RU2432393C1 - СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ СПОРООБРАЗУЮЩИХ ШТАММОВ Bac. subtilis И Bac. licheniformis - Google Patents
СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ СПОРООБРАЗУЮЩИХ ШТАММОВ Bac. subtilis И Bac. licheniformis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2432393C1 RU2432393C1 RU2010135491/10A RU2010135491A RU2432393C1 RU 2432393 C1 RU2432393 C1 RU 2432393C1 RU 2010135491/10 A RU2010135491/10 A RU 2010135491/10A RU 2010135491 A RU2010135491 A RU 2010135491A RU 2432393 C1 RU2432393 C1 RU 2432393C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bac
- licheniformis
- strains
- subtilis
- strain
- Prior art date
Links
Landscapes
- Fodder In General (AREA)
Abstract
Способ производства пробиотического препарата на основе спорообразующих штаммов Bac.subtilis и Вас.licheniformis предусматривает культивирование штаммов, смешивание биомасс клеток бактерий с протектором микробных клеток и последующее стерильное обезвоживание. При этом в способе используют штамм Bac.subtilis BKM B-2287 D и штамм Bac.licheniformis BKM B-2414D. Биомассы штаммов смешивают в соотношении 1:1. В качестве протектора микробных клеток используют лактозу в количестве, обеспечивающем титр клеток в готовом продукте после сушки не менее 1×1011 КОЕ/г. Способ позволяет получить препарат, обладающий широким спектром действия и который может быть использован для профилактики желудочно-кишечных заболеваний у с/х животных и птицы, предупреждения стрессовых воздействий, коррекции микрофлоры в кишечнике при нарушении процессов пищеварения. 6 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, в частности способам производства пробиотических препаратов на основе штаммов бактерий Bac.subtilis и Bac.licheniformis. Подобные препараты обладают широким спектром действия и могут быть использованы для профилактики желудочно-кишечных заболеваний у с/х животных и птицы, предупреждения стрессовых воздействий, коррекции микрофлоры в кишечнике при нарушении процессов пищеварения.
Известен пробиотический препарат комплексного действия, обладающий антибактериальной активностью и способ его получения на основе биомассы штамма Вас. subtilis ВКПМ В-4759 и штамма Вас. licheniformis 2336/105, характеризующийся смешиванием живой биомассы указанных штаммов со стабилизатором при титре клеток соответственно 1×107-1×109 и 1×108-10×109. Препарат одновременно обладает антибактериальной и антивирусной активностями и успешно применяется в отношении широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (RU 2159625, 2000).
Особенностью указанного препарата является наличие в его составе рекомбинантных штаммов микроорганизмов, что предъявляет особые условия к стабильности плазмидной ДНК и, в целом, к стабильности препарата и возможности достижения положительного эффекта от его применения.
Известен также препарат против вирусных и бактериальных инфекций, содержащий смесь биомассы штаммов Вас. subtilis ВКПМ В-7092, Вас. subtilis ВКПМ В-7048 и Вас. licheniformis ВКПМ В-7038 в споровой форме с титром не менее 3·1010 спор/г и стабилизатор - крахмал и сахар. Препарат получают смешиванием биомассы указанных штаммов со стабилизатором и высушиванием. Недостатком данного препарата является использование рекомбинантного штамма, содержащего плазмиду, детерминирующую устойчивость к антибиотикам (RU 2142287 D, 1999).
Наиболее близким к заявленному изобретению является способ получения пробиотического препарата, заключающийся в смешивании биомассы бактерий Bacillus subtilis В-2250 и/или Bacillus licheniformis B-2252 и вспомогательных веществ носителя-сорбента и влагоемкого наполнителя. В качестве носителя-сорбента он содержит аэросил гидрофильной марки А и гидрофобной марки AM, влагоемкого наполнителя - смолы-катиониты ионообменные марок КБ-4П-2 и КУ-2-8чс в заданном соотношении компонентов по массе сухого вещества. Сухую микрокапсулированную форму пробиотической добавки получают методом капиллярно-сорбционного высушивания смеси компонентов до содержания влаги в готовом продукте 8-25%. В результате получают микрокапсулированную форму пробиотической добавки, содержащую пробиотик, удобную в применении и употреблении, способную обеспечивать стабильность свойств на всех этапах приготовления (RU 2252956 С2, 2005).
Однако полученный вышеуказанным способом пробиотический препарат недостаточно эффективен в отношении коррекции микрофлоры кишечника в связи с невысоким содержанием пробиотических микроорганизмов. Кроме того, его производство энергозатратно и сложно.
По этой причине сохраняется потребность в высокоэффективных пробиотических препаратах, используемых для профилактики желудочно-кишечных заболеваний у животных и птицы, предупреждения различных стрессовых воздействий, корректирования микрофлоры в кишечнике при нарушении процессов пищеварения. Действие препарата должно приводить к увеличению привесов животных и птицы.
Техническим результатом данного изобретения является повышение эффективности пробиотической составляющей получаемого продукта, что обеспечивает благоприятную коррекцию микрофлоры кишечника животных и птицы, что приводит к привесам животных.
Этот результат может быть реализован при использовании описываемого способа производства пробиотического препарата на основе спорообразующих штаммов Вас. subtilis и Вас. licheniformis, предназначенного для профилактики желудочно-кишечных заболеваний у животных и птицы и коррекции микрофлоры в кишечнике, включающего культивирование штаммов Вас. subtilis и Вас. licheniformis, смешивание биомасс клеток бактерий с протектором микробных клеток и последующее стерильное обезвоживание, причем используют штамм Вас. subtilis ВКМ B-2287D и штамм Вас. licheniformis BKM B-2414D, биомассы штаммов смешивают в соотношении 1:1, в качестве протектора микробных клеток используют лактозу в количестве, обеспечивающем титр клеток в готовом продукте после сушки не менее 1×1011 КОЕ/г.
В способе производства используются новые штаммы бактерий Вас. subtilis и Вас. licheniformis. Штаммы депонированы в ВКМ под регистрационными номерами: Вас. subtilis ВКМ B-2287D и Вас licheniformis ВКМ B-2414D. Штаммы выделены из почвы Кировской области.
Далее приведены свойства каждого штамма.
Вас. subtilis ВКМ B-2287D
Культурально-морфологические признаки
Грамположительные палочки, длиной 3-5 мкм, подвижные. Образуют споры округлые, одиночные, центральный диаметр меньше диаметра спор. Почкование бинарное. На МПА образуют колонии белые. Пигмент не выделяют. Селективных сред нет.
Физиолого-биохимические признаки
Тест на оксидазу и каталазу положительный. Аэроб. Используемые источники углерода при аэробном росте: глюкоза, лактоза, мальтоза, маннит. Возможно использование сахарозы и нозита, сорбита, арабинозы, мальтозы, цитрат натрия с глюкозой. Окисляемые неорганические субстраты: сера, тиосульфат, железо, аммоний, нитрит. Газа не образует, кислоты не образует. Отношение к рН: 3,5-8,0. Отношение к NaCl: рост при содержании до 3%. Отношение к температуре: 10-47°С. Используемые среды: МПА, МПБ.
Вас. licheniformis BKM B-2414D
Культурально-морфологические признаки
Палочки размером 2-5 мкм. Грамположителен. Образует споры одиночные, центральные или овальные. На среде МПА образует колонии белого цвета.
Физиолого-биохимические признаки
Тест на оксидазу и каталазу положительный. Аэроб. Используемые источники углерода при аэробном росте: глюкоза, мальтоза. Окисляемые неорганические субстраты: сера, тиосульфат, железо, аммоний, нитрит. Сбраживаемые источники углерода: глюкоза, мальтоза, сахароза. Отношение к рН: 5,0-8,0. Отношение к NaCl: рост до 7% NaCl. Отношение к температуре: 50°С. Среды для культивирования: МПА, МПБ, ПЖА.
Способ осуществляют следующим образом: биомассу B.subtilis и B.licheniformis получают путем культивирования в качалочных колбах объемом 750 мл или в ферментационных аппаратах вместимостью от 500 л до 63 м3 на среде с глюкозой, пептоном, кукурузным экстрактом в стерильных условиях, отделяют биомассу на центрифуге, пасту смешивают с протектором-лактозой и высушивают в сушильном шкафу, размалывают на мельнице, фасуют.
Пример
Получение инокулята Bacillus subtilis BKM B-2287D и Bacillus licheniformis BKM B-2414D.
Культуру бактерий B.subtilis BKM B-2287D и B.licheniformis BKM B-2414D хранят на скошенной плотной среде МПА или ГРМ №1 в пробирках, закрытых ватными пробками. Оптимальная температура хранения 4-6°С. Для поддержания культуры в жизнеспособном состоянии один раз в 3 мес производят пересев на свежую питательную среду МПА или ГРМ и выращивают при t=37°C до спорообразования 16-24 ч.
Для получения посевного материала для засева 100 колб с ферментационной питательной средой готовят от 1 до 5 колб инокулята. Для получения инокулята используют 2 варианта:
- в качалочную колбу объемом 750 мл с жидкой питательной средой объемом 100 мл вносят кусочек размером 1×1 см2 исходной культуры со скошенного плотного агара МПА;
- в качалочную колбу объемом 750 мл с жидкой питательной средой объемом 100 мл вносят 0,5-1 мл споровой взвеси, смытой с двух биологических пробирок с исходной культурой 20 мл физиологического раствора.
Выращивание проводят в термостатируемой качалке при N=180-200 об/мин или в ферментационных аппаратах вместимостью от 500 л до 63 м3 при N=250-270 об/мин, с расходом воздуха 1:1, при t=37°C в течение 16-24 ч для культуры Bacillus subtilis BKM B-2287D и в течение 40-48 ч для Bacillus licheniformis ВКМ В-2414D. Чистоту культуры проверяют путем высева на чашки Петри с агаризованной средой МПА с последующим термостатированием при t=37°C. Отсутствие роста посторонней микрофлоры определяют визуально по виду колоний. Кроме этого, чистоту культуры определяют микроскопически. При отсутствии посторонней микрофлоры инокулят используют для засева колб с ферментационной средой.
Приготовление жидкой питательной среды для ферментации.
Состав питательной среды:
Пептон - 10 г/л
Глюкоза - 20 г/л NaCl -1 г/л
CaCl2 -0,05 г/л
MgSO4 - 0,25 г/л
MnSO4 - 0,3 rAn
FeSO4 - 0,01 г/л
Кукурузный экстракт - 30 г/л
рН среды 7,5 ±0,1 доводят 20 % раствором NaOH.
Разливают в качалочные колбы с отбойниками по 100-150 мл. Стерилизуют в паровом стерилизаторе ВК-75 при t=121±1°С в течение 25 мин.
Культивирование Bacillus subtilis BKM B-2287D и Bacillus licheniformis BKM B-2414D.
В качалочные колбы с отбойниками объемом 750 мл с жидкой питательной средой объемом 100-150 мл засевают инокулят в количестве 0,5-1 мл. Выращивание проводят в термостатируемой качалке N=200-220 об/мин или в ферментационных аппаратах вместимостью от 500 л до 63 м3 при N=250-270 об/мин, с расходом воздуха 1:1, при t=37°С в течение 16-24 ч для культуры Bacillus subtilis BKM B-2287D и в течение 40-48 ч для Bacillus licheniformis BKM B-2414D.
Окончание культивирования определяют по достижении рН 7,2-7,6 для Bacillus subtilis BKM B-2287D и рН 8,0-8,5 для Bacillus licheniformis BKM B-2414D; полному потреблению глюкозы и обильному спорообразованию. Количество бактерий определяют методом десятикратных разведений с высевом на чашки Петри. В 1 см3 должно быть не менее 1010 клеток.
Обработка полученной культуральной суспензии
Полученные культуральные жидкости B.subtilis BKM B-2287D и B.licheniformis ВКМ B-2414D смешивают по титру в соотношении 1:1. Центрифугирование культуральной суспензии имеет целью концентрирование культуральной жидкости. Центрифугирование проводят на центрифуге типа «Beckman» при N=6000-8000 об/мин, в течение 25 мин. Пасту бактерий B.subtilis ВКМ B-2287D и B.licheniformis ВКМ B-2414D выгружают в эмалированные или пластиковые емкости. Смешивают с протектором (лактоза) и раскладывают в поддоны слоем 1-2 см. Сушат в сушильном шкафу ШСС-500 при t=40°С в течение 2-3 ч до остаточной влажности не более 4%.
Надосадочную жидкость собирают в реактор-нейтрализатор, обеззараживают при температуре 100°С в течение двух часов, после чего сливают в канализацию. Центрифугу после сбора пасты обрабатывают 4% раствором хлорамина, затем промывают водой.
Сухой продукт измельчают на мельнице.
Фасовка, упаковка готового продукта.
Сухой продукт фасуют по 0,2-1 кг пакеты из полимерных материалов или по 5 г и 10 г в пенициллиновые флаконы, которые укупоривают резиновыми пробками и фиксируют алюминиевыми колпачками. На флаконы с препаратом наклеивают этикетки и укладывают в картонные коробки. Картонные коробки укладывают в ящики из гофрированного картона. Этикетку с названием препарата и датой изготовления вкладывают в коробку.
ПРИМЕР 1
Исследование выполнялось по трем группам. В каждой группе было по 35 голов птицы. Содержание цыплят - клеточное, при рекомендуемых параметрах микроклимата. Срок выращивания - 39 дней.
Птица получала полнорационные рассыпные корма с питательностью, соответствующей нормам.
СХЕМА ОПЫТА | ||
Группа | Особенности кормления | |
1-контрольная | Полнорационный комбикорм с питательностью, | |
соответствующий нормам | ||
2-опытная | Основной рацион + первые 5 дней жидкий препарат в дозе 1,5 | |
мл 100 голов в день, затем сухой препарат в дозе 1 кг на 1т | ||
корма | ||
3-опытная | Основной рацион + первые 5 дней жидкий препарат в дозе 1,5 | |
мл 100 голов в день, затем с 14 по 21 день (период вакцинации) | ||
сухой препарат в дозе 2 кг на 1 т корма |
Жидкий препарат разводили в 10%-ном растворе глюкозы до необходимого объема и выпаивали в вакуумных поилках. Раствор с пробиотиком использовали в течение 8 ч.
УЧИТЫВАЕМЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ
1. Сохранность поголовья
2. Живая масса бройлеров, в суточном 28 - и 39-дневном возрасте.
3. Потребление корма птицей по группам за сутки и период выращивания
4. Затраты корма на 1 кг прироста живой массы.
РЕЗУЛЬТАТЫ ОПЫТА | |||
Показатель | Группа | ||
0 | контрольная | 2-опытная | 3-опытная |
Посажено на выращивание голов | 35 | 35 | 35 |
Сохранность поголовья, % | 100 | 100 | 100 |
Живая масса, г в суточном | 43,9± 0,82 | 41,9±0,65 | 42,0±0,57 |
возрасте | |||
В 28-дневном возрасте | 1330,3±20,3 | 1382,6±18,9 | 1358,0±14,0 |
% к контролю | 100 | 103,9 | 102,1 |
В 39-дневном возрасте | 2195,3 | 2282,1 | 2254,6 |
% к контролю | 100 | 104,0 | 102,7 |
В т.ч курочки | 2053,8±44,5 | 2151,7132,6 | 2141,1 ±39,1 |
% к контролю | 100 | 104,8 | 104,3 |
В т.ч. петушки | 2336,8±43,3 | 2412,4±29,1 | 2368,1±36,0 |
% к контролю | 100 | 103,2 | 101,3 |
Среднесуточный привес | 55,2 | 57,4 | 56,7 |
живой массы, г | |||
Расход корма за период | 141,8 | 138,5 | 138 |
откорма(кг) всего | |||
На 1 голову (кг) | 4,05 | 3,96 | 3,94 |
На 1 голову в сутки, г | 103,8 | 101,5 | 101,0 |
Затраты корма на 1 кг | 1,88 | 1,77 | 1,78 |
прироста живой массы, кг | |||
% к контролю | 100 | 94,1 | 94,7 |
Исследования показали, что благодаря использованию пробиотика улучшились результаты откорма бройлеров.
Сохранность птицы в опыте была 100%-ной. Живая масса цыплят 28-дневного возраста была выше на 3,9% в опытной группе 2, получавшей в начале жидкий, а затем сухой препарат на всем протяжении периода выращивания.
В опытной группе 3, получавшей жидкий пробиотик первые 5 дней, а затем сухой в период вакцинации (14-21 день), она также превысила контроль на 2,2%.
К концу периода откорма данная закономерность сохранилась. Так, в группе 2 живая масса бройлеров оказалась выше, чем в контрольной группе 1, на 4,0%. Наиболее высокой живой массой по сравнению с контролем отличились курочки (на 4,8%), у петушков различия составили 3,2%.
В опытной группе 3 живая масса цыплят была выше, чем в контрольной группе, на 2,7%. При этом наблюдались тенденция к большему увеличению живой массы курочек (на 4,3%) по сравнению с петушками (на 1,3%).
Среднесуточный прирост живой массы бройлеров был высоким - 55,2-57,4 г.В опытных группах, получавших пробиотик, он был выше, чем в контроле, на 2,2 г. (группа 2) и на 1,5 г (группа 3).
Птица опытных групп потребляла меньше корма по сравнению с контрольной группой. Различия составили 2,2% (группа 2), 2,7%(группа 3). Это свидетельствует о лучшей перевариваемости и использовании бройлерами данных групп питательных веществ корма.
Важным показателем экономической эффективности выращивания бройлеров являются затраты кормов на 1 кг прироста живой массы. Результаты опыта показали, что наиболее низкие затраты корма на единицу продукции были получены в опытной группе 2, которые оказались меньше, чем в контрольной группе, на 5,9%. В опытной группе 3 данный показатель был ниже, чем в контрольной группе, на 5,3%.
ПРИМЕР 2
Опыт в профилактических целях (на 40 голов) без использования антибиотиков
Путем выпаивания жидким пробиотиком по 2 мл на голову один раз в день в течение 3 дней подряд (новорожденным поросятам) с целью предотвращении диареи. Среди новорожденных поросят были гипотрофики (массой меньше 1 кг).
Диареи в опытной группе впоследствии не наблюдалось по сравнению с контрольной группой, у которой диарея наблюдалась у 70% поросят.
Гипотрофики в опытной группе набрали вес, как и нормотрофики около 8-8,5 кг.
Вывод:
1) в условиях хозяйства без применения пробиотика, но с применением антибиотика, исходя из результата опыта на 1500 голов в среднем предприятие недополучает 157 500 кг мяса
2) при использовании пробиотика хозяйство получило бы дополнительно
вышеуказанный объем мяса, что в денежном отношении составляет 7 875 000 руб.
В лечебных целях больным поросятам (с признаками диареи) путем выпаивания назначают жидкий пробиотик по 3 мл на голову один раз в день в течение трех дней подряд с целью прекращения диареи. После курса лечения диарея у поросят прекратилась и они не отставали в росте и развитии по сравнению с контрольной группой.
Опыты были проведены с пробиотиком с титром не менее 109.
Способ производства пробиотика с титром 1011 уменьшает расход препарата в сто раз, что в конечном счете сказывается на прибыли сельхозпредприятия.
Препарат производится в стерильных условиях и на современном оборудовании, что позволяет получить очищенный от посторонней микрофлоры продукт.
Рекомендуемые нормы ввода пробиотика для птицы яичного направления (несушек): | |||
Период | Дозировка, г на 1 | Курс | Комментарии |
голову | (сутки) | ||
Престарт | 0,015 | 5 | Задача препарата: заселение |
организма нормальной | |||
микрофлорой, что особенно | |||
важно в первые дни жизни. | |||
Ожидаемый эффект: | |||
повышение сохранности и | |||
достижение оптимальной | |||
однородности стада | |||
Старт | 0,025 | 5-7 | Задача препарата: |
локализация | |||
постантибиотического и | |||
поствакционального стрессов, | |||
восстановление нормобиоза | |||
кишечника после применения | |||
антибиотиков, повышение | |||
иммунного статуса. Особенно | |||
важно после вакцинаций | |||
против болезни Ньюкасла и | |||
инфекционного | |||
ларинготрахеита. | |||
Рост | 0,05 | 1 -3 курса по 5-7 | Задача препарата: локализация кормового |
дней | стресса, получаемого птицей в | ||
результате резкой смены | |||
структуры и питательности | |||
рациона, профилактика | |||
желудочно-кишечных | |||
заболеваний инфекционной | |||
(кокцидиозы, кол и | |||
бактериозы, сальмонеллез и | |||
пр.) и алиментарной орироды | |||
(ацидоз, дисбактериоз и др.). | |||
Оптимальный промежуток | |||
между курсами - 3 недели. | |||
Предкладка | 0,075 | 5-7 | Задача препарата; |
локализация кормового | |||
стресса, получаемого птицей | |||
в результате резкой смены | |||
структуры и питательности | |||
рациона, профилактика | |||
Перевод в | 0,1 | 5-7 | Задача препарата; |
промышленную | локализация последствий | ||
зону | технологических и кормовых | ||
стрессов, обеспечение | |||
оптимального срока выхода | |||
на пик продуктивности, | |||
профилактика | |||
Предпик - Пик | 0,1 | 5-7 | Задача препарата: улучшение |
конверсии корма, обеспечение | |||
оптимального срока выхода | |||
на пик продуктивности, | |||
улучшение использования | |||
кальция и фосфора, снижение | |||
патогенной микрофлоры | |||
толстого отдела кишечника в | |||
результате улучшения | |||
переваримости протеина и | |||
клетчатки корма, | |||
профилактика | |||
2-я фаза яйценоскости | 0,1 | 5-7 | Задача препарата: локализация кормового |
стресса, получаемого птицей | |||
в результате резкой смены | |||
структуры и питательности | |||
рациона, профилактика | |||
Период | 0,1 | 2 курса | Задача препарата: |
падения | по 3 дня | максимальное замедление | |
яйценоскости | падения продуктивности, | ||
связанного с физиологией | |||
птицы, профилактика. | |||
Оптимальный промежуток | |||
между курсами - 3 недели. При длительном сроке использования птицы возможен дополнительный курс (3 дня по 0,1 г) |
Рекомендуемые нормы ввода пробиотика для бройлеров: | |
г на голову в сутки) | |
Престарт | 0,015 |
Старт 1 неделя | 0,025 |
Старт 2 неделя | 0,050 |
P JCT | 0,075 |
Рекомендуемые курсы и нормы ввода для поросят (профилактика): | ||
Для поросят-сосунов в целях | 3-5 дней по 3-5 г на голову | |
профилактики: | ||
При отъеме в целях локализации стресса: | 3-5 дней по 5-7 г на голову | |
На доращивании единовременно в целях | 3-5 дней по 7-10 г на голову | |
профилактики | ||
- Гипотрофикам для приближения к стандартам: | ||
до 10 дней | 5 дней по 3-5 г на голову | |
от 10 до 30 дней | 5 дней по 5-7 г на голову | |
старше 30 дней | 5 дней по 7-10 на голову | |
(ежемесячно) |
Рекомендуемый курс и нормы ввода для свиноматок (профилактика): | ||
1 цикп; | за 4 недели до опороса | 5-7 дней по 10 г на голову |
2 цикл: | за 1 неделю до опороса | 5-7 дней по 10 г на |
голову | ||
3 цикл: | после опороса | 5-7 дней по 10 г на |
голову |
Рекомендации по использованию сухого водорастворимого пробиотика для крупного рогатого скота
- Новорождённым телятам применяют жидкий пробиотик перорально ежедневно с молоком, молозивом, их заменителями, прокипяченной водой или 5-10% водным раствором глюкозы/декстрозы в дозе 7-10 мл на 1 голову 2 раза в сутки с первого дня после рождения в течение 3-5 дней;
- впоследствии для профилактики дисбактериоза, а также в качестве естественного стимулятора роста слабым телятам пробиотик назначают с кормом, молоком или водой в дозе 10 г на 1 голову в течение 3-5 дней (по показаниям). Через 3 недели курс профилактики может быть повторен;
- для лечения желудочно-кишечных инфекций, дизбактериоза и диареи суточную дозировку препарата необходимо увеличить в 1,5-2 раза (по показаниям);
- в целях профилактики и лечения легочных инфекций применяется аэрозольная обработка ноздрей теленка водным раствором препарата (10 мл на 1000 мл воды);
- для получения здорового приплода пробиотик назначают с кормом или водой глубокостельным коровам и нетелям по 10 1 раз в сутки в течение 5-10 дней за 3-4 недели до отела, курс необходимо повторить непосредственно перед отелом (не менее 3 дней до и 3 дней после отела).
Claims (1)
- Способ производства пробиотического препарата на основе спорообразующих штаммов Bac.subtilis и Bac.licheniformis, предназначенного для профилактики желудочно-кишечных заболеваний у животных и птицы, включающий культивирование штаммов Bac.subtilis и Bac.licheniformis, смешивание биомасс клеток бактерий с протектором микробных клеток и последующее стерильное обезвоживание, отличающийся тем, что используют штамм Bac.subtilis BKM B-2287D и штамм Bac.licheniformis BKM B-2414D, биомассы штаммов смешивают в соотношении 1:1, в качестве протектора микробных клеток используют лактозу в количестве, обеспечивающем титр клеток в готовом продукте после сушки не менее 1×1011 КОЕ/г.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010135491/10A RU2432393C1 (ru) | 2010-08-26 | 2010-08-26 | СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ СПОРООБРАЗУЮЩИХ ШТАММОВ Bac. subtilis И Bac. licheniformis |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010135491/10A RU2432393C1 (ru) | 2010-08-26 | 2010-08-26 | СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ СПОРООБРАЗУЮЩИХ ШТАММОВ Bac. subtilis И Bac. licheniformis |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2432393C1 true RU2432393C1 (ru) | 2011-10-27 |
Family
ID=44998100
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010135491/10A RU2432393C1 (ru) | 2010-08-26 | 2010-08-26 | СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ СПОРООБРАЗУЮЩИХ ШТАММОВ Bac. subtilis И Bac. licheniformis |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2432393C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2675934C2 (ru) * | 2017-04-10 | 2018-12-25 | Общество с ограниченной ответственностью "Фермлаб" | Комбинированный пробиотический препарат на основе спорообразующих бактерий рода bacillus (варианты) для использования в животноводстве, способ его производства (варианты) и штамм bacillus subtilis (natto), используемый в качестве добавки к препарату |
-
2010
- 2010-08-26 RU RU2010135491/10A patent/RU2432393C1/ru not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2675934C2 (ru) * | 2017-04-10 | 2018-12-25 | Общество с ограниченной ответственностью "Фермлаб" | Комбинированный пробиотический препарат на основе спорообразующих бактерий рода bacillus (варианты) для использования в животноводстве, способ его производства (варианты) и штамм bacillus subtilis (natto), используемый в качестве добавки к препарату |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9247757B2 (en) | Method for using a Bacillus subtilis strain to enhance animal health | |
AU2018215216B2 (en) | Microbial cells, methods of producing the same, and uses thereof | |
CN102093967B (zh) | 一株水貂源屎肠球菌及其应用 | |
RU2458527C1 (ru) | Способ получения препарата для кормления сельскохозяйственных животных и птицы и способ приготовления корма на его основе | |
RU2458526C1 (ru) | Пробиотическая кормовая добавка для сельскохозяйственных птиц и пушных зверей | |
RU2652836C1 (ru) | Кормовая добавка с пробиотической активностью для сельскохозяйственных животных, птиц, лошадей и рыб | |
CN110982753A (zh) | 凝结芽孢杆菌mes847、菌剂、鸡饲料、制备方法及应用 | |
EP0955061A1 (en) | Oral product for the prevention and therapy of porcine gastroenteric infections | |
CN101309696A (zh) | 含有苏云金芽孢杆菌的有害菌防除剂 | |
CN102754733A (zh) | 一种新型猪用微生态制剂及其制备方法 | |
RU2432393C1 (ru) | СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ СПОРООБРАЗУЮЩИХ ШТАММОВ Bac. subtilis И Bac. licheniformis | |
RU2378000C2 (ru) | Способ получения лечебно-профилактической добавки | |
GB2484126A (en) | Foodstuff fermented with lactic acid producing bacteria | |
CN111548965B (zh) | 一株驴源短小芽孢杆菌及其在制备治疗驴驹腹泻的药物上的应用 | |
KR20180131948A (ko) | 슈도모나스 익스트리모리엔탈리스 균주 kacc 81047bp 및 이를 포함하는 조성물 | |
RU2493723C1 (ru) | Биопрепарат с пробиотической активностью для оптимизации усвоения кормов, предназначенных для сельскохозяйственных животных и птицы | |
CN113136353A (zh) | 一种微生物制剂及其应用 | |
RU2538116C2 (ru) | Биологически активный комплекс на основе бесклеточного пробиотика, кормовая композиция его содержащая, и способ кормления молодняка сельскохозяйственных животных и птицы | |
RU2203947C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus licheniformis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыбы | |
RU2410108C1 (ru) | Способ скармливания пробиотика поросятам-сосунам | |
RU2432392C1 (ru) | СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ СПОРООБРАЗУЮЩИХ ШТАММОВ Bac. subtilis И Bac. licheniformis | |
CN108888762A (zh) | 一种含益生菌代谢产物的组合物 | |
CN115595284B (zh) | 一株植物乳杆菌y1和巴氏毕赤酵母y2及其益生菌制剂和应用 | |
CN117467581B (zh) | 一种提高犬免疫力的乳酸片球菌King73及其应用 | |
RU2491942C1 (ru) | Способ профилактики микотоксикозов и желудочно-кишечных заболеваний животных |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120827 |