RU2421240C1 - Method of producing staphylococcal vaccine - Google Patents

Method of producing staphylococcal vaccine Download PDF

Info

Publication number
RU2421240C1
RU2421240C1 RU2009136113/15A RU2009136113A RU2421240C1 RU 2421240 C1 RU2421240 C1 RU 2421240C1 RU 2009136113/15 A RU2009136113/15 A RU 2009136113/15A RU 2009136113 A RU2009136113 A RU 2009136113A RU 2421240 C1 RU2421240 C1 RU 2421240C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
vaccine
temperature
days
strains
staphylococci
Prior art date
Application number
RU2009136113/15A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2009136113A (en
Inventor
Константин Михайлович Садов (RU)
Константин Михайлович Садов
Игорь Петрович Жданов (RU)
Игорь Петрович Жданов
Юлия Владимировна Лимова (RU)
Юлия Владимировна Лимова
Анатолий Викторович Воробьёв (RU)
Анатолий Викторович Воробьёв
Original Assignee
Государственное научное учреждение Самарская научно-исследовательская ветеринарная станция Российской академии сельскохозяйственных наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное научное учреждение Самарская научно-исследовательская ветеринарная станция Российской академии сельскохозяйственных наук filed Critical Государственное научное учреждение Самарская научно-исследовательская ветеринарная станция Российской академии сельскохозяйственных наук
Priority to RU2009136113/15A priority Critical patent/RU2421240C1/en
Publication of RU2009136113A publication Critical patent/RU2009136113A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2421240C1 publication Critical patent/RU2421240C1/en

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention refers to microbiology. A vaccine is prepared of 6-8 strains of staphylococci identified as Staphylococcus aureus. The strains are cultivated separately for 14-16 days at temperature 37°C and then at temperature 3-5°C for 6-8 days. Thereafter, the prepared material is mixed and immediately autoclaved at temperature 115-125°C for 15-40 minutes.
EFFECT: vaccine enables intense staphylococci immunity, and also enabling a nonspecific immunity sufficient for treating purulent infection caused by other agents is produced.
3 tbl

Description

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для получения вакцины, предназначенной для профилактики и лечения гнойных инфекций у животных и человека.The invention relates to microbiology and can be used to obtain a vaccine intended for the prevention and treatment of purulent infections in animals and humans.

Известен способ получения стафилококковой вакцины путем длительного (15-20 дней) выращивания моновалентной культуры стафилококка в бульоне с последующей фильтрацией или стерилизацией при 100°С (А.М.Безредка, "Антивирусотерапия", Л., 1932 г.).A known method of producing staphylococcal vaccine by prolonged (15-20 days) growing a monovalent staphylococcus culture in broth, followed by filtration or sterilization at 100 ° C (A.M. Bezredka, "Antivirusotherapy", L., 1932).

Недостатком известного способа является то, что изготовленная вакцина не учитывает разнообразия серологических вариантов стафилококка, содержит только растворимые в среде антигенные компоненты и вследствие этого недостаточно эффективна.The disadvantage of this method is that the vaccine made does not take into account the diversity of serological variants of staphylococcus, contains only antigenic components soluble in the medium and, as a result, is not effective enough.

Известен способ получения анатоксин-вакцины против стафилококкоза птиц, включающий выращивание культуры стафилококков в питательной среде, стерилизацию биомассы с последующей детоксикацией токсина формалином, причем перед выращиванием в среду добавляют 4 об.% глицерина, культуру выращивают в течение 7-10 дней до концентрации 5-7 млрд микробных клеток в 1 мл, стерилизацию проводят при 85-100°С в течение 1-1,5 ч, а детоксикацию осуществляют 0,6-0,8%-ным раствором формалина при экспозиции 45-55°С в течение 7-10 дней (АС СССР №1706631, кл. А61К 39/085 от 17.01.89, опубл. 23.01.92, Бюл. №3).A known method of producing anatoxin vaccine against staphylococcosis of birds, including growing a culture of staphylococci in a nutrient medium, sterilizing biomass followed by detoxification of toxin with formalin, and before growing on medium add 4 vol.% Glycerol, the culture is grown for 7-10 days to a concentration of 5- 7 billion microbial cells in 1 ml, sterilization is carried out at 85-100 ° C for 1-1.5 hours, and detoxification is carried out with 0.6-0.8% formalin solution at an exposure of 45-55 ° C for 7 -10 days (USSR AS No. 1706631, class A61K 39/085 dated 01/17/89, publ. 2 3.01.92, Bull. No. 3).

Недостатком известного способа является то, что за 7-10 дней в выращиваемой биомассе не происходит достаточного накопления продуктов метаболизма стафилококков, и, кроме того, обработка формалином придает вакцине раздражающее действие, что допустимо при аэрозольном распылении препарата, но нежелательно при внутривенном введении вакцины животным.The disadvantage of this method is that for 7-10 days in the cultivated biomass there is not enough accumulation of staphylococcal metabolism products, and, in addition, formalin treatment gives the vaccine an irritating effect, which is permissible with aerosol spraying of the drug, but undesirable with the intravenous administration of the vaccine to animals.

Наиболее близким к предлагаемому способу получения стафилококковой вакцины является «Способ получения вакцины стафилококковой и стрептококковой поливалентной» - Vaccinum staphylococcicum (streptococcicum)». Взвесь стафилококков или стрептококков (1 млрд микробных тел в 1 мл) убивают формалином (http://www.micro-biology.ru/main-microbiology/medicine/93-vakciny-iz-ubitykh-bakterijj.html). Применяется для повышения защитных сил организма при хроническом фурункулезе, гидрадените, сикозе и других стафилококковых и стрептококковых заболеваниях кожи.Closest to the proposed method for producing a staphylococcal vaccine is “A method for producing a staphylococcal and streptococcal polyvalent vaccine” - Vaccinum staphylococcicum (streptococcicum). A suspension of staphylococci or streptococci (1 billion microbial bodies per 1 ml) is killed with formalin (http://www.micro-biology.ru/main-microbiology/medicine/93-vakciny-iz-ubitykh-bakterijj.html). It is used to increase the body's defenses in chronic furunculosis, hydradenitis, sycosis and other staphylococcal and streptococcal skin diseases.

Недостатком указанного способа является то, что получаемая вакцина содержит ограниченное количество антигенов - убитые микробные клетки без биологически активных продуктов жизнедеятельности их не содержат угнетающих размножение стафилококков продуктов обмена (в процессе длительного культивирования в питательной среде накапливаются специфические только для стафилококка антимикробные вещества), а также содержит формалин.The disadvantage of this method is that the vaccine obtained contains a limited number of antigens - killed microbial cells without biologically active waste products do not contain metabolic inhibitory products of staphylococci (during long-term cultivation in the nutrient medium, specific antimicrobial substances specific only to staphylococcus accumulate), and also contains formalin.

Задачей изобретения является устранение указанных недостатков.The objective of the invention is to remedy these disadvantages.

Поставленная задача решается следующим образом.The problem is solved as follows.

Для получения вакцины по заявленному способу берут 6-8 штаммов стафилококков, идентифицированных как Staphylococcus aureus. Затем выделенные штаммы помещают в стандартный мясопептонный питательный бульон - каждый штамм в отдельную емкость и культивируют в течение 14-16 дней, в течение которых вакцина приобретает антистафилококковую активность вследствие накопления продуктов метаболизма и антигенов самого стафилококка, а также его токсинов. Культивирование производят при температуре 37°С.To obtain a vaccine according to the claimed method take 6-8 strains of staphylococci identified as Staphylococcus aureus. Then, the isolated strains are placed in a standard meat-peptone nutrient broth - each strain in a separate container and cultured for 14-16 days, during which the vaccine acquires antistaphylococcal activity due to the accumulation of metabolic products and antigens of staphylococcus itself, as well as its toxins. Cultivation is carried out at a temperature of 37 ° C.

Далее культуры выдерживают в течение 6-8 дней при температуре 3-5°С для накопления в ней большего количества биогенных стимуляторов, аналогично консервации по методу В.П.Филатова (БМЭ, издание третье, том 3, с.140), что происходит в неблагоприятных для живых клеток условиях.Then the cultures are kept for 6-8 days at a temperature of 3-5 ° C for the accumulation of more biogenic stimulants in it, similarly to conservation according to the method of V.P. Filatov (BME, third edition, volume 3, p.140), what happens in unfavorable conditions for living cells.

Затем культуры смешивают, разливают по флаконам и тут же автоклавируют при температуре 115-125°С в течение 15-40 минут.Then the cultures are mixed, poured into vials and immediately autoclaved at a temperature of 115-125 ° C for 15-40 minutes.

Антистафилококковая активность полученной вакцины показала следующие результаты (см. табл.1).The antistaphylococcal activity of the obtained vaccine showed the following results (see table 1).

Таблица 1Table 1 Сравнительная антистафилококковая активность предлагаемой вакцины и аналога в logComparative antistaphylococcal activity of the proposed vaccine and analogue in log Способ культивированияCultivation method Антимикробная активностьAntimicrobial activity Раздельное выращиваниеSeparate cultivation 25,8625.86 Совместное выращиваниеCo-cultivation 21,3221.32

Данные таблицы 1 свидетельствуют о том, что антистафилококковая активность полученной вакцины превышает активность вакцины, полученной при совместном выращивании.The data in table 1 indicate that the antistaphylococcal activity of the obtained vaccine exceeds the activity of the vaccine obtained by co-cultivation.

Лечение животных предлагаемой вакциной производят так же, как и лечение стафилококковым анатоксином, но в дозе в полтора раза большей, что было установлено в опытах по иммунизации кроликов. Результаты опытов приведены в таблице 2.Treatment of animals with the proposed vaccine is carried out in the same way as treatment with staphylococcal toxoid, but at a dose one and a half times higher, which was established in experiments on immunization of rabbits. The results of the experiments are shown in table 2.

Титр агглютининов в сыворотке крови иммунизированных животных.The titer of agglutinins in the blood serum of immunized animals.

Таблица 2table 2 Вид вакциныType of vaccine Титр агглютининовAgglutinin titer Раздельное выращиваниеSeparate cultivation 1/3201/320 Совместное выращиваниеCo-cultivation 1/1601/160

Как видно из таблицы 2, предлагаемая вакцина вызывает более высокий титр нарастания антител, а следовательно, обладает более высокими иммуногенными свойствами.As can be seen from table 2, the proposed vaccine causes a higher titer of growth of antibodies, and therefore has higher immunogenic properties.

Положительный примерPositive example

Полученная по предлагаемому способу вакцина испытывалась в одном из животноводческих хозяйств Приволжского района Самарской области.Received by the proposed method, the vaccine was tested in one of the livestock farms of the Volga region of the Samara region.

Результаты испытаний приведены в таблице 3.The test results are shown in table 3.

Таблица 3Table 3 Результаты лечебного действия вакциныThe results of the therapeutic effect of the vaccine Инвентарный номер коровыCow inventory number ДиагнозDiagnosis Результат леченияTreatment result 851851 катаральный маститcatarrhal mastitis ВылеченаCured 14371437 катаральный маститcatarrhal mastitis ВылеченаCured 12921292 серозный маститserous mastitis ВылеченаCured

Вакцина вводилась животным подкожно, троекратно, с интервалом в один день: в первый день - 3,75 мл, во второй день - 7,5 мл, в третий день - 7,5 мл.The vaccine was administered to animals subcutaneously, three times, with an interval of one day: on the first day - 3.75 ml, on the second day - 7.5 ml, on the third day - 7.5 ml.

Предлагаемое изобретение позволяет создать стафилококковую вакцину, обеспечивающую создание достаточно напряженного иммунитета против стафилококков для лечения гнойной инфекции, с учетом того, что первичным иммунным раздражителем является сам возбудитель. Использование при изготовлении вакцины шести штаммов стафилококков, выделенных от больных животных, позволяет расширить спектр действия вакцины за счет расширения набора антигенных детерминант как самого стафилококка, так и продуктов его жизнедеятельности. Применение для стерилизации вакцины автоклавирования при указанных параметрах позволяет обеспечить, помимо стерилизации, и деструкцию клеток и денатурацию белка, вследствие чего вакцина приобретает также и неспецифические свойства и может применяться для лечения гнойных инфекций, вызванных другими возбудителями. В силу того, что вакцина обладает неспецифическим действием на организм, определение этиотропного возбудителя не является обязательным. Поскольку предлагаемая вакцина не содержит формалина, она может вводиться как внутримышечно, так и подкожно. Раздельное выращивание штаммов стафилококков повышает ее антимикробные, иммуногенные свойства, лечебный эффект и является более экономичным.The present invention allows to create a staphylococcal vaccine that provides a sufficiently intense immunity against staphylococci for the treatment of purulent infection, given the fact that the causative agent is the primary immune stimulus. The use of six strains of staphylococci isolated from sick animals in the manufacture of the vaccine allows us to expand the spectrum of action of the vaccine by expanding the range of antigenic determinants of both staphylococcus and its vital products. The use of autoclaving for sterilization of the vaccine at the indicated parameters allows, in addition to sterilization, cell destruction and protein denaturation, as a result of which the vaccine also acquires non-specific properties and can be used to treat purulent infections caused by other pathogens. Due to the fact that the vaccine has a nonspecific effect on the body, the determination of the etiotropic pathogen is not mandatory. Since the proposed vaccine does not contain formalin, it can be administered both intramuscularly and subcutaneously. Separate cultivation of staphylococcus strains increases its antimicrobial, immunogenic properties, therapeutic effect and is more economical.

Claims (1)

Способ получения стафилококковой вакцины для лечения и профилактики гнойных инфекций, включающий выращивание шести-восьми штаммов гноеродных стафилококков в жидкой питательной среде и стерилизацию биомассы, отличающийся тем, что культивирование шести-восьми штаммов гноеродных стафилококков, идентифицированных как Staphylococcus aureus, осуществляют порознь в течение 14-16 дней при температуре 37°С, затем культивируют порознь при температуре 3-5°С в течение 6-8 суток, после чего полученный материал смешивают и сразу автоклавируют при температуре 115-125°С в течение 15-40 мин. A method of obtaining a staphylococcal vaccine for the treatment and prevention of purulent infections, comprising growing six to eight strains of pyogenic staphylococci in a liquid nutrient medium and sterilizing biomass, characterized in that the cultivation of six to eight strains of pyogenic staphylococcus identified as Staphylococcus aureus is carried out separately for 14 16 days at a temperature of 37 ° C, then cultivated separately at a temperature of 3-5 ° C for 6-8 days, after which the resulting material is mixed and immediately autoclaved at a temperature of 115- 125 ° C for 15-40 minutes
RU2009136113/15A 2009-09-29 2009-09-29 Method of producing staphylococcal vaccine RU2421240C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2009136113/15A RU2421240C1 (en) 2009-09-29 2009-09-29 Method of producing staphylococcal vaccine

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2009136113/15A RU2421240C1 (en) 2009-09-29 2009-09-29 Method of producing staphylococcal vaccine

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2009136113A RU2009136113A (en) 2011-04-10
RU2421240C1 true RU2421240C1 (en) 2011-06-20

Family

ID=44051837

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2009136113/15A RU2421240C1 (en) 2009-09-29 2009-09-29 Method of producing staphylococcal vaccine

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2421240C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020139308A1 (en) * 2018-12-27 2020-07-02 Игорь Семёнович МАРКОВ Inactivated staphylococcal liquid vaccine

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020139308A1 (en) * 2018-12-27 2020-07-02 Игорь Семёнович МАРКОВ Inactivated staphylococcal liquid vaccine

Also Published As

Publication number Publication date
RU2009136113A (en) 2011-04-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2421240C1 (en) Method of producing staphylococcal vaccine
RU2432174C1 (en) Method for producing colibacillosis anatoxin
RU2329828C1 (en) Method of production of vaccine for animal necrobacteriosis prevention and treatment, vaccine for animal necrobacteriosis prevention and treatment and method of animal necrobacteriosis prevention and treatment
RU2396978C1 (en) Method for prevention of cattle leukosis development
RU2650628C1 (en) Method of obtaining vaccine associated with colibacillosis, streptococcosis and enterococcal infection of calves and piglets
RU2777479C1 (en) Method for specific prevention of rhinopneumonia and strangles in horses using an associated vaccine in herding conditions
RU2589819C1 (en) VACCINE AGAINST INFECTIOUS BOVINE KERATOCONJUNCTIVITIS BASED ON ANTIGENS OF Moraxella bovis and Moraxella bovoculi BACTERIA
RU2764600C1 (en) Vaccine against escherichiosis of calves and piglets
RU2406533C1 (en) Associated vaccine against streptococcosis and staphylococcosis of cattle
RU2263143C2 (en) Strain of bacterium streptococcus pyogenes 289 used for preparing vaccine against streptococcosis in fur animal
RU2766549C1 (en) Method for preventing escherichiosis in piglets
RU2753410C2 (en) Method for obtaining toxoid vaccine against escherichiosis of animals
RU2766249C1 (en) Method for preventing escherichiosis in calves
RU2316344C1 (en) Associated vaccine against colibacteriosis, salmonellosis, streptococcosis and enterococcal infection in nutrias
RU2377016C1 (en) Method for making staphylo-streptococcal anatoxin-vaccine
RU2406531C1 (en) Associated vaccine against streptoccocosis, pseudomonosis and enterococcus infection in nutria
RU2531054C1 (en) Associated pseudomonosis and rabbit viral haemorrhagic disease vaccine
CN101693109B (en) Yeast glucan synergistic inactivated vaccine for preventing staphylococcus aureus mastitis in dairy cows
RU2675598C1 (en) Method of treatment of radiation damages of body
RU2424823C1 (en) Method of specific prevention of rhinopneumonia and salmonellosis abortion in horses by associated vaccine under conditions of herd keeping
RU2377013C1 (en) Method for production of staphylococcic anatoxin-vaccine
UA117089U (en) SITC Vaccine Inactivated for Specific Prevention of Streptococcal, Enterococcal and Staphylococcal Etiology
RU2539105C1 (en) Preparation for treatment of necrotic stomatitis of cattle
RU2147892C1 (en) Method of preparing preparation based on virus-bacterial strains from local focus for preparing mixed vaccine or polyvalent hyperimmune serum against cattle disease
RU2521513C1 (en) Application of aethonium as adjuvant for production of sorbed foot-mouth disease vaccine

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20120930