RU2412914C2 - Method of cleaning soil and surface of solid objects from petroleum and petroleum products - Google Patents
Method of cleaning soil and surface of solid objects from petroleum and petroleum products Download PDFInfo
- Publication number
- RU2412914C2 RU2412914C2 RU2008151458/10A RU2008151458A RU2412914C2 RU 2412914 C2 RU2412914 C2 RU 2412914C2 RU 2008151458/10 A RU2008151458/10 A RU 2008151458/10A RU 2008151458 A RU2008151458 A RU 2008151458A RU 2412914 C2 RU2412914 C2 RU 2412914C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oil
- microorganisms
- preparation
- petroleum
- water
- Prior art date
Links
Landscapes
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области экологии, прикладной, а также биотехнологии и касается способов очистки твердых объектов от нефти и нефтепродуктов с помощью биологических препаратов.The invention relates to the field of ecology, applied, as well as biotechnology, and relates to methods for cleaning solid objects from oil and oil products using biological preparations.
Известен способ очистки твердого объекта (почвы) от нефти и нефтепродуктов путем ее обработки консорциумом штаммов микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species (патент RU №2232806, МПК C12N 1/20, 2002).There is a method of cleaning a solid object (soil) from oil and oil products by treating it with a consortium of microbial strains Bacillus brevis and Arthrobacter species (patent RU No. 2232806, IPC C12N 1/20, 2002).
Известен способ очистки твердого объекта (почвы) от нефти и нефтепродуктов путем ее обработки ассоциацией штаммов бактерий, продуцирующих биоэмульгаторы (патент RU №2312891, МПК C12N 1/20, 2006).There is a method of cleaning a solid object (soil) from oil and oil products by processing it by the association of bacterial strains producing bioemulsifiers (patent RU No. 2312891, IPC C12N 1/20, 2006).
Наиболее близким к заявляемому является известный способ очистки твердых объектов от нефти и нефтепродуктов путем обработки загрязненного объекта (почвы) микробным препаратом, состоящим из смеси природных углеводородокисляющих (УВ) культур микроорганизмов, выделенных методом селекции из природного сообщества микроорганизмов (патент RU №2057724, МПК C02F 3/34, 1994) - прототип. В данном способе микробный препарат выделяют из природного сообщества микроорганизмов, обитающего в загрязненной нефтью или нефтепродуктами твердом объекте (почве) и селекцию культур микроорганизмов проводят традиционным методом в присутствии смеси питательной водной среды, содержащей, по крайней мере, соединения азота, фосфора, калия и магния с нефтью или нефтепродуктом.Closest to the claimed is a known method of cleaning solid objects from oil and oil products by treating a contaminated object (soil) with a microbial preparation consisting of a mixture of natural hydrocarbon-oxidizing (HC) cultures of microorganisms isolated by selection from a natural community of microorganisms (patent RU No. 2057524, IPC C02F 3/34, 1994) is a prototype. In this method, the microbial preparation is isolated from a natural community of microorganisms living in a solid object (soil) contaminated with oil or oil products and the selection of microorganism cultures is carried out by the traditional method in the presence of a mixture of nutrient water medium containing at least nitrogen, phosphorus, potassium and magnesium compounds with oil or oil product.
Недостатками известного способа являются его относительно невысокие скорость и эффективность очистки загрязненных твердых объектов от нефти и нефтепродуктов, а также узкая область его применения только для очистки загрязненной нефтью или нефтепродуктами почвы.The disadvantages of this method are its relatively low speed and efficiency of cleaning contaminated solid objects from oil and oil products, as well as its narrow scope only for cleaning contaminated with oil or oil products soil.
Технической задачей изобретения является повышение скорости и эффективности очистки твердых объектов от нефти и нефтепродуктов даже при повышенной концентрации соли и относительно низкой температуре, в том числе в районах с коротким тепловым периодом, а также расширение области применения способа.An object of the invention is to increase the speed and efficiency of cleaning solid objects from oil and oil products even at high salt concentrations and relatively low temperatures, including in areas with a short thermal period, as well as expanding the scope of the method.
Указанный технический результат достигается тем, что в известном способе очистки твердых объектов от нефти и нефтепродуктов путем обработки загрязненного объекта микробным препаратом, состоящим из смеси природных углеводородокисляющих культур микроорганизмов, выделенных методом селекции из природного сообщества микроорганизмов в присутствии смеси питательной водной среды, содержащей, по крайней мере, соединения азота, фосфора, калия и магния с нефтью или нефтепродуктом, используют препарат на основе сообщества микроорганизмов, обитающих на морских бурых водорослях, по крайней мере, одного биологического рода, и очищаемый объект дополнительно обрабатывают водой и биогенной добавкой, содержащей, по крайней мере, соединения азота, фосфора, калия и магния, причем препарат используют с титром не менее 105 колоний образующих единиц на миллилитр при использовании суспензии препарата в водной среде и с титром не менее 105 колоний образующих единиц на грамм при использовании водной суспензии препарата, иммобилизованного на твердом носителе. При этом обработку объекта водой осуществляют перед его обработкой микробным препаратом, или одновременно с его обработкой микробным препаратом, или после его обработки микробным препаратом.The specified technical result is achieved in that in the known method for cleaning solid objects from oil and oil products by treating a contaminated object with a microbial preparation consisting of a mixture of natural hydrocarbon-oxidizing cultures of microorganisms isolated by selection from a natural community of microorganisms in the presence of a mixture of nutrient water medium containing at least least, compounds of nitrogen, phosphorus, potassium and magnesium with oil or oil product, use a preparation based on a community of microorganisms, ob melting on marine brown algae of at least one biological genus, and the object to be cleaned is additionally treated with water and a biogenic additive containing at least nitrogen, phosphorus, potassium and magnesium compounds, moreover, the preparation is used with a titer of at least 10 5 colonies forming units per milliliter when using a suspension of the drug in an aqueous medium and with a titer of at least 10 5 colonies of forming units per gram when using an aqueous suspension of the drug immobilized on a solid carrier. In this case, the object is treated with water before it is treated with a microbial preparation, or simultaneously with its treatment with a microbial preparation, or after its treatment with a microbial preparation.
В предлагаемом техническом решении селекцию культур микроорганизмов необходимо проводить в присутствии смеси водной питательной среды с нефтью или нефтепродуктом, причем более целесообразно использовать для этих целей сырую нефть. В отсутствие нефти или нефтепродукта получить микробный препарат не удается. В качестве питательной среды, используемой при селекции МС, можно использовать, традиционные для таких целей питательные среды, содержащие, по крайней мере, соединения азота, фосфора, калия и магния. Питательная среда также может содержать микроэлементы.In the proposed technical solution, the selection of cultures of microorganisms must be carried out in the presence of a mixture of an aqueous nutrient medium with oil or oil product, and it is more advisable to use crude oil for these purposes. In the absence of oil or oil product, it is not possible to obtain a microbial preparation. As a nutrient medium used in the selection of MS, it is possible to use nutrient media traditional for such purposes, containing at least nitrogen, phosphorus, potassium and magnesium compounds. The nutrient medium may also contain trace elements.
Используемый в данном способе микробный препарат в чистом виде представляет собой пастообразную массу, которая может быть получена, например, путем выделения препарата из питательной среды методом центрифугирования, сепарирования или сушки. В чистом виде использование такого пастообразного препарата неэффективно, поэтому очищаемый твердый объект всегда дополнительно обрабатывают водой. В зависимости от природы очищаемого объекта можно использовать как морскую, так и пресную воду.The pure microbial preparation used in this method is a pasty mass, which can be obtained, for example, by isolating the preparation from the nutrient medium by centrifugation, separation or drying. In its pure form, the use of such a paste-like preparation is inefficient, therefore, the solid being cleaned is always additionally treated with water. Depending on the nature of the object being cleaned, you can use both sea and fresh water.
В предлагаемом техническом решении кроме дополнительной обработки очищаемого объекта водой во всех случаях также необходимо дополнительно обрабатывать очищаемый объект биогенной добавкой, которая должна содержать, по крайней мере, соединения азота, фосфора, калия и магния. В качестве биогенной добавки можно использовать как легкорастворимые, так и труднорастворимые минеральные или органоминеральные соединения.In the proposed technical solution, in addition to additional processing of the cleaned object with water, in all cases it is also necessary to additionally treat the cleaned object with a biogenic additive, which should contain at least nitrogen, phosphorus, potassium and magnesium compounds. As a biogenic additive, both soluble and sparingly soluble mineral or organomineral compounds can be used.
При реализации способа микробный препарат можно использовать в виде суспензии отселектированного сообщества микроорганизмов в водной питательной среде или в воде либо в виде высушенного отселектированного микробного сообщества (МС), а также в виде отселектированного МС, иммобилизованного на твердом носителе.When implementing the method, the microbial preparation can be used in the form of a suspension of a selected community of microorganisms in an aqueous nutrient medium or in water, or in the form of a dried selected microbial community (MS), as well as in the form of a selected MS immobilized on a solid carrier.
Микроскопическими, культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими методами было показано, что используемый в предлагаемом способе препарат состоит из бактерий, относящихся к различным биологическим родам, например, таким как Pseudomonas, Bacillus, Rhodococcus, Mycobacterium, Acinetobacter, Phyllobacterium, Marinobacter, Alcanivorax, Oleispira, Cycloclasticus и т.д. В предлагаемом изобретении для выделения культур микроорганизмов могут быть использованы различные морские бурые водоросли, например бурые водоросли биологических родов Fucus sp., Laminarya sp., Phyllariella sp. и т.д. Эти водоросли широко распространены в морских экосистемах, например в Белом море, в Баренцевом море, в Дальневосточных морях и т.д. Можно использовать как бурые водоросли одного биологического рода, например рода Fucus sp., так и водоросли двух и более биологических родов.Microscopic, cultural-morphological and physiological-biochemical methods have been shown that the preparation used in the proposed method consists of bacteria belonging to different biological genera, for example, Pseudomonas, Bacillus, Rhodococcus, Mycobacterium, Acinetobacter, Phyllobacterium, Marinobacter, Alcanivora, Alcanivora, , Cycloclasticus, etc. In the present invention, various marine brown algae, for example, brown algae of the biological genera Fucus sp., Laminarya sp., Phyllariella sp., Can be used to isolate cultures of microorganisms. etc. These algae are widespread in marine ecosystems, for example, in the White Sea, in the Barents Sea, in the Far Eastern seas, etc. You can use brown algae of one biological genus, for example, the genus Fucus sp., And algae of two or more biological genera.
Сушку биомассы препарата можно осуществлять как лиофильно, так распылением суспензии биомассы препарата в газовом потоке, например в воздухе, в азоте, в аргоне и т.д.Drying the biomass of the preparation can be carried out both lyophilically and by spraying a suspension of the biomass of the preparation in a gas stream, for example, in air, in nitrogen, in argon, etc.
В качестве твердого носителя для иммобилизации отселектированного МС можно использовать различные неорганические и органические, преимущественно пористые, объекты, например, такие как природные пористые цеолиты, перлит, торф, опилки, почву и др. Иммобилизацию можно проводить путем обработки носителя суспензией отселектированного сообщества микроорганизмов в жидкой среде посредством распыления, смешения и т.д. с последующей сушкой, которую можно осуществлять как при атмосферном, так и при пониженном давлении.Various inorganic and organic, mainly porous, objects, for example, such as natural porous zeolites, perlite, peat, sawdust, soil, etc. can be used as a solid support for immobilization of a selected MS. Immobilization can be carried out by treating the support with a suspension of a selected community of microorganisms in liquid medium by spraying, mixing, etc. followed by drying, which can be carried out both at atmospheric and under reduced pressure.
Микробный препарат, используемый в предлагаемом техническом решении, получают следующим образом. Образцы бурых водорослей собирают, как правило, в зоне литорали. Фрагменты таллома (кусочки водорослей) размером примерно от 1 см2 или более помещают в водную питательную среду, например, следующего состава (г/л): KNO3 - 4,0; KH2PO4 - 0,6; Na2HPO4 - 1,4; MgSO4 - 0,8; NaCl - 20,0. В качестве источника углерода для жизнедеятельности МС используют либо нефтепродукт, либо преимущественно сырую нефть, вводимые в питательную среду в количестве нескольких массовых процентов. pH среды с нефтью 7,0.The microbial preparation used in the proposed technical solution is obtained as follows. Brown algae samples are collected, as a rule, in the littoral zone. Fragments of thallus (pieces of algae) of about 1 cm 2 or more in size are placed in an aqueous nutrient medium, for example, of the following composition (g / l): KNO 3 - 4.0; KH 2 PO 4 0.6; Na 2 HPO 4 - 1.4; MgSO 4 - 0.8; NaCl - 20.0. As a carbon source for the life of MS, either an oil product or mainly crude oil is used, introduced into the nutrient medium in the amount of several mass percent. The pH of the medium with oil is 7.0.
Для получения культуры, окисляющей нефть или нефтепродукт, МС, засеянное как описано выше, инкубируют на лабораторной качалке при скорости вращения 280-300 об/мин, при температуре преимущественно не выше 15°С. Таким методом получают так называемую накопительную культуру микроорганизмов, за развитием которой наблюдают визуально и микроскопически. Через семь суток накопительную культуру помещают в холодильник, поддерживающий температуру в 10-12°С.To obtain a culture that oxidizes oil or oil, MS sown as described above is incubated on a laboratory shaker at a speed of 280-300 rpm, at a temperature mainly not higher than 15 ° C. Using this method, the so-called accumulative culture of microorganisms is obtained, the development of which is observed visually and microscopically. After seven days, the accumulative culture is placed in a refrigerator, maintaining a temperature of 10-12 ° C.
Селекцию УВ сообщества микроорганизмов проводят в течение нескольких месяцев, путем последовательных нескольких (5-6) пересевов 1 мл накопительной культуры в новую порцию питательной среды с нефтью или нефтепродуктом указанного выше состава.The selection of the HC community of microorganisms is carried out for several months, by successive several (5-6) transfers of 1 ml of accumulative culture into a new portion of the nutrient medium with oil or oil product of the above composition.
Культивируемое разнообразие бактерий и определение титра микроорганизмов в накопительной культуре осуществляют путем десятикратного разведения стерильной питательной среды без нефти и высева 0,01 мл накопительной культуры на чашки Петри, содержащие среду, состоящую из мясопептонного бульона и сусла, взятых в соотношении 1:1, с добавлением 1,7% агар-агара. После этого чашки Петри инкубируют при 10°С в течение 7 дней.The cultivated variety of bacteria and the determination of the titer of microorganisms in the accumulation culture is carried out by ten-fold dilution of a sterile culture medium without oil and plating 0.01 ml of the accumulation culture on Petri dishes containing the medium consisting of meat peptone broth and wort, taken in the ratio 1: 1, with the addition of 1.7% agar agar. After this, Petri dishes are incubated at 10 ° C for 7 days.
Из отдельных колоний микроорганизмов, выросших в этих условиях, традиционными методами выделяют штаммы чистых культур микроорганизмов. Способность чистых культур микроорганизмов потреблять УВ сырой нефти проверяют в тех же условиях, что и у накопительной культуры.From individual colonies of microorganisms grown under these conditions, strains of pure cultures of microorganisms are isolated by traditional methods. The ability of pure cultures of microorganisms to consume HC of crude oil is tested under the same conditions as the accumulative culture.
Морфологические и культуральные свойства колоний микроорганизмов, их микроскопию и проверку их окрашиваемости по Граму изучают традиционными микробиологическими методами.The morphological and cultural properties of the colonies of microorganisms, their microscopy, and verification of their Gram stain are studied by traditional microbiological methods.
В предложенном техническом решении микробный препарат представляет собой смесь бактерий, включающий одиночные клетки и их группирования в недлинные цепочки или иные скопления за счет выделяемой слизи. Морфологически - это палочки разных размеров и толщины, кокки, коккобациллы, изогнутые палочки, у-образные пары клеток. Некоторые из них подвижные, другие - нет. Бактерии являются гетеротрофными аэробами, сапротрофными, грамположительными и грамотрицательными, не разжижающими агар, использующими простые субстраты, такие как углеводы, аминокислоты, органические кислоты, спирты и углеводороды.In the proposed technical solution, the microbial preparation is a mixture of bacteria, including single cells and their grouping into short chains or other accumulations due to secreted mucus. Morphologically, these are rods of different sizes and thicknesses, cocci, coccobacilli, curved rods, y-shaped pairs of cells. Some of them are mobile, others are not. Bacteria are heterotrophic aerobes, saprotrophic, gram-positive and gram-negative, non-liquefying agar, using simple substrates, such as carbohydrates, amino acids, organic acids, alcohols and hydrocarbons.
Используемый микробный препарат не обладает токсичными и токсигенными свойствами, не обладает раздражающими действиями на слизистые оболочки, не аллергичен. Он продуцирует биологические поверхностно активные вещества, которые повышают скорость и степень очистки объектов от нефти и нефтепродуктов.The microbial preparation used does not have toxic and toxigenic properties, does not have irritating effects on the mucous membranes, and is not allergic. It produces biological surface-active substances that increase the speed and degree of purification of objects from oil and oil products.
Микробный препарат можно использовать в виде суспензии отселектированного МС в водной среде с титром микроорганизмов не менее 105 колоний образующих единиц (KOE)/мл. При использовании препарата, иммобилизованного на твердом носителе, титр препарата должен составлять не менее 105 KOE/г носителя. Препарат экологичен и может быть использован для очистки различных твердых объектов, таких как почва, металлические и другие загрязненные поверхности от нефти и нефтепродуктов, в том числе при повышенной концентрации соли в различных географических широтах, в том числе в районах крайнего Севера и других районах с коротким тепловым периодом.The microbial preparation can be used in the form of a suspension of selected MS in an aqueous medium with a titer of microorganisms of at least 10 5 colonies forming units (KOE) / ml. When using a drug immobilized on a solid carrier, the titer of the drug should be at least 10 5 KOE / g of carrier. The drug is environmentally friendly and can be used to clean various solid objects, such as soil, metal and other contaminated surfaces from oil and oil products, including at high salt concentrations in different geographical latitudes, including in the Far North and other areas with short thermal period.
При реализации способа контроль за эффективностью и скоростью очистки объектов от нефти и нефтепродуктов можно проводить с помощью любых традиционных для таких целей методов, например, таких как хроматография, гравиметрия, респирометрия и т.д.When implementing the method, monitoring the efficiency and speed of cleaning objects from oil and oil products can be carried out using any methods traditional for such purposes, such as chromatography, gravimetry, respirometry, etc.
Применяемый в заявленном способе препарат удобен для использования. Хранят микробный препарат в виде его суспензии в водной питательной среде, либо в замороженном виде после отделения микроорганизмов от питательной среды, либо в высушенном виде, а также в иммобилизованном виде на твердом носителе после высушивания. Срок годности препарата, хранящегося в виде суспензии в питательной среде при 10°С, без пересева в новую питательную среду, составляет не менее 6 месяцев. Высушенный препарат, а также иммобилизованный препарат может храниться более года.The preparation used in the claimed method is convenient for use. The microbial preparation is stored in the form of its suspension in an aqueous nutrient medium, either frozen after separation of microorganisms from the nutrient medium, or in dried form, as well as in an immobilized form on a solid carrier after drying. The shelf life of the drug, stored in suspension in a nutrient medium at 10 ° C, without reseeding in a new nutrient medium, is at least 6 months. The dried preparation as well as the immobilized preparation can be stored for more than a year.
Преимущества предлагаемого способа иллюстрируют следующие примеры.The advantages of the proposed method are illustrated by the following examples.
Пример 1.Example 1
Образцы морских бурых водорослей биологического рода Fucus sp. собирают в зоне литорали Белого моря в районе Кандалакшской губы при температуре морской воды 12°С. Кусочки таллома водоросли размером около 2 см2 помещают в стерильные конические стеклянные колбы емкостью 750 мл, заполненные 100 мл водной питательной среды, содержащей растворенные нижеуказанные соли, взятые в количестве (г/л): KNO3 - 4,0; KH2PO4 - 0,6; Na2HPO4 - 1,4; MgSO4 - 0,8; NaCl - 20,0. В колбы добавляют по 2 мл сырой Бакинской нефти, используемой в качестве источника углеводородов для жизнедеятельности МС. Колбы закрывают стерильными ватно-марлевыми пробками и закрепляют на лабораторной качалке. Включают качалку, работающую со скоростью 300 об/мин, и проводят инкубацию МС при 12°С в течение 7 суток. Затем колбы помещают в холодильник с температурой 10°С. За развитием культур микроорганизмов наблюдают визуально и микроскопически.Samples of marine brown algae of the biological genus Fucus sp. collected in the littoral zone of the White Sea in the region of the Kandalaksha Bay at sea temperature of 12 ° C. Pieces of thallus algae about 2 cm 2 in size are placed in sterile 750 ml conical glass flasks filled with 100 ml of an aqueous nutrient medium containing the dissolved below salts, taken in an amount (g / l): KNO 3 - 4.0; KH 2 PO 4 0.6; Na 2 HPO 4 - 1.4; MgSO 4 - 0.8; NaCl - 20.0. 2 ml of crude Baku oil, used as a source of hydrocarbons for the life of MS, is added to the flasks. The flasks are closed with sterile cotton-gauze plugs and fixed on a laboratory rocking chair. The rocker is turned on, operating at a speed of 300 rpm, and the MS is incubated at 12 ° C for 7 days. Then the flasks are placed in a refrigerator with a temperature of 10 ° C. The development of cultures of microorganisms is observed visually and microscopically.
Селекцию УВ сообщества микроорганизмов проводят в течение 2,5 месяцев путем последовательных 10 пересевов 1 мл полученной суспензии микроорганизмов в 100 мл новой вышеуказанной питательной среды с нефтью.The selection of the HC community of microorganisms is carried out for 2.5 months by successive 10 transfers of 1 ml of the resulting suspension of microorganisms in 100 ml of the above new nutrient medium with oil.
Культивируемое разнообразие бактерий МС и определение титра микроорганизмов в полученном сообществе осуществляют путем десятикратного разведения в стерильной среде без нефти и высева 0, 01 мл этой культуры на чашки Петри, содержащие среду, состоящую из мясопептонного бульона и сусла, взятых в соотношении 1:1, с добавлением 1,7% агар-агара. После этого чашки Петри инкубируют при 10°С в течение 7 дней. Получают микробный препарат с титром 108 KOE/мл, содержащий 10 биологических родов грамотрицательных и грамположительных бактерий, следующего морфологического состава: кокки, палочки, изогнутые и коринеформные бактериальные клетки.The cultivated variety of MS bacteria and the determination of the titer of microorganisms in the resulting community is carried out by ten-fold dilution in a sterile medium without oil and plating 0,01 ml of this culture on Petri dishes containing a medium consisting of meat peptone broth and wort, taken in a ratio of 1: 1, s adding 1.7% agar agar. After this, Petri dishes are incubated at 10 ° C for 7 days. A microbial preparation is obtained with a titer of 10 8 KOE / ml, containing 10 biological genera of gram-negative and gram-positive bacteria, of the following morphological composition: cocci, bacilli, curved and coryneform bacterial cells.
Способность полученного микробного препарата очищать твердые объекты от нефти проверяют следующим образом.The ability of the resulting microbial preparation to clean solid objects from oil is checked as follows.
Микробную биомассу отделяют от питательной среды центрифугированием при 8 тыс.об/мин и полученную густую пастообразную массу, содержащую 1010 KOE/мл, хранят в замороженном виде.Microbial biomass is separated from the nutrient medium by centrifugation at 8 thousand rpm and the resulting thick paste-like mass containing 10 10 KOE / ml is stored frozen.
Для иммобилизации препарата осуществляют ресуспендирование 1 мл препарата в 1 л вышеуказанной питательной среды без нефти с последующим введением в полученную суспензию 300 г твердого носителя, в качестве которого используют природный цеолит. Полученную смесь перемешивают в течение 10 мин при комнатной температуре, затем цеолит с иммобилизованным препаратом отделяют от суспензии и сушат при комнатной температуре до воздушно сухого состояния. Получают микробный препарат, иммобилизованный на твердом носителе, содержащий 107 KOE/г носителя.To immobilize the drug, 1 ml of the drug is resuspended in 1 l of the above nutrient medium without oil, followed by the introduction of 300 g of a solid carrier into the resulting suspension, using natural zeolite. The resulting mixture was stirred for 10 min at room temperature, then the zeolite with the immobilized preparation was separated from the suspension and dried at room temperature until air dry. A microbial preparation is obtained, immobilized on a solid support, containing 10 7 KOE / g of support.
На поверхность трех участков засоленной почвы площадью по 1 м2, расположенных в прибрежной зоне вышеназванной биостанции МГУ, равномерно наносят по 800 мл сырой Бакинской нефти, затем на загрязненные участки равномерно наносят по 40 г цеолита с иммобилизованным препаратом и биогенную добавку, содержащую 0,8 г KNO3, 0,12 г - KH2PO4; 0,28 г - Na2HPO4 и 0,16 г MgSO4. После этого загрязненную почву перекапывают и рыхлят, затем каждый участок равномерно обрабатывают 10 л воды путем полива. Опыт проводят при 12°С. За 7 суток степень очистки почвы от нефти, определенная гравиметрическим методом, составляет в среднем 92%.800 ml of crude Baku oil are uniformly applied to the surface of three saline soil sites with an area of 1 m 2 located in the coastal zone of the aforementioned biostation of Moscow State University, then 40 g of zeolite with an immobilized preparation and a biogenic additive containing 0.8 are uniformly applied to g KNO 3 , 0.12 g - KH 2 PO 4 ; 0.28 g of Na 2 HPO 4 and 0.16 g of MgSO 4 . After this, the contaminated soil is dug up and loosened, then each site is evenly treated with 10 liters of water by irrigation. The experiment is carried out at 12 ° C. For 7 days, the degree of soil purification from oil, determined by the gravimetric method, is on average 92%.
Пример 2.Example 2
Опыт проводят аналогично примеру 1, однако полученный биопрепарат на цеолите не иммобилизуют и в качестве очищаемого объекта используют 200-литровую металлическую бочку, загрязненную изнутри нефтью. В бочку заливают 200 л морской воды, затем туда добавляют 3 мл полученного биопрепарата и биогенную добавку, содержащую 80 г KNO3, 12 г - KH2PO4; 28 г - Na2HPO4 и 16 г MgSO4. Получают водную суспензию препарата с титром 1,5×105 KOE/мл. Опыт проводят в течение 5 суток при 10°С при периодическом интенсивном перемешивании. За это время степень очистки бочки от нефти достигает 90%.The experiment is carried out analogously to example 1, however, the obtained biological product on the zeolite is not immobilized and a 200-liter metal barrel contaminated with oil from the inside is used as a cleaned object. 200 l of sea water is poured into the barrel, then 3 ml of the obtained biological product and a biogenic additive containing 80 g of KNO 3 are added thereto, 12 g of KH 2 PO 4 ; 28 g of Na 2 HPO 4 and 16 g of MgSO 4 . An aqueous suspension of the preparation was obtained with a titer of 1.5 × 10 5 KOE / ml. The experiment is carried out for 5 days at 10 ° C with periodic intensive stirring. During this time, the degree of oil barrel cleaning reaches 90%.
Пример 3 (контрольный, по прототипу).Example 3 (control, prototype).
Опыт проводят аналогично примеру 1, однако культуру микроорганизмов выделяют из почвы, взятой в районе автозаправочной станции и загрязненной нефтепродуктами. За 7 суток степень очистки почвы от нефти составляет 51%.The experiment is carried out analogously to example 1, however, the culture of microorganisms is isolated from soil taken in the area of a gas station and contaminated with oil products. For 7 days, the degree of soil purification from oil is 51%.
Пример 4.Example 4
Опыт проводят аналогично примеру 1, однако при получении биологически активного препарата используют смесь образцов морских бурых водорослей биологических родов Laminarya sp. и Phyllariella sp., обитающих в акватории Баренцева моря, селекцию природного сообщества микроорганизмов проводят в присутствии дизельного топлива и биопрепарат на цеолите не иммобилизуют и лиофильно сушат, а в качестве очищаемого объекта используют поверхность трех участков засоленной почвы площадью по 1 м2, каждый из которых равномерно загрязнен 600 мл дизельного топлива.The experiment is carried out analogously to example 1, however, when obtaining a biologically active preparation, a mixture of samples of marine brown algae of biological genera Laminarya sp. and Phyllariella sp., living in the Barents Sea, the selection of the natural community of microorganisms is carried out in the presence of diesel fuel and the biological product on the zeolite is not immobilized and freeze-dried, and the surface of three saline soil areas of 1 m 2 each are used as a cleaned object, each of which evenly contaminated with 600 ml of diesel fuel.
В 10 литрах воды суспендируют полученный препарат, затем туда добавляют биогенную добавку, содержащую 0,8 г KNO3, 0,12 г - KH2PO4; 0,28 г - Na2HPO4 и 0,16 г MgSO4. Получают водную суспензию препарата с титром 1×105 KOE/мл. Каждый участок загрязненной почвы перекапывают и рыхлят, затем каждый участок равномерно обрабатывают 10 л вышеназванной водной суспензии препарата. Опыт проводят при 12°С. За 7 суток эффективность очистки почвы от дизельного топлива составляет в среднем 86%.The resulting preparation is suspended in 10 liters of water, then a biogenic additive containing 0.8 g of KNO 3 , 0.12 g of KH 2 PO 4 is added there; 0.28 g of Na 2 HPO 4 and 0.16 g of MgSO 4 . An aqueous suspension of the preparation is obtained with a titer of 1 × 10 5 KOE / ml. Each site of contaminated soil is dug up and loosened, then each site is evenly treated with 10 l of the above aqueous suspension of the drug. The experiment is carried out at 12 ° C. For 7 days, the efficiency of soil cleaning from diesel fuel is on average 86%.
Пример 5.Example 5
Опыт проводят аналогично примеру 1, однако используют микробный препарат с титром 105 KOE/г носителя и металлическую бочку очищают от мазута. За 9 суток эффективность очистки составляет 90%.The experiment is carried out analogously to example 1, however, a microbial preparation with a titer of 10 5 KOE / g of carrier is used and the metal barrel is cleaned of fuel oil. For 9 days, the cleaning efficiency is 90%.
Пример 6 (контрольный, с меньшим, чем заявлено, титром препарата).Example 6 (control, with less than stated titer of the drug).
Опыт проводят аналогично примеру 4, однако используют водную суспензию микробного препарата с титром 104 KOE/мл. За 5 суток эффективность очистки почвы от дизельного топлива составляет в среднем 51%.The experiment is carried out analogously to example 4, however, an aqueous suspension of a microbial preparation with a titer of 10 4 KOE / ml is used. For 5 days, the efficiency of soil cleaning from diesel fuel is on average 51%.
Пример 7 (контрольный, с меньшим, чем заявлено, титром препарата).Example 7 (control, with less than stated titer of the drug).
Опыт проводят аналогично примеру 1, однако используют препарат с титром 104 KOE/мл. За 9 суток эффективность очистки почвы от нефти составляет 67%.The experiment is carried out analogously to example 1, however, use the drug with a titer of 10 4 KOE / ml For 9 days, the efficiency of soil cleaning from oil is 67%.
Таким образом, из примеров видно, что предложенный способ действительно позволяет повысить эффективность очистки твердых объектов от нефти и нефтепродуктов с 51 до 86-92% даже при повышенной концентрации соли и относительно низкой температуре, в том числе в условиях крайнего Севера России, и позволяет вести очистку объектов с более высокой скоростью. Кроме того, предложенный способ существенно расширяет область его применения, распространяя его на любые твердые объекты, загрязненные нефтью или нефтепродуктами.Thus, it can be seen from the examples that the proposed method really allows to increase the efficiency of cleaning solid objects from oil and oil products from 51 to 86-92% even at high salt concentration and relatively low temperature, including in the conditions of the far North of Russia, and allows cleaning objects at a higher speed. In addition, the proposed method significantly expands its scope, extending it to any solid objects contaminated with oil or petroleum products.
Claims (4)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008151458/10A RU2412914C2 (en) | 2008-12-25 | 2008-12-25 | Method of cleaning soil and surface of solid objects from petroleum and petroleum products |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008151458/10A RU2412914C2 (en) | 2008-12-25 | 2008-12-25 | Method of cleaning soil and surface of solid objects from petroleum and petroleum products |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008151458A RU2008151458A (en) | 2010-06-27 |
| RU2412914C2 true RU2412914C2 (en) | 2011-02-27 |
Family
ID=42683333
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008151458/10A RU2412914C2 (en) | 2008-12-25 | 2008-12-25 | Method of cleaning soil and surface of solid objects from petroleum and petroleum products |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2412914C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2780125C1 (en) * | 2021-10-25 | 2022-09-19 | Публичное акционерное общество "Транснефть" (ПАО "Транснефть") | Solution for cleaning oil contaminated trees and shrubs |
-
2008
- 2008-12-25 RU RU2008151458/10A patent/RU2412914C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| СТЕПАНЬЯН О.В. и др. Влияние нефти и нефтепродуктов на морфофункциональные особенности морских макроводорослей. Биология моря, 2006, т.32, №4, с.241-248. ДМИТРИЕВА Г.Ю. и др. Симбиотическая микрофлора бурых водорослей рода Laminaria как биоиндикатор экологического состояния прибрежных ламинариевых биоценозов. Биология моря, т.22, №5, с.300-305. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2780125C1 (en) * | 2021-10-25 | 2022-09-19 | Публичное акционерное общество "Транснефть" (ПАО "Транснефть") | Solution for cleaning oil contaminated trees and shrubs |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008151458A (en) | 2010-06-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2523584C1 (en) | BACTERIAL STRAIN Exiguobacterium mexicanum - DESTRUCTOR OF CRUDE OIL AND PETROLEUM PRODUCTS | |
| JP5251003B2 (en) | Lubricating oil-decomposing microorganisms and microbial consortium, and method for purification of lubricating oil contaminated soil using them | |
| RU2393215C2 (en) | Eco-biological prepration for purifying water from oil products | |
| CN105018392B (en) | One plant of long-chain alkane degrading bacterium and its application | |
| CN1206174C (en) | Microbe capable of degradation removing microcystin from water bloom | |
| RU2404139C2 (en) | Biopreparation for removing oil from sea water | |
| RU2694610C1 (en) | Pseudomonas extremaustralis arc 38 vkpm b-13084 strain - destructor of oil and oil products | |
| CN102174446A (en) | Bacillus pumilus strain.Bap9 capable of effectively degrading benzo(a)pyrene and application thereof | |
| RU2412913C2 (en) | Method of cleaning water from petroleum and petroleum products | |
| RU2699977C1 (en) | Psychrobacter cibarius arc 35 vkpm v-13081 strain destructor of oil and oil products | |
| RU2553337C2 (en) | Rhodococcus erythropolis STRAIN FOR CLEANING WATER, SOIL, COASTAL AREAS AND BOTTOM SEDIMENTS FROM OIL AND OIL PRODUCTS | |
| RU2299101C1 (en) | Biological preparation for removing crude oil and petroleum products from land | |
| RU2412914C2 (en) | Method of cleaning soil and surface of solid objects from petroleum and petroleum products | |
| RU2533800C2 (en) | Strain pseudomonas migulae for cleaning soil, water and bottom sediments of water reservoirs from oil pollutions | |
| RU2142997C1 (en) | Strain arthrobacter sp for degradation of crude oil and petroleum products | |
| RU2681831C2 (en) | Preparation for biodegradation of petroleum products and method for preparation thereof | |
| RU2624054C2 (en) | Strain leucobacter aridicollis arc 6 vkpm as-1992 destructor of oil and oil products | |
| RU2412912C2 (en) | Microbial preparation for cleaning objects from petroleum and petroleum products | |
| RU2624052C2 (en) | Strain arthrobacter rhombi arc 8 vkpm as-1987-destructor of oil and oil products | |
| RU2560272C1 (en) | Strain of bacteria serratia plymuthica - decomposer of crude oil and petroleum products | |
| RU2691689C1 (en) | Yarrowia lipolytica strain - an oil and oil product destructor | |
| RU2571219C2 (en) | Preparation for biodegradation of petroleum products "bioionit" and method of obtaining thereof | |
| RU2114174C1 (en) | Consortium of yeast candida maltosa for biodegradation of petroleum pollution | |
| RU2634399C2 (en) | Microbial preparation for hydrocarbon contamination disposal | |
| RU2694194C1 (en) | Shewanella vesiculosa arc 37 vkpm b-13083 strain - an oil and oil products destructor |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20100616 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20111226 |