RU2481849C1 - Method of treating experimental animals with high-rate spontaneous tumour formation - Google Patents
Method of treating experimental animals with high-rate spontaneous tumour formation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2481849C1 RU2481849C1 RU2012115907/15A RU2012115907A RU2481849C1 RU 2481849 C1 RU2481849 C1 RU 2481849C1 RU 2012115907/15 A RU2012115907/15 A RU 2012115907/15A RU 2012115907 A RU2012115907 A RU 2012115907A RU 2481849 C1 RU2481849 C1 RU 2481849C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mice
- rate
- tumour formation
- experimental animals
- spontaneous
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к способам лечения экспериментальных животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования, и может быть использовано самостоятельно или в комбинации с современными методами противоопухолевой терапии.The invention relates to medicine, namely to methods for treating experimental animals with a high frequency of spontaneous tumor formation, and can be used alone or in combination with modern methods of antitumor therapy.
Известен способ лечения мышей линии СЗН, предрасположенных к развитию рака молочной железы, при котором добавление в питание животных синтетического антиоксиданта 2-меркаптоэтиламина увеличило среднюю продолжительность жизни на 26%. Возникновение опухолей наблюдалось в более отдаленные сроки, однако частота развития спонтанных опухолей не изменилась [Harman D. Free-radical theory of aging: increasing the functional life span // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1994. - Vol.717. - P.1-15].There is a method of treating mice of the line of SZN predisposed to the development of breast cancer, in which the addition of a synthetic antioxidant 2-mercaptoethylamine to the animals' food increased the average life expectancy by 26%. The occurrence of tumors was observed at a longer time, but the incidence of spontaneous tumors did not change [Harman D. Free-radical theory of aging: increasing the functional life span // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1994 .-- Vol. 717. - P.1-15].
Задачей изобретения является повышение эффективности лечения экспериментальных животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования.The objective of the invention is to increase the effectiveness of the treatment of experimental animals with a high frequency of spontaneous tumor formation.
Поставленная задача решается тем, что в заявляемом способе используется комплексный фитоадаптогенный препарат фитомикс-40 (фм-40) на основе компонентов 40 экстрактов растений, включая женьшень, родиолу розовую, элеутерококк, лимонник, аралию, заманиху, зверобой, календулу, подорожник, калган, бессмертник, сосновые и березовые почки, толокнянку, эвкалипт, можжевельник, солодку, ромашку, чагу, валериану, спорыш, пустырник, душицу, мяту перечную, одуванчик, пижму, толокнянку, тысячелистник, хвощ полевой, чабрец, череду, кориандр, шиповник, калину, рябину черноплодную, боярышник, клюкву, бруснику, чернику, смородину черную [патент РФ №2099410; Шейченко В.И., Бочарова О.А., Шейченко О.П., Бочаров Е.В., Барышников А.Ю., Быков В.А. Аналитические возможности метода ЯМР для определения компонентов препарата фитомикс-40. // Заводская лаборатория. - 2006. - Т.72. - №8. - с.15-23].The problem is solved in that the claimed method uses a complex phytoadaptogenic preparation phytomix-40 (fm-40) based on components of 40 plant extracts, including ginseng, Rhodiola rosea, Eleutherococcus, Schisandra, aralia, zamanika, St. John's wort, calendula, plantain, galanga, immortelle, pine and birch buds, bearberry, eucalyptus, juniper, licorice, chamomile, chaga, valerian, knotweed, motherwort, oregano, peppermint, dandelion, tansy, bearberry, yarrow, horsetail, thyme, thyme, marigold, thyme, calyx, thyme, , R Bina chokeberry, hawthorn, cranberry, lingonberry, blueberry, blackcurrant [RF patent №2099410; Sheychenko V.I., Bocharova O.A., Sheychenko O.P., Bocharov E.V., Baryshnikov A.Yu., Bykov V.A. The analytical capabilities of the NMR method to determine the components of the phytomix-40 preparation. // Factory laboratory. - 2006. - T.72. - No. 8. - p. 15-23].
Заявляемый способ осуществляли следующим образом.The inventive method was carried out as follows.
Исследование проводили на 230 мышах-самцах линии СВА с высокой частотой спонтанного образования гепатокарцином. В исследование были включены опытная группа, состоящая из 70 мышей, и 2 контрольные группы (I группа - 90 мышей и II группа - 70 мышей). Опытные мыши получали 10% раствор препарата фм-40 с питьевой водой. Лечение осуществляли препаратом фм-40, который применяли с шестимесячного возраста мышей (периода возникновения первых гепатокарцином) до их естественной гибели трехнедельными курсами с недельным интервалом. Мыши I контрольной группы получали в качестве питья воду, мыши II контрольной группы получали 3% раствор этанола в лечебном режиме.The study was performed on 230 CBA male mice with a high frequency of spontaneous formation of hepatocarcinomas. The study included an experimental group of 70 mice and 2 control groups (group I - 90 mice and group II - 70 mice). Experimental mice received a 10% solution of fm-40 with drinking water. The treatment was carried out with the fm-40 preparation, which was used from the six-month-old age of the mice (the period of the onset of the first hepatocarcinomas) until their natural death by three-week courses with a weekly interval. Mice of the control group I received water as a drink, mice of the control group II received a 3% solution of ethanol in the treatment regimen.
В каждой группе забивали 10-13 мышей в возрасте 22 месяцев. Остальные мыши находились под наблюдением до их естественной гибели. Определяли объем опухолей (мм3) в печени, который вычисляли по стандартной формуле. Гистологическое исследование печени проводили на парафиновых срезах. Наличие лимфоцитарной инфильтрации и деструкции опухолевых участков в печени животных опытных групп являлось благоприятным прогностическим фактором течения опухолевого процесса [Оllе D., Loewe R., Yu P., Mihm M. Focus on TILs: Prognostic significance of tumor infiltrating lymphocytes in human melanoma // Cancer Immun. - 2009. - Vol.9. - №3. - p.245-251; Wansom D., Light E., Thomas D., Worden F., Prince M., Urba S., Chepeha D., Kumar В., Cordell K., Eisbruch A., Taylor J., Moyer J., Bradford C., D'Silva N. Infiltrating lymphocytes and human papillomavirus-16-associated oropharyngeal cancer. // Laryngoscope. - 2012. - Vol.122. - №1. - р.121-127].In each group, 10–13 mice aged 22 months were sacrificed. The remaining mice were monitored until their natural death. The volume of tumors (mm 3 ) in the liver was determined, which was calculated by the standard formula. Histological examination of the liver was performed on paraffin sections. The presence of lymphocytic infiltration and destruction of tumor sites in the liver of animals of the experimental groups was a favorable prognostic factor for the course of the tumor process [Olle D., Loewe R., Yu P., Mihm M. Focus on TILs: Prognostic significance of tumor infiltrating lymphocytes in human melanoma // Cancer Immun. - 2009. - Vol. 9. - Number 3. p.245-251; Wansom D., Light E., Thomas D., Worden F., Prince M., Urba S., Chepeha D., Kumar B., Cordell K., Eisbruch A., Taylor J., Moyer J., Bradford C ., D'Silva N. Infiltrating lymphocytes and human papillomavirus-16-associated oropharyngeal cancer. // Laryngoscope. - 2012 .-- Vol. 122. - No. 1. - p. 121-127].
Для оценки качества жизни определяли вес мышей, наличие алопеции, двигательную активность животных оценивали в тесте «открытого поля» в автоматическом режиме. Принимая во внимание, что цитокины ИЛ-6 и ИЛ-10 участвуют в патогенезе кахексии животных, повышая уровень С-реактивного белка и усиливая расщепление мышечных белков, а также ИЛ-6 оказывает негативное влияние на функциональную активность волосяных фолликулов, определяли уровни ИЛ-6 и ИЛ-10 в сыворотке крови [Krzystek-Korpacka M., Matusiewicz M., Diakowska D., Grabowski K. et al. Acute-phase response proteins are related to cachexia and accelerated angiogenesis in gastroesophageal cancers. // Clin. Chem. Lab. Med. - 2008. - Vol.46. - №3. - p.359-364; Deans D., Tan В., Ross J. et al. Cancer cachexia is associated with the IL10-1082 gene promoter polimorphism in patients with gastroesophageal malignancy. // Am. J. Clin. Nutr. - 2009. - Vol.89. - №4. - p.1164-1172; Biswas S., Pinson D., Bronshteyn I., LeVine S. IL-6 deficiency allows for enhanced therapeutic value after bone marrow transplantation across a minor histocompatibility barrier in the twitcher (globoid cell leukodystrophy) mouse. // J. Neurosci. Res. - 2001. - Vol.65. - №4. - p.298-307].To assess the quality of life, we determined the weight of mice, the presence of alopecia, the motor activity of animals was evaluated in the test of the "open field" in automatic mode. Considering that the cytokines IL-6 and IL-10 are involved in the pathogenesis of animal cachexia, increasing the level of C-reactive protein and enhancing the breakdown of muscle proteins, as well as IL-6 has a negative effect on the functional activity of hair follicles, IL-6 levels were determined and IL-10 in serum [Krzystek-Korpacka M., Matusiewicz M., Diakowska D., Grabowski K. et al. Acute-phase response proteins are related to cachexia and accelerated angiogenesis in gastroesophageal cancers. // Clin. Chem. Lab. Med. - 2008 .-- Vol. 46. - Number 3. p.359-364; Deans D., Tan B., Ross J. et al. Cancer cachexia is associated with the IL10-1082 gene promoter polimorphism in patients with gastroesophageal malignancy. // Am. J. Clin. Nutr. - 2009 .-- Vol.89. - No. 4. p.1164-1172; Biswas S., Pinson D., Bronshteyn I., LeVine S. IL-6 deficiency allows for enhanced therapeutic value after bone marrow transplantation across a minor histocompatibility barrier in the twitcher (globoid cell leukodystrophy) mouse. // J. Neurosci. Res. - 2001 .-- Vol.65. - No. 4. - p. 298-307].
Уровень экспрессии лейкоцитарных интегринов LFA-1 (CD11a) и Mac-1 (CD11b) на лимфоцитах периферической крови определяли с использованием метода проточной цитофлуометрии. Содержание цитокинов ИЛ-6 и ИЛ-10 в сыворотке крови определяли с использованием иммуноферментного анализа. Среднюю продолжительность жизни (СПЖ) и медиану выживаемости определяли по методу Каплан-Мейера. Статистический анализ результатов проводили с использованием однофакторного дисперсионного анализа ONE-WAY ANOVA программы "STATISTICA-6,0», достоверными считали различия при Р<0,05.The expression level of leukocyte integrins LFA-1 (CD11a) and Mac-1 (CD11b) on peripheral blood lymphocytes was determined using flow cytometry. The content of IL-6 and IL-10 cytokines in blood serum was determined using enzyme-linked immunosorbent assay. Average life expectancy (LIF) and median survival were determined by the Kaplan-Meier method. Statistical analysis of the results was carried out using ONE-WAY ANOVA univariate analysis of variance of the STATISTICA-6.0 program; differences at P <0.05 were considered significant.
Результаты определения изучаемых параметров в контрольных группах не имели различий, поэтому мыши двух контрольных групп были объединены в одну контрольную группу (n=160).The results of determining the studied parameters in the control groups did not differ, therefore, mice of two control groups were combined into one control group (n = 160).
Мыши опытной группы имели полноценный шерстный покров в отличие от мышей контрольной группы, у которых в 16,6% случаев наблюдалась алопеция. Эти данные коррелировали со снижением уровня сывороточных цитокинов ИЛ-6 и ИЛ-10 в опытной группе по сравнению с контрольной группой (114,8±12,3 пг/мл и 46,8±5,3 пг/мл) и (139,1±6,6 пг/мл и 60,9±3,9 г/мл) соответственно, Р<0,05. Экспрессия лейкоцитарных интегринов LFA-1 и Мас-1 в опытной группе была выше значений в контрольной группе и составила (40,7±1,9% и 11,5±1,1%) и (35,4±1,6% и 7,8±1,0%) соответственно, р≤0,05. Эти данные свидетельствуют об усилении иммунореактивности животных под воздействием препарата фм-40 при его применении в профилактическом режиме. Двигательная активность мышей опытной группы в возрасте 31 месяца соответствовала двигательной активности мышей контрольной группы в возрасте 24 месяцев. СПЖ мышей контрольной группы составила 22 месяца.The mice of the experimental group had a full coat, in contrast to the mice of the control group, in which alopecia was observed in 16.6% of cases. These data correlated with a decrease in the level of serum cytokines IL-6 and IL-10 in the experimental group compared with the control group (114.8 ± 12.3 pg / ml and 46.8 ± 5.3 pg / ml) and (139, 1 ± 6.6 pg / ml and 60.9 ± 3.9 g / ml), respectively, P <0.05. The expression of leukocyte integrins LFA-1 and Mac-1 in the experimental group was higher than the values in the control group and amounted to (40.7 ± 1.9% and 11.5 ± 1.1%) and (35.4 ± 1.6% and 7.8 ± 1.0%), respectively, p≤0.05. These data indicate an increase in the immunoreactivity of animals under the influence of the drug fm-40 when used prophylactically. The motor activity of mice of the experimental group at the age of 31 months corresponded to the motor activity of mice of the control group at the age of 24 months. The LSS of mice in the control group was 22 months.
У мышей опытной группы, получавших препарат фм-40, выявлено снижение частоты возникновения спонтанных опухолей на 30% по сравнению с мышами контрольной группы (Р≤0,001). Количество опухолей на мышь у мышей опытной группы сравнимо с контрольной группой (1,6±0,2 и 2,7±0,3 соответственно, Р=0,06). Средний объем опухолевой массы на мышь в опытной группе был ниже на 82,3% по сравнению с контрольной группой (185,1±67,4 мм3 и 1043,1±230,0 мм3 соответственно, Р<0,05).In mice of the experimental group treated with the drug fm-40, a decrease in the incidence of spontaneous tumors by 30% was detected compared with mice in the control group (P≤0.001). The number of tumors per mouse in mice of the experimental group is comparable with the control group (1.6 ± 0.2 and 2.7 ± 0.3, respectively, P = 0.06). The average volume of tumor mass per mouse in the experimental group was 82.3% lower compared with the control group (185.1 ± 67.4 mm 3 and 1043.1 ± 230.0 mm 3, respectively, P <0.05).
Вес мышей, получавших препарат фм-40, был выше, чем в контрольной группе, и составил 34,6±0,5 г и 24,4±0,2 г соответственно, Р<0,01. Мыши опытной группы имели полноценный шерстный покров в отличие от мышей контрольной группы, у которых в 16,6% случаев наблюдалась алопеция. Уровни сывороточных цитокинов ИЛ-6 и ИЛ-10 у мышей опытной группы были ниже значений у мышей в контрольной группе и составили (111,4±10,5 пг/мл и 45,1±5,6 пг/мл) и (139,1±6,6 пг/мл и 60,9±3,9 пг/мл) соответственно, Р<0,05. Экспрессия лейкоцитарных интегринов LFA-1 и Mac-1 у мышей опытной группы, получавших препарат фм-40, была выше этих значений в контрольной группе и составила (42,3±2,9% и 12,8±1,7%) и (35,4±1,6% и 7,8±1,0%) соответственно, Р<0,05.The weight of mice treated with fm-40 was higher than in the control group and amounted to 34.6 ± 0.5 g and 24.4 ± 0.2 g, respectively, P <0.01. The mice of the experimental group had a full coat, in contrast to the mice of the control group, in which alopecia was observed in 16.6% of cases. The levels of serum cytokines IL-6 and IL-10 in mice of the experimental group were lower than in mice in the control group and amounted to (111.4 ± 10.5 pg / ml and 45.1 ± 5.6 pg / ml) and (139 , 1 ± 6.6 pg / ml and 60.9 ± 3.9 pg / ml), respectively, P <0.05. The expression of leukocyte integrins LFA-1 and Mac-1 in mice of the experimental group treated with fm-40 was higher than these values in the control group and amounted to (42.3 ± 2.9% and 12.8 ± 1.7%) and (35.4 ± 1.6% and 7.8 ± 1.0%), respectively, P <0.05.
СПЖ мышей опытной группы, получавших фм-40, увеличилась по сравнению с животными контрольной группы на 28,2% (28,2 и 22 месяца соответственно, Р=0,001).The LSS of mice of the experimental group receiving fm-40 increased by 28.2% compared with animals of the control group (28.2 and 22 months, respectively, P = 0.001).
Медиана выживаемости мышей опытной группы увеличилась на 33,6% по сравнению с контрольной группой и составила 28,2 и 21,1 месяцев соответственно, Р≤0,001.The median survival of mice of the experimental group increased by 33.6% compared with the control group and amounted to 28.2 and 21.1 months, respectively, P≤0.001.
Изобретение иллюстрируется фигурами 1-2.The invention is illustrated in figures 1-2.
На фиг.1 представлен участок трабекулярно-ацинарной гепатокарциномы низкой степени дифференцировки у мыши контрольной группы (гистология печени, окраска гематоксилином и эозином, увеличение ×400, стрелки).Figure 1 presents a plot of trabecular acinar hepatocarcinoma of a low degree of differentiation in a mouse of the control group (histology of the liver, staining with hematoxylin and eosin, magnification × 400, arrows).
На фиг.2 представлен участок лимфоцитарной инфильтрации гепатокарциномы у мыши опытной группы, получавшей препарат фм-40 (окраска гематоксилином и эозином, увеличение ×400, стрелки).Figure 2 presents the plot of lymphocytic infiltration of hepatocarcinoma in the mouse of the experimental group receiving the preparation fm-40 (stained with hematoxylin and eosin, magnification × 400, arrows).
Технический результат заявляемого способа заключается в увеличении средней продолжительности жизни, медианы выживаемости животных, в снижении частоты возникновения спонтанных опухолей и улучшении качества их жизни.The technical result of the proposed method is to increase the average life expectancy, median survival of animals, to reduce the incidence of spontaneous tumors and improve their quality of life.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012115907/15A RU2481849C1 (en) | 2012-04-20 | 2012-04-20 | Method of treating experimental animals with high-rate spontaneous tumour formation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012115907/15A RU2481849C1 (en) | 2012-04-20 | 2012-04-20 | Method of treating experimental animals with high-rate spontaneous tumour formation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2481849C1 true RU2481849C1 (en) | 2013-05-20 |
Family
ID=48789737
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012115907/15A RU2481849C1 (en) | 2012-04-20 | 2012-04-20 | Method of treating experimental animals with high-rate spontaneous tumour formation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2481849C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2082423C1 (en) * | 1994-04-12 | 1997-06-27 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Фитолон" | Agent for cancer prophylaxis |
| RU2099410C1 (en) * | 1996-07-10 | 1997-12-20 | Бочарова Ольга Алексеевна | Balsam composition (fitomiks-40) |
| US6649193B1 (en) * | 1999-06-11 | 2003-11-18 | Henceforth Hibernia Inc. | Prophylactic therapeutic and industrial antioxidant compositions enhanced with stabilized atomic hydrogen/free electrons and methods to prepare and use such compositions |
-
2012
- 2012-04-20 RU RU2012115907/15A patent/RU2481849C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2082423C1 (en) * | 1994-04-12 | 1997-06-27 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Фитолон" | Agent for cancer prophylaxis |
| RU2099410C1 (en) * | 1996-07-10 | 1997-12-20 | Бочарова Ольга Алексеевна | Balsam composition (fitomiks-40) |
| US6649193B1 (en) * | 1999-06-11 | 2003-11-18 | Henceforth Hibernia Inc. | Prophylactic therapeutic and industrial antioxidant compositions enhanced with stabilized atomic hydrogen/free electrons and methods to prepare and use such compositions |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Huang et al. | Mobilization of mesenchymal stem cells by stromal cell-derived factor-1 released from chitosan/tripolyphosphate/fucoidan nanoparticles | |
| Huang et al. | A dynamic covalent polymeric antimicrobial for conquering drug‐resistant bacterial infection | |
| Oršolić et al. | Synergystic antitumor effect of polyphenolic components of water soluble derivative of propolis against Ehrlich ascites tumour | |
| JP6353073B2 (en) | Composition for cell recovery and method for producing and using the same | |
| Baarine et al. | Pro-apoptotic versus anti-apoptotic properties of dietary resveratrol on tumoral and normal cardiac cells | |
| Lu et al. | 3, 3′-diindolylmethane mitigates total body irradiation-induced hematopoietic injury in mice | |
| JP6900358B2 (en) | Cell-free composition for cell restoration and method of preparation and use of the same composition | |
| EP3164157A2 (en) | Hydrogels for treating and ameliorating cancers and potentiating the immune system and methods of making and using them | |
| JP2015523553A5 (en) | ||
| Li et al. | A tumor acidity activatable and Ca 2+-assisted immuno-nanoagent enhances breast cancer therapy and suppresses cancer recurrence | |
| KR102195494B1 (en) | Treatment for pancreatic cancer | |
| Chen et al. | NIR-PTT/ROS-scavenging/oxygen-enriched synergetic therapy for rheumatoid arthritis by a pH-responsive hybrid CeO2-ZIF-8 coated with polydopamine | |
| Zhou et al. | Insulin-like growth factor 1 mitigates hematopoietic toxicity after lethal total body irradiation | |
| Sarsour et al. | Hydroxytyrosol inhibits chemokine CC motif ligand 5 mediated aged quiescent fibroblast-induced stimulation of breast cancer cell proliferation | |
| Wu et al. | Nanodroplet-enhanced sonodynamic therapy potentiates immune checkpoint blockade for systemic suppression of triple-negative breast cancer | |
| RU2481849C1 (en) | Method of treating experimental animals with high-rate spontaneous tumour formation | |
| WO2018132899A1 (en) | Compound, composition, and methods for treating, preventing, reducing, or delaying onset of osteosarcoma lung metastasis in a subject | |
| RU2507599C1 (en) | Method for prevention of tumour development in experimental animals with high-frequency spontaneous tumour formation | |
| KR20210135989A (en) | Salivary gland regeneration | |
| Li et al. | ROS-responsive EPO nanoparticles ameliorate ionizing radiation-induced hematopoietic injury | |
| JP6489517B2 (en) | Differentiation-promoting agents and brain tumor therapeutic agents for cancer stem cells | |
| JP2016049103A (en) | Transmucosal absorption evaluation device, and evaluation method | |
| US20200199681A1 (en) | Mda-7 cancer therapies and methods of detecting biomolecules | |
| US20220193103A1 (en) | Nano-puerarin regulates tumor microenvironment and facilitates chemo- and immunotherapy in murine triple negative breast cancer model | |
| US20200078296A1 (en) | Methods and compositions targeting lung microbiota and its responding immune pathways for lung cancer treatment |