RU2487929C1 - Способ определения способности к персистенции staphylococcus aureus - Google Patents
Способ определения способности к персистенции staphylococcus aureus Download PDFInfo
- Publication number
- RU2487929C1 RU2487929C1 RU2012108760/10A RU2012108760A RU2487929C1 RU 2487929 C1 RU2487929 C1 RU 2487929C1 RU 2012108760/10 A RU2012108760/10 A RU 2012108760/10A RU 2012108760 A RU2012108760 A RU 2012108760A RU 2487929 C1 RU2487929 C1 RU 2487929C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ability
- persistence
- staphylococcus aureus
- leptin
- immunologically similar
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к урологии и может быть использовано, в частности, для определения роли микроорганизмов в развитии инфекционных заболеваний урогенитальной сферы. Изобретение раскрывает способ определения способности к персистенции Staphylococcus aureus, путем определения биологических свойств, в частности, способности синтезировать иммунологически сходные с лептином и/или растворимым рецептором лептина веществ в суточной жидкой культуре стафилококков. При наличии синтеза указанных веществ определяют способность стафилококка к персистенции. Использование способа по изобретению позволяет повысить чувствительность, точность определения и ускорить определение. 1 табл., 3 пр.
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно урологии, и может быть использовано, в частности, для определения роли микроорганизмов в развитии инфекционных заболеваний урогенитальной сферы.
Под персистенцией (от лат. persistere - оставаться, упорствовать) понимают длительное переживание возбудителя в организме хозяина. Способность персистировать обусловлена состоянием их индифферентности к воздействующим внешним факторам физико-химической или биологической природы, обеспечением стабильных антагонистических эффектов в биоценозе и сохранением жизнеспособности популяции за счет приобретения ею устойчивости к защитным механизмам хозяина. Только при соблюдении этих основных условий бактериальная клетка имеет шанс на выживание, на персистирование (Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). - Екатеринбург: УрО РАН, 1996, с.64-65). Переход бактерий из одной среды существования в другую (внешняя среда - клетка хозяина), вынужденный ход микроорганизмов, позволяющий, в конечном счете, обеспечить их существование как вида. Поэтому персистирование бактерий в организме следует рассматривать как стратегию выживания вида. Если учесть, что любая стратегия порождает разнообразие тактики, то смена экологической ниши бактериальной клеткой и ее переход в организм хозяина будет сопровождаться неизменным появлением у бактерий новых биологических характеристик, облегчающих адаптацию патогена к новым условиям среды обитания.
Наиболее близким к предлагаемому нами способу является способ определения антилизоцимной активности микроорганизмов, постановка которого занимает в среднем 48 ч. Обнаружение этого свойства у Staphylococcus aureus и установление выраженности этого признака у других видов свыше 6 мкг/мл позволяет определить микроорганизм - носитель данного свойства к категории резидентных микроорганизмов, то есть по определению, обладающих персистентным потенциалом (Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Немцева Н.В. Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии №2, 1984, с.27-28).
Данный способ имеет следующие недостатки:
Способ требует для количественного определении антилизоцимной активности использования тест-культуры Micrococcus lysodeictius и как следствие, дополнительных манипуляций и реактивов для ее подготовки.
Способ основан на методе отсроченного антагонизма и поэтому увеличивает время анализа на дополнительные 24 ч для предварительного выращивания исследуемой культуры.
Целью представленного изобретения является увеличение чувствительности, точности, сокращение времени, необходимого для установления способности к персистенции выделенного штамма.
Поставленная цель в изобретении достигается тем, что в качестве маркеров используют обнаружение в жидкой культуре микроорганизмов веществ, иммунологически сходным с лептином и растворимым рецептором лептина.
Таким образом, преимущество предлагаемого способа в том, что определение наличия способности у микроорганизмов к синтезу веществ, иммунологически сходных с лептином и растворимым рецептором лептина, повышает достоверность определения способности выделенного микроорганизма к персистенции. Определение указанных веществ проводится методом иммуноферментного анализа (ИФА), время которого составляет около 4 часов, что на 44 часа быстрее, чем прототип. Кроме того, ИФА делает предлагаемую методику более чувствительной, чем достигается более высокая точность и воспроизводимость результатов.
Предложенный способ был успешно апробирован на 80 образцах в практической работе кафедры молекулярной биологии, генетики и биохимии Астраханского государственного университета в течение 2011 года.
Ниже приводятся результаты апробации.
Пример №1
Определяли способность к синтезу веществ, иммунологически сходных с лептином и растворимым рецептором лептина у Staphylococcus aureus, выделенных из спермы пациента И-а с хроническим простатитом.
Культуру стафилококка засевали в 0,9% раствор хлорида натрия в концентрации 103 КОЕ/мл и инкубировали в течение 37°С в течение 24 ч.
Суточную культуру вносили в лунки наборов для проведения иммуноферментного анализа для определения лептина, а также для определения растворимого рецептора лептина. Далее проводили иммуноферментный анализ и оценку результатов стандартным способом в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к наборам.
В этом варианте результаты по определению к синтезу веществ, иммунологически сходных с лептином и растворимым рецептором лептина, отрицательные исходя из чего делается вывод об отсутствии персистентного потенциала у данного штамма Staphylococcus aureus (Таблица 1).
Пример №2
Определяли способность к синтезу веществ, иммунологически сходных с лептином и растворимым рецептором к лептину у Staphylococcus aureus, выделенных из носоглотки пациента Т-го с хроническим тонзиллитом.
Исследования проводили способом, описанным в примере №1.
В этом примере результаты по определению вещества, иммунологически сходного с лептином, составили 1,01 нг/мл, а сходного с растворимым рецептором лептина составили 1,9 нг/мл, исходя из чего делается вывод о наличии персистентного потенциала у данного штамма Staphylococcus aureus (Таблица 1).
Пример №3
Определяли способность к синтезу веществ, иммунологически сходных с лептином и растворимым рецептором лептина у Staphylococcus aureus, выделенных из спермы пациента П-ва с хроническим простатитом.
Исследования проводили способом, описанным в примере №1. В этом примере результаты по определению вещества, иммунологически сходного с лептином, составили 1,0 нг/мл, а с иммунологически сходным с растворимым рецептором лептина составили 1,877 нг/мл, исходя из чего делается вывод о наличии персистентного потенциала у данного штамма Staphylococcus aureus (Таблица 1).
Предлагаемым способом достигается положительный эффект:
Повышается эффективность определения способности к персистенции микроорганизмов за счет использования в качестве маркера обнаружение в жидкой культуре микроорганизмов вещества, иммунологически сходного с лептином и растворимым рецептором лептина, повышается чувствительность, точность проведения анализа, сокращается число стадий по сравнению с прототипом и, как следствие этого, сокращается время, необходимое для выдачи заключения лаборатории на 44 часа.
Проведение этого исследования расширит возможности установления этиологии инфекционного процесса различной локализации.
Предлагаемый способ может быть использован в фундаментальной и практической медицине для определения способности к персистенции микроорганизмов.
| Таблица 1 | |||
| Воспроизводимость результатов определения способности к перистенции Staphylococcus aureus. | |||
| Пример | Концентрация вещества, иммунологически сходного с лептином (нг/мл) | Концентрация вещества, иммунологически сходного с растворимым рецептором лептина (нг/мл) | Способность к перистенции |
| 1 | 0 | 0 | Не персистентный |
| 2 | 1,01 | 1,9 | Персистентный |
| 3 | 1,0 | 1,877 | Персистентный |
Claims (1)
- Способ определения способности к персистенции Staphylococcus aureus, включающий определение его биологических свойств, отличающийся тем, что в суточной жидкой культуре микроорганизмов определяют с помощью ИФА синтез иммунологически сходных с лептином и/или растворимым рецептором лептина веществ, по наличию которых определяют способность исследуемой культуры Staphylococcus aureus к персистенции.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012108760/10A RU2487929C1 (ru) | 2012-03-07 | 2012-03-07 | Способ определения способности к персистенции staphylococcus aureus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012108760/10A RU2487929C1 (ru) | 2012-03-07 | 2012-03-07 | Способ определения способности к персистенции staphylococcus aureus |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2487929C1 true RU2487929C1 (ru) | 2013-07-20 |
Family
ID=48791188
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012108760/10A RU2487929C1 (ru) | 2012-03-07 | 2012-03-07 | Способ определения способности к персистенции staphylococcus aureus |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2487929C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2088668C1 (ru) * | 1995-07-20 | 1997-08-27 | Оренбургский отдел персистенции микроорганизмов Института экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН | Питательная среда для выявления стафилококков с персистентными характеристиками |
| RU2156807C2 (ru) * | 1999-08-16 | 2000-09-27 | Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН | Способ определения антилактоферриновой активности микроорганизмов |
| WO2010014304A1 (en) * | 2008-07-29 | 2010-02-04 | University Of Chicago | Compositions and methods related to staphylococcal bacterium proteins |
-
2012
- 2012-03-07 RU RU2012108760/10A patent/RU2487929C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2088668C1 (ru) * | 1995-07-20 | 1997-08-27 | Оренбургский отдел персистенции микроорганизмов Института экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН | Питательная среда для выявления стафилококков с персистентными характеристиками |
| RU2156807C2 (ru) * | 1999-08-16 | 2000-09-27 | Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН | Способ определения антилактоферриновой активности микроорганизмов |
| WO2010014304A1 (en) * | 2008-07-29 | 2010-02-04 | University Of Chicago | Compositions and methods related to staphylococcal bacterium proteins |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Martins et al. | Presence of extracellular DNA in the Candida albicans biofilm matrix and its contribution to biofilms | |
| Huang et al. | Murine model of colonization with fungal pathogen Candida auris to explore skin tropism, host risk factors and therapeutic strategies | |
| Seixas et al. | Biofilm formation by Salmonella enterica serovar 1, 4,[5], 12: i:-Portuguese isolates: a phenotypic, genotypic, and socio-geographic analysis | |
| Wang et al. | Penicillenols from a deep-sea fungus Aspergillus restrictus inhibit Candida albicans biofilm formation and hyphal growth | |
| Lee et al. | Microbial respiration-based detection of enrofloxacin in milk using capillary-tube indicators | |
| Menassa et al. | Rapid detection of fungal keratitis with DNA-stabilizing FTA filter paper | |
| CN102154496B (zh) | 多种重要水源性人兽共患原虫同时检测试剂盒及制备方法 | |
| ES2428076T3 (es) | Procedimiento de identificación de bacterias del grupo Bacillus cereus | |
| Heintz-Buschart et al. | Identification of inhibitors of yeast-to-hyphae transition in Candida albicans by a reporter screening assay | |
| Pribylova et al. | Effect of short-and long-term antibiotic exposure on the viability of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis as measured by propidium monoazide F57 real time quantitative PCR and culture | |
| Blooi et al. | Combining ethidium monoazide treatment with real-time PCR selectively quantifies viable Batrachochytrium dendrobatidis cells | |
| RU2487929C1 (ru) | Способ определения способности к персистенции staphylococcus aureus | |
| Mulec et al. | Monitoring of microbial indicator groups in caves through the use of RIDA® COUNT kits | |
| Adao et al. | Recent advances in Blastocystis sp. research | |
| Akram et al. | Frequency of panton valentine leucocidin gene in Staphylococcus aureus from skin and soft tissue infections | |
| RU2332460C1 (ru) | Способ выявления эпидемически значимых холерных вибрионов vibrio eltor и vibrio cholerae o139 по их адгезивной способности | |
| Hobson | The effects of diffusates from the spores of Aspergillus fumigatus and A. terreus on human neutrophils, Naegleria gruberi and Acanthamoeba castellanii | |
| CN102191324A (zh) | 伊氏锥虫与路氏锥虫二重pcr检测试剂盒及制备方法 | |
| Bekő et al. | Biofilm formation and its impact on environmental survival and antibiotic resistance of Mycoplasma anserisalpingitidis strains | |
| Praptiwi et al. | Assessment of actinomycetes isolated from soils on Simeuleu Island as antibacterial and antioxidant | |
| Naik et al. | Long-term preservation of Tetraselmis indica (Chlorodendrophyceae, Chlorophyta) for flow cytometric analysis: Influence of fixative and storage temperature | |
| US20200355588A1 (en) | Method of pretreating blood sample | |
| Rivero et al. | Flow cytometry evaluation of in vitro susceptibility of bovine isolates of Tritrichomonas foetus to metronidazole | |
| Grovel et al. | A new and rapid bioassay for the detection of gliotoxin and related epipolythiodioxopiperazines produced by fungi | |
| RU2315113C2 (ru) | Способ диагностики чувствительности mycobacterium tuberculosis к противотуберкулезным препаратам |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180308 |