RU2408731C2 - Способ продукции полезного метаболита - Google Patents

Способ продукции полезного метаболита Download PDF

Info

Publication number
RU2408731C2
RU2408731C2 RU2008123733/10A RU2008123733A RU2408731C2 RU 2408731 C2 RU2408731 C2 RU 2408731C2 RU 2008123733/10 A RU2008123733/10 A RU 2008123733/10A RU 2008123733 A RU2008123733 A RU 2008123733A RU 2408731 C2 RU2408731 C2 RU 2408731C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
bacterium
carbon
carbon source
expression
gene
Prior art date
Application number
RU2008123733/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2008123733A (ru
Inventor
Леонид Романович Птицын (RU)
Леонид Романович Птицын
Ирина Борисовна Альтман (RU)
Ирина Борисовна Альтман
Татьяна Абрамовна Ямпольская (RU)
Татьяна Абрамовна Ямпольская
Original Assignee
Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) filed Critical Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ)
Priority to RU2008123733/10A priority Critical patent/RU2408731C2/ru
Publication of RU2008123733A publication Critical patent/RU2008123733A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2408731C2 publication Critical patent/RU2408731C2/ru

Links

Images

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ продукции полезного метаболита путем ферментации смеси первичного источника углерода и вторичного источника углерода с использованием бактерии семейства Enterobacteriaceae, модифицированной таким образом, что потоки для утилизации первичного источника углерода, такого как углеводы или глицерин, и вторичного источника углерода, такого как этанол, в указанной бактерии разделены. Способ включает культивирование бактерии в питательной среде и выделение метаболита из культуральной жидкости, причем бактерия обладает усиленной экспрессией мутантной алкогольдегидрогеназы, устойчивой к аэробной инактивации, усиленной экспрессией мутантного гена rthA, придающего устойчивость к высоким концентрациям треонина, делецией гена, кодирующего треониндегидрогеназу, и способна к продукции полезного метаболита, выбранного из группы, состоящей из глутамата, пролина, треонина, лизина, аспартата, аспарагина, метионина, серина, валина, лейцина, изолейцина, цистеина, аргинина и пиримидинов, путем ферментации смеси первичного источника углерода, такого как углеводы или глицерин, и вторичного источника углерода, такого как этанол, и дополнительно модифицирована таким образом, что потоки углеводов или глицерина и этанола разделены путем ослабления экспрессии гена(-ов), кодирующего(-их) пируваткиназу. Изобретение позволяет получать полезные метаболиты с высокой степенью эффективности. 12 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

Description

Текст описания приведен в факсимильном виде.
Figure 00000001
Figure 00000002
Figure 00000003
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006
Figure 00000007
Figure 00000008
Figure 00000009
Figure 00000010
Figure 00000011
Figure 00000012
Figure 00000013
Figure 00000014
Figure 00000015
Figure 00000016
Figure 00000017
Figure 00000018
Figure 00000019
Figure 00000020
Figure 00000021
Figure 00000022
Figure 00000023
Figure 00000024
Figure 00000025
Figure 00000026
Figure 00000027
Figure 00000028
Figure 00000029
Figure 00000030
Figure 00000031
Figure 00000032
Figure 00000033
Figure 00000034
Figure 00000035
Figure 00000036
Figure 00000037
Figure 00000038
Figure 00000039
Figure 00000040
Figure 00000041
Figure 00000042
Figure 00000043
Figure 00000044
Figure 00000045
Figure 00000046
Figure 00000047
Figure 00000048
Figure 00000049
Figure 00000050
Figure 00000051
Figure 00000052
Figure 00000053
Figure 00000054
Figure 00000055
Figure 00000056
Figure 00000057
Figure 00000058
Figure 00000059
Figure 00000060
Figure 00000061
Figure 00000062
Figure 00000063
Figure 00000064
Figure 00000065
Figure 00000066
Figure 00000067
Figure 00000068
Figure 00000069
Figure 00000070
Figure 00000071
Figure 00000072
Figure 00000073
Figure 00000074
Figure 00000075
Figure 00000076
Figure 00000077
Figure 00000078
Figure 00000079
Figure 00000080
Figure 00000081
Figure 00000082
Figure 00000083
Figure 00000084
Figure 00000085

Claims (13)

1. Способ продукции полезного метаболита путем ферментации смеси первичного источника углерода и вторичного источника углерода с использованием бактерии семейства Enterobacteriaceae, модифицированной таким образом, что потоки для утилизации первичного источника углерода, такого как углеводы или глицерин, и вторичного источника углерода, такого как этанол, в указанной бактерии разделены, включающий культивирование бактерии в питательной среде и выделение метаболита из культуральной жидкости, отличающийся тем, что бактерия обладает усиленной экспрессией мутантной алкогольдегидрогеназы, устойчивой к аэробной инактивации, усиленной экспрессией мутантного гена rthA, придающего устойчивость к высоким концентрациям треонина, делецией гена, кодирующего треониндегидрогеназу, и способна к продукции полезного метаболита, выбранного из группы, состоящей из глутамата, пролина, треонина, лизина, аспартата, аспарагина, метионина, серина, валина, лейцина, изолейцина, цистеина, аргинина и пиримидинов, путем ферментации смеси первичного источника углерода, такого как углеводы или глицерин, и вторичного источника углерода, такого как этанол, и дополнительно модифицирована таким образом, что потоки углеводов или глицерина и этанола разделены путем ослабления экспрессии гена(-ов), кодирующего(-их) пируваткиназу.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что гены, кодирующие пируваткиназу, включают гены pykF и pykA.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная экспрессия pykF или/и pykA гена(-ов) ослаблена путем инактивации pykF или/и pykA гена(-ов) в хромосоме бактерии.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что бактерия дополнительно модифицирована таким образом, что экспрессия генов, кодирующих белки не фосфотрансферазной системы транспорта, таких как xylE, galP, fucP, araE или lacY, усилена.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный первичный источник углерода выбран из группы, включающей глюкозу, сахарозу, ксилозу, арабинозу, лактозу.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что молярное соотношение первичного и вторичного источников углерода составляет от 1:3 до 1:5.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что молярное соотношение первичного и вторичного источников углерода составляет 1:4.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что бактерия, использующая глицерин в качестве первичного источника углерода, дополнительно модифицирована таким образом, что такая бактерия содержит глицеринкиназу, нечувствительную к ингибированию фруктозо-1,6-бифосфатом по типу обратной связи.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что молярное соотношение глицерина и вторичных источников углерода составляет от 1:1 до 1:3.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что молярное соотношение глицерина и вторичных источников углерода составляет 1:2.
11. Способ по п.1, отличающийся тем, что бактерия принадлежит к роду Escherichia.
12. Способ по п.1, отличающийся тем, что бактерия принадлежит к роду Pantoea.
13. Способ по п.1, отличающийся тем, что бактерия обладает усиленной экспрессией генов биосинтеза целевого полезного метаболита.
RU2008123733/10A 2008-06-17 2008-06-17 Способ продукции полезного метаболита RU2408731C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008123733/10A RU2408731C2 (ru) 2008-06-17 2008-06-17 Способ продукции полезного метаболита

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008123733/10A RU2408731C2 (ru) 2008-06-17 2008-06-17 Способ продукции полезного метаболита

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2008123733A RU2008123733A (ru) 2009-12-27
RU2408731C2 true RU2408731C2 (ru) 2011-01-10

Family

ID=41642261

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2008123733/10A RU2408731C2 (ru) 2008-06-17 2008-06-17 Способ продукции полезного метаболита

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2408731C2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2546237C1 (ru) * 2013-11-07 2015-04-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроогранизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") Рекомбинантный штамм escherichia coli-продуцент l-треонина

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012010673A (ja) * 2010-07-05 2012-01-19 Sumitomo Chemical Co Ltd 含硫α−アミノ酸化合物の製造法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2546237C1 (ru) * 2013-11-07 2015-04-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроогранизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") Рекомбинантный штамм escherichia coli-продуцент l-треонина

Also Published As

Publication number Publication date
RU2008123733A (ru) 2009-12-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Jin et al. Engineering the central biosynthetic and secondary metabolic pathways of Pseudomonas aeruginosa strain PA1201 to improve phenazine-1-carboxylic acid production
Zagrodnik et al. Enrichment versus bioaugmentation—Microbiological production of caproate from mixed carbon sources by mixed bacterial culture and Clostridium kluyveri
Boock et al. Engineered microbial biofuel production and recovery under supercritical carbon dioxide
Borja et al. Engineering Escherichia coli to increase plasmid DNA production in high cell-density cultivations in batch mode
Chen et al. Mechanism of 2, 3-butanediol stereoisomer formation in Klebsiella pneumoniae
Wen et al. Combined evolutionary engineering and genetic manipulation improve low pH tolerance and butanol production in a synthetic microbial Clostridium community
Xu et al. Metabolic engineering of Escherichia coli for efficient production of (3 R)‐acetoin
Wilkins et al. Effects of sludge inoculum and organic feedstock on active microbial communities and methane yield during anaerobic digestion
Li et al. Direct fermentation of gelatinized cassava starch to acetone, butanol, and ethanol using Clostridium acetobutylicum mutant obtained by atmospheric and room temperature plasma
Xu et al. Microbial production of mevalonate by recombinant Escherichia coli using acetic acid as a carbon source
MX2010009984A (es) Selección de organismos capaces de fermentar sustratos mixtos.
MY163228A (en) Process for Producing 3-Hydroxybutyric Acid or Salt Thereof
Cheng et al. Breeding L-arginine-producing strains by a novel mutagenesis method: atmospheric and room temperature plasma (ARTP)
WO2009073557A3 (en) Biological systems for production of commercially valuable compounds
Matsudo et al. CO2 from alcoholic fermentation for continuous cultivation of Arthrospira (Spirulina) platensis in tubular photobioreactor using urea as nitrogen source
MY163223A (en) Method for producing hydrocarbons
Li et al. Metabolic engineering of Pseudomonas chlororaphis Qlu-1 for the enhanced production of phenazine-1-carboxamide
Li et al. Construction of a novel anaerobic pathway in Escherichia coli for propionate production
CN104946552B (zh) 安全高效生产申嗪霉素的基因工程菌株及其应用
Yen et al. The effects of dissolved oxygen level on the distribution of 1, 3-propanediol and 2, 3-butanediol produced from glycerol by an isolated indigenous Klebsiella sp. Ana-WS5
Cheng et al. An antiphage Escherichia coli mutant for higher production of L‐threonine obtained by atmospheric and room temperature plasma mutagenesis
RU2408731C2 (ru) Способ продукции полезного метаболита
Liu et al. CsrA regulates swarming motility and carbohydrate and amino acid metabolism in Vibrio alginolyticus
Scully et al. Amino Acid Metabolism of Thermoanaerobacter Strain AK90: The Role of Electron‐Scavenging Systems in End Product Formation
Tan et al. Hydrogen sulfide formation as well as ethanol production in different media by cysND-and/or cysIJ-inactivated mutant strains of Zymomonas mobilis ZM4