RU2510845C1 - Adjuvant - Google Patents
Adjuvant Download PDFInfo
- Publication number
- RU2510845C1 RU2510845C1 RU2012139582/10A RU2012139582A RU2510845C1 RU 2510845 C1 RU2510845 C1 RU 2510845C1 RU 2012139582/10 A RU2012139582/10 A RU 2012139582/10A RU 2012139582 A RU2012139582 A RU 2012139582A RU 2510845 C1 RU2510845 C1 RU 2510845C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vaccine
- oil
- water
- adjuvant
- vaccines
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в ветеринарной вирусологии и микробиологии при разработке и производстве иммунизирующих препаратов для диагностики и профилактики инфекционных болезней у различных видов сельскохозяйственных животных.The invention relates to biotechnology and can be used in veterinary virology and microbiology in the development and production of immunizing drugs for the diagnosis and prevention of infectious diseases in various types of farm animals.
Из предшествующего технического уровня известно, что при изготовлении средств специфической профилактики инфекционных болезней животных нашли применение, главным образом, два типа адъювантов: сорбционные (гидроксид алюминия, оксид кремния, алюмокалиевые квасцы) и масляные - для получения эмульсионных вакцин (адъювант Фрейнда и многочисленные его разновидности) [Sigma-Aldrich Fine Chemicales, №4, 2002, s.86.].It is known from the previous technical level that in the manufacture of means for the specific prophylaxis of infectious diseases of animals, mainly two types of adjuvants have been used: sorption (aluminum hydroxide, silicon oxide, alum-potassium alum) and oil - to obtain emulsion vaccines (Freund's adjuvant and its many varieties ) [Sigma-Aldrich Fine Chemicales, No. 4, 2002, s. 86.].
Преимущества эмульсионных вакцин перед сорбционными заключаются в пролонгировании действия антигена, лучшей его сохранности, возможности введения более концентрированной антигенной части и ликвидации случаев дополнительной вакцинации животных.The advantages of emulsion vaccines over sorption ones are in prolonging the action of the antigen, its better preservation, the possibility of introducing a more concentrated antigenic part and eliminating cases of additional vaccination of animals.
Свойства масляных эмульсионных вакцин описываются положениями коллоидной химии и в соответствии с ними классифицируются по типу получаемой эмульсии: «вода в масле» или обратные эмульсии (антиген находится внутри мицелл и закрыт эмульгатором и маслом; «вода в масле в воде» или сложные эмульсии (антиген находится как внутри мицелл, так и в водной фазе, «масло в воде» или простые эмульсии (антиген находится в водной фазе) [Сумм Б.Д. Основы коллоидной химии. - 2007, М., с. 240].The properties of oil emulsion vaccines are described by the provisions of colloid chemistry and are classified according to the type of emulsion obtained: “water in oil” or inverse emulsions (the antigen is inside the micelles and is closed by emulsifier and oil; “water in oil in water” or complex emulsions (antigen is both inside the micelles and in the aqueous phase, “oil in water” or simple emulsions (the antigen is in the aqueous phase) [Sum BD Fundamentals of colloid chemistry. - 2007, M., S. 240].
Каждый тип эмульсионной вакцины требует применения стабилизаторов и эмульгаторов определенного строения, что отражается в их величинах ГЛБ (расчетных соотношений гидрофильных и гидрофобных свойств) [W.С. Griffin, J. Cosmetists, 1949, 1, р.311].Each type of emulsion vaccine requires the use of stabilizers and emulsifiers of a certain structure, which is reflected in their HLB values (estimated ratios of hydrophilic and hydrophobic properties) [W. С. Griffin, J. Cosmetists, 1949, 1, p. 311].
Наиболее широкое применение в ветеринарии в настоящее время находят инъекционные эмульсионные вакцины типа «вода в масле».The most widely used in veterinary medicine are currently injected emulsion vaccines of the "water in oil" type.
Общим недостатком вакцин такого типа являются высокая вязкость и реактогенность. Под реактогенностью понимают способность вызывать воспаление, некроз или другие патологические явления в месте инокуляции, особенно для мелкого и крупного рогатого скота.A common disadvantage of this type of vaccine is its high viscosity and reactogenicity. Reactogenicity is understood to mean the ability to cause inflammation, necrosis, or other pathological phenomena at the site of inoculation, especially for small and cattle.
Имеются технические решения по уменьшению вредного влияния таких вакцин: снижение вязкости минеральных масел, применение в качестве масляной основы легко биологически деградируемых эфиров жирных кислот, силиконовых и других инертных растворителей, введение добавок, снижающих реактогенность [Патент РФ №2214278, Патент USA 5.3.12.620].There are technical solutions to reduce the harmful effects of such vaccines: reducing the viscosity of mineral oils, using easily biologically degradable esters of fatty acids, silicone and other inert solvents as an oil base, introducing additives that reduce reactogenicity [RF Patent No. 2214278, US Patent 5.3.12.620] .
Применение природных и других легко биологически деградируемых масел уменьшает реактогенность, но одновременно сокращается период иммуностимулирующего влияния антигена. При замене минеральных масел низковязкими синтетическими маслами резко возрастает стоимость вакцин.The use of natural and other easily biologically degradable oils reduces reactogenicity, but at the same time, the period of the immunostimulating effect of the antigen is reduced. When replacing mineral oils with low viscosity synthetic oils, the cost of vaccines rises sharply.
Наиболее близким к заявляемому изобретению по совокупности существенных признаков является адъювант [Патент РФ №2108111], в котором в качестве эмульгатора использован биологически инертный полиалкоксиалкиленсилоксановый сополимер (ПАС) определенного строения. Этот состав позволяет получать устойчивые инъекционные эмульсионные вакцины типа «вода в масле» с приемлемой реактогенностью. Биологическая инертность эмульгатора оборачивается для некоторых вакцин негативной стороной: эмульгатор, защищающий антиген в мицеллах, ограниченно доступен для ферментативной системы организма, вследствие чего высвобождение антигена и формирование иммунного ответа происходит в замедленном темпе. Применение в качестве масляной фазы низковязких инертных силиконовых растворителей усугубляет эту картину.The closest to the claimed invention in terms of essential features is an adjuvant [RF Patent No. 2108111], in which a biologically inert polyalkoxyalkylene siloxane copolymer (PAS) of a certain structure is used as an emulsifier. This composition allows you to get a stable injection of emulsion vaccines of the type "water in oil" with acceptable reactogenicity. The biological inertness of the emulsifier turns negative for some vaccines: an emulsifier that protects the antigen in micelles is limitedly available for the enzymatic system of the body, as a result of which the release of antigen and the formation of an immune response occurs in a slower pace. The use of low viscosity inert silicone solvents as the oil phase exacerbates this picture.
Помимо вязкости масляной основы в суммарную вязкость вакцины вносит вклад эмульгатор, в связи с чем важным фактором повышения безопасности вакцин можно считать снижение концентрации эмульгатора, в то время как в адъюванте-прототипе концентрация эмульгатора находится на уровне применения классических неионогенных эмульгаторов и составляет от 5 до 10% масс.In addition to the viscosity of the oil base, the emulsifier contributes to the total viscosity of the vaccine, and therefore, an decrease in the concentration of emulsifier can be considered an important factor in improving the safety of vaccines, while in the adjuvant prototype the concentration of emulsifier is at the level of application of classical nonionic emulsifiers and ranges from 5 to 10 % of the mass.
В то же время класс кремнийорганических эмульгаторов характеризуется не только повышенной биологической инертностью, но и способностью в большей степени, чем обычные неионогенные эмульгаторы (эфиры маннита, сорбита, жирных кислот, производные касторового масла и др.), снижать поверхностное натяжение на границе мицелл, то есть для получения эмульсий с приемлемой стабильностью достаточно введения небольших концентраций эмульгаторов [Эбель А.О. и др. Материалы докладов VUU Всероссийской конференции «Структура и динамика молекулярных систем», - 2002, №6].At the same time, the class of organosilicon emulsifiers is characterized not only by increased biological inertness, but also by a greater ability than ordinary nonionic emulsifiers (esters of mannitol, sorbitol, fatty acids, derivatives of castor oil, etc.) to reduce the surface tension at the micelle boundary, then to obtain emulsions with acceptable stability, the introduction of small concentrations of emulsifiers is sufficient [Ebel A.O. et al. Proceedings of the VUU All-Russian Conference “Structure and Dynamics of Molecular Systems”, - 2002, No. 6].
Физико-химические характеристики эмульгатора, использованного в прототипе, рассчитаны на получение только инъекционных эмульсионных вакцин типа «вода в масле». Для других типов инъекционных эмульсионных вакцин: «вода в масле в воде» и «масло в воде», имеющих минимальные показатели реактогенности, рассматриваемый эмульгатор неприемлем вследствие его значения ГЛБ, равного 6. Использование адъюванта с пограничным для эмульсий «вода в масле» значением ГЛБ 6 приводит к необходимости введения относительно высоких концентраций эмульгатора (от 5 до 10% масс.) и может приводить при колебаниях в режимах эмульгирования и составе антигенной части к явлению так называемого «обращения эмульсии», когда вместо целевой эмульсии типа «вода в масле» получают эмульсию «вода в масле в воде» или даже «масло в воде». Однако при целенаправленном получении вакцин такого типа физико-химические свойства эмульгатора не обеспечивают приемлемой стабильности эмульсий.Physico-chemical characteristics of the emulsifier used in the prototype are designed to receive only injection emulsion vaccines of the type "water in oil". For other types of injectable emulsion vaccines: water-in-oil-in-water and oil-in-water, which have minimal reactogenicity, the emulsifier in question is unacceptable due to its HLB value of 6. Using an adjuvant with an HLB value that is borderline for water-in-oil emulsions 6 leads to the need for the introduction of relatively high concentrations of emulsifier (from 5 to 10 wt.%) And can lead to the phenomenon of the so-called “emulsion reversal” when, in fluctuations in the emulsification conditions and the composition of the antigenic part the target emulsion of the type "water in oil" receive an emulsion of "water in oil in water" or even "oil in water". However, with the targeted preparation of vaccines of this type, the physicochemical properties of the emulsifier do not provide acceptable emulsion stability.
Задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента адъювантов для инъекционных эмульсионных вакцин любого типа и иммунизирующих препаратов на их основе.The objective of the present invention is to expand the range of adjuvants for injection emulsion vaccines of any type and immunizing preparations based on them.
Техническими результатами, которые могут быть получены при реализации изобретения, являются:Technical results that can be obtained by implementing the invention are:
- Осуществление назначения адъювантов.- Prescribing adjuvants.
- Расширение функциональных возможностей адъювантов на основе биологически инертных кремнийорганических эмульгаторов.- Expansion of the functionality of adjuvants based on biologically inert organosilicon emulsifiers.
- Повышение стабильности эмульсионных вакцин.- Improving the stability of emulsion vaccines.
- Повышение безопасности.- Increased security.
- Обеспечение прогнозируемого времени иммунного ответа.- Providing predicted immune response times.
Поставленная задача решена и вышеперечисленные результаты достигнуты благодаря тому, что адъювант, включающий эмульгатор в виде кремнийорганического соединения и масляную основу, для эмульсионной вакцины типа «вода в масле» содержит биологически инертное кремнийорганическое соединение цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикон; для вакцины «вода в масле в воде» - ПЭГ/ППГ-18/18-диметикон; для вакцины типа «масло в воде» - ПЭГ-12-диметикон в концентрации от 1,5 до 3% масс.The problem is solved and the above results are achieved due to the fact that the adjuvant comprising an emulsifier in the form of an organosilicon compound and an oil base for a water-in-oil emulsion vaccine contains a biologically inert organosilicon compound cetyl-PEG / PPG-10/1-dimethicone; for the vaccine "water in oil in water" - PEG / PPG-18/18-dimethicone; for a vaccine of the type "oil in water" - PEG-12-dimethicone in a concentration of from 1.5 to 3% of the mass.
В частных примерах использования адъювант дополнительно содержит не менее чем один соэмульгатор из ряда глицеридов жирных кислот, эфиров сорбитана, маннита, полиглицерина, производных касторового масла.In particular examples of use, the adjuvant additionally contains at least one coemulsifier from a number of glycerides of fatty acids, esters of sorbitan, mannitol, polyglycerol, derivatives of castor oil.
Предлагаемое техническое решение осуществляют следующим образом. Навеску эмульгатора растворяют в низковязком, высокоочищенном минеральном или силиконовом масле или в водной части, содержащей антиген, в оптимальной для конкретной эмульсионной вакцины концентрации.The proposed technical solution is as follows. A weighed portion of the emulsifier is dissolved in low viscosity, highly refined mineral or silicone oil or in the aqueous part containing the antigen in the optimal concentration for a particular emulsion vaccine.
Стерилизуют масляную фазу обычными способами.The oil phase is sterilized by conventional methods.
Водную фазу, содержащую антиген, эмульгируют с соблюдением режима, разработанного для данной вакцины.The aqueous phase containing the antigen is emulsified in compliance with the regimen developed for this vaccine.
Реактогенность масляного адъюванта или вакцины количественно определяют в соответствии с Руководством по экспериментальному (доклиническому) исследованию новых фармакологических веществ [Под ред. Р.У. Хабриева. 2005, 204].The reactogenicity of an oil adjuvant or vaccine is quantified in accordance with the Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances [Ed. RU. Khabrieva. 2005, 204].
Эффективность и безопасность вакцин контролируют в соответствии с требованиями существующей нормативной документации.The efficacy and safety of vaccines is monitored in accordance with the requirements of existing regulatory documents.
Реализация технического решения приведена в примерах применения и иллюстрирована таблицами 1, 2, 3.The implementation of the technical solution is given in the application examples and is illustrated in tables 1, 2, 3.
Пример 1. Прототип. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле» на основе ПАС с ГЛБ 6,0.Example 1. The prototype. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil" based on PAS with HLB 6.0.
Навеску 7,5 г эмульгатора растворяли в 92,5 г вакцинного масла «М» по ТУ 381011224 (далее вакцинное масло).A portion of 7.5 g of emulsifier was dissolved in 92.5 g of vaccine oil "M" according to TU 381011224 (hereinafter vaccine oil).
Масляную фазу стерилизовали при 130°С в течение 2 ч нагреванием в термостате.The oil phase was sterilized at 130 ° C for 2 hours by heating in a thermostat.
Реактогенность адъюванта 21%.Reactogenicity of adjuvant 21%.
Адъювант использовали для приготовления вакцины на основе вируса ньюкаслской болезни (НБ) штамма «Ла Сота» с биологической активностью 1010,1 ЭИД 50/см3, определенной до инактивации.The adjuvant was used to prepare a vaccine based on the Newcastle disease virus (NB) of the La Sota strain with a biological activity of 10 10.1 EID 50 / cm 3 determined before inactivation.
Вакцину готовили с использованием гомогенизатора Ultraturrax T-25 в две стадии: 1 - постепенное внесение водной фазы, содержащей антиген (30% масс.), в масляный адъювант (70% масс.) при 3,0 тысячах оборотов в минуту; 2 - гомогенизация полученной предварительной эмульсии при 15,0 тысячах оборотов в минуту.The vaccine was prepared using the Ultraturrax T-25 homogenizer in two stages: 1 - gradual introduction of the aqueous phase containing the antigen (30% wt.), In an oil adjuvant (70% wt.) At 3.0 thousand revolutions per minute; 2 - homogenization of the obtained preliminary emulsion at 15.0 thousand revolutions per minute.
Свойства полученной вакцины контролировали в соответствии с требованиями стандарта ООО «Кронвет» «Вакцина против инфекционного бронхита кур, ньюкаслской болезни, парамиксовирусной инфекции 2-го серотипа, метапневмовирусной инфекции птиц, инфекционной бурсальной болезни, реовирусного теносиновита, синдрома снижения яйценоскости-76, инфекционного гидроперикардита, респираторного микоплазмоза птиц». Инактивированная эмульгированная «АВИКРОН» СТО 23074685-0010-2010 (Регистрационное удостоверение ПВР-1-7.0/02668 от 27.01.2011).The properties of the obtained vaccine were controlled in accordance with the requirements of the standard of LLC Kronvet Vaccine against infectious bronchitis of hens, Newcastle disease, paramyxovirus infection of the 2nd serotype, metapneumovirus infection of birds, infectious bursal disease, reovirus tenosynovitis, egg-laying syndrome-76, infectious hydropericarditis, respiratory mycoplasmosis of birds. " Inactivated emulsified "AVICRON" STO 23074685-0010-2010 (Registration certificate PVR-1-7.0 / 02668 from 01/27/2011).
Вязкость - 78 мм2/c; стабильность - более 12 месяцев.Viscosity - 78 mm 2 / s; stability - more than 12 months.
Безвредность вакцины изучали на 5 группах 30-дневных цыплят по 10 голов каждая (четыре опытных группы и 1 - контрольная). Цыплятам опытных групп вводили внутримышечно по 2 см3 вакцины. Все цыплята в течение срока наблюдения 20 суток оставались живыми без признаков болезни. На месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений.The safety of the vaccine was studied in 5 groups of 30-day-old chickens, 10 animals each (four experimental groups and 1 control group). Chickens of the experimental groups were injected intramuscularly with 2 cm 3 of the vaccine. All chickens during the observation period of 20 days remained alive without signs of illness. At the injection site, no pathological changes were detected.
Антигенную активность определяли на 30-дневных цыплятах (1 опытная и 2 контрольных группы по 10 цыплят). Цыплятам опытной группы в нижнюю треть шеи подкожно вводили вакцину в дозе 0,5 см3. Цыплятам одной контрольной группы вводили такое же количество референс-вакцины, цыплят второй контрольной группы использовали в качестве чистого контроля. Через 28 суток титр антител 1:4-1:8 (контроль с референс-вакциной 1:2048, чистый контроль 1:2-1:4). Через 60 суток титр антител 1:200-1-300 (контроль с референс-вакциной 1:1024-1-1048, чистый контроль 1:2-1:4). В месте инокуляции патологические изменения отсутствовали. Полученная вакцина не соответствовала требованиям нормативной документации по сроку иммунного ответа.Antigenic activity was determined on 30-day-old chickens (1 experimental and 2 control groups of 10 chickens). The chickens of the experimental group in the lower third of the neck were subcutaneously injected with a vaccine at a dose of 0.5 cm 3 . The chickens of one control group were given the same amount of the reference vaccine, the chickens of the second control group were used as a pure control. After 28 days, the antibody titer is 1: 4-1: 8 (control with reference vaccine 1: 2048, net control 1: 2-1: 4). After 60 days, the antibody titer is 1: 200-1-300 (control with reference vaccine 1: 1024-1-1048, net control 1: 2-1: 4). At the site of inoculation, pathological changes were absent. The resulting vaccine did not meet the requirements of regulatory documentation on the duration of the immune response.
Пример 2. Прототип. Получение инъекционных эмульсионных вакцин типа «вода в масле в воде» на основе (ПАС) с ГЛБ 6,0.Example 2. The prototype. Obtaining injection emulsion vaccines of the type "water in oil in water" on the basis of (PAS) with HLB 6.0.
Подготовку адъюванта и получение образцов вакцин осуществляли, как в примере 1.The preparation of the adjuvant and the preparation of vaccine samples was carried out as in example 1.
Свойства вакцин: вязкость - 50 мм2/с; нестабильна. На животных не изучалась из-за нестабильности.Properties of vaccines: viscosity - 50 mm 2 / s; unstable. On animals it has not been studied due to instability.
Пример 3. Получение инъекционных эмульсионных вакцин типа вода в масле на основе эмульгатора цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикона (Ц-10/1-ДМ) с ГЛБ 5,0.Example 3. Obtaining injection emulsion vaccines of the type water in oil based on the emulsifier cetyl-PEG / PPG-10/1-dimethicone (C-10/1-DM) with HLB 5.0.
Навеску 1,5 г эмульгатора растворяли в 98,5 г вакцинного масла.A portion of 1.5 g of emulsifier was dissolved in 98.5 g of vaccine oil.
Подготовку адъюванта и получение образца вакцины и изучение ее свойств осуществляли, как в примере 1.The preparation of the adjuvant and obtaining a sample of the vaccine and the study of its properties was carried out, as in example 1.
Реактогенность адъюванта 21% отн.Adjuvant Reactogenicity 21% Rel.
Свойства полученной вакцины:Properties of the resulting vaccine:
Вязкость - 50 мм2/с; стабильность - более 12 месяцев.Viscosity - 50 mm 2 / s; stability - more than 12 months.
Вакцина выдерживала тесты на безвредность.The vaccine has passed the safety tests.
Через 28 суток титр антител 1:2048 (контроль с референс-вакциной 1:2048). В месте инокуляции патологические изменения отсутствовали. Полученная вакцина соответствовала требованиям нормативной документации. Пример 4. Получение эмульсионной вакцины типа «вода в масле» на основе эмульгатора Ц-10/1-ДМ с ГЛБ 5,0.After 28 days, antibody titer 1: 2048 (control with reference vaccine 1: 2048). At the site of inoculation, pathological changes were absent. The resulting vaccine met the requirements of regulatory documentation. Example 4. Obtaining an emulsion vaccine of the type "water in oil" based on the emulsifier C-10/1-DM with HLB 5.0.
Навеску 1 г эмульгатора, как в примере 1, растворяли в 99 г вакцинного масла. Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли, как в примере 1.A portion of 1 g of emulsifier, as in example 1, was dissolved in 99 g of vaccine oil. The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 15% отн.Adjuvant Reactogenicity 15% Rel.
Вакцину против НБ получали и изучали, как в примере 1.A vaccine against NB was obtained and studied, as in example 1.
Свойства вакцины против НБ: вязкость - 46 мм2/с; стабильность - менее 12 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител 1:2060 (референс-вакцина 1:1050); вакцина эффективна, но не соответствовала требованиям нормативной документации по стабильности.Properties of the vaccine against NB: viscosity - 46 mm 2 / s; stability - less than 12 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer 1: 2060 (reference vaccine 1: 1050); the vaccine is effective, but did not meet the requirements of regulatory documentation for stability.
Пример 5. Получение эмульсионной вакцины типа вода в масле на основе эмульгатора Ц-10/1-ДМ с ГЛБ 5,0.Example 5. Obtaining an emulsion vaccine such as water in oil based on the emulsifier Ts-10/1-DM with HLB 5.0.
Навеску 3,0 г эмульгатора растворяли в 97 г вакцинного масла. Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли как в примере 1.A portion of 3.0 g of emulsifier was dissolved in 97 g of vaccine oil. The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 25% отн.Adjuvant Reactogenicity 25% Rel.
Свойства вакцины против НБ вязкость - 55 мм2/с; стабильность - более 12 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител 1:2049 (референс-вакцина 1:2050).Properties of the vaccine against NB viscosity - 55 mm 2 / s; stability - more than 12 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer 1: 2049 (reference vaccine 1: 2050).
Полученная вакцина соответствовала требованиям нормативной документации. Пример 6. Получение эмульсионной вакцины типа вода в масле на основе эмульгатора Ц-10/1-ДМ с ГЛБ 5,0.The resulting vaccine met the requirements of regulatory documentation. Example 6. Obtaining an emulsion vaccine such as water in oil based on the emulsifier C-10/1-DM with HLB 5.0.
Навеску 5,0 г эмульгатора растворяли в 95 г вакцинного масла.A portion of 5.0 g of emulsifier was dissolved in 95 g of vaccine oil.
Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли как в примере 1.The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 30% отн.Adjuvant Reactogenicity 30% Rel.
Свойства вакцины против НБ вязкость - 62 мм2/с; стабильность - более 12 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител 1:2050 (референс-вакцина 1:2050).Properties of the vaccine against NB viscosity - 62 mm 2 / s; stability - more than 12 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer 1: 2050 (reference vaccine 1: 2050).
Полученная вакцина соответствовала требованиям нормативной документации.The resulting vaccine met the requirements of regulatory documentation.
Пример 7. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле» на основе Ц-10/1-ДМ и сорбитана сесквиолеата с ГЛБ 4,4.Example 7. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil" based on C-10/1-DM and sorbitan sesquioleate with HLB 4.4.
Навеску 2,5 г Ц-10/1-ДМ и 2,5 г сорбитана сесквиолеата растворяли в 95 г вакцинного масла.A portion of 2.5 g of C-10/1-DM and 2.5 g of sesquioleate sorbitan was dissolved in 95 g of vaccine oil.
Подготовку адъюванта и получение образцов вакцин осуществляли, как в примере 1.The preparation of the adjuvant and the preparation of vaccine samples was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 22% отн.Reactogenicity of adjuvant 22% rel.
Свойства вакцины против НБ: вязкость - 57 мм2/с; стабильность - более 12 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител 1:2049 (референс-вакцина 1:2050).Properties of the vaccine against NB: viscosity - 57 mm 2 / s; stability - more than 12 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer 1: 2049 (reference vaccine 1: 2050).
Полученная вакцина соответствовала требованиям нормативной документации.The resulting vaccine met the requirements of regulatory documentation.
С использованием приемов и методов, изложенных в примере 1, и адъюванта из примера 7 были получены образцы вакцин против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) и реовирусного теносиновита (РВТ).Using the techniques and methods described in example 1 and the adjuvant of example 7, vaccine samples against infectious bursal disease (IBD) and reovirus tenosinovitis (PBT) were obtained.
Вязкость вакцины против ИББ 83,6 мм2/с; вакцина безвредна, стабильность более 12 месяцев, титр антител по данным иммуноферментного анализа (ИФА) через 30 дней 13221.The viscosity of the vaccine against IBD 83.6 mm 2 / s; the vaccine is harmless, stability is more than 12 months, the titer of antibodies according to enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) after 30 days 13221.
Вакцина соответствовала требованиям нормативной документации. Вязкость вакцины против РВТ 83,6 мм2/с, вакцина безвредна, стабильность более 12 месяцев, титр антител по данным иммуноферментного анализа (ИФА) через 30 дней 7788.The vaccine was compliant with regulatory requirements. The viscosity of the vaccine against PBT 83.6 mm 2 / s, the vaccine is harmless, stability for more than 12 months, the titer of antibodies according to enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) after 30 days 7788.
Вакцина соответствовала требованиям нормативной документации.The vaccine was compliant with regulatory requirements.
Пример 8. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле» на основе Ц-10/1-ДМ и сорбитана триолеата с ГЛБ 3,5.Example 8. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil" based on C-10/1-DM and sorbitan trioleate with HLB 3,5.
Навеску 1,5 г Ц-10/1-ДМ и 1,5 г сорбитана триолеата растворяли в 97 г вакцинного масла.A portion of 1.5 g of C-10/1-DM and 1.5 g of sorbitan trioleate was dissolved in 97 g of vaccine oil.
Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли, как в примере 1.The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 25% отн.Adjuvant Reactogenicity 25% Rel.
Свойства вакцин: вязкость - 60 мм2/с; нестабильна. На животных не изучалась из-за нестабильности.Properties of vaccines: viscosity - 60 mm 2 / s; unstable. On animals it has not been studied due to instability.
Пример 9. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле» на основе эмульгатора Ц-10/1-ДМ с ГЛБ 5,0.Example 9. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil" based on the emulsifier C-10/1-DM with HLB 5.0.
Навеску 6 г эмульгатора, как в примере 1 растворяли в 94 г вакцинного масла. Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли, как в примере 1.A portion of 6 g of emulsifier, as in example 1, was dissolved in 94 g of vaccine oil. The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 32% отн.Adjuvant Reactogenicity 32% Rel.
Вакцину против НБ получали и изучали, как в примере 1.A vaccine against NB was obtained and studied, as in example 1.
Свойства вакцины против НБ: вязкость - 65 мм2/с; стабильность - более 12 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител 1:1000 (референс-вакцина 1:1057); вакцина соответствовала требованиям нормативной документации, но наблюдалось замедление формирования иммунного ответа.Properties of the vaccine against NB: viscosity - 65 mm 2 / s; stability - more than 12 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer 1: 1000 (reference vaccine 1: 1057); the vaccine met regulatory requirements, but there was a slowdown in the formation of the immune response.
Пример 10. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле в воде» на основе ПЭГ/ППГ/18/18-диметикона(18/18-ДМ) и Ц-10/1-ДМ с ГЛБ 7,4.Example 10. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil in water" based on PEG / PPG / 18/18-dimethicone (18/18-DM) and C-10/1-DM with HLB 7.4.
Навеску 4 г 18/18-ДМ и 1 г Ц-10/1-ДМ растворяли в 95 г вакцинного масла.A portion of 4 g of 18/18-DM and 1 g of C-10/1-DM was dissolved in 95 g of vaccine oil.
Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли, как в примере 1.The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 35% отн.Reactogenicity of adjuvant 35% rel.
Свойства вакцин: вязкость - 35 мм2/с; нестабильна. На животных не изучалась из-за нестабильности.Properties of vaccines: viscosity - 35 mm 2 / s; unstable. On animals it has not been studied due to instability.
Пример 11. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле в воде» на основе 18/18-ДМ с ГЛБ 8,0.Example 11. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil in water" based on 18/18-DM with HLB 8.0.
Навеску 3 г 18/18-ДМ растворяли в 97 г силиконового масла ПЭС-3М. Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли, как в примере 1.A portion of 3 g of 18/18-DM was dissolved in 97 g of silicone oil PES-3M. The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 10% отн.Adjuvant Reactogenicity 10% Rel.
Свойства вакцины против НБ: вязкость - 14 мм2/с; стабильность - более 12 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител через 20 суток 1:2020 (референс-вакцина 1:2050).Properties of the vaccine against NB: viscosity - 14 mm 2 / s; stability - more than 12 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer after 20 days 1: 2020 (reference vaccine 1: 2050).
Полученная вакцина соответствовала требованиям нормативной документации.The resulting vaccine met the requirements of regulatory documentation.
Пример 12. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле в воде» на основе 18/18-ДМ с ГЛБ 8,0.Example 12. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil in water" based on 18/18-DM with HLB 8.0.
Навеску 1,5 г 18/18-ДМ растворяли в 98,5 г силиконового масла ПЭС-3М.A portion of 1.5 g of 18/18-DM was dissolved in 98.5 g of silicone oil PES-3M.
Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли, как в примере 1.The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 5% отн.Adjuvant Reactogenicity 5% Rel.
Свойства вакцины против НБ: вязкость - 10 мм2/с; стабильность - более 12 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител через 20 суток 1:2060 (референс-вакцина 1:2050).Properties of the vaccine against NB: viscosity - 10 mm 2 / s; stability - more than 12 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer after 20 days 1: 2060 (reference vaccine 1: 2050).
Полученная вакцина соответствовала требованиям нормативной документации.The resulting vaccine met the requirements of regulatory documentation.
Пример 13. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле в воде» на основе ПЭГ-12-диметикона (12-ДМ) и сорбитана олеата с ГЛБ 8,7.Example 13. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil in water" based on PEG-12-dimethicone (12-DM) and sorbitan oleate with HLB 8.7.
Навеску 2,5 г ПЭГ-12-диметикона и 2,5 г сорбитана олеата растворяли в 95 г вакцинного масла.A portion of 2.5 g of PEG-12-dimethicone and 2.5 g of sorbitan oleate was dissolved in 95 g of vaccine oil.
Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли как в примере 1.The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 10% отн.Adjuvant Reactogenicity 10% Rel.
Свойства вакцины против НБ: вязкость - 36 мм2/с; стабильность - более 12 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител через 20 суток 1:2060 (референс-вакцина 1:2050).Properties of the vaccine against NB: viscosity - 36 mm 2 / s; stability - more than 12 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer after 20 days 1: 2060 (reference vaccine 1: 2050).
С использованием приемов и методов, изложенных в примере 1, и адъюванта из примера 13 были получены образцы вакцин против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) и реовирусного теносиновита (РВТ).Using the techniques and methods described in example 1 and the adjuvant of example 13, vaccine samples against infectious bursal disease (IBD) and reovirus tenosynovitis (PBT) were obtained.
Вязкость вакцины против ИББ 71,2 мм2/с; вакцина безвредна, стабильность более 12 месяцев, титр антител по данным иммуноферментного анализа (ИФА) через 30 дней 5208.The viscosity of the vaccine against IBD 71.2 mm 2 / s; the vaccine is harmless, stability is more than 12 months, antibody titer according to enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) after 30 days 5208.
Вакцина соответствовала требованиям нормативной документации. Вязкость вакцины против РВТ 71,26 мм2/с, вакцина безвредна, стабильность более 12 месяцев, титр антител по данным иммуноферментного анализа (ИФА) через 30 дней 6866.The vaccine was compliant with regulatory requirements. The viscosity of the vaccine against PBT 71.26 mm 2 / s, the vaccine is harmless, stability for more than 12 months, the titer of antibodies according to enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) after 30 days 6866.
Вакцина соответствовала требованиям нормативной документации. The vaccine was compliant with regulatory requirements.
Пример 14. Получение эмульсионных вакцин типа «вода в масле в воде» на основе 12-ДМи сорбитана олеата с ГЛБ 9,5.Example 14. Obtaining emulsion vaccines of the type "water in oil in water" based on 12-DMi sorbitan oleate with HLB 9.5.
Навеску 2,0 г 12-ДМ и 1,0 г сорбитана олеата растворяли в 97 г вакцинного масла.A weighed portion of 2.0 g of 12-DM and 1.0 g of sorbitan oleate was dissolved in 97 g of vaccine oil.
Подготовку адъюванта и получение образца вакцины осуществляли, как в примере 1.The preparation of the adjuvant and the preparation of a vaccine sample was carried out as in example 1.
Реактогенность адъюванта 10% отн.Adjuvant Reactogenicity 10% Rel.
Свойства вакцины: вязкость - 10 мм2/с; стабильность - нестабильна; на животных не изучалась из-за нестабильности.Properties of the vaccine: viscosity - 10 mm 2 / s; stability - unstable; on animals has not been studied due to instability.
Пример 15. Получение эмульсионных вакцин типа «масло в воде» на основе 12-ДМ с ГЛБ 13.Example 15. Obtaining emulsion vaccines of the type "oil in water" based on 12-DM with HLB 13.
Вакцинное масло и эмульгатор стерилизовали каждый отдельно, как в примере 1.The vaccine oil and emulsifier were each sterilized separately, as in Example 1.
3,0 г эмульгатора растворяли в 6 7 г водной части, содержащей антиген, и перемешивали при 3000 об/мин в течение 2 мин., постепенно вводя 30 г масляной фазы.3.0 g of emulsifier was dissolved in 6 7 g of the water portion containing the antigen and stirred at 3000 rpm for 2 minutes, gradually introducing 30 g of the oil phase.
Реактогенность вакцины 9% отн.Reactogenicity of the vaccine 9% rel.
Свойства вакцины против НБ: вязкость - 10 мм2/с; стабильность - более 6 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител через 15 суток 1:2050 (референс-вакцина 1:2050). Пример 16. Получение эмульсионных вакцин типа масло в воде на основе 12-ДМ и этоксилированного гидрогенизированного касторового масла (ЭГК) с ГЛБ 15.Properties of the vaccine against NB: viscosity - 10 mm 2 / s; stability - more than 6 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer after 15 days 1: 2050 (reference vaccine 1: 2050). Example 16. Obtaining emulsion vaccines of the type oil-in-water based on 12-DM and ethoxylated hydrogenated castor oil (EHC) with HLB 15.
Эмульгатор и масляную фазу готовили, как в примере 8. Навеску 1,5 г ПЭГ-диметикона и 1,5 г ЭГК растворяли в 67 г антигенной водной части.An emulsifier and an oil phase were prepared as in Example 8. A portion of 1.5 g of PEG-dimethicone and 1.5 g of EHC were dissolved in 67 g of antigenic water.
Вакцину получали, как в примере 8.The vaccine was obtained as in example 8.
Реактогенность вакцины 8% отн.Reactogenicity of the vaccine 8% rel.
Свойства вакцины против НБ: вязкость- 12 мм2/с; стабильность - более 6 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений;Properties of the vaccine against NB: viscosity - 12 mm 2 / s; stability - more than 6 months; no pathological changes were found at the injection site;
титр антител через 15 суток 1:2060 (референс-вакцина 1:2060).antibody titer after 15 days 1: 2060 (reference vaccine 1: 2060).
Пример 17. Получение эмульсионной вакцины типа «масло в воде» на основе 12-ДМ и сорбитана олеата с ГЛБ 11,3.Example 17. Obtaining emulsion vaccines of the type "oil in water" based on 12-DM and sorbitan oleate with HLB 11.3.
Масляную фазу готовили, как в примере 8.The oil phase was prepared as in example 8.
2,4 г 12-ДМ и 0,6 г сорбитана олеата растворяли в 67 г водной части, содержащей антиген. Вакцину готовили, как в примере 8.2.4 g of 12-DM and 0.6 g of sorbitan oleate were dissolved in 67 g of the aqueous portion containing the antigen. The vaccine was prepared as in example 8.
Реактогенность вакцины 5% отн.Reactogenicity of the vaccine 5% Rel.
Свойства вакцины: вязкость - 10 мм2/с; нестабильна, испытании на животных не проводились из-за нестабильности.Properties of the vaccine: viscosity - 10 mm 2 / s; unstable, animal tests were not conducted due to instability.
Пример 18. Получение эмульсионной вакцины типа «масло в воде» на основе 12-ДМ и бис-ПЭГ/ППГ-14/14-диметикона (Б-14/14-ДМ) с ГЛБ 12,3Example 18. Obtaining emulsion vaccines of the type "oil in water" based on 12-DM and bis-PEG / PPG-14/14-dimethicone (B-14/14-DM) with HLB 12.3
Вакцинное масло и эмульгатор стерилизовали как в примере 1.The vaccine oil and emulsifier were sterilized as in example 1.
2,7 г 12-ДМ и 0,3 г Б-14/14-ДМ растворяли в водной части, содержащей антиген. Вакцину готовили, как в примере 8.2.7 g of 12-DM and 0.3 g of B-14/14-DM were dissolved in the aqueous portion containing the antigen. The vaccine was prepared as in example 8.
Реактогенность вакцины 12% отн.Reactogenicity of the vaccine 12% rel.
Свойства вакцины против НБ: вязкость- 10 мм2/с; стабильность - более 6 месяцев; на месте введения вакцины не обнаружено патологических изменений; титр антител через 15 суток 1:2060 (референс-вакцина 1:2050).Properties of the vaccine against NB: viscosity - 10 mm 2 / s; stability - more than 6 months; no pathological changes were found at the injection site; antibody titer after 15 days 1: 2060 (reference vaccine 1: 2050).
Из приведенных примеров 3, 5, 6, 7, 11, 12, 13, 15, 16, 18 (таблица 2, 3) видно, что для изготовления инъекционных эмульсионных вакцин пригодны кремнийорганические эмульгаторы различного химического строения, и их выбор определяется биологической безопасностью, способностью к стабилизации эмульсии и типом целевой эмульсионной вакцины. Для инъекционных вакцин типа «вода в масле» пригодны эмульгаторы с ГЛБ от 4 до 5 типа цетил-ПЭГ/ППГ-диметикона, в иных случаях образуются нестабильные эмульсии, для инъекционных вакцин типа «вода в масле в воде» значения ГЛБ, обеспечивающие стабильность, составляют от 8 до 9 и пригодны эмульгаторы типа ПЭГ/ППГ-18/18 диметикона, для инъекционных вакцин типа «масло в воде» ГЛБ должны быть выше 12 и пригодны эмульгаторы типа ПЭГ-12-диметикона При концентрациях эмульгатора ниже 1,5% масс. образуются нестабильные эмульсии, а при концентрациях выше 5% масс. наблюдается замедленное высвобождение антигена. Предпочтительно применение суммарной концентрации эмульгатора от 1,5 до 3,0 масс. При возрастании концентрации до 5% масс. вязкость и сроки иммунного ответа сохраняют приемлемый уровень, однако избыточное применение дополнительного количества эмульгатора не является экономически обоснованным.From the above examples 3, 5, 6, 7, 11, 12, 13, 15, 16, 18 (Table 2, 3), it is seen that silicone emulsifiers of various chemical structures are suitable for the manufacture of injection emulsion vaccines, and their choice is determined by biological safety, the ability to stabilize the emulsion and the type of target emulsion vaccine. For water-in-oil injection vaccines, emulsifiers with HLB from 4 to 5 type cetyl-PEG / PPG-dimethicone are suitable, in other cases unstable emulsions are formed, for water-in-oil-water injection vaccines, HLB values ensuring stability, range from 8 to 9 and emulsifiers of the type PEG / PPG-18/18 dimethicone are suitable; for injection vaccines of the oil-in-water type, the HLB should be higher than 12 and emulsifiers of the type PEG-12-dimethicone are suitable for emulsifier concentrations below 1.5% by weight . unstable emulsions are formed, and at concentrations above 5% of the mass. Slow release of antigen is observed. It is preferable to use a total emulsifier concentration of from 1.5 to 3.0 mass. With increasing concentration up to 5% of the mass. the viscosity and timing of the immune response remain acceptable, however, excessive use of an additional amount of emulsifier is not economically feasible.
При превышении 5% концентрации эмульгатора на фоне повышения вязкости и избыточного расхода эмульгатора, как в случае вакцины типа «вода в масле», наблюдается затягивание срока иммунного ответа.When exceeding 5% of the concentration of the emulsifier against the background of increasing viscosity and excessive consumption of the emulsifier, as in the case of a vaccine such as "water in oil", there is a delay in the duration of the immune response.
Расширение вариантов адъюванта на основе кремнийорганических эмульгаторов позволяет конструировать состав вакцин в зависимости от особенностей животного, желаемого срока иммунного ответа, повышает их безопасность, содействует развитию иммунопрофилактики в сторону создания наноэмульсий, так как уровень понижения поверхностного натяжения кремнийорганическими эмульгаторами в отличие от классических неионогенных эмульгаторов обеспечивает устойчивость наночастиц.Expansion of the adjuvant options based on organosilicon emulsifiers allows you to design the composition of the vaccines depending on the characteristics of the animal, the desired duration of the immune response, increases their safety, promotes the development of immunoprophylaxis towards the creation of nanoemulsions, since the level of lowering the surface tension of organosilicon emulsifiers, in contrast to the classic nonionic emulsifiers, provides stability nanoparticles.
Таким образом, заявляемое изобретение позволяет обогатить ассортимент адъювантов с широкими функциональными возможностями на основе биологически инертных кремнийорганических эмульгаторов, повысить стабильность эмульсионных вакцин, безопасность и обеспечить прогнозируемое время иммунного ответа.Thus, the claimed invention allows to enrich the range of adjuvants with wide functionality based on biologically inert organosilicon emulsifiers, increase the stability of emulsion vaccines, safety and provide a predicted immune response time.
Результаты опытов по изучению вакцин против НБ обобщены в таблице 2, опыты по изучению эффективности вакцин против ИББ и РВТ обобщены в таблице 3.The results of experiments on the study of vaccines against NB are summarized in table 2, experiments on the effectiveness of vaccines against IBD and PBT are summarized in table 3.
ный
ответ,
суткиImmune
ny
answer,
day
6028
60
1:200-1:3001: 4-1: 8
1: 200-1: 300
Claims (2)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012139582/10A RU2510845C1 (en) | 2012-09-14 | 2012-09-14 | Adjuvant |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012139582/10A RU2510845C1 (en) | 2012-09-14 | 2012-09-14 | Adjuvant |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012139582A RU2012139582A (en) | 2014-03-20 |
RU2510845C1 true RU2510845C1 (en) | 2014-04-10 |
Family
ID=50280062
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012139582/10A RU2510845C1 (en) | 2012-09-14 | 2012-09-14 | Adjuvant |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2510845C1 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2813771C1 (en) * | 2022-11-17 | 2024-02-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Method of preventing escherichiosis in calves |
-
2012
- 2012-09-14 RU RU2012139582/10A patent/RU2510845C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2813771C1 (en) * | 2022-11-17 | 2024-02-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Method of preventing escherichiosis in calves |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2012139582A (en) | 2014-03-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2729646C2 (en) | Composition of vaccines with double adjuvant, preparation and use | |
ES2307053T3 (en) | FORMULATIONS OF VACCINE THAT INCLUDE AN EMULSION OF OIL IN WATER. | |
JPH02250835A (en) | Tocol as adjuvant in vaccine | |
RU2009113834A (en) | MICROFLUIDIZED EMULSIONS “OIL IN WATER” AND VACCINE COMPOSITIONS | |
JP2011057692A (en) | West nile vaccine | |
CN112843227B (en) | W/o/w adjuvant composition, vaccine composition prepared from w/o/w adjuvant composition and preparation method of vaccine composition | |
AU715947B2 (en) | Improved inactivated vaccines | |
RU2510845C1 (en) | Adjuvant | |
JP6473748B2 (en) | Vaccine with enhanced antigenicity for in ovo vaccination of birds | |
CN106267176B (en) | Infectious coryza vaccine composition, preparation method and application thereof | |
WO2000037045A2 (en) | Stabilized water-in-oil-in-water antigen delivery system | |
CN106237328A (en) | A kind of for biological product treating gosling plague and preparation method thereof | |
RU2524430C1 (en) | Vaccines for prevention of splenic fever and necrotic stomatitis in animals and method for its preparation | |
JP2007528900A (en) | Antigenic isolates and vaccines of infectious bursal disease virus | |
KR20110081233A (en) | Vaccine for treatment/prevention of scuticociliatosis in fish | |
US4537768A (en) | Combined vaccine | |
RU2644654C2 (en) | Method for producing hydroxide of aluminum oil theo-vaccine against campylobacteriosis | |
Sayed et al. | Efficacy of preliminary prepared mucosal vaccine of Infectious Coryza in chicken. | |
WO2022018576A1 (en) | Controlled release vaccine formulation | |
US9492548B2 (en) | Emulsion containing a non-live medicinal substance | |
MXPA97007402A (en) | Inactivated vaccines improved | |
RU2562550C2 (en) | Method of specific prevention of tuberculosis | |
Nazmia et al. | IMMUNE RESPONSE ENHANCEMENT OF LIVE ATTENUATED VACCINES AGAINST POULTRY RESPIRATORY VIRUSES | |
WO2012143486A1 (en) | Antigenic formulation | |
BR102018073308A2 (en) | EMULSIFICATION OF INACTIVATED ALPHA TOXIN FROM C. NOVYI FORMULATED IN WATER-OIL EMULSION (W/O) 40/60 APPLICABLE FOR MANUFACTURING MULTIPLE ANTIGEN VACCINE AGAINST CLOSTRIDIOSES |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170915 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20190128 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200915 |