RU2430745C1 - Способ приготовления бесклеточной органической ткани для реимплантации живых клеток и бесклеточная органическая ткань, полученная таким способом - Google Patents
Способ приготовления бесклеточной органической ткани для реимплантации живых клеток и бесклеточная органическая ткань, полученная таким способом Download PDFInfo
- Publication number
- RU2430745C1 RU2430745C1 RU2009149666/15A RU2009149666A RU2430745C1 RU 2430745 C1 RU2430745 C1 RU 2430745C1 RU 2009149666/15 A RU2009149666/15 A RU 2009149666/15A RU 2009149666 A RU2009149666 A RU 2009149666A RU 2430745 C1 RU2430745 C1 RU 2430745C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tissue
- cell
- organic tissue
- holes
- needles
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M3/00—Tissue, human, animal or plant cell, or virus culture apparatus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3604—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix characterised by the human or animal origin of the biological material, e.g. hair, fascia, fish scales, silk, shellac, pericardium, pleura, renal tissue, amniotic membrane, parenchymal tissue, fetal tissue, muscle tissue, fat tissue, enamel
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/56—Porous materials, e.g. foams or sponges
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M37/00—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Zoology (AREA)
- Botany (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Prostheses (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для получения тканей, пригодных для трансплантации. Способ приготовления бесклеточной органической ткани для реимплантации живых клеток включает подготовку бесклеточной ткани на, по существу, плоской поверхности и создание множества отверстий на ее поверхности, распределенных по всей упомянутой поверхности и расположенных так, что они проходят вглубь, по меньшей мере, на некоторую часть толщины упомянутой ткани, при этом отверстия предназначены для содержания живых клеток после их реимплантации. Упомянутое множество отверстий создают посредством одной или нескольких металлических игл, соединенных с источником электропитания, который на кончике каждой иглы вызывает прохождение тока такой силы и с такой формой волны, чтобы обеспечить достаточную энергию для разрушения связей между молекулами, составляющими органическую ткань, вблизи кончика упомянутой иглы. Каждое отверстие образуется прохождением тока и достаточно велико, чтобы кончик упомянутой иглы мог войти в пространство, образованное размыканием молекулярных связей. Группа изобретений относится также к бесклеточной органической ткани для реимплантации живых клеток, полученной указанным способом. Группа изобретений позволяет сократить время получения ткани для трансплантации и обеспечивает проникновение живых клеток по всей толщине бесклеточной ткани. 2 н. и 22 з.п. ф-лы, 4 ил.
Description
Изобретение относится к способу приготовления бесклеточной органической ткани для реимплантации живых клеток или «оживления».
В медицине, а конкретнее в области хирургии, хорошо известно, что все большую важность приобретают ткани, предназначенные для пересадки в живой организм, чтобы удовлетворить растущую потребность по замене частей органов или органов в целом.
Создание биологических заменителей, которые приготавливаются в лаборатории, а затем трансплантируются животным-реципиентам или людям-реципиентам, представляет собой медицинскую технологию, известную под названием «тканевая инженерия».
По известной технологии ткани для пересадки готовят в лаборатории путем имплантации клеток в матрицу, состоящую из неорганической поддерживающей среды, обычно называемой «скаффолд» (клеточный каркас или подложка).
Скаффолд-материал, который используется для компенсации потери материала органа, подвергаемого лечению, способствует пространственному культивированию клеток до тех пор, пока не сформируется новая ткань.
Скаффолд-материал, естественно, должен затем подвергнуться процессу разложения до своего полного исчезновения и быть заменен синтезированной тканью, чему способствуют клетки, имплантированные в упомянутый скаффолд-материал.
Трансплантаты можно получать этим способом либо с искусственными, либо с естественными скаффолд-материалами (т.е. от «донора»), которые можно получить от человека или животного, например с использованием стенки пищевода.
Для использования естественного скаффолд-материала, полученного от донора для трансплантации в другой человеческий организм, ткань должна быть, прежде всего, обработана для устранения всех клеток, существующих между волокнами соединительной ткани, а затем для реимплантации клеток человека, принадлежащих намеченному реципиенту по пересадке («хозяину») для того, чтобы избежать реакции отторжения.
Технологии, используемые для создания скаффолд-материала, т.е. бесклеточной матрицы, начиная с тканей, полученных от донора, хорошо известны, а потому подробно здесь не описываются вкратце, они предполагают погружение ткани, которая должна пройти обработку, в жидкую среду, содержащую ферментные вещества, способные «переваривать» и разрушать живые клетки, содержащиеся в ткани, без повреждения соединительных волокон ткани.
После создания матрицы из бесклеточной ткани, готовой принять клетки, полученные от реципиента, упомянутая ткань, или скаффолд-материал, приготавливается в т.н. «чашке Петри» (или схожем контейнере), который представляет собой ванночку, обычно используемую в лабораториях по биологическим исследованиям, на дне которой покоится ткань для оживления.
Оживление ткани происходит путем имплантации стволовых клеток от будущего реципиента и снабжения их питанием посредством культуральной питательной среды, которая питает клетки, сохраняя их живыми и давая им возможность множиться и диссеминировать.
По существу, стволовые клетки, первоначально помещенные на верхнюю поверхность ткани, проходят через естественный интерстиций в ткани скаффолд-материала - интерстиций, который был ранее занят клетками донора.
Через заданный период времени, при регулируемой температуре и в присутствии питательных веществ, которые содержатся в культуральной питательной среде, живые клетки репозиционируются в интерстиций ткани, которая таким образом становится готовой для трансплантации в орган реципиента.
Следует отметить, что клетки, которые обычно используются для оживления скаффолд-материала, представляют собой стволовые клетки, которые затем становятся дифференцированными (или уже стали таковыми) и приобретают специфическую функцию органа, в который пересаживается ткань, прошедшая оживление.
Успех или неуспех трансплантации ткани, обработанной таким способом, зависит от капиллярной диффузии клеток через матрицу ткани. Если такая диффузия происходит с трудом или осуществляется на поверхности, но не в глубину, оживление ткани для трансплантирования становится недостаточным и начинается процесс омертвения, что ведет к гибели трансплантата.
Из вышесказанного следует, что для достижения успеха существенно важно, если не сказать необходимо, обеспечить оживление каждого участка ткани по глубине, в особенности по всей ее толщине.
В настоящее время, даже в случае, если процедуры приготовления и оживления проводятся на достаточно продолжительном отрезке времени, невозможно обеспечить результаты, которые были бы достаточно надежны, чтобы гарантировать успех пересадки.
Это связано с недостаточным «проникновением» живых клеток, реимплантированных в скаффолд-материал.
На практике этот недостаток существенно ограничивает возможности приготовления тканей, пригодных для трансплантации, т.к. более толстые ткани в полной мере не проходят оживление после трансплантации, поскольку в них проникновение осуществляется на недостаточную глубину.
Отсюда следует, что используемая в настоящее время технология применима лишь для трансплантации тканей весьма ограниченной толщины, например, не более примерно 0,1 мм.
В патенте США 5112354 раскрыто приготовление костного аллотрансплантата, в котором сначала удаляется вся мягкая ткань, а затем поверхность структурируется для создания группы отверстий, выполненных с возможностью обеспечения деминерализации кости и увеличения поверхности для взаимодействия с далее вводимыми мезенхимальными клетками. Отверстия получают лазером или механическим высверливанием.
Задача настоящего изобретения заключается в разработке способа приготовления бесклеточных тканей, позволяющего преодолеть вышеупомянутые недостатки.
Более конкретно, задача настоящего изобретения заключается в разработке способа приготовления бесклеточной ткани, так чтобы при оживлении упомянутой ткани стволовыми клетками упомянутые клетки легче проникали во все возможное пространство сети волокон соединительной ткани и колонизировали его, чтобы по существу восстановить состояние ткани, присущее ей до того, как она стала безжизненной.
Другая задача изобретения заключается в том, чтобы добиться значительного и существенного сокращения времени обработки, необходимого для оживления бесклеточного скаффолд-материала, после того как были добавлены живые клетки в целях приготовления ткани для трансплантации.
Указанные задачи решаются с помощью способа приготовления бесклеточной органической ткани для оживления посредством реимплантации живых клеток, согласно которому:
- готовят упомянутую бесклеточную ткань на, по существу, плоской поверхности;
- создают множество отверстий на поверхности упомянутой ткани, распределенных по всей упомянутой поверхности и расположенных так, что они проходят вглубь, по меньшей мере, на некоторую часть толщины упомянутой ткани, при этом упомянутые отверстия предназначены для содержания упомянутых живых клеток после их реимплантации,
И в котором согласно изобретению упомянутое множество отверстий создают посредством одной или нескольких металлических игл, соединенных с источником электропитания, который на кончике каждой иглы вызывает прохождение тока такой силы и с такой формой волны, чтобы обеспечить достаточную энергию для разрушения связей между молекулами, составляющими органическую ткань вблизи кончика упомянутой иглы, при этом каждое отверстие образуется прохождением тока и достаточно велико, чтобы кончик упомянутой иглы мог войти в пространство, образованное размыканием упомянутых молекулярных связей.
Предпочтительно на упомянутые одну или несколько металлических игл подают электрическую энергию переменного тока, по существу синусоидального, имеющего частоту около 4 МГц.
Предпочтительно электроэнергия, подаваемая на упомянутые одну или несколько игл, содержит гармоники, по меньшей мере, до третьего порядка.
Предпочтительно электрическое напряжение, прикладываемое к упомянутым одной или нескольким иглам, составляет около 200-230 В.
Предпочтительно сила тока, пропускаемого через каждую иглу, составляет около 2-2,5 мА.
Предпочтительно глубина упомянутых отверстий соответствует полной толщине упомянутой органической ткани.
Предпочтительно длина упомянутых отверстий больше толщины упомянутой бесклеточной органической ткани.
Предпочтительно упомянутое множество отверстий располагают в направлении, по существу перпендикулярном поверхности упомянутой ткани или наклонно к поверхности упомянутой органической ткани.
Предпочтительно одно или более отверстий на поверхности бесклеточной органической ткани, пригодных для: содержания клеток, предназначенных для оживления упомянутой ткани, выполняют с использованием устройства, которое содержит:
- упомянутые одну или более металлических игл, установленных в держателе;
- источник электрической энергии, представляющий упомянутый источник электропитания и соединенный с упомянутыми одной или несколькими иглами, пригодный для подачи тока на кончик каждой иглы, сила и форма волны которого таковы, что он обеспечивает достаточную энергию, чтобы привести к размыканию связей между молекулами в органической ткани, соприкасающейся с кончиком упомянутой иглы.
Предпочтительно упомянутое устройство содержит множество игл, установленных в держателе, способных образовать матрицу из рядов игл, по существу параллельных друг другу, причем упомянутые иглы по существу эквидистантны друг другу.
Предпочтительно диаметр упомянутой, по меньшей мере, одной иглы составляет, по меньшей мере, 50-55 мкм.
Предпочтительно диаметр упомянутой, по меньшей мере, одной иглы больше максимального размера клетки для оживления.
Предпочтительно упомянутое устройство содержит средство для перемещения упомянутой, по меньшей мере, одной иглы вдоль трех осей декартовой системы координат, т.е. вдоль вертикальной или наклонной оси и вдоль декартовых осей, параллельных поверхности органической ткани.
Предпочтительно средство перемещения создает перемещение по двум декартовым осям, располагающимся по существу дараллельно поверхности упомянутой органической ткани.
Указанные задачи также решаются за счет создания бесклеточной органической ткани, оживляемой посредством реимплантации живых клеток, которая получена описанным способом.
Дальнейшие признаки и детали изобретения будут освещены подробнее в описании предпочтительного варианта осуществления изобретения, который представлен здесь в качестве неограничивающего примера, а также устройства, которое можно использовать в данном способе.
Изобретение описано ниже с помощью прилагаемых чертежей, на которых:
Фиг.1 - схема устройства в сечении, содержащего держатель с матрицей игл, покоящихся на слое ткани, приготовленной для оживления;
Фиг.2 - вид одной из игл в держателе;
Фиг.3 - вид компоновки матрицы игл;
Фиг.4 - схема устройства для перемещения держателя игл.
Согласно изобретению предварительно обработанная бесклеточная органическая ткань, т.н. скаффолд-материал, расположена на дне чашки Петри (или схожего контейнера) так, что она лежит в развернутом виде на плоской поверхности.
Множество игл, таких как игла, обозначенная позицией 1 и показанная на Фиг.2, скомпоновано в матрицу, например образующую квадрат, обозначенную в целом позицией 3 на Фиг.3, так чтобы обеспечить упорядоченное расположение игл, которые предпочтительно отделены на одинаковое расстояние друг от друга, т.е. эквидистантны относительно друг друга.
Головка 11 каждой иглы 1 имеет электрическую связь, например, посредством металлической проводящей пластины 2, закрепленной на держателе 20 упомянутой матрицы игл. Упомянутая пластина 2 соединена с электрическим проводом 21, на который, в свою очередь, подается выходное напряжение генератора 4.
Упомянутый генератор 4 представляет собой генератор напряжения, предпочтительно генерирующий напряжение 200-230 В, но с частотой 4 МГц, получаемой с использованием электронных схем, которые хорошо известны, а потому ради краткости здесь не описаны.
Синусоидальное изменение напряжения на выходе 41 генератора 4 предпочтительно представляет собой искаженную волну и, следовательно, имеет гармоники, по меньшей мере, первого, второго и третьего порядка.
Мощность генератора 4 регулируется так, чтобы на конце каждого электрода 1 можно было получить ток силой от 2 до 2,5 мА.
Когда кончик каждой иглы покоится на поверхности 51 органической ткани 5, контакт между кончиком каждой иглы и органической тканью дает возможность пропускать ток примерно 2-2,5 мА, как упоминалось ранее. Упомянутый ток передает энергию окружающим молекулам, которая соответствует (как показано экспериментально) той, что приводит к т.н. явлению «молекулярного резонанса». Эта энергия достаточна лишь для разрушения связей между молекулами, испытывающими влияние прохождения тока, при этом в окружающей области она не вызывает разрушений, разрывов, некроза, уменьшения или увеличения толщины, изменения содержания жидкой фазы, коагуляции или иной деградации ткани.
По существу, такой разрыв, образуемый в молекулярных связях, приравнивается к образованию крошечного отверстия, которое практически имеет тот же диаметр, что и диаметр каждой иглы 1, т.е., по меньшей мере, 50-55 мкм.
Разумеется, могут быть использованы иглы другого диаметра, большего или меньшего, при условии, что пользователь не забывает о том, что диаметр, по меньшей мере, одной иглы превышает наибольший размер используемой клетки.
Далее держатель 20 матрицы 3 игл толкается в направлении, указываемом иглами, и достаточно медленно продвигается, так что по мере движения иглы вперед кончик иглы находит отверстие, которое уже образовано за счет протекания тока и последующего разрушения молекулярных связей.
Легко видеть, что, таким образом, не происходит разрыва соединительной ткани, и, следовательно, создается тонкое отверстие, соответствующее диаметру вводимой иглы.
Как ранее объяснялось, это особенно важно и полезно, т.к. клетки, реимплантированные на ткань, могут проникать вглубь через ткань и имплантироваться на стенки отверстий, где они могут множиться и очень быстро осуществлять оживление органической ткани по всей толщине.
Как показано на Фиг.1, иглы 1 проникают в поверхность 51 скаффолд-материала 5 предпочтительно, но необязательно под наклоном, чтобы увеличить длину отверстий, а следовательно, получить максимальный эффект проницаемости скаффолд-материала.
Эксперименты показали, что для оживления более эффективен угол 60° относительно вертикали, поскольку длина получаемых в результате отверстий превышает толщину скаффолд-материала.
Лабораторные опыты показали, что эффективный размер матрицы 3 игл, содержащей иглы 1, составляет примерно 1 см2, при этом упомянутая матрица содержит примерно 200 игл; в этом случае сила тока, обеспечиваемого генератором 4, не превышает 500 мА.
Разумеется, процедура перфорации должна повторяться по всей поверхности 51 скаффолд-материала для получения однородного распределения отверстий по толщине и по всей полезной поверхности ткани для трансплантации.
Для этой цели в изобретении используется устройство для создания отверстий, которое предпочтительно снабжено средством 30 для перемещения держателя 20 по трем осям декартовой системы координат, т.е. вдоль вертикальной или наклонной оси Z и вдоль декартовых осей X и Y, параллельных плоскости поверхности 51 и схематично показанных на Фигуре 4.
Когда в заданной части скаффолд-материала 5 отверстия выполнены, держатель 20 может переместиться и процедура может повториться упорядоченным образом для покрытия всей поверхности 51.
Ясно, что если держатель 20, несущий матрицу 3 игл, соединен с программируемым средством 30 перемещения, например с использованием шаговых двигателей, управляемых электронным блоком управления, процедура может повторяться автоматически, последовательно и с максимальной точностью.
После завершения создания серий отверстий в бесклеточной ткани 5, как объяснялось выше, очевидно, что упомянутую бесклеточную ткань можно поместить в чашку Петри или схожий контейнер, куда затем могут быть добавлены живые клетки, которые обычно представляют собой стволовые клетки от реципиента, которому предназначен трансплантат.
При соответствующем питании с использованием культуральной питательной среды упомянутые стволовые клетки могут быстро и легко занять все отверстия, выполненные иглами 1, тем самым обеспечивая полное и эффективное оживление всей ткани, предназначенной для трансплантации.
Очевидно, что способ согласно изобретению решает все поставленные задачи изобретения, поскольку обеспечивается совершенное и эффективное оживление и предотвращается всякий риск неблагоприятного исхода последующей трансплантации.
Кроме того, процесс оживления происходит значительно быстрее, чем при использовании известной технологии, и с весьма положительными результатами.
Там, где технические признаки, упомянутые в любом из пунктов формулы изобретения, сопровождаются ссылочными символами, эти ссылочные символы включены с единственной целью сделать пункты формулы изобретения более ясными, и соответственно такие ссылочные символы не накладывают каких-либо ограничений на интерпретацию каждого элемента, идентифицированного в качестве примера такими ссылочными символами.
Claims (24)
1. Способ приготовления бесклеточной органической ткани для реимплантации живых клеток, согласно которому:
- готовят упомянутую бесклеточную ткань на, по существу, плоской поверхности;
- создают множество отверстий на поверхности упомянутой ткани, распределенных по всей упомянутой поверхности и расположенных так, что они проходят вглубь, по меньшей мере, на некоторую часть толщины упомянутой ткани, при этом упомянутые отверстия предназначены для содержания упомянутых живых клеток после их реимплантации, отличающийся тем, что упомянутое множество отверстий создают посредством одной или нескольких металлических игл, соединенных с источником электропитания, который на кончике каждой иглы вызывает прохождение тока такой силы и с такой формой волны, чтобы обеспечить достаточную энергию для разрушения связей между молекулами, составляющими органическую ткань вблизи кончика упомянутой иглы, при этом каждое отверстие образуется прохождением тока и достаточно велико, чтобы кончик упомянутой иглы мог войти в пространство, образованное размыканием упомянутых молекулярных связей.
- готовят упомянутую бесклеточную ткань на, по существу, плоской поверхности;
- создают множество отверстий на поверхности упомянутой ткани, распределенных по всей упомянутой поверхности и расположенных так, что они проходят вглубь, по меньшей мере, на некоторую часть толщины упомянутой ткани, при этом упомянутые отверстия предназначены для содержания упомянутых живых клеток после их реимплантации, отличающийся тем, что упомянутое множество отверстий создают посредством одной или нескольких металлических игл, соединенных с источником электропитания, который на кончике каждой иглы вызывает прохождение тока такой силы и с такой формой волны, чтобы обеспечить достаточную энергию для разрушения связей между молекулами, составляющими органическую ткань вблизи кончика упомянутой иглы, при этом каждое отверстие образуется прохождением тока и достаточно велико, чтобы кончик упомянутой иглы мог войти в пространство, образованное размыканием упомянутых молекулярных связей.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что на упомянутые одну или несколько металлических игл подают электрическую энергию переменного тока, по существу, синусоидального, имеющего частоту около 4 МГц.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что электроэнергия, подаваемая на упомянутые одну или несколько игл, содержит гармоники, по меньшей мере, до третьего порядка.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что электрическое напряжение, прикладываемое к упомянутым одной или нескольким иглам, составляет около 200-230 В.
5. Способ по п.2, отличающийся тем, что электрическое напряжение, прикладываемое к упомянутым одной или нескольким иглам, составляет около 200-230 В.
6. Способ по п.2, отличающийся тем, что сила тока, пропускаемого через каждую иглу, составляет около 2-2,5 мА.
7. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что глубина упомянутых отверстий соответствует полной толщине упомянутой органической ткани.
8. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что длина упомянутых отверстий больше толщины упомянутой бесклеточной органической ткани.
9. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что упомянутое множество отверстий располагают в направлении, по существу, перпендикулярном поверхности упомянутой ткани.
10. Способ по п.8, отличающийся тем, что упомянутое множество отверстий располагают наклонно к поверхности упомянутой органической ткани.
11. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что одно или более отверстий на поверхности бесклеточной органической ткани, пригодных для содержания клеток после их реимплантации, выполняют с использованием устройства, которое содержит:
- упомянутые одну или более металлических игл (1), установленных в держателе (20);
- источник электрической энергии (4), представляющий упомянутый источник электропитания и соединенный с упомянутыми одной или несколькими иглами, пригодный для подачи тока на кончик каждой иглы, сила и форма волны которого таковы, что он обеспечивает достаточную энергию, чтобы привести к размыканию связей между молекулами в органической ткани, соприкасающейся с кончиком упомянутой иглы.
- упомянутые одну или более металлических игл (1), установленных в держателе (20);
- источник электрической энергии (4), представляющий упомянутый источник электропитания и соединенный с упомянутыми одной или несколькими иглами, пригодный для подачи тока на кончик каждой иглы, сила и форма волны которого таковы, что он обеспечивает достаточную энергию, чтобы привести к размыканию связей между молекулами в органической ткани, соприкасающейся с кончиком упомянутой иглы.
12. Способ по п.11, отличающийся тем, что упомянутый источник электропитания состоит из генератора, по существу, синусоидального напряжения с частотой около 4 МГц.
13. Способ по п.11, отличающийся тем, что упомянутое устройство содержит множество игл, установленных в держателе (20), способных образовать матрицу (3) из рядов игл, по существу, параллельных друг другу, причем упомянутые иглы, по существу, эквидистантны друг другу.
14. Способ по п.11, отличающийся тем, что диаметр упомянутой, по меньшей мере, одной иглы составляет, по меньшей мере, 50-55 мкм.
15. Способ по п.11, отличающийся тем, что диаметр упомянутой, по меньшей мере, одной иглы больше максимального размера клетки для реимплантации.
16. Способ по п.13, отличающийся тем, что упомянутые иглы установлены, по существу, перпендикулярно относительно упомянутого держателя (20).
17. Способ по п.13, отличающийся тем, что упомянутый держатель (20) располагается под наклоном к поверхности перфорируемой органической ткани.
18. Способ по п.11, отличающийся тем, что упомянутое устройство содержит средство (30) для перемещения упомянутой, по меньшей мере, одной иглы вдоль трех осей декартовой системы координат, т.е. вдоль вертикальной или наклонной оси (Z) и вдоль декартовых осей (X, Y), параллельных поверхности органической ткани.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что упомянутое средство перемещения создает перемещение по двум декартовым осям, располагающимся, по существу, параллельно поверхности упомянутой органической ткани.
20. Способ по п.11, отличающийся тем, что глубина отверстий соответствует полной толщине органической ткани.
21. Способ по п.20, отличающийся тем, что упомянутое множество отверстий проходит в направлении, по существу, перпендикулярном поверхности ткани.
22. Способ по п.11, отличающийся тем, что длина отверстий превышает толщину бесклеточной органической ткани.
23. Способ по п.22, отличающийся тем, что упомянутое множество отверстий проходит под наклоном к поверхности органической ткани.
24. Бесклеточная органическая ткань, приготовленная для реимплантации живых клеток, отличающаяся тем, что она получена способом по любому из предшествующих пунктов.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IT000159A ITVI20070159A1 (it) | 2007-05-31 | 2007-05-31 | Metodo di preparazione alla rivitalizzazione di un tessuto organico a-cellulare e dispositivo atto a realizzare tale metodo |
ITVI2007A000159 | 2007-05-31 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2009149666A RU2009149666A (ru) | 2011-07-10 |
RU2430745C1 true RU2430745C1 (ru) | 2011-10-10 |
Family
ID=39874105
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009149666/15A RU2430745C1 (ru) | 2007-05-31 | 2008-04-16 | Способ приготовления бесклеточной органической ткани для реимплантации живых клеток и бесклеточная органическая ткань, полученная таким способом |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20100216206A1 (ru) |
EP (1) | EP2164536B8 (ru) |
JP (1) | JP5412688B2 (ru) |
KR (1) | KR101555069B1 (ru) |
CN (1) | CN101687064B (ru) |
AT (1) | ATE552866T1 (ru) |
BR (1) | BRPI0813396B8 (ru) |
CA (1) | CA2688626C (ru) |
CU (1) | CU23797A3 (ru) |
DK (1) | DK2164536T3 (ru) |
ES (1) | ES2385116T3 (ru) |
IN (1) | IN266807B (ru) |
IT (1) | ITVI20070159A1 (ru) |
PL (1) | PL2164536T3 (ru) |
RU (1) | RU2430745C1 (ru) |
WO (1) | WO2008146106A2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2778730C1 (ru) * | 2019-03-07 | 2022-08-24 | Телеа Биотек С.Р.Л. | Способ подготовки биосовместимой ткани к ревитализации |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IT1398807B1 (it) | 2009-10-29 | 2013-03-18 | Marzaro | Metodo di preparazione di un tessuto organico a-cellulare di origine umana o animale per la rivitalizzazione |
US10945831B2 (en) | 2016-06-03 | 2021-03-16 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Asymmetric tissue graft |
USD856517S1 (en) | 2016-06-03 | 2019-08-13 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Asymmetric tissue graft |
US10813743B2 (en) | 2018-09-07 | 2020-10-27 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Soft tissue repair grafts and processes for preparing and using same |
USD895812S1 (en) | 2018-09-07 | 2020-09-08 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Soft tissue repair graft |
IT201900003299A1 (it) | 2019-03-07 | 2020-09-07 | Telea Biotech S R L | Metodo di preparazione alla rivitalizzazione di un tessuto acellulare |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US1394171A (en) * | 1921-05-02 | 1921-10-18 | Mary E Hall | Electric needle |
US4932973A (en) * | 1983-09-30 | 1990-06-12 | El Gendler | Cartilage and bone induction by artificially perforated organic bone matrix |
US5112354A (en) * | 1989-11-16 | 1992-05-12 | Northwestern University | Bone allograft material and method |
US5658234A (en) * | 1995-07-24 | 1997-08-19 | J. D. Technologies, Inc. | Method for treating tumors |
US6629948B2 (en) * | 1997-01-22 | 2003-10-07 | Advanced Medical Optics | Rapid pulse phaco power for burn free surgery |
KR100263857B1 (ko) * | 1998-03-31 | 2000-08-16 | 김순택 | 플라즈마 표시 장치 |
IL125990A (en) | 1998-08-30 | 2004-12-15 | Moshe Ein-Gal | Electrocoagulation apparatus |
US6479064B1 (en) * | 1999-12-29 | 2002-11-12 | Children's Medical Center Corporation | Culturing different cell populations on a decellularized natural biostructure for organ reconstruction |
US6565532B1 (en) * | 2000-07-12 | 2003-05-20 | The Procter & Gamble Company | Microneedle apparatus used for marking skin and for dispensing semi-permanent subcutaneous makeup |
DE10126509C2 (de) * | 2001-05-30 | 2003-10-02 | Andreas Schoenfeld | Vorrichtung zur Behandlung von Tumoren |
ITVI20030110A1 (it) * | 2003-06-06 | 2004-12-07 | Telea Electronic Eng Srl | Bisturi elettronico. |
GB0520757D0 (en) * | 2005-10-12 | 2005-11-23 | Vuppalapati Gunasekar | Delivery device |
-
2007
- 2007-05-31 IT IT000159A patent/ITVI20070159A1/it unknown
-
2008
- 2008-04-16 EP EP08737451A patent/EP2164536B8/en active Active
- 2008-04-16 IN IN4072KON2009 patent/IN266807B/en unknown
- 2008-04-16 AT AT08737451T patent/ATE552866T1/de active
- 2008-04-16 CN CN200880018213.XA patent/CN101687064B/zh active Active
- 2008-04-16 ES ES08737451T patent/ES2385116T3/es active Active
- 2008-04-16 WO PCT/IB2008/000921 patent/WO2008146106A2/en active Application Filing
- 2008-04-16 BR BRPI0813396A patent/BRPI0813396B8/pt active IP Right Grant
- 2008-04-16 KR KR1020097026316A patent/KR101555069B1/ko active IP Right Grant
- 2008-04-16 US US12/601,306 patent/US20100216206A1/en not_active Abandoned
- 2008-04-16 JP JP2010509905A patent/JP5412688B2/ja active Active
- 2008-04-16 RU RU2009149666/15A patent/RU2430745C1/ru active
- 2008-04-16 PL PL08737451T patent/PL2164536T3/pl unknown
- 2008-04-16 CA CA2688626A patent/CA2688626C/en active Active
- 2008-04-16 DK DK08737451.8T patent/DK2164536T3/da active
-
2009
- 2009-11-30 CU CU20090204A patent/CU23797A3/es active IP Right Grant
-
2013
- 2013-02-28 US US13/780,856 patent/US10195307B2/en active Active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
АККЕРМАН Л.Дж. Применение радиохирургии в дерматологии// Руководство по повышению квалификации для практикующих ветеринаров, т.19(4), апрель 1997 [он-лайн], [найдено 03.12.2010]. Найдено из Интернета: <URL:http://www.surgitron.ru/assets/files/vet/art/akkerman primenenie_radi.doc>. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2778730C1 (ru) * | 2019-03-07 | 2022-08-24 | Телеа Биотек С.Р.Л. | Способ подготовки биосовместимой ткани к ревитализации |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP5412688B2 (ja) | 2014-02-12 |
CU23797A3 (es) | 2012-03-15 |
KR101555069B1 (ko) | 2015-09-22 |
US20180339086A1 (en) | 2018-11-29 |
RU2009149666A (ru) | 2011-07-10 |
CN101687064B (zh) | 2014-06-04 |
CA2688626C (en) | 2013-01-22 |
BRPI0813396B1 (pt) | 2018-07-03 |
ATE552866T1 (de) | 2012-04-15 |
BRPI0813396A2 (pt) | 2015-10-27 |
BRPI0813396B8 (pt) | 2021-06-22 |
EP2164536B1 (en) | 2012-04-11 |
JP2010527724A (ja) | 2010-08-19 |
ES2385116T3 (es) | 2012-07-18 |
EP2164536A2 (en) | 2010-03-24 |
US20100216206A1 (en) | 2010-08-26 |
CA2688626A1 (en) | 2008-12-04 |
EP2164536B8 (en) | 2012-04-25 |
WO2008146106A2 (en) | 2008-12-04 |
IN266807B (ru) | 2015-06-03 |
WO2008146106A3 (en) | 2009-05-07 |
KR20100019524A (ko) | 2010-02-18 |
US10195307B2 (en) | 2019-02-05 |
DK2164536T3 (da) | 2012-07-23 |
PL2164536T3 (pl) | 2012-11-30 |
ITVI20070159A1 (it) | 2008-12-01 |
WO2008146106A9 (en) | 2009-11-19 |
CN101687064A (zh) | 2010-03-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2430745C1 (ru) | Способ приготовления бесклеточной органической ткани для реимплантации живых клеток и бесклеточная органическая ткань, полученная таким способом | |
CN106037889A (zh) | 用于组织移植和复制的方法和装置 | |
CN102665777B (zh) | 制备用于再生的人或动物来源的无细胞有机组织的方法 | |
CN204121469U (zh) | 一种具有诱导细胞增殖分化能力的纳米形貌芯片 | |
US11975122B2 (en) | Preparation method for revitalizing a biocompatible tissue | |
RU2778730C1 (ru) | Способ подготовки биосовместимой ткани к ревитализации | |
CN109731138A (zh) | 激光微孔脱细胞真皮基质及其制备方法 | |
Pascoal-Faria et al. | Electrical Stimulation Optimization in Bioreactors for Tissue Engineering Applications |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20130816 |