Способ позволяет повысить эффективность и экономичность получения цитотоксических лимфоцитов. 1 ил.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, белковой инженерии и медицине, конкретно - к созданию рекомбинантных плазмид, обеспечивающих экспрессию полиэпитопных опухоль-ассоциированных антигенов в дендритных клетках, способных стимулировать цитотоксический противоопухолевый ответ.
В настоящее время активно используются новые клеточные и молекулярно-генетические технологии для создания противоопухолевого иммунитета. Одним из перспективных подходов является создание генмодифицированных вакцин на основе дендритных клеток. ДК являются профессиональными антиген-презентирующими клетками и обладают специальными механизмами захвата и представления антигена Т-клеткам В частности дендритные клетки играют важную роль во взаимодействии врожденного и приобретенного иммунитета при онкологических заболеваниях. Как компонент врожденной иммунной системы, ДК выполняют главную функцию представление антигена для регуляции активности адаптивного иммунного ответа, определяя тип иммунного реагирования. Направленность иммунных реакций определяется профилем цитокинов продуцирующихся ДК и их микроокружением. При этом показано, что для формирования полноценного клеточного ответа дендритные клетки должны стимулировать преимущественное формирование специфического иммунного ответа по Т-хелпер 1 типу и увеличивать цитотоксический потенциал лимфоцитов.
Рак молочной железы являются ведущей онкологической патологией населения России и составляет более 1/5 доли среди всех злокачественных опухолей у женщин. Учитывая высокую актуальность этой проблемы и низкую эффективность традиционных методов лечения и профилактики рака молочной железы, становится важным поиск новых подходов стимуляции противоопухолевого иммунного ответа.
Использование полиэпитопных конструкций позволяет запускать поликлональную реакцию Т-клеток, обеспечивающих запуск более мощного иммунного ответа против различных раковых клеток, составляющих опухоль, и позволяет преодолевать возможную потерю экспрессии данного эпитопа опухоль-ассоциированного антигена в опухолевых клетках. Дополнительное проведение HLA-типирования позволяет выбирать только те эпитопы, которые увеличивают шанс развития специфического CD8+ или/и СD4+Т-клеточного ответа, или обоих одновременно. Также, данный способ уменьшает риск возникновения аутоиммунных реакций, так как используется только ограниченный набор эпитопов опухолевого белка, что существенно снижает возможность развития аутоиммунного ответа на собственные ткани.
Наиболее близким к предполагаемому способу является получение ДК и нагрузки их полиэпитопной pVaxl/pet-neu конструкцией, несущей специфические HLA-A*0201 связанные участки гена ErbB2/Her2 [Scardino A., Alimandi M., Correale Р., et al. A Polyepitope DNA Vaccine Targeted to Her-2/ErbB-2 Elicits a Broad Range of Human and Murine CTL Effectors to Protect against Tumor Challenge. // Cancer Res. - 2007. - Vol.67(14). - p.7028-7036]. В работе использовались мононуклеарные клетки периферической крови условно здоровых доноров. Дендритные клетки получали из прилипающей фракции МНК при добавлении в культуру 50 нг/мл грану-лоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) и 0,5 нг/мл ИЛ-4. Через 7 дней 100 тыс. ДК трансфецировались 1 мкг pVaxl/pet-neu, с использованием трансфецирующего реагента «Effecten» (Qiagen). Трансфецированные ДК облучались и добавлялись в культуру лимфоцитов (неприлипшая фракция МНК) в соотношении ДК:МНК=1:5. Далее, совместная культура инкубировалась в течение 5 дней. Далее, в течение 10 дней продолжалось культивирование в присутствии ИЛ-2 (20 МЕ/мл), с заменой среды и цитокина каждые 3 дня. Для постановки цитотоксического теста, таргетные клетки C1R-A2 (клеточная линия, стабильно трансфецированная геном HLA-A*0201, и неэкспрессирующая другие типы молекул HLA) метились 150 мкСi 51Сr, помещались в 96-луночные круглодонные планшеты, и потом, когда необходимо, нагружались пептидом (1 мкмоль/л) в течение 90 минут. Эффекторы добавлялись к таргетным клеткам в различных соотношениях и инкубировались в течение 6 часов. После инкубации, собирались супернатанты и измерялась радиоактивность на гамма счетчике. Процент специфического лизиса рассчитывался как (эксперимент спонтанный/максимум спонтанный 51Сr)×100. Исследователями было показано, что уровень ЦТЛ ответа варьировал в зависимости от донора, иммуногенности эпитопа опухоль-ассоциированного гена Неr2, а также от соотношения таргетных и эффек-торных клеток.
Описанный способ получения антиген-активированных дендритных клеток достаточно длителен (12 суток), требует использования большого количества рекомбинантных цитокинов (рчГМ-КСФ, рчИЛ-4, и рчИЛ-2), что ведет к значительному удорожанию технологии, так и обладает недостаточной цитотоксической активностью.
Новой задачей является создание эффективного и экономичного способа генерации антиген-специфических цитотоксических лимфоцитов из мононуклеарных клеток периферической крови условно здоровых доноров, обладающих достаточной эффективностью для индукции цитотоксического ответа против клеток линии рака молочной железы человека (MCF-7) in vitro.
Сущность предполагаемого изобретения заключается в следующем:
Из прилипающей фракции мононуклеарных клеток периферической крови человека получают последовательно незрелые и зрелые ДК, с использованием рчГМ-КСФ+рчИЛ-4 и рчФНО-α соответственно. Антигенную активацию зрелых ДК проводят с помощью магнитной трансфекции различных полиэпитопных конструкций [“Polyepitope constructs and methods for their preparation and use”, Application No.: 61/311,981, дата подачи 09.03.2010, international publication number: WO 2011/110953 A2]. Далее, неприлипшую фракцию мононуклеарных клеток периферической крови культивируют с антиген-активированными ДК в соотношении 10:1. Для улучшения модуляции специфического противоопухолевого иммунного ответа в совместную культуру МНК и ДК добавляют рчИЛ-12 и рчИЛ-18, что позволяет повысить потенциал цитотоксической активности мононуклеарных антиген-специфических клеток, против опухолевых клеток рака молочной железы человека (клеточная линия MCF-7), обуславливая цитотоксическую направленность Т-клеток при их пролиферации и дифференцировки в эффекторные клетки.
Принципиальным отличием разработанного способа от прототипа является:
1. Использование рчФНО-α для созревания культуры дендритных клеток, что позволяет сократить процесс созревания ДК до 96 часов;
2. Использование ДНК-конструкций, содержащие наиболее иммуногенные эпитопы основных опухоль-ассоциированных антигенов рака молочной железы, позволяет стимулировать специфический цитотоксический иммунный ответ;
3. Использование рчИЛ-12 и рчИЛ-18 при сокультивировании ДК, трансфецированных ДНК-конструкциями, содержащие наиболее иммуногенные эпитопы основных опухоль-ассоциированных антигенов рака молочной железы, и МНК, что повышает эффективность стимуляции и направленную дифференцировку наивных Т-клеток по Т-хелперы 1 типу.
Предполагаемое изобретение повышает эффективность генерации цитотоксических клеток, а также позволяет сократить сроки сокультивирования ДК и МНК, что в итоге приводит к снижению стоимости способа.
Техническим результатом изобретения является генерация in vitro антиген-специфических клонов Т-клеток с активностью CD8+ Т-клеток и Т-хелперов 1 типа, необходимых для формирования противоопухолевого цитотоксического ответа против клеток рака молочной железы человека.
Изобретение осуществляется следующим образом.
Выделенная из периферической крови условно-здоровых доноров прилипающая фракция мононуклеарных клеток культивируется в концентрации 1 млн/мл в полной среде содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ L-глютамина, 10 мМ HEPES, 5×10-5 мМ 2-меркаптоэтанола, 80 мкг/мл гентами-цина, 100 мкг/мл ампициллина в атмосфере 5% СO2 при 37°С с добавлением рчГМ-КСФ (50 нг/мл) и рчИЛ-4 (100 нг/мл). Через 96 часа культивирования для созревания незрелых дендритных клеток в культуру вносится рчФНО-α в дозе 25 нг/мл. Через 24 часа после добавления ФНО-α, проводится магнитная трансфекция полученных зрелых ДК различными полиэпитопными конструкциями, универсальной или специфической по HLA-A*0201 [“Polyepitope constructs and methods for their preparation and use”, Application No.: 61/311,981, дата подачи 09.03.2010, international publication number: WO 2011/110953 A2], с использованием реагентов коммерческого набора компании «Promokine» согласно инструкции производителя.
Полученные дендритные клетки культивируются с неприлипшей фракцией мононуклеарных клеток в соотношении 1:10 с добавлением рчИЛ-12 в дозе 10 нг/мл и рчИЛ-18 в дозе 100 нг/мл в течение 72 часов.
Способность полученных трансфецированных плазмидами ДК стимулировать прямую цитотоксическую активность против опухолевых клеток, как аутоло-гичных, так и специфической линии, оценивалась по уровню высвобождения внутриклеточного фермента (лактатдегидрогеназы) с помощью коммерческого набора фирмы «Promega» согласно протоколу производителя. Для праймирования опухолевых антигенов, полученные ДК, трансфецированные плазмидами, совместно культивировались с неприлипшей фракцией МНК в соотношении 1:10. Также, оценивался цитотоксический ответ МНК в зависимости от добавления в культуру рчИЛ-18 и рчИЛ-12. Во все группы через 48 часов сокультивирования вносились клетки опухолевой линии рака молочной железы человека (MCF-7).
Изобретение поясняется чертежом. На фигуре 1 изображена цитотоксич-ность совместной культуры МНК здоровых доноров позитивных по HLA-A*02 и аутологичных трансфецированных ДК по отношению к опухолевым клеткам линии MCF-7 (n=8). Данные представлены в виде среднего и ошибки среднего.
На фигуре обозначено:
МНК+Дк0 - совместная культура МНК и ДК без трансфекции;
МНК+Дкр5 - совместная культура МНК и ДК, трансфецированных плазмидой р5;
МНК+ДкU - совместная культура МНК и ДК, трансфецированных универсальной плазмидой;
МНК+ДкА - совместная культура МНК и ДК, трансфецированных плазмидой специфичной для НLА-А*0201;
МНК+ДкЕ - совместная культура МНК и ДК, трансфецированных плазмидой несущей ген Erbb2;
Стрелками обозначены статистически значимые различия
В результате проведенного эксперимента установлено, что группы с трансфекцией универсальной плазмидой и плазмидой специфичной к HLA-A*0201 обладают достоверно большей стимулирующей цитотоксической способностью по сравнению с группами МНК с совместно с ДК без трансфекции, с трансфекцией плазмидами р5. Добавление иммунорегуляторных цитокинов ИЛ-18 и ИЛ-12 в совместную культуру МНК и ДК приводит к увеличению гибели опухолевых клеток, при этом в группе МНК+ДкА, с трансфекцией плазмидой специфической для HLA-А*0201 отмечается повышение цитотоксического ответа по сравнению с группами контроля.
Таким образом, можно сделать вывод, что конструкции плазмид универсальная и специфичная для HLA-A*0201 являются эффективными способами индукции цитотоксической активности культуры МНК в условиях магнитной трансфекции на стадии зрелых дендритных клеток.
Claims (1)
- Способ генерации антиген-специфических Т-клеток с активностью CD8+ Т-клеток и Т-хелперов 1 типа, обладающих противоопухолевой активностью против линии клеток рака молочной железы человека (MCF-7), включающий: выделение мононуклеарных клеток (МНК) из периферической крови условно здоровых доноров; культивирование МНК с разделением клеток на прилипающую и неприлипающую фракции; созревание прилипающей фракции МНК под действием ростовых факторов (рчГМ-КСФ (50 нг/мл), рчИЛ-4 (100 нг/мл) и через 96 часов последующее культивирование дендритных клеток в присутствии рчФНО-α в дозе 25 нг/мл); трансфекция зрелых ДК генетическими ДНК-конструкциями, несущими ЦТЛ- и Тх-эпитопы опухоль-ассоциированных антигенов рака молочной железы, универсальной и HLA-A*0201-специфической; - отличающийся тем, что для генерации антиген-специфических цитотоксических клеток используют совместное культивирование зрелых ДК, трансфицированных ДНК-конструкциями, несущими иммуногенные эпитопы опухоль-ассоциированных антигенов рака молочной железы, и неприлипающей фракции МНК в присутствии рекомбинантного человеческого интерлейкина-12 (10 нг/мл) и рекомбинантного человеческого интерлейкина-18 (100 нг/мл).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012135124/10A RU2520091C2 (ru) | 2012-08-16 | 2012-08-16 | Способ стимуляции цитотоксического иммунного ответа против клеток опухолевой линии аденокарциномы молочной железы, экспрессирующих специфические антигены, с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной днк-конструкцией |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012135124/10A RU2520091C2 (ru) | 2012-08-16 | 2012-08-16 | Способ стимуляции цитотоксического иммунного ответа против клеток опухолевой линии аденокарциномы молочной железы, экспрессирующих специфические антигены, с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной днк-конструкцией |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012135124A RU2012135124A (ru) | 2014-02-27 |
| RU2520091C2 true RU2520091C2 (ru) | 2014-06-20 |
Family
ID=50151476
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012135124/10A RU2520091C2 (ru) | 2012-08-16 | 2012-08-16 | Способ стимуляции цитотоксического иммунного ответа против клеток опухолевой линии аденокарциномы молочной железы, экспрессирующих специфические антигены, с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной днк-конструкцией |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2520091C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016201658A1 (zh) * | 2015-06-17 | 2016-12-22 | 深圳市达科为生物工程有限公司 | 一种肿瘤特异性 ctl 的制备方法 |
| RU2684235C2 (ru) * | 2016-11-29 | 2019-04-04 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии" (НИИФКИ) | Полиэпитопная противоопухолевая вакцинная конструкция, содержащая эпитопы опухоль-ассоциированных антигенов, фармацевтическая композиция и ее применение для стимуляции специфического противоопухолевого иммунного ответа |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2366707C1 (ru) * | 2008-03-11 | 2009-09-10 | Государственное учреждение Научно-исследовательский институт клинической иммунологии СО РАМН | Способ генерации антиген-специфических цитотоксических клеток с активностью против клеток, инфицированных вирусом гепатита в |
| WO2011110953A2 (en) * | 2010-03-09 | 2011-09-15 | Artemev, Timur | Polyepitope constructs and methods for their preparation and use |
| RU2429005C1 (ru) * | 2010-10-07 | 2011-09-20 | Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН | Способ стимуляции противоопухолевой активности цитотоксических эффекторов иммунной системы |
-
2012
- 2012-08-16 RU RU2012135124/10A patent/RU2520091C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2366707C1 (ru) * | 2008-03-11 | 2009-09-10 | Государственное учреждение Научно-исследовательский институт клинической иммунологии СО РАМН | Способ генерации антиген-специфических цитотоксических клеток с активностью против клеток, инфицированных вирусом гепатита в |
| WO2011110953A2 (en) * | 2010-03-09 | 2011-09-15 | Artemev, Timur | Polyepitope constructs and methods for their preparation and use |
| RU2429005C1 (ru) * | 2010-10-07 | 2011-09-20 | Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН | Способ стимуляции противоопухолевой активности цитотоксических эффекторов иммунной системы |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| КУРИЛИН В.В. и др., "Модуляция цитотоксического противоопухолевого ответа в культуре мононуклеарных клеток с помощью дендритных клеток", (2010) Сибирский онкологический журнал, Приложение N1, стр.64-65. SCARDIO A. et al., "A polyepitope DNA vaccine targeted to Her-2/ErbB-2 elicits a broad range of human and murine CTL effectors to protect against tumor challenge", Cancer Res. 2007 Jul 15;67(14):7028-36. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016201658A1 (zh) * | 2015-06-17 | 2016-12-22 | 深圳市达科为生物工程有限公司 | 一种肿瘤特异性 ctl 的制备方法 |
| RU2684235C2 (ru) * | 2016-11-29 | 2019-04-04 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии" (НИИФКИ) | Полиэпитопная противоопухолевая вакцинная конструкция, содержащая эпитопы опухоль-ассоциированных антигенов, фармацевтическая композиция и ее применение для стимуляции специфического противоопухолевого иммунного ответа |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012135124A (ru) | 2014-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Timmerman, MD et al. | Dendritic cell vaccines for cancer immunotherapy | |
| Benteyn et al. | mRNA-based dendritic cell vaccines | |
| Dudley et al. | Adoptive cell transfer therapy | |
| CN102597222B (zh) | 用于增殖抗原特异性t细胞的方法 | |
| Dullaers et al. | Induction of effective therapeutic antitumor immunity by direct in vivo administration of lentiviral vectors | |
| CN103502439B (zh) | 用于抗原特异性t细胞增殖的方法 | |
| Jeras et al. | In vitro preparation and functional assessment of human monocyte-derived dendritic cells—potential antigen-specific modulators of in vivo immune responses | |
| JP2014514927A5 (ru) | ||
| AU2008303453B2 (en) | An ex vivo, fast and efficient process to obtain activated antigen-presenting cells that are useful for therapies against cancer and immune system-related diseases | |
| Dhodapkar et al. | Active immunization of humans with dendritic cells | |
| US20180078627A1 (en) | Method for antigen loading of dendritic cells and vaccine | |
| CN1353575A (zh) | 用树状细胞一肿瘤细胞或树状细胞一病毒细胞衍生的免疫原在体外诱导抗原特异性t－销细胞 | |
| US20190160098A1 (en) | Chimeric antigen receptors and methods of use thereof | |
| Paulos et al. | Adoptive immunotherapy: good habits instilled at youth have long-term benefits | |
| Santini et al. | Advances in the use of dendritic cells and new adjuvants for the development of therapeutic vaccines | |
| Chen et al. | Harnessing whole tumor cells for tumor immunotherapy | |
| AU2016219379A1 (en) | Chlamydia-activated B cell platforms and methods thereof | |
| Mason et al. | RNA-loaded CD40-activated B cells stimulate antigen-specific T-cell responses in dogs with spontaneous lymphoma | |
| RU2520091C2 (ru) | Способ стимуляции цитотоксического иммунного ответа против клеток опухолевой линии аденокарциномы молочной железы, экспрессирующих специфические антигены, с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной днк-конструкцией | |
| Wang et al. | Adjuvant DNA vaccine pNMM promotes enhanced specific immunity and anti-tumor effects | |
| Ohshita et al. | Generation of tumor-reactive effector lymphocytes using tumor RNA-introduced dendritic cells in gastric cancer patients | |
| KR101829978B1 (ko) | Ｂ 세포 백신 및 이의 용도 | |
| RU2717011C1 (ru) | Способ индукции иммунологической толерантности на трансплантационные антигены у млекопитающих | |
| EP1221969B1 (en) | Activation of antigen-specific t cells by virus/antigen-treated dendritic cells | |
| RU2012116602A (ru) | Способ пролиферации антигенспецифических т-клеток |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20131224 |
|
| FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20140128 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140817 |