RU2420524C2

RU2420524C2 - Производные три- или тетра-замещенного-3-аминопирролидина

Info

Publication number: RU2420524C2
Application number: RU2007147217/04A
Authority: RU
Inventors: Хисаси ТАКАХАСИ (JP); Хисаси ТАКАХАСИ; Хироаки ИНАГАКИ (JP); Хироаки ИНАГАКИ; Сатоси КОМОРИЙА (JP); Сатоси КОМОРИЙА; Макото ТАКЕМУРА (JP); Макото Такемура; Рие МИЯУТИ (JP); Рие МИЯУТИ
Original assignee: Дайити Санкио Компани, Лимитед
Priority date: 2005-05-19
Filing date: 2006-05-19
Publication date: 2011-06-10
Also published as: RU2007147217A

Abstract

Изобретение относится к соединению формулы (I):

к его соли или гидрату, где R¹ представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; причем алкильная группа необязательно замещена атомом галогена; R² представляет атом водорода или алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода; R³ представляет алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; причем алкильная группа необязательно замещена атомом галогена; R⁴ и R⁵ независимо представляют атом водорода, атом галогена, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, или алкенильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода; причем алкильная группа необязательно замещена атомом галогена; и при условии, что R⁴ и R⁵ не являются одновременно атомами водорода; или заместители R⁴ и R⁵ вместе представляют (а) 3-6-членную циклическую структуру, включающую атом углерода, общий для R⁴ и R⁵, с образованием спироциклической структуры с пирролидиновым кольцом; или (b) экзометиленовую группу, связанную с пирролидиновым кольцом с помощью двойной связи; R⁶ и R⁷ независимо представляют атом водорода или алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода; R⁸ представляет галоген-замещенную алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; причем циклоалкильная группа может быть замещена атомом галогена; R⁹ представляет атом водорода; X¹ представляет атом водорода или атом галогена; и А представляет атом азота или фрагмент, представленный формулой (II):

,

где X² представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода; или X² вместе с R⁸ представляет циклическую структуру, содержащую часть ядра, причем образованное таким образом кольцо необязательно содержит атом кислорода и является замещенным алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода. Кроме того, изобретение относится к антибактериальному агенту на основе соединения формулы I, терапевтическому агенту против инфекций, к способу лечения инфекционного заболевания и применению данных соединений для получения антибактериального лекарственного средства. Технический результат: получены и описаны новые соединения, которые демонстрируют сильную антибактериальную активность против как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий. 8 н. и 22 з.п. ф-лы, 10 табл., 4 ил.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к хинолоновому синтетическому антибактериальному лекарственному средству, которое является пригодным в качестве лекарственного средства для людей, животных или рыб, или в качестве антибактериального консерванта.

Уровень техники

Со времени открытия норфлоксацина антибактериальная активность и фармакокинетика хинолоновых синтетических антибактериальных лекарственных средств (включая те, которые содержат пиридобензоксазиновый скелет) значительно улучшились и сейчас они используются при химиотерапии инфекций, включая почти все системные инфекции, и в клиническом применении находится большое количество лекарственных средств (см. патентный документ 1 или 2).

Однако в клинической области количество бактерий, демонстрирующих низкую чувствительность к хинолоновым синтетическим антибактериальным лекарственным средствам, в последнее время увеличилось. Например, бактерий, которые являются устойчивыми к лекарственным средствам иным, чем хинолоновые синтетические антибактериальные лекарственные средства, и которые также демонстрируют низкую чувствительность к хинолоновым синтетическим антибактериальным лекарственным средствам, становится все больше, таких как грамположительные кокки, подобные Staphylococcus aureus (MRSA) и pneumococcus (PRSP), нечувствительные к β-лактамовым антибиотикам, и enterococcus (VRE), нечувствительные к аминогликозидным антибактериальным лекарственным средствам. Соответственно, существует большая клиническая потребность в лекарственном средстве, проявляющем повышенную эффективность к грамположительным коккам.

В то же время, антибактериальная активность разработанных в последнее время хинолоновых синтетических антибактериальных соединений гораздо сильнее, чем у более ранних хинолоновых синтетических антибактериальных соединений (см. патентные документы 3 или 4). Однако многие такие хинолоновые соединения, обладающие высокой антибактериальной активностью, как сообщается, оказывают побочные эффекты, основанные на физиологическом или фармакологическом действии, не наблюдавшиеся у более ранних хинолоновых синтетических антибактериальных соединений. Например, накладываются ограничения на введение некоторых соединений из-за побочных эффектов, таких как установление аномального уровня глюкозы в крови, кардиотоксичность или замедленная аллергия, или развитие конвульсий, и разработка и применение в качестве лекарственного средства для некоторых соединений прекращены. Другими словами, многие соединения, как обнаружено, являются недостаточными по своей пригодности в качестве лекарственного средства из-за сильных побочных эффектов, несмотря на их высокую антибактериальную активность. Соответственно, необходима методология создания лекарственных средств, которые отличаются от более ранних соединений, чтобы, тем самым, предотвратить появление такой ситуации, что сильное антибактериальное соединение не может быть разработано в качестве лекарственного средства из-за возникновения побочных эффектов. Другими словами, необходима методология получения, которая способна давать соединения, которые обладают достаточно высокой антибактериальной активностью, сравнимой или сходной с параметрами обычных соединений, и которые, в то же время, пригодны в качестве лекарственного средства, что делает возможным применение соединения в качестве лекарственного средства, например, высокой безопасности без побочных эффектов.

Примеры побочных эффектов, о которых сообщается в связи с хинолоновыми синтетическими антибактериальными агентами, включают индуцирование конвульсий, связанных с одновременным использованием нестероидного противовоспалительного агента, центральное действие (относительно легкие расстройства центральной нервной системы, такие как головокружение, головная боль и инсомния, а также серьезные побочные эффекты, такие как развитие летальных конвульсий), фототоксичность (фоточувствительность), гепатотоксичность и кардиотоксичность (аномалию, наблюдаемую как аномалию на электрокардиограмме, которая вызывает летальную аритмию), замедленную аллергию и аномальный уровень глюкозы в крови (см. непатентные документы 1-3).

Среди побочных эффектов, как рассмотрено выше, важные клинические случаи, о которых сообщалось в последнее время, включают кардиотоксичность (сердечную аномалию, вызывающую летальную аритмию, которая наблюдается как аномалия электрокардиограммы, которая пролонгирует интервал QT или QTc). Некоторые коммерчески доступные хинолоновые антибактериальные агенты, как сообщается, вызывают явную пролонгацию интервала QT или QTc, включая некоторые серьезные случаи (аномалию электрокардиограммы, вызывающую летальную аритмию) (непатентные документы 1-3). Также сообщается о побочных эффектах, таких как индуцирование сыпи, что является результатом замедленной аллергии, и аномальный уровень глюкозы в крови.

Соответственно, чтобы сделать возможным применение хинолонового антибактериального агента в качестве лекарственного средства для людей или животных, необходимо иметь хинолоновый синтетический антибактериальный агент, который обеспечен повышенной безопасностью при более слабых побочных эффектах, таких как индуцирование конвульсий, связанное с одновременным использованием нестероидного противовоспалительного агента, центральное действие, фототоксичность (фоточувствительность) и гепатотоксичность, а также такие побочные эффекты, как кардиотоксичность, замедленная аллергия и аномальный уровень глюкозы в крови. Другими словами, имеется большая потребность в хинолоновом соединении, обладающем одновременно сильной антибактериальной активностью и селективной токсичностью.

[Патентный документ 1] выложенная заявка на патент Японии № (JP-A) 61-282382

[Патентный документ 2] JP-A 63-45261

[Патентный документ 3] JP-A 2-231475

[Патентный документ 4] JP-A 3-95176

[Непатентный документ 1] Hiroyuki Kobayashi Ed., “Clinical Applications of New-quinolone Agents”, Iyaku-Journal-Sha (2001)

[Непатентный документ 2] Drugs, Vol. 62, No. 1, page 13 (2002)

[Непатентный Документ 3] Toxicology Letters, Vol. 127, page 269 (2002).

Описание изобретения

Задачи, решаемые настоящим изобретением

Ввиду ситуации, как описано выше, одной из целей настоящего изобретения является создание хинолонового синтетического антибактериального агента и терапевтического агента против инфекции, которые демонстрируют широкий спектр и сильную антибактериальную активность в отношении как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий, и которые являются также в высшей степени безопасными.

Средства решения задач

Авторы настоящего изобретения провели исследование, сосредоточившись на соединении, которое имеет 3-аминопирролидинильную группу в положении 7 или в эквивалентном положении хинолонового соединения. В ходе исследований авторы обнаружили, что хинолоновое соединение, имеющее 3-аминопирролидинильную группу, которая является три- или тетра-замещенной в положениях 3 и 4, представленную следующей формулой:

которая имеет заместитель, который обычно представляет собой алифатической заместитель на атоме углерода в положении 3, и один или два заместителя, которые также обычно представляют собой алифатический заместитель на атоме углерода в положении 4, обладает широким спектром сильной антибактериальной активности в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий, включая устойчивые к лекарственным средствам грамположительные кокки, такие как устойчивые к множеству лекарственных средств pneumococcus, обладающие устойчивостью к хинолону. Авторы также обнаружили, что такое хинолоновое соединение обладает не только такой высокой антибактериальной активностью, но имеет также более низкую кардиотоксичность по сравнению с хинолоновыми антибактериальными лекарственными средствами, о кардиотоксичности которых в последнее время сообщается в клинической практике как о побочном эффекте хинолоновых антибактериальных лекарственных средств. Также обнаружено, что это соединение имеет пониженный риск возникновения побочных эффектов, таких как замедленная аллергия и аномальный уровень глюкозы в крови. Также обнаружено, что это соединение превосходно поглощается орально, имеет превосходную проницаемость в органах и скорость выделения с мочой. Соответственно, авторы настоящего изобретения обнаружили, что хинолоновое соединение, представленное формулой (I), является хинолоновым синтетическим антибактериальным лекарственным средством, которое имеет превосходные лекарственные свойства, включая превосходную антибактериальную активность и высокую безопасность, а также превосходную фармакокинетику. Настоящее изобретение было завершено на основе таких данных.

Соответственно, настоящее изобретение предусматривает соединение, представленное следующей формулой (I):

или его соль или гидрат,

где R¹ представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, или замещенную карбонильную группу, полученную из аминокислоты, дипептида или трипептида; алкильную группу, необязательно замещенную заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода;

R² представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; алкильную группу, необязательно замещенную заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода;

R³ представляет алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, алкенильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода, или алкинильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода; алкильную группу, необязательно замещенную заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода;

R⁴ и R⁵ независимо представляют атом водорода, атом галогена, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкенильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода, алкинильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода, или необязательно замещенную циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; алкильную группу, алкоксигруппу, алкенильную группу и алкинильную группу либо с прямой, либо с разветвленной цепью; алкильную группу, необязательно замещенную заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода; и при условии, что R⁴ и R⁵ не являются одновременно атомами водорода; или

заместители R⁴ и R⁵ объединяются вместе с образованием (a) 3-6-членной циклической структуры, включающей атом углерода, общий для R⁴ и R⁵, с образованием спироциклической структуры с пирролидиновым кольцом, где образованное таким образом спиро-кольцо необязательно содержит атом кислорода или атом серы в качестве атома-члена кольца и необязательно замещено атомом галогена или алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода, необязательно имеющей заместитель; или (b) экзометиленовой группы, связанной с пирролидиновым кольцом с помощью двойной связи, где экзометиленовая группа необязательно имеет 1 или 2 заместителя, выбранных из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода;

R⁶ и R⁷ независимо представляют атом водорода или алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода;

R⁸ представляет галоген-замещенную алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, галоген-замещенную циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, галоген-замещенную фенильную группу или галоген-замещенную гетероарильную группу;

R⁹ представляет атом водорода, фенильную группу, ацетоксиметильную группу, пивалоилоксиметильную группу, этоксикарбонильную группу, холиновую группу, диметиламиноэтильную группу, 5-инданильную группу, фталидинильную группу, 5-алкил-2-оксо-1,3-диоксол-4-илметильную группу, 3-ацетокси-2-оксобутильную группу, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкоксиметильную группу, содержащую 2-7 атомов углерода, или фенилалкильную группу, содержащую алкиленовую группу, содержащую 1-6 атомов углерода, и фенильную группу;

X¹ представляет атом водорода или атом галогена; и

A представляет атом азота или фрагмент, представленный формулой (II):

где X² представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, цианогруппу, атом галогена, галоген-замещенную метильную группу или галогенметоксигруппу; или X² и R⁸ могут объединяться вместе с образованием циклической структуры, содержащей часть материнского ядра, причем образованное таким образом кольцо необязательно содержит атом кислорода, атом азота или атом серы в качестве атома, составляющего кольцо, и необязательно является замещенным алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода, необязательно имеющей заместитель.

Настоящее изобретение также предусматривает лекарственное средство, содержащее соединение, представленное формулой (I), или его соль или гидрат в качестве его эффективного ингредиента.

Настоящее изобретение также предусматривает способ лечения заболевания путем введения соединения, представленного формулой (I), или его соли или гидрата. Настоящее изобретение также предусматривает применение соединения, представленного формулой (I), или его соли или гидрата для получения лекарственного средства.

Эффект изобретения

Настоящее изобретение предусматривает хинолоновое синтетическое лекарственное средство, которое имеет превосходные лекарственные свойства, такие как сильная антибактериальная активность не только в отношении грамотрицательных бактерий, но также и грамположительных кокков, которые стали менее чувствительными к хинолоновым антибактериальным средствам, высокую безопасность и благоприятную фармакокинетику.

Краткое описание чертежей

Фиг.1 представляет график, демонстрирующий MBI действие сравнительного соединения 1 и соединения примера 9 против CYP3A4.

Фиг.2 представляет график, демонстрирующий терапевтические эффекты сравнительного соединения 1 и соединения примера 9 на модель локальной легочной инфекции мышей посредством PRSP.

Фиг.3 представляет вид, демонстрирующий результаты рентгеноструктурного анализа для соединения, полученного в ссылочном примере 107.

Фиг.4 представляет график, демонстрирующий терапевтические эффекты сравнительного соединения 1 и соединения примера 9 на модель простого цистита у крыс посредством E.coli.

Наилучшие варианты осуществления изобретения

Сначала описываются заместители формулы (I).

R¹ представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, или замещенную карбонильную группу, полученную из аминокислоты, дипептида или трипептида. Когда R¹ представляет алкильную группу, она может быть замещена заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода.

R² представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода. Когда R² представляет алкильную группу, она может быть замещена заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода.

Когда R¹ или R² представляет алкильную группу, алкильная группа может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью. Алкильная группа предпочтительно является метильной группой, этильной группой, пропильной группой или изопропильной группой, и более предпочтительно, метильной группой или этильной группой, и наиболее предпочтительно, метильной группой.

Когда R¹ или R² представляет собой алкильную группу, имеющую гидроксигруппу или аминогруппу в качестве ее заместителя, алкильная группа может быть любой алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкильная группа предпочтительно замещена заместителем на ее концевом атоме углерода. Алкильная группа, имеющая гидроксигруппу, предпочтительно представляет собой алкильную группу, содержащую до 3 атомов углерода, и предпочтительные примеры включают гидроксиметильную группу, 2-гидроксиэтильную группу, 2-гидроксипропильную группу и 3-гидроксипропильную группу. Алкильная группа, имеющая аминогруппу, предпочтительно представляет собой алкильную группу, содержащую до 3 атомов углерода, и предпочтительные примеры включают аминометильную группу, 2-аминоэтильную группу, 2-аминопропильную группу и 3-аминопропильную группу.

Когда R¹ или R² представляет собой алкильную группу, имеющую атом галогена в качестве ее заместителя, алкильная группа может быть любой алкильной группой либо с прямой, либо разветвленной цепью, содержащей 1-6 атомов углерода, и атом галогена предпочтительно является атомом фтора. Количество замещений фтором не ограничивается, и замещение может представлять собой от моно- до перфтор-замещения. Примерами предпочтительных заместителей в качестве галогенированной алкильной группы являются галоген-замещенные алкильные группы, включая монофторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу и 2,2,2-трифторэтильную группу.

Когда R¹ или R² представляет собой алкильную группу, имеющую алкилтиогруппу или алкоксигруппу в качестве ее заместителя, алкильная группа может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, и алкильный фрагмент алкилтиогруппы и алкоксигруппы может также быть алкильным фрагментом либо с прямой, либо с разветвленной цепью. Примеры алкильных групп, имеющих алкилтиогруппу, включают алкилтиометильную группу, алкилтиоэтильную группу и алкилтиопропильную группу, и алкилтиогруппа в таких группах предпочтительно представляет собой группу, содержащую 1-3 атома углерода. Более предпочтительными являются метилтиометильная группа, этилтиометильная группа и метилтиоэтильная группа. Примеры алкильных групп, имеющих алкоксигруппу, включают алкоксиметильную группу, алкоксиэтильную группу и алкоксипропильную группу, и алкоксигруппа в таких группах предпочтительно представляет собой группу, содержащую 1-3 атома углерода. Более предпочтительными являются метоксиметильная группа, этоксиметильная группа и метоксиэтильная группа.

Когда R¹ или R² представляет собой циклоалкильную группу, предпочтительной является циклопропильная группа или циклобутильная группа, и более предпочтительно, циклопропильная группа. Заместитель циклоалкильной группы может представлять собой одну или несколько групп, выбранных из алкильной группы, содержащей 1-6 атомов углерода, атома галогена, аминогруппы и гидроксигруппы, и примеры предпочтительного заместителя включают метильную группу, этильную группу, атом фтора, атом хлора, аминогруппу и гидроксигруппу.

Предпочтительное сочетание R¹ и R² включает сочетание, в котором R¹ представляет собой атом водорода, алкильную группу, циклоалкильную группу или замещенную карбонильную группу, полученную из аминокислоты, дипептида или трипептида, и R² представляет собой атом водорода. Среди них предпочтительным сочетанием является сочетание, в котором R¹ представляет собой атом водорода, алкильную группу или циклоалкильную группу, и R² представляет собой атом водорода. Алкильная группа в таком случае предпочтительно представляет собой метильную группу или этильную группу, и более предпочтительно, метильную группу. Циклоалкильная группа предпочтительно представляет собой циклопропильную группу или циклобутильную группу, и более предпочтительно, циклопропильную группу. Сочетание R¹ и R², более предпочтительно, является сочетанием, в котором как R¹, так и R² представляют собой атом водорода, или сочетанием, в котором один из R¹ и R² представляет собой атом водорода, а другой представляет собой метильную группу, этильную группу, фторэтильную группу или циклопропильную группу.

Хинолоновое производное, где R¹ представляет собой замещенную карбонильную группу, полученную из аминокислоты, дипептида или трипептида, и R² представляет собой атом водорода, является пригодным для применения в качестве пролекарства. Аминокислота, дипептид или трипептид, используемые при получении такого пролекарства, представляют собой кислоту, которая способна образовывать соединение свободного амина путем расщепления в живом организме пептидной связи между карбоксильной группой и аминогруппой, имеющей R¹ и R², связанные с ней. Примеры замещенной карбонильной группы, используемой при получении такого пролекарства, включают замещенные карбонильные заместители, полученные из аминокислоты, такой как глицин, аланин или аспарагиновая кислота; дипептид, состоящий из глицина, аланина или аспарагина, такой как глицин-глицин, глицин-аланин или аланин-аланин; и трипептид, состоящий из глицина, аланина или аспарагина, такой как глицин-глицин-аланин или глицин-аланин-аланин.

R³ представляет алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, алкенильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода, или алкинильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода. Когда R³ представляет собой алкильную группу, она может быть необязательно замещена заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода.

Когда R³ представляет собой алкильную группу, алкильная группа может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью. Алкильная группа предпочтительно представляет собой метильную группу, этильную группу, пропильную группу или изопропильную группу. Среди них предпочтительной является метильная группа или этильная группа, и более предпочтительной является метильная группа.

Циклоалкильная группа, содержащая 3-6 атомов углерода, предпочтительно представляет собой циклопропильную группу или циклобутильную группу, и более предпочтительно, циклопропильную группу.

Алкенильная группа, содержащая 2-6 атомов углерода, предпочтительно представляет собой группу, имеющую одну двойную связь, которая не является конкретно ограниченной относительно ее положения. Предпочтительными являются винильная группа, пропенильная группа и бутенильная группа. Алкинильная группа, содержащая 2-6 атомов углерода, также предпочтительно представляет собой группу, содержащую одну тройную связь, которая не является конкретно ограниченной относительно ее положения. Предпочтительными являются этинильная группа, пропинильная и бутинильная. Среди групп, рассмотренных выше, предпочтительными являются винильная группа и этинильная группа.

Когда R³ представляет собой алкильную группу, она может быть необязательно замещена заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода.

Когда заместитель алкильной группы представляет собой гидроксигруппу или аминогруппу, алкильная группа предпочтительно замещена таким заместителем на концевом атоме углерода. Предпочтительными примерами алкильной группы, имеющей гидроксигруппу, являются гидроксиметильная группа, 2-гидроксиэтильная группа, 2-гидроксипропильная группа и 3-гидроксипропильная группа, и предпочтительными примерами алкильной группы, имеющей аминогруппу, являются аминометильная группа, 2-аминоэтильная группа, 2-аминопропильная группа и 3-аминопропильная группа. Алкильная группа, имеющая гидроксигруппу или аминогруппу, предпочтительно представляет собой метильную группу или этильную группу, имеющую такую группу, и более предпочтительно, метильную группу, имеющую такую группу, например гидроксиметильную группу или аминометильную группу.

Когда алкильная группа имеет атом галогена в качестве ее заместителя, алкильная группа может быть любой алкильной группой с прямой или разветвленной цепью, содержащей 1-6 атомов углерода. Предпочтительной является метильная группа или этильная группа, имеющая атом галогена, и более предпочтительной является метильная группа, имеющая атом галогена. Предпочтительным атомом галогена является атом фтора. Количество замещений фтором не ограничивается, и замещение может представлять собой от моно- до перфтор-замещения. Примеры галоген-замещенных алкильных групп включают монофторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу и 2,2,2-трифторэтильную группу, и предпочтительными являются монофторметильная группа, дифторметильная группа и трифторметильная группа.

Когда заместитель алкильной группы представляет собой алкилтиогруппу или алкоксигруппу, алкильная группа может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, и алкильный фрагмент в алкилтиогруппе или алкоксигруппе также может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью. Алкильная группа, имеющая алкилтиогруппу, предпочтительно представляет собой алкилтиометильную группу или алкилтиоэтильную группу, и алкилтиогруппа предпочтительно представляет собой группу, содержащую 1 или 2 атома углерода. Предпочтительными являются метилтиометильная группа, этилтиометильная группа и метилтиоэтильная группа. Алкильная группа, имеющая алкоксигруппу, предпочтительно представляет собой алкоксиметильную группу или алкоксиэтильную группу, и алкоксигруппа предпочтительно представляет собой группу, содержащую 1 или 2 атома углерода. Предпочтительными являются метоксиметильная группа, этоксиметильная группа и метоксиэтильная группа. Более предпочтительными являются метилтиометильная группа и метоксиметильная группа.

Когда R³ является циклоалкильной группой, заместитель представляет собой одну или несколько групп, выбранных из группы, состоящей из алкильной группы, содержащей 1-6 атомов углерода, атома галогена, аминогруппы и гидроксигруппы. Предпочтительными примерами такого заместителя являются метильная группа, этильная группа, атом фтора и атом хлора.

Предпочтительные примеры R³ включают группы, содержащие 1 или 2 атома углерода, такие как метильная группа; этильная группа; винильная группа; фтор-замещенная метильная группа или этильная группа; метильная группа или этильная группа, имеющая аминогруппу или гидроксигруппу; и метильная группа, имеющая тиометильную группу или метоксигруппу. Наиболее предпочтительно, R³ представляет собой метильную группу или этильную группу.

R⁴ и R⁵ независимо представляют атом водорода, атом галогена, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкенильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода, алкинильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода, или необязательно замещенную циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода. Когда R⁴ или R⁵ представляет собой алкильную группу, она может быть замещена заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода. R⁴ и R⁵ не являются одновременно атомами водорода.

R⁴ и R⁵ могут также объединяться вместе с образованием

(a) 3-6-членной циклической структуры, включающей атом углерода, общий для R⁴ и R⁵, с образованием спироциклической структуры с пирролидиновым кольцом, причем образованное таким образом спиро-кольцо необязательно содержит атом кислорода или атом серы в качестве атома-члена кольца и необязательно замещено атомом галогена или алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода, необязательно имеющей заместитель; или

(b) экзометиленовой группы, связанной с пирролидиновым кольцом с помощью двойной связи, причем экзометиленовая группа необязательно имеет 1 или 2 заместителя, выбранных из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода.

Когда R⁴ или R⁵ представляет собой алкильную группу, она может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, и она может представлять собой метильную группу, этильную группу, пропильную группу или изопропильную группу; более предпочтительно, метильную группу или этильную группу; и наиболее предпочтительно, метильную группу.

Когда R⁴ или R⁵ представляет собой алкильную группу, и эта алкильная группа имеет гидроксигруппу или аминогруппу в качестве ее заместителя, алкильная группа предпочтительно замещена таким заместителем на ее концевом атоме углерода. Алкильная группа, имеющая гидроксигруппу, предпочтительно представляет собой группу, содержащую до 3 атомов углерода, и предпочтительные примеры включают гидроксиметильную группу, 2-гидроксиэтильную группу, 2-гидроксипропильную группу и 3-гидроксипропильную группу. Алкильная группа, имеющая аминогруппу, предпочтительно представляет собой группу, содержащую до 3 атомов углерода, и предпочтительные примеры включают аминометильную группу, 2-аминоэтильную группу, 2-аминопропильную группу и 3-аминопропильную группу.

Когда R⁴ или R⁵ представляет собой алкильную группу, и эта алкильная группа имеет атом галогена в качестве ее заместителя, алкильная группа может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, содержащей 1-6 атомов углерода, и атом галогена предпочтительно является атомом фтора. Количество замещений фтором не ограничивается, и замещение может представлять собой от моно- до перфтор-замещения. Примерами предпочтительных заместителей в качестве галогенированной алкильной группы являются галоген-замещенные алкильные группы, включая монофторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу и 2,2,2-трифторэтильную группу.

Когда R⁴ или R⁵ представляет собой алкильную группу, имеющую алкилтиогруппу или алкоксигруппу в качестве ее заместителя, алкильная группа может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, и алкильный фрагмент в алкилтиогруппе или алкоксигруппе также может быть алкильной группой с прямой или разветвленной цепью. Алкильная группа, имеющая алкилтиогруппу, предпочтительно представляет собой алкилтиометильную группу, алкилтиоэтильную группу или алкилтиопропильную группу, и алкилтиогруппа предпочтительно представляет собой группу, содержащую 1-3 атома углерода. Более предпочтительно, алкильная группа, имеющая алкилтиогруппу, представляет собой метилтиометильную группу, этилтиометильную группу или метилтиоэтильную группу. Алкильная группа, имеющая алкоксигруппу, предпочтительно представляет собой алкоксиметильную группу, алкоксиэтильную группу или алкоксипропильную группу, и алкоксигруппа предпочтительно представляет собой группу, содержащую 1-3 атома углерода. Более предпочтительно, алкильная группа, имеющая алкоксигруппу, представляет собой метоксиметильную группу, этоксиметильную группу или метоксиэтильную группу.

Когда R⁴ или R⁵ представляет собой циклоалкильную группу, предпочтительной является циклопропильная группа или циклобутильная группа, и более предпочтительно, циклопропильная группа. Когда R⁴ или R⁵ представляет собой замещенную циклоалкильную группу, заместитель может быть таким же, как в таком же случае для R³, и представляет собой, по меньшей мере, один заместитель, выбранный из группы, состоящей из алкильной группы, содержащей 1-6 атомов углерода, атома галогена, аминогруппы и гидроксигруппы. Предпочтительными примерами такого заместителя являются метильная группа, этильная группа, атом фтора и атом хлора.

Когда R⁴ или R⁵ представляет собой атом галогена, он может быть атомом фтора, атомом хлора или атомом йода, и предпочтительно, атомом фтора.

Когда R⁴ или R⁵ представляет собой алкоксигруппу, она может быть любой алкоксигруппой, полученной из алкильной группы, как описано выше, и предпочтительно представляет собой алкоксигруппу, содержащую 1-3 атома углерода. Примеры таких алкоксигрупп включают метоксигруппу и этоксигруппу.

Когда R⁴ или R⁵ представляет собой алкенильную группу или алкинильную группу, эти группы могут быть такими, как определено выше для R³.

Когда R⁴ и R⁵ объединяются вместе с образованием спироциклической структуры, R⁴ и R⁵ вместе образуют полиметиленовую цепь, содержащую 2-5 атомов углерода, и противоположные концы образованной таким образом полиметиленовой цепи связываются с атомом углерода, имеющим R⁴ и R⁵, присоединенные к нему, образуя, тем самым, циклическую структуру. Образованное таким образом кольцо может иметь размер от 3-членного кольца до 6-членного кольца, и среди них, предпочтительными являются 3-членное кольцо или 4-членное кольцо, и более предпочтительным является 3-членное кольцо. Метиленовая группа в полиметиленовой цепи может быть заменена на атом кислорода или атом серы с образованием насыщенного гетероцикла. Кольцо, образованное группами R⁴ и R⁵, необязательно замещено атомом галогена или необязательно замещено алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода. Примеры атомов галогена включают атом фтора и атом хлора. Алкильная группа может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, и предпочтительными являются метильная группа, этильная группа, пропильная группа и изопропильная группа, а более предпочтительными являются метильная группа или этильная группа. Эта алкильная группа необязательно замещена заместителем, который предпочтительно представляет собой атом галогена.

Когда R⁴ и R⁵ вместе образуют экзометиленовую группу, которая связывается с пирролидиновым кольцом с помощью двойной связи, двойная связь углерод-углерод образуется путем использования атома углерода в положении 4 пирролидинильной группы, имеющей R⁴ и R⁵, присоединенные к ней, как одного из атомов углерода. В таком случае, фрагмент пирролидинильного заместителя имеет структуру, представленную следующей формулой:

где R⁴¹ и R⁵¹ оба представляют атомы водорода, или один из них представляет атом водорода, а другой представляет заместитель, выбранный из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, или алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода.

Когда заместитель экзометиленовой группы представляет собой алкилтиогруппу или алкоксигруппу, их алкильный фрагмент может быть необязательно замещен заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода. Среди них алкилтиогруппа, содержащая 1-6 атомов углерода, или алкоксильная группа, содержащая 1-6 атомов углерода, предпочтительно представляет собой алкилтио- или алкоксигруппу, содержащую 1-3 атома углерода, более предпочтительно, метилтиогруппу, этилтиогруппу, метоксигруппу или этоксигруппу, и еще более предпочтительно, метилтиогруппу или метоксигруппу.

Предпочтительно, экзометиленовая группа не замещена заместителем иным, чем атом водорода. Однако когда экзометиленовая группа имеет заместитель, заместитель предпочтительно представляет собой гидроксигруппу, аминогруппу, атом фтора, атом хлора, метилтиогруппу или метоксигруппу.

Предпочтительное сочетание R⁴ и R⁵ является сочетанием, в котором один из R⁴ и R⁵ представляет собой атом водорода, а другой представляет собой атом фтора, метильную группу, этильную группу, н-пропильную группу, изопропильную группу, н-бутильную группу, циклопропильную группу, фторметильную группу, метоксигруппу, винильную группу или этинильную группу. Также предпочтительными являются R⁴ и R⁵, образующие вместе циклопропановое кольцо или циклобутановое кольцо, содержащее атом углерода, общий для R⁴ и R⁵, с образованием спироциклической структуры. Кроме того, R⁴ и R⁵ предпочтительно объединяются вместе, образуя экзоалкиленовую группу, содержащую 2-5 атомов углерода.

R⁴ или R⁵ предпочтительно представляет собой фторалкильную группу, атом фтора или спироциклическую структуру, или экзометиленовую группу, получаемую путем их объединения.

R⁶ и R⁷ независимо представляют атом водорода или алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода. Алкильная группа может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, и предпочтительными являются метильная группа, этильная группа, пропильная группа и изопропильная группа. Более предпочтительными являются метильная группа или этильная группа, и наиболее предпочтительной является метильная группа. Предпочтительно, оба R⁶ и R⁷ представляют собой атом водорода.

R⁸ представляет галоген-замещенную алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, галоген-замещенную циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, галоген-замещенную фенильную группу или галоген-замещенную гетероарильную группу.

Когда R⁸ является галоген-замещенной алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода, фрагмент алкильной группы может быть группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью, как иллюстрируется метильной группой, этильной группой, пропильной группой, изопропильной группой, бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой и трет-бутильной группой. Среди них предпочтительной является этильная группа. Атом галогена, замещающий алкильную группу, предпочтительно представляет собой атом фтора или атом хлора, и более предпочтительно, атом фтора. Примеры галоген-замещенной алкильной группы включают фторметильную группу, 1-фторэтильную группу и 2-фторэтильную группу, и предпочтительной является 2-фторэтильная группа.

Когда R⁸ является галоген-замещенной циклоалкильной группой, содержащей 3-6 атомов углерода, примеры циклической алкильной группы включают циклопропильную группу, циклобутильную группу и циклопентильную группу, и предпочтительной является циклопропильная группа. Примеры заместителя атома галогена включают атом фтора и атом хлора, и предпочтительным является атом фтора. Монозамещение атомом галогена является достаточным, и предпочтительной является монофторциклопропильная группа, а более предпочтительной является цис-монофторциклопропильная группа.

Атомом галогена в галоген-замещенной фенильной группе предпочтительно является атом фтора или атом хлора, и более предпочтительно, атом фтора. Замещение атомом галогена предпочтительно представляет собой моно- или ди-замещение. Галоген-замещенными фенильными группами предпочтительно являются 2-фторфенильная группа, 4-фторфенильная группа или 2,4-дифторфенильная группа.

Гетероарильная группа в галоген-замещенной гетероарильной группе может быть пятичленной или шестичленной ароматической гетероциклической группой, содержащей один или несколько гетероатомов, выбранных из атома азота, атома серы и атома кислорода. Среди таких гетероарильных групп предпочтительной является пятичленная или шестичленная азотсодержащая ароматическая гетероциклическая группа, содержащая 1 или 2 атома азота. Примеры таких групп включают пиридильную группу, пиримидильную группу, пиперидинильную группу, пирролидинильную группу, морфолинильную группу, пирролильную группу, имидазолильную группу, пиразолильную группу, пиридильную группу, пиримидинильную группу, пиридазинильную группу, пирролидинильную группу, пирролинильную группу, имидазолидинильную группу, имидазолинильную группу, пиразолидинильную группу, пиразолинильную группу, пиперидильную группу и пиперазинильную группу, и предпочтительной среди них является пиридильная группа. Атомом галогена предпочтительно является атом фтора или атом хлора, и более предпочтительно, атом фтора. Замещение атомом галогена предпочтительно представляет собой моно- или ди-замещение.

R⁸ предпочтительно представляет собой галоген-замещенную циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, и предпочтительно, 2-галогенциклопропильную группу, а более предпочтительно, 1,2-цис-2-галогенпропильную группу, и в частности, (1R,2S)-2-галогенциклопропильную группу. Более предпочтительной является монофторциклопропильная группа, и в частности, цис-монофторциклопропильная группа. Наиболее предпочтительной является 1,2-цис-2-фторциклопропильная группа, и в частности, (1R,2S)-2-фторциклопропильная группа.

R⁹ представляет атом водорода, фенильную группу, ацетоксиметильную группу, пивалоилоксиметильную группу, этоксикарбонильную группу, холиновую группу, диметиламиноэтильную группу, 5-инданильную группу, фталидинильную группу, 5-алкил-2-оксо-1,3-диоксол-4-илметильную группу, 3-ацетокси-2-оксобутильную группу, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкоксиметильную группу, содержащую 2-7 атомов углерода, или фенилалкильную группу, содержащую алкиленовую группу, содержащую 1-6 атомов углерода, и фенильную группу.

R⁹ предпочтительно представляет собой атом водорода.

X¹ представляет собой атом водорода или атом галогена. Предпочтительным атомом галогена является атом фтора или атом хлора, и более предпочтительным является атом фтора. X¹ предпочтительно представляет собой атом фтора или атом водорода.

где X² представляет алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, атом водорода, цианогруппу, атом галогена, галоген-замещенную метильную группу или галогенметоксигруппу. X² вместе с R⁸ могут объединяться вместе с образованием циклической структуры, включающей часть материнского ядра, и образованное таким образом кольцо может необязательно содержать атом кислорода, атом азота или атом серы в качестве атома-члена кольца, и кольцо может быть замещено алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода, необязательно имеющей заместитель.

Когда A означает фрагмент, представленный формулой (II), и X² представляет собой алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, X² может быть алкильной группой либо с прямой, либо с разветвленной цепью. Предпочтительно, X² представляет собой метильную группу, этильную группу, пропильную группу или изопропильную группу, и среди них предпочтительными являются метильная группа и этильная группа, а более предпочтительной является метильная группа. Когда X² представляет собой алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, она может быть любой из алкоксигрупп, полученных из алкильной группы, как описано выше. Среди описанных выше групп X² предпочтительно представляет собой алкильную группу, содержащую 1-3 атома углерода, или алкоксигруппу, содержащую 1-3 атома углерода, и более предпочтительно, метильную группу или метоксигруппу.

Когда X² представляет собой атом галогена, он предпочтительно является атомом фтора или атомом хлора, и более предпочтительно, атомом фтора. Когда X² представляет собой галоген-замещенную метильную группу, атом галогена предпочтительно является атомом фтора или атомом хлора, и более предпочтительно, атомом фтора. Примеры галоген-замещенных метильных групп включают фторметильную группу, дифторметильную группу и трифторметильную группу. Аналогично, когда X² представляет собой галогенметоксигруппу, атом галогена предпочтительно является атомом фтора или атомом хлора, и более предпочтительно, атомом фтора. Примеры галогенметоксигрупп включают фторметоксигруппу, дифторметоксигруппу и трифторметоксигруппу.

Когда A означает фрагмент, представленный формулой (II), X² и R⁸ могут объединяться вместе с образованием циклической структуры, содержащей часть хинолонового скелета (3 атома, а именно атом углерода, имеющий X², связанный с ним; атом азота, имеющий R⁸, связанный с ним; и атом углерода между ядрами, имеющими X² и R⁸, связанные с ними). Образованное кольцо может предпочтительно иметь размер 5-7-членного кольца, и кольцо может быть либо насыщенным, либо ненасыщенным. Эта циклическая структура может также содержать атом кислорода, атом азота или атом серы в качестве составляющего атома кольца, и эта циклическая структура может быть дополнительно замещена алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода, как описывается выше для X². Циклическая структура предпочтительно содержит атом кислорода и предпочтительно замещена метильной группой. Такая частичная структура предпочтительно является структурой, представленной формулой: -O-CH₂-CH(-CH₃)- (атом углерода на правом конце связывается с атомом азота).

Когда A означает фрагмент, представленный формулой (II), и заместитель X² не образует циклической структуры, X² предпочтительно представляет собой метильную группу, этильную группу, метоксигруппу, дифторметоксигруппу, цианогруппу или атом хлора, и наиболее предпочтительно, метильную группу, метоксигруппу или дифторметоксигруппу.

Когда A означает фрагмент, представленный формулой (II), и заместитель X² образует циклическую структуру, предпочтительным является образование скелета 2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновой кислоты, и в частности, скелета 3-(S)-метилпиридобензоксазина.

Соединение по настоящему изобретению обладает той характерной особенностью, что оно имеет заместитель, представленный следующей формулой:

в положении 7 (или в эквивалентном положении) хинолинового скелета.

Другими словами, соединение по настоящему изобретению обладает той характерной особенностью, что присутствует аминогруппа в положении 3 пирролидинильной группы; атом углерода, имеющий эту аминогруппу, связанную с ним, имеет заместитель R³, который не является атомом водорода; и атом углерода в положении 4 является моно- или ди-замещенным. То есть, положение 3 в 1-пирролидинильной группе является ди-замещенным заместителем, включая 3-аминогруппу; и положение 4 является моно- или ди-замещенным; и соответственно, положения 3 и 4 являются три- или тетра-замещенными.

Эта пирролидинильная группа содержит асимметричный атом углерода, и соответственно, возникает стереоизомерия, как описано ниже. Сначала представляются два примера:

для положения 3.

Когда оба R⁴ и R⁵ не являются атомами водорода (включая случай, когда R⁴ и R⁵ вместе образуют структуру), предпочтительной является следующая структура:

где аминогруппа находится в β-конфигурации.

Когда любой из R⁴ и R⁵ представляет собой атом водорода, присутствуют следующие 4 типа:

Тип, имеющий структуру 1, как правило, является более предпочтительным, чем тип, имеющий структуру 4, хотя реальная предпочтительная форма изменяется в соответствии со структурой заместителя R⁵. Все эти структуры входят в объем настоящего изобретения.

Предпочтительные основные скелеты хинолонкарбоновой кислоты, имеющей заместитель в положении 7, являются такими, как показано ниже.

Предпочтительные заместители в положении 7 являются такими, как показано ниже.

Соответственно, предпочтительное соединение по настоящему изобретению представляет собой основной скелет хинолонкарбоновой кислоты, как указано выше, замещенной заместителем в положении 7, как указано выше (а именно, сочетание ядра основного скелета и заместителя, как указано выше). В формуле, показанной выше, абсолютная конфигурация в положении 3 пирролидинового кольца, замещенного аминогруппой, представляет собой либо 3R, либо 3S. Предпочтительно, соединение по настоящему изобретению является стереохимически чистым.

Предпочтительные примеры соединений по настоящему изобретению являются такими, как описано ниже:

7-[3-амино-3,4-диметилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-3,4-диметилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[3-амино-3,4-диметилпирролидин-1-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-4-этил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-4-этил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[3-амино-4-этил-3-метилпирролидин-1-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-3-метил-4-изопропилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-3-метил-4-изопропилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[3-амино-3-метил-4-изопропилпирролидин-1-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-4-циклопропил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-4-циклопропил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[3-амино-4-циклопропил-3-метилпирролидин-1-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-3-метил-4-винилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-3-метил-4-винилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[3-амино-3-метил-4-винилпирролидин-1-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-4-метилен-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-4-метилен-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[3-амино-4-метилен-3-метилпирролидин-1-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3R)-3-амино-3-метил-4-метиленпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-(3-амино-4-метокси-3-метилпирролидин-1-ил)-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-(3-амино-4-метокси-3-метилпирролидин-1-ил)-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3S,4S)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3S,4S)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3S,4S)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3S,4S)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3R)-3-амино-4-фтор-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3R)-3-амино-4-фтор-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3S)-3-амино-3-фторметил-4-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(3S)-3-амино-3-фторметил-4-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[8-амино-8-метил-6-азаспиро[3.4]октан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[8-амино-8-метил-6-азаспиро[3.4]октан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

(3S)-10-[8-амино-8-метил-6-азаспиро[3.4]октан-5-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(7S)-7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(7S)-7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-1-циклопропил-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(7S)-7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат,

7-[(7S)-7-амино-7-метокси-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-1-циклопропил-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота, ее соль или гидрат.

Далее описывается способ синтеза 3-амино-3-алифатический углеводород-замещенного-4-алифатический углеводород-замещенного пирролидинового производного, которое относится к настоящему изобретению. Типичный пример заместителя 3-амино-3-алифатический углеводород-замещенного-4-алифатический углеводород-замещенного пирролидинового производного представляет собой 3-амино-3-алифатический углеводород-замещенная-4-алифатический углеводород-замещенная пирролидин-1-ильная группа, такая как 3-амино-3-метил-4-алкил-замещенная пирролидин-1-ильная группа.

3-Амино-3-метил-4-алкил-замещенное пирролидиновое производное (8), которое представляет собой типично замещенное соединение по настоящему изобретению, можно получить синтезом важного промежуточного соединения путем 1,3-диполярного циклоприсоединения, используя 3-замещенный сложный кротоновый эфир (1) и азометинилид (2) для блокирования реакции, с последующим гидролизом сложноэфирного фрагмента и преобразованием в амин. Хотя авторами настоящего изобретения выбрана трет-бутоксикарбонильная группа в качестве защитной группы аминового фрагмента в положении 3, защитная группа аминового фрагмента в положении 3 не ограничивается трет-бутоксикарбонильной группой до тех пор, пока выбранная защитная группа не влияет на последующие стадии реакции, и эта защитная группа легко удаляется позже, а также может быть использована защитная группа, которая является такой же, как защитная группа в положении 1. Может быть осуществлен синтез оптически активного соединения, например, путем оптического разделения с использованием соответствующего промежуточного соединения, например, путем ВЭЖХ разделения с использованием хиральной колонки соответствующего промежуточного продукта, предпочтительной кристаллизации диастереомерной соли или путем связывания хирального элемента структуры с соответствующим промежуточным соединением с получением диастереомера, отделения диастереомера с использованием соответствующей технологии разделения, такой как хроматография на силикагеле, и удаления хирального элемента структуры с получением оптически активного вещества. Альтернативно, оптически активное соединение можно синтезировать путем использования хирального элемента структуры в качестве исходного вещества.

В формуле, Boc представляет трет-бутоксикарбонильную группу, Cbz представляет бензилоксикарбонильную группу, R¹⁰ представляет алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, и R¹¹ представляет R⁴ или R⁵, описанные для формулы (I), за исключением атома водорода.

Стадия 1 представляет собой стадию, где 3-алкоксикарбонил-3-метил-4-замещенное пирролидиновое производное (3) синтезируют путем 1,3-диполярного циклоприсоединения с использованием 3-замещенного сложного кротонового эфира (1) и азометинилида (2) для блокирования реакции. Азометинилид, используемый для получения азометинилида, может быть получен, например, путем добавления каталитического количества трифторуксусной кислоты или каталитического количества фторида серебра к N-бензил-N-(метоксиметил)триметилсилилметиламину (см. Journal of Organic Chemistry, vol. 52, No. 2, page 235, 1987). Реакционный растворитель особенно не ограничивается до тех пор, пока он дает азометинилид без ингибирования 1,3-диполярного циклоприсоединения. Растворителем, однако, предпочтительно является дихлорметан или 1,2-дихлорэтан. Реакцию можно проводить при температуре от -20°C до температуры дефлегмации растворителя, и предпочтительно, от комнатной температуры до температуры дефлегмации растворителя.

Стадия 2 представляет собой стадию, в которой преобразуется защитная группа в положении 1 пирролидинового кольца. Эту стадию предпочтительно осуществляют для того, чтобы сделать возможным разделение и очистку экстракцией производного карбоновой кислоты, полученного гидролизом сложного эфира в положении 3. Защитная группа в положении 1 предпочтительно представляет собой группу, которая может отличаться на стадии снятия защиты от защитной группы для аминогруппы в положении 3, генерируемой при последующем преобразовании, хотя использование такой же защитной группы допускается. Предпочтительная защитная группа в положении 1 представляет собой бензилоксикарбонильную группу. Реакцию введения этого бензилоксикарбонила, как правило, осуществляют путем прямого преобразования по реакции фон Брауна с использованием бензилхлорформиата в таком растворителе, как дихлорметан; путем каталитического гидролиза с использованием катализатора, такого как палладий на угле, с последующим взаимодействием с бензилхлорформиатом в соответствующем растворителе и в присутствии основания.

Стадия 3 представляет собой стадию гидролиза сложного эфира в положении 3 пирролидинового кольца. Сложный эфир представляет собой сложный алкиловый эфир, содержащий 1-6 атомов углерода, и предпочтительно, сложный метиловый эфир, сложный этиловый эфир или сложный трет-бутиловый эфир. Гидролиз можно осуществлять любым способом, обычно используемым в данной области, до тех пор, пока защитная группа в положении 1 не подвергается влиянию, и, как правило, гидролизом с использованием основания или кислоты. Гидролиз сложного метилового эфира и сложного этилового эфира осуществляют путем взаимодействия со щелочным водным раствором, таким как водный раствор гидроксида натрия, водный раствор гидроксида калия или водный раствор гидроксида бария, в этаноле или воде, с последующим подкислением соответствующей кислотой, которая не влияет на защитную группу в положении 1, для разделения и очистки. В случае гидролиза сложного трет-бутилового эфира, гидролиз осуществляют в кислотных условиях или в присутствии кислотного катализатора в соответствующем растворителе, в котором сложный эфир является растворимым. Предпочтительные кислоты включают хлористоводородную кислоту, муравьиную кислоту, уксусную кислоту, трифторуксусную кислоту и толуолсульфоновую кислоту.

Стадия 4 представляет собой стадию преобразования карбоксильной группы в положении 3 пирролидинового кольца в аминогруппу. Эту стадию, как правило, осуществляют перегруппировкой карбоновой кислоты до амина. Например, когда перегруппировку осуществляют с помощью перегруппировки Курциуса, карбоновая кислота преобразуется в азид кислоты путем использования реагента, такого как азид натрия, триметилсилилазид или дифенилфосфорилазид (DPPA), в соответствующем растворителе, таком как толуол, и преобразования азида кислоты в изоцианат путем нагревания реакционной смеси, а затем преобразования изоцианата в амин гидролизом с использованием хлористоводородной кислоты или т.п.

Стадия 5 представляет собой стадию создания защиты аминогруппы в положении 3 пирролидинового кольца. Однако последующие стадии могут также быть осуществлены без создания защиты аминогруппы. Защитная группа аминогруппы в положении 3 может быть амино-защитной группой, обычно используемой в данной области. Однако использование защитной группы, которая отличается на стадии снятия защиты от защитной группы в положении 1, является предпочтительным. Примеры включают трет-бутоксикарбонильную группу, ацетильную группу и трифторацетильную группу, и предпочтительной является трет-бутоксикарбонильная группа.

Необходимо отметить, что стадия 4 и стадия 5 могут быть осуществлены в одну стадию, когда перегруппировку осуществляют в соответствующем растворителе. Например, перегруппировку Курциуса можно осуществлять с использованием дифенилфосфорилазида (DPPA) в трет-бутиловом спирте с получением 3-(трет-бутоксикарбонил)аминопирролидинового производного.

Стадия 6 представляет собой стадию снятия защиты с положения 1 пирролидинового кольца, и реакцию снятия защиты можно осуществлять при любых условиях до тех пор, пока другие функциональные группы и конфигурации не затрагиваются. Поскольку защитная группа в положении 1 представляет собой бензилоксикарбонильную группу по отношению к соединению по настоящему изобретению, снятие защиты осуществляют при условиях, обычно используемых в данной области, например, путем каталитического гидрогенолиза в присутствии катализатора, такого как палладий на угле, или путем использования формиата аммония в протонном полярном растворителе. Когда ненасыщенная связь углерод-углерод присутствует в положении 4 пирролидинового кольца, благодаря присутствию заместителя, такого как винильная группа или метиленовая группа, снятие защиты должно осуществляться, в то же время, сохраняя ненасыщенную связь углерод-углерод. Поскольку защитная группа в положении 1 представляет собой бензилоксикарбонильную группу по отношению к соединению по настоящему изобретению, условия снятия защиты, способные сохранять ненасыщенную связь углерод-углерод винильной группы, метиленовой группы или тому подобное в положении 4 пирролидинового кольца, достигаются способом с использованием натрия-жидкого аммиака (условия восстановления по Берчу) в присутствии сильной кислоты (например, бромистоводородной кислоты-уксусной кислоты, трифторуксусной кислоты и трифторметансульфоновой кислоты-трифторуксусной кислоты), способом с использованием гидроксида бария и тому подобное.

Далее описывается синтез пирролидинового производного, которое представляет собой, как правило, 7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ильную группу.

7-Амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептановое производное (17), которое представляет собой другое типичное соединение по настоящему изобретению, может быть синтезировано путем преобразования кетонового фрагмента ацетоацетатного производного в аминонитрильное производное по реакции Штрекера, преобразования цианогруппы в аминометильную группу путем восстановления и конденсации аминометильной группы со сложноэфирным фрагментом (единицей карбоновой кислоты) с получением пирролидонового производного, которое представляет собой важное промежуточное соединение.

Хотя авторами настоящего изобретения выбрана трет-бутоксикарбонильная группа в качестве защитной группы аминового фрагмента в положении 3, защитная группа для аминового фрагмента в положении 3 не ограничивается трет-бутоксикарбонильной группой до тех пор, пока выбранная защитная группа не ингибирует последующих стадий реакций, и эта защитная группа легко удаляется позже, и также может быть использована защитная группа, которая является такой же, как защитная группа в положении 1. Синтез оптически активного соединения можно осуществлять, например, путем оптического разделения с использованием соответствующего промежуточного соединения, например, путем разделения методом ВЭЖХ с использованием хиральной колонки соответствующего промежуточного соединения, избирательной кристаллизации диастереомерной соли или путем связывания хирального элемента структуры с соответствующим промежуточным соединением с получением диастереомера, отделения диастереомера с использованием соответствующей технологии разделения, такой как хроматография на силикагеле, и удаления хирального элемента структуры с получением оптически активного вещества. Альтернативно, оптически активное соединение можно синтезировать с использованием хирального элемента структуры в качестве исходного вещества.

В формуле, Boc представляет трет-бутоксикарбонильную группу и R¹² представляет алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода.

Стадия 7 представляет собой стадию создания циклической структуры на метиленовом фрагменте ацетоацетатного производного. Эту стадию можно, как правило, осуществлять с использованием 1,2-дигалогенэтана, такого как дибромэтан, в качестве алкилирующего агента, в присутствии основания. Примеры оснований включают карбонат калия, гидрид натрия и металлический натрий, и примеры реакционных растворителей включают ацетон и N,N-диметилформамид. После завершения реакции циклосоединение может быть отделено и очищено путем дистилляции при пониженном давлении.

Стадия 8 представляет собой стадию преобразования метилкетонового фрагмента в аминонитрильное производное по реакции Штрекера. Эту реакцию Штрекера осуществляют путем взаимодействия аммония с цианирующим агентом, таким как цианид калия, необязательно в присутствии хлорида аммония. Условия реакции могут быть адекватно выбраны с помощью ссылок на реакцию Штрекера, обычно используемую при синтезе аминокислот.

Стадия 9 представляет собой стадию восстановления цианогруппы для преобразования в метиламин. Восстановление нитрила может, как правило, быть осуществлено каталитическим восстановлением в присутствии катализатора в соответствующем растворителе, таком как этанол. Примеры катализатора включают катализаторы палладий на угле, никель Ренея, кобальт Ренея и оксид платины. Если в качестве побочного продукта каталитического восстановления нитрила получается вторичный амин, восстановление можно осуществлять в присутствии аммиака. Восстановление можно осуществлять с помощью гидрида металла, если другие функциональные группы в реакционной системе, например сложноэфирная группа, которая является типичным примером в соединениях по настоящему изобретению, не восстанавливается. Типичный пример гидрида металла представляет собой боргидрид натрия-хлорид кобальта (II). Если сложноэфирный фрагмент восстанавливается, реакция может быть осуществлена после преобразования сложноэфирного фрагмента в объемный сложный эфир, такой как сложный трет-бутиловый эфир, который не восстанавливается.

Стадия 10 представляет собой стадию конденсации сложноэфирного фрагмента (единица карбоновой кислоты) и метиламина в молекуле с получением производного пирролидона. Когда сложноэфирный фрагмент представляет собой сложный метиловый эфир или сложный этиловый эфир, конденсацию, как правило, можно осуществлять путем нагревания реакционного раствора от комнатной температуры в соответствующем растворителе. Когда сложноэфирный фрагмент представляет собой сложный метиловый эфир или сложный этиловый эфир, производное пирролидона может быть получено непосредственно из реакционной смеси на стадии 9. С другой стороны, когда сложный эфир представляет собой объемный сложный эфир, такой как сложный трет-бутиловый эфир, конденсацию осуществляют путем гидролиза сложного эфира способом, обычно используемым в данной области, а затем преобразованием гидролизата в производное пирролидона с использованием конденсирующего агента, такого как DCC.

Стадия 11 представляет собой стадию защиты аминогруппы в положении 3 пирролидинового кольца. Однако последующие стадии также можно осуществлять без защиты аминогруппы. Защитная группа для аминогруппы в положении 3 может быть амино-защитной группой, обычно используемой в данной области, которая является стабильной при условиях реакции на последующей стадии 13. Однако использование защитной группы, которая отличается на стадии снятия защиты от защитной группы в положении 1, является предпочтительным. Примеры включают трет-бутоксикарбонильную группу, ацетильную группу и трифторацетильную группу, и предпочтительной является трет-бутоксикарбонильная группа.

Стадия 12 представляет собой стадию создания защиты положения 1 пирролидинового кольца. Однако последующие стадии можно также осуществлять без защиты аминогруппы. Защитная группа положения 1 может быть амино-защитной группой, обычно используемой в данной области, которая является стабильной при условиях реакции последующей стадии 13. Однако использование защитной группы, которая отличается на стадии снятия защиты от защитной группы аминогруппы в положении 3, является предпочтительным. Авторами настоящего изобретения выбрана в качестве защитной группы бензильная группа. Реакцию введения бензильной группы осуществляют с использованием бензилгалогенида в присутствии основания, такого как гидрид натрия или карбонат калия. Используемый реакционный растворитель может представлять собой ацетон, N,N-диметилформамид, тетрагидрофуран или их смесь.

Стадия 13 представляет собой стадию восстановления карбонильной группы пирролидона. Восстановление осуществляют с использованием восстанавливающего агента. Примеры восстанавливающих агентов включают гидриды металлов, такие как литийалюминийгидрид и бис(2-метоксиэтокси)алюминийгидрид натрия, соединения гидрида бора, такие как диборан и комплекс боран-тетрагидрофуран. Используемый растворитель, как правило, представляет собой растворитель на основе эфира, такой как тетрагидрофуран, и реакцию можно осуществлять при температуре от -78°C до 100°C.

Стадия 14 представляет собой стадию снятия защиты с положения 1 пирролидинового кольца, и реакцию снятия защиты можно осуществлять при любых условиях до тех пор, пока другие функциональные группы и конфигурации не затрагиваются. Поскольку защитная группа в положении 1 представляет собой бензильную группу в отношении соединения по настоящему изобретению, снятие защиты осуществляют при условиях, обычно используемых в данной области, например, каталитическим гидрогенолизом в присутствии катализатора, такого как палладий на угле, или с использованием формиата аммония в протонном полярном растворителе. Когда ненасыщенная связь углерод-углерод присутствует в положении 4 пирролидинового кольца, из-за присутствия заместителя, такого как винильная группа или метиленовая группа, снятие защиты должно осуществляться, в то же время, при сохранении ненасыщенной связи углерод-углерод. Поскольку защитная группа в положении 1 представляет собой бензильную группу в отношении соединения по настоящему изобретению, условия снятия защиты, способные сохранять ненасыщенную связь углерод-углерод винильной группы, метиленовой группы или тому подобное в положении 4 пирролидинового кольца, обеспечиваются, например, способом с использованием натрия-жидкого аммиака (условия восстановления по Берчу).

Выше реакции были описаны в терминах примеров. Специалисты в данной области смогут найти новый способ синтеза, рассматривая такие реакции. Объем настоящего изобретения не ограничивается реакциями, описанными выше.

Если соединение по настоящему изобретению (I) получают с использованием полученного таким образом соединения (8) или соединения (17), соединение хинолонового скелета, представленное следующей формулой (18):

где R⁸, X¹ и A являются такими, как определено выше; и R⁹¹ представляет атом водорода, дигалогенбор или диацилоксибор; и X² представляет собой уходящую группу, может взаимодействовать с соединением (8) или соединением (17).

R⁹¹ соединения хинолонового скелета иллюстрируется как атом водорода или борный заместитель, способный образовывать хелат бора. Борные заместители могут представлять собой дигалогенбор или диацилоксибор. Предпочтительный дигалогенбор представляет собой дифторбор (-BF₂), а предпочтительный диацилоксибор представляет собой диацетилоксибор [-B(OAc)₂], и эти соединения могут быть получены известным способом.

Описывается способ получения с использованием соединения примера 9 в качестве примера.

Целевое соединение может быть получено путем растворения соединения хинолонового скелета в соответствующем растворителе и взаимодействия соединения (8) или (17) для введения заместителя в положении 7, в присутствии основания, с соединением хинолонового скелета. Аминогруппу соединения для введения заместителя в положении 7 можно защищать защитной группой, и примеры защитных групп иных, чем трет-бутилоксикарбонил (Boc), включают бензилоксикарбонильную группу, п-метоксибензилоксикарбонильную группу, ацетильную группу, метоксиацетильную группу, трифторацетильную группу, пивалоильную группу, формильную группу, бензоильную группу, трет-бутильную группу, бензильную группу, триметилсилильную группу и изопропилдиметилсилил. Примеры оснований включают карбонат, бикарбонат или гидроксид щелочного металла или щелочноземельного металла; триалкиламин, такой как триэтиламин и N,N-диизопропилэтиламин; и соединения с азотсодержащими гетероциклическими группами, такие как пиридин, 1,8-диазабициклоундецен и N-метилпиперидин, и предпочтительными являются триалкиламины, и в частности, триэтиламин. Используемый растворитель особенно не ограничивается до тех пор, пока он не ингибирует реакцию, и предпочтительные примеры включают N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, сульфолан, ацетонитрил, этанол, диметилацетамид, тетрагидрофуран и N-метилпирролидон, и более предпочтительными являются диметилсульфоксид или сульфолан.

Если соединение хинолонового скелета представляет собой соединение хелата бора, целевое соединение может быть получено путем отщепления фрагмента борного заместителя гидролизом и снятия защитной группы с аминогруппы. Гидролиз борного заместителя можно осуществлять при условиях, обычно используемых в данной области, например, взаимодействием с основанием в спиртовом растворителе, таком как метанол и этанол. Основание предпочтительно представляет собой триэтиламин, и реакцию предпочтительно осуществляют на бане со льдом. Снятие защиты осуществляют при условиях, подходящих для используемой защитной группы, например, путем обработки гидролизата концентрированной хлористоводородной кислотой. После взаимодействия реакционный раствор подщелачивают добавлением водного раствора гидроксида натрия.

Соответственно, соединения, представленные следующими формулами (19) и (20), являются подходящими для использования в качестве промежуточного соединения для получения соединения (I) по настоящему изобретению.

В формулах, R¹¹ представляет группу, содержащую R¹, как определено выше (атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, или замещенную карбонильную группу, полученную из аминокислоты, дипептида или трипептида; алкильную группу, необязательно замещенную заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода), и защитную группу аминокислоты;

R²¹ представляет группу, содержащую R², как определено выше (атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; алкильную группу, необязательно замещенную заместителем, выбранным из группы, состоящей из гидроксигруппы, аминогруппы, атома галогена, алкилтиогруппы, содержащей 1-6 атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода), и защитную группу аминокислоты; и

R³, R⁴, R⁵, R⁶ и R⁷ являются такими, как определено выше.

Далее описывается защитная группа для аминогруппы, представленная R¹¹ и R²¹. Защитная группа особенно не ограничивается до тех пор, пока защитная группа представляет собой группу, широко используемую в данной области, и примеры защитных групп включают алкоксикарбонильные группы, такие как трет-бутоксикарбонильная группа и 2,2,2-трихлорэтоксикарбонильная группа; аралкилоксикарбонильные группы, такие как бензилоксикарбонильная группа, пара-метоксибензилоксикарбонильная группа и пара-нитробензилоксикарбонильная группа; ацильные группы, такие как ацетильная группа, метоксиацетильная группа, трифторацетильная группа, хлорацетильная группа, пивалоильная группа, формильная группа и бензоильная группа; алкильные группы или аралкильные группы, такие как трет-бутильная группа, бензильная группа, пара-нитробензильная группа, пара-метоксибензильная группа и трифенилметильная группа; простые эфиры, такие как метоксиметильная группа, трет-бутоксиметильная группа, тетрагидропиранильная группа и 2,2,2-трихлорэтоксиметильная группа; (алкил и/или аралкил)-замещенные силильные группы, такие как триметилсилильная группа, изопропилдиметилсилильная группа, трет-бутилдиметилсилильная группа, трибензилсилильная группа и трет-бутилдифенилсилильная группа.

В формуле, R¹³ представляет защитную группу для аминогруппы и R¹¹, R²¹, R³, R⁴, R⁵, R⁶ и R⁷ являются такими, как определено выше.

Защитная группа, представленная R¹³, особенно не ограничивается до тех пор, пока защитная группа представляет собой группу, широко используемую в данной области. Примеры защитных групп включают алкоксикарбонильные группы, такие как трет-бутоксикарбонильная группа и 2,2,2-трихлорэтоксикарбонильная группа; аралкилоксикарбонильные группы, такие как бензилоксикарбонильная группа, пара-метоксибензилоксикарбонильная группа и пара-нитробензилоксикарбонильная группа; ацильные группы, такие как ацетильная группа, метоксиацетильная группа, трифторацетильная группа, хлорацетильная группа, пивалоильная группа, формильная группа и бензоильная группа; алкильные группы или аралкильные группы, такие как трет-бутильная группа, бензильная группа, пара-нитробензильная группа, пара-метоксибензильная группа и трифенилметильная группа; простые эфиры, такие как метоксиметильная группа, трет-бутоксиметильная группа, тетрагидропиранильная группа и 2,2,2-трихлорэтоксиметильная группа; (алкил и/или аралкил)-замещенные силильные группы, такие как триметилсилильная группа, изопропилдиметилсилильная группа, трет-бутилдиметилсилильная группа, трибензилсилильная группа и трет-бутилдифенилсилильная группа.

Когда более двух групп из R¹¹, R¹² и R¹³ представляют собой защитные группы, реальные защитные группы должны выбираться так, чтобы они определялись в соответствии со знаниями в данной области и их можно было селективно удалять при синтезе соединения 19 или 20.

Полученное таким образом соединение примера 9 проявляет сильную антибактериальную активность, а также превосходную стабильность и фармакокинетику, как будет ясно из примеров испытаний, представленных ниже. Когда это соединение оценивают с помощью рентгеновской кристаллографии, абсолютная конфигурация на асимметричном атоме углерода в положении 7 (центр замещения аминогруппы) 5-азаспиро[2.4]гептан-5-ильной группы представляет собой (7S). Это подтверждает то, что предпочтительным соединением является соединение, в котором спиробициклический заместитель в положении 7 имеет абсолютную конфигурацию (S).

Поскольку соединение по настоящему изобретению обладает сильной антибактериальной активностью, оно может быть использовано в качестве лекарственного средства для людей, животных и рыб или в качестве консерванта сельскохозяйственных химикатов и пищевых продуктов. Типичная доза соединения по настоящему изобретению, когда оно используется в качестве лекарственного средства для людей, составляет от 50 мг до 1 г, и более предпочтительно, от 100 мг до 500 мг в день для взрослого. Когда соединение по настоящему изобретению вводят животному, доза, как правило, составляет от 1 мг до 200 мг, и более предпочтительно, от 5 мг до 100 мг в день на 1 кг массы животного, хотя доза может изменяться в соответствии с размером животного, подлежащего лечению, типом патогенного микроорганизма и серьезностью состояния. Такую ежедневную дозу можно вводить в разовой дозе или в 2-4 разделенных дозах. Если это необходимо, можно вводить дозу, превосходящую такую ежедневную дозу.

Соединение по настоящему изобретению обладает превосходной антибактериальной активностью в отношении широкого диапазона микроорганизмов, вызывающих различные инфекции, и, по этой причине, настоящее соединение способно лечить, предотвращать или ослаблять заболевания, вызываемые такими патогенными микроорганизмами. Соединение по настоящему изобретению является эффективным против бактерий и бактериеподобных микроорганизмов, включая Staphylococcus, Streptococcus pyogenes, hemolytic streptococcus, enterococcus, pneumococcus, Peptostreptococcus, Neisseria gonorrhoeae, Escherichia coli, Citrobacter, Shigella, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter, Serratia, Proteus, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae, Acinetobacter, Campylobacter и Chlamydia trachomatis.

Заболевания, вызываемые такими патогенными микроорганизмами, включают поверхностные вторичные инфекции, такие как фолликулит, фурункулы, карбункулы, рожистое воспаление, целлюлит, лимфангит, панариций, субэпидермальный абсцесс, гидраденит, фолликулярный дерматит, инфекционная атерома, перианальный абсцесс, мастит и ранение, ожог и операционные раны; вторичные инфекции ларингофарингита, острый бронхит, тонзиллит, хронический бронхит, бронхоэктазию, диффузный панбронхиолит и хронические респираторные заболевания; пневмонию, пиелонефрит, цистит, простатит, эпидидимит, гонорейный уретрит, негонококковый уретрит, холецистит, холангит, шигеллез, энтерит, аднексит, внутриматочную инфекцию, бартолинит, блефарит, ячмень, дакриоцистит, воспаление мейбомиевых желез, корнеальные язвы, воспаление среднего уха, синусит, воспалительные заболевания надкостницы, перикоронит, воспаление челюсти, перитонит, эндокардит, сепсис, менингит и кожные инфекции.

Соединение по настоящему изобретению является также эффективным против кислотоустойчивых бактерий, таких как M.tuberculosis complex (Mycobacterium tuberculosis, M. bovis и M. africans) и атипичные микобактерии (M. kansasii, M. marianum, M. scrofulaceum, M. avium, M. intracellulare, M. xenopi, M. fortuitum и M. chelonae). Микобактериальные инфекции, вызываемые такими патогенными микроорганизмами, подразделяются на три категории: туберкулез, атипичный микобактериоз и проказа. Микобактериальные инфекции влияют не только на легкие, но также на торакальную полость, трахею и бронхи, лимфатические узлы, посредством системного распространения, суставы и кости, мягкие мозговые оболочки, органы пищеварения (кишечник и печень), кожу, молочные железы, глаза, среднее ухо и глотку, мочевой тракт, мужские гениталии и женские гениталии. Основным органом, на который воздействует атипичный микобактериоз (нетуберкулезный микобактериоз), являются легкие. Атипичный микобактериоз, однако, также действует посредством местного лимфаденита, мягких тканей кожи, костей и суставов и посредством системного распространения.

Соединение по настоящему изобретению также является эффективным против различных микроорганизмов, вызывающих инфекции у животных, таких как Escherichia, Salmonella, Pasteurella, Haemophilus, Bordetella, Staphylococcus и микоплазма. Примеры заболеваний включают колибактериоз, белую диарею, птичий паратиф, холеру домашних птиц, инфекционную диарею, стафилококк, инфекцию микоплазмой и тому подобное у домашней птицы; колибактериоз, сальмонеллез, пастереллез, гемофилоз, атрофический ринит, эксудативный эпидермит, инфекцию микоплазмой и тому подобное у свиней; колибактериоз, сальмонеллез, геморрагическую септицемию, инфекцию микоплазмой, плевропневмонию и мастит у коров; сепсис Escherichia coli, инфекцию сальмонеллой, геморрагическую септицемию, пиометру, цистит и тому подобное у собак; и экссудативный плеврит, цистит, хронический ринит, гемофилоз, диарею котят, инфекцию микоплазмой и тому подобное у кошек.

Антибактериальное лекарственное средство, содержащее соединение по настоящему изобретению, может быть получено путем выбора дозированной формы, соответствующей способу введения, и получения лекарственных средств способом, обычно используемым в данной области для получения выбранной дозированной формы. Примеры дозированных форм для антибактериального лекарственного средства, содержащего соединение по настоящему изобретению в качестве своего основного ингредиента, включают таблетку, порошок, гранулы, капсулу, раствор, сироп, эликсир и суспензию на основе масла и на основе воды. В случае инъекции препарат может содержать стабилизатор, антисептик, солюбилизатор и тому подобное, и препарат, необязательно дополненный такими добавками, можно заполнять в контейнер, а затем высушивать вымораживанием с получением твердого препарата, который должен быть гидратирован непосредственно перед использованием. Контейнер может быть заполнен либо разовой дозой, либо многократными дозами. В случае твердого препарата, препарат может содержать фармацевтически приемлемый носитель с соединением (1), и примеры носителей включают наполнители, вещества для увеличения объема, связующие, дезинтегранты, солюбилизаторы, смачивающие агенты и лубриканты. Жидкий препарат может представлять собой раствор, суспензию, эмульсию или тому подобное, что может содержать суспендирующий агент или эмульгатор в качестве добавки.

В случае твердого препарата, препарат может содержать фармацевтически приемлемый носитель с активным соединением, и примеры носителей включают наполнители, связующие, дезинтегранты, солюбилизаторы, смачивающие агенты и лубриканты. Жидкий препарат может представлять собой раствор, суспензию, эмульсию или тому подобное, что может содержать суспендирующий агент или эмульгатор в качестве добавки.

Далее описываются примеры препаратов.

Препарат 1 (Капсула)

Соединение примера 9	100,0 мг
Кукурузный крахмал	23,0 мг
Кальцийкарбоксиметилцеллюлоза	22,5 мг
Гидроксиметилцеллюлоза	3,0 мг
Стеарат магния	1,5 мг
Всего	150,0 мг

Препарат 2 (Раствор)

Соединение примера 9	1-10 г
Уксусная кислота или гидроксид натрия	0,5-2 г
Этилпараоксибензоат	0,1 г
Очищенная вода	87,8-98,4 г
Всего	100,0 г

Препарат 3 (Порошок для корма для животных)

Соединение примера 9	1-10 г
Кукурузный крахмал	89,5-98,5 г
Светлая безводная кремниевая кислота	0,5 г
Всего	100,0 г

Примеры

Далее настоящее изобретение описывается более подробно посредством ссылок на ссылочные примеры и примеры, которые ни в коем случае не ограничивают объем настоящего изобретения.

Ссылочный пример 1

Этил (3R*,4R*)-1-бензил-3,4-диметилпирролидин-3-карбоксилат

К раствору сложного этилового эфира тиглиновой кислоты (6,41 г, 50,0 ммоль) и N-бензил-N-(метоксиметил)-N-триметилсилилметиламина (15,35 г, 60,0 ммоль) в дихлорметане (150 мл) добавляют каталитическое количество трифторуксусной кислоты при комнатной температуре и смесь перемешивают на масляной бане при 40°C в течение 10 часов. Реакционную смесь разбавляют путем добавления этилацетата (500 мл), раствор промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (200 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ:метанол, 49:1 → 19:1 → 9:1) с получением 13,73 г неочищенного указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого масла. Неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,96 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,17 (3H, c), 1,22 (3H, т, J=7,1Гц), 2,16 (1H, т, J=8,8 Гц), 2,25 (1H, д, J=9,6Гц), 2,61-2,67 (1H, м), 2,91 (1H, т, J=8,2Гц), 3,28 (1H, д, J=10,0Гц), 3,53 (1H, д, J=13,5Гц), 3,64 (1H, д, J=13,2Гц), 4,11 (2H, кв, J=7,1Гц), 7,19-7,38 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 262 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 2

Этил (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3,4-диметилпирролидин-3-карбоксилат

К раствору этил (3R*,4R*)-1-бензил-3,4-диметилпирролидин-3-карбоксилата (2,75 г, 10,0 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляют бензилхлорформиат (2,14 мл, 15,0 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов. Также добавляют к смеси бензилхлорформиат (2,14 мл, 15,0 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение следующих 14 часов. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 9:1 → 4:1 → 2:1) с получением 1,64 г указанного в заголовке соединения (5,37 ммоль, 2 стадии, 54%) в виде бесцветного прозрачного масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,99 (1,5H, д, J=7,1Гц), 1,02 (1,5H, д, J=7,1Гц), 1,18 (3H, c), 1,26 (3H, т, J=7,1Гц), 2,57-2,66 (1H, м), 3,01-3,10 (1H, м), 3,39 (0,5H, д, J=10,7Гц), 3,45 (0,5H, д, J=11,0Гц), 3,66 (1H, тд, J=11,0, 8,0Гц), 3,77 (1H, дд, J=10,9, 4,8Гц), 4,11-4,19 (2H, м), 5,09-5,17 (2H, м), 7,26-7,38 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 306 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 3

(3R*,4S*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин

К раствору этил (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3,4-диметилпирролидин-3-карбоксилата (1,63 г, 5,34 ммоль) в этаноле (16 мл) добавляют 1 н. водный раствор гидроксида натрия (16,0 мл, 16,0 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3,5 часов. После концентрирования растворителя при пониженном давлении к смеси добавляют для подкисления 1 н. хлористоводородную кислоту и смесь экстрагируют этилацетатом (150 мл). Полученный органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме карбоновой кислоты. Неочищенный продукт в форме карбоновой кислоты используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

К раствору полученного таким образом неочищенного продукта в форме карбоновой кислоты и триэтиламина (1,488 мл, 10,68 ммоль) в толуоле (30 мл) добавляют дифенилфосфорилазид (1,495 мл, 6,94 ммоль) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут и дополнительно перемешивают на масляной бане при 80°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляют путем добавления этилацетата (150 мл) и раствор промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (80 мл), водой (80 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (80 мл) в таком порядке. Полученный органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после удаления обезвоживающего агента фильтрованием, растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме изоцианата. Полученный таким образом неочищенный продукт в форме изоцианата растворяют в 1,4-диоксане (15 мл) и после добавления 6 н. хлористоводородной кислоты (15 мл) смесь перемешивают в течение 1 часа на масляной бане при 50°C. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и после азеотропной дистилляции с этанолом (5 раз) остаток растворяют в дихлорметане (30 мл) и к этому раствору при комнатной температуре добавляют триэтиламин (3,72 мл, 26,69 ммоль), а затем ди-трет-бутилдикарбонат (2,33 г, 10,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 9:1 → 4:1) с получением 1,10 г (3,16 ммоль, 4 стадии, 59%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного смолистого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,94-0,98 (3H, м), 1,24-1,26 (3H, м), 1,42-1,44 (9H, м), 2,44-2,62 (1H, м), 2,99-3,05 (1H, м), 3,63-3,70 (3H, м), 4,54-4,56 (1H, м), 5,08-5,17 (2H, м), 7,28-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 371 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 4

(+)-(3R*,4S*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин и (-)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин

Рацемическое соединение (3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидина (1,10 г, 3,16 ммоль), полученное в ссылочном примере 3, оптически разделяют с использованием оптически активной колонки (CHIRALPAK AD, диаметр 20 мм × 250 мм; гексан:изопропиловый спирт 95:5; скорость потока 25 мл/мин; разделение 30 мг за проход) с получением (+)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидина (528 мг; 1,52 ммоль; время удерживания=12,8 минут, [α]_D ^25,1=+8,1° (c=0,161, хлороформ)) и (-)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидина (532 мг; 1,53 ммоль; время удерживания=15,8 минут; [α]_D ^25,1=-6,3° (c=0,175, хлороформ)).

Пример 1

7-[(3R*,4S*)-3-Амино-3,4-диметилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

К раствору (+)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидина (490 мг, 1,406 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (M; содержание воды примерно 50%; 147 мг), и суспензию перемешивают в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 2 часов. После удаления катализатора фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением неочищенного продукта (314 мг, количественный выход) (3R*,4S*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидина в виде бесцветного смолистого твердого продукта.

Полученный таким образом неочищенный продукт (3R*,4S*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин (314 мг), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (461 мг, 1,277 ммоль) и триэтиламин (0,534 мл, 3,83 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (4 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 18 часов. К этой реакционной смеси добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода=4:1) (20 мл) и триэтиламин (2 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 100°C в течение 2 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении остаток растворяют в этилацетате (150 мл) и промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (80 мл), водой (80 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (80 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (20 мл) на бане со льдом и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь промывают хлороформом (30 мл ×3). К водному слою добавляют 10 моль/л водного раствора гидроксида натрия на бане со льдом, доводя pH до 12,0, и затем раствор доводят до pH 7,4 хлористоводородной кислотой. Затем раствор экстрагируют смешанным раствором хлороформа и метанола (хлороформ:метанол=9:1) (150 мл ×2). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения, 328 мг (0,805 ммоль, 63%) в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 200-203°C.

[α]_D ^25,1=+213,7° (c=0,204, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,00 (3H, д, J=6,6Гц), 1,12 (3H, c), 1,55-1,70 (2H, м), 2,07 (1H, м), 3,39 (1H, д, J=10,0Гц), 3,48-3,69 (6H, м), 4,04 (1H, м), 4,93 (1H, дд, J=39,1, 1,5Гц), 7,64 (1H, д, J=14,6Гц), 8,47 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₀H₂₃F₂N₃O₄·1,5H₂O:

Вычислено: C, 55,29; H, 6,03; F, 8,75; N, 9,67.

Найдено: C, 55,55; H, 6,03; F, 8,45; N, 9,56.

МС (FAB) m/z: 408 (M+H)⁺.

ИК (ATR): 2974, 2935, 2879, 1722, 1614, 1572, 1537, 1502, 1456, 1390, 1356, 1323, 1271, 1207 см^-1.

Пример 2

Используя методику, аналогичную методике примера 1, (-)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин (480 мг, 1,378 ммоль) преобразуют в неочищенный продукт (3R*,4S*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин (311 мг, количественный выход) и продукт подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (452 мг, 1,252 ммоль), получая 348 мг (0,854 ммоль, 68%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 195-196°C.

[α]_D ^25,1=-118,3° (c=0,224, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,00 (3H, д, J=6,6Гц), 1,14 (3H, c), 1,31-1,44 (1H, м), 1,49-1,59 (1H, м), 2,09 (1H, м), 3,39-3,57 (6H, м), 3,71 (1H, м), 3,97-4,02 (1H, м), 5,00 (1H, дм, J=63,7Гц), 7,63 (1H, д, J=14,6Гц), 8,39 (1H, д, J=2,4Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₃F₂N₃O₄·0,75H₂O:

Вычислено: C, 57,07; H, 5,87; F, 9,03; N, 9,98.

Найдено: C, 57,30; H, 5,90; F, 9,13; N, 9,92.

МС (FAB) m/z: 408 (M+H)⁺.

ИК (ATR): 2962, 2873, 1724, 1616, 1510, 1435, 1362, 1321, 1271 см^-1.

Ссылочный пример 5

Метил (3R*,4S*)-1-бензил-3,4-диметилпирролидин-3-карбоксилат

Повторяют методику ссылочного примера 1 с использованием метилангелата (12,01 мл, 100,0 ммоль) и N-бензил-N-(н-бутоксиметил)-N-триметилсилилметиламина (36,0 г, 128,9 ммоль), получая 12,28 г неочищенного указанного в заголовке соединения в виде желтого масла. Полученный таким образом неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

МС (ESI) m/z: 248 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 6

Метил (3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3,4-диметилпирролидин-3-карбоксилат

Повторяют методику ссылочного примера 2 с использованием синтезированного таким образом неочищенного продукта метил (3R*,4S*)-1-бензил-3,4-диметилпирролидин-3-карбоксилата (12,28 г) и бензилхлорформиата (21,3 мл, 149,3 ммоль), получая 4,23 г (14,52 ммоль, 2 стадии, 15%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,94 (1,5H, д, J=6,8Гц), 0,96 (1,5H, д, J=6,7Гц), 1,30 (1,5H, c), 1,31 (1,5H, c), 2,14 (1H, м), 3,16-3,28 (2H, м), 3,64-3,71 (4H, м), 3,92 (1H, дд, J=14,6, 11,5Гц), 5,16 (2H, м), 7,26-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 292 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 7

(3R*,4R*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин

К раствору метил (3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3,4-диметилпирролидин-3-карбоксилата (4,23 г, 14,52 ммоль) в метаноле (88 мл) добавляют 1 н. водный раствор гидроксида натрия (44,0 мл, 44,0 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов, и на масляной бане при 50°C в течение следующих 19 часов. К смеси добавляют гидроксид натрия (1,742 г, 43,6 ммоль) и эту смесь также перемешивают на масляной бане при 50°C в течение 8 часов. После концентрирования растворителя при пониженном давлении к концентрату добавляют для подкисления концентрированную хлористоводородную кислоту на бане со льдом и раствор экстрагируют этилацетатом (300 мл). Полученный органический слой сушат безводным сульфатом натрия и обезвоживающий агент удаляют фильтрованием. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме карбоновой кислоты. Неочищенный продукт в форме карбоновой кислоты используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

К раствору полученного таким образом неочищенного продукта в форме карбоновой кислоты и триэтиламина (6,06 мл, 43,5 ммоль) в толуоле (70 мл) добавляют дифенилфосфорилазид (4,06 мл, 18,84 ммоль) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов, и на масляной бане при 90°C в течение следующего 1 часа. К нагреваемой и перемешиваемой реакционной смеси добавляют трет-бутиловый спирт (70 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 120°C в течение 93 часов, а затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры. После удаления растворителя путем дистилляции при пониженном давлении остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан-этилацетат, 90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25) с получением 1,205 г (3,46 ммоль, 2 стадии, 24%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного смолистого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,99 (1,5H, д, J=7,3Гц), 1,01 (1,5H, д, J=7,1Гц), 1,43-1,46 (12H, м), 2,06-2,22 (1H, м), 3,11-3,17 (1H, м), 3,24 (0,5H, д, J=11,5Гц), 3,30 (0,5H, д, J=11,2Гц), 3,60-3,67 (1H, м), 3,88 (0,5H, д, J=11,2Гц), 4,02 (0,5H, д, J=11,0Гц), 4,43 (1H, уш.c), 5,09-5,17 (2H, м), 7,26-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 293 (M-tBu)⁺.

Ссылочный пример 8

(+)-(3R*,4R*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин и (-)-(3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин

Рацемическое соединение (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидина (1,205 г, 3,46 ммоль), полученное в ссылочном примере 7, оптически разделяют на оптически активной колонке (CHIRALPAK AS, диаметр 20 мм × 250 мм; гексан:изопропиловый спирт 95:5; скорость потока 20 мл/мин; разделение 40 мг за проход) с получением (+)-(3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидина (468 мг, 1,34 ммоль, время удерживания=9,0 минут, [α]_D ^25,1=+10,3° (c=0,165, хлороформ)) и (-)-(3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидина (591 мг, 1,70 ммоль, время удерживания=11,4 минут, [α]_D ^25,1=-12,0° (c=0,150, хлороформ)).

Пример 3

7-[(3R*,4R*)-3-Амино-3,4-диметилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Используя методику, аналогичную методике примера 1, (+)-(3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин (468 мг, 1,343 ммоль) преобразуют в неочищенный продукт (3R*,4R*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин (280 мг, 1,307 ммоль, 97%) и продукт подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (429 мг, 1,188 ммоль), получая 370 мг (0,834 ммоль, 68%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 175-179°C.

[α]_D ^23,8=-107,1° (c=0,240, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,00 (3H, д, J=6,8Гц), 1,25 (3H, c), 1,31-1,43 (1H, м), 1,48-1,59 (1H, м), 2,03-2,13 (1H, м), 3,41 (1H, дд, J=10,5, 1,7Гц), 3,46-3,52 (4H, м), 3,62-3,70 (2H, м), 3,99 (1H, дт, J=10,2, 4,5Гц), 5,01 (1H, ддд, J=63,8, 8,7, 5,5Гц), 7,63 (1H, д, J=14,6Гц), 8,39 (1H, д, J=2,9Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₃F₂N₃O₄·2H₂O:

Вычислено: C, 54,17; H, 6,14; F, 8,57; N, 9,48.

Найдено: C, 54,41; H, 5,81; F, 8,63; N, 9,37.

МС (EI) m/z: 407 (M⁺).

ИК (ATR): 2962, 2881, 2833, 1726, 1614, 1577, 1510, 1435, 1387, 1354, 1306, 1267 см^-1.

Пример 4

Используя методику, аналогичную методике примера 1, (-)-(3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин (169 мг, 0,485 ммоль) преобразуют в неочищенный продукт (3R*,4R*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3,4-диметилпирролидин (95 мг, 0,443 ммоль, 91%) и продукт подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (145 мг, 0,402 ммоль), получая 65 мг (0,146 ммоль, 36%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 209-211°C.

[α]_D ^23,7=+186,0° (c=0,162, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,01 (3H, д, J=6,8Гц), 1,26 (3H, c), 1,53-1,71 (2H, м), 2,10 (1H, м), 3,34 (1H, д, J=7,5Гц), 3,54-3,62 (5H, м), 3,76 (1H, дд, J=10,5, 2,9Гц), 4,05 (1H, м), 4,80-5,02 (1H, м), 7,64 (1H, д, J=14,6Гц), 8,48 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₀H₂₃F₂N₃O₄·0,5EtOH·0,75H₂O:

Вычислено: C, 56,81; H, 6,24; F, 8,56; N, 9,46.

Найдено: C, 56,72; H, 6,26; F, 8,44; N, 9,30.

МС (EI) m/z: 407 (M⁺).

ИК (ATR): 2964, 2870, 2833, 1726, 1616, 1577, 1537, 1495, 1456, 1392, 1358, 1298, 1265, 1203 см^-1.

Ссылочный пример 9

Метил (3R*,4R*)-1-бензил-4-этил-3-метилпирролидин-3-карбоксилат

Повторяют методику ссылочного примера 1 с использованием метил транс-2-метил-2-пентената (2,70 г, 21,1 ммоль) и N-бензил-N-(метоксиметил)-N-триметилсилилметиламина (5,00 г, 21,1 ммоль), получая 3,70 г (14,06 ммоль, 67%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,81 (3H, т, J=7,4Гц), 1,14 (3H, c), 1,15-1,24 (1H, м), 1,44-1,54 (1H, м), 2,16 (1H, т, J=9,1Гц), 2,22 (1H, д, J=9,6Гц), 2,38-2,46 (1H, м), 2,92 (1H, дд, J=8,8, 7,8Гц), 3,21 (1H, д, J=9,3Гц), 3,51 (1H, д, J=13,2Гц), 3,62 (3H, c), 3,62 (1H, д, J=13,2Гц), 7,15-7,27 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 262 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 10

Метил (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-4-этил-3-метилпирролидин-3-карбоксилат

Повторяют методику ссылочного примера 2 с использованием метил (3R*,4R*)-1-бензил-4-этил-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (3,68 г, 14,08 ммоль), получая 3,68 г (12,05 ммоль, 86%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,86-0,92 (3H, м), 1,18 (3H, c), 1,23-1,34 (1H, м), 1,51-1,59 (1H, м), 2,42-2,54 (1H, м), 3,06 (1H, м), 3,40 (0,5H, д, J=10,7Гц), 3,47 (0,5H, д, J=11,0Гц), 3,68-3,79 (5H, м), 5,09-5,19 (2H, м), 7,28-7,38 (5H, м).

MS (ESI) m/z: 306 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 11

(3R*,4S*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин

Повторяют методику ссылочного примера 3 с использованием метил (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-4-этил-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (3,68 г, 12,05 ммоль), получая 3,25 г (8,97 ммоль, 4 стадии, 74%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного смолистого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,91-0,98 (3H, м), 1,23-1,31 (4H, м), 1,41-1,54 (10H, м), 2,25-2,42 (1H, м), 2,99-3,06 (1H, м), 3,57-3,75 (3H, м), 4,55-4,59 (1H, м), 5,08-5,17 (2H, м), 7,27-7,38 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 307 (M-tBu)⁺.

Ссылочный пример 12

(+)-(3R*,4S*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин и (-)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин

Рацемическую массу (3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидина (800 мг, 2,21 ммоль), полученную в ссылочном примере 11, оптически разделяют на оптически активной колонке (CHIRALPAK IA, диаметр 20 мм × 250 мм; гексан:дихлорметан 75:25; скорость потока 20 мл/мин; разделение 10 мг за проход) с получением (+)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидина (393 мг, 1,084 ммоль, время удерживания=11,3 минут, [α]_D ^25,1=+15,2° (c=0,230, хлороформ)) и (-)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидина (396 мг, 1,093 ммоль, время удерживания=13,1 минут, [α]_D ^25,1=10,4° (c=0,125, хлороформ)).

Пример 5

7-[(3R*,4S*)-3-Амино-4-этил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Используя методику, аналогичную методике примера 1, (+)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин (383 мг, 1,057 ммоль) преобразуют в неочищенный (3R*,4S*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин и продукт подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (361 мг, 1,000 ммоль), получая 260 мг (0,618 ммоль, 62%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 209-211°C.

[α]_D ^25,1=-154,2° (c=0,144, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,94 (3H, т, J=7,3Гц), 1,14 (3H, c), 1,19-1,41 (2H, м), 1,53 (1H, м), 1,61-1,67 (1H, м), 1,88-1,95 (1H, м), 3,40-3,42 (1H, м), 3,47-3,53 (1H, м), 3,54 (3H, c), 3,60 (1H, дд, J=10,0, 3,4Гц), 3,73 (1H, т, J=9,2Гц), 3,96-4,01 (1H, м), 5,02 (1H, ддд, J=63,8, 8,5, 5,4Гц), 7,64 (1H, д, J=14,4Гц), 8,38 (1H, д, J=3,2Гц).

Элементный анализ для C₂₁H₂₅F₂N₃O₄·0,5H₂O:

Вычислено: C, 58,60; H, 6,09; F, 8,83; N, 9,76.

Найдено: C, 58,68; H, 5,94; F, 9,03; N, 9,69.

МС (FAB) m/z: 422 (M+H)⁺.

ИК (ATR): 2964, 2931, 2875, 1716, 1618, 1514, 1448, 1439, 1371, 1325, 1279, 1234 см^-1.

Пример 6

Используя методику, аналогичную методике примера 1, (-)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин (386 мг, 1,065 ммоль) преобразуют в неочищенный (3R*,4S*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин и продукт подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (361 мг, 1,000 ммоль), получая 263 мг (0,625 ммоль, 63%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 113-115°C.

[α]_D ^25,1=+234,5° (c=0,310, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,91 (3H, т, J=7,3Гц), 1,09 (3H, c), 1,17-1,28 (1H, м), 1,52-1,70 (3H, м), 1,80-1,88 (1H, м), 3,31 (1H, д, J=9,8Гц), 3,49-3,53 (5H, м), 3,63-3,69 (1H, м), 4,02 (1H, м), 4,80-4,98 (1H, м), 7,64 (1H, д, J=14,6Гц), 8,48 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₁H₂₅F₂N₃O₄·0,25EtOH·0,5H₂O:

Вычислено: C, 58,43; H, 6,27; F, 8,60; N, 9,51.

Найдено: C, 58,36; H, 6,26; F, 8,68; N, 9,49.

МС (FAB) m/z: 422 (M+H)⁺.

ИК (ATR): 2960, 2929, 2873, 1728, 1614, 1579, 1541, 1510, 1433, 1392, 1352, 1296, 1275 см^-1.

Ссылочный пример 13

Этил транс-4-фтор-2-метил-2-бутенат

К раствору этил транс-4-гидрокси-2-метил-2-бутената, синтезированного способом согласно Wolff, M. (Tetrahedron Letters, vol. 43, pages 2555-2559, 2002), (2,73 г, 18,94 ммоль) в дихлорметане (100 мл), добавляют по каплям трифторид диэтиламиносеры (7,45 мл, 56,9 ммоль) на бане со льдом в течение 10 минут и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (80 мл) и раствор экстрагируют дихлорметаном (200 мл + 2 × 100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и обезвоживающий агент удаляют с использованием короткой колонки с силикагелем. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 2,43 г (16,63 ммоль, 88%) целевого соединения в виде бледно-желтого масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,31 (3H, т, J=7,2Гц), 1,86-1,87 (3H, м), 4,22 (2H, кв, J=7,2Гц), 5,09 (2H, ддд, J=46,5, 5,9, 1,1Гц), 6,82-6,89 (1H, м).

Ссылочный пример 14

Этил (3R*,4R*)-1-бензил-4-фторметил-3-метилпирролидин-3-карбоксилат

Повторяют методику ссылочного примера 1 с использованием этил транс-4-фтор-2-метил-2-бутената (2,43 г, 16,63 ммоль) и N-бензил-N-(метоксиметил)-N-триметилсилилметиламина (5,11 мл, 19,97 ммоль), получая 2,57 г (9,20 ммоль, 55%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,25 (3H, т, J=7,2Гц), 1,30 (3H, c), 2,33 (1H, д, J=9,3Гц), 2,46 (1H, дд, J=9,0, 7,1Гц), 2,89-3,06 (2H, м), 3,16 (1H, д, J=9,3Гц), 3,57 (1H, д, J=13,2Гц), 3,64 (1H, д, J=13,2Гц), 4,16 (2H, ддд, J=14,3, 7,1, 2,6Гц), 4,44 (1H, ддд, J=34,9, 9,3, 6,0Гц), 4,56 (1H, ддд, J=34,7, 9,3, 6,1Гц), 7,21-7,35 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 280 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 15

Этил (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-4-фторметил-3-метилпирролидин-3-карбоксилат

Повторяют методику ссылочного примера 2 с использованием этил (3R*,4R*)-1-бензил-4-фторметил-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (2,56 г, 9,16 ммоль), получая 2,56 г (7,92 ммоль, 86%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,26 (3H, т, J=7,2Гц), 1,29 (3H, c), 2,91-3,00 (1H, м), 3,35-3,48 (2H, м), 3,71-3,77 (1H, м), 3,81 (1H, д, J=11,0Гц), 4,11-4,21 (2H, м), 4,41-4,68 (2H, м), 5,10-5,18 (2H, м), 7,29-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 324 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 16

(3R*,4S*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин

Повторяют методику ссылочного примера 3 с использованием этил (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-4-фторметил-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (2,55 г, 7,89 ммоль), получая 2,14 г (5,84 ммоль, 4 стадии, 74%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного смолистого твердого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,37 (1,8H, c), 1,39 (1,2H, c), 1,42 (9H, м), 2,79-3,13 (1H, м), 3,19-3,31 (1H, м), 3,60-3,72 (3H, м), 4,41-4,62 (2H, м), 4,77 (0,4H, уш.c), 4,85 (0,6H, уш.c), 5,09-5,17 (2H, м), 7,28-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 311 (M-tBu)⁺.

Ссылочный пример 17

(-)-(3R*,4S*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин и (+)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин

Рацемическую массу (3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидина (1,454 г, 3,97 ммоль), полученную в ссылочном примере 16, оптически разделяют на активной колонке (CHIRALPAK AS, диаметр 20 мм × 250 мм; гексан:изопропиловый спирт, 93:7; скорость потока, 25 мл/мин; разделение, 60 мг за проход) с получением (-)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидина (624 мг, 1,703 ммоль, время удерживания=11,8 минут, [α]_D ^25,1=-15,0° (c=0,645, хлороформ)) и (+)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидина (623 мг, 1,700 ммоль, время удерживания=15,5 минут, [α]_D ^25,1=+13,8° (c=1,230, хлороформ)).

Пример 7

7-[(3R*,4S*)-3-Амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Используя методику, аналогичную методике примера 1, (-)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин (303 мг, 0,827 ммоль) преобразуют в неочищенный (3R*,4S*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин и продукт подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (299 мг, 0,827 ммоль), получая 231 мг (0,521 ммоль, 63%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 195-198°C.

[α]_D ^25,1=-36,8° (c=0,125, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,29 (3H, c), 1,45 (1H, д, J=27,2Гц), 1,52-1,64 (1H, м), 2,50 (1H, тд, J=13,5, 6,9Гц), 3,54-3,57 (2H, м), 3,58 (3H, c), 3,63 (1H, т, J=9,2Гц), 3,94 (1H, т, J=9,2Гц), 3,99-4,05 (1H, м), 4,63 (1H, ддд, J=37,6, 9,2, 6,5Гц), 4,98 (2H, д, J=64,2Гц), 7,66 (1H, д, J=14,5Гц), 8,42 (1H, д, J=2,0Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₂F₃N₃O₄·1H₂O:

Вычислено: C, 54,17; H, 5,46; F, 12,85; N, 9,48.

Найдено: C, 54,34; H, 5,41; F, 13,13; N, 9,21.

МС (EI) m/z: 426 (M+H)⁺.

ИК (ATR): 3541, 3089, 2972, 2881, 1716, 1622, 1514, 1456, 1365, 1327, 1279, 1238 см^-1.

Пример 8

Используя методику, аналогичную методике примера 1, (+)-(3R*,4S*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин (310 мг, 0,846 ммоль) преобразуют в неочищенный (3R*,4S*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин и продукт подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (305 мг, 0,846 ммоль), получая 257 мг (0,516 ммоль, 61%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 186-189°C.

[α]_D ^25,1=+132,0° (c=0,103, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,28 (3H, c), 1,51-1,70 (2H, м), 2,45-2,59 (1H, м), 3,46 (1H, д, J=9,8Гц), 3,60 (3H, c), 3,66 (2H, кв, J=7,1Гц), 3,69 (1H, дд, J=10,0, 3,2Гц), 3,74-3,79 (2H, м), 4,03-4,09 (1H, м), 4,66 (1H, ддд, J=37,3, 9,6, 6,4Гц), 4,93 (2H, д, J=71,6Гц), 7,67 (1H, д, J=14,5Гц), 8,47 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₀H₂₂F₃N₃O₄·1EtOH·1,5H₂O:

Вычислено: C, 53,01; H, 6,27; F, 11,43; N, 8,43.

Найдено: C, 53,03; H, 6,02; F, 11,86; N, 8,08.

МС (EI) m/z: 426 (M+H)⁺.

ИК (ATR): 2970, 2883, 1728, 1616, 1560, 1456, 1390, 1350, 1336, 1315, 1298, 1267,

1203 см^-1.

Ссылочный пример 18

трет-Бутил 1-ацетил-1-циклопропанкарбоксилат

Смесь трет-бутилацетоацетата (497 мл, 3,00 моль), 1,2-дибромэтана (310 мл, 3,60 ммоль), карбоната калия (1,106 кг, 8,00 ммоль) и диметилформамида (2,0 л) перемешивают на водяной бане при 30°C в течение 1,5 часов, на водяной бане при 60°C в течение 3,5 часов и на водяной бане при 30°C в течение 4 дней. Реакционную смесь разделяют фильтрованием через целит и остаток на целите промывают простым диэтиловым эфиром (3,5 л). Фильтрат и простой диэтиловый эфир, используемый для промывки, объединяют и добавляют к воде (2 л) и органический слой отделяют. Водный слой экстрагируют простым диэтиловым эфиром (2 л), к полученному водному слою добавляют воду (1 л) и осуществляют дополнительную экстракцию путем добавления простого диэтилового эфира (2 л). Все органические слои объединяют, промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (2 л), водой (2л ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (2л ×3) и сушат путем добавления безводного сульфата натрия. После удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток подвергают дистилляции при пониженном давлении с получением 371,8 г целевого соединения (10 мм рт.ст., дистилляционная фракция от 72 до 78°C, 2,02 моль, 67%) в виде бесцветного прозрачного масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,37-1,40 (4H, м), 1,49 (9H, c), 2,44 (3H, c).

Ссылочный пример 19

трет-Бутил 1-(1-амино-1-цианоэтил)-1-циклопропанкарбоксилат

трет-Бутил 1-ацетил-1-циклопропанкарбоксилат (9,21 г, 50,0 ммоль) растворяют в 7 н. растворе аммиака в метаноле (300 мл) и к этому раствору на бане со льдом добавляют концентрированный раствор аммиака (90 мл), хлорид аммония (53,5 г, 1,00 моль) и цианид натрия (4,90 г, 100,0 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов и растворитель концентрируют при пониженном давлении. К концентрату добавляют воду (100 мл), и раствор экстрагируют дихлорметаном (300 мл + 2 × 100 мл). Органические слои объединяют и сушат путем добавления безводного сульфата натрия. После удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 10,15 г (48,3 ммоль, 97%) неочищенного целевого соединения в виде бледно-коричневого масла. Полученный таким образом неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,02-1,12 (2H, м), 1,19-1,17 (2H, м), 1,48 (9H, c), 1,50 (3H, c), 2,13 (2H, уш.c).

МС (ESI) m/z: 155 (M-tBu)⁺.

Ссылочный пример 20

трет-Бутил 1-(1,2-диамино-1-метилэтил)-1-циклопропанкарбоксилат

К раствору (50 мл) трет-бутил 1-(1-амино-1-цианоэтил)-1-циклопропанкарбоксилата (1,12 г, 5,30 ммоль) в этаноле добавляют суспензию (30 мл) катализатора никеля Ренея (R-100, производство Nikko Rica Corporation, 10 мл) в этаноле и суспензию энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов в атмосфере газообразного водорода. Катализатор удаляют фильтрованием через целит и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 0,84 г (3,92 ммоль, 74%) неочищенного целевого соединения в виде бесцветного прозрачного масла. Полученный таким образом неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

МС (ESI) m/z: 215 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 21

Дигидрохлорид 1-(1,2-диамино-1-метилэтил)-1-циклопропанкарбоновой кислоты

0,82 г (3,83 ммоль) неочищенного трет-бутил 1-(1,2-диамино-1-метилэтил)-1-циклопропанкарбоксилата растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (5 мл) при комнатной температуре и раствор перемешивают при такой же температуре в течение 30 минут. После добавления воды к реакционному раствору растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток подвергают азеотропной дистилляции с этанолом (дважды), получая 0,82 г (3,55 ммоль, 93%) неочищенного целевого соединения в виде бледно-желтого пенообразного твердого продукта. Полученный таким образом неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ м.д.: 1,20-1,26 (1H, м), 1,28 (3H, c), 1,32-1,43 (2H, м), 1,58-1,62 (1H, м), 3,46 (1H, д, J=13,4Гц), 3,80 (1H, д, J=13,4Гц).

МС (ESI) m/z: 159 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 22

7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-он

К раствору (70 мл) неочищенного дигидрохлорида 1-(1,2-диамино-1-метилэтил)-1-циклопропанкарбоновой кислоты (800 мг, 3,46 ммоль) в ацетонитриле добавляют 1,1,1,3,3,3-гексаметилдисилазан (7,38 мл, 34,6 ммоль) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 100°C в течение 4 часов в атмосфере азота. Смесь охлаждают до комнатной температуры и, после добавления метанола (70 мл), растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением неочищенного 7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-она в виде бледно-коричневого смолистого твердого продукта.

МС (ESI) m/z: 141 (M+H)⁺.

К полученному таким образом неочищенному 7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-ону добавляют 1,4-диоксан (20 мл) и ди-трет-бутилдикарбонат (1,528 г, 7,00 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают при этой температуре в течение 5 часов. К этой реакционной смеси добавляют воду (50 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (100 мл + 50 мл). Органические слои объединяют и сушат безводным сульфатом натрия. Обезвоживающий агент удаляют фильтрованием через короткую колонку с силикагелем и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. К остатку добавляют простой диэтиловый эфир и полученную суспензию фильтруют с получением 502 мг (2,09 ммоль, 2 стадии, 60%) целевого соединения в виде белого порошка.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,77-0,82 (1H, м), 0,94-1,04 (2H, м), 1,16-1,23 (1H, м), 1,28 (3H, c), 1,43 (9H, c), 3,29 (1H, д, J=10,3Гц), 4,12 (1H, м), 4,60 (1H, уш.c), 5,82 (1H, уш.c).

МС (ESI) m/z: 185 (M-tBu)⁺.

Ссылочный пример 23

5-Бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-он

К раствору (65 мл) 7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-она (3,12 г, 12,97 ммоль) в диметилформамиде на бане со льдом постепенно добавляют гидрид натрия (55%, дисперсия в минеральном масле, 538 мг, 12,33 ммоль) в течение 5 минут и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 40 минут. Добавляют бензилбромид (1,851 мл, 15,56 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Реакционную смесь разбавляют путем добавления этилацетата (300 мл) и раствор промывают водой (100 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). После сушки раствора безводным сульфатом натрия и удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 9:1 → 4:1 → 2:1) с получением 4,20 г (12,71 ммоль, 98%) целевого соединения в виде бесцветного прозрачного смолистого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,76-0,81 (1H, м), 0,93-1,06 (2H, м), 1,21-1,29 (4H, м), 1,37 (9H, м), 3,14 (1H, д, J=10,3Гц), 3,92-3,98 (1H, м), 4,44 (1H, д, J=15,1Гц), 4,56 (1H, д, J=14,6Гц), 4,56 (1H, уш.c), 7,22-7,33 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 331 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 24

(-)-5-Бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-он и (+)-5-бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-он

Рацемическую массу 5-бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-она, полученную в ссылочном примере 23 (2,254 г, 6,82 ммоль), оптически разделяют на оптически активной колонке (CHIRALPAK AD, диаметр 20 мм × 250 мм; гексан:изопропиловый спирт, 90:10; скорость потока, 20 мл/мин; разделение, 50 мг за проход) с получением (-)-5-бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-она (997 мг, 3,02 ммоль, время удерживания=7,0 минут, [α]_D ^25,1=-113,9° (c=0,180, хлороформ)) и (+)-5-бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-она (957 мг, 2,90 ммоль, время удерживания=11,3 минут, [α]_D=+108,8° (c=0,249, хлороформ)).

Ссылочный пример 25

(-)-5-Бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан

К раствору (15 мл) (-)-5-бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-она (950 мг, 2,88 ммоль) в дихлорметане при комнатной температуре добавляют трифторуксусную кислоту (7,5 мл) и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 40 минут. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. После азеотропной дистилляции раствора с толуолом (дважды) добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл) и раствор экстрагируют хлороформом (100 мл + 2 × 50 мл). Органические слои объединяют и сушат безводным сульфатом натрия. После удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток растворяют в тетрагидрофуране (30 мл), при перемешивания раствора на бане со льдом к раствору добавляют литийалюминийгидрид (218 мг, 5,74 ммоль) и раствор перемешивают при такой же температуре в течение 1 часа. После добавления еще одной порции литийалюминийгидрида (109 мг, 2,87 ммоль) и перемешивания раствора при комнатной температуре в течение 2,5 часов раствор охлаждают на льду и осторожно добавляют воду (0,31 мл), 15% водный раствор гидроксида натрия (0,31 мл) и воду (0,93 мл) в таком порядке. Полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, сушат с сульфатом магния и подвергают фильтрованию через целит. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного 7-амино-5-бензил-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептана в виде бесцветного прозрачного масла. Полученный таким образом неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,37-0,45 (2H, м), 0,56-0,66 (2H, м), 0,96 (3H, c), 2,48 (1H, д, J=9,0Гц), 2,55 (1H, д, J=8,8Гц), 2,74 (2H, д, J=9,0Гц), 3,59 (2H, c), 7,21-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 217 (M+H)⁺.

Неочищенный 7-амино-5-бензил-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан растворяют в дихлорметане (15 мл) и, после добавления ди-трет-бутилдикарбоната (1,255 г, 5,75 ммоль), смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 22 часов. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ:метанол:триэтиламин, 98:2:1 → 95:5:1) с получением 586 мг (1,852 ммоль, 3 стадии, 64%) целевого соединения в виде бесцветного прозрачного смолистого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,40-0,45 (1H, м), 0,50-0,55 (1H, м), 0,63-0,69 (1H, м), 0,80-0,85 (1H, м), 1,20 (3H, c), 1,43 (9H, c), 2,44 (1H, д, J=8,8Гц), 2,59 (1H, д, J=9,5Гц), 2,83 (1H, д, J=8,8Гц), 3,33 (1H, м), 3,57 (1H, д, J=13,2Гц), 3,68 (1H, д, J=13,2Гц), 4,75 (1H, уш.c), 7,20-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 317 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=-63,6° (c=0,129, хлороформ)

Ссылочный пример 26

(+)-5-Бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан

Повторяют методику ссылочного примера 25 с использованием (+)-5-бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-4-она (950 мг, 2,88 ммоль), получая неочищенный 7-амино-5-бензил-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан в виде бесцветного прозрачного масла.

МС (ESI) m/z: 217 (M+H)⁺.

Используя неочищенный 7-амино-5-бензил-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан, повторяют методику ссылочного примера 28 с получением 629 мг (1,985 ммоль, 3 стадии, 69%) целевого соединения в виде бесцветного прозрачного смолистого твердого продукта.

МС (ESI) m/z: 317 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+76,2° (c=0,290, хлороформ)

Ссылочный пример 27

(-)-7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан

К раствору (-)-5-бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептана (581 мг, 1,836 ммоль) в метаноле (40 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (M; содержание воды, примерно 50%; 349 мг), и суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 2,5 часов в атмосфере водорода. После удаления катализатора фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 434 мг (количественный выход) неочищенного целевого соединения в виде бесцветного прозрачного смолистого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,38-0,43 (1H, м), 0,55-0,60 (2H, м), 0,74-0,80 (1H, м), 1,08 (3H, c), 1,44 (9H, c), 2,75 (1H, д, J=12,0Гц), 2,77 (1H, д, J=11,5Гц), 3,13 (1H, д, J=11,5Гц), 3,75 (1H, уш.д, J=12,0Гц), 4,44 (1H, уш.c).

МС (ESI) m/z: 227 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=-63,5° (c=0,277, хлороформ)

Ссылочный пример 28

(+)-7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан

К раствору (+)-5-бензил-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептана (627 мг, 1,981 ммоль) в метаноле (40 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (M; содержание воды, примерно 50%; 376 мг), и суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов в атмосфере водорода. После удаления катализатора растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 452 мг (количественный выход) неочищенного целевого соединения в виде бесцветного прозрачного смолистого твердого продукта.

МС (ESI) m/z: 227 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+59,5° (c=0,185, хлороформ)

Ссылочный пример 29

7-[7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Неочищенный (-)-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан, полученный в ссылочном примере 27 (434 мг, 1,836 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (663 мг, 1,836 ммоль) и триэтиламин (0,768 мл, 5,510 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (5 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 40°C в течение 14 часов. К реакционной смеси добавляют смешанный раствор (50 мл) этанола и воды (этанол:вода, 4:1) и триэтиламин (5 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 100°C в течение 2 часов. Затем реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, остаток растворяют в этилацетате (200 мл) и промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (50 мл), водой (50 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 870 мг (1,676 ммоль, 91%) неочищенного целевого соединения в виде желтого пенообразного твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,55-0,60 (1H, м), 0,68-0,73 (1H, м), 0,74-0,80 (1H, м), 0,92-0,97 (1H, м), 1,22 (3H, c), 1,40 (9H, c), 1,43-1,59 (2H, м), 3,13 (1H, д, J=9,8Гц), 3,60 (3H, c), 3,75 (1H, дд, J=11,0, 3,7Гц), 3,85 (1H, дт, J=10,2, 4,5Гц), 4,18 (1H, д, J=10,0Гц), 4,47 (1H, м), 4,62 (1H, c), 4,79-4,99 (1H, дм), 7,83 (1H, д, J=13,7Гц), 8,68 (1H, д, J=2,7Гц), 14,88 (0,7H, уш.c).

МС (ESI) m/z: 520 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=-128,5° (c=1,240, хлороформ)

Ссылочный пример 30

Повторяют методику ссылочного примера 29 с использованием неочищенного (+)-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептана, полученного в ссылочном примере 28 (452 мг, 1,981 ммоль), и комплекса 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (715 мг, 1,981 ммоль), получая 1,00 г (1,925 ммоль, 97%) неочищенного целевого соединения в виде желтого пенообразного твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,55-0,60 (1H, м), 0,68-0,80 (2H, м), 0,91-0,97 (1H, м), 1,21 (3H, c), 1,40 (9H, c), 1,53-1,68 (2H, м), 3,04 (1H, д, J=10,0Гц), 3,61 (3H, c), 3,81 (1H, дд, J=10,7, 4,4Гц), 3,87-3,93 (1H, м), 4,24 (1H, д, J=9,8Гц), 4,46 (1H, м), 4,65-4,85 (2H, м), 7,83 (1H, д, J=13,4Гц), 8,76 (1H, c).

МС (ESI) m/z: 520 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+133,2° (c=2,230, хлороформ)

Пример 9

7-(7-Амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил)-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

7-[7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновую кислоту, полученную в ссылочном примере 29 (870 мг, 1,676 ммоль), растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (10 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут и промывают хлороформом (20 мл ×5). Насыщенный водный раствор гидроксида натрия добавляют к водному слою на бане со льдом, доводя pH до 12,0, и pH затем доводят до 7,4 добавлением хлористоводородной кислоты. Раствор экстрагируют смешанным раствором (хлороформ:метанол, 10:1) (200 мл ×2), а затем нижним слоем смешанного раствора (200 мл) (хлороформ:метанол:вода, 7:3:1). Органические слои объединяют, сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции. Остаток очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 644 мг (1,535 ммоль, 92%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-розового порошка.

Т.пл.: 195-200°C.

[α]_D ^25,1=+40,8° (c=0,147, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,49-0,56 (2H, м), 0,67-0,76 (2H, м), 1,12 (3H, c), 1,43-1,64 (2H, м), 3,56 (3H, c), 3,59-3,71 (4H, м), 3,99-4,04 (1H, м), 4,80-5,03 (1H, м), 7,65 (1H, д, J=13,9Гц), 8,45 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₁H₂₃F₂N₃O₄·0,75EtOH·0,5H₂O:

Вычислено: C, 58,37; H, 6,20; F, 8,21; N, 9,08.

Найдено: C, 58,23; H, 5,99; F, 8,09; N, 9,02.

МС (EI) m/z: 419 (M⁺).

ИК (ATR): 2964, 2843, 1726, 1612, 1572, 1537, 1452, 1439, 1387, 1360, 1346, 1311, 1294, 1265, 1207 см^-1.

Пример 10

Повторяют методику примера 9 с использованием 7-[7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, полученной в ссылочном примере 30 (1000 мг, 1,925 ммоль), получая 649 мг (1,546 ммоль, 80%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-розового порошка.

Т.пл.: 211-214°C.

[α]_D ^25,1=+128,8° (c=0,163, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,52 (2H, м), 0,73 (2H, м), 1,07 (3H, c), 1,42-1,64 (2H, м), 3,45 (1H, д, J=10,3Гц), 3,52-3,56 (1H, м), 3,55 (3H, c), 3,73 (1H, дд, J=10,0, 2,2Гц), 3,85 (1H, д, J=9,0Гц), 3,99-4,04 (1H, м), 4,82-5,02 (1H, м), 7,64 (1H, д, J=14,4Гц), 8,45 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₁H₂₃F₂N₃O₄·1,0EtOH·0,5H₂O:

Вычислено: C, 58,22; H, 6,37; F, 8,01; N, 8,86.

Найдено: C, 58,02; H, 6,13; F, 8,05; N, 9,02.

МС (EI) m/z: 419 (M⁺).

ИК (ATR): 2970, 2848, 1726, 1614, 1577, 1537, 1452, 1439, 1389, 1360, 1354, 1317, 1296, 1265, 1215, 1203 см^-1.

Пример 11

Гидрохлорид 7-(7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил)-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты

7-[7-Амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновую кислоту, в которой конфигурация аминогруппы в заместителе в положении 7 является такой же, как конфигурация, полученная в примере 9 (18,07 г, 39,4 ммоль), суспендируют в метаноле (54 мл) и добавляют 1 н. хлористоводородную кислоту (43,4 мл, 43,4 ммоль) к суспензии при комнатной температуре. Затем добавляют изопропиловый спирт (180 мл) и смесь перемешивают на водяной бане при 50°C в течение некоторого времени до тех пор, пока осажденное смолистое вещество не превратится в кристалл. После того как дадут отстояться при комнатной температуре в течение 1 часа, кристаллы собирают фильтрованием и промывают малым количеством изопропилового спирта (дважды). Затем кристаллы сушат при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения, 12,91 г (27,2 ммоль, 69%) в виде желтого порошка.

Т.пл.: 226-228°C.

[α]_D ^25,1=+41,1° (c=0,347, 0,1 н. NaOH).

Элементный анализ для C₂₁H₂₃F₂N₃O₄·1HCl·1H₂O:

Вычислено: C, 53,22; H, 5,53; F, 8,02; N, 8,87; Cl, 7,48.

Найдено: C, 53,01; H, 5,52; F, 7,90; N, 8,71; Cl, 7,53.

Пример 12

7-[7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновую кислоту, в которой конфигурация трет-бутоксикарбониламиногруппы в заместителе в положении 7 является такой же, как конфигурация, полученная в примере 9 (267,2 г), суспендируют в изопропиловом спирте (1,6 л) и к суспензии добавляют 6 н. хлористоводородную кислоту (405 мл, 2,43 моль), при этом суспензию перемешивают на масляной бане при 55°C. Смесь перемешивают при такой же температуре в течение 3,5 часов и после того как дадут охладиться до комнатной температуры, добавляют изопропиловый спирт (2,4 л). Реакционную емкость охлаждают на водяной бане при 5°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 13 часов. Осажденные кристаллы собирают фильтрованием и, после сушки на воздухе в течение нескольких часов, кристаллы сушат при пониженном давлении при 40°C с получением 223,3 г (471 ммоль, 92%) целевого соединения в виде желтого порошка.

Ссылочный пример 31

Метил 3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилат

К раствору метил (3R)-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилата (49,5 г, 200 ммоль) и метилйодида (37,4 мл, 600 ммоль) в диметилформамиде (1 л) постепенно добавляют гидрид натрия (в масле; содержание, 55%; 11,35 г; 260 ммоль) в течение 5 минут при комнатной температуре. После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов дополнительно добавляют метилйодид (24,9 мл, 400 ммоль) и гидрид натрия (в масле; содержание, 55%; 6,11 г; 140 ммоль) и смесь перемешивают в течение следующих 4 часов. Реакционную смесь добавляют к 0,5 н. хлористоводородной кислоте (1 л) на бане со льдом и экстрагируют этилацетатом (2 л + 1 л). Органические слои объединяют, промывают водой (1 л ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (1 л) и сушат безводным сульфатом натрия. После удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Полученный таким образом неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 80:20 → 67:33 → 50:50 → 33:67) с получением стереоизомеров в положении 3 указанного в заголовке соединения (стереоизомер A: 19,86 г (76,0 ммоль, 38%) в виде бледно-желтого масла, стереоизомер B: 20,22 г (77,4 ммоль, 39%) в виде бледно-желтого твердого продукта, и смесь стереоизомеров A и B: 9,69 г (37,1 ммоль, 19%) в виде бледно-желтого масла.

Стереоизомер A:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,21 (3H, c), 1,52 (3H, д, J=7,1Гц), 2,31 (1H, д, J=16,8Гц), 2,73 (1H, д, J=10,0Гц), 2,95 (1H, д, J=16,9Гц), 3,69 (1H, д, J=10,0Гц), 3,72 (3H, c), 5,51 (1H, кв, J=7,2Гц), 7,26-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 262 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+90,1° (c=0,350, хлороформ)

Стереоизомер B:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,39 (3H, c), 1,52 (3H, д, J=7,1Гц), 2,33 (1H, д, J=16,9Гц), 2,93 (1H, д, J=16,8Гц), 3,09 (1H, д, J=10,0Гц), 3,30 (1H, д, J=10,3Гц), 3,61 (3H, c), 5,51 (1H, кв, J=6,8Гц), 7,25-7,36 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 262 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+120,8° (c=0,190, хлороформ)

Ссылочный пример 32

Метил 4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилат

К раствору метил 3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилата (стереоизомер A), полученного в ссылочном примере 31 (19,86 г, 76,0 ммоль), и триамида гексаметилфосфорной кислоты (30 мл) в тетрагидрофуране (300 мл) постепенно добавляют раствор диизопропиламида лития в гептане, тетрагидрофуран и этилбензол (1,8M, 63,3 мл, 113,9 ммоль) в течение 15 минут при -78°C. После перемешивания смеси при -78°C в течение 30 минут добавляют по каплям этилйодид (12,2 мл, 152,0 ммоль) при такой же температуре в течение 10 минут. После перемешивания при -78°C в течение 1 часа смесь гасят добавлением насыщенного водного раствора хлорида аммония (100 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (300 мл) и органический слой промывают водой (200 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл). После сушки безводным сульфатом натрия обезвоживающий агент удаляют фильтрованием и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 90:10 → 85:15 → 80:20) с получением 10,63 г указанного в заголовке соединения (смесь стереоизомеров положения 4, 36,7 ммоль, 48%) в виде бледно-желтого масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,01-1,07 (3,6H, м), 1,22 (2,4H, c), 1,45-1,56 (3,8H, м), 1,64-1,75 (1H, м), 1,80-1,85 (0,2H, м), 2,24 (0,8H, т, J=6,7Гц), 2,61-2,65 (1H, м), 2,81 (0,2H, т, J=7,2Гц), 3,55 (0,2H, д, J=9,5Гц), 3,62 (0,8H, д, J=10,0Гц), 3,699 (2,4H, c), 3,704 (0,6H, c), 5,50-5,56 (1H, м), 7,26-7,36 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 290 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 33

4-Этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоновая кислота

К раствору метил 4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилата (стереоизомер A), полученного в ссылочном примере 32 (10,63 г, 36,7 ммоль) в тетрагидрофуране (330 мл) и метаноле (110 мл), добавляют 2 н. водный раствор гидроксида натрия (110 мл, 220 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают на масляной бане при 60°C в течение 5,5 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и, после добавления концентрированной хлористоводородной кислоты к концентрату на бане со льдом для подкисления, смесь экстрагируют хлороформом (300 мл + 2 × 100 мл). Органические слои объединяют и сушат безводным сульфатом натрия. После удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 11,46 г (количественный выход) неочищенного указанного в заголовке соединения в виде бледно-коричневого твердого продукта. Неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,03-1,08 (3,6H, м), 1,25 (2,4H, c), 1,50-1,54 (3,2H, м), 1,59-1,70 (0,8H, м), 1,73-1,87 (1H, м), 2,30 (0,8H, т, J=6,6Гц), 2,63 (0,8H, д, J=10,3Гц), 2,67 (0,2H, д, J=9,8Гц), 2,86 (0,2H, т, J=7,2Гц), 3,60 (0,2H, д, J=9,8Гц), 3,69 (0,8H, д, J=10,3Гц), 5,48-5,56 (1H, м), 7,26-7,36 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 276 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 34

(3R*,4S*)-3-Амино-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин и (3R*,4R*)-3-амино-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин

К раствору неочищенной 4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоновой кислоты (стереоизомер A) (11,46 г), полученной в ссылочном примере 33, и триэтиламина (10,24 мл, 73,4 ммоль) в толуоле (150 мл) добавляют дифенилфосфорилазид (10,29 мл, 47,7 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 минут, и на масляной бане при 90°C в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляют добавлением этилацетата (500 мл) и раствор промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (200 мл), водой (200 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) в таком порядке. Полученный органический слой сушат безводным сульфатом натрия и, после удаления обезвоживающего агента фильтрованием, растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме изоцианата. Неочищенный продукт в форме изоцианата растворяют в 1,4-диоксане (80 мл) и, после добавления 6 н. хлористоводородной кислоты (80 мл), смесь перемешивают на масляной бане при 60°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и концентрат подвергают азеотропной дистилляции с этанолом. К остатку добавляют воду (100 мл) и, после перемешивания на бане со льдом, добавляют насыщенный водный раствор гидроксида натрия для подщелачивания. Полученную смесь экстрагируют дихлорметаном (600 мл + 100 мл) и органические слои объединяют. После сушки безводным сульфатом натрия обезвоживающий агент удаляют фильтрованием и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Полученную смесь изомеров разделяют и очищают колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ:метанол:триэтиламин, 100:0:1 → 99:1:1 → 98:2:1) с получением 7,00 г стереоизомера AA указанного в заголовке соединения (конфигурация (3R*,4S*), 28,4 ммоль, 2 стадии, 77%) в виде бледно-коричневого смолистого твердого продукта и 1,41 г стереоизомера AB указанного в заголовке соединения (конфигурация (3R*,4R*), 5,72 ммоль, 2 стадии, 16%) в виде бледно-коричневого смолистого твердого продукта.

Стереоизомер AA:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,14 (3H, т, J=7,6Гц), 1,19 (3H, c), 1,43-1,55 (4H, м), 1,72-1,83 (1H, м), 2,05 (1H, т, J=6,8Гц), 2,77 (1H, д, J=10,0Гц), 2,99 (1H, д, J=9,8Гц), 5,53 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,24-7,35 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 247 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+126,6° (c=0,470, хлороформ)

Стереоизомер AB:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,93 (3H, c), 1,13 (3H, т, J=7,4Гц), 1,46-1,62 (4H, м), 1,65-1,74 (1H, м), 2,11 (1H, т, J=7,1Гц), 2,70 (1H, д, J=9,5Гц), 3,00 (1H, д, J=9,3Гц), 5,52 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,24-7,35 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 247 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+132,5° (c=0,260, хлороформ)

Ссылочный пример 35

(3R*,4R*)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метил-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин

К раствору (3R*,4S*)-3-амино-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидина (изомер AA, 4,16 г, 16,89 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл), полученного в ссылочном примере 34, постепенно добавляют литийалюминийгидрид (1,282 г, 33,8 ммоль) в течение 5 минут на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают на бане со льдом и после этого осторожно добавляют воду (1,22 мл, 67,7 ммоль), 15% водный раствор гидроксида натрия (1,22 мл) и воду (3,66 мл) в таком порядке, смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Нерастворимое содержимое удаляют фильтрованием, остаток на фильтре промывают тетрагидрофураном (3 раза) и фильтрат и тетрагидрофуран, используемый для промывки, объединяют. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток растворяют в дихлорметане (70 мл). Добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (5,53 г, 25,3 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 25 часов. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 90:10 → 80:20 → 67:33) с получением 4,45 г (13,37 ммоль, 2 стадии, 79%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-коричневого масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,87 (3H, т, J=7,3Гц), 1,14-1,22 (1H, м), 1,33 (3H, д, J=6,3Гц), 1,44 (9H, c), 1,45 (3H, c), 1,55-1,65 (1H, м), 1,74-1,82 (1H, м), 2,36 (1H, т, J=8,8Гц), 2,63 (1H, д, J=9,5Гц), 2,71 (1H, д, J=8,1Гц), 2,75 (1H, д, J=9,0Гц), 3,28 (1H, кв, J=6,5Гц), 4,73 (1H, уш.c), 7,19-7,33 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 333 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+5,4° (c=0,410, хлороформ)

Ссылочный пример 36

(3R*,4R*)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин

К раствору (3R*,4R*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метил-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидина (4,43 г, 13,33 ммоль), полученного в ссылочном примере 35, в дихлорметане (40 мл) добавляют бензилхлорформиат (5,71 мл, 39,9 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 5 дней. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 90:10 → 80:20 → 67:33) с получением 3,94 г (10,86 ммоль, 81%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного смолистого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,94-1,00 (3H, м), 1,12-1,22 (1H, м), 1,41-1,47 (12H, м), 1,59-1,69 (1H, м), 1,82-1,95 (1H, м), 3,12-3,26 (2H, м), 3,65-3,75 (1H, м), 3,96 (0,3H, д, J=11,5Гц), 4,10 (0,7H, м), 4,43 (1H, уш.c), 5,09-5,18 (2H, м), 7,27-7,38 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 307 (M-tBu)⁺.

[α]_D ^25,1=-13,3° (c=0,120, хлороформ)

Пример 13

7-[(3R*,4R*)-3-Амино-4-этил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Используя методику, аналогичную методике примера 1, неочищенный (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин (450 мг, 1,242 ммоль), полученный в ссылочном примере 36, преобразуют в (3R*,4R*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин (304 мг, количественный выход) и 294 мг продукта подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (434 мг, 1,201 ммоль), получая 282 мг (0,662 ммоль, 55%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 90-93°C.

[α]_D ^25,1=+220,2° (c=0,113, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,96 (3H, т, J=7,4Гц), 1,27-1,34 (4H, м), 1,56-1,72 (3H, м), 1,89-1,97 (1H, м), 3,30 (1H, д, J=10,7Гц), 3,56 (3H, c), 3,61-3,70 (2H, м), 3,78 (1H, дд, J=10,6, 2,8Гц), 4,06 (1H, дд, J=13,1, 6,0Гц), 4,82-5,01 (1H, м), 7,65 (1H, д, J=14,4Гц), 8,48 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₁H₂₅F₂N₃O₄·0,25H₂O:

Вычислено: C, 59,22; H, 6,03; F, 8,92; N, 9,87.

Найдено: C, 59,09; H, 5,84; F, 8,79; N, 9,89.

МС (FAB) m/z: 422 (M+H)⁺.

ИК (ATR): 2958, 2873, 1724, 1618, 1541, 1508, 1431, 1363, 1313, 1277, 1234 см^-1.

Ссылочный пример 37

Метил (3R*,4R*)-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилат и метил (3R*,4S*)-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилат

Повторяют методику ссылочного примера 32 с использованием метил 3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилата (стереоизомер B), полученного в ссылочном примере 31 (20,22 г, 77,4 ммоль), получая 2,27 г стереоизомеров BA в положении 4 указанного в заголовке соединения (конфигурация (3R*,4R*), 7,84 ммоль, 10%) в виде бледно-желтого масла и 7,40 г стереоизомера BB (конфигурация (3R*,4S*), 25,6 ммоль, 33%) в виде бледно-желтого масла.

Стереоизомер BA:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,03 (3H, т, J=7,5Гц), 1,25 (3H, c), 1,39-1,55 (4H, м), 1,79-1,90 (1H, м), 2,78 (1H, дд, J=8,0, 6,5Гц), 2,95 (1H, д, J=9,8Гц), 3,17 (1H, д, J=9,8Гц), 3,64 (3H, c), 5,52 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,25-7,35 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 290 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+106,7° (c=0,520, хлороформ)

Стереоизомер BB:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,00 (3H, т, J=7,6Гц), 1,38-1,47 (4H, м), 1,51 (3H, д, J=7,4Гц), 1,63-1,70 (1H, м), 2,26 (1H, дд, J=7,4, 6,4Гц), 2,98 (1H, д, J=10,3Гц), 3,29 (1H, д, J=10,3Гц), 3,53 (3H, c), 5,52 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,25-7,35 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 290 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+130,0° (c=0,110, хлороформ)

Ссылочный пример 38

(3R*,4S*)-4-Этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоновая кислота

Повторяют методику ссылочного примера 33 с использованием метил (3R*,4S*)-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоксилата (стереоизомер BB, 2,04 г, 7,03 ммоль), полученного в ссылочном примере 37, получая 2,15 г (количественный выход) неочищенного целевого соединения в виде бледно-коричневого твердого продукта. Полученный таким образом неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,98 (3H, т, J=7,6Гц), 1,41 (3H, c), 1,50-1,73 (5H, м), 2,30 (1H, дд, J=7,6, 5,9Гц), 2,96 (1H, д, J=10,1Гц), 3,32 (1H, д, J=10,5Гц), 5,51 (1H, кв, J=7,0Гц), 7,23-7,34 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 276 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 39

(3R*,4S*)-3-Амино-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин

К раствору неочищенной (3R*,4S*)-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-илкарбоновой кислоты, полученной в ссылочном примере 38 (стереоизомер BB, 2,15 г, 7,03 ммоль), и триэтиламина (1,96 мл, 14,06 ммоль) в толуоле (30 мл) при комнатной температуре добавляют дифенилфосфорилазид (1,97 мл, 9,14 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 минут, и на масляной бане при 90°C, в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляют добавлением этилацетата (200 мл) и раствор промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл), водой (50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл) в таком порядке. Полученный органический слой сушат безводным сульфатом натрия и, после удаления обезвоживающего раствора фильтрованием, растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме изоцианата. Полученный таким образом неочищенный продукт в форме изоцианата растворяют в 1,4-диоксане (16 мл), к раствору добавляют 6 н. хлористоводородную кислоту (16 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 60°C в течение 3,5 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и концентрат подвергают азеотропной дистилляции с этанолом. К остатку добавляют воду (30 мл) и добавляют для подщелачивания насыщенный водный раствор гидроксида натрия на бане со льдом при перемешивании. Полученную смесь экстрагируют дихлорметаном (150 мл + 2 × 50 мл) и органические слои объединяют и сушат безводным сульфатом натрия. После удаления обезвоживающего агента фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 1,79 г (количественный выход) неочищенного целевого соединения в виде зеленовато-коричневого масла. Полученный таким образом неочищенный продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,13 (3H, т, J=7,6Гц), 1,27 (3H, c), 1,46-1,58 (1H, м), 1,49 (3H, д, J=7,1Гц), 1,68-1,80 (1H, м), 2,10 (1H, т, J=7,0Гц), 2,68 (1H, д, J=9,8Гц), 3,13 (1H, д, J=9,8Гц), 5,51 (1H, кв, J=7,2Гц), 7,24-7,35 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 247 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 40

Повторяют методику ссылочного примера 35 с использованием неочищенного (3R*,4S*)-3-амино-4-этил-3-метил-5-оксо-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидина, полученного в ссылочном примере 39 (стереоизомер BB, 1,79 г, 7,03 ммоль), получая 2,03 г (6,11 ммоль, 5 стадий, 87%) целевого соединения в виде бледно-красного масла.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,86 (3H, т, J=8,1Гц), 1,11-1,21 (1H, м), 1,31 (3H, д, J=6,3Гц), 1,42 (9H, c), 1,52 (3H, c), 1,55-1,65 (1H, м), 1,78-1,86 (1H, м), 2,27 (1H, т, J=9,2Гц), 2,55 (1H, д, J=9,5Гц), 2,81 (1H, д, J=9,5Гц), 2,92 (1H, т, J=8,7Гц), 3,33 (1H, кв, J=6,5Гц), 4,70 (1H, уш.c), 7,19-7,31 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 333 (M+H)⁺.

[α]_D ^25,1=+30,3° (c=0,405, хлороформ)

Ссылочный пример 41

Повторяют методику ссылочного примера 36 с использованием (3R*,4R*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метил-1-[(R)-1-фенилэтил]пирролидина, полученного в ссылочном примере 40 (стереоизомер BB, 2,03 г, 6,11 ммоль), получая 1,752 г (4,83 ммоль, 79%) целевого соединения в виде бледно-розового смолистого твердого продукта.

МС (ESI) m/z: 307 (M-tBu)⁺.

[α]_D ^25,1=+10,5° (c=0,260, хлороформ)

Пример 14

Используя методику, аналогичную методике примера 1, (3R*,4R*)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин, полученный в ссылочном примере 41 (439 мг, 1,211 ммоль), преобразуют в неочищенный (3R*,4R*)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-этил-3-метилпирролидин (285 мг, количественный выход) и 283 мг продукта подвергают взаимодействию с комплексом 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (434 мг, 1,201 ммоль), получая 256 мг (0,565 ммоль, 47%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 167-169°C.

[α]_D ^25,1=-97,6° (c=0,127, 0, 1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,96 (3H, т, J=6,9Гц), 1,25-1,44 (5H, м), 1,49-1,68 (2H, м), 1,94 (1H, м), 3,37 (1H, д, J=10,5Гц), 3,54-3,76 (6H, м), 3,97-4,02 (1H, м), 5,02 (1H, дм, J=66,4Гц), 7,65 (1H, д, J=14,6Гц), 8,39 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₁H₂₅F₂N₃O₄·0,5H₂O·0,5EtOH:

Вычислено: C, 58,27; H, 6,45; F, 8,38; N, 9,27.

Найдено: C, 58,31; H, 6,46; F, 8,23; N, 9,08.

МС (FAB) m/z: 422 (M+H)⁺.

ИК (ATR): 2967, 2939, 2883, 2831, 1728, 1612, 1577, 1537, 1493, 1456, 1439, 1389, 1358, 1302, 1284, 1261 см^-1.

Ссылочный пример 42

трет-Бутил 2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-4-карбоксилат

К суспензии 2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-4-карбоновой кислоты (1165 г, 4,994 моль) в дихлорметане (10 л) добавляют O-трет-бутил-N,N'-диизопропилмочевину (3020 г, 15,00 моль) при комнатной температуре, при перемешивании, и реакционную систему охлаждают добавлением воды со льдом в наружную баню, когда повышается внутренняя температура и отмечается начало дефлегмации. Когда температура понижается до комнатной температуры, реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа после удаления бани со льдом и в течение 3 часов при нагревании до 40°C. После перемешивания реакционной смеси на бане со льдом в течение 1 часа нерастворимое содержимое отделяют фильтрованием и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (силикагель, 4 кг; элюирующий раствор, гексан:этилацетат, 3:1) с получением 925,2 г (64%) смеси изомеров в положении 4 в виде бледно-желтого сиропа. Хотя разделение изомеров является легким, изомеры используют без разделения, поскольку последующая стадия включает рацемизацию. ¹H-ЯМР спектр аутентичного образца изомеров показан ниже.

Изомер с низкой полярностью:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,45 (9H, c), 1,54 (3H, д, J=7,08), 2,59-2,74 (2H, м), 2,95-3,03 (1H, м), 3,14 (1H, дд, J=9,77, 8,79Гц), 3,49 (1H, дд, J=9,77, 6,35Гц), 7,26-7,36 (5H, м).

Изомер с высокой полярностью:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,36 (9H, c), 1,53 (3H, д, J=7,32), 2,59-2,75 (2H, м), 3,02-3,11 (1H, м), 3,16 (1H, дд, J=10,01, 5,62Гц), 3,51 (1H, дд, J=10,01, 8,54Гц), 7,24-7,36 (5H, м).

Ссылочный пример 43

трет-Бутил (3S)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил 2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-4-карбоксилата (30,05 г, 0,104 моль) в N,N'-диметилформамиде (210 мл) добавляют йодметан 26,0 мл (59,28 г, 0,418 моль), а затем добавляют гидрид натрия (55%, в масле, 11,35 г, 0,260 моль) при комнатной температуре в атмосфере азота, при этом перемешивая смесь. Когда внутренняя температура повысится примерно до 50°C, реакционную смесь охлаждают до 30°C добавлением воды со льдом в наружную баню. После замены бани на водяную баню при наружной температуре 17°C смесь перемешивают в течение 23 часов. Реакционную смесь выливают в холодный водный раствор лимонной кислоты (1 л 10% лимонной кислоты и 500 г льда) и, после перемешивания смеси в течение 30 минут, смесь экстрагируют этилацетатом (800 мл, 500 мл). Органические слои объединяют и промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. После сушки безводным сульфатом натрия смесь подвергают фильтрованию и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (элюирование начинают при отношении гексан:этилацетат 5:1, а после элюирования изомера с низкой полярностью отношение гексан:этилацетат заменяют на 4:1) с получением 10,63 г (33,7%) изомера с высокой полярностью указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта. Получают также 14,91 г (47,3%) изомера с низкой полярностью трет-бутил (4R)-4-метил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-4-карбоксилата.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,34 (12H, c), 1,52 (3H, д, J=7,10Гц), 2,27 (1H, д, J=17,0Гц), 2,93 (1H, д, J=17,0Гц), 3,05 (1H, д, J=10,1Гц), 3,32 (1H, д, J=10,1Гц), 5,50 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,23-7,38 (5H, м).

Ссылочный пример 44

трет-Бутил (3R)-4-гидрокси-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3S)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (10,0 г, 33,0 ммоль) и триэтилфосфита (6,78 мл, 39,6 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (165 мл) добавляют бистриметилсилиламид лития (46,1 мл, 46,1 ммоль, 1,0 M раствор в тетрагидрофуране) при -5°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 30 минут. После барботирования газообразного кислорода в реакционную смесь в течение 2 часов к смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (150 мл) на бане со льдом и смесь концентрируют при пониженном давлении. К остатку добавляют воду (100 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя путем дистилляции при пониженном давлении остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=1:1 → 1:4) с получением 9,61 г (91,3%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,24-1,54 (15H, м), 2,64-4,54 (3H, м), 5,44-5,51 (1H, м), 7,26-7,37 (5H, м).

МС (FAB⁺) m/z: 320 (M+H)⁺.

HRMS (FAB⁺) m/z: Вычислено для C₁₈H₂₆NO₄: 320,1862; Найдено: 320, 1853.

ИК (ATR)ν: 3363, 2978, 2935, 2360, 1716, 1684, 1489, 1456, 1369, 1304, 1269, 1230, 1167 см^-1.

Ссылочный пример 45

трет-Бутил (3R)-4-гидрокси-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3R)-4-гидрокси-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (9,35 г, 29,3 ммоль) в тетрагидрофуране (150 мл) добавляют раствор борана в тетрагидрофуране (82,6 мл, 96,6 ммоль, 1,17M раствор в тетрагидрофуране) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 14 часов. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл), этанол (80 мл) и триэтиламин (20 мл) на бане со льдом и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 88°C в течение 2 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении добавляют воду (200 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=3:1 → 1:2) с получением 4,75 г (53,1%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,25 (3H, c), 1,32 (3H, д, J=6,6Гц), 1,44 (9H, c), 1,92 (1H, д, J=6,6Гц), 2,39 (1H, д, J=9,5Гц), 2,69 (1H, дд, J=9,8, 3,9Гц), 2,75-2,82 (1H, м), 2,92 (1H, д, J=9,8Гц), 3,31 (1H, кв, J=6,6Гц), 4,38-4,45 (1H, м), 7,20-7,30 (5H, м).

МС (FAB⁺) m/z: 306 (M+H)⁺.

HRMS (FAB⁺) m/z: Вычислено для C₁₈H₂₈NO₃: 306,2069; Найдено: 306, 2064.

ИК (ATR)ν: 3450, 2976, 2931, 2785, 2359, 1790, 1720, 1603, 1493, 1477, 1454, 1367, 1281, 1255, 1211 см^-1.

Ссылочный пример 46

трет-Бутил (3R)-1-бензилоксикарбонил-4-гидрокси-3-метилпирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3R)-4-гидрокси-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (2,00 г, 6,55 ммоль) в этаноле (10 мл), добавляют 1 н. хлористоводородную кислоту (6,88 мл, 6,88 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают в течение 10 минут. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении и растворения остатка в этаноле (50 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (200 мг), и суспензию перемешивают на масляной бане при 50°C в течение 14 часов в атмосфере водорода. После фильтрования реакционной смеси фильтрат концентрируют, к остатку добавляют простой диэтиловый эфир (30 мл) и насыщенный бикарбонат натрия (30 мл) и добавляют бензилоксикарбонилхлорид (982 мкл, 6,88 ммоль) на бане со льдом. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов и реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан: этилацетат=2:1 → 1:2) с получением 2,00 г (91,1%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,30 (3H, c), 1,44 (9H, c), 2,10 (1H, дд, J=30,9, 3,8Гц), 3,26-3,45 (2H, м), 3,68-3,79 (2H, м), 4,45-4,51 (1H, м), 5,13 (2H, c), 7,28-7,38 (5H, м).

МС (FAB⁺) m/z: 336 (M+H)⁺.

HRMS (FAB⁺) m/z: Вычислено для C₁₈H₂₆NO₅: 336,1811; Найдено: 336, 1789.

ИК (ATR)ν: 3421, 2978, 2941, 2885, 2364, 1788, 1707, 1687, 1498, 1456, 1423, 1367, 1319, 1257, 1213, 1161 см^-1.

Ссылочный пример 47

трет-Бутил (R)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-оксопирролидин-3-карбоксилат

К раствору оксалилхлорида (1,01 мл, 11,7 ммоль) в дихлорметане (40 мл) добавляют раствор диметилсульфоксида (1,11 мл, 15,6 ммоль) в дихлорметане (5 мл) при -78°C и смесь перемешивают в течение 10 минут. После добавления раствора трет-бутил (R)-1-бензилоксикарбонил-4-гидрокси-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (1,97 г, 5,87 ммоль) в дихлорметане (15 мл) и перемешивания смеси в течение 1 часа добавляют триэтиламин (5,98 мл, 42,9 ммоль) и смесь перемешивают при -78°C в течение 30 минут и на бане со льдом в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл) и воду (100 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Органический слой промывают водой (100 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан-этилацетат=10:1 → 3:2) с получением 1,68 г (85,8%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,34 (3H, д, J=4,9Гц), 1,38 (9H, c), 3,46 (1H, д, J=12,0Гц), 3,81 (1H, д, J=19,0Гц), 4,10-4,19 (1H, м), 4,35 (1H, дд, J=5,9, 12,0Гц), 5,19 (2H, c), 7,30-7,40 (5H, м).

МС (FAB⁺) m/z: 334 (M+H)⁺.

HRMS (FAB⁺) m/z: Вычислено для C₁₈H₂₄NO₅: 334,1654; Найдено: 334, 1643.

ИК (ATR)ν: 2981, 2941, 2889, 1768, 1711, 1498, 1454, 1421, 1369, 1290, 1269, 1196, 1134 см^-1.

Ссылочный пример 48

трет-Бутил (S)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-метиленпирролидин-3-карбоксилат

К раствору бромида метилтрифенилфосфония (2,02 г, 5,65 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (30 мл) добавляют н-бутиллитий (3,11 мл, 4,78 ммоль, 1,54 M раствор в гексане) при -78°C и смесь перемешивают в течение 20 минут. При такой же температуре добавляют раствор трет-бутил (R)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-оксопирролидин-3-карбоксилата (1,45 г, 4,35 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (15 мл) и, после постепенного повышения температуры, смесь перемешивают при 55°C в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляют 10% водный раствор лимонной кислоты (30 мл) на бане со льдом и раствор концентрируют при пониженном давлении. К концентрату добавляют воду (100 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 710 мг (49,3%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,36 (3H, д, J=6,6Гц), 1,39 (9H, д, J=2,0Гц), 3,24 (1H, дд, J=13,7, 11,2Гц), 4,05-4,16 (2H, м), 4,19-4,29 (1H, м), 5,04-5,18 (4H, м), 7,29-7,38 (5H, м).

МС (FAB⁺) m/z: 332 (M+H)⁺.

HRMS (FAB⁺) m/z: Вычислено для C₁₉H₂₆NO₄: 332, 1862; Найдено: 332, 1869.

ИК (ATR)ν: 2976, 2935, 2873, 1705, 1498, 1450, 1417, 1362, 1308, 1275, 1257, 1213, 1159 см^-1.

Ссылочный пример 49

(S)-1-Бензилоксикарбонил-3-метил-4-метиленпирролидин-3-карбоновая кислота

К раствору трет-бутил (S)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-метиленпирролидин-3-карбоксилата (710 мг, 2,14 ммоль) в дихлорметане (8 мл) добавляют трифторуксусную кислоту (4 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл) и смесь промывают простым диэтиловым эфиром (20 мл). После добавления к водному слою 1 н. хлористоводородной кислоты смесь экстрагируют хлороформом (100 мл ×2) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 590 мг (100%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,44 (3H, c), 3,23-3,36 (1H, м), 4,11-4,30 (3H, м), 5,09-5,25 (4H, м), 7,27-7,39 (5H, м).

МС (FAB⁺) m/z: 276 (M+H)⁺.

HRMS (FAB⁺) m/z: Вычислено для C₁₅H₁₈NO₄: 276, 1236. Найдено: 276, 1222.

ИК (ATR)ν: 3064, 3032, 2979, 2945, 2877, 2362, 1705, 1672, 1498, 1423, 1362, 1309, 1257, 1213, 1167, 1124 см^-1.

Ссылочный пример 50

(S)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метил-4-метиленпирролидин

К раствору (S)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-метиленпирролидин-3-карбоновой кислоты (590 мг, 2,14 ммоль) в толуоле (21 мл) добавляют триэтиламин (597 мкл, 4,29 ммоль) и дифенилфосфорилазид (508 мкл, 2,36 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 125°C в течение 1 часа и концентрируют. Концентрат растворяют в 1,4-диоксане (8 мл) и добавляют 6 н. хлористоводородную кислоту (4 мл). После перемешивания в течение 1 часа к реакционной смеси добавляют воду (20 мл) и смесь промывают простым диэтиловым эфиром (50 мл). Водный слой подщелачивают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток растворяют в дихлорметане (8 мл) и добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (936 мг, 4,29 ммоль) на бане со льдом. Растворитель перемешивают при 25°C в течение 19 часов и реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=5:1 → 3:1) с получением 514 мг (69,2%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,42 (9H, c), 1,46 (3H, c), 3,56 (1H, т, J=9,2Гц), 3,85-3,98 (1H, м), 4,13-4,26 (2H, м), 4,62-4,74 (1H, м), 5,01-5,17 (4H, м), 7,27-7,38 (5H, м).

МС (FAB⁺) m/z: 347 (M+H)⁺.

HRMS (FAB⁺) m/z: Вычислено для C₁₉H₂₇N₂O₄: 347, 1971. Найдено: 347, 1954.

ИК (ATR)ν: 3334, 2976, 2931, 2873, 1695, 1498, 1448, 1419, 1390, 1363, 1282, 1244, 1215, 1165 см^-1.

Ссылочный пример 51

(S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-3-метил-4-метиленпирролидин

Газообразный аммиак барботируют в раствор (S)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метил-4-метиленпирролидина (488 мг, 1,41 ммоль) в тетрагидрофуране (7 мл) при -78°C с получением смешанного раствора жидкого аммиака и тетрагидрофурана (20 мл) и добавляют натрий (162 мг, 7,04 ммоль). Смесь перемешивают при такой же температуре в течение 10 минут. Добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл) при -78°C и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (50 мл) и раствор экстрагируют хлороформом (200 мл ×2). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 218 мг (72,9%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветных кристаллов.

[α]_D ^25,1=-74,09° (c=1,04, CHCl₃).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,41-1,46 (12H, м), 2,90 (1H, д, J=11,7Гц), 3,45 (1H, д, J=14,2Гц), 3,50-3,57 (1H, м), 3,69 (1H, д, J=16,1Гц), 4,64 (1H, уш.c), 5,01 (1H, т, J=2,2Гц), 5,04 (1H, т, J=2,2Гц).

МС (FAB⁺) m/z: 213 (M+H)⁺.

HRMS (FAB⁺) m/z: Вычислено для C₁₁H₂₁N₂O₂: 213, 1603; Найдено: 213, 1600.

ИК (ATR)ν: 3284, 3199, 2978, 2922, 2829, 1695, 1660, 1556, 1441, 1365, 1333, 1288, 1279, 1248, 1176 см^-1.

Пример 15

7-[(3S)-3-Амино-3-метил-4-метиленпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

К раствору (3S)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метил-4-метиленпирролидина (218 мг, 1,03 ммоль) в диметилсульфоксиде (3,1 мл) добавляют триэтиламин (156 мкл, 1,12 ммоль) и комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторборан (337 мг, 934 мкмоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 дней. Реакционную смесь концентрируют и к концентрату добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 4:1) (25 мл) и триэтиламин (5 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 90°C в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, к остатку добавляют 10% водный раствор лимонной кислоты (50 мл) и воду (50 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (100 мл ×2). Органический слой промывают водой (50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (10 мл) на бане со льдом и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. К реакционной смеси добавляют воду (50 мл) и смесь промывают хлороформом (50 мл ×2). На бане со льдом к водному слою добавляют 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия, доводя pH до 12,0, и доводят pH до 7,4 добавлением концентрированной хлористоводородной кислоты. Раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 224 мг (57,9%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтых кристаллов.

Т.пл.: 100-102°C.

[α]_D ^25,1=118,9° (c=0,39, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,40 (3H, c), 1,49-1,72 (2H, м), 3,51-3,67 (5H, м), 4,00-4,09 (1H, м), 4,46-4,53 (1H, м), 4,21 (1H, д, J=14,9Гц), 4,97 (1H, д, J=64,5Гц), 5,07 (1H, c), 5,18 (1H, c), 7,71 (1H, д, J=14,4Гц), 8,47 (1H, д, J=1,2Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₁F₂N₃O₄·0,5H₂O:

Вычислено: C, 57,97; H, 5,35; F, 9,17; N, 10,14.

Найдено: C, 57,91; H, 5,42; F, 9,41; N, 10,15.

МС (ESI) m/z: 406 (M+H)⁺.

ИК (ATR)ν: 2839, 1724, 1614, 1577, 1541, 1508, 1435, 1396, 1356, 1338, 1323, 1271, 1188 см^-1.

Ссылочный пример 52

(3S)-10-[7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота

(-)-7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан (391 мг, 1,73 ммоль), комплекс (3S)-9,10-дифтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]-бензоксазин-6-карбоновая кислота-дифторборан (580 мг, 1,76 ммоль) и триэтиламин (0,490 мл, 3,52 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (5 мл) и раствор перемешивают на масляной бане при 40°C в течение 24 часов. К реакционной смеси добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 5:2) (7 мл) и триэтиламин (2 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 100°C в течение 3,5 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и концентрат растворяют в этилацетате. Раствор промывают 10% водным раствором лимонной кислоты, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан:метанол, 98:2) с получением 761 мг (5,37 ммоль, 90%) указанного в заголовке соединения в виде желтого маслянистого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,53-0,60 (1H, м), 0,63-0,71 (1H, м), 0,71-0,79 (1H, м), 0,87-0,96 (1H, м), 1,21 (3H, c), 1,42 (9H, c), 1,61 (3H, д, J=6,8Гц), 3,32 (1H, дд, J=10,3, 2,2Гц), 3,89 (1H, дд, J=11,0, 2,2Гц), 4,15-4,69 (5H, м), 7,68 (1H, д, J=14,2Гц), 8,54 (1H, c).

МС (ESI) m/z: 488 (M+H)⁺.

Пример 16

(3S)-10-(7-Амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил)-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота

(3S)-10-[7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновую кислоту (761 мг, 1,56 ммоль) растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (6,5 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 120 минут. Реакционную смесь промывают хлороформом и к водному слою на бане со льдом добавляют насыщенный водный раствор гидроксида натрия до pH 12,0. Затем добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4, и раствор экстрагируют нижним слоем смешанного раствора (хлороформ:метанол:вода, 7:3:1). После объединения органических слоев и сушки безводным сульфатом натрия растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. К остатку добавляют хлороформ и нерастворимое содержимое удаляют фильтрованием. Фильтрат подвергают дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают кристаллизацией из этанола и сушат при пониженном давлении с получением 260 мг (0,68 ммоль, 43%) указанного в заголовке соединения в виде желтого порошка.

Т.пл.: 268-270°C.

[α]_D ²⁵=-114° (c=0,200, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,52-0,58 (2H, м), 0,70-0,76 (2H, м), 1,08 (3H, c), 1,49 (3H, д, J=6,8Гц), 3,55-3,68 (2H, м), 3,73-3,85 (2H, м), 4,28 (1H, д, J=9,8Гц), 4,42-4,48 (1H, м), 4,52-4,61 (1H, м), 7,48 (1H, д, J=14,4Гц), 8,29 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₀H₂₂FN₃O₄:

Вычислено: C, 62,01; H, 5,72; F, 4,90; N, 10,85.

Найдено: C, 62,00; H, 5,65; F, 4,85; N, 10,69.

МС (FAB) m/z: 388 (M+H)⁺.

ИК (ATR)ν: 3365, 2979, 2877, 1619, 1572, 1519, 1444, 1413, 1398, 1376, 1359, 1338, 1328, 1307, 1280, 1108, 1081, 867 см^-1.

Ссылочный пример 53

трет-Бутил (3S)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат и трет-бутил (3R)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил 2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-4-карбоксилата (30,05 г, 0,104 моль) в N,N-диметилформамиде (210 мл) добавляют йодметан (26,0 мл, 59,28 г, 0,418 моль), а затем добавляют гидрид натрия (55%, в масле, 11,35 г, 0,260 моль) при комнатной температуре в атмосфере азота, в то же время, перемешивая смесь. Когда внутренняя температура повысится примерно до 50°C, реакционную смесь охлаждают до 30°C добавлением воды со льдом в наружную баню. После замены бани на водяную баню при наружной температуре 17°C смесь перемешивают в течение 23 часов. Реакционную смесь выливают в холодный водный раствор лимонной кислоты (1 л 10% лимонной кислоты и 500 г льда) и, после перемешивания смеси в течение 30 минут, смесь экстрагируют этилацетатом (800 мл, 500 мл). Органические слои объединяют и промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. После сушки безводным сульфатом натрия смесь подвергают фильтрованию и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (элюирование начинают смесью гексан:этилацетат 5:1, и после элюирования изомера с низкой полярностью, отношение гексан:этилацетат заменяют на 4:1) с получением 10,63 г (33,7%) изомера с высокой полярностью трет-бутил (3S)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата в виде белого твердого продукта. Также получают 14,91 г (47,3%) изомера с низкой полярностью трет-бутил (3R)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата.

Изомер с высокой полярностью:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,34 (9H, c), 1,52 (3H, д, J=7,10Гц), 2,27 (1H, д, J=17,0Гц), 2,93 (1H, д, J=17,0Гц), 3,05 (1H, д, J=10,1Гц), 3,32 (1H, д, J=10,1Гц), 5,50 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,23-7,38 (5H, м).

Изомер с низкой полярностью:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,18 (3H, c), 1,44 (9H, c), 1,52 (3H, д, J=7,1Гц), 2,26 (1H, д, J=16,9Гц), 2,63-2,69 (1H, м), 2,91 (1H, д, J=16,9Гц), 3,63 (1H, д, J=10,0Гц), 5,51 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,26-7,37 (5H, м).

Ссылочный пример 54

трет-Бутил (3S)-4-гидрокси-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3R)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (9,90 г, 32,6 ммоль) и триэтилфосфита (6,71 мл, 39,1 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (165 мл) добавляют бистриметилсилиламид лития (45,7 мл, 45,7 ммоль, 1,0M раствор в тетрагидрофуране) при -5°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 30 минут. После барботирования газообразного кислорода в реакционную смесь в течение 30 минут добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (150 мл) на бане со льдом и смесь концентрируют при пониженном давлении. К остатку добавляют воду (100 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 1:1 → 1:4) с получением 7,73 г (74%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,24-1,56 (15H, м), 2,61-2,73 (1H, м), 3,43-3,57 (1H, м), 4,02-4,15 (2H, м), 5,45-5,54 (1H, м), 7,26-7,38 (5H, м).

Ссылочный пример 55

трет-Бутил (3S)-4-гидрокси-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3S)-4-гидрокси-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (5,13 г, 16,1 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) добавляют 1,17M раствор борана в тетрагидрофуране (45,3 мл, 53,1 ммоль) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 13 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении к концентрату добавляют воду (10 мл), этанол (100 мл) и триэтиламин (5 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и к концентрату добавляют воду (200 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Полученный органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 3:1 → 1:2) с получением 1,50 г (31%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,26 (3H, c), 1,33 (3H, д, J=6,6Гц), 1,44 (9H, c), 2,42 (1H, дд, J=9,8, 3,9Гц), 2,49 (1H, д, J=10,0Гц), 2,94 (2H, дд, J=10,0, 5,9Гц), 3,30 (1H, кв, J=6,6Гц), 4,45 (1H, уш.c), 7,20-7,30 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 306 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 56

трет-Бутил (3S)-1-бензилоксикарбонил-4-гидрокси-3-метилпирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3S)-4-гидрокси-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (1,49 г, 4,88 ммоль) в этаноле (30 мл) добавляют 1 н. хлористоводородную кислоту (5,12 мл, 5,12 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают в течение 10 минут. К реакционной смеси добавляют катализатор, 10% палладий на угле (1,40 г), и суспензию перемешивают на масляной бане при 40°C в течение 2 часов в атмосфере водорода при нормальном давлении. После фильтрования реакционной смеси и концентрирования фильтрата к остатку добавляют тетрагидрофуран (20 мл), воду (20 мл) и бикарбонат натрия (2,05 г, 24,4 ммоль) и дополнительно добавляют бензилоксикарбонилхлорид (836 мкл, 5,86 ммоль) на бане со льдом. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов и экстрагируют этилацетатом (100 мл ×2). Полученный органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан: этилацетат, 2:1 → 1:2) с получением 1,48 г (90%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

МС (ESI) m/z: 358 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 57

трет-Бутил (3S)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-оксопирролидин-3-карбоксилат

К раствору оксалилхлорида (736 мкл, 8,58 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляют раствор диметилсульфоксида (811 мкл, 11,4 ммоль) в дихлорметане (5 мл) при -78°C и смесь перемешивают в течение 10 минут. Добавляют раствор (3S)-1-трет-бутил бензилоксикарбонил-4-гидрокси-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (1,44 г, 4,29 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и смесь перемешивают в течение 1 часа. Затем добавляют триэтиламин (4,37 мл, 31,4 ммоль) и смесь перемешивают при -78°C в течение 30 минут и на бане со льдом в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл) и воду (100 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Органический слой промывают водой (100 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 10:1 → 3:2) с получением 1,37 г (96%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

Ссылочный пример 58

трет-Бутил (3R)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-метиленпирролидин-3-карбоксилат

К раствору бромида метилтрифенилфосфония (1,67 г, 4,68 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (20 мл) добавляют н-бутиллитий (2,54 мл, 3,96 ммоль, 1,56M раствор в гексане) при -78°C и смесь перемешивают в течение 20 минут. Добавляют раствор трет-бутил (3S)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-оксопирролидин-3-карбоксилата (1,20 г, 3,60 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (4 мл) при такой же температуре, температуру постепенно повышают и смесь перемешивают при 55°C в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляют 10% водный раствор лимонной кислоты (50 мл) на бане со льдом и смесь концентрируют при пониженном давлении. К концентрату добавляют воду (100 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан-этилацетат, 10:1 → 5:1) с получением 750 мг (63%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

Ссылочный пример 59

(3R)-1-Бензилоксикарбонил-3-метил-4-метиленпирролидин-3-карбоновая кислота

К раствору трет-бутил (3R)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-метиленпирролидин-3-карбоксилата (750 мг, 2,26 ммоль) в дихлорметане (8 мл) добавляют трифторуксусную кислоту (4 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении к остатку добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл) и смесь промывают простым диэтиловым эфиром (20 мл). К водному слою для подкисления добавляют 1 н. хлористоводородную кислоту и раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). После сушки органического слоя безводным сульфатом натрия и фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 665 мг неочищенного указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

Ссылочный пример 60

(3R)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метил-4-метиленпирролидин

К раствору (3R)-1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-метиленпирролидин-3-карбоновой кислоты (2,26 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляют триэтиламин (630 мкл, 4,53 ммоль) и дифенилфосфорилазид (536 мкл, 2,49 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 110°C в течение 1 часа. После концентрирования реакционной смеси концентрат растворяют в 1,4-диоксане (8 мл). Добавляют 6 н. хлористоводородную кислоту (4 мл) и смесь перемешивают в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) и смесь промывают простым диэтиловым эфиром (50 мл). Водный слой подщелачивают добавлением насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). После сушки органического слоя безводным сульфатом натрия и фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток растворяют в толуоле (8 мл). Ди-трет-бутилдикарбонат (592 мг, 2,71 ммоль) добавляют на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 67 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 5:1 → 3:1) с получением 487 мг (62%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

Ссылочный пример 61

(3R)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-3-метил-4-метиленпирролидин

Газообразный аммиак барботируют в раствор (3R)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метил-4-метиленпирролидина (469 мг, 1,41 ммоль) в тетрагидрофуране (7 мл) при -78°C с получением смешанного раствора жидкого аммиака и тетрагидрофурана (20 мл) и добавляют к этому раствору натрий (154 мг, 6,70 ммоль). Смесь перемешивают при такой же температуре в течение 10 минут. Добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл) при -78°C и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия, после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 255 мг (85%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветных кристаллов.

Пример 17

7-[(3R)-3-Амино-3-метил-4-метиленпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

К раствору (3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метил-4-метиленпирролидина (255 мг, 1,20 ммоль) в диметилсульфоксиде (3 мл) добавляют триэтиламин (201 мкл, 1,44 ммоль) и комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (433 мг, 1,20 ммоль) и смесь перемешивают при 35°C в течение 15 часов. После концентрирования реакционной смеси к остатку добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (15 мл) и триэтиламин (0,5 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником на масляной бане при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и к остатку добавляют 10% водный раствор лимонной кислоты (50 мл) и воду (50 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (100 мл ×2) и органический слой промывают водой (50 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия, фильтруют и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (5 мл) на бане со льдом и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. Добавляют к реакционной смеси воду (50 мл) и промывают смесь хлороформом (100 мл ×3). К водному слою на бане со льдом добавляют 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 11,0 и добавляют концентрированную хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Затем раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×5). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия, фильтруют и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 210 мг (43%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтых кристаллов.

Т.пл.: 236-239°C (разложение).

[α]_D

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,39 (3H, c), 1,41-1,66 (2H, м), 3,55 (1H, дд, J=9,6, 3,2Гц), 3,61 (3H, c), 3,63 (1H, д, J=10,0Гц), 4,02-4,07 (1H, м), 4,33 (2H, дд, J=25,9, 15,1Гц), 4,99 (1H, д, J=63,7Гц), 5,05 (2H, т, J=1,7Гц), 5,16 (2H, т, J=2,2Гц), 7,68 (1H, д, J=14,2Гц), 8,45 (1H, д, J=2,0Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₁F₂N₃O₄:

Вычислено: C, 59,25; H, 5,22; F, 9,37; N, 10,37.

Найдено: C, 59,14; H, 5,20; F, 9,62; N, 10,50.

ИК (ATR)ν: 2960, 2856, 1716, 1618, 1547, 1514, 1452, 1369, 1327, 1306, 1269, 1230, 1190, 1111 см^-1.

Ссылочный пример 62

Этил 3-[N-бензилоксикарбонил-N-(этоксикарбонилметил)амино]пропионат

К суспензии гидрохлорида сложного глицинэтилового эфира (41,9 г, 0,3 моль) в этаноле (300 мл) добавляют триэтиламин (41,8 мл, 0,3 моль) и этилакрилат (10,8 мл, 0,1 моль) на бане со льдом и смесь перемешивают при 80°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, к остатку добавляют воду (400 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×3). Экстракт промывают водой (200 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) в таком порядке, сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток растворяют в ацетоне (150 мл). К этому раствору добавляют водный раствор карбоната натрия (11,5 г, 108 ммоль) (50 мл) и раствор бензилоксикарбонилхлорида (18,4 г, 108 ммоль) в ацетоне (50 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и к остатку добавляют воду (400 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×3) и экстракт промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 5:1) с получением 31,1 г (92%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,16-1,29 (6H, м), 2,58-2,70 (2H, м), 3,59-3,66 (2H, м), 4,04-4,22 (6H, м), 5,10-5,18 (2H, м), 7,26-7,38 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 338 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 63

Этил 1-бензилоксикарбонил-4-оксопирролидин-3-карбоксилат

К раствору этил 3-[N-бензилоксикарбонил-N-(этоксикарбонилметил)амино]этилпропионата (26,8 г, 79,5 ммоль) в этаноле (200 мл) добавляют этоксид натрия (20% раствор в этаноле, 40,6 мл, 119,3 ммоль) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении остаток растворяют в воде (100 мл). К этому раствору для подкисления добавляют концентрированную хлористоводородную кислоту на бане со льдом и раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×3). Экстракт промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 2:1) с получением 16,7 г (72%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-коричневого масляного продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,25-1,33 (3H, м), 3,87-4,37 (7H, м), 5,16-5,22 (2H, м), 7,23-7,41 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 314 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 64

Этил 1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-оксопирролидин-3-карбоксилат

К раствору этил 1-бензилоксикарбонил-4-оксопирролидин-3-карбоксилата (1,0 г, 3,4 ммоль) в ацетоне (30 мл) добавляют карбонат калия (0,95 г, 6,9 ммоль) и метилйодид (1 мл) и смесь перемешивают при 45°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и к концентрату добавляют воду (20 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (20 мл ×3). Экстракт промывают 10% водным раствором тиосульфата натрия (20 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) в таком порядке и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 4:1) с получением 1,0 г (95%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,21 (3H, т, J=7,1Гц), 1,55 (3H, c), 3,53 (1H, д, J=11,7Гц), 3,88 (1H, д, J=19,3Гц), 4,07-4,20 (3H, м), 4,37 (1H, д, J=12,0Гц), 5,19 (2H, c), 7,30-7,40 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 306 (M+H)⁺, 328 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 65

Этил 1-бензилоксикарбонил-4-гидрокси-3-метилпирролидин-3-карбоксилат

К раствору этил 1-бензилоксикарбонил-3-метил-4-оксопирролидин-3-карбоксилата (1,0 г, 3,28 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляют боргидрид натрия (0,19 г, 4,92 ммоль) при -20°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 20 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл) и воду (20 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (20 мл ×3). Экстракт промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 3:1) с получением 0,57 г (57%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,23-1,34 (6H, м), 2,90-3,87 (4H, м), 4,11-4,56 (3H, м), 5,14 (2H, д, J=4,2Гц), 7,24-7,40 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 308 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 66

Этил 1-бензилоксикарбонил-4-метокси-3-метилпирролидин-3-карбоксилат

К раствору этил 1-бензилоксикарбонил-4-гидрокси-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (0,55 г, 1,8 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) добавляют метилйодид (0,22 мл, 3,6 ммоль) и гидрид натрия (55% в масле, 117 мг, 2,7 ммоль) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляют воду со льдом и смесь экстрагируют этилацетатом (20 мл ×3). Экстракт промывают водой (20 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) в таком порядке и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 2:1) с получением 0,38 г (66%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,24-1,29 (6H, м), 3,19-3,73 (3H, м), 3,30 (3H, c), 3,80-4,28 (4H, м), 5,14 (2H, c), 7,29-7,39 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 322 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 67

1-Бензилоксикарбонил-4-метокси-3-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

К раствору этил 1-бензилоксикарбонил-4-метокси-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (0,38 г, 1,18 ммоль) в этаноле (4 мл) добавляют 1 н. водный раствор гидроксида натрия (4 мл) и смесь перемешивают при 40°C в течение 17,5 часов. К реакционной смеси добавляют воду (10 мл) и смесь промывают этилацетатом (10 мл ×2). К водному слою добавляют 1 н. хлористоводородную кислоту (10 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (20 мл ×3). Экстракт промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 0,31 г (89%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,33 (3H, c), 3,34-3,47 (1H, м), 3,36 (3H, c), 3,53-3,75 (2H, м), 3,85-3,95 (1H, м), 4,09-4,18 (1H, м), 5,14 (1H, c), 7,25-7,40 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 294 (M+H)⁺, 316 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 68

1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-метокси-3-метилпирролидин

К раствору 1-бензилоксикарбонил-4-метокси-3-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты (0,3 г, 1,02 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляют триэтиламин (0,29 мл, 2,05 ммоль) и дифенилфосфорилазид (0,24 мл, 1,13 ммоль) и смесь перемешивают при 125°C в течение 2 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении к остатку добавляют 1,4-диоксан (4 мл), воду (4 мл) и концентрированную хлористоводородную кислоту (1 мл) и смесь перемешивают при 50°C в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют воду (10 мл) и смесь промывают этилацетатом (10 мл). Водный слой подщелачивают 10 н. водным раствором гидроксида натрия и экстрагируют хлороформом (20 мл ×3). Экстракт промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток растворяют в этаноле (10 мл). К раствору добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (0,27 г, 1,22 ммоль) и смесь перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат, 6:1) с получением 0,27 г (72%) рацемической массы указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,41-1,45 (12H, м), 3,30-3,82 (7H, м), 4,12 (1H, кв, J=7,1Гц), 5,09-5,26 (3H, м), 7,24-7,38 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 387 (M+Na)⁺.

Далее, рацемическую массу указанного в заголовке соединения (0,68 г, 1,87 ммоль) подвергают высокоэффективной жидкостной хроматографии, используя оптически активную колонку, и фракцию α (0,29 г, 43%) и фракцию β (0,28 г, 41%), которые представляют собой энантиомеры указанного в заголовке соединения, соответственно, получают в виде бесцветных маслянистых продуктов.

Условия оптического разделения:

Колонка: CHIRALPAK AD (DAICEL, 20 мм × 250 мм)

Растворитель: 2-пропанол:гексан, 1:9

Скорость потока: 10 мл/мин

Детектирование: УФ (254 нм)

Время удерживания: примерно 18,1 минут (фракция α), примерно 23,5 минут (фракция β)

Ссылочный пример 69

3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-метокси-3-метилпирролидин (полученный из фракции α)

К раствору 1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-метокси-3-метилпирролидина (фракция α) (0,29 г, 0,8 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляют катализатор, 5% палладий на угле (содержание воды, 50%; 0,15 г), и суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 16,5 часов в атмосфере водорода. Реакционную смесь фильтруют через целит и фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого продукта. Этот продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

МС (ESI) m/z: 231 (M+H)⁺.

Пример 18

7-(3-Амино-4-метокси-3-метилпирролидин-1-ил)-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота (заместитель в положении 7, полученная из фракции α)

К раствору 3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-метокси-3-метилпирролидина в диметилсульфоксиде (2 мл) добавляют триэтиламин (0,33 мл, 2,4 ммоль) и комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (0,19 г, 0,53 ммоль) и смесь перемешивают при 40°C в течение 21,5 часа в атмосфере азота. К реакционной смеси добавляют этанол, содержащий 10% воды (10 мл), и триэтиламин (1 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и к концентрату добавляют этилацетат (20 мл) и 10% водный раствор лимонной кислоты (20 мл) для разделения на два слоя. Водный слой экстрагируют этилацетатом (20 мл ×2), органические слои объединяют, промывают водой (20 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) в таком порядке и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ:метанол, 50:1). Элюат концентрируют при пониженном давлении и к концентрату добавляют концентрированную хлористоводородную кислоту (1 мл) на бане со льдом. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 минут и промывают хлороформом (10 мл ×5). К водному слою добавляют 10 н. водный раствор гидроксида натрия до pH 12,0, а затем добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Смесь экстрагируют хлороформом (30 мл ×5) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из этанола-простого диэтилового эфира и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 103 мг (46%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного кристаллического порошка.

Т.пл.: 150-151°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 1,21 (3H, c), 1,47-1,58 (2H, м), 3,24-3,64 (4H, м), 3,31 (3H, c), 3,37 (3H, c), 3,87-3,94 (1H, м), 4,08 (1H, дд, J=12,3, 7,2Гц), 4,96-5,18 (1H, м), 7,67 (1H, д, J=13,9Гц), 8,63 (1H, д, J=2,7Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₃F₂N₃O₅:

Вычислено: C, 56,73; H, 5,48; F, 8,97; N, 9,92.

Найдено: C, 56,71; H, 5,54; F, 9,03; N, 9,73.

ИК (ATR)ν: 2931, 1718, 1617, 1513, 1450, 1438 см^-1.

МС (FAB) m/z: 424 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 70

3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-метокси-3-метилпирролидин (полученный из фракции β)

К раствору 1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-метокси-3-метилпирролидина (фракция β) (0,28 г, 0,77 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляют 5% палладий на угле (содержащий воду, 0,14 г) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов в атмосфере водорода. Реакционную смесь фильтруют через целит и фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого продукта. Этот продукт используют в последующей реакции без дополнительной очистки.

(ESI) m/z: 231 (M+H)⁺.

Пример 19

7-(3-Амино-4-метокси-3-метилпирролидин-1-ил)-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота (заместитель в положении 7, полученная из фракции β)

К раствору 3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-метокси-3-метилпирролидина в диметилсульфоксиде (1 мл) добавляют триэтиламин (0,33 мл, 2,4 ммоль) и комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (0,19 г, 0,53 ммоль) и смесь перемешивают при 40°C в течение 3 дней в атмосфере азота. К реакционной смеси добавляют этанол, содержащий 10% воды (10 мл), и триэтиламин (1 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1 часа. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении к концентрату добавляют этилацетат (20 мл) и 10% водный раствор лимонной кислоты (20 мл) для разделения на два слоя. Водный слой экстрагируют этилацетатом (20 мл ×2), органические слои объединяют, промывают водой (20 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл) в таком порядке и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ:метанол, 100:1). Элюат концентрируют при пониженном давлении и к остатку добавляют концентрированную хлористоводородную кислоту (2 мл) на бане со льдом. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут и реакционную смесь промывают хлороформом (10 мл ×5). К водному слою добавляют 10 н. водный раствор гидроксида натрия до pH 12,0, а затем добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (30 мл ×5) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают перекристаллизацией из этанола-простого диэтилового эфира-гексана. Кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 56 мг (25%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого кристаллического порошка.

Т.пл.: 162-163°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 1,20 (3H, c), 1,54-1,66 (2H, м), 3,19-3,59 (4H, м), 3,30 (3H, c), 3,56 (3H, c), 3,87-3,96 (1H, м), 4,05-4,14 (1H, м), 4,82-5,06 (1H, м), 7,66 (1H, д, J=13,9Гц), 8,68 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₀H₂₃F₂N₃O₅:

Вычислено: C, 56,73; H, 5,48; F, 8,97; N, 9,92.

Найдено: C, 56,56; H, 5,49; F, 9,09; N, 9,80.

ИК (ATR)ν: 2937, 1725, 1621, 1511, 1436 см^-1.

МС (FAB) m/z: 424 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 71

Этил (3R,4R)-4-фторметил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору (4R)-4-фторметил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидина (34,1 г, 154 ммоль) и этилхлорформиата (16,1 мл, 169 ммоль) в тетрагидрофуране (500 мл) добавляют бистриметилсилиламид лития (323 мл, 323 ммоль, 1,0M раствор в тетрагидрофуране) при 0°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (700 мл) при такой же температуре и смесь экстрагируют этилацетатом (700 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (500 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 5:1 → 2:3) с получением 35,0 г (77%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,31 (3H, т, J=7,1Гц), 1,55 (3H, д, J=7,1Гц), 2,88-3,01 (1H, м), 3,17 (1H, д, J=7,4Гц), 3,39 (1H, д, J=7,4Гц), 3,74 (1H, т, J=6,1Гц), 4,26 (2H, кв, J=7,1Гц), 4,42 (2H, дд, J=47,1, 5,1Гц), 5,49 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,26-7,38 (5H, м).

Ссылочный пример 72

Этил (3S,4R)-4-фторметил-3-метил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору этил (3R,4R)-4-фторметил-3-метил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (33,4 г, 114 ммоль) и йодметана (9,94 мл, 159 ммоль) в тетрагидрофуране (670 мл) добавляют бистриметилсилиламид калия (274 мл, 137 ммоль, 0,5M раствор в толуоле) при -78°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 10 минут. Температуру постепенно повышают при перемешивании в течение 30 минут до -10°C и к реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (700 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (700 мл ×2), органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (500 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 7:1 → 1:1) с получением 29,1 г (83%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,29 (3H, т, J=7,1Гц), 1,49 (3H, c), 1,56 (3H, т, J=8,8Гц), 2,34-2,47 (1H, м), 3,04 (1H, дд, J=9,3, 8,1Гц), 3,29 (1H, т, J=9,5Гц), 4,19 (2H, кв, J=7,1Гц), 4,34-4,59 (2H, м), 5,52 (1H, кв, J=7,0Гц), 7,28-7,39 (5H, м).

Ссылочный пример 73

(3S,4R)-4-Фторметил-3-метил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновая кислота

К раствору этил (3S,4R)-4-фторметил-3-метил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (20,0 г, 65,1 ммоль) в этаноле (400 мл) добавляют по каплям 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия (65,1 мл, 651 ммоль) и смесь перемешивают в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют воду (400 мл) на бане со льдом и водный раствор промывают простым диэтиловым эфиром (500 мл). К водному слою добавляют концентрированную хлористоводородную кислоту на бане со льдом до pH 2-3 и смесь экстрагируют хлороформом (500 мл ×3). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат подвергают азеотропной дистилляции с добавлением толуола (20 мл) и сушат при пониженном давлении, получая 19,16 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,51 (3H, c), 1,59 (3H, д, J=7,1Гц), 2,42-2,54 (1H, м), 3,12 (1H, дд, J=10,5, 7,1Гц), 3,33 (1H, дд, J=10,5, 3,9Гц), 4,60 (2H, дд, J=46,8, 5,1Гц), 5,49 (1H, кв, J=7,0Гц), 7,26-7,40 (5H, м).

Ссылочный пример 74

(3S,4S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин

К раствору (3S,4R)-4-фторметил-3-метил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновой кислоты (65,1 ммоль) и дифенилфосфорилазида (15,4 мл, 71,6 ммоль) в толуоле (380 мл) добавляют триэтиламин (18,2 мл, 130 ммоль) и смесь перемешивают на масляной бане при 110°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме изоцианата.

МС (ESI) m/z: 277 (M+H)+

Полученный неочищенный продукт в форме изоцианата растворяют в 1,4-диоксане (90 мл), добавляют воду (45 мл) и концентрированную хлористоводородную кислоту (45 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляют воду (180 мл) и смесь промывают простым диэтиловым эфиром (200 мл). К водному слою добавляют 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 9-10 на бане со льдом и смесь экстрагируют хлороформом (500 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и, после сушки безводным сульфатом натрия и фильтрования, фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме амина (10,1 г, DM041701).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,30 (3H, c), 1,55 (3H, д, J=7,1Гц), 2,18-2,32 (1H, м), 2,98 (1H, дд, J=10,3, 7,3Гц), 3,17 (1H, дд, J=10,4, 4,3Гц), 4,48-4,72 (2H, м), 5,48 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,15-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 251 (M+H)⁺.

Неочищенный продукт в форме амина (10,1 г, 40,2 ммоль) растворяют в толуоле (200 мл) и раствор 65% (масс.) раствора натрий бис(2-метоксиэтокси)алюминийгидрида в толуоле (48,3 мл, 161 ммоль) в толуоле (6 мл) добавляют по каплям в течение 15 минут на бане со льдом, так что внутренняя температура не превышает 50°C, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь охлаждают на бане со льдом и добавляют по каплям 25% (масс.) водный раствор гидроксида натрия (160 мл). После гашения раствора раствор экстрагируют толуолом (135 мл). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме амина (10,0 г).

МС (ESI) m/z: 237 (M+H)⁺.

К неочищенному продукту в форме амина (10,0 г, 40,2 ммоль) добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (9,65 г, 44,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 часов. После перемешивания растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат; 19:1 → 5:4) с получением 1,78 г (5 стадий, 8%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного сиропообразного вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,32 (3H, д, J=6,6Гц), 1,42 (9H, c), 1,52 (3H, c), 2,35 (1H, тд, J=14,2, 7,1Гц), 2,45 (1H, т, J=8,3Гц), 2,57 (1H, д, J=9,3Гц), 2,70 (1H, д, J=9,3Гц), 2,92 (1H, т, J=8,8Гц), 3,31 (1H, кв, J=6,6Гц), 4,42 (1H, ддд, J=47,1, 9,3, 6,1Гц), 4,63 (1H, ддд, J=47,4, 9,3, 6,1Гц), 4,94 (1H, c), 7,19-7,31 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 337 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 75

(3S,4S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин

К раствору (3S,4S)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидина (1,35 г, 4,01 ммоль) в этаноле (30 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (содержащий 52,8% воды, 1,30 г), и суспензию перемешивают на масляной бане при 40°C в течение 12 часов в атмосфере газообразного водорода. После удаления катализатора фильтрованием фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 932 мг (количественный выход) неочищенного целевого соединения в виде бесцветного прозрачного сиропообразного вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,44 (9H, c), 1,47 (3H, c), 2,16-2,30 (1H, м), 2,85 (1H, д, J=11,5Гц), 3,01 (1H, дд, J=11,3, 7,4Гц), 3,20 (1H, дд, J=11,3, 8,6Гц), 3,29 (1H, д, J=11,8Гц), 4,49-4,69 (2H, м), 4,98 (1H, c).

МС (ESI) m/z: 233 (M+H)⁺.

Пример 20

7-[(3S,4S)-3-Амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

(3S,4S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин (221 мг, 0,951 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (343 мг, 0,951 ммоль) и триэтиламин (0,159 мл, 1,14 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (3 мл) и перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 18 часов. После концентрирования реакционной смеси к концентрату добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (40 мл) и триэтиламин (1 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Концентрат растворяют в этилацетате (100 мл ×2) и раствор промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (50 мл), водой (50 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования остатка фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (20 мл) и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь промывают хлороформом (100 мл ×5) и к водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12. Добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4, и раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×4). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 269 мг (24%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 187-189°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,38 (3H, c), 1,40-1,51 (1H, м), 1,51-1,63 (1H, м), 2,45-2,58 (1H, м), 3,49 (1H, д, J=9,6Гц), 3,58 (3H, c), 3,64-3,73 (2H, м), 3,85 (1H, т, J=9,4Гц), 4,00-4,05 (1H, м), 4,69 (1H, ддд, J=37,3, 10,0, 5,9Гц), 4,80-4,84 (1H, м), 5,00 (1H, д, J=64,0Гц), 7,66 (1H, д, J=14,5Гц), 8,42 (1H, д, J=2,7Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₂F₃N₃O₄·0,25H₂O:

Вычислено: C, 55,88; H, 5,28; F, 13,26; N, 9,77.

Найдено: C, 55,58; H, 5,29; F, 13,17; N, 9,84.

ИК (ATR)ν: 2962, 2873, 1720, 1618, 1510, 1435, 1363, 1311, 1275, 1234, 1186, 1122 см^-1.

Пример 21

7-[(3S,4S)-3-Амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

(3S,4S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин (46,5 мг, 0,200 ммоль), комплекс 1-циклопропил-6,7-дифтор-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (68,6 мг, 0,200 ммоль) и триэтиламин (0,0335 мл, 0,240 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (0,5 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 19 часов. После концентрирования смеси к концентрату добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (20 мл) и триэтиламин (0,5 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, остаток растворяют в этилацетате (50 мл ×2) и раствор промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (50 мл), водой (50 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (5 мл) на бане со льдом и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь промывают хлороформом (100 мл ×5), к водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×3), органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 42,6 мг (52%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

Т.пл.: 226-229°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,82-0,90 (1H, м), 0,98-1,11 (2H, м), 1,14-1,22 (1H, м), 1,39 (3H, c), 2,47-2,60 (1H, м), 3,44 (1H, д, J=10,0Гц), 3,58 (3H, c), 3,73 (1H, дд, J=10,4, 2,6Гц), 3,78 (2H, д, J=8,3Гц), 4,04-4,11 (1H, м), 4,79-4,88 (2H, м), 7,65 (1H, д, J=14,4Гц), 8,49 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₀H₂₃F₂N₃O₄:

Вычислено: C, 58,96; H, 5,69; F, 9,33; N, 10,31.

Найдено: C, 58,90; H, 5,70; F, 9,33; N, 10,19.

ИК (ATR)ν: 3450, 3374, 3079, 2962, 2873, 1724, 1620, 1508, 1439, 1373, 1315, 1273, 1228, 1186, 1153, 1109 см^-1.

Пример 22

7-[(3S,4S)-3-Амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

(3S,4S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин (932 мг, 4,01 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (922 мг, 2,67 ммоль) и триэтиламин (0,447 мл, 3,20 ммоль) растворяют в сульфолане (5 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 166 часов. После концентрирования реакционной смеси к концентрату добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (80 мл) и триэтиламин (1 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 90°C в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, концентрат растворяют в этилацетате (200 мл ×2) и промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (100 мл), водой (100 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией, используя короткую колонку с силикагелем (элюирование смесью хлороформ:метанол, 49:1 → 9:1). Остаток растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (20 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут и промывают хлороформом (100 мл ×5). К водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×4) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают перекристаллизацией из этанола. Кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 97,7 мг (9%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 135-137°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,18-1,32 (1H, м), 1,38 (3H, c), 1,55-1,66 (1H, м), 2,52 (3H, c), 2,53-2,65 (1H, м), 3,20 (1H, д, J=9,8Гц), 3,49 (1H, т, J=9,2Гц), 3,70 (1H, т, J=8,9Гц), 3,78 (1H, дд, J=9,8, 3,2Гц), 4,09 (1H, дт, J=9,9, 4,4Гц), 4,70 (1H, ддд, J=41,9, 9,4, 6,0Гц), 4,80-4,86 (1H, м), 5,01 (1H, д, J=67,9Гц), 7,69 (1H, д, J=14,0Гц), 8,45 (1H, д, J=3,2Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₂F₃N₃O₄·0,75H₂O:

Вычислено: C, 56,80; H, 5,60; N, 9,94.

Найдено: C, 56,52; H, 5,53; N, 10,06.

ИК (ATR)ν: 2968, 2873, 1718, 1614, 1508, 1462, 1431, 1396, 1358, 1319, 1282, 1163, 1128, 1101 см^-1.

Пример 23

7-[(3S,4S)-3-Амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

(3S,4S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин (298 мг, 1,28 ммоль), комплекс 1-циклопропил-6,7-дифтор-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (280 мг, 0,855 ммоль) и триэтиламин (0,143 мл, 1,03 ммоль) растворяют в сульфолане (1,5 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 142 часов. Реакционную смесь концентрируют, к концентрату добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (40 мл) и триэтиламин (1 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 90°C в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток растворяют в этилацетате (100 мл ×2) и промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (50 мл), водой (50 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают хроматографией, используя короткую колонку с силикагелем (элюирование смесью хлороформ-метанол, 49:1 → 9:1), и остаток растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (10 мл). После перемешивания раствора при комнатной температуре в течение 30 минут реакционную смесь промывают хлороформом (50 мл ×5). К водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×4) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 109 мг (33%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 212-215°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,75-0,90 (2H, м), 1,10-1,25 (2H, м), 1,38 (3H, c), 2,56-2,61 (1H, м), 2,58 (3H, c), 3,29 (1H, д, J=9,6Гц), 3,53-3,63 (2H, м), 3,64 (1H, дд, J=9,8, 2,7Гц), 4,10-4,17 (1H, м), 4,68 (1H, ддд, J=34,7, 10,2, 5,3Гц), 4,80-4,82 (1H, м), 7,67 (1H, д, J=14,0Гц), 8,57 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₀H₂₃F₂N₃O₃:

Вычислено: C, 61,37; H, 5,92; F, 9,71; N, 10,74.

Найдено: C, 61,26; H, 5,91; F, 9,86; N, 10,72.

ИК (ATR)ν: 3361, 3087, 2974, 2873, 1712, 1616, 1545, 1508, 1458, 1431, 1358, 1315, 1228, 1188, 1151, 1109 см^-1.

Ссылочный пример 76

(3S,4S)-3-Этоксикарбонил-4-фторметил-1-[(1R)-1-фенилэтил]-2-пирролидон

К раствору (4S)-4-фторметил-1-[(1R)-1-фенилэтил]-2-пирролидона (7,59 г, 34,3 ммоль) и этилхлорформиата (3,92 мл, 41,2 ммоль) в тетрагидрофуране (150 мл) добавляют бистриметилсилиламид лития (75,5 мл, 75,5 ммоль, 1,0M раствор в тетрагидрофуране) при 0°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 20 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (200 мл) при такой же температуре и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 5:1 → 2:3) с получением 8,50 г (85%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,33 (3H, т, J=7,2Гц), 1,56 (3H, д, J=7,4Гц), 2,80 (1H, дд, J=9,8, 6,1Гц), 2,94-3,11 (1H, м), 3,34 (1H, д, J=7,1Гц), 3,53 (1H, т, J=9,1Гц), 4,23-4,31 (3H, м), 4,37 (1H, дд, J=5,6, 2,7Гц), 5,49 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,26-7,37 (5H, м).

Ссылочный пример 77

(3R,4S)-3-Этоксикарбонил-4-фторметил-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]-2-пирролидон

К раствору (3S,4S)-3-этоксикарбонил-4-фторметил-1-[(1R)-1-фенилэтил]-2-пирролидона (8,30 г, 28,3 ммоль) и йодметана (2,47 мл, 39,6 ммоль) в тетрагидрофуране (170 мл) добавляют бистриметилсилиламид калия (67,9 мл, 34,0 ммоль, 0,5M раствор в толуоле) при -78°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 10 минут. При перемешивании температуру постепенно повышают до -10°C в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (200 мл), смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2) и органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (150 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 7:1 → 1:1) с получением 7,91 г (91%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,10 (3H, т, J=7,2Гц), 1,50 (3H, c), 1,57 (3H, дд, J=7,1, 2,4Гц), 2,46-2,60 (1H, м), 2,89 (1H, т, J=9,5Гц), 3,35 (1H, дд, J=9,4, 7,9Гц), 4,00-4,15 (2H, м), 4,20-4,45 (2H, м), 5,56 (1H, кв, J=7,3Гц), 7,26-7,37 (5H, м).

Ссылочный пример 78

(3R,4S)-4-Фторметил-3-метил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновая кислота

К раствору (3R,4S)-3-этоксикарбонил-4-фторметил-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]-2-пирролидона (1,05 г, 3,42 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляют по каплям 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия (3,42 мл, 34,2 ммоль) на бане со льдом и смесь перемешивают в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) на бане со льдом и водный раствор промывают простым диэтиловым эфиром (50 мл). К водному слою добавляют концентрированную хлористоводородную кислоту до pH 2-3 на бане со льдом и раствор экстрагируют хлороформом (50 мл ×3). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат подвергают азеотропной дистилляции с добавлением толуола (20 мл) и сушат при пониженном давлении, получая 950 мг (99%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,53-1,61 (6H, м), 2,50-2,61 (1H, м), 3,02 (1H, дд, J=10,5, 3,4Гц), 3,49 (1H, дд, J=10,5, 7,1Гц), 4,34-4,56 (2H, м), 5,49 (1H, кв, J=7,0Гц), 7,14-7,36 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 280 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 79

(3R,4R)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин

К раствору (3R,4S)-4-фторметил-3-метил-2-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновой кислоты (950 мг, 3,40 ммоль) и дифенилфосфорилазида (0,806 мл, 3,74 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляют триэтиламин (0,948 мл, 6,80 ммоль) и смесь перемешивают на масляной бане при 110°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме изоцианата.

МС (ESI) m/z: 277 (M+H)⁺

Неочищенный продукт в форме изоцианата растворяют в 1,4-диоксане (5 мл) и к этому раствору добавляют воду (2,5 мл) и концентрированную хлористоводородную кислоту (2,5 мл) на бане со льдом. После перемешивания смеси при комнатной температуре в течение 13 часов к реакционной смеси добавляют воду (10 мл) и смесь промывают простым диэтиловым эфиром (50 мл). К водному слою добавляют 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 9-10 на бане со льдом и раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×3). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме амина (470 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,36 (3H, c), 1,54 (3H, д, J=7,1Гц), 2,29-2,42 (1H, м), 2,82 (1H, дд, J=10,3, 4,4Гц), 3,35 (1H, дд, J=10,1, 7,4Гц), 4,32-4,62 (2H, м), 5,47 (1H, кв, J=7,0Гц), 7,26-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 251 (M+H)⁺.

Неочищенный продукт в форме амина (470 мг, 1,88 ммоль) растворяют в толуоле (10 мл) и добавляют по каплям раствор 65% (масс.) раствора бис(2-метоксиэтокси)алюминийгидрида натрия в толуоле (2,25 мл, 7,52 ммоль) в толуоле (2 мл) в течение 15 минут на бане со льдом, так что внутренняя температура не превышает 50°C, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь охлаждают на бане со льдом и добавляют по каплям 25% (масс.) водный раствор гидроксида натрия (5 мл). После гашения раствора раствор экстрагируют толуолом (40 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме амина (490 мг).

МС (ESI) m/z: 237 (M+H)⁺.

К неочищенному продукту в форме амина (490 мг, 1,88 ммоль) добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (451 мг, 2,07 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 17 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 19:1 → 5:4) с получением 404 мг (5 стадий, 35%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного сиропообразного вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д. 1,34 (3H, д, J=6,6Гц), 1,44 (9H, с), 1,53 (3H, с), 2,31 (1H, тд, J=14,3, 7,2Гц), 2,52 (1H, т, J=8,4Гц), 2,59 (1H, д, J=9,0Гц), 2,69-2,77 (2H, м), 3,28 (1H, кв, J=6,6Гц), 4,42 (1H, ддд, J=47,2, 9,4, 6,1Гц), 4,62 (1H, ддд, J=47,4, 9,4, 6,2Гц), 4,98 (1H, с), 7,22-7,30 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 337 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 80

(3R,4R)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин

К раствору (3R,4R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидина (250 мг, 0,743 ммоль) в этаноле (10 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (содержание воды 52,8%, 250 мг), и суспензию перемешивают на масляной бане при 40°C в течение 1,5 часов в атмосфере газообразного водорода. После удаления катализатора фильтрованием фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 169 мг (98%) неочищенного целевого соединения в виде бесцветного прозрачного сиропообразного вещества.

МС (ESI) m/z: 233 (M+H)⁺.

Пример 24

7-[(3R,4R)-3-Амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

(3R,4R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фторметил-3-метилпирролидин (169 мг, 0,728 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторборан (268 мг, 0,742 ммоль) и триэтиламин (0,124 мл, 0,891 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (2 мл) и раствор перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 16 часов. После концентрирования реакционной смеси добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (55 мл) и триэтиламин (1 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении остаток растворяют в этилацетате (100 мл ×2) и промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (100 мл), водой (100 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (10 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут и промывают хлороформом (100 мл ×4). К водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×3) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и концентрат очищают перекристаллизацией из этанола. Кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 216 мг (67%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 185-188°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,38 (3H, c), 1,50-1,62 (1H, м), 1,61-1,70 (1H, м), 2,45-2,58 (1H, м), 3,39 (1H, д, J=10,5Гц), 3,59 (3H, c), 3,70 (1H, т, J=9,3Гц), 3,75-3,84 (2H, м), 4,02-4,09 (1H, м), 4,70 (1H, ддд, J=40,7, 9,6, 6,1Гц), 4,78-4,81 (1H, м), 4,94 (1H, ддд, J=56,6, 9,1, 6,1Гц), 7,67 (1H, д, J=14,7Гц), 8,48 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₀H₂₂F₃N₃O₄·1H₂O:

Вычислено: C, 54,17; H, 5,46; F, 12,85; N, 9,48.

Найдено: C, 54,20; H, 5,52; F, 12,25; N, 8,99.

ИК (ATR)ν: 2970, 2868, 1724, 1616, 1574, 1512, 1437, 1390, 1354, 1317, 1298, 1271, 1192, 1142 см^-1.

Ссылочный пример 81

трет-Бутил (3S)-4-фтор-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат (изомер A)

К раствору трет-бутил (3S)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (6,83 г, 22,5 ммоль) в тетрагидрофуране (135 мл) добавляют бистриметилсилиламид лития (27,0 мл, 27,0 ммоль, 1,0M раствор в тетрагидрофуране) при 0°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 15 минут. К реакционной смеси добавляют N-фторбензолсульфонимид (13,3 г, 42,2 ммоль) при такой же температуре и смесь перемешивают в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (300 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (300 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (300 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 5:1 → 2:3) с получением 5,80 г (80%) указанного в заголовке соединения (изомера A) в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,35 (3H, д, J=2,9Гц), 1,37 (9H, c), 1,56 (3H, д, J=7,1Гц), 3,10 (1H, дд, J=10,2, 1,1Гц), 3,17 (1H, д, J=10,3Гц), 5,23 (1H, д, J=51,7Гц), 5,50 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,26-7,39 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 322 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 82

трет-Бутил (3S)-4-фтор-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат (изомер B)

К раствору изомера A трет-бутил (3S)-4-фтор-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (3,85 г, 12,0 ммоль) в тетрагидрофуране (70 мл) добавляют диизопропиламид лития (6,66 мл, 12,0 ммоль, 1,8M раствор в тетрагидрофуране) при -78°C и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 15 минут. При такой же температуре к реакционной смеси добавляют 2,6-ди-трет-бутилфенол (2,97 г, 14,4 ммоль) и температуру постепенно повышают при перемешивании в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (200 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 5:1 → 2:3) с получением 2,32 г (60%) указанного в заголовке соединения (изомера B, имеющего более высокую полярность, чем изомер A) в виде белого твердого продукта. Извлекают также 1,53 г (40%) изомера A.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,38 (12H, c), 1,53 (3H, д, J=7,1Гц), 2,97 (1H, д, J=10,5Гц), 3,52 (1H, д, J=10,3Гц), 4,68 (1H, д, J=51,7Гц), 5,49 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,26-7,39 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 322 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 83

трет-Бутил (3S)-4-фтор-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат (изомер A)

К раствору трет-бутил (3S)-4-фтор-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (изомер A) (2,58 г, 8,03 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляют на бане со льдом 1,01M раствор борана в тетрагидрофуране (26,2 мл, 26,5 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, добавляют воду (5 мл), этанол (45 мл) и триэтиламин (3 мл) на бане со льдом и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1,5 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении добавляют воду (100 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 12:1 → 2:1) с получением 2,15 г (87%) указанного в заголовке соединения (изомер A) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,29 (3H, д, J=3,7Гц), 1,32 (3H, д, J=6,6Гц), 1,46 (9H, c), 2,44 (1H, д, J=8,8Гц), 2,68 (1H, дд, J=31,7, 11,9Гц), 2,96 (1H, дкв, J=31,0, 5,7Гц), 3,06 (1H, д, J=8,8Гц), 3,32 (1H, кв, J=6,5Гц), 5,22 (1H, дд, J=55,2, 4,9Гц), 7,14-7,31 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 308 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 84

трет-Бутил (3S)-4-фтор-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат (изомер B)

К раствору трет-бутил (3S)-4-фтор-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (изомер B) (1,64 г, 5,10 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) добавляют на бане со льдом 1,01M раствор борана в тетрагидрофуране (16,7 мл, 16,9 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении добавляют на бане со льдом воду (5 мл), этанол (45 мл) и триэтиламин (2 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1,5 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении добавляют воду (100 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 12:1 → 2:1) с получением 1,55 г (99%) указанного в заголовке соединения (изомер B) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,29 (3H, д, J=1,2Гц), 1,34 (3H, д, J=6,6Гц), 1,43 (9H, c), 2,39 (1H, д, J=9,5Гц), 2,74 (1H, ддд, J=34,4, 12,0, 1,7Гц), 3,02 (1H, д, J=9,5Гц), 3,35 (1H, ддд, J=31,5, 12,2, 4,6Гц), 3,44 (1H, кв, J=6,6Гц), 4,78 (1H, ддд, J=54,2, 4,8, 1,6Гц), 7,19-7,32 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 308 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 85

трет-Бутил (3S)-1-бензилоксикарбонил-4-фтор-3-метилпирролидин-3-карбоксилат (изомер A)

К раствору трет-бутил (3S)-4-фтор-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (изомер A) (2,15 г, 6,99 ммоль) в дихлорметане (40 мл) добавляют бензилоксикарбонилхлорид (1,50 мл, 10,5 ммоль) и смесь перемешивают на масляной бане при 60°C в течение 20 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 12:1 → 2:1) с получением 1,81 г (77%) указанного в заголовке соединения (изомера A) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,35 (3H, дд, J=7,8, 2,2Гц), 1,41 (9H, уш.c), 3,24 (1H, дд, J=17,0, 10,9Гц), 3,61-3,75 (2H, м), 4,08 (1H, дд, J=10,7, 2,7Гц), 5,14 (2H, д, J=4,6Гц), 5,17 (1H, д, J=51,0Гц), 7,26-7,38 (5H, м).

Ссылочный пример 86

трет-Бутил (3S)-1-бензилоксикарбонил-4-фтор-3-метилпирролидин-3-карбоксилат (изомер B)

К раствору изомера B трет-бутил (3S)-4-фтор-3-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (1,55 г, 5,04 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляют бензилоксикарбонилхлорид (1,08 мл, 7,56 ммоль) и смесь перемешивают на масляной бане при 60°C в течение 24 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 20:1 → 3:2) с получением 1,38 г (81%) указанного в заголовке соединения (изомера B) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,24 (3H, c), 1,47 (9H, c), 3,49 (1H, дд, J=26,9, 11,0Гц), 3,60-3,80 (2H, м), 3,90 (1H, дд, J=11,0, 3,7Гц), 4,90 (1H, дд, J=51,8, 2,9Гц), 5,14 (2H, дд, J=16,6, 11,7Гц), 7,22-7,38 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 360 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 87

(3S)-1-Бензилоксикарбонил-4-фтор-3-метилпирролидин-3-карбоновая кислота (изомер A)

К раствору трет-бутил (3S)-1-бензилоксикарбонил-4-фтор-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (изомер A) (1,80 г, 5,33 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляют по каплям трифторуксусную кислоту (10 мл) и смесь перемешивают в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и к концентрату добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл) при пониженном давлении. Водный раствор промывают простым диэтиловым эфиром (50 мл), к водному слою добавляют 1 моль/л хлористоводородную кислоту до pH 2-3 и смесь экстрагируют хлороформом (200 мл ×2). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат подвергают азеотропной дистилляции с добавлением толуола (20 мл) и сушат при пониженном давлении, получая 1,86 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения (изомер A) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,44 (3H, д, J=4,9Гц), 3,32 (1H, т, J=12,0Гц), 3,67-3,83 (2H, м), 4,14 (1H, т, J=10,3Гц), 5,09-5,17 (2H, м), 5,22 (1H, д, J=43,9Гц), 7,27-7,38 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 304 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 88

(3S)-1-Бензилоксикарбонил-4-фтор-3-метилпирролидин-3-карбоновая кислота (изомер B)

К раствору изомера B трет-бутил (3S)-1-бензилоксикарбонил-4-фтор-3-метилпирролидин-3-карбоксилата (1,35 г, 4,00 ммоль) в дихлорметане (7 мл) добавляют по каплям трифторуксусную кислоту (7 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают в течение 2 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении к концентрату добавляют на бане со льдом насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл) и водный раствор промывают простым диэтиловым эфиром (50 мл). К водному слою добавляют 1 моль/л хлористоводородную кислоту до pH 2-3 и раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×2). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат подвергают азеотропной дистилляции с добавлением толуола (20 мл) и сушат при пониженном давлении, получая 1,25 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения (изомера B) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,33 (3H, c), 3,57 (1H, дд, J=29,4, 11,0Гц), 3,66-3,86 (2H, м), 3,95 (1H, дд, J=10,8, 6,1Гц), 4,99 (1H, дд, J=51,5, 3,2Гц), 5,16 (2H, c), 7,15-7,52 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 304 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 89

(3R)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидин (изомер A)

К раствору (3S)-1-бензилоксикарбонил-4-фтор-3-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты (изомер A) (1,86 г, 5,33 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) добавляют 1,1'-карбонилбис-1H-имидазол (1,30 г, 8,00 ммоль) и смесь перемешивают в течение 1 часа. Газообразный аммиак барботируют в реакционную смесь в течение 1,5 часов и раствор концентрируют при пониженном давлении. К концентрату добавляют воду (50 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат подвергают азеотропной дистилляции с добавлением толуола (20 мл) и сушат при пониженном давлении, получая 1,80 г (количественный выход) неочищенного продукта (изомер A) в форме амида в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,41 (3H, c), 3,40 (1H, д, J=12,0Гц), 3,60-3,97 (3H, м), 5,12-5,31 (3H, м), 5,48-5,89 (2H, м), 7,23-7,35 (5H, м).

К раствору неочищенного продукта в форме амида (1,80 г, 5,33 ммоль) в трет-бутиловом спирте (20 мл) добавляют тетраацетат свинца (4,73 г, 10,7 ммоль) и смесь перемешивают на масляной бане при 80°C в течение 15 минут. После того как смеси дают охладиться, к реакционной смеси добавляют бикарбонат натрия (5 г) и простой диэтиловый эфир (20 мл) и смесь перемешивают в течение 30 минут на бане со льдом. После удаления нерастворимого содержимого фильтрованием через целит фильтрат и раствор, используемый для промывки, объединяют и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом магния и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 20:1 → 3:2) с получением 1,00 г (53%) указанного в заголовке соединения (изомера A) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 1,42 (9H, c), 1,51 (3H, дд, J=8,8, 2,9Гц), 3,42 (1H, дд, J=11,8, 2,5Гц), 3,53 (1H, д, J=11,5Гц), 3,59-3,72 (1H, м), 3,71-3,87 (1H, м), 4,50 (1H, д, J=28,7Гц), 5,14 (2H, c), 5,35 (1H, дд, J=52,0, 26,0Гц), 7,26-7,39 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 375 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 90

(3R)-1-Бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидин (изомер B)

К раствору (3S)-1-бензилоксикарбонил-4-фтор-3-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты (изомер B) (1,25 г, 4,00 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) добавляют 1,1'-карбонилбис-1H-имидазол (973 мг, 6,00 ммоль) и смесь перемешивают в течение 1 часа. После барботирования газообразного аммиака в реакционную смесь в течение 1,5 часов смесь концентрируют при пониженном давлении. К концентрату добавляют воду (50 мл) и раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат подвергают азеотропной дистилляции с толуолом (20 мл) и сушат при пониженном давлении, получая 1,20 г (количественный выход) неочищенного продукта в форме амида (изомера B) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,31 (3H, c), 3,61 (1H, дд, J=25,6, 10,4Гц), 3,69-3,79 (1H, м), 3,83 (2H, дд, J=16,7, 3,9Гц), 4,96 (1H, д, J=51,5Гц), 5,15 (2H, уш.c), 5,58 (2H, д, J=59,6Гц), 7,23-7,40 (5H, м).

К раствору неочищенного продукта в форме амида (1,20 г, 4,00 ммоль) в трет-бутиловом спирте (15 мл) добавляют тетраацетат свинца (3,55 г, 8,00 ммоль) и смесь перемешивают на масляной бане при 80°C в течение 1 часа. После того как реакционной смеси дают охладиться, к реакционной смеси добавляют бикарбонат натрия (4 г) и простой диэтиловый эфир (20 мл) и смесь перемешивают на бане со льдом в течение 1 часа. Нерастворимое содержимое удаляют фильтрованием через целит и фильтрат и промывочный раствор нерастворимого содержимого объединяют и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом магния и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 20:1 → 3:2) с получением 1,03 г (73%) указанного в заголовке соединения (изомер B) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,42 (3H, дд, J=4,4, 1,2Гц), 1,44-1,45 (9H, м), 3,42 (1H, т, J=11,2Гц), 3,62-3,71 (1H, м), 3,76 (1H, дд, J=10,3, 2,5Гц), 3,84 (1H, т, J=10,7Гц), 4,84 (1H, д, J=54,4Гц), 4,92 (1H, д, J=56,9Гц), 5,14 (2H, дд, J=15,3, 13,1Гц), 7,26-7,52 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 375 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 91

(3R)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидин (изомер A)

К раствору (3R)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидина (изомер A) (271 мг, 0,769 ммоль) в этаноле (10 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (содержащий 52,8% воды, 27,0 мг), и суспензию перемешивают в течение 2 часов в атмосфере газообразного водорода. После удаления катализатора фильтрованием фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 156 мг (93%) неочищенного целевого соединения (изомера A) в виде бесцветного прозрачного сиропообразного вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,43-1,44 (12H, м), 3,06 (1H, дд, J=13,4, 1,7Гц), 3,13 (1H, д, J=13,4Гц), 3,34 (1H, дд, J=13,4, 4,6Гц), 3,42 (1H, дд, J=13,4, 4,6Гц), 4,58 (1H, c), 5,16 (1H, д, J=53,7Гц).

МС (ESI) m/z: 219 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 92

(3R)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидин (изомер B)

К раствору (3R)-1-бензилоксикарбонил-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидина (изомер B) (304 мг, 0,863 ммоль) в этаноле (12 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (содержащий 52,8% воды, 30,0 мг), и суспензию перемешивают в течение 2 часов в атмосфере газообразного водорода. После удаления катализатора фильтрованием фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 182 мг (97%) неочищенного целевого соединения (изомера B) в виде бесцветного прозрачного сиропообразного вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,40 (3H, д, J=1,7Гц), 1,45 (9H, c), 3,11-3,17 (2H, м), 3,19-3,25 (1H, м), 3,31 (1H, дд, J=13,7, 4,4Гц), 4,75 (1H, дд, J=55,3, 3,6Гц), 4,99 (1H, c).

МС (ESI) m/z: 219 (M+H)⁺.

Пример 25

7-[(3R)-3-Амино-4-фтор-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Изомер A (3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидина (156 мг, 0,713 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (278 мг, 0,769 ммоль) и триэтиламин (0,129 мл, 0,923 ммоль) добавляют к диметилсульфоксиду (2 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 19 часов. После концентрирования смеси к концентрату добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (60 мл) и триэтиламин (2 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и концентрат растворяют в этилацетате (100 мл ×2). Раствор промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (100 мл), водой (100 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (10 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь промывают хлороформом (100 мл ×4), к водному слою добавляют 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия на бане со льдом до pH 12 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×3) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и концентрат очищают перекристаллизацией из этанола. Кристаллы сушат с получением 165 мг (52%) указанного в заголовке соединения (из изомера A заместителя в положении 7) в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 160-163°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,38 (3H, д, J=2,5Гц), 1,40-1,48 (1H, м), 1,50-1,62 (1H, м), 3,44 (1H, д, J=10,3Гц), 3,59 (3H, c), 3,68-3,80 (2H, м), 4,00-4,05 (1H, м), 4,29 (1H, дд, J=40,0, 13,5Гц), 4,82-4,87 (1H, м), 5,03 (1H, дд, J=65,7, 4,7Гц), 7,69 (1H, д, J=14,2Гц), 8,41 (1H, д, J=2,9Гц).

Элементный анализ для C₁₉H₂₀F₃N₃O₄·0,25H₂O:

Вычислено: C, 54,87; H, 4,97; F, 13,70; N, 10,10.

Найдено: C, 54,71; H, 4,98; F, 13,54; N, 10,09.

ИК (ATR)ν: 3386, 2972, 2881, 1722, 1624, 1518, 1452, 1373, 1325, 1279, 1223, 1190, 1149, 1122 см^-1.

Пример 26

Изомер В (3R)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидина (182 мг, 0,833 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (311 мг, 0,863 ммоль) и триэтиламин (0,144 мл, 1,04 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (2 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 19 часов. После концентрирования смеси добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (60 мл) и триэтиламин (3 мл), смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, концентрат растворяют в этилацетате (100 мл ×2) и раствор промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (100 мл), водой (100 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (10 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь промывают хлороформом (100 мл ×4), к водному слою добавляют 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12 на бане со льдом и добавляют к раствору хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×3) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 176 мг (51%) указанного в заголовке соединения (из изомера B заместителя в положении 7) в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 206-208°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,29 (3H, уш.c), 1,57-1,74 (2H, м), 3,37 (1H, д, J=9,8Гц), 3,56-3,67 (1H, м), 3,60 (3H, c), 3,83 (1H, д, J=10,0Гц), 4,08 (1H, кв, J=6,3Гц), 4,34 (1H, дд, J=43,3, 13,1Гц), 4,77-4,84 (1H, м), 4,93 (1H, ддд, J=52,7, 10,0, 3,2Гц), 7,68 (1H, д, J=14,5Гц), 8,50 (1H, c).

Элементный анализ для C₁₉H₂₀F₃N₃O₄:

Вычислено: C, 55,47; H, 4,90; F, 13,85; N, 10,21.

Найдено: C, 55,29; H, 4,86; F, 13,99; N, 10,33.

ИК (ATR)ν: 3373, 3300, 3074, 2979, 2881, 2837, 1709, 1620, 1510, 1435, 1378, 1338, 1313, 1269, 1225, 1186, 1130 см^-1.

Пример 27

7-[(3R)-3-Амино-4-фтор-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Изомер А (3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-фтор-3-метилпирролидина (397 мг, 1,82 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (418 мг, 1,21 ммоль) и триэтиламин (0,202 мл, 1,45 ммоль) растворяют в сульфолане (2 мл) на масляной бане при 35°C и смесь перемешивают в течение 264 часов. После концентрирования смеси к концентрату добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (80 мл) и триэтиламин (1 мл) на масляной бане при 90°C и смесь перемешивают в течение 30 минут. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении остаток растворяют в этилацетате (200 мл ×2) и раствор промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (100 мл), водой (100 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия, после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией, используя короткую колонку с силикагелем (элюирование смесью хлороформ:метанол, 49:1 → 9:1). Остаток растворяют в хлористоводородной кислоте (20 мл), раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут и промывают хлороформом (100 мл ×5). К водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×4) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении, концентрат очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 28,3 мг (6%) указанного в заголовке соединения (из изомера A заместителя в положении 7) в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 215-217°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,20-1,32 (1H, м), 1,37 (3H, д, J=2,7Гц), 1,54-1,67 (1H, м), 2,51 (3H, c), 3,17 (1H, д, J=9,8Гц), 3,47 (1H, дд, J=29,0, 12,6Гц), 3,86 (1H, д, J=10,0Гц), 4,05-4,12 (1H, м), 4,30 (1H, ддд, J=40,0, 13,2, 3,2Гц), 4,80-4,85 (1H, м), 5,01 (1H, ддд, J=67,8, 9,4, 4,6Гц), 7,70 (1H, д, J=14,0Гц), 8,45 (1H, д, J=3,4Гц).

Элементный анализ для C₁₉H₂₀F₃N₃O₃·0,75H₂O:

Вычислено: C, 55,81; H, 5,30; N, 10,28.

Найдено: C, 55,81; H, 4,89; N, 10,14.

ИК (ATR)ν: 3394, 3097, 2970, 2941, 2870, 1726, 1618, 1599, 1508, 1456, 1425, 1319, 1267, 1225, 1190, 1146 см^-1.

Ссылочный пример 93

трет-Бутил (3S)-3-гидроксиметил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил 5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (4,00 г, 13,8 ммоль) в N,N-диметилформамиде (40 мл) добавляют параформальдегид (0,830 г, 27,7 ммоль) и гидрид натрия (0,600 г, 55% в масле, 13,8 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют на бане со льдом 10% водный раствор лимонной кислоты (150 мл) и раствор экстрагируют этилацетатом (300 мл ×2). Органический слой промывают водой (100 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 7:3 → 1:4) с получением 1,03 г (23%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,35 (9H, c), 1,53 (3H, д, J=7,3Гц), 2,40 (1H, д, J=17,3Гц), 2,51 (1H, дд, J=7,8, 5,4Гц), 2,78 (1H, д, J=17,1Гц), 3,21 (1H, д, J=10,3Гц), 3,39 (1H, д, J=10,5Гц), 3,61 (1H, дд, J=11,2, 7,8Гц), 3,77 (1H, дд, J=11,2, 5,4Гц), 5,51 (1H, кв, J=7,2Гц), 7,26-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 320 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 94

трет-Бутил (3S)-3-{[трет-бутил(диметил)силилокси]метил}-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3S)-3-гидроксиметил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (8,23 г, 25,8 ммоль) и имидазола (2,63 г, 38,7 ммоль) в N,N-диметилформамиде (150 мл) добавляют трет-бутилдиметилсилилхлорид (4,66 г, 31,0 ммоль) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (300 мл) на бане со льдом и смесь экстрагируют простым диэтиловым эфиром (300 мл ×2). Органический слой промывают водой (300 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом магния. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 10:1 → 1:1) с получением 7,98 г (71%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,05 (3H, c), 0,06 (3H, c), 0,88 (9H, c), 1,35 (9H, c), 1,51 (3H, д, J=7,1Гц), 2,47 (1H, д, J=17,1Гц), 2,77 (1H, д, J=17,3Гц), 3,28 (2H, дд, J=26,7, 10,1Гц), 3,68 (2H, дд, J=14,4, 9,5Гц), 5,49 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,25-7,35 (5H, м).

Ссылочный пример 95

трет-Бутил (3S)-3-{[трет-бутил(диметил)силилокси]метил}-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3S)-3-{[трет-бутил(диметил)силилокси]метил}-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (8,65 г, 19,9 ммоль) и йодметана (1,37 мл, 21,9 ммоль) в тетрагидрофуране (173 мл) добавляют на бане со льдом бистриметилсилиламид лития (21,9 мл, 21,9 ммоль, 1M раствор в тетрагидрофуране) и смесь перемешивают при такой же температуре в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (300 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (300 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 7:1 → 1:1) с получением 3,72 г (42%) указанного в заголовке соединения (единственный компонент) в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,05 (3H, c), 0,06 (3H, c), 0,88 (9H, c), 1,12 (3H, д, J=7,3Гц), 1,38 (9H, c), 1,51 (3H, д, J=7,1Гц), 2,31 (1H, кв, J=7,4Гц), 3,29 (1H, д, J=10,3Гц), 3,39 (1H, д, J=10,3Гц), 3,50 (1H, дд, J=9,4, 6,0Гц), 3,83 (1H, д, J=9,5Гц), 5,47 (1H, кв, J=7,2Гц), 7,24-7,36 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 448 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 96

трет-Бутил (3S)-3-гидроксиметил-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

трет-Бутил (3S)-3-{[трет-бутил(диметил)силилокси]метил}-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат (3,72 г, 8,31 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (70 мл) и добавляют по каплям тетрабутиламмонийфторид (12,5 мл, 1,0 моль/л раствор в тетрагидрофуране, 12,5 ммоль) на бане со льдом. Смесь перемешивают при такой же температуре в течение 1 часа. После концентрирования смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (200 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат=3:1 → 1:2) с получением 1,87 г (67%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,18 (3H, д, J=7,6Гц), 1,32 (9H, c), 1,52 (3H, д, J=7,1Гц), 2,43-2,49 (2H, м), 3,30 (2H, дд, J=19,0, 10,5Гц), 3,57 (1H, дд, J=11,1, 6,7Гц), 3,89 (1H, дд, J=11,0, 5,9Гц), 5,48 (1H, кв, J=7,2Гц), 7,27-7,36 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 334 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 97

трет-Бутил (3R)-3-фторметил-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

трет-Бутил (3S)-3-гидроксиметил-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат (1,70 г, 5,10 ммоль) растворяют в дихлорметане (20 мл). К этому раствору добавляют толуол (20 мл) и добавляют по каплям трифторид диэтиламиносеры (1,68 мл, 12,8 ммоль) на бане со льдом. После перемешивания при 60°C в течение 8 часов к реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (50 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Затем концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 9:1 → 2:3) с получением 0,910 мг (53%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,17 (3H, д, J=7,6Гц), 1,37 (9H, д, J=0,5Гц), 1,54 (3H, д, J=7,1Гц), 2,35-2,42 (1H, м), 3,37 (2H, т, J=12,1Гц), 4,33 (1H, дд, J=46,9, 9,2Гц), 4,65 (1H, дд, J=46,8, 9,1Гц), 5,48 (1H, кв, J=7,2Гц), 7,25-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 336 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 98

(3R)-3-Фторметил-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновая кислота

К раствору трет-бутил (3R)-3-фторметил-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата (910 мг, 2,71 ммоль) в дихлорметане (9 мл) добавляют по каплям трифторуксусную кислоту (9 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении к концентрату добавляют на бане со льдом насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл) и водный раствор промывают простым диэтиловым эфиром (50 мл). К водному слою добавляют 1 моль/л хлористоводородную кислоту до pH 2-3 на бане со льдом и раствор экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат подвергают азеотропной дистилляции с добавлением толуола (20 мл) и сушат при пониженном давлении, получая 910 мг (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,18 (3H, д, J=7,4Гц), 1,55 (3H, д, J=7,1Гц), 2,49 (1H, кв, J=7,4Гц), 3,35-3,50 (2H, м), 4,38 (1H, дд, J=46,7, 9,2Гц), 4,71 (1H, дд, J=46,8, 9,3Гц), 5,50 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,26-7,37 (5H, м).

Ссылочный пример 99

(3S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-3-фторметил-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин

К раствору (3R)-3-фторметил-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновой кислоты (910 мг, 2,71 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) добавляют 1,1'-карбонилбис-1H-имидазол (659 мг, 4,07 ммоль) и смесь перемешивают в течение 20 минут. Газообразный аммиак барботируют в реакционную смесь в течение 1,5 часов и раствор концентрируют при пониженном давлении. К концентрату добавляют воду (50 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат подвергают азеотропной дистилляции с добавлением толуола (20 мл) и сушат при пониженном давлении, получая 800 мг (количественный выход) неочищенного продукта в форме амида в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,18 (3H, д, J=7,4Гц), 1,56 (3H, д, J=7,4Гц), 2,72 (1H, кв, J=7,3Гц), 3,26-3,37 (2H, м), 4,52 (1H, дд, J=21,0, 9,7Гц), 4,64 (1H, дд, J=20,7, 9,7Гц), 5,15 (2H, д, J=55,4Гц), 5,57 (1H, кв, J=7,0Гц), 7,26-7,41 (5H, м).

К раствору неочищенного продукта в форме амида (800 мг, 2,71 ммоль) в трет-бутиловом спирте (10 мл) добавляют тетраацетат свинца (2,40 г, 5,42 ммоль) и смесь перемешивают на масляной бане при 80°C в течение 30 минут. После того как смеси дают охладиться, к реакционной смеси добавляют бикарбонат натрия (2,5 г) и простой диэтиловый эфир (20 мл) и смесь перемешивают на бане со льдом в течение 30 минут. Нерастворимое содержимое удаляют фильтрованием через целит и фильтрат и раствор, используемый для промывки, объединяют и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом магния и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 20:1 → 3:2) с получением 485 мг (51%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,18 (3H, д, J=7,4Гц), 1,34 (9H, c), 1,51 (3H, д, J=7,6Гц), 2,71-2,79 (1H, м), 3,16-3,24 (1H, м), 3,39 (1H, дд, J=10,7, 1,3Гц), 4,46 (1H, дд, J=47,3, 9,1Гц), 4,55 (1H, c), 4,71 (1H, дд, J=46,8, 9,1Гц), 5,50 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,23-7,34 (5H, м).

Ссылочный пример 100

(3S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-3-фторметил-4-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин

К раствору (3S)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-фторметил-4-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидина (485 мг, 1,38 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляют 1,00M раствор борана в тетрагидрофуране (4,57 мл, 4,57 ммоль) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении добавляют воду (1 мл), этанол (9 мл) и триэтиламин (1 мл) на бане со льдом и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1,5 часов. После концентрирования реакционной смеси при пониженном давлении добавляют воду (100 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (100 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 12:1 → 1:1) с получением 350 мг (75%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,03 (3H, д, J=6,8Гц), 1,32 (3H, д, J=6,6Гц), 1,41 (9H, c), 2,11 (1H, т, J=8,5Гц), 2,19-2,29 (1H, м), 2,38 (1H, дд, J=10,1, 4,5Гц), 2,84 (1H, д, J=10,3Гц), 3,16 (1H, т, J=8,1Гц), 3,25 (1H, кв, J=6,5Гц), 4,54 (2H, д, J=48,3Гц), 4,65 (1H, c), 7,19-7,31 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 337 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 101

(3S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-3-фторметил-4-метилпирролидин

К раствору (3S)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-фторметил-4-метил-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидина (200 мг, 0,594 ммоль) в этаноле (12 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (содержащий 52,8% воды, 200 мг), и суспензию перемешивают на масляной бане при 40°C в течение 2 часов в атмосфере газообразного водорода. После удаления катализатора фильтрованием растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении с получением 150 мг (количественный выход) неочищенного указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,06 (3H, д, J=6,9Гц), 1,44 (9H, c), 2,28 (1H, кв, J=7,4Гц), 2,80 (1H, т, J=10,0Гц), 3,24 (1H, д, J=12,3Гц), 3,32 (2H, дд, J=11,0, 8,1Гц), 4,54 (2H, д, J=47,3Гц), 4,74 (1H, c).

Пример 28

7-[(3S)-3-Амино-3-фторметил-4-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

(3S)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-фторметил-4-метилпирролидин (150 мг, 0,594 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (214 мг, 0,594 ммоль) и триэтиламин (0,0994 мл, 0,713 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (2 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 15 часов. После концентрирования смеси к концентрату добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (11 мл) и триэтиламин (0,5 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, концентрат растворяют в этилацетате (100 мл ×2) и раствор промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (100 мл), водой (100 мл ×3) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (10 мл) и, после перемешивания раствора при комнатной температуре в течение 30 минут, реакционную смесь промывают хлороформом (100 мл ×4). К водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×3) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 115 мг (45%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 167-169°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,07 (3H, д, J=6,9Гц), 1,37-1,50 (1H, м), 1,50-1,62 (1H, м), 2,34 (1H, кв, J=7,7Гц), 3,45 (1H, д, J=11,0Гц), 3,52-3,58 (1H, м), 3,59 (3H, c), 3,82 (1H, д, J=8,6Гц), 3,87 (1H, д, J=12,5Гц), 4,00-4,05 (1H, м), 4,51 (2H, д, J=47,3Гц), 5,01 (1H, д, J=65,0Гц), 7,67 (1H, д, J=14,5Гц), 8,41 (1H, д, J=2,7Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₂F₃N₃O₄·0,25H₂O:

Вычислено: C, 55,88; H, 5,28; F, 13,26; N, 9,77.

Найдено: C, 55,66; H, 5,21; F, 13,26; N, 9,97.

МС (ESI) m/z: 426 (M+H)⁺.

ИК (ATR)ν: 2962, 2939, 2877, 1716, 1622, 1514, 1452, 1441, 1363, 1327, 1273, 1184, 1124 см^-1.

Пример 29

7-[(7S)-7-Амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Смесь (7S)-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептана (523 мг, 2,31 ммоль), 7-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты (538 мг, 1,927 ммоль), триэтиламина (0,537 мл, 3,85 ммоль) и диметилсульфоксида (6 мл) перемешивают в атмосфере азота на масляной бане при 75°C в течение 5 дней и на масляной бане при 85°C в течение 2 дней. К реакционной смеси добавляют 10% водный раствор лимонной кислоты (10 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой промывают водой (10 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (10 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (силикагель, 10 г; элюирование хлороформом → смесью хлороформ:метанол, 98:2) с получением бледно-желтого пенообразного твердого продукта. Очищенный бледно-желтый пенообразный твердый продукт растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (8 мл) при комнатной температуре и, после переноса полученного кислотного водного раствора с использованием 6 н. хлористоводородной кислоты в разделительную воронку, раствор промывают хлороформом (50 мл ×8). К водному слою добавляют 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12,0 на бане со льдом и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют смешанным растворителем из хлороформа и метанола (хлороформ:метанол, 9:1) (100 мл ×3) и нижним слоем смешанного растворителя из хлороформа, метанола и воды (хлороформ:метанол:вода, 7:3:1) (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и после фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из системы этанол-изопропанол и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 332 мг (2 стадии, 42%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 157-159°C.

[α]_D ^25,0=-144,2° (c=0,197, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,50-0,54 (1H, м), 0,58-0,62 (1H, м), 0,69-0,80 (2H, м), 1,06 (3H, c), 1,22-1,33 (1H, м), 1,57-1,63 (1H, м), 2,42 (3H, c), 3,14 (1H, д, J=9,8Гц), 3,35 (1H, д, J=9,6Гц), 3,65 (1H, д, J=9,6Гц), 3,89 (1H, д, J=9,8Гц), 4,04-4,09 (1H, м), 4,93-5,11 (1H, м), 7,06 (1H, д, J=9,1Гц), 7,99 (1H, д, J=9,1Гц), 8,45 (1H, д, J=2,9Гц).

Элементный анализ для C₂₁H₂₄FN₃O₃·1,25H₂O:

Вычислено: C, 61,83; H, 6,55; F, 4,66; N, 10,30.

Найдено: C, 61,65; H, 6,30; F, 4,77; N, 9,88.

МС (FAB) m/z: 386 (M+H)⁺.

ИК (ATR)ν: 1718, 1608, 1572, 1508, 1460, 1429, 1390, 1358, 1317, 1279, 1259, 1196 см^-1.

Пример 30

7-[(7S)-7-Амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-1-циклопропил-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

Смесь (7S)-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептана (524 мг, 2,31 ммоль), 1-фторциклопропил-7-фтор-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты (503 мг, 1,925 ммоль), триэтиламина (0,537 мл, 3,85 ммоль) и диметилсульфоксида (6 мл) перемешивают в атмосфере азота на масляной бане при 75°C в течение 5 дней и на масляной бане при 85°C в течение 2 дней. К реакционной смеси добавляют 10% водный раствор лимонной кислоты (10 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой промывают водой (10 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (10 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (силикагель, 10 г; элюирование хлороформом → смесью хлороформ:метанол, 98:2) с получением бледно-желтого пенообразного твердого продукта. Очищенный бледно-желтый пенообразный твердый продукт растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (8 мл) при комнатной температуре и, после переноса полученного кислотного водного раствора в разделительную воронку, при промывке 6 н. хлористоводородной кислотой, раствор промывают хлороформом (50 мл ×8). К водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12,0 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют смешанным растворителем из хлороформа и метанола (хлороформ:метанол, 9:1) (100 мл ×3) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают перекристаллизацией из этанола и сушат при пониженном давлении с получением 268 мг (0,641 ммоль, 2 стадии, 33%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 227-230°C.

[α]_D ^25,0=-38,9° (c=0,211, 0,1 н. NaOH).

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 0,53 (2H, м), 0,72 (2H, м), 0,79 (2H, м), 1,08 (3H, c), 1,15 (1H, м), 2,41 (3H, c), 3,35 (1H, д, J=10,0Гц), 3,40 (1H, д, J=9,6Гц), 3,49 (1H, д, J=9,8Гц), 3,57 (1H, д, J=9,8Гц), 4,04-4,07 (1H, м), 7,01 (1H, д, J=9,1Гц), 7,95 (1H, д, J=9,1Гц), 8,56 (1H, c).

Элементный анализ для C₂₁H₂₅N₃O₃·1,0EtOH·0,25H₂O:

Вычислено: C, 66,09; H, 7,60; N, 10,05.

Найдено: C, 66,38; H, 7,48; N, 10,26,

МС (FAB) m/z: 368 (M+H)⁺.

ИК (ATR)ν: 2964, 2916, 2850, 1711, 1610, 1545, 1508, 1466, 1427, 1390, 1352, 1313, 1254, 1194 см^-1.

Пример 31

7-[(3S)-3-Амино-3-фторметил-4-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

(3S)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-3-фторметил-4-метилпирролидин (155 мг, 0,663 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторбор (228 мг, 0,661 ммоль) и триэтиламин (0,111 мл, 0,795 ммоль) растворяют в сульфолане (0,8 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 35°C в течение 480 часов. После концентрирования реакционного раствора добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 9:1) (5 мл) и триэтиламин (0,5 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 80°C в течение 30 минут. Реакционную систему концентрируют при пониженном давлении, концентрат растворяют в этилацетате (100 мл ×2) и промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (100 мл), водой (100 мл ×2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на короткой колонке с силикагелем (хлороформ: метанол, 99:1 → 4:1). Остаток растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (10 мл) на бане со льдом и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционный раствор промывают хлороформом (100 мл ×3), к водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия до pH 12 и добавляют хлористоводородную кислоту, доводя pH до 7,4. Раствор экстрагируют хлороформом (150 мл ×4). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают перекристаллизацией из этанола. Кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 24,0 мг (0,0558 ммоль, 8%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого порошка.

Т.пл.: 200-203°C.

¹H-ЯМР (400 МГц, 0,1N NaOD) δ м.д.: 1,05 (3H, д, J=6,9Гц), 1,21-1,33 (1H, м), 1,61 (1H, дт, J=25,2, 7,6Гц), 2,30-2,40 (1H, м), 2,51 (3H, c), 3,22 (1H, д, J=10,3Гц), 3,48 (1H, т, J=8,6Гц), 3,54-3,61 (1H, м), 3,94 (1H, дд, J=10,5, 1,5Гц), 4,06-4,12 (1H, м), 4,51 (2H, д, J=47,4Гц), 5,01 (1H, ддд, J=64,2, 9,1, 5,1Гц), 7,69 (1H, д, J=14,5Гц), 8,45 (1H, д, J=3,7Гц).

Элементный анализ для C₂₀H₂₂F₃N₃O₃·0,25EtOH·0,5H₂O:

Вычислено: C, 57,27; H, 5,74; N, 9,77.

Найдено: C, 57,17; H, 5,74; N, 9,56.

МС (ESI) m/z: 410 (M+H)⁺.

ИК (ATR)ν: 3400, 3367, 3089, 2964, 2883, 1711, 1618, 1508, 1468, 1435, 1356, 1321, 1259, 1227, 1178, 1130 см^-1.

Ссылочный пример 102

Трет-бутил 5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К суспензии 5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной способом, описанным в Culbertson T.P., Domagala J.M., Nichols J.F., Priebe S., and Skeean R.W., J.Med.Chem., 1987, 30, 1711-1715, (1165 г, 4,994 моль) в дихлорметане (10 л) добавляют при комнатной температуре O-трет-бутил-N,N'-диизопропилмочевину (3020 г, 15,00 моль) при перемешивании. Когда отмечается повышение внутренней температуры и начало дефлегмации, реакционную систему охлаждают на бане со льдом. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры, смесь перемешивают в течение 1 часа после удаления бани со льдом и в течение следующих 3 часов при нагревании до 40°C. После перемешивания реакционной смеси в течение следующего 1 часа при охлаждении на бане со льдом, нерастворимое содержимое удаляют и фильтрат сушат при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (силикагель: 4 кг; элюирование смесью гексан:этилацетат, 3:1) с получением 925,2 г (64%) указанного в заголовке соединения (смесь изомеров в положении 3) в виде бледно-желтого сиропа. Хотя разделение диастереомеров положения 3 пирролидина является легким, диастереомеры используют без разделения, поскольку последующая стадия включает эпимеризацию. ¹H-ЯМР спектры изомеров, аликвотированных для целей оценки, показаны ниже.

Изомер с низкой полярностью:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,45 (9H, c), 1,54 (3H, д, J=7,08Гц), 2,59-2,74 (2H, м), 2,95-3,03 (1H, м), 3,14 (1H, дд, J=9,77, 8,79Гц), 3,49 (1H, дд, J=9,77, 6,35Гц), 7,26-7,36 (5H, м).

Изомер с высокой полярностью:

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 1,36 (9H, c), 1,53 (3H, д, J=7,32Гц), 2,59-2,75 (2H, м), 3,02-3,11 (1H, м), 3,16 (1H, дд, J=10,01, 5,62Гц), 3,51 (1H, дд, J=10,01, 8,54Гц), 7,24-7,36 (5H, м).

Ссылочный пример 103

Трет-бутил (3S)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновая кислота

К раствору трет-бутил 5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновой кислоты (30,05 г, 0,104 моль) в N,N'-диметилформамиде (210 мл) добавляют йодметан 26,0 мл (59,28 г, 0,418 моль), а затем гидрид натрия (55% в масле, 11,35 г, 0,260 моль) при перемешивании при комнатной температуре в атмосфере азота. Когда внутренняя температура повысится примерно до 50°C, реакционную смесь охлаждают до 30°C, используя баню со льдом, а затем смесь перемешивают в течение 23 часов, заменяя баню со льдом водяной баней при наружной температуре 17°C. Реакционную смесь выливают в холодный водный раствор лимонной кислоты (смесь 1 л 10% лимонной кислоты и 500 г льда) и смесь перемешивают в течение 30 минут и экстрагируют этилацетатом (800 мл, 500 мл). Органические слои объединяют, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат сушат при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 5:1 → 4:1) с получением 10,63 г (33,7%) изомера с высокой полярностью указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта. Получают также 14,91 г (47,3%) изомера с низкой полярностью трет-бутил (3R)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-1-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилата.

Ссылочный пример 104

Трет-бутил (3S)-4-[2-(трет-бутилдиметилсилил)гидроксиэтил]-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3S)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновой кислоты (30,0 г, 98,9 ммоль) и трет-бутил (2-йодэтокси)диметилсилана (36,8 г, 129 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (288 мл) добавляют по каплям бис(триметилсилил)амид лития (1,0M раствор в тетрагидрофуране, 129 мл, 129 ммоль) при -4°C и смесь перемешивают при 2°C в течение 3,5 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (300 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (300 мл, 200 мл). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат сушат при пониженном давлении с получением 54,1 г указанного в заголовке соединения. Продукт используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

МС (ESI) m/z: 363 (M-Boc+H)⁺.

Ссылочный пример 105

Трет-бутил (3S)-4-(2-гидроксиэтил)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

Неочищенный продукт в форме силильного соединения (54,1 г, 98,9 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (450 мл) и добавляют по каплям к раствору на бане со льдом 1,0 моль/л раствор тетрабутиламмонийфторида в тетрагидрофуране (148 мл, 148 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов и, после концентрирования смеси, концентрат экстрагируют этилацетатом (200 мл, 100 мл). Органический слой промывают 10% водным раствором бикарбоната натрия (200 мл), водным раствором лимонной кислоты (300 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат сушат при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 6:1 → 4:1 → 1:1) с получением 29,1 г (83,9 ммоль, 85%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного сиропообразного вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 1,28 (3H, c), 1,40 (9H, c), 1,51-1,53 (1H, м), 1,53 (3H, д, J=7,1Гц), 1,78-1,94 (2H, м), 2,90-3,08 (2H, м), 3,67-3,75 (1H, м), 3,80-3,91 (1H, м), 4,85-4,89 (1H, м), 5,43-5,53 (1H, м), 7,27-7,37 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 348 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 106

Трет-бутил (3S)-4-[2-(бензолсульфонил)оксиэтил]-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-фенилэтил]пирролидин-3-карбоксилат

К раствору трет-бутил (3S)-4-(2-гидроксиэтил)-3-метил-5-оксо-1-[(1R)-фенилэтил]пирролидин-3-карбоновой кислоты (29,1 г, 83,9 ммоль) в дихлорметане (280 мл) добавляют триэтиламин (15,2 мл, 109 ммоль), бензолсульфонилхлорид (11,8 мл, 92,3 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (1,02 г, 8,39 ммоль) на бане со льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 19 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (280 мл) и, после отделения органического слоя и удаления растворителя при пониженном давлении, остаток растворяют в этилацетате (280 мл, 180 мл). Раствор промывают вновь насыщенным водным раствором хлорида аммония. Органический слой промывают 1 моль/л водным раствором хлористоводородной кислоты (250 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (250 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат сушат при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме бензолсульфонильного соединения (43,7 г). Продукт используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

МС (ESI) m/z: 510 (M+Na)⁺.

Ссылочный пример 107

трет-Бутил (7S)-7-метил-4-оксо-5-[(1R)-фенилэтил]-5-азаспиро[2.4]гептан-7-карбоксилат

К раствору неочищенного продукта в форме бензолсульфонильного соединения (43,7 г, 83,9 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (470 мл) добавляют на бане со льдом 1,0 моль/л раствор бис(триметилсилил)амида натрия в тетрагидрофуране (109 мл, 109 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (300 мл), смесь экстрагируют этилацетатом (300 мл, 200 мл) и органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл). После сушки органического слоя безводным сульфатом натрия остаток фильтруют и фильтрат сушат при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 3:1 → 2:1) с получением 24,6 г (89%, 2 стадии) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта.

Т.пл.: 55-57°C.

[α]_D ^25,1=122,1° (c=0,517, CHCl₃).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,72-0,77 (1H, м), 0,85-0,90 (1H, м), 1,04-1,13 (2H, м), 1,18 (3H, c), 1,32 (9H, c), 1,54 (3H, д, J=7,1Гц), 3,08 (1H, д, J=9,8Гц), 3,53 (1H, д, J=9,8Гц), 5,52 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,26-7,34 (5H, м).

Элементный анализ для C₂₀H₂₇NO₃:

Вычислено: C, 72,92; H, 8,26; N, 4,25.

Найдено: C, 72,64; H, 8,27; N, 4,06.

МС (FAB) m/z: 330 (M+H)⁺.

HRMS (FAB) m/z: 330,2069 (Вычислено для C₂₀H₂₈NO₃ 330,2069).

ИК (ATR)ν: 3066, 2976, 2933, 2879, 1720, 1676, 1481, 1454, 1433, 1365, 1329, 1286, 1238, 1203 см^-1.

Рентгеноструктурный анализ осуществляют для определения конфигурации положения 7 этого соединения. Результаты показаны на фиг.3.

После сбора данных начальную фазу разделяют прямым способом и данные уточняют способом наименьших квадратов для матрицы в целом. После уточнения используют анизотропные термические параметры для атомов, иных, чем атомы водорода, и атомы водорода помещают в вычисленные положения на этих координатах. Это соединение имеет два асимметричных атома углерода, и абсолютная конфигурация одного асимметричного атома углерода известна. Абсолютную конфигурацию другого асимметричного атома углерода, следовательно, определяют на основе абсолютной конфигурации известного асимметричного атома углерода. Результаты показаны на фиг.1. Таким образом, определяют, что конфигурация положения 7 указанного в заголовке соединения должна представлять собой (S). Также определяют конфигурацию ряда соединений, полученных с использованием этого соединения в качестве промежуточного соединения.

Ссылочный пример 108

(7S)-7-Метил-4-оксо-5-[(1R)-фенилэтил]-5-азаспиро[2.4]гептан-7-карбоновая кислота

К раствору трет-бутил (7S)-7-метил-4-оксо-5-[(1R)-фенилэтил]-5-азаспиро[2.4]гептан-7-карбоксилата (24,5 г, 74,4 ммоль) в дихлорметане (120 мл) добавляют по каплям трифторуксусную кислоту (120 мл) на бане со льдом и смесь перемешивают в течение 2 часов. Реакционную смесь сушат при пониженном давлении и, после добавления толуола (20 мл) к остатку, смесь сушат при пониженном давлении. Остаток растворяют в 1 моль/л водном растворе гидроксида натрия (300 мл) и водный раствор промывают этилацетатом (350 мл). К водному слою добавляют на бане со льдом концентрированную хлористоводородную кислоту (25 мл) до pH 2-3 и смесь экстрагируют хлороформом (300 мл ×2). Органический слой промывают водой (200 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл), сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. К остатку добавляют толуол (20 мл) и смесь сушат при пониженном давлении. Остаток суспендируют в хлороформе (20 мл) и добавляют гексан (200 мл) для перекристаллизации. Осажденный твердый продукт промывают гексаном (100 мл) и сушат при пониженном давлении с получением 20,48 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта. Продукт используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,78-0,83 (1H, м), 0,90-0,95 (1H, м), 1,08-1,18 (2H, м), 1,24 (3H, c), 1,55 (3H, д, J=7,3Гц), 3,11 (1H, д, J=10,0Гц), 3,55 (1H, д, J=10,0Гц), 5,52 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,28-7,32 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 274 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 109

(7S)-7-Амино-7-метил-4-оксо-5-[(1R)-фенилэтил]-5-азаспиро[2.4]гептан

К раствору (7S)-7-метил-4-оксо-5-[(1R)-фенилэтил]-5-азаспиро[2.4]гептан-7-карбоновой кислоты (20,4 г, 74,4 ммоль) и азида дифенилфосфорной кислоты (17,6 мл, 81,8 ммоль) в толуоле (200 мл) добавляют триэтиламин (20,7 мл, 149 ммоль) и смесь перемешивают на масляной бане при 125°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в форме изоцианата.

После растворения неочищенного продукта в форме изоцианата в 1,4-диоксане (180 мл) к смеси добавляют воду (90 мл) и концентрированную хлористоводородную кислоту (90 мл). Смесь перемешивают на масляной бане при 50°C в течение 1 часа и к реакционной смеси добавляют воду (200 мл). После промывки этилацетатом (200 мл) к водному слою добавляют 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия (170 мл) до pH 9-10 и раствор экстрагируют толуолом (200 мл ×2). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 15,8 г (64,7 ммоль) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого маслянистого продукта. Продукт используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,72-0,78 (2H, м), 0,99-1,10 (2H, м), 1,08 (3H, c), 1,53 (3H, д, J=7,4Гц), 2,82 (1H, д, J=9,6Гц), 3,27 (1H, д, J=9,6Гц), 5,56 (1H, кв, J=7,1Гц), 7,14-7,37 (5H, м).

Ссылочный пример 110

(7S)-7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-[(1R)-фенилэтил]-5-азаспиро[2.4]гептан

(7S)-7-Амино-7-метил-4-оксо-5-[(1R)-фенилэтил]-5-азаспиро[2.4]гептан (15,8 г, 64,7 ммоль) растворяют в толуоле (82 мл) и раствор 65% (масс.) раствора бис(2-метоксиэтокси)алюминийгидрида натрия в толуоле (77,6 мл, 259 ммоль) в толуоле (6 мл) добавляют по каплям в течение 15 минут на бане со льдом, так что внутренняя температура не превышает 70°C, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь охлаждают на бане со льдом и добавляют по каплям 25% (масс.) водный раствор гидроксида натрия (100 мл). После гашения раствора раствор экстрагируют толуолом (135 мл). Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл) и добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (15,6 г, 71,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан:этилацетат, 8:1 → 4:1 → 1:1) с получением 18,0 г (73%) указанного в заголовке соединения в виде бесцветного прозрачного сиропообразного вещества.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,37-0,49 (2H, м), 0,62-0,68 (1H, м), 0,77-0,82 (1H, м), 1,20 (3H, c), 1,32 (3H, д, J=6,6Гц), 1,44 (9H, c), 2,46 (2H, дд, J=33,2, 9,3Гц), 2,68 (1H, д, J=8,8Гц), 3,27 (1H, кв, J=6,6Гц), 3,31-3,34 (1H, м), 4,71 (1H, c), 7,19-7,34 (5H, м).

МС (ESI) m/z: 331 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 111

(7S)-7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан

К раствору (7S)-7-(трет-бутоксикарбониламино)-7-метил-5-[(1R)-фенилэтил]-5-азаспиро[2.4]гептана (18,0 г, 54,5 ммоль) в метаноле (180 мл) добавляют катализатор, 10% палладий на угле (содержание воды 52,8%; 9,00 г), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов в атмосфере газообразного водорода и на масляной бане при 40°C в течение 5,5 часов. После удаления катализатора растворитель сушат при пониженном давлении с получением 13,4 г (количественный выход) неочищенного целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 0,38-0,43 (1H, м), 0,54-0,61 (2H, м), 0,74-0,80 (1H, м), 1,08 (3H, c), 1,44 (9H, c), 2,75 (1H, д, J=7,6Гц), 2,78 (1H, д, J=7,1Гц), 3,13 (1H, д, J=11,5Гц), 3,73-3,77 (1H, м), 4,45 (1H, c).

МС (ESI) m/z: 227 (M+H)⁺.

Ссылочный пример 112

7-[(7S)-7-Амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота

(7S)-7-(трет-Бутоксикарбониламино)-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан (13,4 г, 54,5 ммоль), комплекс 6,7-дифтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновая кислота-дифторборан (17,9 г, 49,5 ммоль) и триэтиламин (8,97 мл, 64,4 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (52 мл) и смесь перемешивают на масляной бане при 40°C в течение 17 часов. Реакционную смесь выливают в холодную воду (1000 мл) и осажденный твердый продукт собирают фильтрованием. К этому твердому продукту добавляют смешанный раствор этанола и воды (этанол:вода, 5:1) (180 мл) и триэтиламин (15 мл) и смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1,5 часов. Реакционную смесь сушат при пониженном давлении и остаток растворяют в этилацетате (150 мл ×2) и промывают 10% водным раствором лимонной кислоты (200 мл), водой (200 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток растворяют в смешанном растворе из хлороформа и метанола (хлороформ:метанол, 9:1) (100 мл) и после добавления силикагеля (10 г) смесь перемешивают в течение 1 часа. После удаления силикагеля фильтрованием смесь промывают смешанным раствором хлороформа и метанола (хлороформ:метанол, 9:1) (50 мл ×2) и фильтраты объединяют и концентрируют досуха. Остаток растворяют в концентрированной хлористоводородной кислоте (200 мл) на бане со льдом и перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь промывают хлороформом (400 мл ×5). К водному слою добавляют на бане со льдом 10 моль/л водный раствор гидроксида натрия, доводя pH до 11,8, а затем pH доводят до 7,4 добавлением хлористоводородной кислоты. Раствор экстрагируют путем добавления хлороформа (1000 мл ×3). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют путем дистилляции при пониженном давлении. Остаток очищают перекристаллизацией из этанола и кристаллы сушат при пониженном давлении с получением 18,5 г (79%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-розового порошка.

¹H-ЯМР и другие данные инструментального анализа этого продукта полностью согласуются с данными соединения, полученного в примере 9. Другими словами, из хинолоновых производных, имеющих 7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ильную группу, хинолоновое производное, описанное в примере 9, которое представляет собой соединение с высокой активностью, имеет 5-азаспиро[2.4]гептан-5-ильную группу, в которой стереохимическая конфигурация в положении 7 представляет собой (7S).

Пример испытаний 1

Соединения по настоящему изобретению оценивают на их антибактериальную активность в соответствии со стандартным способом, определенным Японским обществом химиотерапии, и результаты показаны как MIC (минимальная ингибирующая концентрация) (мкг/мл) в таблице, ниже. В таблице показано также значение MIC для моксифлоксацина (MFLX), сравнительного соединения 1, которое представляет собой соединение, описанное в выложенной заявке на патент Японии № 2-231475 (патентный документ 2), левофлоксацина (LVFX), гатифлоксацина (GTFX) и ципрофлоксацина (CPFX), в дополнение к соединению по настоящему изобретению. (Структура ниже показывает только структуру ядра). S.aureus, 87037 представляет собой устойчивые к LVFX MRSA и S.pneumoniae, J24 представляет собой бактерию средней устойчивости к пенициллину.

Таблица 1
	Пример 1	Пример 2	Пример 3	Пример 8	Пример 9	Пример 10	Пример 15	Пример 16
E.coli NIHJ	0,025	0,012	0,012	0,012	0,025	0,025	0,012	0,012
P.vulgaris, 08601	0,05	0,025	0,05	0,025	0,025	0,05	0,025	0,006
S.marscecens, 10100	0,2	0,1	0,2	0,2	0,1	0,2	0,2	0,1
P.aeruginosa, 32104	0,39	0,2	0,39	0,78	0,39	0,39	0,39	0,1
P.aeruginosa, 32121	0,2	0,1	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,05
S.aureus, 209P	0,025	0,025	0,025	0,025	0,025	0,05	0,05	0,025
S.epidermidis, 56500	0,1	0,05	0,1	0,1	0,1	0,2	0,1	0,1
E.faecalis, ATCC 19433	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,78	0,2	0,39
S.aureus, 87037	0,78	0,78	0,78	0,78	0,78	1,56	0,78	3,13
S.pneumoniae, J24	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,39	0,1	0,2
	Пример 17	Пример 21	Пример 22	Пример 23	Пример 27	Пример 28	Пример 29	Пример 30
E.coli NIHJ	0,006	0,012	0,012	≤0,003	0,006	0,025	0,05	0,006
P.vulgaris, 08601	0,012	0,05	0,012	0,006	0,006	0,05	0,025	0,025
S.marscecens, 10100	0,1	0,2	0,1	0,05	0,1	0,39	0,2	0,1
P.aeruginosa, 32104	0,39	0,78	0,39	-	0,39	-	0,2	0,2
P.aeruginosa, 32121	0,1	0,2	0,1	0,05	0,1	0,39	0,1	0,05
S.aureus, 209P	0,025	0,025	0,025	0,025	0,012	0,025	0,05	0,05
S.epidermidis, 56500	0,1	0,1	0,05	0,05	0,05	0,05	0,2	0,2
E.faecalis, ATCC 19433	0,2	0,2	0,2	0,1	0,2	0,2	0,78	0,39
S.aureus, 87037	0,39	0,78	0,78	0,39	0,39	0,2	3,13	1,56
S.pneumoniae, J24	0,1	0,1	0,1	0,05	0,1	0,1	0,39	0,2
	Пример 31		MFLX	Ср. соед. 1	LVFX	GTFX	CPFX
E.coli NIHJ	0,006		0,012	≤0,003	0,012	0,006	≤0,003
P.vulgaris, 08601	0,012		0,025	0,012	0,012	0,006	≤0,003
S.marscecens, 10100	0,1		0,1	0,05	0,1	0,1	0,025
P.aeruginosa, 32104	-		0,39	0,1	0,2	0,2	0,05
P.aeruginosa, 32121	0,05		0,2	0,05	0,1	0,1	0,025
S.aureus, 209P	0,012		0,05	0,006	0,2	0,005	0,1
S.epidermidis, 56500	0,025		0,2	0,05	0,39	0,2	0,2
E.faecalis, ATCC 19433	0,1		0,2	0,1	0,78	0,39	0,78
S.aureus, 87037	0,1		1,56	0,39	>6,25	1,56	>6,25
S.pneumoniae, J24	0,05		0,1	0,025	0,78	0,2	0,39

Пример испытаний 2

Соединения, полученные в примерах 2, 3 и 9 по настоящему изобретению, оценивают путем испытания с помощью микроядра костного мозга мышей, используя 5 животных на группу, самцов мышей Slc:ddY в возрасте 6 недель, и соединений, разбавленных 0,1 моль/л NaOH/физиологическим раствором. Контроль представляет собой 0,1 моль/л NaOH/физиологический раствор, и положительный контроль представляет собой циклофосфамид (циклофосфамид, CP), растворенный и разбавленный в физиологическом растворе. Все образцы стерилизуют путем фильтрования через фильтр Milex GS (0,22 мкм). Каждый раствор вводят внутривенно при дозе 10 мл/кг в разовой дозе при скорости введения 0,2 мл/мин.

Клетки костного мозга собирают из бедренной кости через 24 часа после введения и получают препарат для мазка. После окрашивания акридиновым оранжевым, 1000 полихроматических эритроцитов на одно животное наблюдают под флуоресцентным микроскопом, считая частоту, с которой встречаются полихроматические эритроциты с микроядрами, и отношение ортохроматических эритроцитов к полихроматическим эритроцитам для 1000 эритроцитов.

Не обнаруживается значимого различия в скорости индуцирования микроядер по сравнению с контролем для всех групп при введении соединения примера 2 в дозе 50 и 100 мг/кг, групп введения соединения примера 3 в дозе 100 и 150 мг/кг и группы введения соединения примера 9 в дозе 50, 100 и 150 мг/кг, и результат оценки является отрицательным. Другими словами, соединения по настоящему изобретению имеют очень слабое индуцирование микроядер в исследовании микроядер костного мозга мышей in vivo, используемом при оценке генотоксичности, и по этой причине являются очень безопасными.

Пример испытаний 3

Соединения, описанные в примерах 2, 3 и 9 по настоящему изобретению, оценивают на концентрацию в крови и других органах после введения с помощью методики, описанной ниже. Сравнительное соединение также оценивают с помощью такой же методики.

Испытуемое вещество перорально вводят голодающим крысам (самцы крыс Crj:CD IGS в возрасте 7 недель, закупленные от Charles River Laboratories Japan, Inc.) при дозе 5 мг/кг.

Животных группы, исследуемой на поглощение (3 животных в группе), забивают путем кровопускания под эфирным наркозом через 0,25, 0,5, 1, 2, 4 и 8 часов после введения лекарственного средства и собирают кровь, печень, почки и легкие. Кровь центрифугируют (3000 об/мин × 15 минут, 4°C) после коагуляции, собирая сыворотку. Ткани гомогенизируют после добавления 3-5 мл 0,1 моль/л фосфатного буфера (pH 7,0) и супернатант собирают из гомогената (3000 об/мин × 15 минут, 4°C).

Животных из группы исследования экскреции (3 животных в группе) помещают в метаболическую клетку и мочу от 0-4 часов и 4-24 часов после введения собирают в охлаждаемом водой контейнере. Одновременно со сбором мочи клетку также промывают примерно 15 мл 0,1 моль/л фосфатного буфера (pH 7,0) для сбора мочи, оставшейся в клетке. Для оценки конъюгатов, таких как глюкуронид, собранный образец также аликвотируют и гидролизуют равным количеством 1 моль/л водного раствора гидроксида натрия, и гидролизат нейтрализуют 0,5 моль/л хлористоводородной кислотой и измеряют их концентрацию. Концентрацию измеряют методом ЖХ-МС/МС.

Фармакокинетические параметры каждого лекарственного средства у крысы вычисляют из временного хода средней концентрации, используя программное обеспечение для фармакокинетического анализа PSAG-CP (AS Medica Inc.), способом, независимым от модельного животного.

Таблица 2 Фармакокинетика у крыс
Соединение 1				Пример 2	Пример 3	Пример 9	Сравнительное соединение 1	MFLX
Гидратирующая молекула				0,75H₂O	2H₂O	EtOH·0,5H₂O	HCl·H₂O	HCl·0,5H₂O
Сыворотка	Cmax(мкг/мл) (0,25час)			0,67	1,03	1,22	0,82	1,49
	AUC 0-8час (мкг·час/мл)			1,31	1,85	3,08	1,59	4,46

Ткань	Cmax (мкг/г)		Печень	10,2	9,02	13,7	9,3	9,49
			Почки	7,78	8,83	9,88	8,63	10,1
			Легкие	2,46	3,47	3,86	2,59	4,69

	AUC 0-8час (мкг·час/мл)		Печень	17,4	15,4	32,1	15,0	-
			Почки	14,7	17,1	27,8	19,3	-
			Легкие	8,07	7,38	13,7	6,77	-

Извлечение (%) с мочой по отношению к введенному количеству		0-24 час		25,4	24,5	27,7	21,8	26,6
Извлечение (%) с мочой по отношению к введенному количеству		Извлечение (%), включая конъюгат		26,6	24,7	32,0	23,1	30,8

Повторяя методику, применяемую для крыс, соединение примера 9, сравнительное соединение 1 и MFLX оценивают для макак циномолгус, используя голодающих самок макаки циномолгус (3 животных в группе), которым вводят дозу 5 мг/кг в разовой дозе, и измеряют интактные соединения в сыворотке и выделяемой моче. Измерения осуществляют методом ЖХ-МС/МС.

Таблица 3 Фармакокинетика у макак циномолгус
Соединение 1		Пример 9	Сравнительное соединение 1	MFLX
Гидратирующая молекула		EtOH·0,5H₂O	HCl·H₂O	HCl·0,5H₂O
Сыворотка	Cmax (мкг/мл)	2,18	0,84	1,03
	t1/2 (час)	4,8	5,0	5,3
	AUC 0-24 час (мкг·час/мл)	16,9	5,11	6,64

Извлечение (%) с мочой по отношению к введенному количеству	0-24 час	61,3	25,8	8,1
Извлечение (%) с мочой по отношению к введенному количеству	Извлечение (%), включая конъюгат	59,5	32,9	12,2

Как видно из данных по концентрации в сыворотке, концентрации в тканях и AUC (площади под кривой) соединения по настоящему изобретению, и в частности соединение примера 9, демонстрируют концентрацию в сыворотке и концентрацию в тканях при пероральном введении, которые примерно в 2 раза выше, и значение AUC, которое в 1,5-2 раза выше, чем у сравнительного соединения 1, что указывает на превосходное оральное поглощение и проникновение в ткани настоящего соединения. Скорость выделения с мочой примерно в 1,5 раза выше, чем для сравнительного соединения 1, что указывает на превосходное выделение с мочой. Данные являются даже лучшими для макак циномолгус, и проникновение в кровь примерно в 2,5 раза выше, а скорость выделения с мочой более чем в 2 раза выше, чем для сравнительного соединения 1.

Соединение примера 9 и MFLX демонстрируют сходную фармакокинетику у крыс и макак циномолгус. Однако соединение примера 9 демонстрирует значительно лучшее проникновение в кровь и выделение с мочой у макак циномолгус, ясно показывая, что соединение примера 9 демонстрирует превосходные фармакокинетические свойства не только на отдельных видах, но и на нескольких видах животных.

Пример испытаний 4

Потенциальную конвульсантную активность при интрацистернальном введении мышам оценивают в соответствии со способом Ueda et al. (Eur. J. Pharmacol., 1979, 56,265-268). Испытуемое вещество вводят интрацистернально самцам мышей Slc:ddy (6 животных в группе) и конвульсии и гибель отслеживают в каждой клетке в пределах 30 минут после введения. Испытуемое вещество растворяют в 5 мкл 1% водного раствора молочной кислоты, и доза составляет 5, 15 или 50 мкг на животное.

Таблица 4 Количество мышей, которые демонстрируют конвульсии
	Пример 2	Пример 3	Пример 9	Сравнительное соединение 1	MFLX	CPFX
5 мкг/мышь	1/6	0/6	0/6	0/6	0/6	1/6
15 мкг/мышь	4/6	2/6	2/6	0/6	0/6	3/6
50 мкг/мышь	6/6	6/6	6/6	0/6	0/6	6/6

Потенциальную конвульсантную активность при интрацистернальном введении мышам также оценивают для одновременного введения вместе с 4-бифенилуксусной кислотой (BPAA: активный метаболит фенбуфена) и в отсутствие такого одновременного введения. Оценку осуществляют, используя самцов мышей Slc:ddY в возрасте 4 недель (6 животных в группе) и интрацистернальное введение испытуемого вещества в дозе 5 мкг/5 мкл/мышь (растворитель, 0,5% молочная кислота). Мониторинг животных на конвульсии и гибель начинают непосредственно после введения и продолжают в пределах до 30 минут после введения. Когда вещество используют одновременно с BPAA, BPAA суспендируют в 5% CMC и 400 мг/кг вводят перорально при количестве раствора 10 мл/кг и испытуемое вещество вводят интрацистернально через 30 минут после BPAA.

Таблица 5 Воздействие бифенилацетата
	Доза	Количество животных, которые демонстрируют конвульсии (количество погибших животных)
	мкг/5 мкл/мышь интрацист.	BPAA	BPAA
0,5% лактат	0	0/6 (0/6)	0/6 (0/6)
Соединение примера 9	5	0/6 (0/6)	0/6 (0/6)
CPFX	5	0/6 (0/6)	6/6^##(6/6^##)
^P<0,05, ^*P<0,01: Значимо отличается от группы с 0,5% лактата (тест Фишера) ^#P<0,05, ^##P<0,01: Значимо отличается от группы без BPAA (тест Фишера)

Соединение по настоящему изобретению проявляет частоту индуцирования конвульсий при высокой дозе, которая выше, чем у сравнительного соединения 1, но ниже, чем у ципрофлоксацина (CPFX), который широко используется в клинической практике, что указывает на более слабую активность индуцирования конвульсий, и, следовательно, на более высокую безопасность по сравнению с CPFX. Исследование одновременного введения вместе с бифенилуксусной кислотой, которое представляет собой модель одновременного введения с фенбуфеном, также показывает превосходную безопасность настоящего соединения, поскольку не отмечается случаев конвульсии или гибели для соединения примера 9, в то время как конвульсии и смерть отмечаются при введении ципрофлоксацина.

Пример испытаний 5

Испытание с максимизацией на морских свинках (GPMT), которое представляет собой широко принятую модель замедленной антигенности, осуществляют в соответствии со способом Mugnusson et al. (J. invest. Dermatol., 52, 1969), используя концентрацию кожной сенсибилизации 1% и концентрацию сенсибилизации с помощью пластыря и индуцирование 10%. В день 1 животное сенсибилизируют кожным введением испытуемого вещества (хинолоновые соединения и контроль: носитель, вазелин) (1% раствор в физиологическом растворе + эмульсия FCA) на задней части головы выбритых морских свинок (самцы в возрасте 7 недель Slc:Hertley). В день 7 применяют лаурилсульфат натрия (SLC) в качестве стимула (вспомогательное лечение), на следующий день испытуемое вещество в виде покрытия на вощеной бумаге наносят в виде пластыря на выбритую кожу для герметичной сенсибилизации, а через 48 часов (в день 10) вощеную бумагу убирают. Реакцию кожи наблюдают после удаления. В день 22 испытуемое вещество (10%) наносят в виде пластыря на переднюю сторону тела для индуцирования и индуцирующий пластырь удаляют через 24 часа. На следующий день (в день 24) и следующий день (в день 25) реакцию кожи оценивают в соответствии с описанием документа, как рассмотрено выше. Оценивают покраснение и опухоль и случай с общей оценкой 2 или выше оценивают как положительный, при этом максимальная оценка равна 7.

Таблица 6 Средний балл и результаты оценки при GPMT
	Пример 9	Сравнительное соединение 1	MFLX	Гемифлоксацин
Средний балл	0	6,8	0	6,8
Оценка	Положительная	Положительная	Отрицательная	Положительная

Подтверждается, что соединение примера 9 является GPMT-отрицательным (балл 0). С другой стороны, сравнительное соединение 1 демонстрирует балл 6,8, который представляет собой почти самый высокий балл. В то же время, гемифлоксацин (гемифлоксацин мезилат; наименование продукта, FACTIVE(TM)), который недавно стал коммерчески доступным в США, как сообщается, в фазе 3 клинических испытаний, которые осуществляют для бытовой пневмонии и обострения острого хронического бронхита, часто вызывает побочный эффект сыпи, и развитие сыпи часто обнаруживается после дня 7 многократного введения. Этот гемифлоксацин, как подтверждается, также является GPMT-положительным с баллом 6,8, который представляет собой почти самый высокий балл, как в случае сравнительного соединения 1. Поскольку гемифлоксацин, о котором сообщается, что он вызывает развитие сыпи, является GPMT-положительным, GPMT-отрицательное соединение по настоящему изобретению, как показано, имеет пониженный риск развития сыпи.

Пример испытаний 6

Измерение эффекта блокирования каналов hERG-K⁺, которое представляет собой стандартную систему оценки in vitro на кардиотоксичность (аномалия, вызывающая летальную аритмию, которая обнаруживается с помощью электрокардиограммы и которая наблюдается как пролонгированный интервал QT или QTc), о которой недавно сообщалось как о побочном эффекте хинолонового антибактериального агента, осуществляют способом, описанным в Biophysical Journal, vol. 74, page 230, 1998.

Таблица 7 Эффект блокирования каналов hERG-K⁺ (1)
Ингибирование (%)	Пример 2	Пример 3	Пример 9	Сравнительное соединение 1	MFLX	GTFX
30 мкМ	3,8±2,1	5,3±4,1	7,4±4,5	6,7±8,3	33,9±8,3	8,1±6,0
100 мкМ	8,5±1,2	12,0±4,0	10,2±5,4	13,5±3,1	44,6±10,2	17,6±11,5
300 мкМ	18,2±4,2	22,3±0,7	20,1±7,4	24,8±16,5	69,9±8,3	39,0±10,8
n=3

Таблица 8 Эффект блокирования каналов hERG-K⁺ (2)
Ингибирование (%)	Пример 8	Пример 22	Пример 20	Пример 25	Пример 23	Пример 27
30 мкМ	1,5±1,8	^-1,3±10,1	1,4±4,5	2,0±7,2	3,0±4,1	^-1,8±6,8
100 мкМ	2,1±2,3	^-0,6±7,9	8,5±6,1	4,2±7,9	4,6±4,7	0,6±8,0
300 мкМ	2,3±7,3	21,5±6,9	14,5±6,0	17,1±14,4	16,7±8,4	8,9±11,0
n=3

Эффект блокирования каналов hERG-K⁺, как подтверждается, является очень слабым для соединения по настоящему изобретению по сравнению с MFLX и GTFX, согласно клиническим отчетам по действию увеличения интервала QT или QTc, и со сравнительным соединением 1.

Пример испытаний 7

Ингибирование на основе механизма (MBI) CYP3A4 оценивают с использованием ингибирования гидроксилирования в положении 1 мидазолама. В то время как сравнительное соединение 1 проявляет значительное ингибирование способом, зависимым от времени предварительного инкубирования и концентрации лекарственного средства, соединение примера 9 проявляет слабое ингибирование, даже когда используется при высокой концентрации.

Несколько механизмов являются вовлеченными во взаимодействие с лекарственным средством путем ингибирования CYP, и среди механизмов такого ингибирования ингибирование путем генерирования стабильного комплекса метаболита одновременно вводимого лекарственного средства с CYP и ингибирование путем инактивирования CYP связыванием метаболита одновременно вводимого лекарственного средства с остатком гем- или апо-белка являются необратимыми, и такое необратимое ингибирование может продолжаться в течение достаточного периода времени после прекращения введения одновременно вводимого лекарственного средства и может вызывать серьезный побочный эффект. Такое необратимое ингибирование называется “ингибирование на основе метаболизма”. Среди видов молекулярных CYP, вовлеченных в метаболизм лекарственных средств у людей, CYP3A4 вовлечен в метаболизм 50% или более лекарственных средств при клиническом применении. (Непатентный документ: Drug Metabolism, 2nd ed., Tokyo Kagaku Dojin, 2000). Соответственно, реагент, который проявляет MBI действие по отношению к CYP3A4, можно рассматривать как вещество, имеющее высокий риск того, что оно вовлечено во взаимодействие с лекарственным средством.

Например, кларитромицин, который часто используют как терапевтическое лекарственное средство против бактериальной респираторной инфекции, как известно, проявляет MBI действие относительно CYP3A4 (см. документ, рассмотренный выше), и использование кларитромицина одновременно с терфенадином (антигистаминным средством) противопоказано, поскольку такое одновременное введение приводит к увеличению концентрации терфенадина в крови из-за ингибирования метаболизма терфенадина, посредством CYP3A4, вызываемого кларитромицином, и обнаруживается увеличение интервала QT на электрокардиограмме, вентрикулярная аритмия и внезапная остановка сердца. Однако соединение примера 9, как доказано, имеет четко более слабое MBI даже при испытании при высокой концентрации (со значительным запасом безопасности по сравнению с постулированной концентрацией при клиническом применении). По этой причине, соединение по настоящему изобретению, согласно оценкам, должно ассоциироваться с сильным понижением риска развития клинических побочных эффектов из-за взаимодействия с лекарственным средством на основе MBI действия относительно CYP3A4.

Пример испытаний 8

Модель локальной легочной инфекции у мышей, вызываемой стойкими к пенициллину Streptococcus pneumoniae (PRSP), используют для сравнения терапевтического эффекта соединения примера 9 и сравнительного соединения 1.

Штамм PRSP 033806, который культивируется анаэробно в бульоне Todd Hewitt, вводят назально самцам мышей CBA/JNCrlj (в возрасте 3-4 недели; Charles River Laboratories Japan, Inc.; 4 животных в группе) под анестезией смесью кетамин-ксилазин. Соединение примера 9 и сравнительное соединение 1 вводят перорально этой модели инъекции, соответственно, в дозе, показанной на фиг.2 (25, 50 и 100 мг/кг/день) через 2 и 8 часов после инфицирования (обработка только в течение 1 дня при ежедневной дозе 50, 100 или 200 мг/кг/день). Нелеченой контрольной группе вводят дистиллированную воду для инъекций.

Количество бактерий в легких измеряют непосредственно перед введением лекарственного средства нелеченой группе (через 2 часа после инфицирования, показано на рисунке как “предварительный контроль”) и на следующий день после введения лекарственного средства для нелеченой группы (на следующий день после инфекции, показано как “пост-контроль”) и леченым группам для использования в качестве показателя терапевтического эффекта.

Как ясно из фиг.2, хотя антибактериальная активность in vivo соединения примера 9 относительно исследуемых бактерий составляет примерно 1/4 от сравнительного соединения 1, не обнаруживается значимого различия между терапевтическим эффектом соединения примера 9 и сравнительного соединения 1 при пероральном введении модели локальной легочной инфекции мышей, вызываемой PRSP, для всех групп, которым вводят одинаковую дозу.

Пример испытаний 9

Терапевтический эффект на модели простого цистита у крыс (E.coli)

Модель инфекции: Крыс (самцы крыс Crl:CD(SD)(IGS) в возрасте 7 недель, Charles River Laboratories Japan, Inc., 4 животных в группе), которые были лишены воды с предыдущего дня, анестезируют смесью кетамин-ксилазин и штамм E.coli E77156 инокулируют трансуретрально (1,2×10⁷ КОЕ/крыса) в мочевой пузырь. После введения уретральное отверстие закрывают на 2 часа, чтобы предотвратить, тем самым, высвобождение бактериального раствора, и потребление воды животными начинается одновременно с завершением перекрывания.

Введение лекарственного средства: соединение примера 9 и сравнительное соединение 1 вводят перорально, соответственно, в дозе 5, 20 или 80 мг/кг на следующий день после инфицирования в разовой дозе.

Оценка эффективности: Количество бактерий в мочевом пузыре измеряют непосредственно перед введением лекарственного средства и на следующий день после введения лекарственного средства (через 2 дня после инфицирования) для нелеченой группы, и на следующий день после введения лекарственного средства для леченых групп для использования в качестве показателя терапевтического эффекта.

Результаты: значительное уменьшение количества бактерий обнаружено только для соединения примера 9, когда доза составляет 20 или 80 мг/кг/день. Терапевтический эффект этого соединения для группы с дозой 5 мг/кг/день был значительно сильнее, чем для сравнительного соединения 1. Соответственно, соединение примера 9, как продемонстрировано, представляет собой соединение, которое способно реализовать терапевтический эффект, превосходящий эффекты сравнительного соединения 1 (фиг.4).

Пример испытаний 10

Соединения по настоящему изобретению оценивают на их активность против Mycobacterium tuberculosis в соответствии со стандартным способом, определенным Японским обществом химиотерапии (Journal of Japanese Society of Chemotherapy, vol. 29, pages 76 to 79, 1981), и результаты показаны как MIC (мкг/мл) в таблицах 9 и 10, ниже. Соединения по настоящему изобретению проявляют превосходную антибактериальную активность относительно Mycobacterium tuberculosis.

Таблица 9 Активность против Mycobacterium tuberculosis (чувствительные бактерии) (MIC: мкг/мл)
Штамм/соединение	Пример 9	RFP	Сравнительное соединение 1
TB-s 2	0,06	0,03	0,125
TB-s 3	0,06	0,125	0,125
TB-s 4	0,06	0,06	0,125
TB-s 5	0,06	0,06	0,06
TB-s 6	0,06	0,125	0,125
TB-s 7	0,06	0,06	0,25
TB-s 8	0,03	0,015	0,06
TB-s 9	0,06	0,06	0,125
TB-s 10	0,03	0,06	0,06
TB-s 11	0,06	0,06	0,125
TB-s 12	0,125	0,125	0,25
TB-s 13	0,06	0,06	0,125
TB-s 14	0,06	0,03	0,125
TB-s 15	0,06	0,06	0,125
TB-s 16	0,06	0,06	0,125
TB-s 17	0,06	0,06	0,125
TB-s 18	0,06	0,03	0,125
TB-s 19	0,06	0,125	0,125
TB-s 20	0,06	0,25	0,25
TB-s 21	0,06	0,03	0,125
TB-s 22	0,03	0,015	0,06
Kurono	0,03	0,06	0,06
H37Rv	0,03	0,125	0,06
Ravenel	0,03	0,125	0,06
RFP: рифампицин

Таблица 10 Активность против Mycobacterium tuberculosis (чувствительные к хинолону) (MIC: мкг/мл)
Штамм/соединение	Пример 9	RFP	Сравнительное соединение 1
S 1	1	16	2
MDR 1	0,125	16	0,5
MDR 3	0,125	128	0,5
MDR 4	0,25	64	0,5
MDR 5	0,5	32	1
MDR 7	0,125	>128	0,5
MDR 9	0,125	128	0,5
MDR 12	0,125	128	0,5
1 (QR-3)	0,125	>128	1
2 (QR-6)	0,5	>128	128
3 (QR-1)	0,25	128	2
4 (QR-9)	0,25	>128	32

Claims

1. Соединение, представленное следующей формулой (I):

его соль или гидрат, где
R¹ представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; причем алкильная группа необязательно замещена атомом галогена;
R² представляет атом водорода или алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода;
R³ представляет алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; причем алкильная группа необязательно замещена атомом галогена;
R⁴ и R⁵ независимо представляют атом водорода, атом галогена, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода или алкенильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода; причем алкильная группа необязательно замещена атомом галогена; и при условии, что R⁴ и R⁵ не являются одновременно атомами водорода; или
заместители R⁴ и R⁵ вместе представляют (а) 3-6-членную циклическую структуру, включающую атом углерода, общий для R⁴ и R⁵, с образованием спироциклической структуры с пирролидиновым кольцом; или (b) экзометиленовую группу, связанную с пирролидиновым кольцом с помощью двойной связи;
R⁶ и R⁷ независимо представляют атом водорода или алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода;
R⁸ представляет галоген-замещенную алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода; причем циклоалкильная группа может быть замещена атомом галогена;
R⁹ представляет атом водорода;
X¹ представляет атом водорода или атом галогена; и
А представляет атом азота или фрагмент, представленный формулой (II):

где X² представляет атом водорода, алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, или алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода;
или X² вместе с R⁸ представляет циклическую структуру, содержащую часть ядра, причем образованное таким образом кольцо необязательно содержит атом кислорода и является замещенным алкильной группой, содержащей 1-6 атомов углерода.

2. Соединение, его соль или гидрат по п.1, где соединение, представленное формулой (I), является соединением, представленным следующей формулой:

где R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, X¹ и А являются такими, как определено в п.1.

3. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором R¹ и R² в формуле (I) представляют собой атом водорода.

4. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором R² в формуле (I) представляет собой атом водорода, a R¹ представляет собой заместитель, выбранный из метальной группы, этильной группы, фторэтильной группы и циклопропильной группы.

5. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором R³ в формуле (I) представляет собой метальную группу или этильную группу.

6. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором один из R⁴ и R⁵ в формуле (I) представляет собой атом водорода, а другой представляет собой атом фтора, метальную группу, этильную группу, н-пропильную группу, изопропильную группу, н-бутильную группу, фторметильную группу, метоксигруппу или винильную группу.

7. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором R⁴ и R⁵ в формуле (I) вместе образуют циклопропановое кольцо или циклобутановое кольцо, включающее атом углерода, общий для R⁴ и R⁵, с образованием спироциклической структуры.

8. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором R⁴ и R⁵ в формуле (I) вместе образуют экзометиленовуто группу.

9. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором X¹ в формуле (I) представляет собой атом фтора.

10. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором А в формуле (I) представляет собой атом азота.

11. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором А в формуле (I) означает фрагмент, представленный формулой (II).

12. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором X² в формуле (II) представляет собой метальную группу, этильную группу или метоксигруппу.

13. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором X² в формуле (II) представляет собой метальную группу или метоксигруппу.

14. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором R⁸ в формуле (I) представляет собой 1,2-цис-2-галогенциклопропильную группу.

15. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором R⁸ в формуле (I) представляет собой стереохимически чистую 1,2-цис-2-галогенциклопропильную группу.

16. Соединение, его соль или гидрат по п.15, в котором 1,2-цис-2-галогенциклопропильная группа, которая представляет собой R⁸ в формуле (I), является (1R, 2S)-2-галогенциклопропильной группой.

17. Соединение, его соль или гидрат по п.15, в котором (1R, 2S)-2-галогенциклопропильная группа, которая представляет собой R⁸ в формуле (I), является (1R, 2S)-2-фторциклопропильной группой.

18. Соединение, его соль или гидрат по п.11, в котором
соединение формулы (I) представлено следующей формулой:

где R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁹ и X¹ являются такими, как определено в п.1.

19. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором соединение формулы (I) представляет собой стереохимически чистое соединение.

20. Соединение, выбранное из
7-[3-амино-3,4-диметилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
(7-[3-амино-4-этил-3-метилпирролидин-1 -ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[3-амино-4-метилен-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метил-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3S)-3-амино-3-метил-4-метиленпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3R)-3-амино-3-метил-4-метиленпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-(3-амино-4-метокси-3-метилпирролидин-1-ил)-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3S,4S)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3S,4S)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-8-метокси-]-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3S,4S)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3S,4S)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3R,4R)-3-амино-4-фторметил-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3R)-3-амино-4-фтор-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3R)-3-амино-4-фтор-3-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[(3S)-3-амино-3-фторметил-4-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата; и
7-[(3S)-3-амино-3-фторметил-4-метилпирролидин-1-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фтор-1-циклопропил]-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата.

21. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором в соединении формулы (I) абсолютная конфигурация в положении 3, где аминогруппа замещена на пирролидиновом кольце, представляет собой (3R).

22. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором в соединении формулы (I) абсолютная конфигурация в положении 3, где аминогруппа замещена на пирролидиновом кольце, представляет собой (3S).

23. Соединение, выбранное из
7-[(7S)-7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
7-[7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-6-фтор-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
(3S)-10-[7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-9-фтор-2,3-дигидро-3-метил-7-оксо-7Н-пиридо[1,2,3-de][1,4] бензоксазин-6-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата;
(7-[(7S)-7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-1-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-8-метокси-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата; и
7-[(7S)-7-амино-7-метил-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил]-1-циклопропил-8-метил-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты, ее соли или гидрата.

24. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором в соединении формулы (I) абсолютная конфигурация в месте, где аминогруппа замещена на спиробициклическом заместителе, представляет собой (R).

25. Соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2, в котором в соединении формулы (I) абсолютная конфигурация в месте, где аминогруппа замещена на спиробициклическом заместителе, представляет собой (S).

26. Антибактериальный агент, содержащий соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2 в качестве его эффективного компонента.

27. Терапевтический агент против инфекций, содержащий соединение, его соль или гидрат по п.1 или 2 в качестве его эффективного компонента.

28. Способ лечения бактериального инфекционного заболевания посредством введения соединения, его соли или гидрата по п.1 или 2.

29. Способ лечения инфекций посредством введения соединения, его соли или гидрата по по п.1 или 2.

30. Применение соединения, его соли или гидрата по п.1 или 2 для получения антибактериального лекарственного средства.