RU2479582C1 - Labdane-type 6-hydroxynaphthoquinones, having cytotoxic activity on human tumour cells - Google Patents

Labdane-type 6-hydroxynaphthoquinones, having cytotoxic activity on human tumour cells Download PDF

Info

Publication number
RU2479582C1
RU2479582C1 RU2012115828/04A RU2012115828A RU2479582C1 RU 2479582 C1 RU2479582 C1 RU 2479582C1 RU 2012115828/04 A RU2012115828/04 A RU 2012115828/04A RU 2012115828 A RU2012115828 A RU 2012115828A RU 2479582 C1 RU2479582 C1 RU 2479582C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
mmol
cells
compounds
compound
tumour cells
Prior art date
Application number
RU2012115828/04A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Эльвира Эдуардовна Шульц
Максим Евгеньевич Миронов
Михаил Андреевич Покровский
Ксения Михайловна Шерман
Андрей Георгиевич Покровский
Генрих Александрович Толстиков
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН)
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Новосибирский национальный исследовательский государственный университет" (НГУ)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН), Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Новосибирский национальный исследовательский государственный университет" (НГУ) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН)
Priority to RU2012115828/04A priority Critical patent/RU2479582C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2479582C1 publication Critical patent/RU2479582C1/en

Links

Abstract

FIELD: chemistry.
SUBSTANCE: invention relates to novel labdane-type 6-hydroxynaphthoquinones of formula:
Figure 00000014
where R1=R2=H (Ia); R1=Me, R2=H (1b); R1=H, R2=CO2Et (Ic), which are capable of inhibiting growth of human tumour cells. The most active substance - (lS,4aS,8aR)-methyl 5-{2-[2-(6-hydroxy-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-8-yl)-furan-3-yl]ethyl}-1,4a,6-trimethyl-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (Ia) inhibits growth of tumour cells CEM-13, U-937 and MT-4 in concentrations of 3.4, 5.8 and 4.3 mcM, respectively. The compounds are obtained from lambertian acid contained in the sap and needles of Siberian cedar.
EFFECT: improved method.
1 cl, 4 ex, 1 tbl

Description

Изобретение относится к органической химии, конкретно - к новым оптически активным нафтохинонам, содержащим фрагмент лабданового дитерпеноида, формулы (Iа-в):The invention relates to organic chemistry, in particular, to new optically active naphthoquinones containing a labdane diterpenoid fragment of the formula (Ia-b):

Figure 00000001
Figure 00000001

где R1=R2=Н(Ia); R1=Me, R2=H(Iб); R1=H, R2=CO2Et (Iв),where R 1 = R 2 = H (Ia); R 1 = Me, R 2 = H (Ib); R 1 = H, R 2 = CO 2 Et (Ic),

обладающим значительной цитотоксичностью по отношению к опухолевым клеткам человека.with significant cytotoxicity to human tumor cells.

Указанные свойства позволяют предполагать возможность использования соединений в медицине в качестве фармацевтического препарата.These properties suggest the possibility of using compounds in medicine as a pharmaceutical preparation.

В последние годы при создании противоопухолевых агентов внимание уделяется поиску ингибиторов тканевой инвазии опухолевых клеток и индукторам апоптоза опухолевых клеток [Fenteany, G.; Zhu, S. Cur. Top. Med. Chem. 2003, v.3 (4), p.593-616]. Соединения обоих типов найдены в ряду сестертерпеноидов и лабдановых дитерпеноидов. В качестве перспективных ингибиторов инвазии опухолевых клеток рассматриваются хинон- и гидрохинонсодержащие ди- и сестертерпеноиды морских губок - стронгулофорин-26 (II) [Warabi K., Patrik B.O., Austin P., Roskelley C.D., Roberge M., Andersen R.J., J. Nat. Prod. 2007, v.70 (5), p.736-740], авинозол (III) [Diaz-Marrero A.R., Austin P., Van Soest R., Matainaho T., Roskelley C.D., Roberge M., Andersen R.J., Org. Lett. 2006, v.8 (17), p.3749-3752]. Соединения проявляют значительную цитотоксичность по отношению к опухолевым клеткам, а также обладают антиинвазивной активностью в тестах связывания: IC50 (доза, ингибирующая инвазию опухолевых клеток на 50%) соединений (II, III) составляет 1-50 мкг/мл (клетки рака груди MDA-MB-231) и 20-50 мкг/мл (клетки карциномы LS 174Т) [Diaz-Marrero A.R., Austin P., Van Soest R., Matainaho Т., Roskelley C.D., Roberge M., Andersen R.J., Org. Lett. 2006, v.8 (17), p.3749-3752]. Соединения (II, III) являются малодоступными метаболитами.In recent years, the development of antitumor agents has focused on the search for inhibitors of tissue invasion of tumor cells and inducers of apoptosis of tumor cells [Fenteany, G .; Zhu, S. Cur. Top Med. Chem. 2003, v.3 (4), p. 593-616]. Compounds of both types are found in a series of sesterterpenoids and labdanic diterpenoids. Quinone- and hydroquinone-containing di- and sesterterpenoids of marine sponges, Stronguloforin-26 (II), are considered promising inhibitors of tumor cell invasion [Warabi K., Patrik BO, Austin P., Roskelley CD, Roberge M., Andersen RJ, J. Nat . Prod. 2007, v. 70 (5), p. 736-740], aerosol (III) [Diaz-Marrero AR, Austin P., Van Soest R., Matainaho T., Roskelley CD, Roberge M., Andersen RJ, Org . Lett. 2006, v. 8 (17), p. 3749-3752]. Compounds exhibit significant cytotoxicity against tumor cells and also have anti-invasive activity in binding tests: IC 50 (dose that inhibits tumor cell invasion by 50%) of compounds (II, III) is 1-50 μg / ml (MDA breast cancer cells -MB-231) and 20-50 μg / ml (LS 174T carcinoma cells) [Diaz-Marrero AR, Austin P., Van Soest R., Matainaho T., Roskelley CD, Roberge M., Andersen RJ, Org. Lett. 2006, v. 8 (17), p. 3749-3752]. Compounds (II, III) are inaccessible metabolites.

Figure 00000002
Figure 00000002

Активным противоопухолевым агентом является природный лабданоид пинусолид (IV). Это соединение является аналогом по свойствам заявляемых соединений. Пинусолид (IV) содержится в нейтральной части живицы кедра сибирского Pinus sibirica R.Mayr.The active antitumor agent is the natural labdanoid pinusolid (IV). This compound is analogous to the properties of the claimed compounds. Pinusolid (IV) is contained in the neutral part of the resin of the Siberian cedar Pinus sibirica R. Mayr.

Антилейкемический и хемопривентивный потенциал пинусолида был изучен in vitro на клеточной линии лимфомы Беркитта BJAB. Было показано, что пинусолид не только снижает пролиферативную активность опухолевых клеток в относительно низких концентрациях, но и специфично индуцирует апоптоз у 70% клеток в концентрации 100 мкМ. Апоптоз клеток BJAB опосредован потерей потенциала митохондриальной мембраны. В сущности, пинусолид в концентрации 100 мкМ приводит к потере потенциала митохондриальной мембраны, указывая на то, что это соединение использует механизм митохондриального апоптоза в соответствующем сигнальном пути гибели клетки. Значительная индукция апоптоза пинусолидом (100 мкМ) наблюдалась также в эксперименте ex vivo. Фрагментация ДНК происходила как в первичных лимфобластных клетках, так и в лейкемических. Пинусолид ex vivo преодолевает антрациклиновую устойчивость первичных лимфобластов, полученных от пациентов с высоким риском ОЛЛ (острая лимфобластная лейкемия) и слабым ответом на химиотерапию [Е.Е.Shults, J.Velder, H.-G.Schmalz, S.V.Chernov, T.V.Rubalova, Y.V.Gatilov, G.Henze, G.A.Tolstikov, A.Prokop. // Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, v.16 (16), p.4228-4232; Koo K.A., Lee M.K., Kim S.H., Jeong E.J., Kim S.Y., Oh Т.Н., Kim Y.C. Pinusolide and 15-methoxypinusolidic acid attenuate the neurotoxic effect of staurosporine in primary cultures of rat cortical cells. // Br. J. Pharmacol., 2007, v.150 (1), p.65-71].The antileukemic and chemopreventive potential of pinusolid was studied in vitro on the Burjitt BJAB lymphoma cell line. It was shown that pinusolid not only reduces the proliferative activity of tumor cells at relatively low concentrations, but also specifically induces apoptosis in 70% of cells at a concentration of 100 μM. Apoptosis of BJAB cells is mediated by loss of mitochondrial membrane potential. In fact, pinusolid at a concentration of 100 μM leads to a loss of mitochondrial membrane potential, indicating that this compound uses the mechanism of mitochondrial apoptosis in the corresponding signaling pathway for cell death. Significant induction of apoptosis with pinusolid (100 μM) was also observed in the ex vivo experiment. DNA fragmentation occurred both in primary lymphoblastic cells and in leukemic cells. Pinusolid ex vivo overcomes the anthracycline resistance of primary lymphoblasts obtained from patients with a high risk of ALL (acute lymphoblastic leukemia) and a weak response to chemotherapy [E.E.Shults, J.Velder, H.-G. Schmalz, SV Chernov, TVRubalova, YVGatilov, G. Henze, GATolstikov, A.Prokop. // Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, v. 16 (16), p. 4228-4232; Koo K.A., Lee M.K., Kim S.H., Jeong E.J., Kim S.Y., Oh T.N., Kim Y.C. Pinusolide and 15-methoxypinusolidic acid attenuate the neurotoxic effect of staurosporine in primary cultures of rat cortical cells. // Br. J. Pharmacol., 2007, v. 150 (1), p. 65-71].

Авторы работы [Han B.H., Yang H.O., Kang Y.-H., Suh D.-Y., Go H.J., Song W.-J., Kim Y.Ch., Park M.K. In Vitro Platelet-Activating Factor Receptor Binding Inhibitory Activity of Pinusolide Derivatives: A Structure-Activity Study. // J. Med. Chem. 1998, v.41 (14), p.2626-2630] охарактеризовали пинусолид (IV) в качестве нового антагониста фактора агрегации тромбоцитов. В опытах с использованием тромбоцитов кролика было получено значение IC50 для агрегации тромбоцитов, вызванной ФАТ (фактор агрегации тромбоцитов) от 19 до 5 мкМ при снижении концентрации ФАТ от 500 до 5 нМ. ЕД50 in vivo составило 1.1 мг/кг для внутривенного введения и 69.0 мг/кг per os.Authors [Han BH, Yang HO, Kang Y.-H., Suh D.-Y., Go HJ, Song W.-J., Kim Y.Ch., Park MK In Vitro Platelet-Activating Factor Receptor Binding Inhibitory Activity of Pinusolide Derivatives: A Structure-Activity Study. // J. Med. Chem. 1998, v.41 (14), p.2626-2630] characterized pinusolid (IV) as a new antagonist of platelet aggregation factor. In experiments using rabbit platelets, an IC 50 value was obtained for platelet aggregation induced by FAT (platelet aggregation factor) from 19 to 5 μM with a decrease in the concentration of FAT from 500 to 5 nM. The in vivo ED 50 was 1.1 mg / kg for intravenous administration and 69.0 mg / kg per os.

Пинусолид (2 мг/кг) также проявляет местное противовоспалительное действие в эксперименте на ухе мыши; активность соединения сравнима с гидрокортизоном [Koo K.A., Sung S.H., Kim Y.C. A New Neuroprotective Pinusolide Derivative from the Leaves of Biota orientalis II Chem. Pharm. Bull, 2002, v.50(6), p.834-836].Pinusolid (2 mg / kg) also exerts a local anti-inflammatory effect in the experiment on the mouse ear; the activity of the compound is comparable to hydrocortisone [Koo K.A., Sung S.H., Kim Y.C. A New Neuroprotective Pinusolide Derivative from the Leaves of Biota orientalis II Chem. Pharm. Bull, 2002, v. 50 (6), p. 834-836].

Основным недостаткам фармакологического действия пинусолида (IV) является его использование в значительных дозах (IC50 100 мкМ), однако в связи с селективностью фармакологического (антипролиферативного и апоптозиндуцирующего) эффекта, связанного с активацией каспазы-3 указанного эпоксилабданоида, получение его структурных аналогов представляет значительный интерес для создания противоопухолевых агентов с направленным действием на цикл деления клетки.The main disadvantages of the pharmacological action of pinusolid (IV) is its use in significant doses (IC 50 100 μM), however, due to the selectivity of the pharmacological (antiproliferative and apoptosis-inducing) effect associated with the activation of caspase-3 of this epoxylabdanoid, it is of considerable interest to obtain its structural analogues to create antitumor agents with a targeted effect on the cell division cycle.

Аналогом по строению заявляемых соединений является азлактон 16-формилметилламбертианата (V), обладающий антиоксидантной, гепатопротекторной и гемостимулирующей активностью [Патент RU 2353620. Харитонов Ю.В., Шульц Э.Э., Сорокина И.В., Толстикова Т.Г., Баев Д.С., Жукова Н.А., Толстиков Г.А. (Z)-метил-16-(5-оксо-2-фенилоксазол-4-илиденметил)-15,16-эпокси-8(17),13(16),14-лабдатриен-18-оат, обладающий антиоксидантной, гепатопротекторной и гемостимулирующей активностью. Опубл. 27.04.2009, бюл. №12; С.А. 2009, 150, P495008k].An analog in the structure of the claimed compounds is azlactone 16-formylmethyl amberthianate (V), which has antioxidant, hepatoprotective and hemostimulating activity [Patent RU 2353620. Yu. V. Kharitonov, E.E. Shults, IV Sorokina, TG Tolstikova, Baev D.S., Zhukova N.A., Tolstikov G.A. (Z) -methyl-16- (5-oxo-2-phenyloxazol-4-ylidenomethyl) -15,16-epoxy-8 (17), 13 (16), 14-labdatriene-18-oat, which has antioxidant, hepatoprotective and hemostimulating activity. Publ. 04/27/2009, bull. No. 12; S.A. 2009, 150, P495008k].

Figure 00000003
Figure 00000003

Аналогом по свойствам заявляемых соединений [помимо природных меротерпеноидов (II, III) и лабданового дитерпеноида (IV)] является растительный тритерпеноид бетулиновая кислота (VI).An analogue to the properties of the claimed compounds [in addition to the natural meroterpenoids (II, III) and labdanic diterpenoids (IV)] is the plant triterpenoid betulinic acid (VI).

Figure 00000004
Figure 00000004

Описаны некоторые биологические эффекты агента (VI), включающие антивирусную, антипаразитарную, антибактериальную активности и в частности задержку роста опухолевых клеток [Eiznhamer D.A, Xu Z.Q. Betulinic acid: a promising anticancer candidate // I. Drugs, 2004, v.7 (4), p.359-373]. Противоопухолевая активность была показана на клеточной линии меланомы [Liu W.K., Но J.С., Cheung F.W., Liu В.P., Ye W.С, Che С.N. Apoptotic activity of betulinic acid derivatives on murine melanoma B16 cell line // Eur. J. Pharmacol. 2004, v.498(1-3), p.71-78], при головной и шейной плоскоклеточной карциномы [Eder-Czembirek С, Czembirek С, Erovic ВМ et al. Combination of betulinic acid with cisplatin-different cytotoxic effects in two head and neck cancer cell lines. // Oncol. Rep. 2005, v.14 (5), p.667-671], лейкемии [Ehrhardt H., Fulda S., Fuhrer M., Debatin K.M., Jeremias I. Betulinic acid-induced apoptosis in leukemia cells // Leukemia. 2004, v.18(8), p.1406-1412] и других опухолевых клеточных линий [Yun Y., Han S., Park E., Yim D., Lee C.K. Immunomodulatory activity of betulinic acid by producing proinflammatory cytokines and activation of macrophages // Arch. Pharm. Res. 2003, v.26(12), p.1087-1095].Some biological effects of agent (VI) are described, including antiviral, antiparasitic, antibacterial activity and, in particular, growth retardation of tumor cells [Eiznhamer D.A, Xu Z.Q. Betulinic acid: a promising anticancer candidate // I. Drugs, 2004, v. 7 (4), p. 359-373]. Antitumor activity was shown on the melanoma cell line [Liu W.K., But J.C., Cheung F.W., Liu B.P., Ye W.C., Che C.N. Apoptotic activity of betulinic acid derivatives on murine melanoma B16 cell line // Eur. J. Pharmacol. 2004, v.498 (1-3), p.71-78], with head and cervical squamous cell carcinoma [Eder-Czembirek C, Czembirek C, Erovic BM et al. Combination of betulinic acid with cisplatin-different cytotoxic effects in two head and neck cancer cell lines. // Oncol. Rep. 2005, v.14 (5), p.667-671], leukemia [Ehrhardt H., Fulda S., Fuhrer M., Debatin K.M., Jeremias I. Betulinic acid-induced apoptosis in leukemia cells // Leukemia. 2004, v. 18 (8), p. 1406-1412] and other tumor cell lines [Yun Y., Han S., Park E., Yim D., Lee C.K. Immunomodulatory activity of betulinic acid by producing proinflammatory cytokines and activation of macrophages // Arch. Pharm. Res. 2003, v.26 (12), p.1087-1095].

В 2000 году бетулиновая кислота (VI) была включена в программу RAID (Rapid Access to Intervention Development) Национального института рака, как потенциальный противоопухолевый агент (http://dtp.nci.nih.gov/docs/small_mol/status_small_mol.html). В настоящее время препарат на основе бетулиновой кислоты проходит клинические исследования в США в качестве средства для лечения злокачественной меланомы (http://clinicaltrials.gov/show/NCT00346502).In 2000, betulinic acid (VI) was included in the National Institute of Cancer's Rapid Access to Intervention Development (RAID) program as a potential antitumor agent (http://dtp.nci.nih.gov/docs/small_mol/status_small_mol.html). A betulinic acid-based drug is currently undergoing clinical trials in the United States as a treatment for malignant melanoma (http://clinicaltrials.gov/show/NCT00346502).

Задачей изобретения, является создание новых средств, обладающих способностью подавлять рост опухолевых клеток человека, на основе доступного растительного метаболита ламбертиановой кислоты (VII).The objective of the invention is the creation of new agents with the ability to inhibit the growth of tumor cells in humans, based on the available plant metabolite of lambertanoic acid (VII).

Поставленная задача решается новыми химическими соединениями - 6-гидроксинафтохинонами лабданового типа, формулы (Ia-в), обладающими способностью к подавлению роста опухолевых клеток человека СЕМ-13, МТ-4 и U-937.The problem is solved by new chemical compounds - 6-hydroxy-naphthoquinones of the Labdanian type, of formula (Ia-c), which are capable of inhibiting the growth of human tumor cells CEM-13, MT-4 and U-937.

Figure 00000001
Figure 00000001

где R1=R2=Н(Ia); R1=Me, R2=H(Iб); R1=H, R2=CO2Et (Iв).where R 1 = R 2 = H (Ia); R 1 = Me, R 2 = H (Ib); R 1 = H, R 2 = CO 2 Et (Ic).

Способ получения соединений (Ia-в) реализуется по показанной на схеме 1 последовательности превращений ламбертиановой кислоты (VII). Метилирование ламбертиановой кислоты (VII) дает метиловый эфир (VIIa), обработка которого p-толуолсульфокислотой в бензоле гладко приводит к 8(9),13(16),14-лабдатриену (VIII) (выход 89%) [Ю.В.Харитонов, Э.Э.Шульц, М.М.Шакиров, Г.А.Толстиков. Синтетические трансформации высших терпеноидов. XVII. Внутримолекулярная циклизация фурфуриламидов лабданового типа. Журнал органической химии. 2008, т.44 (4), с.521-528]. Формилирование соединения (VIII) в условиях реакции Вильсмайера-Хаака приводит к метиловому эфиру 16-формилфломизоиковой кислоты (IX) (выход 78%) [Миронов М.Е., Харитонов Ю.В., Шульц Э.Э., Шакиров М.М., Гатилов Ю.В., Толстиков Г.А. Синтетические трансформации высших терпеноидов. XXIII. Синтез изоиндолинонов на основе дитерпеноидов. Журнал органической химии. 2010, т.46 (12), с.1855-1867]. Альдольно-кротоновая конденсация терпеноидного альдегида (IX) с ацетоном протекает с образованием кетона (X) (выход 94%). Реакция кетона (X) с избытком триметилхлорсилана в ацетонитриле в присутствии безводных хлорида цинка и триэтиламина приводит к образованию (1-терпенил)-3-триметилсилоксибутадиена (XI) (выход 92%). При кипячении диена (XI) с бензохиноном (XIIa) бензоле присутствии L-пролина и хроматографировании продуктов реакции на силикагеле выделяют 8-замещенный 6-гидрокси-1,4-нафтохинон (Ia) (выход 70%).The method for producing compounds (Ia-b) is implemented according to the sequence of conversions of lambertianic acid (VII) shown in Scheme 1. Methylation of lambertianic acid (VII) gives methyl ester (VIIa), treatment of which with p-toluenesulfonic acid in benzene smoothly leads to 8 (9), 13 (16), 14-labdatriene (VIII) (yield 89%) [Yu. V. Kharitonov , E.E. Schultz, M.M. Shakirov, G.A. Tolstikov. Synthetic transformations of higher terpenoids. Xvii. Intramolecular cyclization of labdanic type furfurilamides. Journal of Organic Chemistry. 2008, vol. 44 (4), p. 521-528]. Formylation of compound (VIII) under the conditions of the Vilsmeier-Haack reaction leads to 16-formylflomisoic acid (IX) methyl ester (yield 78%) [Mironov ME, Kharitonov Yu.V., Shults E.E., Shakirov M.M. ., Gatilov Yu.V., Tolstikov G.A. Synthetic transformations of higher terpenoids. Xxiii. Synthesis of isoindolinones based on diterpenoids. Journal of Organic Chemistry. 2010, vol. 46 (12), p. 1855-1867]. The aldol-croton condensation of terpenoidaldehyde (IX) with acetone proceeds with the formation of ketone (X) (yield 94%). The reaction of ketone (X) with an excess of trimethylchlorosilane in acetonitrile in the presence of anhydrous zinc chloride and triethylamine leads to the formation of (1-terpenyl) -3-trimethylsiloxybutadiene (XI) (yield 92%). Upon boiling of diene (XI) with benzoquinone (XIIa) benzene in the presence of L-proline and chromatography of the reaction products on silica gel, 8-substituted 6-hydroxy-1,4-naphthoquinone (Ia) is isolated (yield 70%).

Взаимодействие диена (XI) с 2-бром-6-метилбензохиноном (XIIб) при нагревании в бензоле в присутствии L-пролина протекает как последовательное циклоприсоединение и дегидробромирование и приводит к образованию 8-замещенного 6-гидрокси-2-метил-1,4-нафтохинона (I6) (выход 68%).The interaction of diene (XI) with 2-bromo-6-methylbenzoquinone (XIIb) when heated in benzene in the presence of L-proline proceeds as sequential cycloaddition and dehydrobromination and leads to the formation of 8-substituted 6-hydroxy-2-methyl-1,4- naphthoquinone (I6) (yield 68%).

Соединение (Iв) синтезировали в три стадии из альдегида (IX). При конденсации терпенового альдегида (IX) с ацетоуксусным эфиром получают 4-терпенил-3-этоксикарбонил-3-бутен-2-оны в виде смеси (Z)- и (E)-изомеров (ХIIIа, ХIIIб) (выход 89%, соотношение ~1:1, по данным ЯМР спектра), которые легко разделяют колоночной хроматографией на силикагеле. Взаимодействие смеси изомерных кетонов (XIIIa, б) с триметилхлорсиланом в ацетонитриле в присутствии хлорида цинка и триэтиламина приводит к 2-этоксикарбонил-3-триметилсилоксибутадиен терпенового типа (XIV) (выход 96%). При взаимодейстии 2-этоксикарбонилзамещенного силоксидиена (XIV) с бензохиноном (XIIa) получают терпеноидный 6-гидрокси-7-этоксикарбонилнафтохинон (Iв) (35%).Compound (Ic) was synthesized in three stages from aldehyde (IX). Upon condensation of terpene aldehyde (IX) with acetoacetic ester, 4-terpenyl-3-ethoxycarbonyl-3-buten-2-ones are obtained in the form of a mixture of (Z) - and (E) -isomers (XIIIa, XIIIb) (89% yield, ratio ~ 1: 1, according to NMR spectrum), which are easily separated by silica gel column chromatography. The interaction of a mixture of isomeric ketones (XIIIa, b) with trimethylchlorosilane in acetonitrile in the presence of zinc chloride and triethylamine leads to 2-ethoxycarbonyl-3-trimethylsiloxybutadiene terpene type (XIV) (yield 96%). The interaction of 2-ethoxycarbonyl-substituted siloxidien (XIV) with benzoquinone (XIIa) gives terpenoid 6-hydroxy-7-ethoxycarbonylnaphthoquinone (Ic) (35%).

Техническим результатом изобретения является создание новых производных лабданоидов (Ia-в), обладающих способностью к подавлению роста опухолевых клеток человека. Новые соединения получают путем химической модификации доступного растительного метаболита Pinus sibirica R.Mayr. - ламбертиановой кислоты (VII), которая легко выделяется из лесопромышленного продукта - кедровой живицы или из хвои кедра, являющейся многотоннажным отходом лесосеки [Т.Г.Толстикова, И.В.Сорокина, М.П.Долгих., Ю.В.Харитонов, С.В.Чернов, Э.Э.Шульц, Г.А.Толстиков. Нейротропная активность аддуктов ламбертиановой кислоты с N-замещенными малеинимидами. Химико-фармацевтический журнал. 2004, т.38 (10), с.13-15]. Физико-химические константы новых, впервые полученных соединений, приведены в примерах 1-3.The technical result of the invention is the creation of new derivatives of labdanoids (Ia-b), with the ability to inhibit the growth of human tumor cells. New compounds are obtained by chemical modification of the available plant metabolite Pinus sibirica R. Mayr. - lambertianic acid (VII), which is easily isolated from the forest product - cedar resin or from cedar needles, which is a large-tonnage waste of the cutting area [T.G. Tolstikova, I.V. Sorokina, M.P. Dolgikh., Yu.V. Kharitonov , S.V. Chernov, E.E. Schulz, G.A. Tolstikov. Neurotropic activity of lambertianic acid adducts with N-substituted maleimides. Chemical Pharmaceutical Journal. 2004, vol. 38 (10), pp. 13-15]. Physico-chemical constants of new, first-obtained compounds are shown in examples 1-3.

Биологическая активность соединений (Ia-в) изучалась путем определения способности к подавлению роста опухолевых клеток СЕМ-13, МТ-4 и U-937. Цитотоксическую активность устанавливали путем определения CCID50 - доза, ингибирующая жизнеспособность опухолевых клеток на 50%. Для определения CCID50 использовали стандартный МТТ тест, как описано в рекомендациях [Mosmann Т. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. // J Immunol Methods, 1983, v.16 (1), p.55-63; Wilson J.K., Sargent J.M., Elgie A.W., Hill J.G., Taylor C.G. A feasibility study of the MTT assay for chemosensitivity testing in ovarian malignancy // Br. J. Cancer, 1990, v.62 (2), p.189-194]. Результаты изучения цитотоксической активности приведены в табл.1.The biological activity of compounds (Ia-b) was studied by determining the ability to suppress the growth of tumor cells CEM-13, MT-4 and U-937. Cytotoxic activity was determined by determining CCID 50 - a dose inhibiting tumor cell viability by 50%. To determine the CCID 50 , a standard MTT test was used as described in the recommendations [Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. // J Immunol Methods, 1983, v. 16 (1), p. 55-63; Wilson JK, Sargent JM, Elgie AW, Hill JG, Taylor CG A feasibility study of the MTT assay for chemosensitivity testing in ovarian malignancy // Br. J. Cancer, 1990, v. 62 (2), p. 189-194]. The results of the study of cytotoxic activity are given in table 1.

Таблица 1Table 1 Цитотоксичность соединений (Ia-в)Cytotoxicity of compounds (Ia-b) СоединениеCompound Опухолевые клетки СЕМ-13, CCID50, (мкМ)CEM-13 tumor cells, CCID 50 , (μM) Опухолевые клетки U-937, CCID50, (мкМ)Tumor cells U-937, CCID 50 , (μM) Опухолевые клетки МТ-4, CCID50, (мкМ)Tumor cells MT-4, CCID 50 , (μM) (Ia)(Ia) 3.4±1.13.4 ± 1.1 5.8±0.85.8 ± 0.8 4.3±1.44.3 ± 1.4 (Iб)(Ib) 12.2±1.612.2 ± 1.6 4.4±1.94.4 ± 1.9 6.6±2.56.6 ± 2.5 (Iв)(Ic) 7.5±0.97.5 ± 0.9 9.2±0.89.2 ± 0.8 15.1±1.315.1 ± 1.3 Пинусолид (II)Pinusolid (II) 9.2±0.029.2 ± 0.02 34.1±0.834.1 ± 0.8 49.1±0.849.1 ± 0.8 Бетулиновая кислота (VI)Betulinic Acid (VI) 4.3±0.84.3 ± 0.8 6.1±1.46.1 ± 1.4 11.6±2.211.6 ± 2.2 Ламбертиановая кислота (VII)Lambertianic acid (VII) 69.169.1 43.243.2 92.192.1

Из данных таблицы 1 видно, что заявляемые соединения (Ia-в) обладают способностью подавлять рост опухолевых клеток человека. Наибольшей цитотоксической активностью обладает соединение (Ia). Цитотоксическая доза соединения (Ia) составляет 3.4 мкМ для клеток T-клеточных лейкозов СЕМ-13, 5.8 мкМ - для клеток моноцитов человека U-937 и 4.3 мкМ - для клеток Т-клеточной лейкемии МТ-4. Это соединение оказалось в 20 раз более активным ингибитором жизнеспособности опухолевых клеток СЕМ-13 и МТ-4, и в 8 раз более активным ингибитором жизнеспособности опухолевых клеток U-937, чем исходное ламбертиановая кислота (VII). Соединения (Ia-в) более активно, чем пинусолид, подавляют рост опухолевых клеток моноцитов человека U-937 (CCID50=4.4-9.2 мкМ) и T-клеточной лейкемии (CCID50=4.3-15.1 мкМ). Соединения (Ia, б) в более низкой концентрации подавляют рост клеток лейкемии МТ-4, чем бетулоновая кислота (VI).From the data of table 1 it can be seen that the claimed compounds (Ia-b) have the ability to inhibit the growth of human tumor cells. The greatest cytotoxic activity is possessed by compound (Ia). The cytotoxic dose of compound (Ia) is 3.4 μM for CEM-13 T-cell leukemia cells, 5.8 μM for U-937 human monocyte cells and 4.3 μM for MT-4 T-cell leukemia cells. This compound turned out to be 20 times more active inhibitor of tumor cell viability CEM-13 and MT-4, and 8 times more active inhibitor of tumor cell viability U-937 than the original lambertanoic acid (VII). Compounds (Ia-c) more actively than pinusolid inhibit the growth of tumor cells of human monocytes U-937 (CCID 50 = 4.4-9.2 μM) and T-cell leukemia (CCID 50 = 4.3-15.1 μM). Compounds (Ia, b) at a lower concentration inhibit the growth of MT-4 leukemia cells than betulonic acid (VI).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.

Пример 1. Получение (1S,4aS,8aR)-Метил 5-{2-[2-(6-гидрокси-1,4-диоксо-1,4-дигидронафталин-8-ил)-фуран-3-ил]этил}-1,4а,6-триметил-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилата (Ia).Example 1. Obtaining (1S, 4aS, 8aR) -Metyl 5- {2- [2- (6-hydroxy-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-8-yl) -furan-3-yl] ethyl } -1,4a, 6-trimethyl-1,2,3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (Ia).

1. (1S,4aR,5S,8aR)-Метил 5-[2-(фуран-3-ил)этил]-1,4а-диметил-6-метилендекагидро-нафталин-1-карбоксилат (метилламбертианат) (VIIa).1. (1S, 4aR, 5S, 8aR) -Metyl 5- [2- (furan-3-yl) ethyl] -1,4a-dimethyl-6-methylenedecahydro-naphthalene-1-carboxylate (methylambertianate) (VIIa).

К раствору 2.5 г ламбертиановой кислоты (IV) в 50 мл этанола добавляют 1.99 г диметилсульфата и при перемешивании в течение 15 мин прикапывают раствор 2.2 г гидроокиси калия в 22 мл воды. Температура не должна превышать 40°C. Реакционную массу перемешивают 2 ч при комнатной температуре, затем добавляют 100 мл воды, продукт экстрагирируют хлористым метиленом (4×50 мл). Объединенный экстракт промывают 1%-ным водн. раствором NaOH (2×25 мл), водой (3×25 мл) и сушат сульфатом магния. Растворитель упаривают, в остатке получают 2.38 г (91%) метилового эфира ламбертиановой кислоты (VIIa) в виде масла.

Figure 00000005
(c 1.3, в хлороформе). Данные спектров ЯМР 1H и 13C соответствуют приведенным в работе [Dauben W.G., German V.F. The structure of lambertianic acid. A new diterpenic acid. // Tetrahedron. 1966, v.22 (2), p.679-683].To a solution of 2.5 g of lambertianic acid (IV) in 50 ml of ethanol, 1.99 g of dimethyl sulfate is added and, with stirring, a solution of 2.2 g of potassium hydroxide in 22 ml of water is added dropwise. The temperature should not exceed 40 ° C. The reaction mass is stirred for 2 hours at room temperature, then 100 ml of water are added, the product is extracted with methylene chloride (4 × 50 ml). The combined extract was washed with 1% aq. NaOH solution (2 × 25 ml), water (3 × 25 ml) and dried with magnesium sulfate. The solvent was evaporated, and 2.38 g (91%) of lambertianic acid methyl ester (VIIa) were obtained in the form of an oil.
Figure 00000005
(c 1.3, in chloroform). The data of 1 H and 13 C NMR spectra correspond to those given in [Dauben WG, German VF The structure of lambertianic acid. A new diterpenic acid. // Tetrahedron. 1966, v. 22 (2), p.679-683].

2. (1S,10S)-Метил-5-[2-(фуран-3-ил)этил]-1,6,10-триметил-1,2,3,4,5,6,9,10-окта гидронафталин-1-карбоксилат (метил-15,16-эпокси-8(9),13(16),14-лабдатриен-18-оат) (VIII).2. (1S, 10S) -Metyl-5- [2- (furan-3-yl) ethyl] -1,6,10-trimethyl-1,2,3,4,5,6,9,10-octa hydronaphthalene-1-carboxylate (methyl-15.16-epoxy-8 (9), 13 (16), 14-labdatriene-18-oat) (VIII).

К раствору 1.00 г (3.02 ммоль) метилового эфира ламбертиановой кислоты (VIIa) в 10 мл бензола добавляют 0.01 г (0.06 ммоль) безв. p-толуолсульфокислоты. Реакционную смесь кипятят 2 ч, растворитель выпаривают в вакууме, остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент - петролейный эфир). Получают 0.89 г (89%) соединения (VIII) в виде масла. [α]580+23.4 (c 3.1, EtOH). Данные спектров ЯМР 1H и 13C соответствуют приведенным в работе [Ю.В.Харитонов, Э.Э.Шульц, М.М.Шакиров, Г.А.Толстиков. Синтетические трансформации высших терпеноидов. XVII. Внутримолекулярная циклизация фурфуриламидов лабданового типа. Журнал органической химии. 2008, т.44 (4), с.521-528].To a solution of 1.00 g (3.02 mmol) of lambertianic acid methyl ester (VIIa) in 10 ml of benzene, 0.01 g (0.06 mmol) bezv. p-toluenesulfonic acid. The reaction mixture is boiled for 2 hours, the solvent is evaporated off in vacuo, the residue is chromatographed on a silica gel column (eluent is petroleum ether). Obtain 0.89 g (89%) of compound (VIII) as an oil. [α] 580 + 23.4 (c 3.1, EtOH). The data of 1 H and 13 C NMR spectra correspond to those given in [Yu.V. Kharitonov, E.E. Schulz, M.M.Shakirov, G.A. Tolstikov. Synthetic transformations of higher terpenoids. Xvii. Intramolecular cyclization of labdanic type furfurilamides. Journal of Organic Chemistry. 2008, vol. 44 (4), p. 521-528].

3. (1S,4aS,8aR)-Метил 5-[2-(2-формилфуран-3-ил)этил]-1,4а,6-триметил-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилат (Метил 16-формил-8(9),13(16),14-лабдатриеноат) (IX).3. (1S, 4aS, 8aR) -Metyl 5- [2- (2-formylfuran-3-yl) ethyl] -1,4a, 6-trimethyl-1,2,3,4,4a, 7.8, 8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (Methyl 16-formyl-8 (9), 13 (16), 14-labdatrienoate) (IX).

К перемешиваемому раствору 8.80 г (26.7 ммоль) дитерпеноида (VIII) в 40 мл ДМФА добавляют по каплям 4.80 мл (52.5 ммоль) POCl3 (температура 20°C). Реакционную массу выдерживают при периодическом перемешивании 48 ч, затем выливают на 70 мл ледяной воды. К полученной смеси добавляют 20 мл насыщенного водного раствора NaOAc, образовавшийся органический слой отделяют, водный слой экстрагируют эфиром. Объединенные экстракты промывают 5%-ным водным раствором соды и высушивают над MgSO4. Растворитель упаривают в вакууме, остаток хроматографируют на Al2O3 (20:1, петролейный эфир-эфир, 4:1). Фракции, содержащие продукт, кристаллизуют из гексана, получают 7.48 г (78%) метил 16-формил-8(9),13(16),14-лабдатриеноата (IX). Т.пл. 55-58°C.

Figure 00000006
(с 0.55, CHCl3). Данные спектров ЯМР 1H и 13C соответствуют приведенным в работе [Миронов М.Е., Харитонов Ю.В., Шульц Э.Э., Шакиров М.М., Гатилов Ю.В., Толстиков Г.А. Синтетические трансформации высших терпеноидов. XXIII. Синтез изоиндолинонов на основе дитерпеноидов. Журнал органической химии. 2010, т.46 (12), с.1855-1867].To a stirred solution of 8.80 g (26.7 mmol) of diterpenoid (VIII) in 40 ml of DMF was added dropwise 4.80 ml (52.5 mmol) of POCl 3 (temperature 20 ° C). The reaction mass is kept under periodic stirring for 48 hours, then poured onto 70 ml of ice water. To the resulting mixture was added 20 ml of a saturated aqueous NaOAc solution, the resulting organic layer was separated, the aqueous layer was extracted with ether. The combined extracts were washed with a 5% aqueous soda solution and dried over MgSO 4 . The solvent was evaporated in vacuo, the residue was chromatographed on Al 2 O 3 (20: 1, petroleum ether-ether, 4: 1). Fractions containing the product crystallize from hexane to give 7.48 g (78%) of methyl 16-formyl-8 (9), 13 (16), 14-labdatrienoate (IX). Mp 55-58 ° C.
Figure 00000006
(c 0.55, CHCl 3 ). The data of 1 H and 13 C NMR spectra correspond to those given in [Mironov ME, Kharitonov Yu.V., Shults E.E., Shakirov MM, Gatilov Yu.V., Tolstikov G.A. Synthetic transformations of higher terpenoids. Xxiii. Synthesis of isoindolinones based on diterpenoids. Journal of Organic Chemistry. 2010, vol. 46 (12), p. 1855-1867].

4. (1S,4aS,8aR,E)-Метил 1,4а,6-триметил-5-{2-[2-(3-оксобут-1-енил)фуран-3-ил]этил}-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилат (X).4. (1S, 4aS, 8aR, E) -Metyl 1,4a, 6-trimethyl-5- {2- [2- (3-oxobut-1-enyl) furan-3-yl] ethyl} -1,2 3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (X).

К раствору 5.0 г (14 ммоль) терпенового альдегида (IX) в 25 мл ацетона при интенсивном перемешивании прибавляют 0.28 г NaOH (7 ммоль) в 8.0 мл H2O. Реакционную смесь перемешивают 5 ч при комнатной температуре, затем упаривают. К остатку добавляют 50 мл хлористого метилена и 5 мл 10%-ного водного раствора HCl. Слои разделяют, органический слой промывают дистиллированной водой до pH 7, сушат над MgSO4, упаривают в вакууме, остаток хроматографируют на силикагеле (элюент-петролейный эфир-диэтиловый эфир, 4:1). Выделяют 5.25 г (94%) соединения (X) в виде масла,

Figure 00000007
(c 0.34, CHCl3). ИК спектр, ν, см-1: 3141, 3112, 2952, 1722, 1680, 1664, 1612, 1564, 1464, 1439, 1376, 1361, 1235, 1191, 1162, 1142, 1097, 1039, 970, 893, 825, 794, 756. УФ спектр (EtOH), λмакс, нм (lgε): 202 (4.08), 330 (3.86). Спектр ЯМР 1H, δ, м.д. (J, Гц): 0.75 с (3H, C20H3) 1.00 т.д (1H, Н3, J 13.5, 4.5), 1.19 с (3H, С19Н3), 1.22 м (1H, Hl), 1.30 д.д (1H, Н5, J 12.5, 1.8), 1.51 м (1Н, Н2), 1.62 с (3H, С17Н3), 1.72 м (1H, H6), 1.81-1.92 м (3H, H1,2,6), 1.96 м (2Н, Н7), 2.08 м (2Н, H11), 2.18 д.м (1H, Н3, Jгем 13.5), 2.28 с (3H, С4'H3), 2.53 м (2Н, H12), 3.60 с (3H, OCH3), 6.38 д (1H, H14, J 1.5), 6.55 д (1H, Н1', J 15.8), 7.30 д (1H, Н2', J 15.8), 7.39 д (1H, Н15, J 1.5). Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.: 17.33 к (С20), 19.13 т (C2), 19.43 к (С17), 20.33 т (С6), 25.32 т (С12), 27.63 к (С4'), 27.97 к (С19), 28.62 т (C11), 36.84 т (С7), 36.88 т (С1), 37.21 т (С3), 39.14 с (С10), 43.43 с (С4), 50.64 к (OCH3), 53.00 д (С5), 112.95 д (С14), 122.09 д (С2'), 126.71 д (С1'), 127.53 с (С8), 131.79 с (С13), 137.77 с (С9), 144.06 д (С15), 145.98 с (С16), 177.53 с (C18), 197.21 с (С3'). Масс-спектр, m/z (Iотн., %): 398 (0.6), 358 (0.3), 339 (0.9), 283 (0.6), 265 (0.8), 249 (7), 189 (26), 150 (100), 133 (13), 108 (30), 83 (24), 59 (24). Найдено: m/z 398.2444 [М]+. С25Н35О4. Вычислено: M 398.2452.To a solution of 5.0 g (14 mmol) of terpene aldehyde (IX) in 25 ml of acetone, 0.28 g of NaOH (7 mmol) in 8.0 ml of H 2 O was added with vigorous stirring. The reaction mixture was stirred for 5 h at room temperature, then evaporated. To the residue were added 50 ml of methylene chloride and 5 ml of a 10% aqueous HCl solution. The layers were separated, the organic layer was washed with distilled water to pH 7, dried over MgSO 4 , evaporated in vacuo, the residue was chromatographed on silica gel (eluent-petroleum ether-diethyl ether, 4: 1). 5.25 g (94%) of compound (X) is isolated as an oil,
Figure 00000007
(c 0.34, CHCl 3 ). IR spectrum, ν, cm -1 : 3141, 3112, 2952, 1722, 1680, 1664, 1612, 1564, 1464, 1439, 1376, 1361, 1235, 1191, 1162, 1142, 1097, 1039, 970, 893, 825 , 794, 756. UV spectrum (EtOH), λ max , nm (logε): 202 (4.08), 330 (3.86). 1 H NMR spectrum, δ, ppm (J, Hz): 0.75 s (3H, C 20 H 3 ) 1.00 etc (1H, H 3 , J 13.5, 4.5), 1.19 s (3H, C 19 H 3 ), 1.22 m (1H, H l ), 1.30 dd (1H, H 5 , J 12.5, 1.8), 1.51 m (1H, H 2 ), 1.62 s (3H, C 17 H 3 ), 1.72 m (1H, H 6 ), 1.81-1.92 m (3H, H 1.2.6 ), 1.96 m (2H, H 7 ), 2.08 m (2H, H 11 ), 2.18 dm (1H, H 3 , J g 13.5), 2.28 s (3H, C 4 ' H 3 ), 2.53 m (2H, H 12 ), 3.60 s (3H, OCH 3 ), 6.38 d (1H, H 14 , J 1.5), 6.55 d (1H, H 1' , J 15.8), 7.30 d (1H, H 2 ' , J 15.8); 7.39 d (1H, H 15 , J 1.5). 13 C NMR spectrum, δ, ppm: 17.33 k (C 20 ), 19.13 t (C 2 ), 19.43 k (C 17 ), 20.33 t (C 6 ), 25.32 t (C 12 ), 27.63 k ( C 4 ' ), 27.97 t (C 19 ), 28.62 t (C 11 ), 36.84 t (C 7 ), 36.88 t (C 1 ), 37.21 t (C 3 ), 39.14 s (C 10 ), 43.43 s ( C 4 ), 50.64 k (OCH 3 ), 53.00 d (C 5 ), 112.95 d (C 14 ), 122.09 d (C 2 ' ), 126.71 d (C 1' ), 127.53 s (C 8 ), 131.79 s (C 13 ), 137.77 s (C 9 ), 144.06 d (C 15 ), 145.98 s (C 16 ), 177.53 s (C 18 ), 197.21 s (C 3 ' ). Mass spectrum, m / z (I rel. ,%): 398 (0.6), 358 (0.3), 339 (0.9), 283 (0.6), 265 (0.8), 249 (7), 189 (26), 150 (100), 133 (13), 108 (30), 83 (24), 59 (24). Found: m / z 398.2444 [M] + . C 25 H 35 O 4 . Calculated: M 398.2452.

5. (1S,4aR,8aR,E)-Метил 1,4а,6,8а-триметил-5-(2-{2-[3-(триметилсилокси)бута-1,3-диенил]фуран-3-ил}этил)-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилат (XI).5. (1S, 4aR, 8aR, E) -Metyl 1,4a, 6,8a-trimethyl-5- (2- {2- [3- (trimethylsiloxy) buta-1,3-dienyl] furan-3-yl } ethyl) -1,2,3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (XI).

К перемешиваемой суспензии 0.27 г (2 ммоль) безводного хлористого цинка и 5 мл (36 ммоль) триэтиламина при нагревании до 60°C в токе аргона последовательно прибавляют раствор 3.98 г (10 ммоль) кетона (X) в 40 мл ацетонитрила и 3.8 мл (30 ммоль) триметилхлорсилана. Реакционную массу перемешивают 2 ч (температура масляной бани 90-100°C), затем добавляют 2 мл триэтиламина и 1 мл триметилхлорсилана и продолжают нагревание еще 3 ч. После охлаждения добавляют 50 мл безводного диэтилового эфира, в токе аргона отфильтровывают образовавшийся осадок. Маточный раствор упаривают в вакууме водоструйного насоса, остаток аналогично обрабатывают 50 мл безводного диэтилового эфира. Маслообразное соединение подвергают очистке путем перколирования через слой дезактивированного силикагеля (масса силикагеля 6 г, диаметр колонки 3 см, элюент - безводный диэтиловый эфир). После упаривания получают соединение (XI) (выход 92%), в виде светло-коричневого маслообразного вещества, устойчивого в атмосфере аргона. Спектр ЯМР 1H, δ, м.д. (J, Гц): 0.23 с (9Н, OSi(CH3)3), 0.75 с (3H, C20H3), 1.01 т.д (1Н, Н3, J 13.4, 4.0), 1.19 с (3H, С19Н3), 1.23 м (1Н, Н1), 1.33 м (1H, Н5), 1.53 м (1H, Н2, Jгем 13.6), 1.66 с (3H, С17Н3), 1.70-2.12 м (7Н, H1,2,3,6,6,7,7), 2.20 м (2H, H11), 2.45 м (2H, H12), 3.61 с (3H, OCH3); 4.36 c, 4.41 с (2H, H4'), 6.28 д (1H, H14, J 1.5), 6.45 д, 6.60 д (2Н, Н1',2', J 15.8), 7.27 д (1H, H15, J 1.5). Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.: 0.15 к ((CH3)3OSi), 17.69 к (С20), 19.60 т (С2), 19.89 к (С17), 20.81 т (С6), 25.68 т (С12), 28.42 к (С19), 29.61 т (С11), 34.29 т (С7), 37.18 т (С1), 37.70 т (С3), 39.59 с (С10), 43.87 с (С4), 51.09 к (ОСН3), 53.49 д (С5), 96.48 т (С4'), 112.66, (С14), 115.02 д (С1'), 123.37 д (С2'), 124.65 с (C13), 127.49 с (С8), 138.65 с (С9), 141.73 д (С15), 147.95 с (С16), 154.91 с (С3'), 178.06 с (С18).To a stirred suspension of 0.27 g (2 mmol) of anhydrous zinc chloride and 5 ml (36 mmol) of triethylamine, while heating to 60 ° C under argon flow, a solution of 3.98 g (10 mmol) of ketone (X) in 40 ml of acetonitrile and 3.8 ml ( 30 mmol) of trimethylchlorosilane. The reaction mixture is stirred for 2 hours (oil bath temperature 90-100 ° C), then 2 ml of triethylamine and 1 ml of trimethylchlorosilane are added and heating is continued for another 3 hours. After cooling, 50 ml of anhydrous diethyl ether are added, and the precipitate formed is filtered off in an argon stream. The mother liquor is evaporated in vacuo of a water-jet pump, the residue is similarly treated with 50 ml of anhydrous diethyl ether. The oily compound is purified by percolation through a layer of deactivated silica gel (silica gel mass 6 g, column diameter 3 cm, eluent anhydrous diethyl ether). After evaporation, compound (XI) is obtained (yield 92%), in the form of a light brown oily substance, stable in an argon atmosphere. 1 H NMR spectrum, δ, ppm (J, Hz): 0.23 s (9H, OSi (CH 3 ) 3 ), 0.75 s (3H, C 20 H 3 ), 1.01 td (1H, H 3 , J 13.4, 4.0), 1.19 s (3H , С 19 Н 3 ), 1.23 m (1Н, Н 1 ), 1.33 m (1H, Н 5 ), 1.53 m (1H, Н 2 , J gem 13.6), 1.66 s (3H, С 17 Н 3 ), 1.70 -2.12 m (7H, H 1,2,3,6,6,7,7 ), 2.20 m (2H, H 11 ), 2.45 m (2H, H 12 ), 3.61 s (3H, OCH 3 ); 4.36 s, 4.41 s (2H, H 4 ' ), 6.28 d (1H, H 14 , J 1.5), 6.45 d, 6.60 d (2H, H 1', 2 ' , J 15.8), 7.27 d (1H, H 15 , J 1.5). 13 C NMR spectrum, δ, ppm: 0.15 k (( C H 3 ) 3 OSi), 17.69 k (C 20 ), 19.60 t (C 2 ), 19.89 k (C 17 ), 20.81 t (C 6 ), 25.68 t (C 12 ), 28.42 t (C 19 ), 29.61 t (C 11 ), 34.29 t (C 7 ), 37.18 t (C 1 ), 37.70 t (C 3 ), 39.59 s (C 10 ) , 43.87 s (C 4 ), 51.09 k (OCH 3 ), 53.49 d (C 5 ), 96.48 t (C 4 ' ), 112.66, (C 14 ), 115.02 d (C 1' ), 123.37 d (C 2 ' ), 124.65 s (C 13 ), 127.49 s (C 8 ), 138.65 s (C 9 ), 141.73 d (C 15 ), 147.95 s (C 16 ), 154.91 s (C 3' ), 178.06 s (C 18 ).

6. (1S,4aS,8aR)-Метил 5-{2-[2-(6-гидрокси-1,4-диоксо-1,4-дигидронафталин-8-ил)-фуран-3-ил]этил}-1,4а,6-триметил-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилат (Iа).6. (1S, 4aS, 8aR) -Metyl 5- {2- [2- (6-hydroxy-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-8-yl) -furan-3-yl] ethyl} - 1,4a, 6-trimethyl-1,2,3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (Ia).

К раствору 1.9 г (4 ммоль) диена (XI) в 20 мл бензола в токе аргона добавляют 0.39 г (3.6 ммоля) бензохинона (XIIa) (предварительно возгоняют) и 0.041 г (0.36 ммоль) L-пролина. Реакционную смесь кипятят 12 ч, растворитель удаляют в вакууме, остаток растворяют в 50 мл хлористого метилена, раствор промывают дистиллированной водой (3×20 мл), сушат MgSO4, затем упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем, последовательно выделяют кетон (X) (элюент-петролейный эфир-диэтиловый эфир 4:1) и соединение (Ia) (элюент-хлороформ-метанол 100:1), которое очищают кристаллизацией из эфира. Выход 1.42 г (70%). Т.пл. 125-127°C.

Figure 00000008
(с 0.02, CHCl3). ИК-спектр, см-1: 3430, 2952, 1724, 1697, 1668, 1595, 1576, 1500, 1455, 1419, 1332, 1279, 1230, 1208, 1194, 1162, 1141, 1086, 1060, 1045, 981, 892, 848, 810, 756. УФ спектр (EtOH), λмакс, нм (lgε): 201 (4.55), 244 (4.07), 366 (3.46). Спектр ЯМР 1H, δ, м.д. (J, Гц): 0.69 с (3H, С20Н3), 0.94 т.д (1H, Н3, J 13.4, 4.3), 1.05 т.д (1Н, Н1, J 12.9, 4.0), 1.17 с (3H, С19Н3), 1.22-1.27 м (1H, Н5), 1.41 д (1Н, H2, J 13.7), 1.48 с (3H, С17Н3), 1.63-1.75 м (3H, Н1,2,6), 1.79-2.02 м (3H, Н6,7,7), 2.11-2.22 м (3H, Н3,11,11), 2.30-2.36 м (2Н, H12), 3.62 с (3H, ОСН3), 6.46 д (1H, H14, J 1.6), 6.80 д (1H, H2', J 10.0), 6.87 д (1H, Н3′, J 10.0), 7.14 д (1H, Н7′, J 2.5), 7.43 д (1Н, H15, J 1.6), 7.62 д (1Н, H5′, J 2.5), 8.01 уш.с (1H, OH). Спектр ЯМР 13C, δ, м.д.: 17.56 к (С20), 19.38 т (С2), 19.49 к (С17), 20.66 т (C6), 25.73 т (C12), 28.26 к (C19), 29.09 т (C11), 34.11 т (С7), 37.00 т (С1), 37.51 т (С3), 39.38 с (С10), 43.80 с (C4), 51.15 к (OCH3), 53.32 д (С5), 111.89 д (С14), 113.54 д (С5′), 122.15 с (С13), 123.62 с (С8′a), 124.39 д (С7′), 127.48 с (С8), 133.90 с (С8′), 135.45 с (С4′a), 136.25 д (С3′), 138.44 с (С9), 140.44 д (С2′), 141.52 д (C15), 147.04 с (С16), 160.22 с (С6′), 178.52 с (С18), 183.22 с (С1′), 185.16 с (С4′). Масс-спектр, m/z (Iотн., %): 499.3 (6.02), 91.1 (100), 249.1 (72.78), 250.2 (23.16), 43.0 (20.98). Найдено: m/z 502.2344 [M]+. C31H34O6. Вычислено: M 502.2350.To a solution of 1.9 g (4 mmol) of diene (XI) in 20 ml of benzene in an argon stream, 0.39 g (3.6 mmol) of benzoquinone (XIIa) (preliminarily sublimated) and 0.041 g (0.36 mmol) of L-proline are added. The reaction mixture is boiled for 12 hours, the solvent is removed in vacuo, the residue is dissolved in 50 ml of methylene chloride, the solution is washed with distilled water (3 × 20 ml), dried with MgSO 4 , then evaporated. The residue was chromatographed on a silica gel column, ketone (X) (eluent-petroleum ether-diethyl ether 4: 1) and compound (Ia) (eluent-chloroform-methanol 100: 1) were sequentially isolated, which was purified by crystallization from ether. Yield 1.42 g (70%). Mp 125-127 ° C.
Figure 00000008
(c 0.02, CHCl 3 ). IR spectrum, cm -1 : 3430, 2952, 1724, 1697, 1668, 1595, 1576, 1500, 1455, 1419, 1332, 1279, 1230, 1208, 1194, 1162, 1141, 1086, 1060, 1045, 981, 892, 848, 810, 756. UV spectrum (EtOH), λ max , nm (logε): 201 (4.55), 244 (4.07), 366 (3.46). 1 H NMR spectrum, δ, ppm (J, Hz): 0.69 s (3H, C 20 H 3 ), 0.94 td (1H, H 3 , J 13.4, 4.3), 1.05 td (1H, H 1 , J 12.9, 4.0), 1.17 s (3H, C 19 H 3 ), 1.22-1.27 m (1H, H 5 ), 1.41 d (1H, H 2 , J 13.7), 1.48 s (3H, C 17 H 3 ), 1.63-1.75 m (3H , H 1.2.6 ), 1.79-2.02 m (3H, H 6.7.7 ), 2.11-2.22 m (3H, H 3.11.11 ), 2.30-2.36 m (2H, H 12 ), 3.62 s (3H, OCH 3 ), 6.46 d (1H, H 14 , J 1.6), 6.80 d (1H, H 2 ' , J 10.0), 6.87 d (1H, H 3 ′ , J 10.0), 7.14 d ( 1H, H 7 ′ , J 2.5), 7.43 d (1H, H 15 , J 1.6), 7.62 d (1H, H 5 ′ , J 2.5), 8.01 br.s (1H, OH). 13 C NMR spectrum, δ, ppm: 17.56 k (C 20 ), 19.38 t (C 2 ), 19.49 k (C 17 ), 20.66 t (C 6 ), 25.73 t (C 12 ), 28.26 k ( C 19 ), 29.09 t (C 11 ), 34.11 t (C 7 ), 37.00 t (C 1 ), 37.51 t (C 3 ), 39.38 s (C 10 ), 43.80 s (C 4 ), 51.15 k (OCH 3 ), 53.32 d (C 5 ), 111.89 d (C 14 ), 113.54 d (C 5 ′ ), 122.15 s (C 13 ), 123.62 s (C 8′a ), 124.39 d (C 7 ′ ), 127.48 s (C 8 ), 133.90 s (C 8 ′ ), 135.45 s (C 4′a ), 136.25 d (C 3 ′ ), 138.44 s (C 9 ), 140.44 d (C 2 ′ ), 141.52 d (C 15 ), 147.04 s (C 16 ), 160.22 s (C 6 ′ ), 178.52 s (C 18 ), 183.22 s (C 1 ′ ), 185.16 s (C 4 ′ ). Mass spectrum, m / z (I rel. ,%): 499.3 (6.02), 91.1 (100), 249.1 (72.78), 250.2 (23.16), 43.0 (20.98). Found: m / z 502.2344 [M] + . C 31 H 34 O 6 . Calculated: M 502.2350.

Пример 2. Получение (1S,4aS,8aR)-Метил 5-{2-[2-(6-гидрокси-2-метил-1,4-диоксо-1,4-дигидронафталин-8-ил)фуран-3-ил]этил}-1,4а,6-триметил-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилата (Iб).Example 2. Preparation of (1S, 4aS, 8aR) -Metyl 5- {2- [2- (6-hydroxy-2-methyl-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-8-yl) furan-3- yl] ethyl} -1,4a, 6-trimethyl-1,2,3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (IB).

Стадии 1-5 выполняются по методикам, приведенным в описании примера 1.Stage 1-5 are performed according to the methods described in the description of example 1.

6. 1S,4aS,8aR)-Метил 5-{2-[2-(6-гидрокси-2-метил-1,4-диоксо-1,4-дигидронафталин-8-ил)фуран-3-ил]этил}-1,4а,6-триметил-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилат (I6).6. 1S, 4aS, 8aR) -Metyl 5- {2- [2- (6-hydroxy-2-methyl-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-8-yl) furan-3-yl] ethyl } -1.4a, 6-trimethyl-1,2,3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (I6).

К раствору 1.9 г (4 ммоль) диена (XI) в 20 мл бензола в токе аргона добавляют 0.72 г (3.6 ммоля) 2-бром-6-метилбензохинона (ХIIб) (предварительно возгоняют) и 0.041 г (0.36 ммоль) L-пролина. Реакционную смесь кипятят 12 ч, растворитель удаляют в вакууме, остаток растворяют в 50 мл хлористого метилена, раствор промывают дистиллированной водой (3×20 мл), сушат MgSO4, затем упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем, последовательно выделяют кетон (X) (элюент-петролейный эфир-диэтиловый эфир 4:1) и соединение (I6) (элюент-хлороформ-метанол 100:1), которое очищают дополнительной перекристаллизацией из эфира. Получают 1.26 г (68%) соединения (I6). Т.пл. 162-164°C.

Figure 00000009
(c 0.27, CHCl3). ИК спектр, см-1: 3424, 2957, 2928, 2874,1725,1680, 1665, 1597, 1570, 1500, 1480, 1376, 1331, 1254, 1238, 1208, 1172, 1154, 1139, 1091, 956, 943, 890, 874, 744, 604. УФ спектр (EtOH), λмакс., нм (lgε): 201 (4.31), 267 (3.97), 361 (2.80), 372 (2.77). Спектр ЯМР 1H, δ, м.д. (J, Гц): 0.66 с (3H, C20H3), 0.91 т.д (1H, H3, J 13.6, 4.7), 1.00 т.д (1Н, Н1, J 14.3, 5.4), 1.14 c (3H, С19Н3), 1.23 м (1H, H5), 1.38 м (1H, Н2), 1.44 с (3H, С17Н3), 1.56-1.74 м (4Н, H1,2,6,6), 1.83-2.01 м (3H, H7,7,11), 2.07 с (CH3) 2.11-2.19 м (2Н, H3,11), 2.32 м (2Н, H12), 3.59 с (3H, ОСН3), 6.44 д (1H, H14, J 1.7), 6.73 д (1Н, Н2′, J 1.6), 7.08 д (1H, Н7′, J 2.6), 7.43 д (1Н, Н15, J 1.7), 7.59 д (1H, Н5′, J 2.6), 8.01 уш.с (1Н, OH). Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.: 16.79 к (СН3), 17.51 к (С20), 19.34 т (С2), 19.45 к (С17), 20.64 т (С6), 25.68 т (С12), 28.24 к (С19), 29.10 т (С11), 34.10 т (С7), 36.96 т (С1), 37.50 т (С3), 39.36 с (С10), 43.77 с (С4), 51.11 к (ОСН3), 53.30 д (С5), 111.80 д (C14), 113.30 д (С5′), 121.68 с (С13), 123.92 с (С8′а), 124.33 д (С7′), 127.19 с (С8), 133.53 д (С3′), 133.89 с (С8′), 135.76 с (С4'а), 138.46 с (С9), 141.34 д (С15), 147.46 с (С16), 150.08 с (С2′), 160.15 с (С6′), 178.44 с (С18), 183.55 с (С1′), 185.18 с (C4′). Масс-спектр, m/z (Iотн., %): 516.3 (14.58), 57.0 (100), 42.9 (80.84), 55.0 (70.68), 71.0 (66.62). Найдено: m/z 516.2505 [M]+. C32H36O6. Вычислено: М 516.2506.To a solution of 1.9 g (4 mmol) of diene (XI) in 20 ml of benzene in an argon stream add 0.72 g (3.6 mmol) of 2-bromo-6-methylbenzoquinone (XIIb) (preliminarily sublimated) and 0.041 g (0.36 mmol) of L-proline . The reaction mixture is boiled for 12 hours, the solvent is removed in vacuo, the residue is dissolved in 50 ml of methylene chloride, the solution is washed with distilled water (3 × 20 ml), dried with MgSO 4 , then evaporated. The residue was chromatographed on a silica gel column, ketone (X) (eluent-petroleum ether-diethyl ether 4: 1) and compound (I6) (eluent-chloroform-methanol 100: 1) were sequentially isolated, which was purified by additional recrystallization from ether. Obtain 1.26 g (68%) of compound (I6). Mp 162-164 ° C.
Figure 00000009
(c 0.27, CHCl 3 ). IR spectrum, cm -1 : 3424, 2957, 2928, 2874.172525680, 1665, 1597, 1570, 1500, 1480, 1376, 1331, 1254, 1238, 1208, 1172, 1154, 1139, 1091, 956, 943 , 890, 874, 744, 604. UV spectrum (EtOH), λ max. nm (logε): 201 (4.31), 267 (3.97), 361 (2.80), 372 (2.77). 1 H NMR spectrum, δ, ppm (J, Hz): 0.66 s (3H, C 20 H 3 ), 0.91 td (1H, H 3 , J 13.6, 4.7), 1.00 td (1H, H 1 , J 14.3, 5.4), 1.14 s (3H, C 19 H 3 ), 1.23 m (1H, H 5 ), 1.38 m (1H, H 2 ), 1.44 s (3H, C 17 H 3 ), 1.56-1.74 m (4H, H 1.2 , 6.6 ), 1.83-2.01 m (3H, H 7.7.11 ), 2.07 s (CH 3 ) 2.11-2.19 m (2H, H 3.11 ), 2.32 m (2H, H 12 ), 3.59 s (3H, OCH 3 ), 6.44 d (1H, H 14 , J 1.6), 6.73 d (1H, H 2 ′ , J 1.6), 7.08 d (1H, H 7 ′ , J 2.6), 7.43 d (1H , H 15 , J 1.7), 7.59 d (1H, H 5 ′ , J 2.6), 8.01 br s (1H, OH). 13 C NMR spectrum, δ, ppm: 16.79 k (C 3 ), 17.51 k (C 20 ), 19.34 t (C 2 ), 19.45 k (C 17 ), 20.64 t (C 6 ), 25.68 t ( C 12 ), 28.24 k (C 19 ), 29.10 t (C 11 ), 34.10 t (C 7 ), 36.96 t (C 1 ), 37.50 t (C 3 ), 39.36 s (C 10 ), 43.77 s (C 4 ), 51.11 k (OCH 3 ), 53.30 d (C 5 ), 111.80 d (C 14 ), 113.30 d (C 5 ′ ), 121.68 s (C 13 ), 123.92 s (C 8′a ), 124.33 d (C 7 ′ ), 127.19 s (C 8 ), 133.53 d (C 3 ′ ), 133.89 s (C 8 ′ ), 135.76 s (C 4'a ), 138.46 s (C 9 ), 141.34 d (C 15 ), 147.46 s (C 16 ), 150.08 s (C 2 ′ ), 160.15 s (C 6 ′ ), 178.44 s (C 18 ), 183.55 s (C 1 ′ ), 185.18 s (C 4 ′ ). Mass spectrum, m / z (I rel .,%): 516.3 (14.58), 57.0 (100), 42.9 (80.84), 55.0 (70.68), 71.0 (66.62). Found: m / z 516.2505 [M] + . C 32 H 36 O 6 . Calculated: M 516.2506.

Пример 3. Получение (1S,4aR,5S,8aR)-Метил-5-(2-{2-[5-(хлорметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-фуран-3-ил}этил)-1,4а-диметил-6-метилендекагидронафталин-1-карбоксилата (Iв).Example 3. Obtaining (1S, 4aR, 5S, 8aR) -Metyl-5- (2- {2- [5- (chloromethyl) -1,2,4-oxadiazol-3-yl] -furan-3-yl} ethyl) -1,4a-dimethyl-6-methylene-decahydronaphthalene-1-carboxylate (Ic).

Стадии 1-3 выполняются по методикам, приведенным в описании примера 1.Stage 1-3 are performed according to the methods described in the description of example 1.

4. (1S,4aS,8aR,Z)- и (1S,4aS,8aR,E)-Метил 5-{2-[2-(2-этоксикарбонил-3-оксобут-1-енил)фуран-3-ил]этил}-1,4а,6-триметил-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилаты (XIIIa, б).4. (1S, 4aS, 8aR, Z) - and (1S, 4aS, 8aR, E) -Metyl 5- {2- [2- (2-ethoxycarbonyl-3-oxobut-1-enyl) furan-3-yl ] ethyl} -1,4a, 6-trimethyl-1,2,3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylates (XIIIa, b).

а. К раствору 4.0 г (11.2 ммоль) альдегида (IX) в 40 мл бензола добавляли 2.13 мл ацетоуксусного эфира (16.7 ммоль), 0.22 мл пиперидина (2.2 ммоль), 0.50 мл уксусной кислоты (8.8 ммоль), 0.015 г молекулярных сит 3Å и 0.13 г (1.10 ммоль) L-пролина. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником 8 ч (контроль ТСХ), упаривают досуха, остаток растворяют в 50 мл хлористого метилена, промывают водой (3×10 мл), органический слой сушат MgSO4. Остаток после упаривания хроматографируют на силикагеле (элюент петролейный эфир-диэтиловый эфир, 4:1). Получают 4.77 г (90%) смеси соединений (XIIa, б). a . To a solution of 4.0 g (11.2 mmol) of aldehyde (IX) in 40 ml of benzene was added 2.13 ml of acetoacetate (16.7 mmol), 0.22 ml of piperidine (2.2 mmol), 0.50 ml of acetic acid (8.8 mmol), 0.015 g of 3Å molecular sieves and 0.13 g (1.10 mmol) of L-proline. The reaction mixture was refluxed for 8 h (TLC control), evaporated to dryness, the residue was dissolved in 50 ml of methylene chloride, washed with water (3 × 10 ml), the organic layer was dried with MgSO 4 . The evaporation residue is chromatographed on silica gel (eluent: petroleum ether-diethyl ether, 4: 1). 4.77 g (90%) of a mixture of compounds (XIIa, b) are obtained.

Соединения (XIIIa, б) разделяют колоночной хроматографией на силикагеле (элюенты-гексан для (Z)- и гексан-этиэтиловый эфир, 5:1 - для (E)-изомера).Compounds (XIIIa, b) were separated by silica gel column chromatography (eluents-hexane for (Z) and hexane-ethyl ether, 5: 1 for (E) -isomer).

(Z)-изомер (XIIIa):

Figure 00000010
(с 0.55, CHCl3). ИК-спектр, см-1: 557, 669, 694, 758, 799, 870, 897, 920, 984, 1038, 1090, 1165, 1202, 1231, 1340, 1375, 1431, 1466,1555, 1620, 1661, 1724, 2883, 2953, 3142, 3431. Спектр ЯМР 1Н, δ, м.д. (J, Гц): 0.74 с (3H, С20Н3), 1.01 т.д (1Н, Н3, J 13.3, 4.4), 1.19 с (3H, С19Н3), 1.22 т.д (1H, Н1, J 13.9, 3.4), 1.31 м (1H, H5), 1.35 т (3H, CO2CH2CH 3, J 7.2), 1.54 м (1Н, Н2), 1.62 с (3Н, С17Н3), 1.70 к.д (1Н, H6, J 12.7, 5.8), 1.81 д.т (1H, Н1, J 13.5, 3.5), 1.85 м (1Н, Н2), 1.93 м (2Н, Н6,7), 2.00-2.08 м (2Н, Н7,11), 2.21 м (2Н, Н3,11), 2.32 с (3H, С4′Н3), 2.55 м (2Н, Н12,12), 3.61 с (3H, OCH3), 4.38 к (2Н, CO2CH 2CH3, J 7.2), 6.41 д (1Н, H14, J 1.9), 7.29 с (1H, Н1′), 7.42 д (1H, Н15, J 1.7). Спектр ЯМР 13C, δ, м.д.: 14.04 к (CO2CH2 CH3), 17.65 к (С20), 19.45 т (С2), 19.77 к (C17), 20.64 т (С6), 25.87 т (С12), 26.32 к (С4′), 28.30 к (С19), 29.06 т (С11), 34.14 т (С7), 37.21 т (C1), 37.51 т (С3), 39.47 с (С10), 43.75 с (С4), 51.01 к (OCH3), 53.29 д (С5), 61.42 т (CO2 CH2CH3), 113.47 д (C14), 123.47 д (С1′), 128.09 с (С8), 128.13 с (С3′), 135.68 с (С13), 137.85 с (С9), 144.61 с (С16), 145.87 д (С15), 168.02 с (CO2CH2CH3), 177.86 с (С18), 193.48 с (С2′). Масс-спектр, m/z (Iотн., %): 470.3 (1.03), 176.1 (100.00), 221.1 (84.69), 201.7 (72.95), 189.2 (34.48), 161.0 (28.95). Найдено: m/z 470.2655 [M]+. C28H38O6. Вычислено: M 470.2663.(Z) -isomer (XIIIa):
Figure 00000010
(c 0.55, CHCl 3 ). IR spectrum, cm -1 : 557, 669, 694, 758, 799, 870, 897, 920, 984, 1038, 1090, 1165, 1202, 1231, 1340, 1375, 1431, 1466,1555, 1620, 1661, 1724, 2883, 2953, 3142, 3431. NMR spectrum 1 H, δ, ppm (J, Hz): 0.74 s (3H, C 20 H 3 ), 1.01 td (1H, H 3 , J 13.3, 4.4), 1.19 s (3H, C 19 H 3 ), 1.22 td (1H , H 1 , J 13.9, 3.4), 1.31 m (1H, H 5 ), 1.35 t (3H, CO 2 CH 2 C H 3 , J 7.2), 1.54 m (1H, H 2 ), 1.62 s (3H, C 17 H 3 ), 1.70 cd (1H, H 6 , J 12.7, 5.8), 1.81 dt (1H, H 1 , J 13.5, 3.5), 1.85 m (1H, H 2 ), 1.93 m ( 2H, H 6.7 ), 2.00-2.08 m (2H, H 7.11 ), 2.21 m (2H, H 3.11 ), 2.32 s (3H, C 4 ′ H 3 ), 2.55 m (2H, H 12.12 ), 3.61 s (3H, OCH 3 ), 4.38 s (2H, CO 2 C H 2 CH 3 , J 7.2), 6.41 d (1H, H 14 , J 1.9), 7.29 s (1H, H 1 ′ ), 7.42 d (1H, H 15 , J 1.7). 13 C NMR spectrum, δ, ppm: 14.04 k (CO 2 CH 2 C H 3 ), 17.65 k (C 20 ), 19.45 t (C 2 ), 19.77 k (C 17 ), 20.64 t (C 6 ), 25.87 t (C 12 ), 26.32 t (C 4 ′ ), 28.30 t (C 19 ), 29.06 t (C 11 ), 34.14 t (C 7 ), 37.21 t (C 1 ), 37.51 t (C 3 ), 39.47 s (C 10 ), 43.75 s (C 4 ), 51.01 k (OCH 3 ), 53.29 d (C 5 ), 61.42 t (CO 2 C H 2 CH 3 ), 113.47 d (C 14 ), 123.47 d (C 1 ′ ), 128.09 s (C 8 ), 128.13 s (C 3 ′ ), 135.68 s (C 13 ), 137.85 s (C 9 ), 144.61 s (C 16 ), 145.87 d (C 15 ), 168.02 s ( C O 2 CH 2 CH 3 ), 177.86 s (C 18 ), 193.48 s (C 2 ′ ). Mass spectrum, m / z (I rel. ,%): 470.3 (1.03), 176.1 (100.00), 221.1 (84.69), 201.7 (72.95), 189.2 (34.48), 161.0 (28.95). Found: m / z 470.2655 [M] + . C 28 H 38 O 6 . Calculated: M 470.2663.

(E)-изомер (XIIIб):

Figure 00000011
(с 0.55, CHCl3). ИК-спектр, см-1: 598, 669, 696, 756, 872, 986, 1036, 1094, 1186, 1232, 1331, 1371, 1447, 1462, 1562, 1622, 1720, 2883, 2953, 3144, 3429. Спектр ЯМР 1H, δ, м.д. (J, Гц): 0.74 с (3H, С20Н3), 1.01 т.д (1H, Н3, J 13.3, 4.3), 1.18 с (3H, С19Н3), 1.21 м (1H, Н1), 1.28 т (3H, CO2CH2CH 3, J 7.0), 1.32 м (1H, Н5), 1.54 м (1H, Н2), 1.62 с (3H, С17Н3), 1.70 к.д (1H, H6, J 12.5, 5.7), 1.80 т.д (1H, Н1, J 13.6, 3.5), 1.85 м (1H, Н2), 1.94 м (2Н, Н6,7), 1.99-2.08 м (2Н, Н7,11), 2.18 м (2Н, Н3,11), 2.45 с (3H, С4′Н3), 2.54 м (2Н, Н12,12), 3.60 с (3H, OCH3), 4.23 к (2Н, CO2CH 2CH3, J 7.2), 6.37 д (1H, H14, J 1.8), 7.32 с (1H, Н1′), 7.39 д (1H, Н15, J 1.6). Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.: 14.05 к (CO2CH2 CH3), 17.62 к (С20), 19.44 т (С2), 19.78 к (С17), 20.64 т (С6), 25.73 т (С12), 28.28 к (С19), 29.04 т (С11), 31.13 к (С4′), 34.16 т (С7), 37.16 т (С1), 37.52 т (С3), 39.45 с (С10), 43.74 с (C4), 50.08 к (OCH3), 53.28 д (С5), 61.13 т (CO2 CH2CH3), 113.18 д (С14), 123.12 д (С1′), 127.99 с (C8), 127.81 с (С3′), 133.87 с (С13), 137.94 с (С9), 144.80 с (С16), 145.51 д (С15), 164.60 с (CO2CH2CH3), 177.88 с (С18), 202.60 с (С2′). Масс-спектр, m/z (Iотн., %): 470.3 (1.93), 176.1 (100), 222.1 (66.77), 207.1 (60.49), 264 (48.11), 189.2 (48.11). Найдено: m/z 470.2636 [M]+. C28H38O6. Вычислено: M 470.2663.(E) -isomer (XIIIb):
Figure 00000011
(c 0.55, CHCl 3 ). IR spectrum, cm -1 : 598, 669, 696, 756, 872, 986, 1036, 1094, 1186, 1232, 1331, 1371, 1447, 1462, 1562, 1622, 1720, 2883, 2953, 3144, 3429. 1 H NMR spectrum, δ, ppm (J, Hz): 0.74 s (3H, C 20 H 3 ), 1.01 td (1H, H 3 , J 13.3, 4.3), 1.18 s (3H, C 19 H 3 ), 1.21 m (1H, H 1 ), 1.28 t (3H, CO 2 CH 2 C H 3 , J 7.0), 1.32 m (1H, Н 5 ), 1.54 m (1H, Н 2 ), 1.62 s (3H, С 17 Н 3 ), 1.70 cd (1H, H 6 , J 12.5, 5.7), 1.80 td (1H, H 1 , J 13.6, 3.5), 1.85 m (1H, H 2 ), 1.94 m (2H, H 6.7 ) , 1.99-2.08 m (2H, H 7.11 ), 2.18 m (2H, H 3.11 ), 2.45 s (3H, C 4 ′ H 3 ), 2.54 m (2H, H 12.12 ), 3.60 s (3H, OCH 3 ), 4.23 s (2H, CO 2 C H 2 CH 3 , J 7.2), 6.37 d (1H, H 14 , J 1.8), 7.32 s (1H, H 1 ′ ), 7.39 d (1H , H 15 , J 1.6). 13 C NMR spectrum, δ, ppm: 14.05 k (CO 2 CH 2 C H 3 ), 17.62 k (C 20 ), 19.44 t (C 2 ), 19.78 k (C 17 ), 20.64 t (C 6 ), 25.73 t (C 12 ), 28.28 k (C 19 ), 29.04 t (C 11 ), 31.13 k (C 4 ′ ), 34.16 t (C 7 ), 37.16 t (C 1 ), 37.52 t (C 3 ), 39.45 s (C 10 ), 43.74 s (C 4 ), 50.08 k (OCH 3 ), 53.28 d (C 5 ), 61.13 t (CO 2 C H 2 CH 3 ), 113.18 d (C 14 ), 123.12 d (C 1 ′ ), 127.99 s (C 8 ), 127.81 s (C 3 ′ ), 133.87 s (C 13 ), 137.94 s (C 9 ), 144.80 s (C 16 ), 145.51 d (C 15 ), 164.60 s ( C O 2 CH 2 CH 3 ), 177.88 s (C 18 ), 202.60 s (C 2 ′ ). Mass spectrum, m / z (I rel. ,%): 470.3 (1.93), 176.1 (100), 222.1 (66.77), 207.1 (60.49), 264 (48.11), 189.2 (48.11). Found: m / z 470.2636 [M] + . C 28 H 38 O 6 . Calculated: M 470.2663.

5. (1S,4aS,8aR)-Метил 5-(2-{2-[2-(этоксикарбонил)-3-(триметилсилокси)бута-1,3-диенил]фуран-3-ил}этил)-1,4а,6-триметил-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилат (XIV).5. (1S, 4aS, 8aR) -Metyl 5- (2- {2- [2- (ethoxycarbonyl) -3- (trimethylsiloxy) buta-1,3-dienyl] furan-3-yl} ethyl) -1, 4a, 6-trimethyl-1,2,3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (XIV).

К перемешиваемой суспензии 0.27 г (2 ммоль) безводного хлористого цинка и 5 мл (36 ммоль) триэтиламина при нагревании до 60°C в токе аргона последовательно прибавляют раствор 4.7 г (10 ммоль) смеси кетонов (XIIIa, б) в 60 мл ацетонитрила и 3.8 мл (30 ммоль) триметилхлорсилана. Реакционную массу перемешивают 2 ч (температура масляной бани 80-90°C), затем добавляют 2 мл триэтиламина и 1 мл триметилхлорсилана и продолжают нагревание еще 3 ч. После охлаждения добавляют 50 мл безводного диэтилового эфира, в токе аргона отфильтровывают образовавшийся осадок. Маточный раствор упаривают в вакууме водоструйного насоса, остаток аналогично обрабатывают 50 мл безводного диэтилового эфира. Маслообразное соединение подвергают очистке путем перколирования через слой дезактивированного силикагеля (масса силикагеля 6 г, диаметр колонки 3 см, элюент - безводный диэтиловый эфир). После упаривания получают 4.66 г (86%) диена (XIV) в виде светло-коричневого масла. Спектр ЯМР 1H, δ, м.д. (J, Гц): 0.25 с [9Н, OSi(CH3)3], 0.74 с (3H, С20Н3), 1.01 м (1H, Н3), 1.19 с (3H, С19Н3), 1.26 м (2Н, Н1,5), 1.33 т (3H, CO2CH2CH 3, J 7.1), 1.57 м (1H, Н2), 1.64 с (3H, С17Н3), 1.67-2.07 м (7Н, Н1,2,3,6,6,7,7), 2.20 м (2Н, Н11), 2.46 м (2Н, Н12), 3.61 с (3Н, OCH3), 4.35 к (2Н, CO2CH 2CH3, J 7.1), 4.41 с (2Н, H4′), 6.30 д (1H, Н14, J 1.8), 6.71 с (1H, Н1′), 7,28 д (1H, Н15, J 1.8). Спектр ЯМР 13C, δ, м.д.: 0.18 к (OSi(CH3)3), 14.15, 14.39 к (CO2CH2 CH3), 17.72 к (С20), 19.58 т (С2), 20.68 к (С17), 20.79 т (С6), 25.84, 25.98 т (С12), 28.41 к (С19), 29.17, 29.44 т (С11), 34.28 т (С7), 37.20 т (С1), 37.66 т (С3), 39.59 с (С10), 43.74 с (С4), 51.09 к (OCH3), 53.48 д (С5), 59.28, 61.26 т (CO2 CH2CH3), 94.34 т (C4′), 112.59 д (С14), 113.58 д (С1′), 127.65, 127.90 с (С13), 128.20, 128.41 с (С8), 135.78 с (С2′), 137.97, 138.49 с (С9), 143.22 д (С15), 145.86 с (С16), 152.24 с (С3′), 167.98, 169.61 с (CO2CH2CH3), 178.02 с (С18).To a stirred suspension of 0.27 g (2 mmol) of anhydrous zinc chloride and 5 ml (36 mmol) of triethylamine, while heating to 60 ° C under argon flow, a solution of 4.7 g (10 mmol) of a mixture of ketones (XIIIa, b) in 60 ml of acetonitrile and 3.8 ml (30 mmol) of trimethylchlorosilane. The reaction mixture is stirred for 2 hours (oil bath temperature 80-90 ° C), then 2 ml of triethylamine and 1 ml of trimethylchlorosilane are added and heating is continued for another 3 hours. After cooling, 50 ml of anhydrous diethyl ether are added, and the precipitate formed is filtered off in an argon stream. The mother liquor is evaporated in vacuo of a water-jet pump, the residue is similarly treated with 50 ml of anhydrous diethyl ether. The oily compound is purified by percolation through a layer of deactivated silica gel (silica gel mass 6 g, column diameter 3 cm, eluent anhydrous diethyl ether). After evaporation, 4.66 g (86%) of diene (XIV) are obtained in the form of a light brown oil. 1 H NMR spectrum, δ, ppm (J, Hz): 0.25 s [9H, OSi (CH 3 ) 3 ], 0.74 s (3H, C 20 H 3 ), 1.01 m (1H, H 3 ), 1.19 s (3H, C 19 H 3 ), 1.26 m (2H, H 1.5 ), 1.33 t (3H, CO 2 CH 2 C H 3 , J 7.1), 1.57 m (1H, H 2 ), 1.64 s (3H, C 17 H 3 ), 1.67- 2.07 m (7H, H 1,2,3,6,6,7,7 ), 2.20 m (2H, H 11 ), 2.46 m (2H, H 12 ), 3.61 s (3H, OCH 3 ), 4.35 k (2H, CO 2 C H 2 CH 3 , J 7.1), 4.41 s (2H, H 4 ′ ), 6.30 d (1H, H 14 , J 1.8), 6.71 s (1H, H 1 ′ ), 7.28 d (1H, H 15 , J 1.8). 13 C NMR spectrum, δ, ppm: 0.18 k (OSi ( C H 3 ) 3 ), 14.15, 14.39 k (CO 2 CH 2 C H 3 ), 17.72 k (C 20 ), 19.58 t (C 2 ), 20.68 k (C 17 ), 20.79 t (C 6 ), 25.84, 25.98 t (C 12 ), 28.41 k (C 19 ), 29.17, 29.44 t (C 11 ), 34.28 t (C 7 ), 37.20 t (C 1 ), 37.66 t (C 3 ), 39.59 s (C 10 ), 43.74 s (C 4 ), 51.09 k (OCH 3 ), 53.48 d (C 5 ), 59.28, 61.26 t (CO 2 C H 2 CH 3), 94.34 m (C 4 '), 112.59 g (C 14), 113.58 g (C 1'), 127.65, 127.90 s (C 13), 128.20, 128.41 s (C 8), 135.78 s (C 2 ′ ), 137.97, 138.49 s (C 9 ), 143.22 d (C 15 ), 145.86 s (C 16 ), 152.24 s (C 3 ′ ), 167.98, 169.61 s ( C O 2 CH 2 CH 3 ), 178.02 s (C 18 ).

6. (1S,4aS,8aR)-Метил 5-{2-[2-(6-гидрокси-7-этоксикарбонил-1,4-диоксо-1,4-дигидронафталин-8-ил)фуран-3-ил]этил}-1,4а,6-триметил-1,2,3,4,4а,7,8,8а-октагидронафталин-1-карбоксилат (Iв).6. (1S, 4aS, 8aR) -Metyl 5- {2- [2- (6-hydroxy-7-ethoxycarbonyl-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-8-yl) furan-3-yl] ethyl} -1.4a, 6-trimethyl-1,2,3,4,4a, 7,8,8a-octahydronaphthalene-1-carboxylate (Ic).

К раствору 2.17 г (4 ммоль) диена (XIV) в 20 мл бензола в токе аргона добавляют 0.38 г (3.3 ммоль) бензохинона (XIIa) (предварительно возгоняют) и 0.04 г (0.36 ммоль) L-пролина. Реакционную смесь нагревают до кипения и выдерживают 12 ч, затем растворитель удаляют в вакууме, остаток растворяют в 50 мл хлористого метилена, промывают дистиллированной водой (3×20 мл), сушат MgSO4, затем упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем, последовательно выделяют 0.33 г (15%) непрореагировавшего диена (XIV), 0.52 г смеси кетонов (XIIIa, б) (элюент-петролейный эфир-диэтиловый эфир 4:1) и 1.2 г фракций, содержащих продукт реакции (элюенты-хлороформ, хлороформ-метанол 100:1). Последующей хроматографией фракций, содержащих продукт, и перекристаллизацией из эфира получают 0.82 г (35%) терпеноидного 6-гидрокси-7-этоксикарбонилнафтохинона (Iв). Т.пл. 51-54°C.

Figure 00000012
(с 0.45, CHCl3). ИК спектр, ν, см-1: 3334, 2956, 2925, 2854, 1724, 1671, 1615, 1573, 1508, 1462, 1440, 1375, 1342, 1271, 1236, 1190, 1155, 1139, 1106, 1090,1041, 1015, 984, 900, 850, 810, 756. УФ спектр (EtOH), λмакс., нм (lgε): 203 (4.41), 256 (4.06), 307 (3.53), 503 (2.49). Спектр ЯМР 1H, δ, м.д. (J, Гц): 0.59, 0.61 с (3H, С20Н3), 0.85 т (3H, CO2CH2CH 3, J 7.1), 0.81 м (1H, Н3), 0.93 м (1Н, Н1), 1.05 т (3H, CO2CH2CH 3, J 7.1), 1.11, 1.12 с (3H, С19Н3), 1.16 м (1Н, Н5), 1.36, 1.42 с (3H, С17Н3), 1.53 д.м (1H, Н2, Jгем 12.6), 1.61 м (1Н, H6), 1.65-1.86 м (3H, Н2,6,11), 1.89-1.93 м (3H, Н7,11), 1.98-2.08 м (H, Н3,7,12) 2.12 д.д (1H, Н12, J 13.6, 2.8), 3.57 с (3H, OCH3), 4.12 к (2Н, CO2CH 2CH3, J 7.1), 6.41 д (1H, H14, J 1.6), 6.79 д (1Н, Н2′, J 9.2), 6.89 д (1Н, Н3′, J 9.2), 7.48 д (1H, Н15, J 1.6), 7.78 с (1H, H5′), 11.27 с, 11.29 с (1H, OH). Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.: 13.48, 13.95 к (CO2CH2 CH3), 17.45, 17.46 к (С20), 19.11, 19.22 к (С17), 19.36 т (С2), 20.57 т (С6), 25.39, 25.46 т (С12), 28.22, 28.24 к (С19), 28.53, 28.66 т (С11), 34.01 т (С7), 36.78 т, 36.89 т (С1), 37.43 т (С3), 39.30 с (C10), 43.66 с (С4), 50.93 к (OCH3), 53.21 д, 53.25 д (С5), 62.46 т (СН2), 111.69, 111.75 д (С14), 117.25 д (C5′), 121.16 с (С13), 124.02 с (С7′), 127.11 с (C8), 134.31 с (С8′), 136.33 д (С3′), 136.84 с (С4′а), 138.28 с (C9), 140.81, 140.82 д (С15), 141.21 д (С2′), 144.20 с (С16), 164.13 с (С6′), 169.55 с (CO2CH2CH3), 177.82 с (C18), 182.43 с (С1′), 183.79 с (С4′). Масс-спектр. Найдено: m/z 574.2563 [M]+. C34H38O8. Вычислено: M 574.2561.To a solution of 2.17 g (4 mmol) of diene (XIV) in 20 ml of benzene in an argon stream, 0.38 g (3.3 mmol) of benzoquinone (XIIa) (preliminarily sublimated) and 0.04 g (0.36 mmol) of L-proline are added. The reaction mixture was heated to boiling and held for 12 hours, then the solvent was removed in vacuo, the residue was dissolved in 50 ml of methylene chloride, washed with distilled water (3 × 20 ml), dried with MgSO 4 , then evaporated. The residue is chromatographed on a silica gel column, 0.33 g (15%) of unreacted diene (XIV), 0.52 g of a mixture of ketones (XIIIa, b) (eluent-petroleum ether-diethyl ether 4: 1) and 1.2 g of fractions containing the reaction product are successively isolated (eluents-chloroform, chloroform-methanol 100: 1). Subsequent chromatography of the fractions containing the product and recrystallization from ether yields 0.82 g (35%) of the terpenoid 6-hydroxy-7-ethoxycarbonylnaphthoquinone (Ic). Mp 51-54 ° C.
Figure 00000012
(c 0.45, CHCl 3 ). IR spectrum, ν, cm -1 : 3334, 2956, 2925, 2854, 1724, 1671, 1615, 1573, 1508, 1462, 1440, 1375, 1342, 1271, 1236, 1190, 1155, 1139, 1106, 1090.1041 , 1015, 984, 900, 850, 810, 756. UV spectrum (EtOH), λ max. nm (logε): 203 (4.41), 256 (4.06), 307 (3.53), 503 (2.49). 1 H NMR spectrum, δ, ppm (J, Hz): 0.59, 0.61 s (3H, С 20 Н 3 ), 0.85 t (3H, CO 2 CH 2 C H 3 , J 7.1), 0.81 m (1H, Н 3 ), 0.93 m (1Н, H 1 ), 1.05 t (3H, CO 2 CH 2 C H 3 , J 7.1), 1.11, 1.12 s (3H, С 19 Н 3 ), 1.16 m (1Н, Н 5 ), 1.36, 1.42 s (3H, C 17 H 3 ), 1.53 dm (1H, H 2 , J heme 12.6), 1.61 m (1H, H 6 ), 1.65-1.86 m (3H, H 2,6.11 ), 1.89-1.93 m ( 3H, H 7.11 ), 1.98-2.08 m (H, H 3,7,12 ) 2.12 dd (1H, H 12 , J 13.6, 2.8), 3.57 s (3H, OCH 3 ), 4.12 k ( 2H, CO 2 C H 2 CH 3 , J 7.1), 6.41 d (1H, H 14 , J 1.6), 6.79 d (1H, H 2 ′ , J 9.2), 6.89 d (1H, H 3 ′ , J 9.2 ), 7.48 d (1H, H 15 , J 1.6), 7.78 s (1H, H 5 ′ ), 11.27 s, 11.29 s (1H, OH). 13 C NMR spectrum, δ, ppm: 13.48, 13.95 k (CO 2 CH 2 C H 3 ), 17.45, 17.46 k (C 20) , 19.11, 19.22 k (C 17 ), 19.36 t (C 2 ) , 20.57 t (C 6 ), 25.39, 25.46 t (C 12 ), 28.22, 28.24 k (C 19 ), 28.53, 28.66 t (C 11 ), 34.01 t (C 7 ), 36.78 t, 36.89 t (C 1 ), 37.43 t (C 3 ), 39.30 s (C 10 ), 43.66 s (C 4 ), 50.93 k (OCH 3 ), 53.21 d, 53.25 d (C 5 ), 62.46 t ( C H 2 ), 111.69, 111.75 g (C 14), 117.25 d (C 5 '), 121.16 s (C 13), 124.02 s (C 7'), 127.11 with (C 8), 134.31 s (C 8 '), 136.33 d (C 3 ′ ), 136.84 s (C 4′a ), 138.28 s (C 9 ), 140.81, 140.82 d (C 15 ), 141.21 d (C 2 ′ ), 144.20 s (C 16 ), 164.13 s (C 6 ′ ) , 169.55 s ( C O 2 CH 2 CH 3 ), 177.82 s (C 18 ), 182.43 s (C 1 ′ ), 183.79 s (C 4 ′ ). Mass spectrum. Found: m / z 574.2563 [M] + . C 34 H 38 O 8 . Calculated: M 574.2561.

Пример 4. Исследование активности соединений формулы (Ia-в)Example 4. The study of the activity of compounds of formula (Ia-b)

В работе использовали линии опухолевых клеток человека МТ-4, СЕМ-13 (клетки T-клеточных лейкозов человека) и U-937 (клетки моноцитов человека). Клетки культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 10% сыворотки крови эмбрионов крупного рогатого скота, 2 ммоль/л L-глутамина, 80 мкг/мл гентамицина и 30 мг/мл линкомицина, при температуре 37°C в CO2 инкубаторе. Исследуемые вещества, растворяли в ДМСО и добавляли к клеточной культуре в необходимых концентрациях. Использовали по 3 лунки на каждую концентрацию. Для эксперимента использовали клетки на 3 сутки культивирования после оценки морфологии, подсчета концентрации и жизнеспособности клеток. Клетки СЕМ-13, U-937 или МТ-4 помещали в лунки 96-луночного планшета («Cel-Cult», Англия) по 100 мкл в лунку, в посевной концентрации 0.5×106 клеток в мл. Исследуемые вещества добавляли к клеткам, получая конечные концентрации 0.01-1000 мкМ, используя по 3 лунки на каждую концентрацию. Клетки, инкубируемые в тех же условиях без добавления препаратов, являлись контрольными. Клетки культивировали 72 часа. Водный раствор МТТ (5 мг/мл) профильтровывали через 0.22 мкм фильтр («Flow laboratories», Англия), добавляли в каждую исследуемую культуру в соотношении 1:10 к ее объему, смесь инкубировали 3-4 часа при температуре 37°C в CO2 инкубаторе. По окончании инкубации супернатант осторожно удаляли, затем в каждую анализируемую лунку добавляли по 100 мкл ДМСО. Осадок ресуспендировали и 30 мин инкубировали в темноте при комнатной температуре до полного растворения кристаллов формазана.In the work, human tumor cell lines MT-4, CEM-13 (human T-cell leukemia cells) and U-937 (human monocyte cells) were used. Cells were cultured in RPMI-1640 medium containing 10% blood serum of cattle embryos, 2 mmol / L L-glutamine, 80 μg / ml gentamicin and 30 mg / ml lincomycin, at a temperature of 37 ° C in a CO 2 incubator. The test substances were dissolved in DMSO and added to the cell culture in the required concentrations. Used 3 wells for each concentration. For the experiment, cells were used on the 3rd day of cultivation after evaluating the morphology, counting the concentration and viability of the cells. CEM-13, U-937, or MT-4 cells were placed in wells of a 96-well plate (Cel-Cult, England), 100 μl per well, at a seed concentration of 0.5 × 10 6 cells per ml. The test substances were added to the cells, obtaining final concentrations of 0.01-1000 μM, using 3 wells for each concentration. Cells incubated under the same conditions without the addition of drugs were control. Cells were cultured for 72 hours. An aqueous MTT solution (5 mg / ml) was filtered through a 0.22 μm filter (Flow laboratories, England), added to each test culture in a ratio of 1:10 to its volume, the mixture was incubated for 3-4 hours at 37 ° C in CO 2 incubators. At the end of the incubation, the supernatant was carefully removed, then 100 μl of DMSO was added to each assay well. The precipitate was resuspended and incubated for 30 min in the dark at room temperature until crystals of formazan were completely dissolved.

Оптическую плотность (OD) образцов измеряли на мультилуночном спектрофотометре BioRad 680 (США) при длине волны, равной 490 нм. Процент ингибирования роста клеток определяли по формуле 100 - (среднее значение OD в опыте/среднее значение OD в контроле)×100. Полученное значение для контрольного триплета (первые три лунки без добавления соединений, параллельных для каждого исследуемого экспериментального агента) принималось за 100%. Рассчитывали среднее значение и ошибку среднего для каждой концентрации анализируемого соединения. По результатам строили диаграмму зависимости жизнеспособности клеток (%) от концентрации исследуемого цитотоксического вещества, определяли дозу, на 50% ингибирующую жизнеспособность клеток (CCID50), а также стандартную ошибку (SE) показателя ЦД50.The optical density (OD) of the samples was measured on a BioRad 680 multiline spectrophotometer (USA) at a wavelength of 490 nm. The percentage of inhibition of cell growth was determined by the formula 100 - (average OD value in the experiment / average OD value in the control) × 100. The obtained value for the control triplet (the first three wells without adding parallel compounds for each experimental experimental agent) was taken as 100%. The mean value and the error of the mean for each concentration of the analyte were calculated. Based on the results, a cell viability diagram (%) was plotted against the concentration of the studied cytotoxic substance, a dose that inhibited cell viability by 50% (CCID 50 ), as well as the standard error (SE) of the CD 50 index were determined.

Соединение (Ia) ингибирует рост опухолевых клеток человека СЕМ-13, U-937 и МТ-4 в концентрациях 3.4, 5.8 и 4.3 мкМ соответственно. Цитотоксическая активность этого соединения проявляется в более низких дозах по сравнению с цитотоксичностью аналога по свойствам пинусолида (IV). Дозы, ингибирующие жизнеспособность опухолевых клеток на 50%, для соединения (IV) в этих же условиях составляют 9.2, 34.1 и 49.1 мкМ.Compound (Ia) inhibits the growth of human tumor cells CEM-13, U-937 and MT-4 at concentrations of 3.4, 5.8 and 4.3 μM, respectively. The cytotoxic activity of this compound is manifested in lower doses compared to the cytotoxicity of the analogue according to the properties of pinusolid (IV). Doses that inhibit tumor cell viability by 50% for compound (IV) under the same conditions are 9.2, 34.1, and 49.1 μM.

Соединение (Iб) проявляет свой цитотоксический эффект в концентрациях 12.2, 4.4 и 6.6 мкМ соответственно, эффективные дозы этого соединения для клеток СЕМ-13 и МТ-4 практически одинаковы с эффективными концентрациями пинусолида (II). При этом соединение (16) ингибирует рост клеток моноцитов человека U-937 в 2.3 раза меньшей дозе, чем пинусолид (II).Compound (IB) exerts its cytotoxic effect at concentrations of 12.2, 4.4, and 6.6 μM, respectively; the effective doses of this compound for CEM-13 and MT-4 cells are almost identical to the effective concentrations of pinusolid (II). In this case, compound (16) inhibits the growth of human monocyte cells U-937 in a 2.3 times lower dose than pinusolid (II).

Соединение (Iв) подавляет рост опухолевых клеток человека СЕМ-13, U-937 и МТ-4 в концентрациях 7.5, 9.2 и 15.1 мкМ соответственно.Compound (Ic) inhibits the growth of human tumor cells CEM-13, U-937, and MT-4 at concentrations of 7.5, 9.2, and 15.1 μM, respectively.

Соединение (Ia) является наиболее активным цитотоксическим агентом.Compound (Ia) is the most active cytotoxic agent.

Таким образом, заявляемое изобретение обладает следующими преимуществами, а именно:Thus, the claimed invention has the following advantages, namely:

- новые соединения формулы (Ia-в) обладают способностью ингибировать рост опухолевых клеток человека в микромолярных концентрациях;- new compounds of formula (Ia-b) have the ability to inhibit the growth of human tumor cells in micromolar concentrations;

- заявляемые соединения (Ia-в) синтезируются из доступного растительного сырья - хвои или живицы кедра сибирского.- the claimed compounds (Ia-b) are synthesized from available plant materials - needles or gum Siberian cedar.

Figure 00000013
Figure 00000013

Claims (1)

6-Гидроксинафтохиноны лабданового типа формулы (Ia-в)
Figure 00000001

где R1=R2=H(Ia); R1=Me, R2=H (Iб); R1=H, R2=CO2Et (Iв),
обладающие цитотоксической активностью по отношению к опухолевым клеткам человека. Labdanic type 6-hydroxynaphthoquinones of the formula (Ia-b)
Figure 00000001

where R 1 = R 2 = H (Ia); R 1 = Me, R 2 = H (Ib); R 1 = H, R 2 = CO 2 Et (Ic),
possessing cytotoxic activity in relation to human tumor cells.
RU2012115828/04A 2012-04-19 2012-04-19 Labdane-type 6-hydroxynaphthoquinones, having cytotoxic activity on human tumour cells RU2479582C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012115828/04A RU2479582C1 (en) 2012-04-19 2012-04-19 Labdane-type 6-hydroxynaphthoquinones, having cytotoxic activity on human tumour cells

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012115828/04A RU2479582C1 (en) 2012-04-19 2012-04-19 Labdane-type 6-hydroxynaphthoquinones, having cytotoxic activity on human tumour cells

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2479582C1 true RU2479582C1 (en) 2013-04-20

Family

ID=49152682

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012115828/04A RU2479582C1 (en) 2012-04-19 2012-04-19 Labdane-type 6-hydroxynaphthoquinones, having cytotoxic activity on human tumour cells

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2479582C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2758117C2 (en) * 2017-02-07 2021-10-26 Юниверсити Оф Кентукки Рисёрч Фаундейшн Method for increasing the content of sucrose ester in tobacco plants

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2353620C1 (en) * 2007-08-23 2009-04-27 Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова СО РАН (НИОХ СО РАН) (z)-methyl-16-(5-oxo-2-phenyl-oxazol-4-ilidenmethyl)-15,16-epoxy-8(17),13(16),14-labdatrien-18-oate, possessing antioxidative, hepatoprotective and hemostimulating activity

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2353620C1 (en) * 2007-08-23 2009-04-27 Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова СО РАН (НИОХ СО РАН) (z)-methyl-16-(5-oxo-2-phenyl-oxazol-4-ilidenmethyl)-15,16-epoxy-8(17),13(16),14-labdatrien-18-oate, possessing antioxidative, hepatoprotective and hemostimulating activity

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ХАРИТОНОВ Ю.В. и др. Журн. орг. химии. Т.44 (4), с.521-528 (2008). МИРОНОВ М.Е. и др. Журн. орг. химии. Т.46 (12), с.1855-1867, 2010. ТОЛСТИКОВА Т.Г. и др. Хим. фарм. журн. Т.38 (10), с.13-15, (2004). *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2758117C2 (en) * 2017-02-07 2021-10-26 Юниверсити Оф Кентукки Рисёрч Фаундейшн Method for increasing the content of sucrose ester in tobacco plants

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. Design, synthesis and biological evaluation of novel β-pinene-based thiazole derivatives as potential anticancer agents via mitochondrial-mediated apoptosis pathway
CN108623615B (en) Macrocyclic derivatives of pyrazolo [3,4-d ] pyrimidin-3-one, pharmaceutical compositions and uses thereof
Cheng et al. Two new sesquiterpenoids and anti-HIV principles from the root bark of Zanthoxylum ailanthoides
Amolins et al. Synthesis and evaluation of electron-rich curcumin analogues
Shin et al. Synthesis of aurones and their inhibitory effects on nitric oxide and PGE2 productions in LPS-induced RAW 264.7 cells
KR20220038289A (en) KRAS G12C inhibitors and uses thereof
JP6794609B2 (en) 3,5-Disubstituted pyrazole useful as a checkpoint kinase 1 (CHK1) inhibitor, and its preparation and use
McCracken et al. Synthesis and antimalarial and antituberculosis activities of a series of natural and unnatural 4-methoxy-6-styryl-pyran-2-ones, dihydro analogues and photo-dimers
Barbosa et al. Synthesis and antitumor activity of β-carboline 3-(substituted-carbohydrazide) derivatives
Khaleghi et al. A new bioactive compound from the roots of Petasites hybridus
Puppala et al. 4H-Chromene-based anticancer agents towards multi-drug resistant HL60/MX2 human leukemia: SAR at the 4th and 6th positions
Li et al. Novel unsaturated glycyrrhetic acids derivatives: Design, synthesis and anti-inflammatory activity
Kaur et al. A comparative study of proapoptotic potential of cyano analogues of boswellic acid and 11-keto-boswellic acid
Li et al. Neogenkwanines A–H: daphnane-type diterpenes containing 4, 7 or 4, 6-ether groups from the flower bud of Daphne genkwa
Nguyen et al. Several herbal compounds in Okinawa plants directly inhibit the oncogenic/aging kinase PAK1
El-Feraly et al. Conversion of artemisinin to artemisitene
Wang et al. Studies on chemical structure modification and biology of a natural product, Gambogic acid (I): Synthesis and biological evaluation of oxidized analogues of gambogic acid
EP3947387A1 (en) Prmt5 inhibitors and uses thereof
JP4425109B2 (en) Compound isolated from cancer resin having tumor / cancer cell growth inhibitory activity and pharmaceutical composition containing the compound
Dong et al. Artemzhongdianolides A1-A21, antihepatic fibrosis guaiane-type sesquiterpenoid dimers from Artemisia zhongdianensis
WO2009047791A2 (en) Toll like receptor (tlr) signaling antagonist
RU2479582C1 (en) Labdane-type 6-hydroxynaphthoquinones, having cytotoxic activity on human tumour cells
RU2641900C1 (en) N-[3-oxolup-20(29)-ene-28-oil]-2,2,6,6-tetramethylpiperidine-4-ylamine with cytotoxic activity in respect of human tumour cells
RU2473550C1 (en) 16-(1,2,4-oxadiazol-3-yl)-15,16-epoxilabdanoids possessing cytotoxic activity on human tumour cells
RU2401273C1 (en) Triterpene anti-tumour drug produced via modification of glycyrrhetic acid