RU2421512C1 - Nutrient medium to cultivate entomopathogenic fungi - Google Patents
Nutrient medium to cultivate entomopathogenic fungi Download PDFInfo
- Publication number
- RU2421512C1 RU2421512C1 RU2010109693/10A RU2010109693A RU2421512C1 RU 2421512 C1 RU2421512 C1 RU 2421512C1 RU 2010109693/10 A RU2010109693/10 A RU 2010109693/10A RU 2010109693 A RU2010109693 A RU 2010109693A RU 2421512 C1 RU2421512 C1 RU 2421512C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nutrient medium
- larvae
- entomopathogenic fungi
- fungi
- millet
- Prior art date
Links
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к сельскому хозяйству и предназначено для биологической защиты культурных растений от вредителей.The present invention relates to agriculture and is intended for biological protection of cultivated plants from pests.
В связи с напряженной экологической обстановкой приоритетное значение в настоящее время приобретают биологические методы контроля численности вредителей растений. Одним из направлений биозащиты является использование энтомопатогенных грибов. Энтомопатогенные грибы обладают способностью в естественных условиях заражать вредных насекомых и клещей, могут вызывать их массовые заболевания и гибель (эпизоотии). Кроме того, грибы способны расти на искусственных питательных средах (ПС), что позволяет создавать на их основе биологические препараты.Due to the tense environmental situation, biological methods for controlling the number of plant pests are currently gaining priority. One of the areas of bioprotection is the use of entomopathogenic fungi. Entomopathogenic fungi have the ability in vivo to infect harmful insects and ticks, they can cause massive diseases and death (epizootics). In addition, fungi are able to grow on artificial nutrient media (PS), which allows you to create biological products on their basis.
Известна питательная среда, принятая за аналог. В частности, энтомопатогенные грибы - продуценты биопрепаратов (Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., Metarhizium anisopliae (Metch.) Sor. и др.) - культивируют на твердой ПС, в состав которой входят размолотые пшено и отруби в соотношении 2:1 (Огарков Б.Н., Огаркова Г.Р. Энтомопатогенные грибы Восточной Сибири. - Иркутск, 2000. - С.134).A known nutrient medium, taken as an analogue. In particular, entomopathogenic fungi - producers of biological products (Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., Metarhizium anisopliae (Metch.) Sor. And others) - are cultivated on solid PS, which includes ground millet and bran in a 2: 1 ratio ( Ogarkov B.N., Ogarkova G.R. Entomopathogenic fungi of Eastern Siberia. - Irkutsk, 2000. - P.134).
Однако многократные пересевы грибов на ПС приводят к постепенному снижению их патогенности (Аванесов С.Г. Проявление ферментативной активности как фактора вирулентности гриба Verticillium lecanii при культивировании. // Экологические проблемы защиты растений: тез. докл. конф. молодых ученых. - Л., 1990. - С.217; Thomas P.Hayden, Bidochka M.J., Khachatourians G.G. Entomopathogenicity of Several Fungi toward the English Grain Aphid (Homoptera: Aphididae) and Enchancement of Virulence with Host Passage of Paecilomyces farinosus // J. Econ. Entomol., 1992. - №1. - P.58-64).However, repeated reseeding of fungi on PS leads to a gradual decrease in their pathogenicity (Avanesov S.G. Manifestation of enzymatic activity as a virulence factor of the fungus Verticillium lecanii during cultivation. // Ecological problems of plant protection: abstract of a conference of young scientists. - L., 1990. - P.217; Thomas P. Hayden, Bidochka MJ, Khachatourians GG Entomopathogenicity of Several Fungi toward the English Grain Aphid (Homoptera: Aphididae) and Enchancement of Virulence with Host Passage of Paecilomyces farinosus // J. Econ. Entomol., 1992. - No. 1. - P.58-64).
Для сохранения патогенных свойств грибов прибегают к пассированию промышленных штаммов через организм насекомого-хозяина (Огарков Б.Н. Биологическое обоснование способов создания и использования грибных препаратов для борьбы с насекомыми. Автореф. дисс… д-pa биол. наук. - Л., 1990. - С.19), однако этот прием достаточно трудоемок и требует больших затрат времени.To preserve the pathogenic properties of fungi, they resort to the passivation of industrial strains through the body of the host insect (Ogarkov B.N. Biological justification of the methods for creating and using mushroom preparations for controlling insects. Author. Diss. Dr. Pa. Biol. Sciences. - L., 1990 . - P.19), however, this technique is rather laborious and time-consuming.
Известен способ повышения патогенности штаммов грибов путем введения в состав питательных сред муки из насекомых. В питательную среду для культивирования энтомопатогенных грибов, принятую за прототип, входит мука из личинок комнатной мухи (Томилова О.Г., Усова О.Н., Штерншис М.В. Модификация среды для культивирования энтомопатогенных грибов. // Современная микология в России. - Первый съезд микологов России. - Тез. докл. - М., 2002. - С.214).A known method of increasing the pathogenicity of strains of fungi by introducing into the composition of the nutrient medium flour from insects. The nutrient medium for cultivation of entomopathogenic fungi, adopted as a prototype, includes flour from housefly larvae (Tomilova OG, Usova ON, Sternshis MV Modification of the environment for cultivation of entomopathogenic fungi. // Modern Mycology in Russia. - The First Congress of Mycologists of Russia. - Abstracts - Moscow, 2002. - P.214).
Включение в состав питательных сред насекомых в виде термически обработанной муки имеет ряд недостатков. Гриб развивается не на живом насекомом, а на субстрате, который после воздействия высоких температур (120-130°С) существенно изменяет свои физико-химические свойства (Токарев B.C., Накозин В.А. Технология приготовления и хранения кормовой муки из личинок копрофагов. // Биотехнология переработки органических отходов и экология. / Под ред. И.И.Гудилина, А.Ф.Кондратова, Новосибирск. - Новосибирское книжное изд-во, 1999. - С.220-228), что, естественно, приведет к снижению патогенных свойств гриба по отношению к живым (нативным) насекомым-вредителям. Термическая сушка личинок - энергоемкий и дорогостоящий процесс. Для хранения муки из личинок добавляют консерванты, которые могут в некоторой степени сдерживать развитие энтомопатогенных грибов, попадать на растения, а через них - в организм животных, человека и в окружающую среду. В состав питательных сред включены ингредиенты, являющиеся продуктами питания человека, что нерационально по экономическим и этическим причинам.The inclusion of insects in the form of heat-treated flour in the nutrient medium has several disadvantages. The fungus does not develop on a living insect, but on a substrate that, after exposure to high temperatures (120-130 ° C), significantly changes its physicochemical properties (Tokarev VS, Nakozin V.A. Technology for the preparation and storage of feed flour from coprophage larvae. / / Biotechnology of organic waste processing and ecology. / Under the editorship of I.I. Gudilin, A.F. Kondratov, Novosibirsk. - Novosibirsk Book Publishing House, 1999. - P.220-228), which, naturally, will lead to a decrease pathogenic properties of the fungus in relation to live (native) insect pests. Thermal drying of larvae is an energy-intensive and expensive process. To store flour from larvae, preservatives are added that can to some extent inhibit the development of entomopathogenic fungi, enter plants, and through them into animals, humans, and the environment. The composition of nutrient media includes ingredients that are human food, which is irrational for economic and ethical reasons.
Кроме того, состав питательной среды, даже самый оптимальный, не учитывает того, что в дальнейшем (после обработки защищаемой культуры) энтомопатогенным грибам придется некоторое время находиться на растении. Как известно, резкая смена субстрата для всех живых организмов приводит к стрессу, задержке в развитии и даже к гибели.In addition, the composition of the nutrient medium, even the most optimal, does not take into account the fact that in the future (after processing the protected culture) entomopathogenic fungi will have to be on the plant for some time. As you know, a sharp change of substrate for all living organisms leads to stress, a delay in development, and even death.
В питательной среде, принятой за прототип, личинки синантропных мух подвергаются термической обработке дважды: сначала при сушке личинок до состояния муки, а второй раз при автоклавировании питательной среды, что удорожает производство и снижает качество питательной среды.In the nutrient medium adopted for the prototype, the larvae of synanthropic flies are subjected to heat treatment twice: first, when the larvae are dried to the state of flour, and the second time during autoclaving of the nutrient medium, which increases the cost of production and reduces the quality of the nutrient medium.
Технической задачей является повышение вирулентности энтомопатогенных грибов путем оптимизации питательной среды для их культивирования и снижение ее себестоимости.The technical task is to increase the virulence of entomopathogenic fungi by optimizing the nutrient medium for their cultivation and reducing its cost.
Задача достигается созданием питательной среды, включающей смесь измельченных личинок синантропных мух с древесными опилками и пшеном.The objective is achieved by creating a nutrient medium, including a mixture of crushed larvae of synanthropic flies with sawdust and millet.
Живых личинок смешивают с древесными опилками в соотношении 1:1 и измельчают, полученную смесь подсушивают. В таком виде личинки могут храниться до 3 месяцев без применения консервантов. К смеси личинок с опилками добавляют размолотое пшено в соотношении 1:1, полученную таким образом питательную среду стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм в течение 20-30 минут, а затем высевают споры энтомопатогенного гриба.Live larvae are mixed with sawdust in a ratio of 1: 1 and crushed, the resulting mixture is dried. In this form, the larvae can be stored for up to 3 months without the use of preservatives. To the mixture of larvae with sawdust, ground millet is added in a 1: 1 ratio, the nutrient medium thus obtained is sterilized in an autoclave at 0.5 atm for 20-30 minutes, and then the spores of an entomopathogenic fungus are seeded.
В случае возможности доставки личинок синантропных мух в живом виде к месту производства питательной среды процесс подсушивания смеси личинок с опилками исключают, а все компоненты питательной среды измельчают одновременно.If it is possible to deliver larvae of synanthropic flies live to the place of production of the nutrient medium, the process of drying the mixture of larvae with sawdust is excluded, and all components of the nutrient medium are crushed at the same time.
Уменьшение доли личинок менее 20-25% по отношению к другим компонентам не приводит к значительному увеличению вирулентности энтомопатогенного гриба, а увеличение их доли удорожает себестоимость питательной среды без существенного повышения активности. Снижение доли пшена в питательной среде менее 50% приведет к снижению роста вегетативной массы энтомопатогена, а увеличение доли этого компонента не повышает выход биомассы и спор, что нерационально.A decrease in the proportion of larvae of less than 20-25% in relation to other components does not lead to a significant increase in the virulence of an entomopathogenic fungus, and an increase in their share increases the cost of the nutrient medium without a significant increase in activity. A decrease in the proportion of millet in the nutrient medium less than 50% will lead to a decrease in the growth of the vegetative mass of the entomopathogen, and an increase in the proportion of this component does not increase the yield of biomass and spores, which is irrational.
Автоклавирование питательной среды в течение 20-30 минут при давлении 0,5 атм наиболее рационально, так как при давлении в автоклаве менее 0,5 атм не достигается требуемое обеззараживание питательной среды, а увеличение давления более 0,5 атм приведет к удорожанию производства. Автоклавирование менее 20 минут также не обеспечит требуемого обеззараживания питательной среды. Автоклавирование более 30 минут приведет к удорожанию производства.Autoclaving the nutrient medium for 20-30 minutes at a pressure of 0.5 atm is most rational, since when the pressure in the autoclave is less than 0.5 atm, the required disinfection of the nutrient medium is not achieved, and an increase in pressure of more than 0.5 atm will increase the cost of production. Autoclaving for less than 20 minutes will also not provide the required disinfection of the culture medium. Autoclaving for more than 30 minutes will increase the cost of production.
Состав питательной среды для культивирования энтомопатогенных грибов, соотношение компонентов мас.%:The composition of the nutrient medium for the cultivation of entomopathogenic fungi, the ratio of components wt.%:
От прототипа заявляемая питательная среда отличается тем, что личинки синантропных мух смешивают с древесными опилками в пропорции 1:1, а затем измельчают. В процессе измельчения опилки поглощают влагу, выделяющуюся из живых личинок, способствуя лучшей сохранности биологически активных веществ насекомых. При непосредственном приготовлении ПС в смесь личинок с древесными опилками добавляют размолотое пшено в необходимом количестве, среду стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм в течение 20-30 минут. В отличие от сухих личинок, подвергшихся сушке при высоких температурах, при автоклавировании достигается обеззараживание среды от посторонних микроорганизмов с высокой степенью сохранности белков, аминокислот, хитина и других БАВ, содержащихся в живых насекомых (Токарев B.C., Накозин В.А. Технология приготовления и хранения кормовой муки из личинок копрофагов. // Биотехнология переработки органических отходов и экология. / Под ред. И.И.Гудилина, А.Ф.Кондратова. Новосибирск. - Новосибирское книжное изд-во. 1999. - С.220-228). Использование в питательной среде древесных опилок на 25% снижает расход пшена, являющегося продуктом питания.The claimed nutrient medium differs from the prototype in that the larvae of synanthropic flies are mixed with sawdust in a ratio of 1: 1, and then ground. In the process of grinding, sawdust absorbs moisture released from living larvae, contributing to better preservation of biologically active insect substances. In the direct preparation of PS, milled millet is added to the mixture of larvae with wood sawdust in the required amount, the medium is sterilized in an autoclave at 0.5 atm for 20-30 minutes. Unlike dry larvae, which were dried at high temperatures, autoclaving results in disinfection of the environment from extraneous microorganisms with a high degree of preservation of proteins, amino acids, chitin and other biologically active substances contained in living insects (Tokarev BC, Nakozin V.A. Preparation and storage technology feed flour from coprophage larvae // Biotechnology of organic waste processing and ecology. / Under the editorship of II Gudilin, AF Kondratov. Novosibirsk. - Novosibirsk book publishing house. 1999. - S.220-228). The use of wood sawdust in the nutrient medium reduces the consumption of millet, which is a food product, by 25%.
Использование отличительных признаков - смешивание личинок синантропной мухи с древесными опилками с последующим измельчением полученной смеси с целью получения питательной среды для культивирования энтомопатогенных грибов - авторам и заявителю неизвестны.The use of distinctive features - mixing larvae of a synanthropic fly with wood sawdust, followed by grinding the resulting mixture in order to obtain a nutrient medium for culturing entomopathogenic fungi is unknown to the authors and applicant.
Заявляемая питательная среда максимально сохраняет физико-химические свойства личинок, неустойчивые к высоким температурам вещества (ювенильные гормоны, экдизоны, простагландины, ферменты), содержащиеся в личинках комнатной мухи, позволяет экономить на процессе сушки до 500 л жидкого топлива на каждой тонне личинок и 400 кВт/ч электроэнергии.The inventive nutrient medium maximally preserves the physicochemical properties of the larvae, substances that are unstable to high temperatures (juvenile hormones, ecdysones, prostaglandins, enzymes) contained in housefly larvae, and save up to 500 l of liquid fuel per ton of larvae and 400 kW on the drying process / h of electricity.
Сущность предлагаемого изобретения поясняется ниже следующим описанием состава питательной среды для культивирования энтомопатогенных грибов, мас.%:The essence of the invention is illustrated below by the following description of the composition of the nutrient medium for the cultivation of entomopathogenic fungi, wt.%:
При выращивании энтомопатогенных грибов на заявляемой среде на 14-е сутки роста титр жизнеспособных спор на единицу площади увеличивается в 1,5-3,6 раза (L. muscarium), в 3-5,1 раза (В. bassiana) по сравнению со средой-аналогом (Таблица 1).When growing entomopathogenic fungi on the claimed medium on the 14th day of growth, the titer of viable spores per unit area increases by 1.5-3.6 times (L. muscarium), by 3-5.1 times (B. bassiana) compared with analog medium (table 1).
Биологическая эффективность гриба Lecanicillium muscarium (Petch) Zare et W. Gams (синоним - Verticillium lecanii (Zimm.) Viegas) штамм F-8 (новосибирский) с титром рабочей суспензии 107 спор/мл, культивируемого на среде предлагаемого состава, увеличивается в зависимости от суток на 29,1-8,7% по сравнению со средой-аналогом и находится на уровне гриба, пассированного через живого хозяина (тест-объект - обыкновенный паутинный клещ - Tetranychus urticae Koch.). При использовании менее патогенного штамма гриба Beauveria bassiana (Bals.) Vuill в отношении гусениц галлерии - Galleria mellonella наблюдается более существенное увеличение биологической активности (28-22,5% на 7 и 10-е сутки после заражения) по сравнению с грибом, культивируемым на среде-аналоге (таблица 2).The biological effectiveness of the fungus Lecanicillium muscarium (Petch) Zare et W. Gams (synonym for Verticillium lecanii (Zimm.) Viegas) strain F-8 (Novosibirsk) with a titer of a working suspension of 10 7 spores / ml cultivated on the medium of the proposed composition increases depending on from day by 29.1-8.7% compared with the analogue medium and is located at the level of the fungus passaged through a living host (test object is an ordinary spider mite - Tetranychus urticae Koch.). When using a less pathogenic strain of the fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill in relation to the galleria caterpillars - Galleria mellonella, a more significant increase in biological activity is observed (28-22.5% on the 7th and 10th day after infection) compared with the fungus cultivated on analog medium (table 2).
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010109693/10A RU2421512C1 (en) | 2010-03-15 | 2010-03-15 | Nutrient medium to cultivate entomopathogenic fungi |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010109693/10A RU2421512C1 (en) | 2010-03-15 | 2010-03-15 | Nutrient medium to cultivate entomopathogenic fungi |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2421512C1 true RU2421512C1 (en) | 2011-06-20 |
Family
ID=44737999
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010109693/10A RU2421512C1 (en) | 2010-03-15 | 2010-03-15 | Nutrient medium to cultivate entomopathogenic fungi |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2421512C1 (en) |
-
2010
- 2010-03-15 RU RU2010109693/10A patent/RU2421512C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Огарков Б.Н., Огаркова Г.Р. Энтомопатогенные грибы Восточной Сибири. - Иркутск, 2000 с.134. Алешкина О.А., Ильчева С.Н. и др. Энтомопатогенные грибы и их применение в сельском хозяйстве. Обзор. - М, 1978, с.15-40. Под ред. Гудилина И.И., Кондратова А.Ф. Биотехнология переработки органических отходов и экология. - Новосибирск, Новосибирское из-во, 1999, с.220-228. THOMAS P., et. al., Entomopathogenicity of Several Fungi toward the English Grain Aphid (Homoptera: Aphididae) and Enchancement of Virulence with Host Passage of Paecilomyces farinosus, J. Econ. EntomoL, 1992, N1, p.58-64. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
MX2007008234A (en) | New trichoderma atroviride strain, culture medium containing it, and use of the strain in particular as a stimulant for the germination and/or growth of plants . | |
Zhou | Cultivation of Ganoderma lucidum | |
CN107365710B (en) | Metarhizium strain with strong pathogenicity on hazelnut weevil and application thereof | |
Törős et al. | Edible mushroom of Pleurotus spp.: a case study of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus L.) | |
KR102251508B1 (en) | Novel Beauveria bassiana KNU-101 Strain with Improved Insecticidal Effect and Spore Production and Uses thereof | |
KR101293107B1 (en) | A composite for a prevention and a removal of disease of plants and a soil conditioning, and manufacturing method of the same | |
CN104541977A (en) | Chinese fir board cultivating method of antrodia cinnamomea | |
Sabri et al. | Production of spawn with high quality from novel Iraqi strains of edible mushrooms | |
Bhai | Preservation and long-term storage of Trichoderma spp. by sodium alginate encapsulation | |
RU2421512C1 (en) | Nutrient medium to cultivate entomopathogenic fungi | |
Tiwari et al. | Antifungal activity of Anabaena variabilis against plant pathogens | |
JP2003116522A (en) | Medium for culturing cordyceps sinensis sacc. and method for culturing cordyceps sinensis sacc. | |
CN113475312A (en) | Megapes cracking powder phlobacterium culture medium and culture method thereof | |
JP2023553717A (en) | Spore composition, its production and use | |
KR20180059622A (en) | COMPOSITION FOR PREVENTING PLANT PATHOGENS COMPRISING EXTRACT FROM SPENT SUBSTRATE OF Lentinula edodes AND METHOD FOR PREPARING THE SAME | |
Seecharran et al. | An investigation into culture and propagation of edible mushrooms on different organic substrates | |
Mohamed et al. | Aspergillus from different habitats and their industrial applications | |
JP2007014296A (en) | Method for culturing filamentous fungus | |
Sánchez-Rey et al. | Physiological response of Metarhizium rileyi with linoleic acid supplementation | |
RU2651487C1 (en) | Method for obtaining a biopesticide preparation | |
Afandhi et al. | Performance and virulence of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana grown in media derived from biodegradable agricultural wastes enriched with cricket powder | |
Maranhão et al. | Occurrence of entomopathogenic fungi in soils from different parts of Spain | |
Rubezhniak | Antibiotic and Phytotoxic Activities of Cultural Filtrates of some Micromycete Strains | |
Pertiwiningrum et al. | The use of sludge from cow manure biodigester as fertilizer and carrier of Cordyceps sp. for white grub pest control | |
Ahmad et al. | Growth requirements of pleurotus ostreatus and antagonistic potential against Rhizoctonia solani |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120316 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20130720 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140316 |