RU2488823C1 - Differential diagnostic technique for uterine cancer - Google Patents
Differential diagnostic technique for uterine cancer Download PDFInfo
- Publication number
- RU2488823C1 RU2488823C1 RU2012107983/15A RU2012107983A RU2488823C1 RU 2488823 C1 RU2488823 C1 RU 2488823C1 RU 2012107983/15 A RU2012107983/15 A RU 2012107983/15A RU 2012107983 A RU2012107983 A RU 2012107983A RU 2488823 C1 RU2488823 C1 RU 2488823C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- acc
- scc
- uterine cancer
- figo
- fsll
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии.The invention relates to medicine, in particular to oncology.
Известен способ диагностики рака шейки матки (см.Патент РФ №2343485, кл. G01N 33/53; опубл. 10.01.2009 г.), включающий лектин-иммуноферментный анализ вагинального секрета, в котором определяют концентрацию лектин-связанных РЭА/РЭА - подобных антигенов.A known method for the diagnosis of cervical cancer (see RF Patent No. 2343485, class G01N 33/53 ; publ. 10.01.2009), including lectin immunoassay analysis of vaginal secretion, which determines the concentration of lectin-associated CEA / CEA-like antigens.
К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известного способа, относится невозможность определения стадии рака шейки матки.The reasons that impede the achievement of the following technical result when using the known method include the inability to determine the stage of cervical cancer.
Известен способ дифференциальной диагностики гиперплазии, интраэпителиальных неоплазий и рака шейки матки (см. патент РФ №2321859, кл. G01N 33/483, опубл. 10.04.2008 г.), включающий компьютерный анализ мазков, полученных из канала шейки матки и окрашенных ядерным красителем.A known method for the differential diagnosis of hyperplasia, intraepithelial neoplasia and cervical cancer (see RF patent No. 2321859, CL G01N 33/483, publ. 10.04.2008), including computer analysis of smears obtained from the cervical canal and stained with a nuclear dye .
К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известного способа, относится невозможность определения стадии рака шейки матки.The reasons that impede the achievement of the following technical result when using the known method include the inability to determine the stage of cervical cancer.
Использование предполагаемого изобретения обеспечивает следующий технический результат: определение стадии рака шейки матки.Using the alleged invention provides the following technical result: determining the stage of cervical cancer.
Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что суспензию нейтрофилов (Нф), полученную из свеженабраннойгепаринизированной венозной крови, подвергают фемтосекундному лазерному излучению (ФСЛИ) в различных дозах и определяют в Нф активностьмиелопероксйдазы (МПО), кислой фосфатазы (КФ), уровень катионных белков (КБ) и активность в нитросинеготетразолияв(НСТ)-тесте. Причем, при начальном РТТТМ (Ia по FIGO) в Нф после ФСЛИ средней дозы 84,53 мДж/см2 уровень КБ выше значения 1,65 среднего цитохимический коэффициента (СЦК), а КФ выше значения 0,96 СЦК, причем в норме - КБ ниже 1,65 СЦК, а КФ выше 0,96 СЦК.The specified technical result in the implementation of the invention is achieved by the fact that a suspension of neutrophils (NF) obtained from freshly collected heparinized venous blood is subjected to femtosecond laser radiation (PSLI) in various doses and the activity of myeloperoxidase (MPO), acid phosphatase (CF), and the level of cationic proteins are determined (KB) and activity in nitrosine gotetrazolium (HCT) test. Moreover, with an initial RTTTM (Ia according to FIGO) in NF after an FSLI of an average dose of 84.53 mJ / cm 2 , the CB level is higher than the 1.65 average cytochemical coefficient (SCC), and the CF is higher than 0.96 SCC, and normally - The design bureau is below 1.65 SCC, and the CF is above 0.96 SCC.
При местноограниченном процессе (Ib-IIa по FIGO) РШМ в Нф после ФСЛИ средней дозы 23,7 мДж/см2 НСТ выше 1,45 СЦК, а МПО ниже 2,22 СЦК.In the locally limited process (Ib-IIa according to FIGO), cervical cancer in Nf after FSLI of an average dose of 23.7 mJ / cm 2 HCT is higher than 1.45 SCC, and MPO is lower than 2.22 SCC.
При распространенном РШМ (IIb-IV по FIGO) в Нф при ФСЛИ 8,5 мДж/см2 КФ ниже 1,28 СЦК, а при ФСЛИ 71,1 мДж/см2 НСТ ниже 1,38 СЦК.In case of widespread cervical cancer (IIb-IV according to FIGO) in NF with FSLI 8.5 mJ / cm 2 CF is lower than 1.28 SCC, and with FSLI 71.1 mJ / cm 2 HCT is lower than 1.38 SCC.
Проведенный заявителем анализ уровня техники, включающий поиск по патентам и научно-техническим источникам информации и выявление источников, содержащих сведения об аналогах заявленного изобретения, позволил установить, что заявитель не обнаружил аналог, характеризующийся признаками, тождественными всем существенным признакам заявленного изобретения. Определение из перечня выявленных аналогов прототипа, как наиболее близкого по совокупности существенных признаков аналога, позволило выявить совокупность существенных по отношению к усматриваемому заявителем техническому результату отличительных признаков в заявленном способе, изложенных в формуле изобретения.The analysis of the prior art by the applicant, including the search by patents and scientific and technical sources of information and the identification of sources containing information about analogues of the claimed invention, allowed to establish that the applicant did not find an analogue characterized by features identical to all the essential features of the claimed invention. The definition from the list of identified analogues of the prototype, as the closest in the set of essential features of the analogue, allowed to identify the set of essential distinguishing features in relation to the applicant's technical result in the claimed method set forth in the claims.
Следовательно, заявленное изобретение соответствует условию «новизна».Therefore, the claimed invention meets the condition of "novelty."
Исследования проводят следующим образом. Суспензию нейтрофилов (Нф), полученную из свеженабранной гепаризированной венозной крови больных раком шейки матки с целью уточнения стадии заболевания, подвергают фемтосекундному лазерному излучению (ФСЛИ) в различных дозах и определяют в Нф цитохимически активность миелопероксидазы (МПО) по методу Грэхема-Кнолля (см. Долгушин И.А., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз.Екатеринбург, 2001).Свежие мазки фиксируют в 4% формалиново-спиртовом растворе 30 сек. В темном месте и в среде повышенной влажности на фиксированные мазки наносят инкубационную среду (250 мг бензидина растворяли в 6 мл спирта 96% и 4 мл воды с добавлением 0,02 мл 3% перекиси водорода) на 10 мин. Докрашивают цитоплазму 0,5% спиртовым раствором эозина в течение 10 мин, а ядра -0,5% спиртовым раствором метиленового синего (15 мин). Промывают проточной водой в течение 10 сек и высушивают на воздухе. Фермент выявляют в цитоплазме клеток в виде коричневых гранул.Research is carried out as follows. A suspension of neutrophils (Nf) obtained from freshly collected heparinized venous blood of patients with cervical cancer in order to clarify the stage of the disease is subjected to femtosecond laser radiation (PSLI) in various doses and cytochemically determined myeloperoxidase (MPO) activity according to the Graham-Knoll method. Dolgushin I.A., Bukharin O.V. Neutrophils and homeostasis. Yekaterinburg, 2001). Fresh smears are fixed in 4% formalin-alcohol solution for 30 sec. In a dark place and in an environment of high humidity, incubation medium is applied to fixed smears (250 mg of benzidine was dissolved in 6 ml of alcohol 96% and 4 ml of water with the addition of 0.02 ml of 3% hydrogen peroxide) for 10 minutes. The cytoplasm is stained with a 0.5% alcohol solution of eosin for 10 min, and the nucleus is 0.5% with an alcohol solution of methylene blue (15 min). Washed with running water for 10 seconds and dried in air. The enzyme is detected in the cytoplasm of cells in the form of brown granules.
В Нф определяют активность кислой фосфатазы (КФ) методом азосочетания по методу Burstone и Li (см. Шубич М.Г., Нестерова И.В. О специфичности цитохимического выявления кислой фосфатазы в нейтрофильных лейкоцитах // Лаб. дело. - 1980. - №3. - С.150-154). Свежие высушенные мазкификсируют в 10% растворе формалина на этиловом спирте в течение 30 сек. Промытые дистиллированной водой и высушенные мазки помещают в емкость с инкубационной средой (рН 5,2-5,4), предварительно профильтрованной (40 г нафтола-АБ-фосфата, 1 мл диметилформамида, 0,1 н раствор ацетата натрия, 8 капель парарозанилина и 8 капель раствора азотистокислого натрия) и помещают в термостат на 2 ч при температуре 37°C. После инкубации мазки промывают дистиллированной водой, высушивают и докрашивают ядра гематоксилином Майера в течение 15 мин. Активность КФ выявляют в виде гранул красноватой окраски.In Nf, the activity of acid phosphatase (CF) is determined by the azo coupling method according to the method of Burstone and Li (see Shubich MG, Nesterova IV On the specificity of the cytochemical detection of acid phosphatase in neutrophilic leukocytes // Lab. - 1980. - No. 3. - S.150-154). Fresh dried smears are fixed in 10% formalin solution in ethanol for 30 sec. Washed with distilled water and dried smears are placed in a container with incubation medium (pH 5.2-5.4), pre-filtered (40 g of naphthol-AB phosphate, 1 ml of dimethylformamide, 0.1 n sodium acetate solution, 8 drops of pararosaniline and 8 drops of sodium nitrate solution) and placed in a thermostat for 2 hours at a temperature of 37 ° C. After incubation, the smears are washed with distilled water, the kernels are dried and stained with Mayer hematoxylin for 15 minutes. The activity of CF is detected in the form of granules of a reddish color.
В Нф также определяют уровень катионных белков (КБ) по методу М.Г. Шубича с бромфеноловым синим (см. Шубич М.Г. Выявление катионного белка в цитоплазме лейкоцитов с помощью бромфенолового синего // Цитология. - 1974. - №10. - С.1321-1322). Свежие мазки фиксируют в 5% водном растворе сульфосалицилловой кислоты в течение 60 сек. Далее окрашивают 0,1%-ным раствором бромфенолового синего в боратном буфере 2 мин и промывают в трех сменах 0,05 М боратного буфера (рН 7,2) по 1 мин. Затем мазки высушивают и ядра докрашивают 1%-ным водным раствором сафранина в течение 30 сек. Пробы промывают проточной водой, высушивают имикроскопируют (при увеличении ×1350) под иммерсией. КБ выявляют в цитоплазме Нф в виде синих гранул.In Nf, the level of cationic proteins (CB) is also determined by the method of M.G. Shubich with bromphenol blue (see Shubich MG. Detection of cationic protein in the leukocyte cytoplasm using bromphenol blue // Cytology. - 1974. - No. 10. - S.1321-1322). Fresh smears are fixed in a 5% aqueous solution of sulfosalicylic acid for 60 seconds. Then it is stained with a 0.1% solution of bromphenol blue in borate buffer for 2 minutes and washed in three shifts of 0.05 M borate buffer (pH 7.2) for 1 minute. Then the smears are dried and the kernels are stained with a 1% aqueous solution of safranin for 30 seconds. Samples are washed with running water, dried by imicroscopy (at magnification × 1350) under immersion. CBs are detected in the cytoplasm of NF in the form of blue granules.
Далее определяют активность Нф в НСТ-тесте. Принцип метода основан на восстановлении поглощенного фагоцитом растворимого красителя нитросинеготетразолия (НСТ) в нерастворимый диформазан. Высушенные мазки помещают в емкость с краской-фиксатором Мая-Грюнвальда в течение 3-5 мин. Затем мазки помещают в кювету с разведенным (1:10) раствором красителя Романовского на 20-30 мин. Далее промывают проточной водой и на влажные мазки в темном месте наносят раствор тетразолиянитросинего с концентрацией 1 мг/мл на 5-7 мин и промывают. А затем выявляют зерна формазана синего цвета.Next, determine the activity of Nf in the HCT test. The principle of the method is based on the restoration of the soluble dye nitrosinegotetrazolium (HCT) absorbed by the phagocyte into insoluble formazan. Dried smears are placed in a container with May-Grunwald fixative paint for 3-5 minutes. Then the smears are placed in a cuvette with a diluted (1:10) Romanovsky dye solution for 20-30 minutes. Then it is washed with running water and a solution of tetrazolynitrosine with a concentration of 1 mg / ml for 5-7 minutes is applied to wet smears in a dark place and washed. And then blue formazan grains are revealed.
При начальном РШМ (Ia по FIGO) в Нф после ФСЛИ средней дозы 84,53 мДж/см2 уровень КБ выше 1,65 СЦК (средний цитохимический коэффициент), а КФ выше 0,96 СЦК. В норме КБ ниже 1,65 СЦК, а КФ выше 0,96 СЦК.At the initial cervical cancer (Ia according to FIGO) in NF after FSLI, the average dose is 84.53 mJ / cm 2 , the CB level is higher than 1.65 SCC (average cytochemical coefficient), and the CF is higher than 0.96 SCC. Normally, the design bureau is below 1.65 SCC, and the CF is above 0.96 SCC.
При местноограниченном процессе (Ib-IIa по FIGO) РШМ в Нф после ФСЛИ средней дозы 23,7 мДж/см2 НСТ выше 1,45 СЦК, МПО ниже 2,22 СЦК. При распространенном РШМ (IIb-IV по FIGO) в Нф при ФСЛИ 8,5 мДж/см2 КФ ниже 1,28 СЦК, а при ФСЛИ 71,1 мДж/см2 НСТ ниже 1,38 СЦК. На основании предложенных тестов дообследования уточнение стадий РШМ было проведено у 19-ти пациенток, впервые лечившихся в период с января 2010 г. по сентябрь 2010 г. в Ульяновском областном клиническом онкологическом диспансере. У 8 из них стадия злокачественного процесса была изменена.In the locally limited process (Ib-IIa according to FIGO), cervical cancer in Nf after FSLI of an average dose of 23.7 mJ / cm 2 HCT is higher than 1.45 SCC, MPO is below 2.22 SCC. In case of widespread cervical cancer (IIb-IV according to FIGO) in NF with FSLI 8.5 mJ / cm 2 CF is lower than 1.28 SCC, and with FSLI 71.1 mJ / cm 2 HCT is lower than 1.38 SCC. Based on the proposed follow-up tests, cervical cancer stages were clarified in 19 patients who were treated for the first time from January 2010 to September 2010 in the Ulyanovsk Regional Clinical Oncology Center. In 8 of them, the stage of the malignant process was changed.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012107983/15A RU2488823C1 (en) | 2012-03-01 | 2012-03-01 | Differential diagnostic technique for uterine cancer |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012107983/15A RU2488823C1 (en) | 2012-03-01 | 2012-03-01 | Differential diagnostic technique for uterine cancer |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2488823C1 true RU2488823C1 (en) | 2013-07-27 |
Family
ID=49155727
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012107983/15A RU2488823C1 (en) | 2012-03-01 | 2012-03-01 | Differential diagnostic technique for uterine cancer |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2488823C1 (en) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105050131A (en) * | 2015-07-08 | 2015-11-11 | 深圳市华讯方舟科技有限公司 | Pressure testing method of access controller and device |
RU2735660C1 (en) * | 2019-12-23 | 2020-11-05 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Петрозаводский государственный университет" | Method for differential diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia of grade iii and microinvasive cervical cancer associated with human papilloma virus |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2045072C1 (en) * | 1992-04-27 | 1995-09-27 | Олег Михайлович Кшивец | Method of differential diagnosing of cancer and precancer pathology |
RU2343485C1 (en) * | 2007-06-14 | 2009-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Владивостокский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО ВГМУ Росздрава) | Method of diagnostics of uteri cervix cancer |
RU107923U1 (en) * | 2011-01-18 | 2011-09-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ИНЛАЙФ" | LASER SPECTRAL COLOSCOPE |
-
2012
- 2012-03-01 RU RU2012107983/15A patent/RU2488823C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2045072C1 (en) * | 1992-04-27 | 1995-09-27 | Олег Михайлович Кшивец | Method of differential diagnosing of cancer and precancer pathology |
RU2343485C1 (en) * | 2007-06-14 | 2009-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Владивостокский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО ВГМУ Росздрава) | Method of diagnostics of uteri cervix cancer |
RU107923U1 (en) * | 2011-01-18 | 2011-09-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ИНЛАЙФ" | LASER SPECTRAL COLOSCOPE |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105050131A (en) * | 2015-07-08 | 2015-11-11 | 深圳市华讯方舟科技有限公司 | Pressure testing method of access controller and device |
RU2735660C1 (en) * | 2019-12-23 | 2020-11-05 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Петрозаводский государственный университет" | Method for differential diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia of grade iii and microinvasive cervical cancer associated with human papilloma virus |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Jiyad et al. | Azathioprine and risk of skin cancer in organ transplant recipients: systematic review and meta-analysis | |
CN105717307B (en) | The kit and its application method of a kind of sperm quality assessment | |
CN105950700A (en) | Fungus fluorescent staining agent | |
Akanni et al. | Glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency in blood donors and jaundiced neonates in Osogbo, Nigeria | |
Gosálvez et al. | Multi-centre assessment of nitroblue tetrazolium reactivity in human semen as a potential marker of oxidative stress | |
CN107177683B (en) | Bladder cancer screening and detecting kit | |
RU2488823C1 (en) | Differential diagnostic technique for uterine cancer | |
CN102707058B (en) | Tumor necrosis factor-alpha induced protein 8 L3 (TIPE3) immunohistochemistry detection kit for diagnosing lung cancer | |
KR20110049830A (en) | Reagent for detecting abnormal cell in cervix of uterus, and method for detecting abnormal cell in cervix of uterus by using same | |
Liu et al. | Single-particle analysis of tear fluid reveals abundant presence of tissue factor-exposing extracellular vesicles with strong coagulation activity | |
Wu et al. | Trabecular meshwork mitochondrial function and oxidative stress: Clues to racial disparities of glaucoma | |
CN108273062A (en) | Effect of the FOXM1 inhibitor in intrahepatic cholangiocellular carcinoma treatment | |
RU2437100C1 (en) | Diagnostic technique for abnormal chromatin packaging in male infertility | |
Paraboni et al. | Comparative study of oxidative stress and antioxidative markers in patients infected with Toxoplasma gondii | |
CN103995112A (en) | Test strip for screening specific animal fur and scurf allergens IgE (Immunoglobulin E) and preparation method thereof | |
Mittal et al. | Redox status of acute pancreatitis as measured by cyclic voltammetry: Initial rodent studies to assess disease severity | |
CN115469104A (en) | Application of HMGB1 in prognosis prediction of glioblastoma TMZ chemotherapy | |
CN109696547B (en) | Marker for judging colorectal cancer prognosis and application thereof | |
RU2473086C1 (en) | Method of assessing intracellular neutrophil metabolism in workers occupied in petrochemical and chemical production | |
Norden et al. | Bilharzia and bladder cancer. An investigation of urinary β-glucuronidase associated with S. haematobium infection | |
Yeckel | Decoding T Cell Responses to Herpes Simplex Virus Infection in Skin Using Highly Multiplexed Tissue Imaging | |
RU2196987C2 (en) | Method for detecting activity of acid phosphatase in blood smears | |
CN111308076A (en) | Application of ubiquitin ligase RNF38 as nasopharyngeal carcinoma marker | |
CN109870576B (en) | Application of quantitative detection of USP10 protein in primary liver cancer prognosis judgment kit | |
CN115873940A (en) | Biomarker for diagnosing and/or prognostically evaluating azoospermia and application thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160302 |