RU2500104C2 - Method of preparing bone tissue preparation and set for its realisation - Google Patents

Method of preparing bone tissue preparation and set for its realisation Download PDF

Info

Publication number
RU2500104C2
RU2500104C2 RU2012108301/13A RU2012108301A RU2500104C2 RU 2500104 C2 RU2500104 C2 RU 2500104C2 RU 2012108301/13 A RU2012108301/13 A RU 2012108301/13A RU 2012108301 A RU2012108301 A RU 2012108301A RU 2500104 C2 RU2500104 C2 RU 2500104C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
solution
decalcification
alcohol
sample
finefix
Prior art date
Application number
RU2012108301/13A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2012108301A (en
Inventor
Ирина Александровна Шурыгина
Михаил Геннадьевич Шурыгин
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НЦРВХ" СО РАМН)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НЦРВХ" СО РАМН) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НЦРВХ" СО РАМН)
Priority to RU2012108301/13A priority Critical patent/RU2500104C2/en
Publication of RU2012108301A publication Critical patent/RU2012108301A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2500104C2 publication Critical patent/RU2500104C2/en

Links

Images

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention relates to medicine, veterinary and biology. Sample fixation, decalcification, washing with water, dehydration in alcohol solutions and pouring with paraffin are performed. Sample fixation is performed for 24 hours in alcohol-based molecular fixing agent FineFix, which contains FineFix and 96° alcohol in ratio 1:2.5. Decalcification is carried out for 2-5 days in 5-8% buffered solution of formic acid with daily replacement of decalcifying solution and control of decalcification completeness. Ratio sample:decalcifying solution constitutes 1:20. When decalcification is finished, sample washing with water is performed and sample is re-submerged into alcohol solution of molecular fixing agent FineFix for 6-12 hours before dehydration stage. Set for preparation of bone tissue preparation contains alcohol-based molecular fixing agent FineFix, concentrated solution of decalcifying agent, prepared with ratio 40 g of sodium citrate, 100 ml of 90% solution of formic acid, 300 ml of distilled water, and working solutions for control of decalcification completeness, containing saturated ammonium oxalate solution and 25% water solution of ammonia.
EFFECT: invention makes it possible to obtain high-quality preparations suitable for further histological and immunohistological analysis without application of highly toxic components.
2 cl, 2 dwg

Description

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, ветеринарии и биологии.The present invention relates to the field of medicine, veterinary medicine and biology.

Гистологическое исследование костной ткани является обязательным компонентом диагностики многих заболеваний и состояний и применяется как в клинических, так и в экспериментальных исследованиях. При этом качество препарата играет решающую роль в постановке диагноза и в установлении тканевых взаимоотношений.Histological examination of bone tissue is an essential component in the diagnosis of many diseases and conditions and is used in both clinical and experimental studies. Moreover, the quality of the drug plays a decisive role in the diagnosis and in the establishment of tissue relationships.

Известен способ приготовления препарата кости, включающий распил кости и его шлифование (Микроскопическая техника / под ред. Саркисов Д.С., Петров Ю.Л. - М.: Медицина, 1996. - С.456).A known method of preparing a bone preparation, including cutting a bone and grinding it (Microscopic technique / edited by Sarkisov D.S., Petrov Yu.L. - M .: Medicine, 1996. - P.456).

К недостаткам данного способа следует отнести то, что получаемые препараты малопригодны для гистологических исследований, так как в толстых срезах плохо различима структура костной ткани, а при шлифовании также разрушаются клеточные элементы.The disadvantages of this method include the fact that the resulting preparations are unsuitable for histological studies, since the structure of bone tissue is poorly distinguishable in thick sections, and cellular elements are also destroyed when grinding.

Также известен способ приготовления фрагментов костной ткани к исследованию, включающий фиксацию в забуференном 10%-ном растворе нейтрального формалина в течение 24-48 часов, промывку в воде в течение 24-48 часов, декальцинацию в 5-7.5%-ном растворе азотной кислоты до полной декальцинации, последующую обработку препарата костной ткани в 5%-ном растворе сульфата натрия или лития в течение 1 суток, промывку в воде в течение 24-48 часов, обезвоживание в спиртах и заливку в парафин (Микроскопическая техника / под ред. Саркисов Д.С., Петров Ю.Л. - М.: Медицина, 1996. - С.454, 457, 467).Also known is a method of preparing bone tissue fragments for research, including fixing in a buffered 10% solution of neutral formalin for 24-48 hours, washing in water for 24-48 hours, decalcification in a 5-7.5% solution of nitric acid to complete decalcification, subsequent processing of the bone tissue preparation in a 5% solution of sodium or lithium sulfate for 1 day, washing in water for 24-48 hours, dehydration in alcohols and pouring in paraffin (Microscopic technique / edited by D. Sarkisov. S., Petrov Yu.L. - M .: Medicine, 1 996. - S. 454, 457, 467).

Однако данный способ не позволяет добиться хорошей сохранности клеточных структур, особенно в окружающих мягких тканях (мышце, надкостнице, костном мозге), значительно ухудшает качество стандартных гистологичских окрасок, а также не позволяет проводить последующие иммуногистохимические и иммунофлюоресцентные исследования из-за повреждения вторичной структуры белковых эпитопов.However, this method does not allow to achieve good preservation of cell structures, especially in the surrounding soft tissues (muscle, periosteum, bone marrow), significantly impairs the quality of standard histological stains, and also does not allow subsequent immunohistochemical and immunofluorescence studies due to damage to the secondary structure of protein epitopes .

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ подготовки костных образцов к морфологической диагностике, включающий фиксацию образца, его декальцинацию, промывание водой, дегидратацию в спиртовых растворах с возрастающей концентрацией и заливку в парафин (Медведева Н.Н., Николаев В.Г. и др. Способ подготовки костных образцов к морфологической диагностике. Пат. RU 2241994, МПК7 G01N 33/48, G01N 1/28, Заявка: 2003129253/15, 30.09.2003, Опубликовано: 10.12.2004).The closest in technical essence to the proposed one is a method for preparing bone samples for morphological diagnosis, including fixing the sample, decalcifying it, rinsing with water, dehydration in alcohol solutions with increasing concentration and pouring it into paraffin (Medvedeva N.N., Nikolaev V.G. and other Method for preparing bone samples for morphological diagnostics (Patent RU 2241994, IPC 7 G01N 33/48, G01N 1/28, Application: 2003129253/15, 09/30/2003, Published: December 10, 2004).

Известный способ осуществляют следующим образом. После фиксации костных образцов в растворе формалина осуществляют их декальцинацию в течение 7-8 суток в 5%-ном растворе азотной кислоты на основе 5%-ого раствора формалина, после чего костные образцы в течение 2 часов промывают проточной водопроводной водой и на 12 часов погружают в 5%-ный раствор серно-кислого лития, затем в течение 20-30 минут снова промывают проточной водой и подвергают дегидратации в спиртах возрастающих концентраций.The known method is as follows. After fixing the bone samples in a formalin solution, they are decalcified for 7-8 days in a 5% solution of nitric acid based on a 5% formalin solution, after which the bone samples are washed with running tap water for 2 hours and immersed for 12 hours in a 5% solution of lithium sulfuric acid, then again washed with running water for 20-30 minutes and subjected to dehydration in alcohols of increasing concentrations.

К недостаткам известного способа следует отнести длительность процедуры декальцинации, использование в качестве фиксатора формалина, а в качестве декальцинатора - раствора азотной кислоты, что не позволяет в последующем проводить иммуногистохимическое и иммунофлюоресцентное исследования образцов вследствие значительных повреждений окружающих тканей и клеточных структур при проведении декальцинации.The disadvantages of this method include the duration of the decalcification procedure, the use of formalin as a fixative, and nitric acid solution as a decalcifier, which does not allow subsequent immunohistochemical and immunofluorescence studies of samples due to significant damage to surrounding tissues and cell structures during decalcification.

Задачей заявляемого изобретения является разработка способа приготовления препарата костной ткани, пригодного для гистологического и иммуноморфологического исследования, и набора для его осуществления.The task of the invention is to develop a method for preparing a bone tissue preparation suitable for histological and immunomorphological studies, and a kit for its implementation.

Техническим результатом предлагаемого способа является обеспечение сохранности гистологических структур кости и окружающих тканей, а также снижение трудоемкости и токсического воздействия при изготовлении препарата.The technical result of the proposed method is to ensure the preservation of the histological structures of the bone and surrounding tissues, as well as reducing the complexity and toxic effects in the manufacture of the drug.

Технический результат достигается тем, что способ приготовления препарата костной ткани включает фиксацию образца, его декальцинацию, промывание водой, дегидратацию в спиртовых растворах и заливку в парафин.The technical result is achieved by the fact that the method of preparation of the bone tissue preparation involves fixing the sample, decalcifying it, rinsing with water, dehydration in alcohol solutions and pouring it into paraffin.

Отличие заявляемого способа заключается в том, что фиксацию образца костной ткани проводят в течение 24-х часов в молекулярном фиксаторе, в состав которого не входят альдегиды, например, растровом FineFix на спиртовой основе, содержащем FineFix и 96° спирт в соотношении 1:2,5.The difference of the proposed method lies in the fact that the fixation of a sample of bone tissue is carried out for 24 hours in a molecular fixative, which does not include aldehydes, for example, raster FineFix alcohol-based, containing FineFix and 96 ° alcohol in a ratio of 1: 2, 5.

FineFix - бесформалиновый фиксатор, включающий в себя следующие компоненты: вода, 1,2-пропанедиол, поливиниловый спирт и от 0.05 до 2.00 wt.-% мономерного карбогидрата, содержащего не менее 3 атомов углерода и второе средство для сохранения этанола (патент ЕР 145 5174 B1 Fixative, Номер заявки EP20030005010, Дата публикации: 15 декабря 2004, Дата приоритета: 5 марта 2003. Другие номера патента: US 20050074422. Автор: Francesco Visinoni, Заявитель - Milestone S.r.L).FineFix is a formless-free fixative that includes the following components: water, 1,2-propanediol, polyvinyl alcohol and from 0.05 to 2.00 wt .-% monomeric carbohydrate containing at least 3 carbon atoms and a second agent for preserving ethanol (patent EP 145 5174 B1 Fixative, Application number EP20030005010, Date of publication: December 15, 2004, Priority date: March 5, 2003. Other patent numbers: US 20050074422. Author: Francesco Visinoni, Applicant - Milestone SrL).

Отличительным приемом заявляемого способа является и то, что декальцинацию осуществляют в течение 2-5 суток в 5-8% забуференном растворе муравьиной кислоты при ежедневной смене декальцинирующего раствора и контроле полноты декальцинации, при этом соотношение образец:декальцинирующий раствор составляет 1:20.A distinctive technique of the proposed method is that decalcification is carried out for 2-5 days in a 5-8% buffered solution of formic acid with a daily change of decalcification solution and monitoring the completeness of decalcification, while the ratio of sample: decalcification solution is 1:20.

К отличиям предлагаемого способа также относится прием повторного помещения образца костной ткани в спиртовой раствор молекулярного фиксатора на 6-12 часов, который осуществляют после завершения декальцинации и промывки образца водой.The differences of the proposed method also include the reception of repeated placement of a bone tissue sample in an alcoholic solution of molecular fixative for 6-12 hours, which is carried out after decalcification and washing of the sample with water.

Сопоставительный анализ заявляемого технического решения с прототипом позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию изобретения «новизна».A comparative analysis of the proposed technical solution with the prototype allows us to conclude that the claimed technical solution meets the criteria of the invention of "novelty."

Отличительные приемы заявляемого способа обеспечивают сохранность гистологических структур кости и окружающих тканей, сохранность антигенных эпитопов, а также позволяют снизить трудоемкость и сократить сроки изготовления препарата. Так, сроки декальцинации компактной кости мелких лабораторных животных (мышей, крыс) составляют 2-4 суток, кроликов - 4-5 суток, фрагментов костной ткани человека - 4-5 суток. При этом исключается токсическое воздействие формалина на исследователя.Distinctive techniques of the proposed method ensure the preservation of the histological structures of the bone and surrounding tissues, the preservation of antigenic epitopes, and also reduce the complexity and reduce the time of manufacture of the drug. So, the terms for decalcification of the compact bone of small laboratory animals (mice, rats) are 2-4 days, rabbits - 4-5 days, fragments of human bone tissue - 4-5 days. In this case, the toxic effect of formalin on the researcher is excluded.

Заявляемый способ обеспечивает достижение усматриваемого заявителем технического результата, а именно - обеспечение сохранности гистологических структур кости и окружающих тканей, снижение трудоемкости и сокращение сроков изготовления препаратов.The inventive method ensures the achievement of the technical result perceived by the applicant, namely, ensuring the preservation of the histological structures of the bone and surrounding tissues, reducing the complexity and reducing the time for manufacturing drugs.

Следовательно, заявляемый способ позволяет получить препараты высокого качества, пригодных как для рутинного гистологического исследования, так и для проведения иммуногистологических исследований. Кроме этого исключается применение высокотоксичного формалина.Therefore, the inventive method allows to obtain high-quality drugs suitable for both routine histological examination and immunohistological studies. In addition, the use of highly toxic formalin is excluded.

Изложенное позволяет сделать вывод о соответствии технического решения критерию «изобретательский уровень».The above allows us to conclude that the technical solution meets the criterion of "inventive step".

Способ, составляющий заявляемое изобретение, предназначен для использования в медицине, ветеринарии и биологии. Возможность его осуществления подтверждена описанными в заявке приемами и средствами.The method comprising the claimed invention is intended for use in medicine, veterinary medicine and biology. The possibility of its implementation is confirmed by the methods and means described in the application.

Вышеизложенное дает основание считать, что заявляемое техническое решение соответствует критерию изобретения «промышленная применимость».The above gives reason to believe that the claimed technical solution meets the criteria of the invention of "industrial applicability".

Осуществление заявляемого способа поясняется примером конкретного выполнения. Приведенный ниже пример служит для иллюстрации, но не ограничивает данное изобретение.The implementation of the proposed method is illustrated by an example of a specific implementation. The following example is intended to illustrate but not limit the invention.

Образцы костной ткани фиксируют спиртовым раствором молекулярного фиксатора FineFix (280 мл FineFix+720 мл 96° спирта) в течение 24 часов. Затем без отмывки образцы помещают в индивидуальные хорошо закрывающиеся емкости в 5%-ный забуференный раствор муравьиной кислоты. Концентрированный раствор декальцинатора, так называемый матричный раствор, готовят из расчета 40 г лимоннокислого натрия, 100 мл 90% раствора муравьиной кислоты, 300 мл дистиллированной воды; перед употреблением раствор доводят дистиллированной водой до получения 5-8% раствора муравьиной кислоты. Для каждого образца соотношение образец:декальцинирующий раствор составляет 1:20.Bone tissue samples are fixed with an alcohol solution of FineFix molecular fixative (280 ml FineFix + 720 ml 96 ° alcohol) for 24 hours. Then, without washing, the samples are placed in individual well-closing containers in a 5% buffered formic acid solution. A concentrated decalcifier solution, the so-called matrix solution, is prepared at the rate of 40 g of sodium citrate, 100 ml of 90% formic acid solution, 300 ml of distilled water; before use, the solution is adjusted with distilled water to obtain a 5-8% solution of formic acid. For each sample, the ratio of sample: decalcification solution is 1:20.

Ежедневно оценивают полноту декальцинации кальций-оксалатным методом (3 мл использованной декальцинирующей жидкости, довести рН до 7.0 концентрированным (25%) раствором аммиака, затем добавить 5 мл насыщенного раствора оксалата аммония, хорошо взболтать, оставить на 30 мин, если жидкость останется прозрачной - декальцинация завершена). При наличии кальция в использованном декальцинирующем растворе образцы помещают в свежую порцию декальцинатора.The completeness of decalcification is evaluated daily using the calcium oxalate method (3 ml of used decalcifying liquid, adjust pH to 7.0 with concentrated (25%) ammonia solution, then add 5 ml of saturated ammonium oxalate solution, shake well, leave for 30 min if the liquid remains clear - decalcification completed). In the presence of calcium in the used decalcifying solution, the samples are placed in a fresh portion of the decalcifier.

После завершения декальцинации проводят промывку образцов водой в течение 5 минут и повторно помещают в спиртовой раствор FineFix на 12 часов.After decalcification is completed, the samples are washed with water for 5 minutes and re-placed in FineFix alcohol solution for 12 hours.

Затем проводят дегидратацию в спиртах с возрастающей концентрацией, начиная с 70° раствора и заканчивая 100° спиртом. Заливку в парафин осуществляют по общепринятой методике (Микроскопическая техника / под ред. Саркисов Д.С., Петров Ю.Л. - М.: Медицина, 1996. - С.467).Then dehydration is carried out in alcohols with increasing concentration, starting from 70 ° of the solution and ending with 100 ° with alcohol. Paraffin filling is carried out according to the generally accepted technique (Microscopic technique / under the editorship of DS Sarkisov, Yu.L. Petrov - M .: Medicine, 1996. - P.467).

Предлагаемым способом изготовлено 162 блока образцов костной ткани. Получены высококачественные гистологические препараты как при применении рутинных методов окрашивания (окрашивание гематоксилин-эозином), так и при применении иммуноморфологических методов окрашивания.The proposed method produced 162 blocks of bone tissue. High-quality histological preparations were obtained both with the use of routine staining methods (staining with hematoxylin-eosin) and with the use of immunomorphological staining methods.

При приготовлении препарата костной ткани используют набор, содержащий молекулярный фиксатор FineFix на спиртовой основе, содержащий FineFix и 96° спирт в соотношении 1:2,5, концентрированный раствор декальцинацинатора и рабочие растворы для контроля полноты декальцинации: 25% раствор аммиака и насыщенный раствор оксалата аммония.In the preparation of the bone tissue preparation, a kit containing an alcohol-based FineFix molecular fixative containing FineFix and 96 ° alcohol in a ratio of 1: 2.5, a concentrated decalcinization solution and working solutions to control the decalcification completeness is used: 25% ammonia solution and saturated ammonium oxalate solution .

Сущность предлагаемого способа поясняется фигурами - гистологическими препаратами костной ткани, полученными по предлагаемому способу.The essence of the proposed method is illustrated by figures - histological preparations of bone tissue obtained by the proposed method.

Так, на фиг.1 показан гистологический препарат кости, окрашенный гематоксилин-эозином. Показана сохранность структур кости и окружающих тканей: А - мышцы, В - надкостница, С - кость, D - костный мозг, Е - хрящ, увеличение 40х.So, figure 1 shows a histological preparation of bone stained with hematoxylin-eosin. The preservation of the structures of the bone and surrounding tissues is shown: A - muscles, B - periosteum, C - bone, D - bone marrow, E - cartilage, magnification 40x.

На фиг.2 показано окрашивание клеток костного мозга в декальцинированной кости иммуногистохимическим методом на карбоангидразу. Использованы первичные антитела СА2, Epitomics® каталожный №5204-1. Продемонстрировано хорошее качество окрашивания. F - ярко окрашенные остеокласты, D - кость, увеличение 400х.Figure 2 shows the staining of bone marrow cells in decalcified bone immunohistochemical method on carbonic anhydrase. Primary antibodies CA2, Epitomics® catalog No. 5204-1 were used. Good staining quality has been demonstrated. F - brightly colored osteoclasts, D - bone, 400x magnification.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет получить препараты костной ткани, пригодные как для гистологического, так и для иммуноморфологического исследования. При этом костные и окружающие ткани сохраняют свою структуру, сохраняются антигенные эпитопы, отсутствует использование высокотоксичных компонентов.Thus, the proposed method allows to obtain bone tissue preparations suitable for both histological and immunomorphological studies. At the same time, bone and surrounding tissues retain their structure, antigenic epitopes are preserved, and the use of highly toxic components is absent.

Claims (2)

1. Способ приготовления препарата костной ткани, включающий фиксацию образца, декальцинацию, промывание водой, дегидратацию в спиртовых растворах и заливку в парафин, отличающийся тем, что фиксацию образца проводят в течение 24 ч в молекулярном фиксаторе FineFix на спиртовой основе, содержащем FineFix и 96%-ный спирт в соотношении 1:2,5, декальцинацию осуществляют в течение 2-5 суток в 5-8% забуференном растворе муравьиной кислоты при ежедневной смене декальцинирующего раствора и контроле полноты декальцинации, при этом соотношение образец:декальцинирующий раствор составляет 1:20, после завершения декальцинации проводят промывку образца водой и до стадии дегидратации повторно помещают образец в спиртовой раствор молекулярного фиксатора FineFix на 6-12 ч.1. A method of preparing a bone tissue preparation, including fixing the sample, decalcification, washing with water, dehydration in alcohol solutions and pouring in paraffin, characterized in that the sample is fixed for 24 hours in an alcohol-based FineFix molecular fixative containing FineFix and 96% alcohol in a ratio of 1: 2.5, decalcification is carried out for 2-5 days in a 5-8% buffered solution of formic acid with a daily change of decalcification solution and control the completeness of decalcification, while the ratio of sample: decalcini uyuschy solution being 1:20, is carried out after the descaling and rinsing the sample with water before the dehydration step repeated pattern placed in an alcohol solution FineFix molecular retainer for 6-12 hours. 2. Набор для приготовления препарата костной ткани, характеризующийся тем, что он содержит молекулярный фиксатор FineFix на спиртовой основе, концентрированный раствор декальцинатора, изготовленный из расчета 40 г лимоннокислого натрия, 100 мл 90%-ного раствора муравьиной кислоты, 300 мл дистиллированной воды и рабочие растворы для контроля полноты декальцинации: насыщенный раствор оксалата аммония и 25%-ный водный раствор аммиака. 2. A set for the preparation of a bone tissue preparation, characterized in that it contains an alcohol-based FineFix molecular fixative, a concentrated decalcifier solution made from 40 g of sodium citrate, 100 ml of 90% formic acid solution, 300 ml of distilled water and workers solutions for the control of decalcification: a saturated solution of ammonium oxalate and 25% aqueous ammonia.
RU2012108301/13A 2012-03-05 2012-03-05 Method of preparing bone tissue preparation and set for its realisation RU2500104C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012108301/13A RU2500104C2 (en) 2012-03-05 2012-03-05 Method of preparing bone tissue preparation and set for its realisation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012108301/13A RU2500104C2 (en) 2012-03-05 2012-03-05 Method of preparing bone tissue preparation and set for its realisation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012108301A RU2012108301A (en) 2013-09-10
RU2500104C2 true RU2500104C2 (en) 2013-12-10

Family

ID=49164618

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012108301/13A RU2500104C2 (en) 2012-03-05 2012-03-05 Method of preparing bone tissue preparation and set for its realisation

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2500104C2 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2624869C1 (en) * 2016-04-11 2017-07-07 Максим Викторович Гоман Method for nervous structures identification in dentistry system
RU2689950C1 (en) * 2018-07-18 2019-05-29 Сергей Николаевич Чемидронов Method for preserving bone anatomical preparations
RU2776930C1 (en) * 2021-06-21 2022-07-28 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Северный государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for extracting isolated cells from the jaw

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105973663B (en) * 2016-04-29 2019-07-12 马征来 A kind of preparation method of colorful skeleton specimen
CN112945657B (en) * 2021-01-22 2023-08-25 中国科学院东北地理与农业生态研究所 Pretreatment device and method for preparing plant material paraffin section
CN117861266A (en) * 2024-03-12 2024-04-12 北京龙迈达斯科技开发有限公司 Bone tissue decalcification system

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2157519C1 (en) * 1999-11-30 2000-10-10 Балязин Виктор Александрович Method for examining bone tissue for diagnosing intraosseous growing tumors
RU2241994C1 (en) * 2003-09-30 2004-12-10 ГОУ ВПО Красноярская государственная медицинская академия Method for preparing bone samples to morphological diagnostic analysis
US7618828B2 (en) * 2003-06-30 2009-11-17 Academisch Ziekenhuis Groningen Method for histoprocessing
US20110195052A1 (en) * 2003-12-31 2011-08-11 Keyvan Behnam Bone matrix compositions and methods

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2157519C1 (en) * 1999-11-30 2000-10-10 Балязин Виктор Александрович Method for examining bone tissue for diagnosing intraosseous growing tumors
US7618828B2 (en) * 2003-06-30 2009-11-17 Academisch Ziekenhuis Groningen Method for histoprocessing
RU2241994C1 (en) * 2003-09-30 2004-12-10 ГОУ ВПО Красноярская государственная медицинская академия Method for preparing bone samples to morphological diagnostic analysis
US20110195052A1 (en) * 2003-12-31 2011-08-11 Keyvan Behnam Bone matrix compositions and methods

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2624869C1 (en) * 2016-04-11 2017-07-07 Максим Викторович Гоман Method for nervous structures identification in dentistry system
RU2689950C1 (en) * 2018-07-18 2019-05-29 Сергей Николаевич Чемидронов Method for preserving bone anatomical preparations
RU2776930C1 (en) * 2021-06-21 2022-07-28 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Северный государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for extracting isolated cells from the jaw

Also Published As

Publication number Publication date
RU2012108301A (en) 2013-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2500104C2 (en) Method of preparing bone tissue preparation and set for its realisation
JP5120998B2 (en) Tissue, cell or organ preservation solution
JP7281230B2 (en) COMPOSITION FOR PREPARATION OF BIOLOGICAL MATERIAL EXCELLENT IN LIGHT TRANSMISSION AND USE THEREOF
JPH076893B2 (en) Method for preserving tissue fixative and animal tissue
DE69333586T2 (en) METHOD AND COMPOSITION FOR PRESERVING ANTIGENES AND METHOD FOR THE USE OF CYTOLOGICAL MATERIAL PRODUCED BY SELF-PROCEDURE
WO2015123192A9 (en) Universal system, method and solution for the acceleration of the process of fixing, dehydrating and clearing the structure of biological tissue
RU2530612C1 (en) Method for nematode preparation for morphological and histological examination
JP4292296B2 (en) Electron staining method for samples for transmission electron microscope observation.
Berman et al. The influence of the flow of detergent and donor characteristics on the extracellular matrix composition after human pancreas decellularization
EP2873975B1 (en) Antibody composition, kit for preparing antibody composition, and immunostaining method
Bencosme A trichrome staining method for routine use
JP6878704B2 (en) Composition for immunostaining of clearing large tissues, and immunostaining method for clearing large living tissues
JP3723204B1 (en) Impermeable tissue quick fixative
CN114652729A (en) Application of CX-5461 in treatment of kidney transplantation immune rejection
Hagiwara et al. Stimulation of autophagy in the liver by lipopolysaccharide-induced systemic inflammation in a rat model of diabetes mellitus
RU2386415C1 (en) Method for prevention of systemic amyloidosis and its nephropathic condition in experimental animals
RU2429462C2 (en) Optical clarification of biological tissue specimens
JPH0368865A (en) Inspection of pathological tissue and dehydrating agent therefor
CN110384712B (en) Application of nucleic acid aptamer in preparation of drug for treating Alzheimer's disease
KR102673166B1 (en) 3D imaging method in tissue of cell therapy products using tissue clearing
RU2241994C1 (en) Method for preparing bone samples to morphological diagnostic analysis
RU2752505C1 (en) Formaldehyde-free biomaterial fixator for histological and immunohistochemical studies
Riesterer et al. Post-fixation heavy metal staining and resin embedding for electron microscopy (EM)
RU2464646C2 (en) Deep-etching method
Aryani et al. Histology and Histomorphometry of Kidney on Domestic Chicken (Gallus gallus domesticus) During Pre and Post Hatch

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner