RU2443708C2 - Method of producing a2a-adenosine receptor agonist and polymorphic modifications thereof - Google Patents
Method of producing a2a-adenosine receptor agonist and polymorphic modifications thereof Download PDFInfo
- Publication number
- RU2443708C2 RU2443708C2 RU2009146829/04A RU2009146829A RU2443708C2 RU 2443708 C2 RU2443708 C2 RU 2443708C2 RU 2009146829/04 A RU2009146829/04 A RU 2009146829/04A RU 2009146829 A RU2009146829 A RU 2009146829A RU 2443708 C2 RU2443708 C2 RU 2443708C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- formula
- temperature
- compound
- approximately
- reaction
- Prior art date
Links
- 0 *c1nc(N)c2nc[n]([C@@]([C@@]3O)O[C@@](CO)[C@@]3O)c2n1 Chemical compound *c1nc(N)c2nc[n]([C@@]([C@@]3O)O[C@@](CO)[C@@]3O)c2n1 0.000 description 2
- FZDLWIVJDVIJGW-CLDRPODSSA-N CCOC(/C(/C=O)=C/Nc1c2nc[n]([C@@H]([C@@H]3O)O[C@H](CO)[C@H]3O)c2nc(-[n]2ncc(C(OCC)=O)c2)n1)=O Chemical compound CCOC(/C(/C=O)=C/Nc1c2nc[n]([C@@H]([C@@H]3O)O[C@H](CO)[C@H]3O)c2nc(-[n]2ncc(C(OCC)=O)c2)n1)=O FZDLWIVJDVIJGW-CLDRPODSSA-N 0.000 description 1
- ZPVLTIXYQGANFL-IDTAVKCVSA-N CCOC(c1c[n](-c2nc(N)c3nc[n]([C@@H]([C@@H]4O)O[C@H](CO)[C@H]4O)c3n2)nc1)=O Chemical compound CCOC(c1c[n](-c2nc(N)c3nc[n]([C@@H]([C@@H]4O)O[C@H](CO)[C@H]4O)c3n2)nc1)=O ZPVLTIXYQGANFL-IDTAVKCVSA-N 0.000 description 1
- LZPZPHGJDAGEJZ-AKAIJSEGSA-N CNC(c1c[n](-c2nc(N)c3nc[n]([C@@H]([C@@H]4O)O[C@H](CO)[C@H]4O)c3n2)nc1)=O Chemical compound CNC(c1c[n](-c2nc(N)c3nc[n]([C@@H]([C@@H]4O)O[C@H](CO)[C@H]4O)c3n2)nc1)=O LZPZPHGJDAGEJZ-AKAIJSEGSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
Description
Данная заявка представляет собой частичное продолжение патентной заявки США серийный № 11/701699, поданной 2 февраля 2007 года, по которой испрошен приоритет на основании предварительной патентной заявки США серийный № 60/801857, поданной 18 мая 2006 года, и предварительной патентной заявки США серийный № 60/765114, поданной 3 февраля 2006 года, полное раскрытие которых включено в настоящее описание в виде ссылки.This application is a partial continuation of US patent application Serial No. 11/701699, filed February 2, 2007, which claimed priority on the basis of provisional patent application US Serial No. 60/801857, filed May 18, 2006, and provisional patent application US Serial No. 60/765114, filed February 3, 2006, the full disclosure of which is incorporated into this description by reference.
Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION
Настоящее изобретение относится к способу крупномасштабного получения агониста рецептора А2А-аденозина, а также относится к полиморфным модификациям этого соединения и к способам выделения конкретной полиморфной модификации.The present invention relates to a method for large-scale production of an A 2A- adenosine receptor agonist, and also relates to polymorphic modifications of this compound and to methods for isolating a specific polymorphic modification.
Уровень техникиState of the art
Аденозин представляет собой природный нуклеозид, который проявляет свои биологические свойства посредством взаимодействия с семейством рецепторов аденозина, известных как А1, А2А, А2В и А3, каждый из которых модулирует важные физиологические процессы. Одно из биологических свойств аденозина заключается в его действии в качестве коронарного вазодилататора, причем указанное свойство является результатом взаимодействия с рецептором А2А аденозина. Обнаружено, что данный эффект аденозина полезен при визуализации сердца, когда необходимо расширить коронарные артерии перед применением радиофармацевтического препарата (например, таллия 201) и в результате посредством наблюдения полученных таким образом изображений определить наличие или отсутствие заболевания коронарных артерий. Преимущество подобной технологии заключается в том, что избегают более традиционного способа индуцирования коронарного сосудорасширения посредством упражнения на бегущей «дорожке», которое является, несомненно, нежелательным для пациента с коронарным заболеванием.Adenosine is a naturally occurring nucleoside that exerts its biological properties through interaction with a family of adenosine receptors known as A 1 , A 2A , A 2B and A 3 , each of which modulates important physiological processes. One of the biological properties of adenosine is its action as a coronary vasodilator, and this property is the result of interaction with adenosine A 2A receptor. It was found that this effect of adenosine is useful in cardiac imaging when it is necessary to expand the coronary arteries before using a radiopharmaceutical (for example, thallium 201) and as a result, by observing the images thus obtained, determine the presence or absence of coronary artery disease. The advantage of this technology is that they avoid the more traditional method of inducing coronary vasodilation by means of an exercise on a treadmill, which is undoubtedly undesirable for a patient with coronary disease.
Однако применение аденозина имеет несколько недостатков. Аденозин обладает очень коротким временем полужизни в организме человека (менее чем 10 секунд), а также обладает всеми свойствами, связанными с агонистами А1, А2А, А2В и А3 рецепторов. Таким образом, применение селективного агониста рецептора А2А аденозина обеспечило бы превосходный способ осуществления коронарного сосудорасширения, особенно агониста с более длительным временем полужизни и некоторыми побочными эффектами или без них.However, the use of adenosine has several disadvantages. Adenosine has a very short half-life in humans (less than 10 seconds), and has all the properties associated with agonists of A 1, A 2A, A 2B and A 3 receptors. Thus, the use of a selective adenosine A 2A receptor agonist would provide an excellent way to accomplish coronary vasodilation, especially an agonist with longer half-life and some or no side effects.
Класс соединений, обладающих этими желательными свойствами, раскрыт в патенте США № 6403567, полное раскрытие которого включено настоящим в виде ссылки. В частности, показано, что одно соединение, раскрытое в этом патенте, (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамид, представляет собой высокоселективный агонист рецептора А2А-аденозина и сейчас проходит клинические испытания в качестве коронарного вазодилататора, пригодного для кардиологической визуализации.A class of compounds possessing these desirable properties is disclosed in US Pat. No. 6,035,367, the entire disclosure of which is hereby incorporated by reference. In particular, it is shown that one compound disclosed in this patent is (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6 -aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide is a highly selective agonist of the A 2A- adenosine receptor and is currently undergoing clinical trials as a coronary vasodilator suitable for cardiac imaging.
Принимая во внимание повышенный интерес к этому и сходным соединениям, стало желательным обнаружение новых способов синтеза, которые обеспечивают удобный способ получения больших количеств вещества с хорошим выходом и высокой чистотой. Патент, который раскрывает интересующее соединение (патент США № 6403567), предоставляет несколько способов получения соединения. Однако, хотя эти способы подходят для синтеза в небольшом масштабе, все способы синтеза, раскрытые в патенте, используют защитные группы, что является нежелательным для синтеза в большом масштабе.Given the increased interest in this and similar compounds, it became desirable to discover new synthesis methods that provide a convenient way to obtain large quantities of the substance with good yield and high purity. A patent that discloses a compound of interest (US Patent No. 6403567) provides several methods for preparing the compound. However, although these methods are suitable for synthesis on a small scale, all synthesis methods disclosed in the patent use protecting groups, which is undesirable for synthesis on a large scale.
Кроме того, обнаружено, что желаемый продукт (то есть (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамид) способен существовать по меньшей мере в трех различных кристаллических формах, наиболее стабильной из которых является моногидрат. Эта полиморфная модификация является стабильной в стрессовых состояниях относительной влажности, вплоть до его точки плавления. Соответственно является желательным, чтобы конечный продукт, произведенный путем нового синтеза, был получен в виде стабильного моногидрата.In addition, it was found that the desired product (i.e. (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurine- 2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide) can exist in at least three different crystalline forms, the most stable of which is monohydrate. This polymorphic modification is stable in stress states of relative humidity, up to its melting point. Accordingly, it is desirable that the final product produced by a new synthesis be obtained as a stable monohydrate.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯSUMMARY OF THE INVENTION
Таким образом, задача настоящего изобретения состоит в предоставлении удобного синтеза для крупномасштабного получения (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида и его полиморфных модификаций, предпочтительно в виде его моногидрата. Соответственно в первом аспекте изобретение относится к способу получения соединения формулы I:Thus, it is an object of the present invention to provide convenient synthesis for large scale production of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6 -aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide and its polymorphic modifications, preferably in the form of its monohydrate. Accordingly, in a first aspect, the invention relates to a method for producing a compound of formula I:
Формула IFormula I
включающемуincluding
контактирование соединения формулы (3):contacting a compound of formula (3):
с метиламином.with methylamine.
В одном варианте осуществления реакцию проводят в водном растворе метиламина, первоначально при температуре приблизительно 0-5°С с последующим нагреванием до приблизительно 50-70°С. Альтернативно реакцию проводят, как описано выше, но в герметичном реакторе под давлением.In one embodiment, the reaction is carried out in an aqueous solution of methylamine, initially at a temperature of about 0-5 ° C, followed by heating to about 50-70 ° C. Alternatively, the reaction is carried out as described above, but in a sealed reactor under pressure.
Во втором варианте осуществления продукт выделяют как чистый моногидрат посредством растворения продукта в растворителе, например диметилсульфоксиде, добавления очищенной воды, фильтрации образованной таким образом суспензии, промывания содержимого фильтра водой и далее этанолом и высушивания твердого вещества, которое находится под вакуумом при температуре, которая не превышает 40°С.In a second embodiment, the product is isolated as pure monohydrate by dissolving the product in a solvent, for example dimethyl sulfoxide, adding purified water, filtering the suspension thus formed, washing the contents of the filter with water and then ethanol, and drying the solid, which is under vacuum at a temperature that does not exceed 40 ° C.
Во втором аспекте изобретение относится к способу получения соединения формулы (3):In a second aspect, the invention relates to a method for producing a compound of formula (3):
включающемуincluding
контактирование соединения формулы (2):contacting a compound of formula (2):
с этил-2-формил-3-оксопропионатом.with ethyl 2-formyl-3-oxopropionate.
В одном варианте осуществления реакцию проводят в этаноле при температуре, равной приблизительно 80°С, с приблизительно 1,1 молярными эквивалентами этил-2-формил-3-оксипропионата.In one embodiment, the reaction is carried out in ethanol at a temperature of about 80 ° C, with about 1.1 molar equivalents of ethyl 2-formyl-3-hydroxypropionate.
В третьем аспекте изобретение относится к способу получения соединения формулы (2):In a third aspect, the invention relates to a method for producing a compound of formula (2):
включающемуincluding
контактирование соединения формулы (1):contacting a compound of formula (1):
с гидразином.with hydrazine.
Можно применять 14,3-16,7-кратный молярный избыток гидразина и реакцию можно проводить при температуре, равной приблизительно 60-65°С. В одном варианте осуществления гидразин сначала нагревают до приблизительно 60-65°С с последующим добавлением соединения формулы (1). Соединение формулы (2) можно выделить посредством (а) охлаждения реакционной смеси до приблизительно 40°С, (b) добавления 4,2-4,9 массового эквивалентного количества воды, в то же время поддерживая температуру при приблизительно 40°С, (с) охлаждения смеси до приблизительно 10°С и поддержания при этой температуре по меньшей мере в течение приблизительно 1 часа, (d) фильтрации, (е) промывания содержимого фильтра водой и далее этанолом и (f) сушки твердого вещества, которое находится под вакуумом при температуре, которая не превышает 30°С, в течение по меньшей мере 12 часов.A 14.3-16.7-fold molar excess of hydrazine can be used and the reaction can be carried out at a temperature of approximately 60-65 ° C. In one embodiment, hydrazine is first heated to about 60-65 ° C., followed by the addition of a compound of formula (1). The compound of formula (2) can be isolated by (a) cooling the reaction mixture to approximately 40 ° C, (b) adding 4.2-4.9 mass equivalent amounts of water, while maintaining the temperature at approximately 40 ° C, (s ) cooling the mixture to about 10 ° C and maintaining at this temperature for at least about 1 hour, (d) filtering, (e) washing the contents of the filter with water and then ethanol, and (f) drying the solid, which is under vacuum at temperature, which does not exceed 30 ° С, during at least 12 hours.
Описанный выше способ является подходящим для крупномасштабного синтеза желаемого продукта, который обеспечивается с хорошим выходом, несмотря на присутствие в конечном продукте одной незначительной примеси. Показано, что эта примесь является неизменяемым промежуточным соединением формулы (2); то есть соединением формулы:The method described above is suitable for large-scale synthesis of the desired product, which is achieved in good yield, despite the presence of one minor impurity in the final product. This impurity has been shown to be an unchanged intermediate of formula (2); that is, a compound of the formula:
Хотя эту примесь можно удалить из конечного продукта кристаллизацией, было решено искать альтернативный синтез, который обладает всеми преимуществами приведенного выше синтеза, но не дает соединение формулы (2) в качестве примеси в конечном продукте.Although this impurity can be removed from the final product by crystallization, it was decided to look for an alternative synthesis that has all the advantages of the above synthesis, but does not give the compound of formula (2) as an impurity in the final product.
Таким образом, в четвертом аспекте изобретение относится к способу синтеза (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида посредством контактирования соединения формулы (4):Thus, in a fourth aspect, the invention relates to a method for the synthesis of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurine- 2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide by contacting a compound of formula (4):
с метиламином.with methylamine.
В одном варианте осуществления реакцию проводят в водном растворе метиламина, первоначально при температуре приблизительно 0-5°С с последующим нагреванием до приблизительно 50-70°С. Предпочтительно реакцию проводят в герметичном реакторе под давлением.In one embodiment, the reaction is carried out in an aqueous solution of methylamine, initially at a temperature of about 0-5 ° C, followed by heating to about 50-70 ° C. Preferably, the reaction is carried out in a sealed reactor under pressure.
В другом варианте осуществления реакцию проводят при температуре приблизительно 2,5-7,5°С.In another embodiment, the reaction is carried out at a temperature of about 2.5-7.5 ° C.
В еще одном варианте осуществления продукт выделяют как чистый моногидрат посредством растворения продукта в растворителе, например диметилсульфоксиде, добавления очищенной воды, фильтрации таким образом полученной суспензии, промывания содержимого фильтра водой и далее этанолом и осушения твердого вещества, которое остается под вакуумом при температуре, которая не превышает 40°С. В некоторых других вариантах осуществления продукт можно выделить как чистый моногидрат посредством (а) дегазации реакционной смеси под вакуумом при не более чем 35°С для удаления избытка метиламина, (b) сбрасывания вакуума и охлаждения до 0-5°С в течение приблизительно от 15 минут до одного часа, (с) фильтрации образованной таким образом суспензии, (d) промывания содержимого фильтра водой и далее этанолом и (е) осушения твердого вещества, которое остается под вакуумом при температуре, которая не превышает 40°С.In yet another embodiment, the product is isolated as pure monohydrate by dissolving the product in a solvent, for example dimethyl sulfoxide, adding purified water, filtering the suspension thus obtained, washing the contents of the filter with water and then ethanol, and drying the solid, which remains under vacuum at a temperature that does not exceeds 40 ° C. In some other embodiments, the product can be isolated as pure monohydrate by (a) degassing the reaction mixture under vacuum at no more than 35 ° C to remove excess methylamine, (b) venting and cooling to 0-5 ° C for about 15 minutes to one hour, (c) filtering the suspension thus formed, (d) washing the contents of the filter with water and then ethanol, and (e) drying the solid, which remains under vacuum at a temperature that does not exceed 40 ° C.
В некоторых вариантах осуществления (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамид дополнительно очищают для предоставления моногидратной формы посредством (i) растворения соединения в растворителе, таком как диметилсульфоксид, нагретого до приблизительно 78-88°, (ii) фильтрации любых твердых примесей из раствора, (iii) промывания дополнительным растворителем, (iv) добавления раствора к очищенной воде, которую поддерживают при приблизительно 78-88°С, образуя таким образом суспензию, (v) перемешивания суспензии, (vi) охлаждения суспензии, (vii) фильтрации, (viii) промывания содержимого фильтра водой и далее этанолом и (ix) осушения твердого вещества, который сохраняют под вакуумом при температуре, которая не превышает 40°С.In some embodiments, (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4 -yl) -N-methylcarboxamide is further purified to provide a monohydrate form by (i) dissolving the compound in a solvent such as dimethyl sulfoxide heated to about 78-88 °, (ii) filtering any solid impurities from the solution, (iii) washing with an additional solvent , (iv) adding a solution to the purified water, which is maintained at approximately 78-88 ° C, thereby forming a suspension, (v) curing the suspension, (vi) cooling the suspension, (vii) filtering, (viii) washing the contents of the filter with water and then ethanol, and (ix) drying the solid, which is kept under vacuum at a temperature that does not exceed 40 ° C.
В пятом аспекте изобретение относится к способу синтеза соединения формулы (4):In a fifth aspect, the invention relates to a method for synthesizing a compound of formula (4):
включающему контактирование соединения формулы (2):comprising contacting a compound of formula (2):
с избытком этил-2-формил-2-оксопропионата, предпочтительно приблизительно 2-10-кратным молярным избытком, более предпочтительно приблизительно 5-10-кратным избытком. В одном варианте осуществления реакцию проводят в этаноле при температуре приблизительно 80°С. Этил-2-формил-3-оксопропионат присутствует в 5-10-кратном избытке.with an excess of ethyl 2-formyl-2-oxopropionate, preferably about 2-10-fold molar excess, more preferably about 5-10-fold excess. In one embodiment, the reaction is carried out in ethanol at a temperature of about 80 ° C. Ethyl 2-formyl-3-oxopropionate is present in a 5-10-fold excess.
В дополнительном варианте осуществления также предоставляется дополнительный способ синтеза соединения формулы (4), включающий контактирование соединения формулы (2)In an additional embodiment, an additional method for synthesizing a compound of formula (4) is also provided, comprising contacting a compound of formula (2)
с избытком этил-2-формил-3-оксопропионата в присутствии кислоты. Реакция проходит при кипячении с обратным холодильником, и ее, как правило, проводят в этаноле. Реакция может протекать как в присутствии, так и в отсутствие HCl в качестве катализатора. Применяют вплоть до 0,1 молярного эквивалента, предпочтительно приблизительно 0,05 молярного избытка HCl и приблизительно 5-10-кратного молярного избытка, предпочтительно приблизительно 6,8-7,5-кратного молярного избытка этил-2-формил-3-оксопропионата. Продукт этой реакции можно выделить посредством (а) охлаждения реакционной смеси после завершения реакции до приблизительно 10°С, (b) фильтрации, (с) промывания содержимого фильтра этанолом и (d) осушения твердого вещества, которое остается под вакуумом при температуре, которая не превышает 40°С.with excess ethyl 2-formyl-3-oxopropionate in the presence of acid. The reaction takes place at the boil under reflux, and it is usually carried out in ethanol. The reaction can proceed both in the presence and in the absence of HCl as a catalyst. Up to 0.1 molar equivalent, preferably about 0.05 molar excess of HCl and about 5-10 times molar excess, preferably about 6.8-7.5 times molar excess of ethyl 2-formyl-3-oxopropionate are used. The product of this reaction can be isolated by (a) cooling the reaction mixture after completion of the reaction to about 10 ° C, (b) filtering, (c) washing the contents of the filter with ethanol, and (d) drying the solid, which remains under vacuum at a temperature that does not exceeds 40 ° C.
Определения и основные параметрыDefinitions and main parameters
На фиг.1 представлен 1Н ЯМР-спектр моногидрата (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида (форма А).Figure 1 presents the 1 H NMR spectrum of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurine monohydrate 2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide (Form A).
На фиг.2 показан термический анализ моногидрата (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида.Figure 2 shows the thermal analysis of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl monohydrate } pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide.
На фиг.3 показана рентгеновская дифрактограмма моногидрата (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида.Figure 3 shows the x-ray diffraction pattern of the monohydrate (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl } pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide.
На фиг.4 показана рентгеновская дифрактограмма (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида, форма В.Figure 4 shows an x-ray diffraction pattern of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide Form B.
На фиг.5 показана рентгеновская дифрактограмма (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида, форма С по сравнению с формой А.5 shows an X-ray diffraction pattern of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide form C compared to form A.
В контексте настоящего описания следующие термины и выражения, как правило, предназначены для определения установленных ниже значений, за исключением специально оговоренных случаев.In the context of the present description, the following terms and expressions are generally intended to define the meanings set forth below, unless otherwise indicated.
“Необязательный” или “необязательно” означает, что описанное последовательно событие или обстоятельство может или не может происходить и что описание включает случаи, где указанное событие или обстоятельство происходит, и случаи, в которых оно не происходит.“Optional” or “optional” means that the event or circumstance described sequentially may or may not occur and that the description includes cases where the specified event or circumstance occurs and cases in which it does not occur.
Термин “терапевтически эффективное количество” относится к количеству соединения формулы 1, которое является достаточным для эффективного лечения, как определено ниже, при введении млекопитающему при необходимости подобного лечения. Терапевтически эффективное количество будет варьироваться в зависимости от субъекта и условий заболевания для лечения, массы и возраста субъекта, тяжести условия заболевания, способа введения и подобного, что может быть легко определено обычным специалистом.The term “therapeutically effective amount” refers to an amount of a compound of formula 1 that is sufficient for effective treatment, as defined below, when administered to a mammal, if necessary, such treatment. A therapeutically effective amount will vary depending on the subject and the conditions of the disease to be treated, the weight and age of the subject, the severity of the condition of the disease, route of administration and the like, which can be easily determined by an ordinary specialist.
Термин “лечение” или “лечащий” означает любое лечение заболевания у млекопитающего, включая:The term “treatment” or “treating” means any treatment for a disease in a mammal, including:
(i) предупреждение заболевания, то есть препятствие для развития клинических симптомов заболевания;(i) prevention of the disease, that is, an obstacle to the development of clinical symptoms of the disease;
(ii) ингибирование заболевания, то есть приостановка клинических симптомов; и/или(ii) inhibition of the disease, i.e., suspension of clinical symptoms; and / or
(iii) облегчение заболевания, то есть регрессия клинических симптомов.(iii) alleviation of the disease, i.e., regression of clinical symptoms.
Как применяется в данном документе, “фармацевтически приемлемый носитель” включает любой и все растворители, дисперсные среды, покрытия, противомикробные и противогрибковые средства, изотонические и препятствующие абсорбции агенты и подобные. Применение подобных сред и агентов для фармацевтически активных веществ хорошо известно в технике. За исключением тех случаев, когда любая традиционная среда или агент являются несовместимыми с активным ингредиентом, их применение в терапевтических композициях предполагается. Также можно ввести в композиции дополнительные активные ингредиенты.As used herein, a “pharmaceutically acceptable carrier” includes any and all solvents, dispersible media, coatings, antimicrobial and antifungal agents, isotonic and absorption preventing agents, and the like. The use of such media and agents for pharmaceutically active substances is well known in the art. Except where any conventional medium or agent is incompatible with the active ingredient, their use in therapeutic compositions is contemplated. You can also enter in the composition of additional active ingredients.
Термин “полиморфная модификация” предназначен для включения аморфных модификаций и сольватов (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида.The term “polymorphic modification” is intended to include amorphous modifications and solvates of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurine -2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide.
Обнаружено, что это соединение способно существовать по меньшей мере в трех различных кристаллических формах, упоминаемых в данном документе как форма А, форма В, форма С и аморфный продукт.This compound has been found to exist in at least three different crystalline forms, referred to herein as Form A, Form B, Form C, and an amorphous product.
Форма А: Эту полиморфную модификацию можно получить посредством кристаллизации (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида из протонных растворителей, например этанола или смесей этанола и воды, или из полярного растворителя, например воды и диметилсульфоксида. Показано, что форма А является моногидратом и является наиболее стабильной из различных полиморфных модификаций при температурах окружающей среды. Она является стабильной в относительно влажных напряженных состояниях вплоть до точки ее плавления. Form A : This polymorphic modification can be obtained by crystallization of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2 -yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide from protic solvents, for example ethanol or mixtures of ethanol and water, or from a polar solvent, for example water and dimethyl sulfoxide. It was shown that Form A is a monohydrate and is the most stable of various polymorphic modifications at ambient temperatures. It is stable in relatively wet stresses up to its melting point.
Форма В: Эту полиморфную модификацию получают посредством выпаривания под вакуумом раствора (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида в трифторэтаноле при температурах окружающей среды. Рентгеновский анализ кристаллов заметно отличался от любой другой полиморфной модификации (см. фиг.4), но определить его состав было затруднительно, так как рентгеновский анализ давал неупорядоченные широкие пики и полиморфная модификация содержала различные количества воды. Обнаружено, что трудно с большой вероятностью воспроизвести получение этой полиморфной модификации. Form B : This polymorphic modification is obtained by vacuum evaporation of a solution of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurine -2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide in trifluoroethanol at ambient temperatures. The X-ray analysis of the crystals was noticeably different from any other polymorphic modification (see Fig. 4), but its composition was difficult to determine, since the X-ray analysis yielded disordered wide peaks and the polymorphic modification contained various amounts of water. It was found that it is difficult to reproduce the receipt of this polymorphic modification with high probability.
Форма С: Эту полиморфную модификацию получают посредством суспендирования (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида в ацетонитриле в течение длительного промежутка времени при 60°С. Рентгеновский анализ кристаллов заметно отличался от любой другой полиморфной модификации (см. фиг.5). Показано, что полиморфная модификация С представляет собой непостоянный гидрат, который при повышенных температурах десольватирует в нестабильную форму. Form C : This polymorphic modification is obtained by suspending (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2- il} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide in acetonitrile for a long period of time at 60 ° C. X-ray crystal analysis was noticeably different from any other polymorphic modification (see figure 5). It was shown that polymorphic modification C is an unstable hydrate, which at elevated temperatures desolvates into an unstable form.
Аморфный материал: Эту полиморфную модификацию получают посредством нагревания полиморфной модификации Формы А при температуре вплоть до 200°С. Эта полиморфная модификация является нестабильной в присутствии атмосферной влаги, образуя различные гидраты. Amorphous material : This polymorphic modification is obtained by heating the polymorphic modification of Form A at temperatures up to 200 ° C. This polymorphic modification is unstable in the presence of atmospheric moisture, forming various hydrates.
Методики анализа форм А, В, С и аморфного материалаMethods of analysis of forms A, B, C and amorphous material
Порошковая рентгеновская дифракцияX-ray powder diffraction
Анализ методом порошковой рентгеновской дифракции (XRPD) проводили на Shimadzu XRD-6000 порошковом рентгеновском дифрактометре с применением Cu Kα излучения. Прибор оснащали рентгеновской трубкой с тонкой фокусировкой и напряжение и силу тока в трубке устанавливали соответственно до 40 кВ и 40 мА. Дивергенцию и рассеивающие щели устанавливали на 1” и принимающую щель устанавливали на 0,15 мм. Дифрагированное излучение определяли NaI сцинтилляционным детектором. Применяли тэта-два тэта непрерывную развертку при 3°/мин (шаг 0,4 сек/0,02°) от 2,5-40°2θ. Для проверки настройки применяли кремниевый стандарт. Данные собирали и анализировали с применением XRD-6000 v. 4.1 программного обеспечения.X-ray powder diffraction (XRPD) analysis was performed on a Shimadzu XRD-6000 X-ray powder diffractometer using Cu Kα radiation. The device was equipped with a fine-focus X-ray tube and the voltage and current in the tube were set to 40 kV and 40 mA, respectively. Divergence and scattering slots were set to 1 ”and the receiving slit was set to 0.15 mm. The diffracted radiation was determined by a NaI scintillation detector. A theta-two theta continuous scan was used at 3 ° / min (step 0.4 sec / 0.02 °) from 2.5-40 ° 2θ. To check the settings, a silicon standard was used. Data was collected and analyzed using XRD-6000 v. 4.1 software.
Анализы методом порошковой рентгеновской дифракции (XRPD) также выполняют с применением Inel XRG-3000 дифрактометра, оснащенного CPS (чувствительный с изогнутым положением) детектором с 28 интервалом 120°. Калибровку прибора выполняли с применением кремниевого ссылочного стандарта. Напряжение и силу тока в трубке устанавливали соответственно до 40 кВ и 30 мА. Монохромную щель устанавливали на 5 мм рядом с 80 мкм. Образцы помещали на держатель для образцов из алюминия с кремниевым вкладышем или в стеклянные капилляры XRPD-качества. Каждый капилляр устанавливали в головку гониометра, которую приводили в действие для предоставления кручения капилляра в ходе сбора данных. Получали данные реального времени с применением Cu-Kα излучения при разрешении 0,03°2θ. Типично данные собирали за период в 300 секунд. На нанесенных XRPD рисунках показаны только точки данных внутри интервала 2,5-40°2θ.X-ray powder diffraction (XRPD) analyzes are also performed using an Inel XRG-3000 diffractometer equipped with a CPS (sensitive with bent position) detector with 28 intervals of 120 °. Calibration of the device was performed using a silicon reference standard. The voltage and current in the tube were set to 40 kV and 30 mA, respectively. A monochrome gap was set at 5 mm near 80 μm. Samples were placed on an aluminum sample holder with a silicon insert or in XRPD-quality glass capillaries. Each capillary was installed in the head of the goniometer, which was actuated to provide torsion of the capillary during data collection. Real-time data was obtained using Cu-Kα radiation at a resolution of 0.03 ° 2θ. Typically, data was collected over a period of 300 seconds. XRPD drawings show only data points within the interval 2.5-40 ° 2θ.
Термический анализThermal analysis
Термогравиметрический (TG) анализ проводили на ТА Instruments 2050 или 2950 термогравиметрическом анализаторе. Калибровочными стандартами являлись никель и AlumelTM. Образцы помещали в поддон для образцов из алюминия, вставляли в TG печь и точно взвешивали. Образцы нагревали в азоте со скоростью 10°С/мин или до 300 или до 350°С. До тех пор пока иначе не утверждается, массы образцов перед анализом уравновешивали при 25°С в TGA печи.Thermogravimetric (TG) analysis was performed on a TA Instruments 2050 or 2950 thermogravimetric analyzer. Calibration standards were nickel and Alumel TM . Samples were placed in an aluminum sample tray, inserted into a TG furnace, and accurately weighed. Samples were heated in nitrogen at a rate of 10 ° C / min or up to 300 or up to 350 ° C. Unless otherwise stated otherwise, the masses of the samples were balanced before analysis at 25 ° C. in a TGA furnace.
Анализ методом дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) проводили на ТА Instruments дифференциальном сканирующем калориметре 2920. Точно взвешенные образцы помещали или в извитые поддоны или герметично закупоренные поддоны, которые содержат прокол, чтобы дать возможность для сброса давления. Каждый образец нагревали в азоте со скоростью 10°С/мин или до 300 или 350°С. В качестве калибровочного стандарта применяли металл индий. Температуры проводились в максимуме перехода.Differential Scanning Calorimetry (DSC) analysis was performed on a TA Instruments 2920 Differential Scanning Calorimeter. Accurately weighed samples were placed in either crimped trays or hermetically sealed trays that contain a puncture to allow pressure relief. Each sample was heated in nitrogen at a rate of 10 ° C / min or up to 300 or 350 ° C. Indium metal was used as the calibration standard. Temperatures were held at the transition maximum.
Инфракрасная спектроскопияInfrared spectroscopy
Инфракрасные спектры получали на Magna 860® Fourier трансформированном инфракрасном (FT-IR) спектрофотометре (Nicolet Instrument Corp.), оснащенном Ever-Glo mid/far инфракрасным источником, светоделителем с расширенным интервалом из бромида калия и детектором из дейтерированного триглицин сульфата (DTGS). До тех пор пока иначе не утверждается, для выборочного исследования применяли Spectra-Tech, Inc. вспомогательное устройство для коэффициента диффузного отражения. Каждый спектр представляет 256 совместно добавленных сканирований при спектральном разрешении в 4 см-1. Получение образцов для соединения состояло в помещении образца в микрочашу и выравнивании материала с помощью матированного стеклянного предметного стекла. Установку основополагающих данных получали с помощью центрированного отражателя на месте. Спектры представляют отношение набора данных с однократным лучом образца к набору данных с фоновым однократным лучом. Калибровку длины волны прибора проводили с применением полистирола.Infrared spectra were obtained on a Magna 860 ® Fourier transformed infrared (FT-IR) spectrophotometer (Nicolet Instrument Corp.) equipped with an Ever-Glo mid / far infrared source, an extended range potassium bromide beam splitter and a deuterated triglycine sulfate detector (DTGS). Unless otherwise stated, Spectra-Tech, Inc. was used for the sample study. auxiliary device for the coefficient of diffuse reflection. Each spectrum represents 256 co-added scans at a spectral resolution of 4 cm -1 . Obtaining samples for the connection consisted of placing the sample in a microwall and leveling the material with a frosted glass slide. The installation of the underlying data was obtained using a centered reflector in place. Spectra represent the ratio of a data set with a single beam of a sample to a data set with a background single beam. The wavelength calibration of the device was carried out using polystyrene.
ЯМР спектроскопияNMR spectroscopy
1Н ЯМР спектры в фазе раствора получали при температуре окружающей среды на модели спектрометра Bruker AM-250, оперируя при 5,87 Т (частота Larmor: 1Н=250 МГц). Данные промежутка времени получали с применением ширины пульсации в 7,5 пс и времени сбора в 1,6834 секунды на спектральном окне в 5000 Гц. Собирали сумму из 16384 точек данных. Между переходными состояниями использовали время задержки 5 секунд релаксации. Каждый набор данных типично состоял из 128 совместно усредненных переходных состояний. Спектры обрабатывали с использованием GRAMS132 A1 программного обеспечения, версия 6.00. Ослабление свободной индукции (FID) обнуляли до четырех раз по количеству точек данных и экспоненциально умножали на фактор уширения линий, равный 0,61 Гц перед преобразованием Фурье. В 1Н спектрах проводили внутреннее отнесение сигналов к тетраметилсилану (0 частей на миллион), который добавляли в качестве внутреннего стандарта. 1 H NMR spectra in the solution phase were obtained at ambient temperature on a Bruker AM-250 spectrometer model, operating at 5.87 T (Larmor frequency: 1 N = 250 MHz). Time lapse data was obtained using a ripple width of 7.5 ps and a collection time of 1.6834 seconds on a spectral window of 5000 Hz. A total of 16384 data points was collected. Between transition states, a delay time of 5 seconds of relaxation was used. Each data set typically consisted of 128 co-averaged transition states. The spectra were processed using GRAMS132 A1 software, version 6.00. Attenuation of free induction (FID) was zeroed to four times the number of data points and exponentially multiplied by the line broadening factor of 0.61 Hz before the Fourier transform. In the 1 H spectra, signals were assigned internally to tetramethylsilane (0 ppm), which was added as an internal standard.
Альтернативно ЯМР анализ проводили, как описано в примере 4.Alternative NMR analysis was performed as described in example 4.
Анализ сорбции/десорбции влагиMoisture sorption / desorption analysis
Данные сорбции/десорбции влаги собирали на VTI SCA-100 Анализаторе сорбции пара. Данные сорбции и десорбции собирали в интервале от 5% до 95% относительной влажности (RK) с 10% интервалами относительной влажности с продувкой азотом. В качестве калибровочных стандартов применяли хлорид натрия (NaCl) и поливинилпирролидон (PVP). Критерии равновесия, применяемые для анализа, составляли менее чем 0,0100% изменения массы за 5 минут с максимальным временем равновесия в 180 минут, если критерий массы не был достигнут. Нанесенные на график данные не были скорректированы для первоначального содержания влаги.Moisture sorption / desorption data were collected on a VTI SCA-100 Steam Sorption Analyzer. Sorption and desorption data were collected in the range from 5% to 95% relative humidity (RK) with 10% relative humidity intervals with nitrogen purging. Sodium chloride (NaCl) and polyvinylpyrrolidone (PVP) were used as calibration standards. The equilibrium criteria used for the analysis were less than 0.0100% of the mass change in 5 minutes with a maximum equilibrium time of 180 minutes if the mass criterion was not reached. The plotted data has not been adjusted for the initial moisture content.
НоменклатураNomenclature
Структура соединения (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида представляет собой следующую:Structure of the compound (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl ) -N-methylcarboxamide is the following:
Синтез (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамидаSynthesis of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide
Один способ для крупномасштабного синтеза (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида показан на схеме реакции I. Все реакции обычно проводят в атмосфере азота.One method for large-scale synthesis of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol- 4-yl) -N-methylcarboxamide is shown in Reaction Scheme I. All reactions are usually carried out under a nitrogen atmosphere.
СХЕМА РЕАКЦИИ ISCHEME OF REACTION I
Стадия 1 - Получение формулы (2)Stage 1 - Obtaining the formula (2)
Соединение формулы (2) получают из соединения формулы (1) посредством взаимодействия с моногидратом гидразина в отсутствие растворителя. Реакцию проводят при температуре приблизительно 45-55°С. Когда реакция завершается, продукт формулы (2) выделяют посредством перемешивания с протонным растворителем, в котором соединение формулы (2) имеет ограниченную растворимость, например этанолом или изопропанолом. Смесь перемешивают в течение приблизительно 1-5 часов и затем фильтруют. Твердое вещество очищают посредством перемешивания с водой, фильтрации и промывания водой и далее изопропанолом и сушки под вакуумом и берут его для следующей стадии без очистки.A compound of formula (2) is prepared from a compound of formula (1) by reaction with hydrazine monohydrate in the absence of a solvent. The reaction is carried out at a temperature of approximately 45-55 ° C. When the reaction is complete, the product of formula (2) is isolated by mixing with a protic solvent, in which the compound of formula (2) has limited solubility, for example ethanol or isopropanol. The mixture is stirred for about 1-5 hours and then filtered. The solid is purified by stirring with water, filtration and washing with water and then isopropanol and drying under vacuum and taken for the next step without purification.
Стадия 2 - Получение формулы (3)Stage 2 - Obtaining the formula (3)
Соединение формулы (2) затем преобразуют в соединение формулы (3) посредством взаимодействия с приблизительно 1-1,2 молярными эквивалентами этил-2-формил-3-оксопропионата. Реакцию проводят в протонном растворителе, предпочтительно этаноле, при приблизительно температуре кипячения с обратным холодильником в течение приблизительно 2-4 часов. После охлаждения до приблизительно 0°С твердое вещество отфильтровывают, промывают холодным этанолом и сушат при пониженном давлении. Продукт формулы (3) берут для следующей стадии без очистки.The compound of formula (2) is then converted to the compound of formula (3) by reaction with approximately 1-1.2 molar equivalents of ethyl 2-formyl-3-oxopropionate. The reaction is carried out in a protic solvent, preferably ethanol, at about reflux temperature for about 2-4 hours. After cooling to approximately 0 ° C., the solid was filtered off, washed with cold ethanol and dried under reduced pressure. The product of formula (3) is taken for the next step without purification.
Стадия 3 - Получение конечного продуктаStage 3 - Getting the final product
Конечный продукт получают из соединения формулы (3) посредством взаимодействия с метиламином, предпочтительно водным метиламином. Реакцию проводят при приблизительно комнатной температуре в течение приблизительно 4 часов. Продукт формулы 1 выделяют традиционным образом, например посредством фильтрации, промывания твердого вещества холодным этанолом и сушки при пониженном давлении.The final product is obtained from a compound of formula (3) by reaction with methylamine, preferably aqueous methylamine. The reaction is carried out at approximately room temperature for approximately 4 hours. The product of formula 1 is isolated in a conventional manner, for example by filtration, washing the solid with cold ethanol and drying under reduced pressure.
Получение исходных веществPreparation of starting materials
В качестве исходного вещества на стадии 1 применяют (4S,2R,3R,5R)-2-(6-амино-2-хлорпурин-9-ил)-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол. Это соединение является доступным на рынке.The starting material used in step 1 is (4S, 2R, 3R, 5R) -2- (6-amino-2-chloropurin-9-yl) -5- (hydroxymethyl) oxolan-3,4-diol. This compound is available in the market.
В качестве исходного вещества на стадии 2 применяют этил-2-формил-3-оксопропионат. Он является доступным на рынке, или его можно получить, как показано на схеме реакции II.Ethyl 2-formyl-3-oxopropionate is used as the starting material in step 2. It is commercially available or can be obtained as shown in Reaction Scheme II.
СХЕМА РЕАКЦИИ IISCHEME OF REACTION II
Этил-3,3-диэтоксипропионат взаимодействует с этилформиатом в присутствии сильного основания, предпочтительно гидрида натрия. Реакцию проводят при приблизительно 0-5°С в течение приблизительно 24 часов. Продукт выделяют традиционным образом, например посредством добавления воды и экстракции примесей традиционным растворителем, например трет-бутилметиловым эфиром, подкисления водной фазы, например, хлористоводородной кислотой, с последующей экстракцией растворителем, таким как дихлорметан, и удалением растворителя из осушенного экстракта при пониженном давлении. Этил-2-формил-3-оксопропионат очищают посредством перегонки при пониженном давлении.Ethyl 3,3-diethoxypropionate reacts with ethyl formate in the presence of a strong base, preferably sodium hydride. The reaction is carried out at approximately 0-5 ° C for approximately 24 hours. The product is isolated in a conventional manner, for example, by adding water and extracting impurities with a traditional solvent, for example tert-butyl methyl ether, acidifying the aqueous phase, for example, hydrochloric acid, followed by extraction with a solvent, such as dichloromethane, and removing the solvent from the dried extract under reduced pressure. Ethyl 2-formyl-3-oxopropionate is purified by distillation under reduced pressure.
Предпочтительный способ для крупномасштабного синтеза (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида показан на схеме реакции III.The preferred method for large-scale synthesis of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol- 4-yl) -N-methylcarboxamide is shown in Reaction Scheme III.
СХЕМА РЕАКЦИИ IIIRESPONSE DIAGRAM III
Стадия 1 - Получение формулы (2)Stage 1 - Obtaining the formula (2)
Как прежде, соединение формулы (2) получают из соединения формулы (1) посредством взаимодействия с моногидратом гидразина в отсутствие растворителя. Однако в этом способе 14,3-16,7-кратный избыток моногидрата гидразина сначала нагревают до приблизительно 60-65°С с последующим добавлением соединения формулы (1). Температуру поддерживают при приблизительно 60-65°С в ходе взаимодействия, которое занимает до завершения приблизительно от 1 до 3 часов. Когда уровень остаточного соединения формулы (1) в смеси составляет не более чем приблизительно 0,10%, реакционную смесь охлаждают до приблизительно 40°С. Температуру поддерживают, пока медленно добавляют воду. Как только добавлена приблизительно 4,2-4,9 массовая эквивалентность, смесь охлаждают до приблизительно 10°С и выдерживают при этой температуре в течение не менее чем 1 час.As before, a compound of formula (2) is prepared from a compound of formula (1) by reaction with hydrazine monohydrate in the absence of a solvent. However, in this method, a 14.3-16.7-fold excess of hydrazine monohydrate is first heated to about 60-65 ° C., followed by the addition of a compound of formula (1). The temperature is maintained at about 60-65 ° C. during the reaction, which takes about 1 to 3 hours to complete. When the level of the residual compound of formula (1) in the mixture is not more than about 0.10%, the reaction mixture is cooled to about 40 ° C. The temperature is maintained while water is slowly added. As soon as approximately 4.2-4.9 mass equivalence is added, the mixture is cooled to approximately 10 ° C. and held at this temperature for at least 1 hour.
Затем продукт выделяют фильтрацией, промывают водой и затем промывают абсолютным этанолом. Твердое вещество сушат под вакуумом при вплоть до 30°С в течение не менее чем 12 часов и затем берут на следующую стадию без дополнительной очистки.Then the product is isolated by filtration, washed with water and then washed with absolute ethanol. The solid is dried under vacuum at up to 30 ° C for at least 12 hours and then taken to the next step without further purification.
Стадия 2 - Получение формулы (4)Stage 2 - Obtaining the formula (4)
Соединение формулы (2) затем преобразуют в соединение формулы (4) посредством взаимодействия с избытком этил-2-формил-3-оксопропионата, например 2-10-кратным избытком, предпочтительно приблизительно 5-10-кратным, идеально приблизительно 6,8-7,5-кратным избытком. Реакцию можно проводить при таких же условиях, как условия, описанные для получения соединения формулы (3) в схеме реакции (I).The compound of formula (2) is then converted to the compound of formula (4) by reaction with an excess of ethyl 2-formyl-3-oxopropionate, for example, a 2-10-fold excess, preferably about 5-10-fold, ideally about 6.8-7 A 5-fold excess. The reaction can be carried out under the same conditions as the conditions described for obtaining the compounds of formula (3) in the reaction scheme (I).
Альтернативно к реакционной смеси также можно добавить приблизительно 0,05 молярных эквивалентов кислоты, такой как HCl. Реакции дают возможность продолжаться при температуре кипения с обратным холодильником в течение приблизительно 2-4 часов, пока уровень остаточного соединения формулы (2) не составит не более чем 0,50% и количество любого соединения формулы (3), которое может быть образовано, не составит не более чем 2,5%. После охлаждения до приблизительно 10°С, твердое вещество отфильтровывают, промывают абсолютным этанолом и сушат под вакуумом при вплоть до 40°С для удаления остаточного этанола. Продукт формулы (4) берут для следующей стадии без очистки.Alternatively, approximately 0.05 molar equivalents of an acid such as HCl can also be added to the reaction mixture. The reactions make it possible to continue at the boiling point under reflux for approximately 2-4 hours, until the level of the residual compound of formula (2) is not more than 0.50% and the amount of any compound of formula (3) that can be formed is not will be no more than 2.5%. After cooling to approximately 10 ° C, the solid is filtered off, washed with absolute ethanol and dried under vacuum at up to 40 ° C to remove residual ethanol. The product of formula (4) is taken for the next step without purification.
Соединение формулы (4) изображают как производное (2Е) алкена, так как оно представляет собой основной изомер, образованный в этой реакции. Однако следует отметить, что в этой реакции также может быть образовано значительное количество производного (2Z) алкена; то естьThe compound of formula (4) is depicted as a derivative of (2E) alkene, since it is the main isomer formed in this reaction. However, it should be noted that a significant amount of a (2Z) alkene derivative can also be formed in this reaction; i.e
названный как этил(2Z)-3-({9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-2-[4-(этоксикарбонил)пиразолил]пурин-6-ил}амино)-2-формилпроп-2-еноат.named as ethyl (2Z) -3 - ({9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -2- [4- (ethoxycarbonyl) pyrazolyl] purin-6-yl} amino) -2-formylprop-2-enoate.
Соответственно хотя соединение формулы (4) представлено только как производное (2Е) алкена, термин “соединение формулы (4)” предназначен для включения как случая, где он является единственно (2Е) изомером, так и случая, где основная часть продукта представляет собой (2Е) изомер и также присутствует минорная часть (2Z) изомера. Превращение соединения формулы (4) в конечный продукт посредством реакции с метиламином, как описано на стадии 3, протекает таким же образом, присутствует ли соединение формулы (4) как (2Е) изомер или как смесь (2Е) изомера и (2Z) изомера.Accordingly, although the compound of formula (4) is presented only as a derivative of (2E) alkene, the term “compound of formula (4)” is intended to include both the case where it is the only (2E) isomer and the case where the bulk of the product is ( 2E) isomer and a minor portion (2Z) of the isomer is also present. The conversion of the compound of formula (4) to the final product by reaction with methylamine as described in step 3 proceeds in the same way, whether the compound of formula (4) is present as a (2E) isomer or as a mixture of the (2E) isomer and (2Z) isomer.
Стадия 3 - Получение конечного продуктаStage 3 - Getting the final product
Конечный продукт получают из соединения формулы (4) посредством взаимодействия с метиламином, предпочтительно водным метиламином. Реакцию первоначально проводят при приблизительно 0-5°С в течение приблизительно 8 часов, предпочтительно в реакторе под давлением с последующим поднятием температуры до 50-60°С через приблизительно 1 час и поддержанием температуры в течение 15-30 минут.The final product is obtained from a compound of formula (4) by reaction with methylamine, preferably aqueous methylamine. The reaction is initially carried out at about 0-5 ° C for about 8 hours, preferably in a pressure reactor, followed by raising the temperature to 50-60 ° C after about 1 hour and maintaining the temperature for 15-30 minutes.
Альтернативно сначала метиламин помещают в сосуд под давлением и охлаждают до приблизительно 2,5-7,5°С, а затем добавляют соединение формулы (4), в то время как поддерживают температуру. Реакция протекает до тех пор, пока уровень остаточного соединения формулы (3) не составит менее чем приблизительно 0,10%.Alternatively, methylamine is first placed in a pressure vessel and cooled to about 2.5-7.5 ° C., and then the compound of formula (4) is added while the temperature is maintained. The reaction proceeds until the level of the residual compound of the formula (3) is less than about 0.10%.
После завершения продукт выделяют традиционным образом, например посредством дегазации под вакуумом при не более чем приблизительно 35°С для удаления избытка метиламина. Затем вакуум спускают и смесь охлаждают до приблизительно 0-5°С и выдерживают при температуре в течение 15 минут до одного часа с последующей фильтрацией. Твердое вещество, полученное таким образом, промывают водой и далее этанолом и сушат при пониженном давлении при температуре не более чем приблизительно 40°С.After completion, the product is isolated in a conventional manner, for example, by degassing under vacuum at no more than about 35 ° C. to remove excess methylamine. Then the vacuum is lowered and the mixture is cooled to approximately 0-5 ° C and maintained at a temperature of 15 minutes to one hour, followed by filtration. The solid thus obtained is washed with water and then ethanol and dried under reduced pressure at a temperature of not more than about 40 ° C.
Этот способ предоставляет (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамид в виде его моногидрата. Эту полиморфную модификацию можно дополнительно очистить посредством растворения в диметилсульфоксиде (DMSO), фильтрации из раствора любых твердых примесей, промывки дополнительным ДМСО и осаждения моногидрата из раствора посредством добавления к воде. Этот способ является особенно эффективным, когда раствор ДМСО и воду нагревают до приблизительно 78-88°С и выдерживают при этой температуре с перемешиванием в течение приблизительно 1 часа. После перемешивания суспензию медленно охлаждают до приблизительно 20°С. Затем конечный продукт выделяют посредством фильтрации, промывают очищенной водой и далее этанолом и сушат, как описано ранее.This method provides (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4- il) -N-methylcarboxamide as its monohydrate. This polymorphic modification can be further purified by dissolving in dimethyl sulfoxide (DMSO), filtering any solid impurities from the solution, washing with additional DMSO, and precipitating the monohydrate from the solution by adding to water. This method is particularly effective when the DMSO solution and water are heated to about 78-88 ° C and kept at this temperature with stirring for about 1 hour. After stirring, the suspension is slowly cooled to approximately 20 ° C. Then the final product is isolated by filtration, washed with purified water and then ethanol and dried, as described previously.
ПРИМЕР 1EXAMPLE 1
Получение этил-2-формил-3-оксопропионатаObtaining ethyl 2-formyl-3-oxopropionate
Трех- или четырехгорлую круглодонную колбу, оснащенную палочкой магнитной мешалки, термопарой, термометром с цифровой индикацией, входным и выходным отверстием для газа и дополнительной воронкой, продували аргоном. В дополнительную воронку загружали этил-3,3-диэтоксипропионат (64,5 г) в тетрагидрофуране. В реакционную колбу загружали гидрид натрия (21,2 г 60%-й дисперсии) вслед за тетрагидрофураном. Содержимое колбы охлаждали до 0-5°С на бане со льдом и добавляли этилформиат (257 г). Смесь охлаждали до 0-5°С и содержимое дополнительной воронки добавляли по каплям, поддерживая внутреннюю температуру менее чем 5°С. Удаляли баню со льдом и содержимому давали возможность нагреться до температуры окружающей среды. Расход этил-3,3-диэтоксипропионата отслеживали ТСХ анализом. Реакцию гасили посредством добавления воды со льдом (10,6 об.), экстрагировали три раза метил-трет-бутиловым эфиром (5,4 об. каждый) и отбрасывали органические слои. Водную фазу подкисляли концентрированной хлористоводородной кислотой до pH от 1 до 1,5. Подкисленный водный слой экстрагировали три раза дихлорметаном и объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток перегоняли под вакуумом для предоставления этил-2-формил-3-оксопропионата, 27,92 г, выход 70%.A three- or four-necked round-bottom flask equipped with a magnetic stir bar, thermocouple, thermometer with digital indication, gas inlet and outlet, and additional funnel were purged with argon. Ethyl 3,3-diethoxypropionate (64.5 g) in tetrahydrofuran was charged to an additional funnel. Sodium hydride (21.2 g of a 60% dispersion) was charged into the reaction flask following tetrahydrofuran. The contents of the flask were cooled to 0-5 ° C in an ice bath and ethyl formate (257 g) was added. The mixture was cooled to 0-5 ° C and the contents of the additional funnel was added dropwise, keeping the internal temperature less than 5 ° C. The ice bath was removed and the contents were allowed to warm to ambient temperature. The consumption of ethyl 3,3-diethoxypropionate was monitored by TLC analysis. The reaction was quenched by addition of ice water (10.6 vol.), Extracted three times with methyl tert-butyl ether (5.4 vol. Each) and the organic layers were discarded. The aqueous phase was acidified with concentrated hydrochloric acid to a pH of from 1 to 1.5. The acidified aqueous layer was extracted three times with dichloromethane and the combined organic layers were dried over sodium sulfate. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was vacuum distilled to provide ethyl 2-formyl-3-oxopropionate, 27.92 g, 70% yield.
ПРИМЕР 2EXAMPLE 2
А. Получение 2-гидразиноаденозина (2) A. Preparation of 2-hydrazinoadenosine (2)
Колбу, оснащенную механической мешалкой, входным и выходным отверстиями для газа и термопарой, продували аргоном. Добавляли гемигидрат 2-хлораденозина (53,1 г) с последующим добавлением моногидрата гидразина (134 г). Смесь перемешивали при нагреве при 40-45°С в течение 2 часов. Протекание реакции отслеживали посредством ТСХ-анализа. По завершении реакции источник тепла удаляли и добавляли этанол (800 мл). Смесь перемешивали в течение 2 часов при температуре окружающей среды, затем осадок собирали фильтрацией. Фильтровальную лепешку промывали этанолом и сушили при пониженном давлении в течение 30 минут. Твердые вещества переносили в чистую колбу, оснащенную механической мешалкой, и добавляли воду (300 мл). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов и твердые вещества выделяли фильтрацией. Фильтровальную лепешку промывали ледяной водой (300 мл) с последующей промывкой ледяным этанолом (300 мл). Твердое вещество сушили при пониженном давлении с получением 2-гидразиноаденозина (41,38 г, 81,4% выход, 99,3% чистота).A flask equipped with a mechanical stirrer, gas inlet and outlet, and a thermocouple was purged with argon. 2-Chloradenosine hemihydrate (53.1 g) was added followed by hydrazine monohydrate (134 g). The mixture was stirred under heating at 40-45 ° C for 2 hours. The progress of the reaction was monitored by TLC analysis. Upon completion of the reaction, the heat source was removed and ethanol (800 ml) was added. The mixture was stirred for 2 hours at ambient temperature, then the precipitate was collected by filtration. The filter cake was washed with ethanol and dried under reduced pressure for 30 minutes. The solids were transferred to a clean flask equipped with a mechanical stirrer and water (300 ml) was added. The suspension was stirred at room temperature for 18 hours and the solids were isolated by filtration. The filter cake was washed with ice water (300 ml), followed by washing with ice ethanol (300 ml). The solid was dried under reduced pressure to give 2-hydrazinoadenosine (41.38 g, 81.4% yield, 99.3% purity).
В. Альтернативное получение 2-гидразиноаденозина (2) B. Alternative Preparation of 2-Hydrazinoadenosine (2)
Сосуд для реакции, содержащий гидразингидрат (258 г, 250 мл), нагревали до 40-50°С. К теплой смеси по частям добавляли гемигидрат 2-хлораденозина (100 г), поддерживая температуру между 45-55°С. Температуру поддерживали при данном значении в течение двух часов и затем добавляли деионизированную воду (500 мл) в течение периода, равного 30 минутам, поддерживая температуру при 45-55°С. Смесь далее постепенно охлаждали до 0-5°С в течение периода, равного 3 часам, затем перемешивали при этой температуре в течение дополнительных 30 минут. Твердое вещество далее отфильтровывали и промывали холодной (2-5°С) деионизованной водой (200 мл) с последующей промывкой этанолом (400 мл). Твердое вещество сушили под вакуумом в течение 12 часов с получением 2-гидразиноаденозина.The reaction vessel containing hydrazine hydrate (258 g, 250 ml) was heated to 40-50 ° C. To the warm mixture, 2-chloradenosine hemihydrate (100 g) was added in portions, maintaining the temperature between 45-55 ° C. The temperature was maintained at this value for two hours, and then deionized water (500 ml) was added over a period of 30 minutes, maintaining the temperature at 45-55 ° C. The mixture was then gradually cooled to 0-5 ° C over a period of 3 hours, then stirred at this temperature for an additional 30 minutes. The solid was further filtered and washed with cold (2-5 ° C) deionized water (200 ml), followed by washing with ethanol (400 ml). The solid was dried under vacuum for 12 hours to give 2-hydrazinoadenosine.
С. Альтернативное получение 2-гидразиноаденозина (2) C. Alternative Preparation of 2-Hydrazinoadenosine (2)
В сосуд для реакции загружают гидразингидрат (1285 г). Раствор нагревают до приблизительно 62°С и добавляют 2-хлораденозин (500 г) при поддержании температуры, равной приблизительно 62°С. Смесь поддерживают при отметке 62°С в течение по меньшей мере 2 часов, пока уровень остаточного 2-хлораденозина в смеси не будет составлять не более чем 0,10%. Смесь охлаждают до приблизительно 40°С и смесь проверяют для подтверждения присутствия твердых веществ. Медленно добавляют воду (2275 г), при поддержании температуры, равной приблизительно 40°С. Смесь охлаждают до приблизительно 10°С и выдерживают в течение не менее 1 часа. Продукт выделяют фильтрацией, промывают водой (1195 г) и далее абсолютным этанолом (1885 г). Продукт сушат под вакуумом при температуре вплоть до 30°С в течение не менее 12 часов с получением 2-гидразиноаденозина.Hydrazine hydrate (1285 g) was charged into the reaction vessel. The solution was heated to approximately 62 ° C and 2-chloradenosine (500 g) was added while maintaining a temperature of approximately 62 ° C. The mixture is maintained at 62 ° C. for at least 2 hours, until the level of residual 2-chloradenosine in the mixture is not more than 0.10%. The mixture was cooled to approximately 40 ° C and the mixture was checked to confirm the presence of solids. Slowly add water (2275 g), while maintaining a temperature of approximately 40 ° C. The mixture is cooled to approximately 10 ° C and incubated for at least 1 hour. The product was isolated by filtration, washed with water (1195 g) and then with absolute ethanol (1885 g). The product is dried under vacuum at temperatures up to 30 ° C for at least 12 hours to obtain 2-hydrazinoadenosine.
ПРИМЕР 3EXAMPLE 3
Получение этил-1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-карбоксилата (3)Preparation of Ethyl 1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazole-4-carboxylate (3)
Этил-2-формил-3-оксопропионат (23,93 г, 0,17 моль) помещали в колбу, снабженную механической мешалкой, входным и выходным отверстиями для газа и обратным холодильником. В колбу добавляли 2-пропанол с последующим добавлением 2-гидразиноаденозина (44,45 г, 0,15 моль). Смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником при перемешивании в течение 2-4 часов, отслеживая протекание реакции с помощью ТСХ-анализа. Когда реакцию сочли завершенной, источник тепла удалили и смесь охладили до комнатной температуры. Суспензию охлаждали при перемешивании на бане со льдом в течение 1,5-2 часов. Твердые вещества выделяли вакуум-фильтрацией и промывали ледяным 2-пропанолом. Продукт, этил-1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-карбоксилат, сушили при пониженном давлении до постоянной массы.Ethyl 2-formyl-3-oxopropionate (23.93 g, 0.17 mol) was placed in a flask equipped with a mechanical stirrer, gas inlet and outlet and a reflux condenser. 2-propanol was added to the flask, followed by 2-hydrazinoadenosine (44.45 g, 0.15 mol). The mixture was heated at the boil under reflux with stirring for 2-4 hours, monitoring the progress of the reaction using TLC analysis. When the reaction was deemed complete, the heat source was removed and the mixture was cooled to room temperature. The suspension was cooled with stirring in an ice bath for 1.5-2 hours. The solids were suction filtered and washed with ice-cold 2-propanol. Product, ethyl-1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4- carboxylate, dried under reduced pressure to constant weight.
ПРИМЕР 4EXAMPLE 4
Получение (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамидаPreparation of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide
Смесь этил-1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-карбоксилата (46,4 г) и метиламина (40% в воде, 600 мл) перемешивали при температуре окружающей среды в течение приблизительно 4 часов, отслеживая протекание реакции с помощью ВЭЖХ-анализа. Основное количество избыточного метиламина удаляли при пониженном давлении и оставшуюся смесь охлаждали до 0°С в течение 2 часов. Твердое вещество отфильтровывали, промывали ледяным этанолом с крепостью 200 и сушили при пониженном давлении с получением (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида в виде его моногидрата.A mixture of ethyl 1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazole-4-carboxylate (46.4 g) and methylamine (40% in water, 600 ml) were stirred at ambient temperature for approximately 4 hours, monitoring the progress of the reaction by HPLC analysis. The main amount of excess methylamine was removed under reduced pressure and the remaining mixture was cooled to 0 ° C for 2 hours. The solid was filtered off, washed with 200 ml ice-cold ethanol and dried under reduced pressure to obtain (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl ] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide as its monohydrate.
Структуру вещества подтверждали с помощью 1Н ЯМР (см. фиг.1 и ниже). Термический анализ (см. фиг.2) представил результаты, совпадающие с присутствием одной молекулы воды. Получали рентгенограммы дифракционных полос (фиг.3).The structure of the substance was confirmed using 1 H NMR (see figure 1 and below). Thermal analysis (see figure 2) presented results that coincide with the presence of one water molecule. Received x-ray diffraction bands (figure 3).
Спектры 1Н- и 13С-ЯМР получали следующим образом. Два образца вещества, полученного выше, взвешивали и растворяли в d6-ДМСО - 5,3 мг применяли для 1Н-спектров и 20,8 мг использовали для 13С-спектров. Все спектры регистрировали при температуре окружающей среды на спектрометре JEOL Eclipse+ 400 c рабочей частотой 400 МГц для 1Н- и 100 МГц для 13С.Spectra 1 H - and 13 C-NMR were obtained as follows. Two samples of the material obtained above were weighed and dissolved in d 6 -DMSO - 5.3 mg was used for 1 H-spectra and 20.8 mg was used for 13 C-spectra. All spectra were recorded at ambient temperature on a JEOL Eclipse + 400 spectrometer with an operating frequency of 400 MHz for 1 H and 100 MHz for 13 C.
ПРИМЕР 5EXAMPLE 5
А. Получение этил-(2Е)-3-({9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-2-[4-(этоксикарбонил)пиразолил]пурин-6-ил}амино)-2-формилпроп-2-еноата (4)A. Preparation of Ethyl (2E) -3 - ({9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -2- [4- ( ethoxycarbonyl) pyrazolyl] purin-6-yl} amino) -2-formylprop-2-enoate (4)
Смесь 2-гидразиноаденозина (100 г, 0,34 моль), этил-2-формил-3-оксопропионата (242 г, 1,7 моль) и абсолютного этанола загружали в реактор и смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 часов. Когда реакцию сочли завершенной, источник тепла удаляли и смесь постепенно охлаждали до 5-10°С в течение периода, равного 3 часам. Суспензию перемешивали в течение 30 минут при данной температуре и смесь фильтровали. Твердое вещество промывали холодным (5-10°С) абсолютным этанолом и затем сушили под вакуумом при температуре, которая не превышала 40°С с получением этил-(2Е)-3-({9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-2-[4-(этоксикарбонил)пиразолил]пурин-6-ил}амино)-2-формилпроп-2-еноата.A mixture of 2-hydrazinoadenosine (100 g, 0.34 mol), ethyl 2-formyl-3-oxopropionate (242 g, 1.7 mol) and absolute ethanol was charged into the reactor and the mixture was heated under reflux for 2 hours . When the reaction was deemed complete, the heat source was removed and the mixture was gradually cooled to 5-10 ° C. over a period of 3 hours. The suspension was stirred for 30 minutes at this temperature and the mixture was filtered. The solid was washed with cold (5-10 ° C) absolute ethanol and then dried under vacuum at a temperature that did not exceed 40 ° C to obtain ethyl (2E) -3 - ({9 - [(4S, 2R, 3R, 5R ) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -2- [4- (ethoxycarbonyl) pyrazolyl] purin-6-yl} amino) -2-formylprop-2-enoate.
В. Альтернативное получение этил-(2Е)-3-({9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-2-[4-(этоксикарбонил)пиразолил]пурин-6-ил}амино)-2-формилпроп-2-еноата (4) B. Alternative Preparation of Ethyl (2E) -3 - ({9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -2- [4- (ethoxycarbonyl) pyrazolyl] purin-6-yl} amino) -2-formylprop-2-enoate (4)
В сосуд для реакции загружают 2-гидразиноаденозин (450 г) и добавляют абсолютный этанол (11376 г), HCl (7,47 г) и этил-2-формил-3-оксопропионат (1557 г). Смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником и из нее отбирают образцы до тех пор, пока уровень остаточного 2-гидразиноаденозина в смеси не будет составлять более чем 0,50%, а уровень соединения формулы (3) не составит более чем 2,5%. Смесь медленно охлаждают до приблизительно 10°С. Продукт, соединение формулы (4), выделяют фильтрацией и промывают абсолютным этанолом (5121 г). Продукт сушат под вакуумом при температуре до 40°С до тех пор, пока остаточный этанол не составит более чем 5000 ppm с получением этил-(2Е)-3-({9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-2-[4-(этоксикарбонил)пиразолил]пурин-6-ил}амино)-2-формилпроп-2-еноата.2-hydrazinoadenosine (450 g) was loaded into the reaction vessel and absolute ethanol (11376 g), HCl (7.47 g) and ethyl 2-formyl-3-oxopropionate (1557 g) were added. The mixture is heated at the boil under reflux and samples are taken from it until the level of residual 2-hydrazinoadenosine in the mixture is more than 0.50% and the level of the compound of formula (3) is more than 2.5%. The mixture is slowly cooled to approximately 10 ° C. The product, a compound of formula (4), was isolated by filtration and washed with absolute ethanol (5121 g). The product is dried under vacuum at a temperature of up to 40 ° C until the residual ethanol is more than 5000 ppm to obtain ethyl- (2E) -3 - ({9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3, 4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -2- [4- (ethoxycarbonyl) pyrazolyl] purin-6-yl} amino) -2-formylprop-2-enoate.
Элементный анализ продукта примера 5А дал следующие результаты: С, 48,75%; Н, 4,86%; N, 18,05%; О, 27,57. Теоретические значения: С, 49,72%; Н, 4,74%; N, 18,45%; О, 27,09. Результаты анализа соответствуют пределам экспериментальной погрешности для гемигидрата требуемого продукта (С, 48,89%; Н, 4,81%; N, 18,1%; О, 28,12).Elemental analysis of the product of example 5A gave the following results: C, 48.75%; H, 4.86%; N, 18.05%; Oh, 27.57. Theoretical values: C, 49.72%; H, 4.74%; N, 18.45%; Oh, 27.09. The analysis results correspond to the experimental error limits for the hemihydrate of the desired product (C, 48.89%; H, 4.81%; N, 18.1%; O, 28.12).
Спектры 1Н- и 13С-ЯМР получали следующим образом. 20,2 мг соединения формулы (4) растворяли в ~0,75 мл ДМСО-d6 и спектры получали при температуре окружающей среды на спектрометре JEOL ECX-400 c рабочей частотой 400 МГц для 1Н- и 100 МГц для 13С. Химические сдвиги относили с ДМСО растворителем, 2,50 мд для 1Н и 39,5 ppm для 13С.Spectra 1 H - and 13 C-NMR were obtained as follows. 20.2 mg of the compound of formula (4) was dissolved in ~ 0.75 ml of DMSO-d 6 and the spectra were obtained at ambient temperature on a JEOL ECX-400 spectrometer with an operating frequency of 400 MHz for 1 H and 100 MHz for 13 C. Chemical shifts are treated with DMSO solvent, 2.50 ppm for 1 H and 39,5 ppm to 13 C.
РЕЗУЛЬТАТЫRESULTS
Химические сдвиги для 1Н и 13С приведены в таблице 1. Два изомера в соотношении ~60/30 наблюдали как в спектрах 1Н, так и 13С, обозначенные как основной и минорный в таблице.Chemical shifts for 1 H and 13 C are shown in Table 1. Two isomers in a ratio of ~ 60/30 was observed in the spectra of 1 H and 13 C, designated as the primary and minor in the table.
Было подтверждено, что соединение формулы (4) представляет собой смесь следующих двух изомеров:It was confirmed that the compound of formula (4) is a mixture of the following two isomers:
ПРИМЕР 6EXAMPLE 6
А. Получение (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида из соединения (4) A. Preparation of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4- il) -N-methylcarboxamide from compound (4)
Водный 40% раствор метиламина (1300 мл) помещали в реактор под давлением, охлаждали до 0-5°С и добавляли продукт примера 5А, (этил-(2Е)-3-({9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-2-[4-(этоксикарбонил)пиразолил]пурин-6-ил}амино)-2-формилпроп-2-еноат (100 г). Смесь перемешивали при 0-5°С в течение по меньшей мере 8 часов, отслеживая завершение реакции. По завершении смесь нагревали, поддерживая температуру между 50 и 60°С в течение 1 часа, и далее охлаждали до менее чем 30°С в течение 1 часа. Когда температура стала ниже 30°С, смесь дегазировали, используя давление, равное 100-150 мм Hg, давая возможность температуре понизиться до 0-5°С. Смесь перемешивали при 0-5°С в течение по меньшей мере 1 часа, поддерживая давление при 100-150 мм Hg. Вакуум затем прерывали и заменяли на азот, поддерживая температуру при 0-5°С в течение не менее 30 минут. Твердый продукт далее отфильтровывали, промывали водой (3×500 мл), затем абсолютным этанолом (625 мл). Продукт сушили под вакуумом, не позволяя температуре превышать 40°С, с получением (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида в виде его моногидрата.An aqueous 40% methylamine solution (1300 ml) was placed in a reactor under pressure, cooled to 0-5 ° C, and the product of Example 5A, (ethyl- (2E) -3 - ({9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) was added ) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -2- [4- (ethoxycarbonyl) pyrazolyl] purin-6-yl} amino) -2-formylprop-2-enoate (100 g) The mixture was stirred at 0-5 ° C for at least 8 hours, monitoring the completion of the reaction.After completion, the mixture was heated, maintaining the temperature between 50 and 60 ° C for 1 hour, and then cooled to less than 30 ° C for 1 hour. When the temperature dropped below 30 ° C, the mixture was degassed using pressure equal to 100-150 mm Hg, allowing the temperature to drop to 0-5 ° C. The mixture was stirred at 0-5 ° C for at least 1 hour, maintaining the pressure at 100-150 mm Hg. The vacuum was then interrupted and replaced nitrogen, maintaining the temperature at 0-5 ° C for at least 30 minutes.The solid product was then filtered, washed with water (3 × 500 ml), then with absolute ethanol (625 ml). The product was dried under vacuum, not allowing the temperature to exceed 40 ° C, to give (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol- 4-yl) -N-methylcar oxamide in the form of its monohydrate.
В. Альтернативное получение (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида из Соединения (4) B. Alternative Preparation of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R , 5R) -3,4- dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurine-2-yl} pyrazol-4 -yl) -N-methylcarboxamide from Compound (4)
Сосуд, работающий под давлением, загружают раствором 47% метиламина (10080 г). Раствор охлаждают и добавляют соединение формулы (4), как было получено в примере 5В выше (600 г) при поддержании температурной отметки 5°С. Смесь перемешивают при температурной отметке 5°С до тех пор, пока уровень остаточного соединения формулы (3) в смеси не станет ниже 0,10%. Реакционную смесь дегазируют под вакуумом при не более чем 35°С для удаления избытка метиламина. Вакуум сбрасывают и смесь охлаждают до 2,5°С и выдерживают в течение по меньшей мере 30 мин. Продукт далее выделяют фильтрацией, промывают водой (не менее чем 9000 г) и затем абсолютным этанолом (не менее чем 2964 г). Продукт сушат под вакуумом при температуре до 40°С пока остаточный этанол составит не более чем 5000 ppm с получением неочищенного (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида в виде его моногидрата.The pressure vessel was charged with a solution of 47% methylamine (10080 g). The solution was cooled and the compound of formula (4) was added as was obtained in Example 5B above (600 g) while maintaining a temperature of 5 ° C. The mixture is stirred at a temperature of 5 ° C until the level of the residual compound of formula (3) in the mixture drops below 0.10%. The reaction mixture is degassed under vacuum at no more than 35 ° C to remove excess methylamine. The vacuum is discharged and the mixture is cooled to 2.5 ° C and held for at least 30 minutes. The product is further isolated by filtration, washed with water (not less than 9000 g) and then absolute ethanol (not less than 2964 g). The product is dried under vacuum at a temperature of up to 40 ° C until the residual ethanol is not more than 5000 ppm to obtain crude (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide as its monohydrate.
Спектры 1Н- и 13С-ЯМР получали следующим образом. Два образца вещества, полученного в примере 6А, взвешивали и растворяли в d6-ДМСО - 5,3 мг применяли для 1Н-спектров и 20,8 мг использовали для 13С-спектров. Все спектры регистрировали при температуре окружающей среды на спектрометре JEOL Eclipse+ 400 c рабочей частотой 400 МГц для 1Н- и 100 МГц для 13С.Spectra 1 H - and 13 C-NMR were obtained as follows. Two samples of the substance obtained in Example 6A were weighed and dissolved in d 6 -DMSO — 5.3 mg was used for 1 H-spectra and 20.8 mg was used for 13 C-spectra. All spectra were recorded at ambient temperature on a JEOL Eclipse + 400 spectrometer with an operating frequency of 400 MHz for 1 H and 100 MHz for 13 C.
Элементный анализ продукта дал следующие результаты: С, 43,96%; Н, 4,94%; N, 27,94%; О, 27,57%. Теоретические значения: С, 44,12%; Н, 4,94%; N, 27,44%; О, 27,09%. Результаты анализа соответствуют пределам экспериментальной погрешности для моногидрата.Elemental analysis of the product gave the following results: C, 43.96%; H, 4.94%; N, 27.94%; Oh, 27.57%. Theoretical values: C, 44.12%; H, 4.94%; N, 27.44%; Oh, 27.09%. The results of the analysis correspond to the experimental error limits for the monohydrate.
ПРИМЕР 7EXAMPLE 7
А. Очистка моногидрата (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида A. Purification of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4 monohydrate -yl) -N-methylcarboxamide
Раствор (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида, полученного как в примере 4 (100 г), в диметилсульфоксиде (300 мл) фильтровали через префильтр 0,6-0,8 микрон и фильтр 0,2 микрон для удаления любых твердых примесей. Фильтрат затем медленно добавляли в течение 1 часа к деионизованной воде (1 литр) при перемешивании и полученную таким образом суспензию перемешивали в течение не менее 1 часа. Твердое вещество отфильтровывали, промывали деионизованной водой (2×1 литр) и сушили под вакуумом в течение не менее 1 часа.Solution (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) The -N-methylcarboxamide obtained as in Example 4 (100 g) in dimethyl sulfoxide (300 ml) was filtered through a 0.6-0.8 micron prefilter and a 0.2 micron filter to remove any solid impurities. The filtrate was then slowly added over 1 hour to deionized water (1 liter) with stirring, and the suspension thus obtained was stirred for at least 1 hour. The solid was filtered off, washed with deionized water (2 × 1 liter) and dried under vacuum for at least 1 hour.
Высушенный продукт затем повторно суспендировали в деионизованной воде (1,5 литра) в течение не менее 2 часов, отфильтровывали, промывали деионизованной водой (1 литр) с последующей промывкой абсолютным этанолом (750 мл). Очищенный продукт сушили под вакуумом при температуре не более чем 40°С в течение не менее 12 часов с получением моногидрата (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида, свободного от любой примеси 2-гидразинаденозина.The dried product was then re-suspended in deionized water (1.5 liters) for at least 2 hours, filtered, washed with deionized water (1 liter), followed by washing with absolute ethanol (750 ml). The purified product was dried under vacuum at a temperature of not more than 40 ° C for at least 12 hours to obtain the monohydrate (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide free of any impurity of 2-hydrazinadenosine.
В. Альтернативная очистка моногидрата (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида B. Alternative Purification of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol- monohydrate 4-yl) -N-methylcarboxamide
Раствор моногидрата (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида (400 г) растворяют в ДМСО (1320 г) и раствор фильтруют через серию последовательных фильтров 0,6-0,8-микрон и 0,2-микрон. Для промывки системы фильтров применяют дополнительный ДМСО (880 г). Раствор медленно добавляют к очищенной воде (5000 г) при поддержании температурной отметки, равной 83°С. Продукт начинает кристаллизоваться во время добавления, и суспензию перемешивают при отметке 83°С в течение приблизительно 1 часа. Смесь медленно охлаждают до 20°С. Продукт выделяют фильтрацией и промывают очищенной водой (8000 г).Solution of (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl monohydrate ) -N-methylcarboxamide (400 g) was dissolved in DMSO (1320 g) and the solution was filtered through a series of successive filters of 0.6-0.8-micron and 0.2-micron. An additional DMSO (880 g) is used to flush the filter system. The solution is slowly added to purified water (5000 g) while maintaining a temperature mark of 83 ° C. The product begins to crystallize during the addition, and the suspension is stirred at 83 ° C. for approximately 1 hour. The mixture is slowly cooled to 20 ° C. The product was isolated by filtration and washed with purified water (8000 g).
Твердые вещества загружают в сосуд и добавляют очищенную воду (6000 г). Суспензию перемешивают в течение приблизительно 1 часа. Продукт выделяют фильтрацией и промывают очищенной водой (4000 г) и затем абсолютным этанолом (3160 г). Продукт сушат под вакуумом при температуре до 40°С до тех пор, пока содержание остаточной воды станет не более 5,5%, а остаточного этанола не более 2000 ppm с получением моногидрата (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамида.Solids are loaded into a vessel and purified water (6000 g) is added. The suspension is stirred for approximately 1 hour. The product was isolated by filtration and washed with purified water (4000 g) and then with absolute ethanol (3160 g). The product is dried under vacuum at a temperature of up to 40 ° С until the content of residual water becomes no more than 5.5% and the residual ethanol no more than 2000 ppm to produce monohydrate (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide.
Claims (15)
путем контактирования соединения формулы (4):
с водным метиламином при температуре, равной приблизительно 2,5-7,5°С.1. The method of obtaining monohydrate (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurin-2-yl} pyrazol- 4-yl) -N-methylcarboxamide
by contacting a compound of formula (4):
with aqueous methylamine at a temperature of approximately 2.5-7.5 ° C.
(a) дегазирования под вакуумом при температуре не более 35°С для удаления избыточного метиламина,
(b) сбрасывания вакуума и охлаждения до 0-5°С в течение приблизительно от 15 минут до часа,
(c) фильтрования образованной таким образом суспензии,
(d) промывки содержимого фильтра водой и далее этанолом и
(e) сушки оставшегося твердого вещества под вакуумом при температуре, которая не превышает 40°С.3. The method according to claim 2, where the product is isolated by
(a) degassing under vacuum at a temperature not exceeding 35 ° C to remove excess methylamine,
(b) venting and cooling to 0-5 ° C. for about 15 minutes to an hour,
(c) filtering the suspension thus formed,
(d) washing the contents of the filter with water and then ethanol; and
(e) drying the remaining solid under vacuum at a temperature that does not exceed 40 ° C.
(i) растворения высушенного твердого вещества, полученного на стадии (е) по п.3 в растворителе, таком как диметилсульфоксид,
(ii) фильтрования любых твердых примесей из раствора,
(iii) промывки дополнительным растворителем, таким как диметилсульфоксид,
(iv) добавления раствора к очищенной воде, которую поддерживают при температуре приблизительно 78-88°С с образованием таким образом суспензии,
(v) перемешивания суспензии,
(vi) охлаждения суспензии,
(vii) фильтрования,
(viii) промывки содержимого фильтра водой и далее этанолом и
(ix) сушки оставшегося твердого вещества под вакуумом при температуре, которая не превышает 40°С.4. The method according to claim 3, where the final product is (1- {9 - [(4S, 2R, 3R, 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymethyl) oxolan-2-yl] -6-aminopurine- 2-yl} pyrazol-4-yl) -N-methylcarboxamide is further purified by
(i) dissolving the dried solid obtained in step (e) according to claim 3 in a solvent such as dimethyl sulfoxide,
(ii) filtering any solid impurities from the solution,
(iii) washing with an additional solvent such as dimethyl sulfoxide,
(iv) adding a solution to the purified water, which is maintained at a temperature of about 78-88 ° C, thereby forming a suspension,
(v) mixing the suspension,
(vi) cooling the suspension,
(vii) filtering,
(viii) washing the contents of the filter with water and then ethanol; and
(ix) drying the remaining solid under vacuum at a temperature that does not exceed 40 ° C.
включающий взаимодействие соединения формулы (1)
с 14,3-16,7-кратным молярным избытком гидрата гидразина при температуре, равной приблизительно 60-65°С с получением соединения формулы (2)
с последующим контактированием полученного соединения формулы (2) с избытком этил-2-формил-3-оксопропионата необязательно в присутствии кислоты.6. A method of obtaining a compound of formula (4):
comprising the interaction of the compounds of formula (1)
with a 14.3-16.7-fold molar excess of hydrazine hydrate at a temperature of about 60-65 ° C. to give a compound of formula (2)
followed by contacting the resulting compound of formula (2) with an excess of ethyl 2-formyl-3-oxopropionate, optionally in the presence of an acid.
(a) охлаждения смеси, полученной после завершения реакции, до приблизительно 10°С,
(b) фильтрования,
(c) промывки содержимого фильтра этанолом и
(d) сушки оставшегося твердого вещества под вакуумом при температуре, которая не превышает 40°С.12. The method according to claim 11, where the final product is isolated by
(a) cooling the mixture obtained after completion of the reaction to about 10 ° C,
(b) filtering,
(c) washing the contents of the filter with ethanol; and
(d) drying the remaining solid under vacuum at a temperature that does not exceed 40 ° C.
включающий
взаимодействие соединения формулы (1)
с 14,3-16,7-кратным молярным избытком гидрата гидразина при температуре, равной приблизительно 60-65°С.13. The method of obtaining the compounds of formula (2):
including
the interaction of the compounds of formula (1)
with a 14.3-16.7-fold molar excess of hydrazine hydrate at a temperature of approximately 60-65 ° C.
(a) охлаждения реакционной смеси до приблизительно 40°С,
(b) добавления 4,2-4,9 массовых эквивалентов воды при поддержании температуры, равной приблизительно 40°С,
(c) охлаждения смеси до температуры приблизительно 10°С и поддержания такой температуры в течение по меньшей мере 1 ч,
(d) фильтрования,
(e) промывки содержимого фильтра водой и далее этанолом и
(f) сушки оставшегося твердого вещества под вакуумом при температуре, которая не превышает 30°С, в течение по меньшей мере 12 ч. 15. The method according to item 13, where the compound of formula (2) is isolated by
(a) cooling the reaction mixture to about 40 ° C,
(b) adding 4.2-4.9 weight equivalents of water while maintaining a temperature of approximately 40 ° C,
(c) cooling the mixture to a temperature of approximately 10 ° C and maintaining this temperature for at least 1 hour,
(d) filtering,
(e) washing the contents of the filter with water and then ethanol; and
(f) drying the remaining solid in vacuo at a temperature that does not exceed 30 ° C. for at least 12 hours
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009146829/04A RU2443708C2 (en) | 2007-05-17 | 2007-05-17 | Method of producing a2a-adenosine receptor agonist and polymorphic modifications thereof |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009146829/04A RU2443708C2 (en) | 2007-05-17 | 2007-05-17 | Method of producing a2a-adenosine receptor agonist and polymorphic modifications thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2009146829A RU2009146829A (en) | 2011-06-27 |
RU2443708C2 true RU2443708C2 (en) | 2012-02-27 |
Family
ID=44738562
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009146829/04A RU2443708C2 (en) | 2007-05-17 | 2007-05-17 | Method of producing a2a-adenosine receptor agonist and polymorphic modifications thereof |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2443708C2 (en) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000078779A2 (en) * | 1999-06-22 | 2000-12-28 | Cv Therapeutics, Inc. | N-pyrazole a2a receptor agonists |
RU2004125492A (en) * | 2002-02-19 | 2006-01-27 | Си Ви Терапьютикс, Инк. (Us) | PARTIAL AND COMPLETE AGENISTS OF Adenosine Receptors A1 |
-
2007
- 2007-05-17 RU RU2009146829/04A patent/RU2443708C2/en active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000078779A2 (en) * | 1999-06-22 | 2000-12-28 | Cv Therapeutics, Inc. | N-pyrazole a2a receptor agonists |
US7183264B2 (en) * | 1999-06-22 | 2007-02-27 | Cv Therapeutics, Inc. | N-pyrazole A2A receptor agonists |
RU2004125492A (en) * | 2002-02-19 | 2006-01-27 | Си Ви Терапьютикс, Инк. (Us) | PARTIAL AND COMPLETE AGENISTS OF Adenosine Receptors A1 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
NIIYA K. et al., 2-(N'-alkylidenehydrazino)adenosines: Potent and selective coronary vasodilators. Journal of Med. Chemistry, 1992, vol.35, pp.4557-4561. ELZEIN E. et al., N 6 -cycloalkyl-2-substituted adenosine derivatives as selective, high affinity * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2009146829A (en) | 2011-06-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
USRE47301E1 (en) | Process for preparing an A2A-adenosine receptor agonist and its polymorphs | |
EP2158208B1 (en) | Process for preparing an a2a-adenosine receptor agonist and its polymorphs | |
CA2787759C (en) | Process for preparing an a2a-adenosine receptor agonist and its polymorphs | |
RU2443708C2 (en) | Method of producing a2a-adenosine receptor agonist and polymorphic modifications thereof | |
AU2014200786A1 (en) | Process for preparing an A2A-adenosine receptor agonist and its polymorphs | |
JP2013067662A (en) | Process for preparing a2a-adenosine receptor agonist and polymorph of the same | |
MX2008009879A (en) | Process for preparing an a2a-adenosine receptor agonist and its polymorphs |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD4A | Correction of name of patent owner | ||
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20140702 |
|
TC4A | Altering the group of invention authors |
Effective date: 20190409 |