RU2476888C1 - Diagnostic technique for lipidemia - Google Patents
Diagnostic technique for lipidemia Download PDFInfo
- Publication number
- RU2476888C1 RU2476888C1 RU2011133430/15A RU2011133430A RU2476888C1 RU 2476888 C1 RU2476888 C1 RU 2476888C1 RU 2011133430/15 A RU2011133430/15 A RU 2011133430/15A RU 2011133430 A RU2011133430 A RU 2011133430A RU 2476888 C1 RU2476888 C1 RU 2476888C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lipoprotein
- lipidemia
- apolipoprotein
- blood
- concentration
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии или терапии.The invention relates to medicine and can be used in cardiology or therapy.
Известны способы разделения на фракции липопротеинов крови методом аналитического ультрацентрифугирования (А.Н.Климов, Н.Г.Никульчева. Липиды, липопротеины и атеросклероз. - Питер, пресс, с.98-102).Known methods of separation into fractions of blood lipoproteins by the method of analytical ultracentrifugation (A.N. Klimov, N.G. Nikulcheva. Lipids, lipoproteins and atherosclerosis. - Peter, press, p.98-102).
Известны способы разделения на фракции липопротеинов (ЛП) в полиакриламидном геле (Н.Н.Шацкая. Биохимические исследования в оценке состояния сердечно-сосудистой системы. В кн. «Методы исследований в профпатологии», Москва, 1988, с.95-97).Known methods of separation into fractions of lipoproteins (LPs) in a polyacrylamide gel (NN Shatskaya. Biochemical studies in assessing the state of the cardiovascular system. In the book "Research Methods in Occupational Pathology", Moscow, 1988, p.95-97).
Известны также способы разделения на фракции ЛП путем электрофореза в геле агарозе (Лаб. методы исследования / под редакцией В.В.Меньшикова. М.: Медицина, 1987, с.248-249), SU 1720015 А, 15.03.1992. RU 2063040 C1, 27.06.1996. RU 2115121 C1, 10.07.1998. RU 2097038 C1, 27.11.1997. RU 2060034 C1, 20.05.1996. EP 0074610 A, 23.03.1983.There are also known methods of separation into LP fractions by agarose gel electrophoresis (Lab. Research methods / edited by V.V. Menshikov. M: Medicine, 1987, p.248-249), SU 1720015 A, 03/15/1992. RU 2063040 C1, 06/27/1996. RU 2115121 C1, 07/10/1998. RU 2097038 C1, 11.27.1997. RU 2060034 C1, 05.20.1996. EP 0074610 A, 03.23.1983.
Недостатком данных способов является то, что они не позволяют выявить все фракции апопротеинов, а именно аполипопротеинов В и липопротеинов (а). Под липопротеином (а) понимают аполипопротеин (а), т.е. апо-белок липопротеина (а) (ЛП (а)). Термин используется в каталогах к реагентам биохимического анализатора Konelab (Финляндия) для определения апо-белка ЛП (а). Поэтому в описании способа в связи с применяемым методом анализа используется термин липопротеин (а) вместо аполипротеина (а).The disadvantage of these methods is that they do not allow to identify all fractions of apoproteins, namely apolipoproteins B and lipoproteins (a). Lipoprotein (a) means apolipoprotein (a), i.e. apo-protein of lipoprotein (a) (LP (a)). The term is used in the catalogs for reagents of the Konelab biochemical analyzer (Finland) for the determination of the apo protein of LP (a). Therefore, in the description of the method in connection with the method of analysis used, the term lipoprotein (a) is used instead of apoliprotein (a).
Известен способ определения фракции липопротеинов у больных ишемической болезнью сердца (RU 2400751 C1, 27.09.2010).A known method for determining the fraction of lipoproteins in patients with coronary heart disease (RU 2400751 C1, 09/27/2010).
Данный способ является наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату и выбран в качестве прототипа.This method is the closest to the proposed technical essence and the achieved result and is selected as a prototype.
Недостатком данного способа является то, что он не позволяет выявить аполипротеин В и липопротеин (а). Это связано с тем, что липопротеин (а), с одной стороны, является наиболее атерогенным, а с другой - в норме выявляется в очень низкой концентрации и увеличивается в крови при липидемии атерогенного генеза. Следовательно, для ранней диагностики заболевания особенно важно выявление липопротеина (а) наряду с максимально полным определением аполипопротеина В и соотношения аполипротеина В к липопротеину (а).The disadvantage of this method is that it does not detect apoliprotein B and lipoprotein (a). This is due to the fact that lipoprotein (a), on the one hand, is the most atherogenic, and on the other, it is normally detected at a very low concentration and increases in the blood with lipidemia of atherogenic origin. Therefore, for the early diagnosis of the disease, the identification of lipoprotein (a) is especially important along with the most complete determination of apolipoprotein B and the ratio of apoliprotein B to lipoprotein (a).
Целью предлагаемого изобретения является повышение точности и эффективности способа.The aim of the invention is to increase the accuracy and efficiency of the method.
Указанная цель достигается тем, что сыворотку крови перед исследованием обрабатывают трехкратным замораживанием и оттаиванием по 20 минут и 10 минут соответственно, а затем методом иммунопреципитации определяют аполипопротеин В, липопротеин (а) и их соотношение, и если оно составляет менее 20,5 выявляют раннюю стадию липидемии.This goal is achieved in that the blood serum is treated with triple freezing and thawing for 20 minutes and 10 minutes, respectively, and then apolipoprotein B, lipoprotein (a) and their ratio are determined by immunoprecipitation, and if it is less than 20.5, an early stage is detected lipidemia.
Новым в данном способе является предварительная обработка сыворотки крови трехкратным замораживанием и оттаиванием по 20 минут и 10 минут соответственно, что позволяет определить максимальную концентрацию аполипопротеина В и липопротеина (а) и их соотношение для диагностики ранней липидемии.New in this method is the preliminary treatment of blood serum by three freezing and thawing for 20 minutes and 10 minutes, respectively, which allows us to determine the maximum concentration of apolipoprotein B and lipoprotein (a) and their ratio for the diagnosis of early lipidemia.
Следовательно, только комплексная модернизация способа-прототипа позволяет получить желаемый результат.Therefore, only a comprehensive modernization of the prototype method allows to obtain the desired result.
Каждый вновь введенный в формулу изобретения признак выполняет функцию повышения точности и эффективности способа. Трехкратное замораживание 0,5 мл сыворотки крови с последующим трехкратным оттаиванием в течение 20 минут и 10 минут соответственно позволяет максимально выявить содержание аполипопротеина В и липопротеина (а) для диагностики липидемии.Each feature newly introduced into the claims performs the function of increasing the accuracy and efficiency of the method. Threefold freezing of 0.5 ml of blood serum followed by thrice thawing for 20 minutes and 10 minutes, respectively, allows the maximum detection of apolipoprotein B and lipoprotein (a) for the diagnosis of lipidemia.
Исследование аполипопротеинов и липопротеинов разных классов при диагностике липидемии и ишемической болезни сердца (ИБС) рекомендовано Всероссийским научным обществом кардиологов согласно положению рекомендаций Европейского общества по изучению атеросклероза - «Диагностика и коррекция нарушения липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза» (г.Москва, 2005 г.: Клиническая лабораторная диагностика, №10, 2008 г., с.21-32).The study of apolipoproteins and lipoproteins of different classes in the diagnosis of lipidemia and coronary heart disease (IHD) is recommended by the All-Russian Scientific Society of Cardiology according to the provisions of the European Society for the Study of Atherosclerosis - “Diagnosis and correction of lipid metabolism disorders for the prevention and treatment of atherosclerosis” (Moscow, 2005 g .: Clinical laboratory diagnostics, No. 10, 2008, p.21-32).
В настоящее время перспективными являются методы исследования липидов и липопротеинов. В лабораторной практике все больше используются прямые методы определения липопротеинов (ЛП) и их аполипротеинов, а именно методы иммунопреципитации.Currently, promising are methods for the study of lipids and lipoproteins. In laboratory practice, more and more direct methods are used to determine lipoproteins (LPs) and their apoliproteins, namely immunoprecipitation methods.
Увеличение концентрации ЛП abnormal или ЛП (а) и его аполипротеина (а) в крови считают независимым фактором риска атеросклероза. При содержании в крови ЛП (а) более 300 мкг/мл при норме 0-300 мкг/мл риск возникновения коронарного атеросклероза увеличивается вдвое, а при одновременном повышении уровня ЛП (а), холестерола (ХС) и ХС ЛПНП - в пять раз (J.A. М.А. - 2001. - Vol.285. - р.2486-2497, Eur. Heart. J. - 2003. - Vol.24. - p.1601-1610).An increase in the concentration of abnormal LP or LP (a) and its apoliprotein (a) in the blood is considered an independent risk factor for atherosclerosis. With a blood content of LD (a) of more than 300 μg / ml at a rate of 0-300 μg / ml, the risk of coronary atherosclerosis is doubled, and with a simultaneous increase in the level of LP (a), cholesterol (CS) and LDL cholesterol - five times JA M.A. - 2001. - Vol.285. - p. 2486-2497, Eur. Heart. J. - 2003. - Vol.24. - p. 1601-1610).
Липопротеин (а) является предиктором атеросклероза, свидетельствует о генетической предрасположенности к сердечно-сосудистым заболеваниям, фатальному и нефатальному инфаркту миокарда и ишемическому инсульту.Lipoprotein (a) is a predictor of atherosclerosis, indicating a genetic predisposition to cardiovascular disease, fatal and non-fatal myocardial infarction and ischemic stroke.
В настоящее время особое внимание уделяется исследованию фракции липопротеина (а) в связи с чем разрабатываются способы лабораторной диагностики, позволяющие в максимальной концентрации исследовать этот липопротеин крови. Он относится к апо-В-содержащим липопротеинам, богатым холестеролом (ХС). ЛП(а) идентичен "тонущим" пре-β-ЛП (sinking pre-β-Lp), имеющим при электрофорезе подвижность пре-β-ЛП. ЛП(а) содержат 27% белка, 8% углеводов и 65% липидов, из которых ЭХС составляют 59%, НЭХС 14%, ФЛ 14%.Currently, special attention is paid to the study of the lipoprotein fraction (a), and therefore laboratory diagnostic methods are being developed that allow to study this blood lipoprotein in the maximum concentration. It refers to apo-B-containing lipoproteins rich in cholesterol (cholesterol). LP (a) is identical to sinking pre-β-LP (sinking pre-β-Lp), which has the mobility of pre-β-LP during electrophoresis. PL (a) contains 27% protein, 8% carbohydrates and 65% lipids, of which ECS make up 59%, NEHS 14%, and PL 14%.
Белковым компонентом ЛП(а) является высокогликозилированный полипептид-апо(а), имеющий близкое структурное сродство к плазминогену - одному из факторов системы свертывания - противосвертывания крови. При росте концентрации как ЛП(а), так и его модифицированных форм в крови нарушаются процессы микроциркуляции в кровеносных артериях с возможным образованием микротромбов.The protein component of LP (a) is the highly glycosylated apo (a) polypeptide, which has a close structural affinity for plasminogen - one of the factors of the coagulation system - anticoagulation of blood. With an increase in the concentration of both LP (a) and its modified forms in the blood, the microcirculation processes in the blood arteries are disrupted with the possible formation of microthrombi.
Благодаря наличию в структуре апо(а) сиаловых кислот ЛП(а) более отрицательно заряжен по сравнению с β-ЛП в электрическом поле, лучше растворим в воде, может взаимодействовать с ионами металлов (кальция). Этот липопротеин и его модифицированные формы гетерогенны. Все это свидетельствует об особой роли ЛП(а) и модифицированных ЛП(а) в атерогенезе.Due to the presence in the structure of apo (a) sialic acids, PL (a) is more negatively charged than β-PL in an electric field, it is better soluble in water, and can interact with metal ions (calcium). This lipoprotein and its modified forms are heterogeneous. All this indicates the special role of LP (a) and modified LP (a) in atherogenesis.
ЛП(а) может взаимодействовать с ЛПНП-рецепторами, оказывая слабое влияние на активность ГМК-КоА редуктазы, на этерификацию ХС. Период полураспада ЛП(а) длиннее, чем у ЛПНП, и составляет 3,3 суток. Содержание ЛП(а) в крови в норме не превышает 30 мг/л. При высокой концентрации в крови ЛП(а) выявляется в местах поражения сосудов в области скопления фибриногена. Повышенная концентрация ЛП(а) часто сочетается с IIа, IIб типами гиперлипопротеинемий, при которых часто выявляются модифицированные ЛП. Поэтому в клинической практике крайне важно определение ЛП(а) одновременно с определением белков острой фазы воспаления. Установлено, что большинство гиполипидемических препаратов не влияет на повышенный уровень ЛП (а).LP (a) can interact with LDL receptors, exerting a weak effect on the activity of GMK-CoA reductase, on the esterification of cholesterol. The half-life of the drug (a) is longer than that of LDL and is 3.3 days. The content of LP (a) in the blood normally does not exceed 30 mg / L. At a high concentration in the blood, PL (a) is detected at the sites of vascular damage in the area of accumulation of fibrinogen. Increased concentration of Lp (a) is often associated with II a, II b hyperlipoproteinemia types in which commonly identified modified LP. Therefore, in clinical practice it is extremely important to determine the LP (a) simultaneously with the determination of proteins of the acute phase of inflammation. It was found that most lipid-lowering drugs do not affect elevated levels of LP (a).
Фракция ЛП (а) гетерогенна. Установлено, что при электрофорезе ЛП (а) находятся в области β-глобулинов, но до 5% ЛП (а) при этом могут выявляться в области α-глобулинов. По причине такой выраженной гетерогенности достаточно сложно оценить при электрофорезе всю фракцию ЛП(а), а тем более ее минорные фракции, которые могут оставаться на линии старта, если размер их частиц достаточно велик. Поэтому использование иммуноприципетации при исследовании липопротеина (а) и аполипротеина В позволяет наиболее точно определить уровень этих липопротеинов в крови.The LP (a) fraction is heterogeneous. It was established that during electrophoresis, the drugs (a) are in the region of β-globulins, but up to 5% of the drugs (a) can be detected in the region of α-globulins. Due to such pronounced heterogeneity, it is quite difficult to evaluate the whole LP fraction (a) during electrophoresis, and even less its minor fractions, which can remain on the start line if their particle size is large enough. Therefore, the use of immunoprecipitation in the study of lipoprotein (a) and apoliprotein B allows you to most accurately determine the level of these lipoproteins in the blood.
Обработка 0,5 мл сыворотки крови методом трехкратного замораживания и оттаивания позволяет определить максимальную концентрацию аполипротеинов в крови пациента.Processing 0.5 ml of blood serum using the method of three freezing and thawing allows you to determine the maximum concentration of apoliproteins in the patient's blood.
Усовершенствование способа касается трехкратного замораживания и оттаивания по 20 минут и 10 минут соответственно крови пациента с последующим определением аполипопротеина В, липопротеина (а) и их соотношения.The improvement of the method concerns three freezing and thawing for 20 minutes and 10 minutes, respectively, of the patient’s blood, followed by determination of apolipoprotein B, lipoprotein (a) and their ratio.
Указанное выше время обработки сыворотки пробы является оптимальным. Проведение этой процедуры менее 20 минут и 10 минут или более 20 минут и 10 минут соответственно не улучшает результатов исследования аполипопротеинов.The above processing time of the serum sample is optimal. Carrying out this procedure for less than 20 minutes and 10 minutes or more than 20 minutes and 10 minutes, respectively, does not improve the results of the study of apolipoproteins.
Поскольку липопротеин (а) наиболее атерогенен, очень важно на ранних стадиях заболевания выявлять максимальное содержание в крови липопротеина (а). Это позволяет диагностировать липидемию при ишемической болезни сердца еще до стадии значительных изменений других клинико-лабораторных показателей, повышает точность диагностики заболевания. В свою очередь, таким пациентам рано назначается потогенетически обоснованная терапия. Не менее важно выявление липопротеина (а) для оценки эффективности терапии заболевания и прогнозирования течения липидемии при ишемической болезни сердца.Since lipoprotein (a) is the most atherogenic, it is very important in the early stages of the disease to detect the maximum content of lipoprotein (a) in the blood. This allows you to diagnose lipidemia in coronary heart disease even before the stage of significant changes in other clinical and laboratory parameters, improves the accuracy of the diagnosis of the disease. In turn, such patients are prescribed early progeny therapy. The identification of lipoprotein (a) is equally important for assessing the effectiveness of the treatment of the disease and predicting the course of lipidemia in coronary heart disease.
Все сказанное свидетельствует о крайней важности разработки способов лабораторной диагностики, позволяющих наиболее полно выявлять липопротеин (а), а также аполипопротеин В.All of the above indicates the extreme importance of the development of laboratory diagnostic methods that allow the most complete detection of lipoprotein (a), as well as apolipoprotein B.
Существенные признаки, характеризующие изобретение, проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста.The essential features characterizing the invention showed in the inventive combination new properties that are not explicitly derived from the prior art in this field and are not obvious to a specialist.
Идентичной совокупности признаков не обнаружено при изучении патентной и научно-медицинской литературы.An identical set of features was not found in the study of patent and medical literature.
Данное изобретение может быть использовано в практическом здравоохранении для повышения точности диагностики у больных ИБС.This invention can be used in medical practice to improve the accuracy of diagnosis in patients with coronary artery disease.
Таким образом, следует считать данное техническое решение соответствующим условиям патентоспособности: «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».Thus, this technical solution should be considered relevant to the conditions of patentability: “Novelty”, “Inventive step”, “Industrial applicability”.
Способ осуществляется следующим образом поэтапно:The method is as follows in stages:
1. 0,5 мл сыворотки крови трехкратно замораживают и оттаивают по 20 минут и 10 минут соответственно;1. 0.5 ml of blood serum is frozen three times and thawed for 20 minutes and 10 minutes, respectively;
2. В сыворотке крови пациента определяют липопротеин (а) с помощью набора для Konelab (Код 981915).2. Lipoprotein (a) is determined in the patient's blood serum using a Konelab kit (Code 981915).
Методика определения основана на измерении иммунопреципитации, усиленной полиэтиленгликолем (ПЭГ), при длине волны 340 нм. В анализатор Konelab устанавливается исследуемый образец сыворотки крови пациента либо образец сыворотки крови, разведенный разбавителем для образца в 2 раза в случае высокой концентрации липопротеина (а) в крови. Затем устанавливается реактив с буферным раствором, содержащий избыток специфической антисыворотки. В анализаторе автоматически проводится исследование пробы сыворотки крови пациента. Регистрируется увеличение поглощения света, вызванное иммунопреципитацией. Изменение светопоглощения пропорционально концентрации липопротеина (а), содержащегося в сыворотке крови пациента. Анализатор Konelab автоматически готовит серию из стандартного калибратора липопротеина (а) (код 981916) в соответствии с установленными параметрами. Калибровочная кривая строится исходя из значений, полученных при измерении отклика калибраторов с применением сплайнового сглаживания. Результат исследования пробы сыворотки крови пациента после ее реакции с антисывороткой к липопротеину (а) появляется на калибровочной кривой в виде точки. По горизонтали на графике указывается концентрация липопротеина (а) в мг/л, а по вертикали - абсорбция (А). Следовательно, определяется значение абсорбции пробы, которая в автоматическом режиме обозначается результирующей концентрацией липопротеина (а), выраженной в мг/л. Выполнение анализа возможно вплоть до концентрации 8100 мг/л (8,1 г/л) липопротеина (а) и минимальном значении 30 мг/л.The determination procedure is based on measuring immunoprecipitation enhanced with polyethylene glycol (PEG) at a wavelength of 340 nm. The Konelab analyzer installs the patient’s test blood serum sample or a blood serum sample diluted 2 times with the sample diluent in case of a high concentration of lipoprotein (a) in the blood. Then a reagent with a buffer solution containing an excess of specific antiserum is installed. The analyzer automatically examines a patient's blood serum sample. An increase in light absorption caused by immunoprecipitation is recorded. The change in light absorption is proportional to the concentration of lipoprotein (a) contained in the patient's blood serum. The Konelab analyzer automatically prepares a series of the standard lipoprotein calibrator (a) (code 981916) in accordance with the set parameters. The calibration curve is constructed based on the values obtained when measuring the response of calibrators using spline smoothing. The result of the study of the patient’s blood serum sample after its reaction with the antiserum to lipoprotein (a) appears on the calibration curve as a dot. Horizontally, the graph shows the concentration of lipoprotein (a) in mg / l, and vertically the absorption (A). Therefore, the absorption value of the sample is determined, which is automatically indicated by the resulting concentration of lipoprotein (a), expressed in mg / L. The analysis is possible up to a concentration of 8100 mg / l (8.1 g / l) of lipoprotein (a) and a minimum value of 30 mg / l.
Установленное значение нормы липопротеина (а) 31-150 мг/л. При липидемии атерогенного генеза уровень липопротеина (а) увеличивается в диапазоне 310-4200 мг/л (0,3-4,2 г/л).The established norm value of lipoprotein (a) is 31-150 mg / l. With lipidemia of atherogenic origin, the level of lipoprotein (a) increases in the range of 310-4200 mg / l (0.3-4.2 g / l).
Сравнительное исследование проводилось в соответствии с NCCLS документом ЕР-9А с использованием коммерческой нефелометрической методики, которая служила в качестве эталона с концентрацией липопротеина (а) в образцах 69-1622 мг/л.A comparative study was carried out in accordance with NCCLS document EP-9A using a commercial nephelometric technique, which served as a reference with a concentration of lipoprotein (a) in samples 69-1622 mg / L.
3. В сыворотке крови пациента определяют аполипопротеин В с помощью набора для Konelab (Код 981663).3. Apolipoprotein B is determined in the patient’s blood serum using a Konelab kit (Code 981663).
Методика определения основана на измерении иммунопреципитации, усиленной полиэтиленгликолем (ПЭГ), при длине волны 340 нм. В анализатор Konelab устанавливается исследуемый образец сыворотки крови пациента либо образец сыворотки крови, разведенный разбавителем для образца в 2 раза в случае высокой концентрации аполипопротеина В в крови. Затем устанавливается реактив с буферным раствором, содержащий избыток специфической антисыворотки. В анализаторе автоматически проводится исследование пробы сыворотки крови пациента. Регистрируется увеличение поглощения света, вызванное иммунопреципитацией. Изменение светопоглощения пропорционально концентрации аполипопротеина В, содержащегося в сыворотке крови пациента. Анализатор Konelab автоматически готовит серию из стандартного калибратора апо А-1/В: лиофилизированного, на основе человеческого материала (концентрация аполипопротеина В в восстановленном калибраторе указана на этикетке флакона). Калибровочная кривая строится исходя из значений, полученных при измерении отклика калибраторов с применением сплайнового сглаживания. Результат исследования пробы сыворотки крови пациента после ее реакции с антисывороткой к аполипопротеину В появляется на калибровочной кривой в виде точки. По горизонтали на графике указывается концентрация аполипопротеина В в г/л, а по вертикали абсорбция (А). Следовательно определяется значение абсорбции пробы, которая в автоматическом режиме обозначается результирующей концентрацией аполипопротеина В, выраженной в г/л. Выполнение анализа возможно вплоть до концентрации аполипопротеина В, равной 13,1 г/л при минимальном значении 0,05 г/л.The determination procedure is based on measuring immunoprecipitation enhanced with polyethylene glycol (PEG) at a wavelength of 340 nm. The Konelab analyzer installs a test patient's blood serum sample or a blood serum sample diluted 2 times with a sample diluent in case of a high concentration of apolipoprotein B in the blood. Then a reagent with a buffer solution containing an excess of specific antiserum is installed. The analyzer automatically examines a patient's blood serum sample. An increase in light absorption caused by immunoprecipitation is recorded. The change in light absorption is proportional to the concentration of apolipoprotein B contained in the patient's blood serum. The Konelab analyzer automatically prepares a series of the standard apo A-1 / B calibrator: lyophilized, based on human material (the concentration of apolipoprotein B in the recovered calibrator is indicated on the label of the bottle). The calibration curve is constructed based on the values obtained when measuring the response of calibrators using spline smoothing. The result of the study of the patient’s blood serum sample after its reaction with the antiserum to apolipoprotein B appears on the calibration curve as a dot. Horizontally, the graph shows the concentration of apolipoprotein B in g / l, and the vertical absorption (A). Therefore, the absorption value of the sample is determined, which is automatically indicated by the resulting concentration of apolipoprotein B, expressed in g / l. The analysis is possible up to a concentration of apolipoprotein B equal to 13.1 g / l with a minimum value of 0.05 g / l.
Установленное значение нормы для м 0,63-1,88 г/л, для ж 0,56-1,82 г/л, при липидемии атерогенного генеза уровень аполипопротеина В увеличивается в диапазоне 1,9-13,1 г/л.The established norm value for m is 0.63-1.88 g / l, for w 0.56-1.82 g / l, with lipidemia of atherogenic origin, the level of apolipoprotein B increases in the range of 1.9-13.1 g / l.
Сравнительное исследование проводится в соответствии с инструкцией к анализатору NCCLS документом ЕР-9А с использованием коммерческой нефелометрической методики, которая служила в качестве эталона с концентрацией аполипопротеина В в образцах 0,4-2,21 г/л.A comparative study is carried out in accordance with the instruction to the NCCLS analyzer document EP-9A using a commercial nephelometric technique, which served as a reference with a concentration of apolipoprotein B in samples of 0.4-2.21 g / l.
Для более точной характеристики ранней стадии липидемии впервые было определено отношение аполипопротеина В к липопротеина (а) как наиболее атерогенной фракции липопротеинов.To more accurately characterize the early stage of lipidemia, the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a) was first determined as the most atherogenic fraction of lipoproteins.
Установлено нормально значение отношения аполипропротеина В к липопротеину (а), превышающее 20,6. Значение этого соотношения снижается при липидемии и становится меньше 20,5.The ratio of apoliproprotein B to lipoprotein (a) was found to be normal, exceeding 20.6. The value of this ratio decreases with lipidemia and becomes less than 20.5.
Описываем возможные осложнения при выполнении исследования и способы их устранения.We describe possible complications during the study and how to eliminate them.
Предотвращение возможных ложноположительных и ложноотрицательных результатов связано с предельно точным выполнением методов исследования. Ложноположительный результат возможен крайне редко и может быть обусловлен только нарушением техники разведения сыворотки крови при высокой концентрации в ней липидов. Перед установкой реагентов на борт анализатора Konelab необходимо удостовериться в отсутствии пузырьков во флаконах и на поверхности реагентов.Prevention of possible false positive and false negative results is associated with extremely accurate implementation of research methods. A false positive result is extremely rare and can only be caused by a violation of the technique for diluting blood serum with a high concentration of lipids in it. Before installing reagents on board the Konelab analyzer, make sure that there are no bubbles in the vials and on the surface of the reagents.
Для подтверждения работоспособности работы предлагаемого способа и достижения технического результата были обследованы группа-контроля (n=10) и группа больных ишемической болезнью сердца (ИБС), т.к. в основе патогенеза ИБС лежит липидемия атерогенного генеза (n=20). Обе группы обследованы с помощью предлагаемого способа и способа-прототипа. В группе контроля в случае использования способа прототипа и предлагаемого способа липопротеины (а) не выявлены, либо выявлены в минимальной концентрации.To confirm the operability of the proposed method and achieve the technical result, the control group (n = 10) and the group of patients with coronary heart disease (CHD) were examined, because the pathogenesis of IHD is based on lipidemia of atherogenic origin (n = 20). Both groups were examined using the proposed method and the prototype method. In the control group, in the case of using the prototype method and the proposed method, the lipoproteins (a) were not detected, or detected at a minimum concentration.
В группе больных ИБС выявлены липопротеины низкой и очень низкой плотности, липопротеины (а), но аполипротеины не определяются. Липидемия атерогенного генеза выявлена в 60% случаев, т.е. у 12 пациентов из 20 больных ИБС.In the group of patients with coronary artery disease, low and very low density lipoproteins were detected, lipoproteins (a), but apoliproteins are not determined. Lipidemia of atherogenic genesis was detected in 60% of cases, i.e. 12 patients out of 20 patients with coronary heart disease.
В группе больных ИБС, обследованных по предлагаемому способу, определены аполипопротеины В, липопротеины (а) с расчетом их соотношения, значительно сниженного по сравнению с нормой, т.е. значительно ниже 20,5. Липидемия выявлена у 19 из 20 обследованных пациентов на самых ранних стадиях заболеваниях.In the group of IHD patients examined by the proposed method, apolipoproteins B, lipoproteins (a) were determined with the calculation of their ratio significantly reduced compared to the norm, i.e. well below 20.5. Lipidemia was detected in 19 of the 20 examined patients at the earliest stages of the disease.
Пример: Пациент В., 57 лет, жалобы при поступлении на боли за грудиной и в области сердца, возникающие при физической нагрузке. Боли купируются нитроглицеролом. Больного беспокоит отдышка при физической нагрузке. АД 180/90 мм рт. ст., пульс в покое 68 ударов в минуту. Диагноз: ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения, ФК II.Example: Patient B., 57 years old, complaints of admission to pain behind the sternum and in the region of the heart arising from physical exertion. Pain is stopped by nitroglycerol. The patient is worried about shortness of breath during physical exertion. HELL 180/90 mm RT. Art., pulse at rest 68 beats per minute. Diagnosis: coronary heart disease, angina pectoris, FC II.
Результаты лабораторных исследований: Холестерол общий 7,3 ммоль/л, 3-ацил-глицерол 1,5 ммоль/л, ХС ЛПВП 0,9 ммоль/л, ХС ЛПНП 6,3 ммоль/л, ХС ЛПОНП 0,68 ммоль/л, аполипопротеин В 4,4 г/л, липопротеин (а) 0,35 г/л, отношение аполипопротеина В к липопротеину (а) 12,6.Laboratory results: Total cholesterol 7.3 mmol / L, 3-acyl-glycerol 1.5 mmol / L, HDL cholesterol 0.9 mmol / L, LDL cholesterol 6.3 mmol / L, VLDL cholesterol 0.68 mmol / l, apolipoprotein B 4.4 g / l, lipoprotein (a) 0.35 g / l, the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a) 12.6.
Диагноз: липидемия (гиперхолестрелоимея), ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения, ФК II-III.Diagnosis: lipidemia (hypercholesterolemia), coronary heart disease, exertional angina, FC II-III.
Предлагаемый способ позволяет выявить даже ранние стадии липидемии атерогенного генеза.The proposed method allows to identify even the early stages of lipidemia of atherogenic origin.
Применение предлагаемого способа диагностики липидемии в отличие от способа прототипа позволило выявить липидемию атерогенного генеза в 95% случаев ИБС, т.к. были исследованы наиболее атерогенные аполипопротеины самым точным способом иммуноприципитации.The use of the proposed method for the diagnosis of lipidemia, in contrast to the prototype method, made it possible to detect lipidemia of atherogenic origin in 95% of cases of coronary artery disease. the most atherogenic apolipoproteins were studied in the most accurate way of immunoprecipitation.
При этом предлагаемый способ прост в использовании и интерпретации полученных результатов.Moreover, the proposed method is easy to use and interpretation of the results.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011133430/15A RU2476888C1 (en) | 2011-08-09 | 2011-08-09 | Diagnostic technique for lipidemia |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011133430/15A RU2476888C1 (en) | 2011-08-09 | 2011-08-09 | Diagnostic technique for lipidemia |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2476888C1 true RU2476888C1 (en) | 2013-02-27 |
Family
ID=49121599
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011133430/15A RU2476888C1 (en) | 2011-08-09 | 2011-08-09 | Diagnostic technique for lipidemia |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2476888C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2721687C1 (en) * | 2019-06-13 | 2020-05-21 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for prediction of possible thrombogenic complications in atherogenic genesis lipidemia and clinical diagnosis of stress angina of different functional classes |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2398239C1 (en) * | 2009-02-02 | 2010-08-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of predicting course of coronary heart disease |
-
2011
- 2011-08-09 RU RU2011133430/15A patent/RU2476888C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2398239C1 (en) * | 2009-02-02 | 2010-08-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of predicting course of coronary heart disease |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| МЕТЕЛЬСКАЯ В.А. и ПЕРОВА Н.В. Современные основы диагностики и коррекции атерогенных дислипопротеидемий. Кардиология. Опубликовано 15.09.2008. * |
| МОТТА М. et al. The significance of apolipoprotein-B (Apo-B) in the elderly as a predictive factor of cardio-cerebrovascular complications. Arch Gerontol Geriatr. 2009 Jul-Aug; 49(1):162-4. Epub 2008 Aug 13. Найдено из БД PubMed, PMID: 18701171. * |
| МОТТА М. et al. The significance of apolipoprotein-B (Apo-B) in the elderly as a predictive factor of cardio-cerebrovascular complications. Arch Gerontol Geriatr. 2009 Jul-Aug; 49(1):162-4. Epub 2008 Aug 13. Найдено из БД PubMed, PMID: 18701171. МЕТЕЛЬСКАЯ В.А. и ПЕРОВА Н.В. Современные основы диагностики и коррекции атерогенных дислипопротеидемий. Кардиология. Опубликовано 15.09.2008. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2721687C1 (en) * | 2019-06-13 | 2020-05-21 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for prediction of possible thrombogenic complications in atherogenic genesis lipidemia and clinical diagnosis of stress angina of different functional classes |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Carr et al. | Non-HDL-cholesterol and apolipoprotein B compared with LDL-cholesterol in atherosclerotic cardiovascular disease risk assessment | |
| Nauck et al. | Homogeneous assay for direct determination of high-density lipoprotein cholesterol evaluated | |
| KR20090108006A (en) | Methods for identifying and analyzing biomarkers from plasma-derived microparticles | |
| RU2462718C1 (en) | Method for evaluating clinical effectiveness in lipidemia | |
| KR102424550B1 (en) | Hdl-associated protein biomarker panel detection | |
| RU2517054C1 (en) | Method for prediction of clinical course of lipidemia | |
| RU2398239C1 (en) | Method of predicting course of coronary heart disease | |
| EP3714273A1 (en) | Methods for prediction and early detection of diabetes | |
| RU2476888C1 (en) | Diagnostic technique for lipidemia | |
| RU2413952C2 (en) | Method of determining fractions of modified lipoproteins in blood | |
| RU2521322C1 (en) | Method for assessing progression of atherogenicity in ischemic heart disease | |
| RU2400759C1 (en) | Method of estimating efficiency of coronary heart disease treatment | |
| CN108535488B (en) | Method for evaluating risk of coronary heart disease by using value of high density lipoprotein containing apolipoprotein E | |
| RU2439582C1 (en) | Method of predicting ischemic heart disease course | |
| Zhang et al. | Association between fast-migrating low-density lipoprotein subfraction as characterized by capillary isotachophoresis and intima-media thickness of carotid artery | |
| Menys et al. | Measurement of plasma small-dense LDL concentration by a simplified ultracentrifugation procedure and immunoassay of apolipoprotein B | |
| JP6454950B1 (en) | Simple oxidative VLDL (VLDL susceptibility to oxidation) and oxidative oxidative LDL (LDL susceptibility to oxidation) determination method and apparatus for determining that the risk of myocardial infarction or cerebral infarction due to atherosclerosis is high | |
| Van Dreden et al. | Procoagulant phospholipids and tissue factor activity in cerebrospinal fluid from patients with intracerebral haemorrhage | |
| Baudhuin et al. | Electrophoretic measurement of lipoprotein (a) cholesterol in plasma with and without ultracentrifugation: comparison with an immunoturbidimetric lipoprotein (a) method | |
| RU2497116C1 (en) | Method to determine atherogenicity of human blood | |
| RU2439576C1 (en) | Method of predicting ischemic heart disease course | |
| RU2402016C1 (en) | Method of predicting course of coronary heart disease | |
| RU2396567C1 (en) | Method of estimating clinical effectiveness in chronic heart disease | |
| RU2364873C1 (en) | Method of fractional analysis of modified blood lipoproteins | |
| EP2015077B1 (en) | Method for detection of familial combined hyperlipidemia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130810 |