RU2478963C1 - Method for estimating clinical course of wound process and clinical effectiveness in skin wounds of various geneses - Google Patents
Method for estimating clinical course of wound process and clinical effectiveness in skin wounds of various geneses Download PDFInfo
- Publication number
- RU2478963C1 RU2478963C1 RU2011147263/15A RU2011147263A RU2478963C1 RU 2478963 C1 RU2478963 C1 RU 2478963C1 RU 2011147263/15 A RU2011147263/15 A RU 2011147263/15A RU 2011147263 A RU2011147263 A RU 2011147263A RU 2478963 C1 RU2478963 C1 RU 2478963C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- wound
- length
- dna
- track
- phase
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и молекулярной биологии, а именно к молекулярной медицине, и может быть использовано в экспериментальной и клинической хирургии для объективной оценки динамики раневого процесса и эффективности лечения.The invention relates to medicine and molecular biology, namely to molecular medicine, and can be used in experimental and clinical surgery for an objective assessment of the dynamics of the wound process and the effectiveness of treatment.
Известно, что в структуре хирургических болезней раны составляют около 70%. Раневой процесс - это комплекс закономерных, сменяющих друг друга изменений (некролиз, ангиогенез, образование коллагена и контракция раны, раневая эпителизация и рубцевание). Для оценки раневого процесса в настоящее время используется условное деление его на три стадии (фазы): I - фаза экссудации или фаза воспалительного периода, II - фаза регенерации и пролиферации, III - фаза эпителизации и реорганизации рубца. I фаза характеризуется последовательно переходящими процессами гемостаза, образованием фибринной пленки, закрывающей рану, развитием воспалительного процесса с выходом лейкоцитов из сосудистого русла и фагоцитозом бактерий, ферментативным лизисом мертвых тканей. Появление грануляций, которые, заполняя рану из глубины, обеспечивают ее заживление, открывает II фазу раневого процесса. III фаза начинается, как только растущие грануляции из глубины раны доходят до росткового слоя эпителия и обеспечивают его питание и рост (http://www.ruhirurg.ru. Клиника раневого процесса). При отсутствии отягощающих моментов ориентировочно I фаза имеет продолжительность 1-4 сут., II фаза - 1-14 сут., III фаза - 3-21 суток. Продолжительность фаз подвержена колебаниям в зависимости от различных факторов, как эндо-, так и экзогенных. Для подбора обоснованной тактики и методов воздействия на раны с целью их лечения необходима объективная оценка течения раневого процесса. Она осуществляется в процессе клинического наблюдения за состоянием раны во время перевязок, когда врачом-хирургом оценивается выраженность симптомов воспаления, характер и количество экссудата, наличие и внешний вид грануляций, наличие признаков раневой эпителизации и рубцевания. Недостатком такой диагностики является то, что клинические критерии, используемые для динамической оценки раневого процесса, основаны на визуальной, тактильной и органолептической оценке, и могут трактоваться произвольно, то есть являются субъективными, что обусловливает трудности в лечении ран.It is known that in the structure of surgical diseases, wounds account for about 70%. The wound process is a complex of regular, successive changes (necrolysis, angiogenesis, collagen formation and wound contraction, wound epithelization and scarring). To assess the wound process, it is currently used to conditionally divide it into three stages (phases): I - phase of exudation or phase of the inflammatory period, II - phase of regeneration and proliferation, III - phase of epithelization and reorganization of the scar. Phase I is characterized by sequentially passing processes of hemostasis, the formation of a fibrin film covering the wound, the development of the inflammatory process with the release of leukocytes from the vascular bed and phagocytosis of bacteria, enzymatic lysis of dead tissues. The appearance of granulations, which, filling the wound from the depths, ensure its healing, opens the second phase of the wound process. Phase III begins as soon as growing granulations from the depth of the wound reach the germ layer of the epithelium and provide its nutrition and growth ( http://www.ruhirurg.ru. Clinic of the wound process). In the absence of aggravating moments, approximately the I phase has a duration of 1-4 days., II phase - 1-14 days., III phase - 3-21 days. The duration of the phases is subject to fluctuations depending on various factors, both endo- and exogenous. An objective assessment of the course of the wound healing process is necessary for the selection of reasonable tactics and methods for treating wounds with the aim of treating them. It is carried out in the process of clinical observation of the state of the wound during dressings, when the surgeon assesses the severity of symptoms of inflammation, the nature and amount of exudate, the presence and appearance of granulations, the presence of signs of wound epithelization and scarring. The disadvantage of this diagnosis is that the clinical criteria used for the dynamic assessment of the wound process are based on visual, tactile and organoleptic evaluation, and can be interpreted arbitrarily, that is, they are subjective, which makes it difficult to treat wounds.
Объективными методами оценки раневого процесса являются измерение размеров и площади раны, бактериологический метод и цитологический метод.Objective methods for assessing the wound process are measuring the size and area of the wound, the bacteriological method and the cytological method.
Измерение размеров и площади раны может производиться непосредственным измерением размеров раны с помощью линейки или копированием контуров раны на бумагу через прозрачную пленку (А.Д.Тараско. Раны: Учебно-методическое пособие для врачей-курсантов. - Новокузнецк, 2007. - С.8-10).Measurement of the size and area of the wound can be carried out by directly measuring the size of the wound using a ruler or by copying the contours of the wound onto paper through a transparent film (A.D. Tarasco. Wounds: Teaching aid for cadets. - Novokuznetsk, 2007. - P. 8 -10).
Непосредственное измерение размеров раны с помощью линейки - самый старый и наиболее широко используемый метод. Измеряют длину и ширину раны во взаимно перпендикулярных плоскостях. Измерение проводится в динамике раневого процесса. Уменьшение размеров раны чаще всего расценивается как динамика, направленная в сторону заживления раны.Direct measurement of wound sizes using a ruler is the oldest and most widely used method. Measure the length and width of the wound in mutually perpendicular planes. The measurement is carried out in the dynamics of the wound process. Reducing the size of the wound is most often regarded as a dynamics directed towards the healing of the wound.
Недостатки:Disadvantages:
1) необходимость измерений одним и тем же инструментом;1) the need for measurements with the same instrument;
2) инструмент необходимо подвергать стерилизации, чтобы предотвратить контактное распространение инфекции, из-за чего инструмент быстро выходит из строя;2) the instrument must be sterilized to prevent contact spread of infection, which is why the instrument quickly fails;
3) метод позволяет определить только размеры раны, но не дает характеристику раневого процесса.3) the method allows you to determine only the size of the wound, but does not give a characteristic of the wound process.
Копирование контуров раны на бумагу - в настоящее время очень распространенный метод контроля течения раневого процесса, особенно за рубежом. Чаще всего используют метод очерчивания контуров раны через прозрачную пленку. Пленку прикладывают к ране, поверх нее накладывают кальку и очерчивают контуры маркером. Пленку после этого выбрасывают. Лучше применять двухслойную пленку. При этом верхний слой с рисунком остается, а нижний выбрасывается. Размеры раны могут измеряться вручную, с помощью масштабной бумаги путем подсчета квадратов известной площади внутри контура, площадь рассчитывается по специальным формулам. Можно воспользоваться гравиметрическим методом, когда участок бумаги, очерченный контуром, вырезается, взвешивается на аналитических весах и выстраивается пропорция с весом кусочка той же бумаги известной площади. Вместо бумаги можно использовать рентгеновскую пленку. Измерения выполняются в динамике, уменьшение площади раны свидетельствует о тенденции к заживлению раны. Рисунки фиксируются в медицинской документации друг над другом, что позволяет проводить их визуальное сравнение.Copying the contours of the wound on paper is currently a very common method of controlling the course of the wound process, especially abroad. The most commonly used method is the contouring of wounds through a transparent film. The film is applied to the wound, tracing paper is applied over it and the contours are outlined with a marker. The film is then discarded. It is better to use a two-layer film. In this case, the upper layer with the pattern remains, and the lower one is ejected. The size of the wound can be measured manually, using large-scale paper by counting the squares of the known area inside the contour, the area is calculated by special formulas. You can use the gravimetric method when a piece of paper, outlined by a contour, is cut out, weighed on an analytical balance and a proportion is built with the weight of a piece of the same paper of a known area. Instead of paper, you can use x-ray film. Measurements are carried out in dynamics, a decrease in the area of the wound indicates a tendency to wound healing. Figures are fixed in the medical documentation one above the other, which allows for their visual comparison.
Недостатки:Disadvantages:
1) комплекс пленка-бумага должны быть стерильны, но медицинская промышленность в РФ такие приспособления не производит, в импровизированных приспособлениях пленка должна подвергаться дезинфекции до измерения и после измерения перед утилизацией;1) the film-paper complex must be sterile, but the medical industry in the Russian Federation does not produce such devices, in improvised devices the film must be disinfected before measurement and after measurement before disposal;
2) метод не позволяет регистрировать глубину раны;2) the method does not allow to record the depth of the wound;
3) при перерисовывании маркер может оставить слишком жирный контур, из-за чего точность измерения снижается;3) when redrawing, the marker may leave a too bold outline, due to which the measurement accuracy decreases;
4) метод не дает информации о характере раневого процесса.4) the method does not provide information about the nature of the wound healing process.
Бактериологический метод («Раны и раневая инфекция» / Под ред. Академика АМН СССР проф. М.И.Кузина и проф. Б.М.Костючонок.- М.: Москва, 1981. - С.187-193.) включает в себя качественное и количественное изучение раневой микрофлоры в динамике раневого процесса, идентификацию возбудителя инфекции и определение его чувствительности к антибиотикам.The bacteriological method ("Wounds and wound infection" / Ed. By Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR, Prof. M.I. Kuzin and Prof. B.M. Kostyuchonok.- M .: Moscow, 1981. - P.187-193.) Includes a qualitative and quantitative study of the wound microflora in the dynamics of the wound process, identification of the pathogen of infection and determination of its sensitivity to antibiotics.
Качественное определение микрофлоры производится следующим образом. Хирург стерильным тампоном производит мазок со стенок раны и помещает этот тампон в питательную среду. Затем материал транспортируется в бактериологическую лабораторию, где производится культивирование микроорганизмов на питательных средах, выращиваются их колонии. Затем производится идентификация микроорганизмов под световым микроскопом. При необходимости определяются биохимические свойства микроорганизмов, их ферментативная активность и определяется их чувствительность к антибиотикам. Весь этот процесс осуществляется в течение 2-4 суток.Qualitative determination of microflora is as follows. The surgeon makes a swab from the walls of the wound with a sterile swab and places the swab in a growth medium. Then the material is transported to a bacteriological laboratory, where microorganisms are cultured on nutrient media, their colonies are grown. Then microorganisms are identified under a light microscope. If necessary, the biochemical properties of microorganisms are determined, their enzymatic activity, and their sensitivity to antibiotics is determined. This whole process is carried out within 2-4 days.
В настоящее время считается недостаточным определение качественного микробиологического исследования и рекомендуется проводить количественную оценку микроорганизмов из тканей, образующих стенки раны. Для этого во время операции иссекается участок ткани на всю глубину раны. Полученный материал растирают в ступке со стерильным изотоническим раствором хлорида натрия из расчета 1:10 и далее готовят десятикратные разведения, которые засевают на чашки с питательной средой. После суточной инкубации при температуре 37ºC и суточной - при комнатной температуре проводят количественный учет выросших колоний в различных разведениях и вычисляют среднее количество микробов в пересчете на 1 г ткани.At present, it is considered insufficient to determine a qualitative microbiological study and it is recommended to conduct a quantitative assessment of microorganisms from the tissues forming the wound walls. To do this, during the operation, a section of tissue is excised to the entire depth of the wound. The resulting material is ground in a mortar with a sterile isotonic sodium chloride solution at a rate of 1:10, and then ten-fold dilutions are prepared, which are inoculated on plates with nutrient medium. After daily incubation at a temperature of 37ºC and daily at room temperature, the grown colonies are quantified in various dilutions and the average number of microbes is calculated in terms of 1 g of tissue.
Недостатки:Disadvantages:
1) метод не позволяет оценить направленность раневого процесса, так как на протяжении всего периода лечения с раны могут выделяться патогенные микроорганизмы. При этом количество микроорганизмов в динамике чаще всего уменьшается и микрофлора переходит в латентную фазу;1) the method does not allow to evaluate the direction of the wound process, since pathogenic microorganisms can be released from the wound throughout the entire treatment period. Moreover, the number of microorganisms in dynamics most often decreases and the microflora passes into the latent phase;
2) процесс проведения микробиологических исследований трудоемок;2) the process of conducting microbiological studies is laborious;
3) результаты микробиологических исследований становятся известны клиницисту только через 2-3 суток.3) the results of microbiological studies become known to the clinician only after 2-3 days.
Наиболее близким к заявляемому способу является способ цитологического исследования отпечатков с раневой поверхности, который позволяет оценить клеточные изменения, закономерно возникающие в течение раневого процесса (Камаев М.Ф. Инфицированная рана и ее лечение. - М., 1970. - 159 с. - С.57-82). Этот метод в настоящее время является неотъемлемой процедурой для объективной диагностики стадии раневого процесса.Closest to the claimed method is a method of cytological examination of prints from the wound surface, which allows you to evaluate cellular changes that naturally occur during the wound process (Kamaev MF Infected wound and its treatment. - M., 1970. - 159 S. - C .57-82). This method is currently an integral procedure for an objective diagnosis of the stage of the wound process.
В основе метода лежит изготовление мазка, содержащего клетки со стенок раны, посредством приготовления отпечатков со стенки раны на стекло либо изготовления мазка из содержимого соскоба со стенок и дна раны. Мазки высушиваются на воздухе, фиксируются этиловым спиртом и окрашиваются по Романовскому-Гимза. После высыхания мазки подвергаются микроскопии в режимах: окуляр 15 - объектив 8 и окуляр 10 - объектив 90.The method is based on the production of a smear containing cells from the walls of the wound, by preparing prints from the wall of the wound on glass or by making a smear from the contents of the scraping from the walls and the bottom of the wound. Smears are dried in air, fixed with ethyl alcohol and stained according to Romanovsky-Giemsa. After drying, smears are subjected to microscopy in the following modes: eyepiece 15 - lens 8 and eyepiece 10 - lens 90.
М.Ф.Камаев выделяет следующие периоды заживления раны вторичным натяжением: I - ранний период; II - дегенеративно-воспалительный период; III - регенеративный период, в пределах последнего выделяется первая, вторая и третья фазы. Данная классификация позволяет детально описать цитологическую картину ран в течение раневого процесса. В ранний период в цитограмме преобладают клетки нормальной крови и фибрин. В дегенеративно-воспалительный период в цитограмме преобладают полиморфно-ядерные лейкоциты, большей частью дегенеративно измененные, эозинофилы, не детрит, единичные лимфоциты; иногда встречаются тучные клетки, макрофаги, гигантские клетки. В первой фазе регенеративного периода в цитограмме выявляются малоизмененные полиморфноядерные лейкоциты в значительном или умеренном количестве, полибласты (3-5 в поле зрения). Во второй фазе регенеративного периода в цитограмме продолжается дальнейшее снижение числа лейкоцитов, их фрагментация, появляются клетки типа фибробластов и макрофагов. В третьей фазе регенеративного периода полиморфноядерных лейкоцитов мало, клеточные элементы представлены в основном профибробластами, обнаруживаются волокнистые структуры.MF Kamaev distinguishes the following periods of wound healing by secondary intention: I - early period; II - degenerative-inflammatory period; III - the regenerative period, within the limits of the last the first, second and third phases are allocated. This classification allows you to describe in detail the cytological picture of wounds during the wound process. In the early period, normal blood cells and fibrin predominate in the cytogram. In the degenerative-inflammatory period, polymorphic nuclear leukocytes predominate in the cytogram, for the most part degeneratively altered, eosinophils, non-detritus, single lymphocytes; mast cells, macrophages, giant cells are sometimes found. In the first phase of the regenerative period, unchanged polymorphonuclear leukocytes in significant or moderate numbers, polyblasts (3-5 in the field of vision) are detected in the cytogram. In the second phase of the regenerative period, a further decrease in the number of leukocytes, their fragmentation continues in the cytogram, cells such as fibroblasts and macrophages appear. In the third phase of the regenerative period, there are few polymorphonuclear leukocytes, cellular elements are mainly represented by profibroblasts, fibrous structures are detected.
Таким образом, исследуя цитограммы в динамике, можно судить о направленности раневого процесса.Thus, examining cytograms in dynamics, one can judge the direction of the wound process.
Недостатки:Disadvantages:
1) необходимость изготовления 3-5 цитограмм из разных участков раны для оценки раневого процесса в случае его неоднородности;1) the need to produce 3-5 cytograms from different sections of the wound to assess the wound process in case of heterogeneity;
2) необходимость специализации врача-лаборанта для оценки раневого процесса;2) the need for specialization of a laboratory doctor to assess the wound process;
3) дополнительная нагрузка на членов хирургической бригады (изготовление отпечатков, их сушка и фиксация).3) additional load on the members of the surgical team (making prints, drying and fixing them).
4) нередко мазки получаются неинформативными из-за невозможности дифференцировать клеточные элементы.4) often smears are uninformative due to the inability to differentiate cellular elements.
Задача изобретения заключается в создании объективного способа оценки течения раневого процесса и эффективности лечения кожных ран различного генеза, который позволяет сократить сроки диагностики.The objective of the invention is to create an objective way to assess the course of the wound healing process and the effectiveness of treatment of skin wounds of various origins, which allows to reduce the time of diagnosis.
Поставленная задача достигается способом, включающим забор биологического материала из раны в течение раневого процесса и его исследование. Берут соскобы с поверхности раны, из которых выделяют ДНК с помощью реагента ДНК-ЭКСПРЕСС с красителем для электрофоретической детекции. Полученный супернатант, содержащий ДНК, вносят в лунку длиной 4 мм 2% агарозного геля с бромистым этидием и подвергают горизонтальному электрофорезу. На полученных электрофореграммах измеряют длину полученных треков, которую соотносят с длиной лунки в качестве стандарта и между собой. При длине трека, превышающей длину лунки в 4,7-5,6 раз и более, диагностируют I фазу раневого процесса. При длине трека, превышающей длину лунки в 3,8-4,6 раз, диагностируют II фазу раневого процесса. При длине трека, превышающей длину лунки в 2,6-3,7 раза и менее, диагностируют III фазу раневого процесса. Укорочение длины трека в динамике раневого процесса оценивают как положительное течение заживления раны, лечение считают эффективным. Удлинение трека или отсутствие изменений его длины в динамике раневого процесса оценивают как отрицательное течение заживления раны, лечение считают неэффективным и изменяют тактику лечения.The problem is achieved by a method including the collection of biological material from the wound during the wound process and its study. Scrapes are taken from the surface of the wound, from which DNA is isolated using the DNA EXPRESS reagent with a dye for electrophoretic detection. The obtained DNA-containing supernatant was added to a 4 mm long 2% ethidium bromide agarose gel well and subjected to horizontal electrophoresis. On the obtained electrophoregrams, the length of the obtained tracks is measured, which is correlated with the length of the hole as a standard and with each other. With a track length exceeding the length of the hole 4.7-5.6 times or more, the first phase of the wound healing process is diagnosed. With a track length exceeding the hole length by 3.8-4.6 times, the II phase of the wound healing process is diagnosed. With a track length exceeding the length of the hole by 2.6-3.7 times or less, the III phase of the wound healing process is diagnosed. Shortening the length of the track in the dynamics of the wound process is assessed as a positive course of wound healing, treatment is considered effective. The elongation of the track or the absence of changes in its length in the dynamics of the wound process is evaluated as a negative course of wound healing, treatment is considered ineffective and the treatment tactics are changed.
Новизна изобретения.The novelty of the invention.
- Берут соскобы с поверхности раны, из которых выделяют ДНК с помощью реагента ДНК-ЭКСПРЕСС с красителем для электрофоретической детекции.- Take scrapings from the surface of the wound, from which DNA is isolated using DNA EXPRESS reagent with a dye for electrophoretic detection.
- Полученный супернатант, содержащий ДНК, вносят в лунку длиной 4 мм 2% агарозного геля с бромистым этидием и подвергают горизонтальному электрофорезу.- The obtained supernatant containing DNA is added to a 4 mm long 2% ethidium bromide agarose gel well and subjected to horizontal electrophoresis.
- На полученных электрофореграммах измеряют длину полученных треков, которую соотносят с длиной лунки и между собой. При длине трека, превышающей длину лунки в 4,7-5,6 раз и более, диагностируют I фазу раневого процесса. При длине трека, превышающей длину лунки в 3,8-4,6 раз, диагностируют II фазу раневого процесса. При длине трека, превышающей длину лунки в 2,6-3,7 раза и менее, диагностируют III фазу раневого процесса.- On the obtained electrophoregrams, the length of the obtained tracks is measured, which is correlated with the length of the hole and with each other. With a track length exceeding the length of the hole 4.7-5.6 times or more, the first phase of the wound healing process is diagnosed. With a track length exceeding the hole length by 3.8-4.6 times, the II phase of the wound healing process is diagnosed. With a track length exceeding the length of the hole by 2.6-3.7 times or less, the III phase of the wound healing process is diagnosed.
- Укорочение длины трека в динамике раневого процесса оценивают как положительное течение заживления раны, лечение считают эффективным. Удлинение трека или отсутствие изменений его длины в динамике раневого процесса оценивают как отрицательное течение заживления раны, лечение считают неэффективным и изменяют тактику лечения.- Shortening the length of the track in the dynamics of the wound process is assessed as a positive course of wound healing, treatment is considered effective. The elongation of the track or the absence of changes in its length in the dynamics of the wound process is evaluated as a negative course of wound healing, treatment is considered ineffective and the treatment tactics are changed.
В патентной и научной литературе отсутствуют сведения об аналогичном способе, обладающем такой же совокупностью признаков.In the patent and scientific literature there is no information about a similar method with the same set of features.
Совокупность существенных признаков изобретения позволяет получить новый технический результат, заключающийся в быстрой и объективной оценке течения раневого процесса, на основании которого выбираются средства и методы лечения, своевременно производится корректировка лечебного воздействия, что улучшает качество лечения и сокращает его сроки, особенно в случае длительно незаживающих ран.The set of essential features of the invention allows to obtain a new technical result, which consists in a quick and objective assessment of the course of the wound healing process, on the basis of which the means and methods of treatment are selected, the therapeutic effect is timely adjusted, which improves the quality of treatment and shortens its time, especially in the case of long-term non-healing wounds .
Известно, что в основе регенерации ран лежит баланс между конкурирующими процессами - пролиферации, дифференцировки и гибели клеток. Недавние исследования продемонстрировали, что апоптотическая гибель играет основную роль при заживлении кожных ран, регулируя как воспалительную фазу заживления ран, так и регенеративные процессы. Апоптоз и некроз клеток могут быть выявлены по картине повреждения ДНК. При апоптозе ДНК расщепляется в местах, связывающих отдельные нуклеосомы, что приводит к возникновению большого количества фрагментов, длина которых кратна 200 п.н. Эти фрагменты ДНК выявляются в виде "лесенки" при электрофорезе ДНК, при некрозе же длина фрагментов деградированной ДНК варьирует, и электрофореграммы ДНК имеют "размазанный" характер ее миграции. Электрофоретический метод выявления деградации ДНК погибших клеток описан (Н.Н.Мушкамбаров, С.Л.Кузнецов Молекулярная биология. Учебное пособие для студентов медицинских вузов. - М: ООО «Медицинское информационное агентство», 2003. - 544 с. - С.460-461.). Метод не использовался для ДНК, выделяемой с кожных ран, для оценки течения раневого процесса и для оценки эффективности лечения.It is known that the basis of wound regeneration is the balance between competing processes - proliferation, differentiation and cell death. Recent studies have shown that apoptotic death plays a major role in the healing of skin wounds, regulating both the inflammatory phase of wound healing and regenerative processes. Apoptosis and cell necrosis can be detected by a DNA damage picture. During apoptosis, DNA is cleaved at sites that bind individual nucleosomes, which leads to the appearance of a large number of fragments, the length of which is a multiple of 200 bp. These DNA fragments are detected as a "ladder" during DNA electrophoresis, while necrosis, the length of fragments of degraded DNA varies, and DNA electrophoregrams have a "smeared" nature of its migration. The electrophoretic method for detecting DNA degradation of dead cells has been described (N.N. Mushkambarov, S.L. Kuznetsov, Molecular Biology. A manual for students of medical universities. - M: Medical Information Agency LLC, 2003. - 544 p. - P.460 -461.). The method was not used for DNA secreted from skin wounds, to assess the course of the wound process and to evaluate the effectiveness of treatment.
Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.
Забирается материал из раны путем соскоба при первичном обращении, а затем через 3-5 суток, когда под влиянием лечения должны произойти положительные изменения в ране, а также при смене метода лечения, например при долго незаживающих и хронических ранах. Соскоб проводят после туалета раны по ее дну крестообразно с последующим окаймляющим движением по стенкам или периферии урогенитальным зондом или ложкой Фолькмана. Взятый материал помещают в пластиковую одноразовую пробирку с крышкой и замком и проводят выделение ДНК из собранного материала с помощью ДНК-ЭКСПРЕСС (производство НПФ «Литех», Москва), реагента для выделения ДНК из биопроб с красителем. Этот реагент наливают в пробирки предварительно в количестве 300 мкл согласно инструкции использования (www.lytech.ru). Пробирки с биоматериалом либо сразу используют для дальнейшего исследования, либо замораживают при -20ºC до использования. Для исследования содержимое пробирок размораживают, пробирку встряхивают на вортексе в течение 10-15 сек и помещают в твердотельный термостат на 20-30 минут при 98-99ºC для выделения ДНК. Затем пробирку центрифугируют при 12000 об/мин в течение 30 секунд, забирают около 25-30 мкл супернатанта с выделенной ДНК и заливают в лунку размером 4 мм × 1 мм 2% агарозного геля на 20 мл ТАЕ-буфера с предварительно добавленными в гель 10 мкл 1% бромистого этидия. Результат регистрируют после горизонтального электрофореза ДНК, контролируя его длительность визуально по движению полосы красителя, которая должна пройти от лунки 1,5 см в течение 15 минут. После электрофореза гель помещают на стекло УФ-трансиллюминатора и анализируют результат в проходящем ультрафиолетовом свете с длиной волны 310 нм. На электрофореграммах выявляют свечение ДНК в виде отходящих от лунок треков разной длины, которые сопоставляют между собой. Длину треков и их укорочение, удлинение или отсутствие изменений длины оценивают визуально или электрофореграммы фотографируют и снимки переносят в персональный компьютер, где длину треков измеряют, соотносят с длиной лунки в качестве стандартной длины, и треки сравнивают между собой. При длине трека, превышающей длину лунки в 4,7-5,6 раз и более, диагностируют I фазу раневого процесса, при длине трека, превышающей длину лунки в 3,8-4,6 раз, диагностируют II фазу раневого процесса, при длине трека, превышающей длину лунки в 2,6-3,7 раза и менее, диагностируют III фазу раневого процесса. Укорочение трека ДНК в динамике исследования говорит о положительном течении раневого процесса и об эффективности проводимого лечения. Удлинение трека или отсутствие изменений его длины свидетельствуют о неэффективности проводимого лечения, о затяжном характере раневого процесса, что говорит в пользу изменения лечебной тактики. Проведение исследования занимает около 1 часа.Material is removed from the wound by scraping during initial treatment, and then after 3-5 days, when under the influence of treatment positive changes in the wound should occur, as well as when changing the treatment method, for example, for long non-healing and chronic wounds. Scraping is carried out after the toilet of the wound along its bottom crosswise with subsequent bordering movement on the walls or periphery with a urogenital probe or Volkman's spoon. The taken material is placed in a plastic disposable test tube with a cap and a lock and DNA is extracted from the collected material using DNA EXPRESS (production of NPF Litekh, Moscow), a reagent for the extraction of DNA from a bioassay with a dye. This reagent is pre-poured into test tubes in an amount of 300 μl according to the instructions for use ( www.lytech.ru ). Tubes with biomaterial are either immediately used for further research or frozen at -20ºC until use. For research, the contents of the tubes are thawed, the tube is shaken on a vortex for 10-15 seconds and placed in a solid-state thermostat for 20-30 minutes at 98-99ºC for DNA isolation. The tube is then centrifuged at 12,000 rpm for 30 seconds, about 25-30 μl of the supernatant with the extracted DNA is taken and poured into a 4 mm × 1 mm well of 2% agarose gel per 20 ml of TAE buffer with 10 μl previously added to the
Было обследовано 49 пациентов в возрасте от 18 до 74 лет обоего пола, обратившихся в Центр амбулаторной хирургии МЛПУ ГКБ №2 г.Новокузнецка по поводу первичных и вторичных гнойных ран - фурункулов, карбункулов, абсцессов, флегмон, инфицированных ран, трофических язв, пролежней. Метод отработан на 133 соскобах из вышеперечисленных типов ран. Для статистического анализа (результаты представлены в таблице 1) использованы параметры электрофореграмм ДНК, выделенных из 23 соскобов из ран, находящихся в I фазе раневого процесса (наличие гнойного экссудата, влажного некроза и фибринозных наложений), 28 соскобов во II фазе раневого процесса (отсутствие гноения, гранулирование раны); 19 соскобов в III фазе раневого процесса (полное очищение раны, ее контракция, выраженная краевая эпителизация и признаки формирования рубца). Для оценки течения раневого процесса использовался количественный показатель - длина трека относительно длины лунки (Д). Изменение Д между фазами раневого процесса (∆Д) оценивали по результатам, полученным в динамическом наблюдении раневого процесса у нескольких пациентов (результаты представлены в таблице 2).We examined 49 patients aged 18 to 74 years of both sexes who applied to the Center for Outpatient Surgery of the MLPU GKB No. 2 of the city of Novokuznetsk for primary and secondary purulent wounds - boils, carbuncles, abscesses, phlegmon, infected wounds, trophic ulcers, bedsores. The method was tested on 133 scrapings from the above types of wounds. For statistical analysis (the results are shown in Table 1), the parameters of DNA electrophoregrams were used, isolated from 23 scrapings from wounds located in the first phase of the wound process (the presence of purulent exudate, wet necrosis and fibrinous overlay), 28 scrapings in the second phase of the wound process (absence of suppuration granulating wounds); 19 scrapings in the III phase of the wound process (complete cleansing of the wound, its contraction, pronounced marginal epithelization and signs of scar formation). To assess the course of the wound healing process, a quantitative indicator was used - the length of the track relative to the length of the hole (D). The change in D between the phases of the wound healing process (ΔE) was evaluated by the results obtained in the dynamic observation of the wound healing process in several patients (the results are presented in table 2).
Стандартная статистическая обработка включала подсчет средних арифметических величин (М), стандартной ошибки среднего (SEM, standard error of mean) и 95%-ного доверительного интервала значений (95% CI, 95% confidence interval). Значимость различий полученных количественных показателей оценивали с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимался равным 0,05.Standard statistical processing included calculation of arithmetic mean values (M), standard error of mean (SEM) and 95% confidence interval of values (95% CI, 95% confidence interval). The significance of differences in the obtained quantitative indicators was evaluated using the non-parametric Mann-Whitney test. The critical level of significance in testing statistical hypotheses in this study was assumed to be 0.05.
Результаты измерения длины треков ДНК в различные фазы раневого процесса представлены в таблице 1.The results of measuring the length of DNA tracks in various phases of the wound healing process are presented in table 1.
Результаты показывают, что длина трека ДНК превосходит длину лунки в I фазе раневого процесса, в среднем, в 5 раз, при этом 95% значений укладываются в интервал 4,7-5,6. Во II фазе длина трека ДНК больше длины лунки в среднем в 4 раза, при этом 95% полученных значений были в интервале 3,8-4,6. В III фазе длина треков была минимальна, т.к. в среднем превышала длину лунки только в 3 раза, а 95% полученных значений были в интервале 2,6-3,7.The results show that the length of the DNA track exceeds the length of the hole in phase I of the wound process, on average, 5 times, while 95% of the values fit in the range 4.7-5.6. In phase II, the length of the DNA track is 4 times longer than the hole on average, while 95% of the obtained values were in the range of 3.8-4.6. In phase III, the length of the tracks was minimal, because on average exceeded the length of the hole only 3 times, and 95% of the obtained values were in the range of 2.6-3.7.
В таблице 2 показаны результаты сравнения изменения длины треков между фазами раневого процесса. Они показывают, что наибольшее укорочение длины треков образцов ДНК наблюдалось в III фазе по сравнению с I (примерно на 50%) и со II фазой (около 40%). Во II фазе по сравнению с I фазой укорочение составило в среднем около 20%.Table 2 shows the results of comparing the changes in the length of tracks between the phases of the wound healing process. They show that the greatest shortening of the length of the tracks of DNA samples was observed in phase III compared with phase I (about 50%) and phase II (about 40%). In phase II, in comparison with phase I, shortening averaged about 20%.
Следовательно, по мере последовательного прохождения фаз раневого процесса, т.е. при его положительной динамике и эффективном лечении треки образцов ДНК, выделенных из ран, на электрофореграммах укорачиваются.Therefore, as the phases of the wound healing process progressively progress, i.e. with its positive dynamics and effective treatment, tracks of DNA samples isolated from wounds are shortened on electrophoregrams.
Таким образом, положительная динамика раневого процесса сопровождается количественными изменениями фракции ДНК, выделенной с поверхности ран. Эти изменения отражаются на электрофореграммах образцов ДНК в укорочении соответствующих треков, на 10% и более процентов, что может свидетельствовать об уменьшении количества низкомолекулярных фрагментов ДНК в образцах ДНК, т.е. о снижении степени разрушения клеток и ДНК, что сопряжено с уменьшением воспалительных и усилением регенеративных процессов, максимальных в III фазе раневого процесса.Thus, the positive dynamics of the wound process is accompanied by quantitative changes in the fraction of DNA isolated from the surface of the wounds. These changes are reflected in the electrophoregrams of DNA samples in the shortening of the corresponding tracks, by 10% or more percent, which may indicate a decrease in the number of low molecular weight DNA fragments in DNA samples, i.e. to reduce the degree of destruction of cells and DNA, which is associated with a decrease in inflammatory and increased regenerative processes, maximum in the III phase of the wound process.
Изобретение иллюстрируется фотографиями фиг.1-фиг.5, на которых представлены результаты эффективного и неэффективного лечения ран различного генеза и локализации.The invention is illustrated by photographs of figure 1-figure 5, which presents the results of effective and ineffective treatment of wounds of various origins and localization.
На фиг.1 представлена фотография электрофореграммы образцов ДНК, выделенных из соскоба диабетической язвы пятки.Figure 1 presents a photograph of an electrophoregram of DNA samples isolated from scraping a diabetic heel ulcer.
На фиг.2 представлены фотографии электрофореграмм образцов ДНК, выделенных из соскоба укушенной раны предплечья, осложненной рожистым воспалением.Figure 2 presents photographs of electrophoregrams of DNA samples isolated from scraping a bitten wound of the forearm, complicated by erysipelas.
На фиг.3 представлены фотографии электрофореграмм образцов ДНК, выделенных из соскоба трофической язвы.Figure 3 presents photographs of electrophoregrams of DNA samples isolated from scraping a trophic ulcer.
На фиг.4 представлены фотографии электрофореграмм образцов ДНК, выделенных из соскоба диабетической некрофлегмоны.Figure 4 presents photographs of electrophoregrams of DNA samples isolated from scrapings of diabetic necroflegmon.
На фиг.5 представлены фотографии электрофореграмм образцов ДНК, выделенных из соскоба с диабетической язвы подошвы.Figure 5 presents photographs of electrophoregrams of DNA samples isolated from scraping from a diabetic sole ulcer.
Треки образцов ДНК - 1, лунки для внесения образцов ДНК - 2.Tracks of DNA samples - 1, wells for introducing DNA samples - 2.
Пример 1. Больная Б., 1952 г.р. Обратилась в хирургический кабинет 17.09.09 после лечения в хирургическом стационаре горбольницы №22 (г.Новокузнецк) по поводу наличия трофической язвы в области пятки левой стопы (после вскрытия некрофлегмоны). Продолжительность существования язвы на пятке 2 месяца. При обращении на левой пятке дефект кожи 2×1 см, края раны слегка подрыты. Стенки и дно раны выполнены водянистыми синюшными грануляциями, некротических тканей нет, признаков эпителизации и рубцевания нет. Такая картина позволила сделать заключение, что имеется II фаза раневого процесса. При первичном обращении у больной выполнен соскоб из раны для выявления ДНК (Фиг.1, А). Определен ярко светящийся трек, длина которого превышает длину лунки в 4,6 раза. Назначено лечение: перевязки с мазями, содержащими стимуляторы регенерации: метилурацил, солкосерил. Больная направлена в физиоотделение для проведения курса низкоэнергетической лазерной терапии. При повторном осмотре после окончания лазеротерапии 29.09.09 выявлено, что грануляции стали плотнее, красного цвета, рана несколько сократилась и имеет размеры 1,5×0,8 см. Данная картина раны позволила сделать заключение, что продолжается II фаза раневого процесса. Произведен соскоб со стенок раны для выявления ДНК (Фиг.1, Б). Выявлено укорочение трека на 5% по сравнению с предыдущим исследованием, длина трека превышает длину лунки в 4,38 раз. С целью стимуляции процесса регенерации больной выполнена поясничная блокада слева 0,25% раствором новокаина в количестве 100 мл, в дальнейшем продолжались редкие перевязки с применением мазей со стимуляторами регенерации. При осмотре 02.11.09 язва имеет щелевидную форму, 1×0,2 см, то есть имеются выраженные явления раневой контракции, грануляции яркие, имеются признаки краевой эпителизации. Данная картина расценена как III фаза раневого процесса. Произведен соскоб из раны на ДНК (Фиг.1, В). Выявлено укорочение трека на 38% по сравнению с предыдущим исследованием, трек превышает длину лунки в 2,7 раза. 10.11.09 язва полностью зажила, больная выписана под наблюдение эндокринолога.Example 1. Patient B., born in 1952 I applied to the surgical room on 09.17.09 after treatment in the surgical hospital of the city hospital No. 22 (Novokuznetsk) about the presence of a trophic ulcer in the heel of the left foot (after opening the necroflegmon). The duration of an ulcer on the heel is 2 months. When handling on the left heel, a skin defect of 2 × 1 cm, the edges of the wound are slightly undercut. The walls and bottom of the wound are made with watery bluish granulations, there are no necrotic tissues, there are no signs of epithelization and scarring. This picture allowed us to conclude that there is a second phase of the wound healing process. At the initial treatment, the patient made scraping from the wound to detect DNA (Figure 1, A). A brightly luminous track was determined, the length of which exceeds the length of the hole by 4.6 times. Prescribed treatment: dressings with ointments containing regeneration stimulants: methyluracil, solcoseryl. The patient was sent to the physiotherapy department for a course of low-energy laser therapy. When re-examined after the end of laser therapy on September 29, 2009, it was revealed that the granulations became denser, red, the wound was slightly reduced and has dimensions 1.5 × 0.8 cm. This picture of the wound allowed us to conclude that the second phase of the wound process is continuing. Produced scraping from the walls of the wound to detect DNA (Figure 1, B). A shortening of the track by 5% was revealed in comparison with the previous study; the track length exceeds the hole length by 4.38 times. In order to stimulate the patient’s regeneration process, a lumbar blockade on the left with a 0.25% solution of novocaine in an amount of 100 ml was performed, later rare dressings with the use of ointments with regeneration stimulants continued. On examination 02.11.09, the ulcer has a slit-like shape, 1 × 0.2 cm, that is, there are pronounced phenomena of wound contraction, granulation is bright, there are signs of marginal epithelization. This picture is regarded as the III phase of the wound healing process. Produced scraping from a wound on DNA (Figure 1, B). A shortening of the track by 38% was revealed in comparison with the previous study; the track exceeds the hole length 2.7 times. 10.11.09 the ulcer has completely healed, the patient was discharged under the supervision of an endocrinologist.
Пример 2. Больной П., 1966 г.р. Обратился в хирургический кабинет 02.09.10. по поводу укушенной раны левого предплечья через 4 дня после травмы. Клинически выявлены выраженные признаки воспаления: гиперемия кожи вокруг раны, отек, рана на левом предплечье неправильной формы 1,5×0,5 см, выделение гнойного экссудата, лихорадка с повышением температуры тела до 39ºC. Данная клиническая картина позволяет говорить о наличии I фазы раневого процесса. Взят соскоб для выявления ДНК (Фиг.2, А). На электрофореграмме ДНК ярко светящийся трек, длина которого превышает длину лунки в 5,3 раза. Произведена хирургическая обработка раны: рассечение, некрэктомия, вскрытие затеков, дренирование. Назначена антибиотикотерапия. Проводились ежедневные перевязки. Рана очистилась, температура тела нормализовалась. Рана постепенно стала заполняться грануляциями, появились признаки контракции, что клинически расценено как II фаза раневого процесса. 10.09.10, через 8 дней после начала лечения, произведен электрофорез выделенной из раны ДНК (Фиг.2, Б). Длина трека в 3,1 раз превышает длину лунки, что соответствует III фазе. Укорочение трека ДНК в III фазе по сравнению с I фазой составило 42%. Данные изменения позволяют сделать заключение, что лечение больного адекватное.Example 2. Patient P., born in 1966 Turned to the surgical room 02.09.10. about a bite wound of the left forearm 4 days after the injury. Pronounced signs of inflammation were clinically revealed: skin hyperemia around the wound, edema, wound on the left forearm of irregular shape 1.5 × 0.5 cm, purulent exudate secretion, fever with fever up to 39ºC. This clinical picture allows us to talk about the presence of phase I of the wound process. A scraping was taken to detect DNA (Figure 2, A). On the DNA electrophoregram, a brightly glowing track, the length of which exceeds the length of the hole by 5.3 times. Surgical treatment of the wound was made: dissection, necrectomy, opening of sagging, drainage. Prescribed antibiotic therapy. Conducted daily dressings. The wound cleansed, body temperature returned to normal. The wound gradually began to fill up with granulations, signs of contraction appeared, which is clinically regarded as phase II of the wound process. September 10, 10, 8 days after the start of treatment, electrophoresis of DNA extracted from the wound was performed (Figure 2, B). The track is 3.1 times longer than the hole, which corresponds to phase III. The shortening of the DNA track in phase III compared to phase I was 42%. These changes allow us to conclude that the treatment of the patient is adequate.
Пример 3. Больной М., 1936 г.р. обратился в хирургический кабинет с жалобами на наличие трофической язвы на левой голени в течение 4-х лет. Страдает варикозным расширением вен. На левой голени в нижней трети на внутренней поверхности язва неправильной формы. Кожные покровы вокруг язвы гиперпигментированы, имеется индурация подкожной клетчатки, признаки экзематизации. На поверхности язвы некротический налет, язва резко болезненна. Д-з: Варикозное расширение вен левой голени, стадия декомпенсации с осложнениями: трофическая язва, дерматоцеллюлит, микробная экзема. Взят соскоб для электрофореза ДНК (Фиг.3, А). Трек ДНК превышал длину лунки в 4,3 раза, что соответствует II фазе раневого процесса.Example 3. Patient M., born in 1936 appealed to the surgical room with complaints of the presence of a trophic ulcer on the left lower leg for 4 years. Suffers from varicose veins. On the left lower leg in the lower third on the inner surface of the ulcer of irregular shape. The skin around the ulcer is hyperpigmented, there is an induction of subcutaneous tissue, signs of eczematization. On the surface of the ulcer necrotic plaque, the ulcer is sharply painful. Dz: Varicose veins of the left leg, stage of decompensation with complications: trophic ulcer, dermatocellulitis, microbial eczema. A scraping was taken for DNA electrophoresis (Figure 3, A). The DNA track exceeded the length of the hole by 4.3 times, which corresponds to phase II of the wound process.
Больному назначена флеботропная терапия, эластическая компрессия, учитывая нетолерантность его к оперативному лечению из-за сопутствующих заболеваний: гипертоническая болезнь 3 ст, ожирение 3 ст., двусторонний коксартроз II-III ст. Для стимуляции процесса очищения язвы и подавления воспалительного процесса выполнена поясничная блокада 0,25% раствором новокаина 100,0 мл слева. После контрольного взятия материала с язвы через 1 час после блокады (Фиг.2, Б) длина трека ДНК в 3,7 раза превышала длину лунки. Укорочение трека ДНК после блокады составило 15%. Это свидетельствует об эффективности лечебного воздействия на рану поясничной блокады уже через 1 час после ее проведения, хотя клинических проявлений улучшения еще не отмечалось. Клинические проявления эффективности действия блокады проявились через три дня, когда произошел лизис некроза, поверхность язвы покрылась яркими сочными грануляциями. Такое яркое проявление действия лечебного фактора позволило применить его курсом.The patient was prescribed phlebotropic therapy, elastic compression, given his intolerance to surgical treatment due to concomitant diseases: hypertension 3 tbsp, obesity 3 tbsp., Bilateral coxarthrosis II-III tbsp. To stimulate the process of cleansing an ulcer and suppressing the inflammatory process, a lumbar blockade of 0.25% novocaine solution 100.0 ml was made on the left. After the control taking material from the
Пример 4. Больной П., 1947 г.р. обратился в хирургический кабинет 02.04.11. после выписки из хирургического отделения, где он лечился в течение 1 месяца по поводу диабетической некрофлегмоны правой пятки. Выписан при наличии клинических проявлений I фазы раневого процесса - проникающая язва на правой пятке овальной формы 2×1 см, отек, наличие некротических масс и гнойного отделяемого из раны. У больного взят материал для электрофореза ДНК (Фиг.4, А). Трек плохо окрашен, превышает длину лунки в 4,7 раза. Больному выполнена поясничная новокаиновая блокада 0,25% раствором новокаина 100,0 мл справа. Через 1 час материал для электрофореза ДНК взят повторно (Фиг.4, Б). На электрофореграмме обращает внимание более яркое свечение трека, что говорит о провокации воспаления проведенной блокадой, т.е. о сдвиге раневого процесса в положительную сторону, при этом длина трека ДНК относительно длины лунки составила 4,4. Положительная динамика позволила применить поясничную новокаиновую блокаду в виде курса. Через 5 дней, в течение которых выполнялись также ежедневные перевязки с гиперосмолярными растворами (10% раствор NaCl), больному в рамках динамического контроля выполнено очередное исследование электрофореза ДНК (Фиг.4, В). Клинически при этом отмечалось очищение раны от некротических масс и выполнение раны грануляциями. На электрофореграмме выявилось яркое свечение трека, длина трека сократилась, превысив длину лунки в 4 раза. Больному повторно выполнена поясничная блокада справа в прежней дозировке и через 1 час произведено контрольное взятие материала на ДНК (Фиг.4, Г). Длина трека сократилась, и отношение его длины к длине лунки составило 3. В дальнейшем проводились, наряду с блокадами, перевязки с использованием мазей на гидрофильной основе (левомеколь, левосин), гигиенические ванны. Рана стала поверхностной и заметно меньше. 19.04.11 выполнено контрольное исследование ДНК из раны (Фиг.4, Д). Свечение трека стало менее ярким, его длина сократилась до 2,5 относительно лунки, что было сопряжено с III фазой раневого процесса.Example 4. Patient P., born in 1947 appealed to the surgical room 04/02/11. after discharge from the surgical department, where he was treated for 1 month for diabetic necroflegmon of the right heel. It was discharged in the presence of clinical manifestations of the first phase of the wound process - a penetrating ulcer on the
Пример 5. Больной С., 1969 г.р., обратился в хирургический кабинет 14.10.10 с жалобами на наличие дефекта кожи на подошве левой стопы. Страдает сахарным диабетом I типа. Дефект кожи существует 2 месяца и не заживает. Объективно: на подошве левой стопы дефект кожи до 1,5 см, овальной формы с ровными краями. Дно раны выполнено грануляционной тканью. Признаков рубцевания и эпителизации нет. Д-з: Проникающая диабетическая язва подошвы левой стопы. Учитывая резистентность процессов данного рода к лечению, решено изучить динамику электрофореграмм ДНК. На Фиг.5, А представлена электрофореграмма ДНК в день обращения до применения лечебных мероприятий. Отношение длины трека к длине лунки составило 3,9. Больному выполнена поясничная новокаиновая блокада 0,25% раствором новокаина 100,0 мл справа с последующим забором материала на ДНК через 1 сутки. Трек ДНК не изменился через сутки после ее проведения (Фиг.5, Б). Через двое суток после блокады трек ДНК остался таким же по длине (Фиг.5, В).Example 5. Patient S., born in 1969, turned to the surgical room on 10/14/10 with complaints of a skin defect on the sole of the left foot. Suffers from type I diabetes. A skin defect exists for 2 months and does not heal. Objectively: on the sole of the left foot, the skin defect is up to 1.5 cm, oval in shape with smooth edges. The bottom of the wound is made of granulation tissue. There are no signs of scarring and epithelization. Dz: Penetrating diabetic ulcer of the sole of the left foot. Given the resistance of this type of process to treatment, it was decided to study the dynamics of DNA electrophoregrams. Figure 5, A presents an electrophoregram of DNA on the day of treatment before the application of therapeutic measures. The ratio of track length to hole length was 3.9. The patient performed lumbar novocaine blockade with a 0.25% solution of novocaine 100.0 ml on the right with subsequent sampling of the material on DNA after 1 day. The DNA track did not change a day after its implementation (Figure 5, B). Two days after the blockade, the DNA track remained the same in length (Figure 5, B).
Таким образом, установлено отсутствие изменения длины трека, что позволило сделать предположение о неэффективности блокады для данного пациента. Далее больному проводились перевязки с гиперосмолярными растворами, с субстанциями, содержащими стимуляторы регенерации, физиолечение с применением низкоэнергетического лазерного излучения (ежедневно, 10 раз). Контрольное исследование ДНК 29.10.10 (Фиг.5, Г) показало, что трек ДНК остался прежним по длине. Клинических признаков заживления раны у больного не было. Таким образом, отсутствие динамики в изменении длины треков ДНК находится в корреляции с клиническими проявлениями и позволяет прогнозировать хроническое течение раневого процесса и отсутствие положительных сдвигов при использовании различных средств местного воздействия.Thus, the absence of a change in the length of the track was established, which allowed us to make an assumption about the inefficiency of the blockade for this patient. Next, the patient was ligated with hyperosmolar solutions, with substances containing regeneration stimulants, physiotherapy using low-energy laser radiation (daily, 10 times). A control study of DNA 10/29/10 (Figure 5, D) showed that the DNA track remained the same in length. The patient had no clinical signs of wound healing. Thus, the lack of dynamics in the change in the length of DNA tracks is in correlation with clinical manifestations and allows us to predict the chronic course of the wound process and the absence of positive changes when using various local agents.
Таким образом, предложенный способ позволяет в максимально короткие сроки определить эффективность проводимых лечебных мероприятий и правильно определить врачебную тактику, выбрать средства и методы лечения, своевременно корректировать лечебное воздействие.Thus, the proposed method allows as soon as possible to determine the effectiveness of the therapeutic measures and correctly determine the medical tactics, choose the means and methods of treatment, timely adjust the therapeutic effect.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011147263/15A RU2478963C1 (en) | 2011-11-21 | 2011-11-21 | Method for estimating clinical course of wound process and clinical effectiveness in skin wounds of various geneses |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011147263/15A RU2478963C1 (en) | 2011-11-21 | 2011-11-21 | Method for estimating clinical course of wound process and clinical effectiveness in skin wounds of various geneses |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2478963C1 true RU2478963C1 (en) | 2013-04-10 |
Family
ID=49152387
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011147263/15A RU2478963C1 (en) | 2011-11-21 | 2011-11-21 | Method for estimating clinical course of wound process and clinical effectiveness in skin wounds of various geneses |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2478963C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2627650C1 (en) * | 2016-09-15 | 2017-08-09 | Частное учреждение образовательная организация высшего образования "Медицинский университет "Реавиз" | Method for wound process course prediction |
| RU2638970C1 (en) * | 2016-09-27 | 2017-12-19 | Наталья Бегиевна Мигачева | Method for material sampling from skin surface for microbiological research for children of first year of life and device for its implementation |
| RU2681118C1 (en) * | 2017-12-29 | 2019-03-04 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for estimating activity of regeneration of full-layer rat skin wound in experiment |
| RU2815141C1 (en) * | 2023-05-30 | 2024-03-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for investigating effectiveness of using biocompatible materials for regeneration of wound defects of oral mucosa |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2146367C1 (en) * | 1997-07-22 | 2000-03-10 | Гуменюк Сергей Евгеньевич | Method for predicting wound development process course |
| RU2233449C1 (en) * | 2003-07-01 | 2004-07-27 | Цымбалов Олег Владимирович | Method for evaluating the flow and prediction for the development of purulent wounds in case of phlegmons in oral area |
-
2011
- 2011-11-21 RU RU2011147263/15A patent/RU2478963C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2146367C1 (en) * | 1997-07-22 | 2000-03-10 | Гуменюк Сергей Евгеньевич | Method for predicting wound development process course |
| RU2233449C1 (en) * | 2003-07-01 | 2004-07-27 | Цымбалов Олег Владимирович | Method for evaluating the flow and prediction for the development of purulent wounds in case of phlegmons in oral area |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ДНК-ЭКСПРЕСС № ФСР2007/00362. Инструкция по применению тест-системы для ПЦР. НПФ «Литех». 16.07.2007 [Найдено 09.10.2012] [он-лайн], Найдено из Интернет: <URL: http://www.lytech.ru/data/file/dnk3.pdf>. Молекулярная клиническая диагностика. Методы: Пер. с англ. / Под ред. С.Херрингтона, Дж.Макги. - М.: Мир, 1999. - 558 с. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2627650C1 (en) * | 2016-09-15 | 2017-08-09 | Частное учреждение образовательная организация высшего образования "Медицинский университет "Реавиз" | Method for wound process course prediction |
| RU2638970C1 (en) * | 2016-09-27 | 2017-12-19 | Наталья Бегиевна Мигачева | Method for material sampling from skin surface for microbiological research for children of first year of life and device for its implementation |
| RU2681118C1 (en) * | 2017-12-29 | 2019-03-04 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for estimating activity of regeneration of full-layer rat skin wound in experiment |
| RU2815141C1 (en) * | 2023-05-30 | 2024-03-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for investigating effectiveness of using biocompatible materials for regeneration of wound defects of oral mucosa |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Woo et al. | A cross-sectional validation study of using NERDS and STONEES to assess bacterial burden | |
| Dąbrowski et al. | Usefulness of C-reactive protein, serum amyloid A component, and haptoglobin determinations in bitches with pyometra for monitoring early post-ovariohysterectomy complications | |
| Stanley et al. | Senescence and the healing rates of venous ulcers | |
| Salvo et al. | The role of biomedical sensors in wound healing | |
| Vasileiadou et al. | Cyanoacrylate adhesive reduces seroma production after modified radical mastectomy or quadrantectomy with lymph node dissection—a prospective randomized clinical trial | |
| RU2664455C1 (en) | Method for assessing risk of developing complications in the long-term postoperative period in patients with signs of connective tissue dysplasia | |
| RU2478963C1 (en) | Method for estimating clinical course of wound process and clinical effectiveness in skin wounds of various geneses | |
| Schrufer-Poland et al. | Incidence of wound complications in cesarean deliveries following closure with absorbable subcuticular staples versus conventional skin closure techniques | |
| Dowsett | Using the TIME framework in wound bed preparation | |
| McNees | Skin and wound assessment and care in oncology | |
| Serena et al. | The lack of reliability of clinical examination in the diagnosis of wound infection: preliminary communication | |
| RU2740504C1 (en) | Method for prediction of postoperative purulent wound course | |
| RU2696565C1 (en) | Method for assessment of clinical course of wound process in patients with diabetic foot syndrome | |
| Fronczek et al. | Analysis of morphological characteristics and expression levels of extracellular matrix proteins in skin wounds to determine wound age in living subjects in forensic medicine | |
| RU2624352C1 (en) | Method for prediction of direction of purelent and infected face wounds healing process development in children | |
| RU2706537C1 (en) | Method for early postoperative risk assessment in patients with connective tissue dysplasia | |
| Zaporozhan et al. | The new model of diagnostics, treatment and prevention of purulent-septic complications in patients with burn injury | |
| Sudhir et al. | To compare the efficacy of topical phenytoin over conventional wound care (5% povidone‐iodine) in diabetic ulcer | |
| Asciutto et al. | Negative pressure wound therapy (NPWT) in groin wounds after lymphadenectomy in vulvar cancer patients | |
| Ioannovich et al. | Moist exposed therapy of partial-thickness burn wounds. A multi-center study | |
| RU2704004C1 (en) | Method for assessing the risk (prediction) of postoperative complications of the surgical management of hemorrhoids | |
| RU2554326C1 (en) | Method of treating acute tissue hypertensive syndrome accompanying parotideomasseteric phlegmons | |
| RU2761893C1 (en) | Method for predicting the result of laser treatment of a hypertrophic scar in women | |
| RU2485508C1 (en) | Method of choosing surgical approach to sialolithiasis | |
| RU2429476C1 (en) | Diagnostic technique for arthrosis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131122 |