RU2434059C1 - Способ получения сухой формы биопрепарата для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами - Google Patents
Способ получения сухой формы биопрепарата для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами Download PDFInfo
- Publication number
- RU2434059C1 RU2434059C1 RU2010121688/10A RU2010121688A RU2434059C1 RU 2434059 C1 RU2434059 C1 RU 2434059C1 RU 2010121688/10 A RU2010121688/10 A RU 2010121688/10A RU 2010121688 A RU2010121688 A RU 2010121688A RU 2434059 C1 RU2434059 C1 RU 2434059C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oil
- rhodococcus
- pseudomonas
- microorganisms
- sorbent
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 title 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 18
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 13
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 12
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims abstract description 10
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 8
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 claims abstract description 7
- 241000316848 Rhodococcus <scale insect> Species 0.000 claims abstract description 7
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 6
- 239000004576 sand Substances 0.000 claims abstract description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 claims abstract description 4
- ASHGTUMKRVIOLH-UHFFFAOYSA-L potassium;sodium;hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[K+].OP([O-])([O-])=O ASHGTUMKRVIOLH-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 4
- 238000004448 titration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 6
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 24
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 abstract description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 abstract 2
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 abstract 1
- 229910001562 pearlite Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 abstract 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 17
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 8
- 241000589774 Pseudomonas sp. Species 0.000 description 6
- 241000187562 Rhodococcus sp. Species 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000000254 damaging effect Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003413 degradative effect Effects 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000010304 firing Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003209 petroleum derivative Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000005335 volcanic glass Substances 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ получения сухой формы биопрепарата на основе микроорганизма-нефтедеструктора рода Pseudomonas или Rhodococcus для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами. Культивируют бактерии рода Pseudomonas или Rhodococcus в жидкой питательной среде. Затем суспензию бактерий смешивают с защитной средой. При этом защитную среду готовят на основе 0,05 М натрий-калиевого фосфатного буфера рН 6,8 при следующем соотношении компонентов: 4% полиглюкина, 10% сахарозы, 4% тиомочевины, 2% аскорбиновой кислоты с последующим титрованием 45% раствором гидроксида натрия до рН 6,8-7,2. Полученную смесь добавляют к сорбенту - вспученному перлитовому песку. Затем проводят контактную сушку препарата при t=37°C до постоянной массы. Способ позволяет повысить выживаемость бактериальных клеток микроорганизмов-нефтедеструкторов родов Pseudomonas и Rhodococcus до 44% и 81% соответственно. 1 ил., 2 табл.
Description
Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии, а именно технологии производства сухих микробных препаратов, предназначенных для очистки почв и водных поверхностей, загрязненных нефтью и нефтепродуктами.
Известен способ контактной сушки микроорганизмов (2008589, Российская Федерация, F26B 5/16), предусматривающий смешивание суспензии микроорганизмов с сорбентом влаги, отличающийся тем, что перед смешиванием микроорганизмов с сорбентом последний и/или суспензию смешивают с гидрофобной жидкостью с возможным добавлением стабилизатора суспензии. Однако данный способ не используется для хранения нефтеокисляющих бактерий. К тому же отсутствует проверка выживаемости микроорганизмов в сухом препарате при хранении.
Известен способ получения сухой формы биопрепарата с последующим хранением (2160992, Российская Федерация, А23С 9/12), заключающийся в культивировании микроорганизмов в подобранных условиях с последующим сублимационным высушиванием полученного препарата с добавлением желатина, сахарозы и обезжиренного сухого молока в качестве защитных компонентов. При хранении при комнатной температуре в течение полугода снижение выживаемости было незначительным. Однако сублимационное высушивание требует значительных материальных затрат, а в процессе сушки из-за воздействия низких температур и вакуума может погибать значительная часть микроорганизмов. К тому же данный способ описан только для бактерий Lactobacillus acidophilus, и его использование для нефтеокисляющих бактерий может оказаться неэффективным.
Задачей настоящего изобретения является повышение выживаемости и сохранение деградативной активности клеток микроорганизмов-нефтедеструкторов родов Pseudomonas и Rhodococcus при получении сухой формы биопрепарата из этих бактерий.
Для решения поставленной задачи сухую форму биопрепарата получают культивированием бактерий в жидкой питательной среде, введением защитной среды, смешиванием с сорбентом и контактной сушкой, при этом защитную среду готовят на основе 0,05 М натрий-калиевого фосфатного буфера (рН 6,8) при следующем соотношении компонентов: 4% полиглюкина, 10% сахарозы, 4% тиомочевины, 2% аскорбиновой кислоты с последующим титрованием 45% раствором гидроксида натрия до рН 6,8-7,2, в качестве сорбента используют вспученный перлитовый песок, а сушку проводят при t=37°C до постоянной массы.
Таблица 1. Выживаемость микроорганизмов после контактной сушки, КОЕ/г и %.
Таблица 2. Выживаемость микроорганизмов при хранении при различных температурах, КОЕ/г и %.
Чертеж. Изменение концентрации нефти в процессе деградации относительно абиотического контроля в течение 10 суток при температуре 24°С.
Контактная сушка является распространенным способом подготовки биоматериалов к длительному хранению. В отличие от лиофильной сушки в этом методе микробные клетки не подвергаются воздействию низких температур, что позволяет существенно увеличить их выживаемость. Но, с другой стороны, сохраняется повреждающее воздействие на микроорганизмы за счет их обезвоживания. Таким образом, численность микроорганизмов после высушивания может быть существенно ниже, чем до сушки. Этот недостаток может быть устранен путем использования различных защитных сред: растворов, содержащих вещества, снижающие повреждающее действие обезвоживания. Теоретические основы механизма защиты клеток изучены слабо, поэтому поиск новых эффективных защитных средств является областью практических исследований. В качестве компонентов защитной среды предлагается использовать следующие вещества: тиомочевину, сахарозу, полиглюкин и аскорбиновую кислоту. Данные вещества легко доступны, обладают низкой стоимостью, что является преимуществом описываемого способа.
Как сорбент-носитель для контактной сушки был выбран вспученный перлитовый песок (ГОСТ 10832-91). Его получают высокотемпературным обжигом водосодержащего вулканического стекла, называемого перлитом. Это легкий, инертный, негорючий, нетоксичный материал. Обладая высокой открытой пористостью (до 75%), перлитовый песок в течение 3-5 минут впитывает 10 г воды на 1 г сорбента. Одна из областей его применения - агропромышленность, где его применяют для улучшения структуры почв. Эти качества делают его удобным носителем для микроорганизмов при контактной сушке. Следует отметить его низкую стоимость, что является важным фактором для получения конкурентоспособного продукта с низкой себестоимостью.
В качестве биологической основы препарата используют штаммы микроорганизмов-нефтедеструкторов: Pseudomonas sp. BKM В-2387Д и Rhodococcus sp. BKM Ас-2532Д. Данные микроорганизмы входят в запатентованную ассоциацию микроорганизмов (2378090, Российская Федерация, МПК В09С 1/10; 2312891, Российская Федерация, МПК C12N 1/20) и являются высокоэффективными нефтедеструкторами. Они обладают способностью утилизировать нефть при низких температурах (до 2°С) и в присутствии солей до 5%. Также эти штаммы являются продуцентами поверхностно-активных веществ, повышающих биодоступность гидрофобных субстратов, в число которых входит нефть и нефтепродукты. Использование в биопрепарате микроорганизмов, обладающих данными свойствами, делает его перспективным продуктом для применения в очистке территорий, загрязненных нефтью и нефтепродуктами.
Пример 1. Для приготовления сухой формы используется биомасса микроорганизмов-нефтедеструкторов Pseudomonas sp. BKM В-2387Д или Rhodococcus sp. BKM Ас-2532Д, полученная путем глубинного культивирования с последующим удалением культуральной жидкости центрифугированием. Биомасса должна иметь влажность 75-85% и численность живых клеток не менее 1×1010 КОЕ/г.
Готовится защитная среда на основе 0,05 М натрий-калиевого фосфатного буфера (рН 6,8), содержащая 4% полиглюкина, 10% сахарозы, 4% тиомочевины, 2% аскорбиновой кислоты. Кислотность среды доводят до уровня рН 6,8-7,2 титрованием 45% раствором гидроксида натрия. Суспензию смешивают с защитной средой в пропорции 1:1 по массе. Полученную смесь медленно добавляют в емкость, содержащую сорбент (вспученный перлитовый песок), обеспечивая равномерное распределение раствора по объему сорбента интенсивным перемешиванием. Сорбент берут исходя из расчета: на 1 г смеси суспензии с защитной средой необходимо 0,25 г сорбента. Готовую смесь наносят тонким слоем (2-3 мм) на ровную, гладкую стерильную поверхность, не допускающую прилипания (стеклянная пластина). Препарат высушивают при 37°С до постоянной массы.
Для оценки количества микроорганизмов, сохранивших жизнеспособность при сушке, рассчитывают выживаемость бактериальных клеток - процентное отношение концентрации клеток в готовом препарате сразу после окончания высушивания (КОЕ2) к их концентрации в исходной биомассе (КОЕ1). Для учета изменения массы образцов при высушивании при расчете выживаемости число КОЕ2 умножают на коэффициент, равный отношению массы готового препарата (m2) к массе исходной суспензии (m1). Выживаемость рассчитывают по конечной формуле: В=[КОЕ2×m2/(КОЕ1×m1)]×100%.
Концентрацию живых клеток - число колониеобразующих единиц (КОЕ) - определяют стандартным методом серийных десятикратных разведений с последующим высевом на агаризованную питательную среду Лурия-Бетани. Число колоний подсчитывают через 2 дня.
Выживаемость микроорганизмов составила 25-44% для Pseudomonas sp. и 75-81% для Rhodococcus sp. (табл.1). Данный показатель является высоким для клеток неспорообразующих бактерий, к которым относятся использованные штаммы.
Пример 2. Сухой биопрепарат, полученный, как описано в примере 1, помещают в полиэтиленовые мешки и запаивают. Хранение осуществляют при комнатной температуре, в холодильнике при температуре 2-4°С или в морозильной камере при -20°С.
Через 6 месяцев при хранении в морозильной камере концентрация живых клеток составила 24% и 20% для Pseudomonas sp. и Rhodococcus sp. соответственно (табл.2). Данные показатели высоки, что говорит об оптимальном составе защитной среды, использованной в работе.
После вскрытия пакета биопрепарат рекомендуется использовать в течение нескольких дней и не помещать на хранение вторично.
Пример 3. Для оценки эффективности биопрепарата проводили лабораторный модельный эксперимент по нефтедеструкции. Для этого навеску сухого препарата (1 г), полученного, как описано в примере 1, хранящегося в течение двух недель при температуре -20°С, помещали в 10 мл физиологического раствора. Перемешивали в течение 20 минут для регидратации клеток бактерий. В колбы Эрленмейера объемом 750 мл вносили 100 мл минеральной питательной среды Эванса для культивирования микроорганизмов. В каждую колбу добавляли 1,73 г сырой нефти и 1 мл рабочего раствора биопрепарата (концентрация микроорганизмов 107-108 КОЕ/мл). Для сравнения деградативной активности биопрепарата и свежей культуры проводили культивирование микроорганизмов на богатой среде Лурия-Бетани. Вместо биопрепарата в колбы с нефтью инокулировали 10 мл суспензии свежевыращенных микроорганизмов (концентрация 108 КОЕ/мл). В качестве нулевого контроля использовали колбы с нефтью без внесения биоматериала.
Нефтедеградирующую активность исследованных штаммов оценивали по суммарному показателю убыли нефти в жидкой среде, определяемому методом ИК-спектрометрии. Анализ данных (см. чертеж) по изменению остаточной концентрации нефти показал, что наблюдается снижение деградации нефти на 5% и 2% в системах, обработанных сухими препаратами Pseudomonas и Rhodococcus соответственно, что является незначительным и свидетельствует о правильно выбранных условиях высушивания и хранения препаратов.
Таким образом, разработан эффективный способ получения сухой формы нефтеокисляющих микроорганизмов родов Pseudomonas и Rhodococcus, позволяющий повысить выживаемость бактериальных клеток до 44% и 81% соответственно и сохранить высокий уровень деградативной активности (15% и 18% соответственно).
| Таблица 1 | ||||
| Штамм | ||||
| Номер образца | Pseudomonas sp. BKM B-2387Д | Rhodococcus sp. AC-2532Д | ||
| 0 (до сушки) | (1,9±0,6)×1010 | 100% | (1,2±0,2)×1011 | 100% |
| 1 | (4,7±2,0)×109 | 24,7% | (9,0±3,0)×1010 | 75,0% |
| 2 | (6,2±3,2)×109 | 32,6% | (7,2±2,7)×1010 | 60,0% |
| 3 | (8,3±3,8)×109 | 43,7% | (9,7±2,0)×1010 | 80,8% |
| Таблица 2 | |||||
| Штамм | |||||
| Время хранения, мес | Температура хранения, °С | Pseudomonas sp. BKM B-2387Д | Rhodococcus sp. Ac-2532Д | ||
| 0 | - | 5,0×108 | 100% | 6,2×1010 | 100% |
| 1 месяц | комнатная | 6,5×107 | 13% | 9,1×109 | 15% |
| 2-4 | 1,2×108 | 24% | 2,5×1010 | 42% | |
| -20 | 1,6×108 | 32% | 1,3×1010 | 22% | |
| 2 месяца | комнатная | 3,0×107 | 6% | 1,0×108 | 0,2% |
| 2-4 | 1,2×108 | 24% | 6,5×109 | 11% | |
| -20 | 1,2×108 | 24% | 1,3×1010 | 22% | |
| 6 месяцев | комнатная | 1,0×106 | 0,2% | 4,1×107 | 0,1% |
| 2-4 | 1,5×107 | 3% | 1,9×109 | 3,2% | |
| -20 | 1,2×108 | 24% | 1,2×1010 | 20% | |
Claims (1)
- Способ получения сухой формы биопрепарата на основе микроорганизмов-нефтедеструкторов родов Pseudomonas или Rhodococcus для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами, включающий культивирование бактерий в жидкой питательной среде, введение защитной среды, смешивание с сорбентом и контактную сушку, отличающийся тем, что защитную среду готовят на основе 0,05 М натрий-калиевого фосфатного буфера (рН 6,8) при следующем соотношении компонентов: 4% полиглюкина, 10% сахарозы, 4% тиомочевины, 2% аскорбиновой кислоты с последующим титрованием 45%-ным раствором гидроксида натрия до рН 6,8-7,2, в качестве сорбента используют вспученный перлитовый песок, а контактную сушку проводят при t=37°C до постоянной массы.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010121688/10A RU2434059C1 (ru) | 2010-05-27 | 2010-05-27 | Способ получения сухой формы биопрепарата для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010121688/10A RU2434059C1 (ru) | 2010-05-27 | 2010-05-27 | Способ получения сухой формы биопрепарата для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2434059C1 true RU2434059C1 (ru) | 2011-11-20 |
Family
ID=45316694
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010121688/10A RU2434059C1 (ru) | 2010-05-27 | 2010-05-27 | Способ получения сухой формы биопрепарата для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2434059C1 (ru) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3843517A (en) * | 1970-01-08 | 1974-10-22 | Grace W R & Co | Methods for elimination of oil slicks |
| SU1730138A1 (ru) * | 1990-04-06 | 1992-04-30 | Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии | Способ консервировани микроорганизмов |
| RU2138451C1 (ru) * | 1997-12-05 | 1999-09-27 | Саксон Валерий Михайлович | Биопрепарат для очистки объектов окружающей среды от нефти и нефтепродуктов |
| RU2143947C1 (ru) * | 1999-08-05 | 2000-01-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Адекватные технологии" | Сорбент для очистки природных вод и почвы от нефтяных загрязнений "москат" |
| RU2378060C2 (ru) * | 2007-07-05 | 2010-01-10 | Андрей Евгеньевич Филонов | Биопрепарат для очистки почв от загрязнений нефтью и нефтепродуктами, способ его получения и применения |
-
2010
- 2010-05-27 RU RU2010121688/10A patent/RU2434059C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3843517A (en) * | 1970-01-08 | 1974-10-22 | Grace W R & Co | Methods for elimination of oil slicks |
| SU1730138A1 (ru) * | 1990-04-06 | 1992-04-30 | Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии | Способ консервировани микроорганизмов |
| RU2138451C1 (ru) * | 1997-12-05 | 1999-09-27 | Саксон Валерий Михайлович | Биопрепарат для очистки объектов окружающей среды от нефти и нефтепродуктов |
| RU2143947C1 (ru) * | 1999-08-05 | 2000-01-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Адекватные технологии" | Сорбент для очистки природных вод и почвы от нефтяных загрязнений "москат" |
| RU2378060C2 (ru) * | 2007-07-05 | 2010-01-10 | Андрей Евгеньевич Филонов | Биопрепарат для очистки почв от загрязнений нефтью и нефтепродуктами, способ его получения и применения |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| McEldowney et al. | The effect of temperature and relative humidity on the survival of bacteria attached to dry solid surfaces | |
| CN102308852B (zh) | 一种可抑制水中游离或成膜微藻的微生物抑藻剂及制备方法 | |
| Mahony et al. | Stable L-forms of Clostridium perfringens and their growth on glass surfaces | |
| Israeli et al. | Protection of freeze-dried Escherichia coli by trehalose upon exposure to environmental conditions | |
| Han et al. | Optimization of a protective medium for enhancing the viability of freeze-dried Bacillus amyloliquefaciens B1408 based on response surface methodology | |
| Vehapi et al. | Antimicrobial and bacteriostatic activity of surfactants against B. subtilis for microbial cleaner formulation | |
| Habteselassie et al. | Environmental controls on the fate of Escherichia coli in soil | |
| CN110791448B (zh) | 一株甘蔗内生芽孢杆菌及其应用 | |
| Hayakawa et al. | Pollen-baiting and drying method for the highly selective isolation of Actinoplanes spp. from soil | |
| JP2011223990A (ja) | 凍結乾燥菌体の製造方法 | |
| Thompson et al. | Survival of two ecologically distinct bacteria (Flavobacterium and Arthrobacter) in unplanted and rhizosphere soil: laboratory studies | |
| RU2434059C1 (ru) | Способ получения сухой формы биопрепарата для очистки территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами | |
| CN107058180B (zh) | 一种高寒草地牧草内生细菌枯草芽孢杆菌菌株、微生物菌剂及其制备方法和应用 | |
| CN1358838A (zh) | 一种活菌制剂的保藏方法 | |
| CN107022504B (zh) | 一种具有甲醛降解作用的乳酸菌及其应用 | |
| Hottle et al. | Growth and survival of Mycoplasma neurolyticum in liquid media | |
| JP3752125B2 (ja) | レタス病害の防除方法 | |
| CN112608872B (zh) | 硫藤黄链霉菌及其在防治柑橘绿霉病中的应用 | |
| CN109402023A (zh) | 一种防霉芽孢杆菌菌株及其在粮食储藏中的应用 | |
| RU2737321C1 (ru) | Способ сохранения бактерий в фекальной микробиоте и бактериальных культур, выращенных на плотных агаризованных питательных или дифференциальных средах в условиях низких температур с использованием составной среды для заморозки | |
| RU2551968C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus pumilus А 1.5, В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ | |
| Silva et al. | Preservation methods of Tolypothrix tenuis for use as a cyanobacterial fertilizer | |
| Sakai et al. | Effect of calcium ion on spinach root colonization by fluorescent pseudomonads through chemotaxis | |
| CN105316259B (zh) | 一种防治植物病害的生防菌株及其应用 | |
| RU2813789C1 (ru) | Биопрепарат для защиты сельскохозяйственных и декоративных растений от листогрызущих насекомых и способ получения этого биопрепарата |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130528 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20150620 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160528 |