RU2396749C2 - Insecticide agent to control larvae of flies - Google Patents
Insecticide agent to control larvae of flies Download PDFInfo
- Publication number
- RU2396749C2 RU2396749C2 RU2008112038/13A RU2008112038A RU2396749C2 RU 2396749 C2 RU2396749 C2 RU 2396749C2 RU 2008112038/13 A RU2008112038/13 A RU 2008112038/13A RU 2008112038 A RU2008112038 A RU 2008112038A RU 2396749 C2 RU2396749 C2 RU 2396749C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- granules
- insecticidal agent
- larvae
- fungi
- agent
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к инсектицидным средствам, используемым для борьбы с личинками двукрылых насекомых.The invention relates to the microbiological industry, in particular to insecticides used to combat larvae of dipterans insects.
Насекомые - самые разнообразные и многочисленные формы жизни на земле. В то время как большинство из около одного миллиона известных разновидностей насекомых являются полезными, около от 1% до 5%, как полагают, являются вредителями.Insects are the most diverse and numerous forms of life on earth. While most of the approximately one million known insect species are beneficial, about 1% to 5% are believed to be pests.
Эти насекомые-вредители наносят огромный ущерб здоровью человека и животных, так как нередко являются переносчиками возбудителей вирусных, бактериальных и паразитарных заболеваний (малярия, туляремия, японский энцефалит, желтая лихорадка, сибирская язва и др.). Кроме того, насекомые-вредители наносят большой ущерб сельскому хозяйству, так их личинки, нередко, находятся в земле, подгрызают корни и нарушают нормальный рост культурных растений (огурцы, томаты, лук, морковь, зерновые и др.). Борьба с насекомыми-вредителями имеет большое социальное, экологическое и экономическое значение, так как их массовое распространение угрожает нормальному развитию жизни человека и животных.These insect pests cause enormous damage to human and animal health, as they are often carriers of pathogens of viral, bacterial and parasitic diseases (malaria, tularemia, Japanese encephalitis, yellow fever, anthrax, etc.). In addition, insect pests cause great damage to agriculture, so their larvae are often found in the ground, gnaw roots and disrupt the normal growth of cultivated plants (cucumbers, tomatoes, onions, carrots, grains, etc.). The control of insect pests is of great social, environmental and economic importance, since their mass distribution threatens the normal development of human and animal life.
Существует несколько способов борьбы с вредными насекомыми: механические, физические, химические, биологические, а также их комбинированное применение.There are several ways to control harmful insects: mechanical, physical, chemical, biological, as well as their combined use.
Наибольшее применение в современных условиях имеют химические методы борьбы. Но их широкомасштабное использование приводит к загрязнению окружающей среды, гибели полезных организмов и нарушению равновесия в экологических системах. Кроме того, со временем у насекомых вырабатывается устойчивость к таким химическим препаратам.The greatest application in modern conditions have chemical methods of control. But their widespread use leads to environmental pollution, the death of beneficial organisms and the imbalance in ecological systems. In addition, over time, insects develop resistance to such chemicals.
Использование биоинсектицидов для борьбы с насекомыми-вредителями является наиболее выгодным с экологической и экономической точки зрения.The use of bioinsecticides to control pests is the most beneficial from an environmental and economic point of view.
Специфическими возбудителями болезней насекомых являются многие бактерии, грибы, вирусы, простейшие, гельминты. Эти агенты вызывают эпизоотии среди насекомых и при внесении их в среду обитания насекомых могут стать естественными сочленами биоценоза, обусловливая снижение их численности.Specific pathogens of insect diseases are many bacteria, fungi, viruses, protozoa, and helminths. These agents cause epizootics among insects and, when introduced into the insect habitat, can become natural articulations of the biocenosis, causing a decrease in their numbers.
В качестве действующих агентов биоинсектицидов могут быть использованы бактерии и грибы. Бактериальные инсектициды, в основном, основаны на спорокристаллической биомассе бактерий Bacillus thuringiensis [RU 2199214], которые способны в ходе споруляции образовывать кристаллоподобные включения, состоящие из энтомоцидных белков - дельта-эндотоксинов (также называемых Cry-белками). Известны способы получения бактериальных инсектицидов, содержащих в качестве действующего начала дельта-эндотоксин в чистом виде, выделенного из бактерий Bacillus thuringiensis [RU 2264100 - RU 2264103].Bacteria and fungi can be used as active agents of bioinsecticides. Bacterial insecticides are mainly based on the sporocrystalline biomass of bacteria Bacillus thuringiensis [RU 2199214], which are capable of forming crystalline inclusions during sporulation, consisting of entomocidal proteins - delta-endotoxins (also called Cry-proteins). Known methods for producing bacterial insecticides containing, as an active principle, delta-endotoxin in its pure form isolated from bacteria Bacillus thuringiensis [RU 2264100 - RU 2264103].
Грибные инсектициды основаны на спорово-мицелиальной биомассе различных микроскопических грибов, обладающих энтомопатогенной активностью, например, Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Verticillium lecanii, Tolypocladium cylindrosporum, Paecilomyces farinosus и др. [US 7122176].Fungal insecticides are based on spore-mycelial biomass of various microscopic fungi with entomopathogenic activity, for example, Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Verticillium lecanii, Tolypocladium cylindrosporum, Paecilomyces farinosus, etc. [US 71276
Известны энтомопатогенные препараты, содержащие в качестве действующего начала дельта-эндотоксин в чистом виде, выделенный из бактерий Bacillus thuringiensis [RU 2264100 - RU 2264103]. Несмотря на высокую эффективность, данные препараты характеризуются сложностью их получения, высокой стоимостью и непродолжительным периодом действия.Entomopathogenic preparations are known which contain, as an active principle, pure delta-endotoxin isolated from Bacillus thuringiensis bacteria [RU 2264100 - RU 2264103]. Despite the high efficiency, these drugs are characterized by the complexity of their preparation, high cost and short duration of action.
Известно инсектицидное средство против личинок комаров на основе бактерий Bacillus thuringiensis var. israelensis H-14 ВКПМ В-7572, содержащее в качестве действующего начала спорокристаллический комплекс бактерий с добавлением консерванта и стабилизатора [ЕА000295].Known insecticidal agent against mosquito larvae based on bacteria Bacillus thuringiensis var. israelensis H-14 VKPM B-7572, containing, as an active principle, a spore-crystalline complex of bacteria with the addition of a preservative and stabilizer [EA000295].
Основным недостатком данного средства является непродолжительное время его действия (обычно не более 1 месяца), после чего требуется повторная обработка. Кроме того, при обработке водоемов количество вносимого средства (доза) напрямую зависит от глубины обрабатываемого водоема: чем больше глубина, тем больше доза. Обработка глубоких водоемов может привезти к резкому увеличению количества вносимого средства.The main disadvantage of this tool is the short duration of its action (usually no more than 1 month), after which re-processing is required. In addition, when treating ponds, the amount of funds introduced (dose) directly depends on the depth of the treated pond: the greater the depth, the greater the dose. Processing deep water can lead to a sharp increase in the amount of funds deposited.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является инсектицидное средство против личинок комаров, содержащее бактерии Bacillus thuringiensis var. israelensis и добавки, которые иммобилизованы в гранулы альгинатного геля. В качестве добавок используют овсяную и кукурузную муку. [Заявка на патент Мексики. МХРА02005713, Suero Monserrat Ramirez "Formulation of corn flour or grits pellets using the mixture spore-crystal of the Bacillus thuringiensis israelensis variety encapsulated with sodium alginate and calcium chloride for the mosquito's larvae control" Опубликован 2004 г.]The closest in technical essence and the achieved effect is an insecticidal agent against mosquito larvae containing bacteria Bacillus thuringiensis var. israelensis and supplements that are immobilized into alginate gel granules. As additives, oat and corn flour are used. [Mexican patent application. MXRA02005713, Suero Monserrat Ramirez "Formulation of corn flour or grits pellets using the mixture spore-crystal of the Bacillus thuringiensis israelensis variety encapsulated with sodium alginate and calcium chloride for the mosquito's larvae control" Published 2004]
Недостатком данного средства является то, что оно обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых непродолжительное время после обработки мест выплода насекомых (50-60 дней).The disadvantage of this tool is that it has entomopathogenic activity against dipterous insect larvae for a short time after processing insect breeding sites (50-60 days).
Технической задачей данного изобретения является создание инсектицидного средства, обладающего более длительным сроком воздействия на личинки двукрылых насекомых после обработки мест их выплода (подвальных помещений, луж, метрополитенов, водной поверхности и т.д.).The technical task of this invention is the creation of an insecticidal agent with a longer exposure to the larvae of dipteran insects after processing their breeding sites (basements, puddles, subways, water surface, etc.).
Поставленная задача решается тем, что инсектицидное средство, содержащее иммобилизованные бактерии Bacillus thuringiensis и добавки, дополнительно содержит иммобилизованные клетки грибов, обладающих энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых, а в качестве добавок содержит питательные вещества для грибов и бактерий и вещества, придающие гранулам средства плавучесть.The problem is solved in that the insecticidal agent containing immobilized bacteria of Bacillus thuringiensis and additives additionally contains immobilized fungal cells with entomopathogenic activity against dipterous insect larvae, and as additives contains nutrients for fungi and bacteria and substances that give granules funds buoyancy.
В качестве грибов, обладающих энтомопатогенной активностью, могут быть использованы микроскопические грибы Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Verticillium lecanii, Tolypocladium cylindrosporum, Paecilomyces farinosus и др.Microscopic fungi Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Verticillium lecanii, Tolypocladium cylindrosporum, Paecilomyces farinosus, etc. can be used as fungi with entomopathogenic activity.
Предпочтительно, в качестве грибов, обладающих энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых, используют клетки гриба Tolypocladium cylindrosporum.Preferably, fungus cells of the Tolypocladium cylindrosporum fungus are used as fungi having entomopathogenic activity with respect to the larvae of dipteran insects.
В качестве питательных веществ могут быть использованы крахмал, желатин и другие высокомолекулярные вещества природного происхождения в количестве, достаточном для обеспечения жизнедеятельности микроорганизмов в течение всего срока действия средства.As nutrients, starch, gelatin and other high molecular weight substances of natural origin can be used in an amount sufficient to ensure the vital activity of microorganisms throughout the life of the product.
В качестве добавок, придающих гранулам плавучесть, могут быть использованы различные растительные масла (подсолнечное, рапсовое и др.), алканы С8-С20, а также другие вещества природного происхождения, не токсичные для живых организмов, плотность которых меньше плотности воды.As additives that add buoyancy to the granules, various vegetable oils (sunflower, rapeseed, etc.), C 8 -C 20 alkanes, as well as other substances of natural origin, non-toxic to living organisms, whose density is lower than the density of water, can be used.
Иммобилизация микроорганизмов в смеси с добавками может быть осуществлена различными известными способами, в том числе, методами, подробно описанными в книге А.П.Синицын, Е.И.Райнина, В.И.Лозинский, С.Д.Спасов. Иммобилизованные клетки микроорганизмов // Издательство Московского Университета, Университетское издательство им. Св. Климента Орхидского, 1994, стр.157-170.The immobilization of microorganisms in a mixture with additives can be carried out by various known methods, including methods described in detail in the book by A.P. Sinitsyn, E.I. Rainin, V.I. Lozinsky, S.D. Spasov. Immobilized cells of microorganisms // Publishing house of Moscow University, University publishing house. St. Clement of Orchid, 1994, pp. 157-170.
В частности, иммобилизация может быть осуществлена путем прикапывания (погружения) мелких жидких капель смеси альгината натрия, клеток микроорганизмов и добавок к водному раствору, содержащему 0,5-8% хлористого кальция.In particular, immobilization can be carried out by dropping (immersion) of small liquid drops of a mixture of sodium alginate, microorganism cells and additives to an aqueous solution containing 0.5-8% calcium chloride.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Примеры 1-9 иллюстрируют методику получения инсектицидного средства, содержащего клетки бактерии Bacillus thuringiensis var. israelensis, клетки различных типов грибов и различные добавки.Examples 1-9 illustrate the method of obtaining an insecticidal agent containing cells of the bacterium Bacillus thuringiensis var. israelensis, cells of various types of fungi and various additives.
Пример 1Example 1
В коническую колбу емкостью 750 мл вносят 250 мл среды Чапека (глюкоза - 30 г/л, NaNO3 - 2 г/л, КН2РO4 - 1 г/л, MgSO4 - 0,5 г/л, КСl - 0,5 г/л, FeSO4 - 0,01 г/л, вода - 1000 мл) стерилизуют в автоклаве 30 минут при давлении 0,5 атм и после охлаждения вносят 2 мл посевной культуры микроскопического гриба Tolypocladium cylindrosporum. Культуру инокулируют в течение 6 суток при комнатной температуре на микробиологической роторной качалке при скорости 140 об/мин до концентрации клеток 109 КОЕ/мл.In a conical flask with a capacity of 750 ml add 250 ml of Chapek's medium (glucose - 30 g / l, NaNO 3 - 2 g / l, KH 2 PO 4 - 1 g / l, MgSO 4 - 0.5 g / l, KCl - 0 5 g / l, FeSO 4 - 0.01 g / l, water - 1000 ml) are autoclaved for 30 minutes at a pressure of 0.5 atm, and after cooling, 2 ml of inoculum culture of the microscopic fungus Tolypocladium cylindrosporum is introduced. The culture is inoculated for 6 days at room temperature on a microbiological rotary shaker at a speed of 140 rpm to a cell concentration of 10 9 CFU / ml.
Параллельно аналогичным способом выращивают клетки бактерии Bacillus thuringiensis var. israelensis на среде L-бульон в течение 48 часов до получения концентрации клеток бактерии, равной 1010 КОЕ/мл.In a similar manner, cells of the bacterium Bacillus thuringiensis var. israelensis on L-broth medium for 48 hours until a bacterial cell concentration of 10 10 CFU / ml is obtained.
Отдельно в стеклянном стакане емкостью 250 мл смешивают 1 г ионотропного блок-сополимера - природного альгината натрия с водой (99 мл) до получения гелеобразной массы, к которой также при перемешивании добавляют 10 г питательной добавки - крахмала и 10 г подсолнечного масла.Separately, in a 250 ml glass beaker, 1 g of an ionotropic block copolymer of natural sodium alginate is mixed with water (99 ml) to obtain a gel-like mass, to which 10 g of a nutritional supplement - starch and 10 g of sunflower oil are also added with stirring.
К полученной смеси альгината натрия, крахмала, подсолнечного масла и воды добавляют 5 мл приготовленной культурой клеток микроорганизмов микроскопического гриба Tolypocladium cylindrosporum и 5 мл клеток бактерии Bacillus thuringiensis var. israelensis и перемешивают до получения однородной массы.To the resulting mixture of sodium alginate, starch, sunflower oil and water, add 5 ml of the prepared culture cell of microorganisms of the microscopic fungus Tolypocladium cylindrosporum and 5 ml of cells of the bacterium Bacillus thuringiensis var. israelensis and mixed until smooth.
В отдельной емкости объемом 500 мл готовят 2%-ный водный раствор сшивающего агента (кросс-агента) - хлористого кальция.In a separate container with a volume of 500 ml, a 2% aqueous solution of a crosslinking agent (cross-agent) - calcium chloride is prepared.
Иммобилизацию осуществляют следующим образом. Однородную смесь альгината натрия, крахмала, подсолнечного масла с клетками микроорганизмов под давлением (1-5 бар) пропускают через инжекторную установку под давлением, а в область отрыва капель подают поток воздуха. Образующиеся при отрыве от сопла инжекторной установки капли раствора с клетками попадают в раствор хлористого кальция (кросс-агента), где происходит полимеризация альгината натрия с образованием плотных гранул биополимера с заключенными внутри клетками микроорганизмов. Полимеризация происходит за счет химической реакции между полимером и солью металла. Размер гранул может варьироваться в зависимости от напора воздушной струи, подаваемой в область распыла гелеобразной массы.Immobilization is as follows. A homogeneous mixture of sodium alginate, starch, sunflower oil with cells of microorganisms under pressure (1-5 bar) is passed through an injection unit under pressure, and an air stream is introduced into the area of separation of droplets. Drops of the solution with the cells formed upon separation from the nozzle of the injection unit fall into the solution of calcium chloride (cross-agent), where sodium alginate is polymerized to form dense biopolymer granules with microorganisms enclosed inside the cells. Polymerization occurs due to a chemical reaction between the polymer and the metal salt. The size of the granules may vary depending on the pressure of the air stream supplied to the spray area of the gel-like mass.
Всего для приготовления инсектицидного средства было взято 5 мл клеток гриба (концентрация клеток 109 КОЕ/мл) и 5 мл клеток бактерии (концентрация клеток бактерий 1010 КОЕ/мл). Тогда отношение количества клеток гриба к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве равно 1:10.In total, 5 ml of fungal cells (cell concentration of 10 9 CFU / ml) and 5 ml of bacterial cells (bacterial cell concentration of 10 10 CFU / ml) were taken for the preparation of the insecticidal agent. Then the ratio of the number of fungal cells to the number of bacterial cells in the insecticidal agent is 1:10.
Полученные гранулы инсектицидного средства, содержащие иммобилизованные клетки гриба Tolypocladium cylindrosporum и клетки бактерии Bacillus thuringiensis var. israelensis, отфильтровывают от раствора соли, сушат и смешивают с раствором консервирующего агента (лактоза) и хранят до их использования. Срок хранения инсектицидного средства - 1 год.The obtained granules of an insecticidal agent containing immobilized cells of the fungus Tolypocladium cylindrosporum and cells of the bacterium Bacillus thuringiensis var. israelensis, is filtered off from a salt solution, dried and mixed with a solution of a preservative agent (lactose) and stored until their use. The shelf life of the insecticide is 1 year.
Пример 2Example 2
Клетки бактерии и гриба выращивают аналогично примеру 1.Cells of bacteria and fungi are grown analogously to example 1.
К 120 г смеси альгината натрия, крахмала и подсолнечного масла, полученной аналогично примеру 1, добавляют 10 мл приготовленной культуры микроорганизмов микроскопического гриба Tolypocladium cylindrosporum. Иммобилизацию микроскопического гриба осуществляют аналогично примеру 1, при этом в качестве кросс-агента используют предварительно приготовленный 4%-ный водный раствор хлористого кальция.To 120 g of a mixture of sodium alginate, starch and sunflower oil, obtained analogously to example 1, add 10 ml of the prepared culture of microorganisms of the microscopic fungus Tolypocladium cylindrosporum. Immobilization of the microscopic fungus is carried out analogously to example 1, while a pre-prepared 4% aqueous solution of calcium chloride is used as a cross-agent.
Полученные гранулы, содержащие иммобилизованные микроорганизмы гриба Tolypocladium cylindrosporum, отфильтровывают от раствора соли и сушат.The obtained granules containing immobilized microorganisms of the fungus Tolypocladium cylindrosporum are filtered off from a salt solution and dried.
К 120 г смеси альгината натрия, крахмала и подсолнечного масла, полученной аналогично примеру 1, добавляют 10 мл приготовленной культуры бактерий Bacillus thuringiensis var. israelensis. Иммобилизацию клеток бактерии осуществляют аналогично примеру 1, при этом в качестве кросс-агента используют предварительно приготовленный 3%-ный водный раствор хлористого кальция.To 120 g of a mixture of sodium alginate, starch and sunflower oil, obtained analogously to example 1, add 10 ml of the prepared bacterial culture of Bacillus thuringiensis var. israelensis. The immobilization of bacterial cells is carried out analogously to example 1, while a pre-prepared 3% aqueous solution of calcium chloride is used as a cross-agent.
Полученные гранулы, содержащие иммобилизованные клетки бактерии Bacillus thuringiensis var. israelensis, отфильтровывают от раствора соли и сушат.The obtained granules containing immobilized cells of the bacterium Bacillus thuringiensis var. israelensis, filtered off from brine and dried.
Полученные гранулы иммобилизованных клеток гриба Tolypocladium cylindrosporum смешивают с гранулами иммобилизованных клеток бактерий Bacillus thuringiensis var. israelensis в массовом соотношении 3:1. Отношение количества клеток гриба к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве равно 1:3.33.The obtained granules of immobilized cells of the fungus Tolypocladium cylindrosporum are mixed with granules of immobilized cells of the bacteria Bacillus thuringiensis var. israelensis in a mass ratio of 3: 1. The ratio of the number of fungal cells to the number of bacterial cells in an insecticidal agent is 1: 3.33.
Полученная смесь представляет собой готовую форму инсектицидного средства, которое используют для обработки мест выплода комаров (подвальных помещений, луж, метрополитенов, водной поверхности и т.д.). Срок хранения - 10 мес.The resulting mixture is a finished form of an insecticidal agent that is used to treat mosquito breeding sites (basements, puddles, subways, water surface, etc.). Shelf life - 10 months.
Пример 3Example 3
Процесс получения инсектицидного средства осуществляют аналогично примеру 1, но в качестве грибов используют Beauveria bassiana, в качестве питательного вещества - желатин; в качестве вещества, придающего гранулам плавучесть, - додекан. Отношение количества клеток гриба к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве = 1:10.The process of obtaining an insecticidal agent is carried out analogously to example 1, but Beauveria bassiana is used as fungi, gelatin is used as a nutrient; as a substance that gives buoyancy to the granules, dodecane. The ratio of the number of fungal cells to the number of bacterial cells in an insecticidal agent = 1:10.
Полученная смесь представляет собой готовую форму инсектицидного средства, которое используют для обработки мест выплода комаров (подвальных помещений, луж, метрополитенов, водной поверхности и т.д.). Срок хранения полученного инсектицидного средства - 1 год.The resulting mixture is a finished form of an insecticidal agent that is used to treat mosquito breeding sites (basements, puddles, subways, water surface, etc.). The shelf life of the received insecticidal agent is 1 year.
Пример 4Example 4
Процесс получения инсектицидного средства осуществляют аналогично примеру 2, но в качестве грибов используют Metarhizium anisopliae, в качестве питательных веществ - сахар, в качестве веществ, придающих гранулам плавучесть, - кукурузное масло.The process of obtaining an insecticidal agent is carried out analogously to example 2, but Metarhizium anisopliae is used as fungi, sugar as nutrients, and corn oil as substances that add buoyancy to granules.
Полученные гранулы иммобилизованных микроорганизмов гриба Metarhizium anisopliae смешивают с гранулами иммобилизованных бактерий Bacillus thuringiensis var. israelensis в массовом соотношении 1:3. Отношение количества клеток гриба к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве = 1:30.The obtained granules of immobilized microorganisms of the fungus Metarhizium anisopliae are mixed with granules of immobilized bacteria of Bacillus thuringiensis var. israelensis in a mass ratio of 1: 3. The ratio of the number of fungal cells to the number of bacterial cells in an insecticidal agent = 1:30.
Полученная смесь представляет собой готовую форму инсектицидного средства, которое используют для обработки мест выплода комаров (подвальных помещений, луж, метрополитенов, водной поверхности и т.д.).The resulting mixture is a finished form of an insecticidal agent that is used to treat mosquito breeding sites (basements, puddles, subways, water surface, etc.).
Срок хранения полученного инсектицидного средства - 1 год.The shelf life of the received insecticidal agent is 1 year.
Пример 5Example 5
Процесс получения иммобилизованных клеток гриба осуществляют аналогично примеру 2, но в качестве гриба используют Verticillium lecanii, в качестве питательных веществ - смесь крахмала и желатина (1:1 масс), в качестве веществ, придающего гранулам плавучесть - воск.The process of obtaining immobilized fungal cells is carried out analogously to example 2, but Verticillium lecanii is used as a fungus, a mixture of starch and gelatin (1: 1 mass) is used as nutrient, and wax is used as a substance that gives granules buoyancy.
Полученные гранулы иммобилизованных микроорганизмов гриба Verticillium lecanii смешивают с гранулами иммобилизованных бактерий Bacillus thuringiensis var. israelensis в массовом соотношении 1:1.The obtained granules of immobilized microorganisms of the fungus Verticillium lecanii are mixed with granules of immobilized bacteria of Bacillus thuringiensis var. israelensis in a mass ratio of 1: 1.
Отношение количества клеток гриба к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве = 1:10.The ratio of the number of fungal cells to the number of bacterial cells in an insecticidal agent = 1:10.
Полученная смесь представляет собой готовую форму инсектицидного средства, которое используют для обработки мест выплода комаров (подвальных помещений, луж, метрополитенов, водной поверхности и т.д.).The resulting mixture is a finished form of an insecticidal agent that is used to treat mosquito breeding sites (basements, puddles, subways, water surface, etc.).
Срок хранения полученного инсектицидного средства - 1 год.The shelf life of the received insecticidal agent is 1 year.
Пример 6Example 6
Клетки микроскопического гриба Beauveria bassiana инокулируют аналогично примеру 1 в течение 7 суток при комнатной температуре на микробиологической роторной качалке при скорости 140 об/мин до концентрации клеток 109 КОЕ/мл.The cells of the microscopic fungus Beauveria bassiana are inoculated in the same manner as in Example 1 for 7 days at room temperature on a microbiological rotary shaker at a speed of 140 rpm to a cell concentration of 10 9 CFU / ml.
Отдельно в стеклянном стакане емкостью 250 мл смешивают 1 г ионотропного блок-сополимера - природного альгината натрия с водой (99 мл) до получения гелеобразной массы, к которой также при перемешивании добавляют 10 г питательной добавки - крахмала и 5 г подсолнечного масла и 2 г додекана.Separately, 1 g of an ionotropic block copolymer of natural sodium alginate with water (99 ml) is mixed in a 250 ml glass beaker to obtain a gel-like mass, to which 10 g of a nutritional supplement - starch and 5 g of sunflower oil and 2 g of dodecane are also added with stirring .
К полученной смеси альгината натрия, крахмала, подсолнечного масла, додекана и воды добавляют 5 мл приготовленной культурой клеток микроорганизмов микроскопического гриба Beauveria bassiana.To the resulting mixture of sodium alginate, starch, sunflower oil, dodecan and water add 5 ml of the prepared cell culture of microorganisms of the microscopic fungus Beauveria bassiana.
В отдельной емкости объемом 500 мл готовят 2.5%-ный водный раствор сшивающего агента (кросс-агента) - хлористого кальция.In a separate container with a volume of 500 ml, a 2.5% aqueous solution of a crosslinking agent (cross-agent) - calcium chloride is prepared.
Иммобилизацию клеток гриба осуществляют аналогичного примеру 1.The immobilization of fungal cells is carried out analogously to example 1.
Полученные гранулы, содержащие иммобилизованные клетки гриба Beauveria bassiana, отфильтровывают от раствора соли и сушат.The obtained granules containing immobilized Beauveria bassiana fungal cells are filtered off from the brine and dried.
Аналогично получают сухие гранулы иммобилизованных клеток гриба Metarhizium anisopliae.Similarly, dry granules of immobilized cells of the fungus Metarhizium anisopliae are obtained.
Сухие гранулы, содержащие клетки гриба Beauveria bassiana, смешивают с гранулами, содержащими содержащие иммобилизованные микроорганизмы гриба Tolypocladium cylindrosporum (полученными в примере 2), гранулами, содержащими клетки гриба Metarhizium anisopliae, и гранулами, содержащими содержащие иммобилизованные бактерии Bacillus thuringiensis var. israelensis, (полученными в примере 2) в массовом соотношении 1:1:1:1.Dry granules containing Beauveria bassiana fungal cells are mixed with granules containing immobilized microorganisms of the Tolypocladium cylindrosporum fungus (obtained in Example 2), granules containing Metarhizium anisopliae fungal cells, and granules containing immobilized Bacis varius thii bacteria. israelensis, (obtained in example 2) in a mass ratio of 1: 1: 1: 1.
Отношение суммарного количества клеток грибов к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве = 1:3.3.The ratio of the total number of fungal cells to the number of bacterial cells in an insecticidal agent = 1: 3.3.
Пример 7Example 7
Полученные в примере 2 сухие гранулы, содержащие иммобилизованные микроорганизмы гриба Tolypocladium cylindrosporum, и сухие гранулы (полученные также в примере 2), содержащие иммобилизованные клетки бактерии Bacillus thuringiensis var. Israelensis, смешивают в массовом соотношении 1:10.The dry granules obtained in Example 2 containing immobilized microorganisms of the fungus Tolypocladium cylindrosporum and the dry granules (obtained also in Example 2) containing immobilized cells of the bacterium Bacillus thuringiensis var. Israelensis mixed in a mass ratio of 1:10.
Отношение количества клеток гриба к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве = 1:100.The ratio of the number of fungal cells to the number of bacterial cells in an insecticidal agent = 1: 100.
Полученная смесь представляет собой готовую форму инсектицидного средства, которое используют для обработки мест выплода комаров (подвальных помещений, луж, метрополитенов, водной поверхности и т.д.).The resulting mixture is a finished form of an insecticidal agent that is used to treat mosquito breeding sites (basements, puddles, subways, water surface, etc.).
Срок хранения полученного инсектицидного средства - 1 год.The shelf life of the received insecticidal agent is 1 year.
Пример 8Example 8
Сухие гранулы, содержащие иммобилизованные микроорганизмы гриба Tolypocladium cylindrosporum (полученные в примере 2), и сухие гранулы, содержащие иммобилизованные клетки бактерии Bacillus thuringiensis var. Israelensis (полученные также в примере 2), смешивают в массовом соотношении 1000:1.Dry granules containing immobilized microorganisms of the fungus Tolypocladium cylindrosporum (obtained in Example 2), and dry granules containing immobilized cells of the bacterium Bacillus thuringiensis var. Israelensis (also obtained in Example 2) was mixed in a weight ratio of 1000: 1.
Отношение количества клеток гриба к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве = 100:1.The ratio of the number of fungal cells to the number of bacterial cells in an insecticidal agent = 100: 1.
Полученная смесь представляет собой готовую форму инсектицидного средства, которое используют для обработки мест выплода комаров (подвальных помещений, луж, метрополитенов, водной поверхности и т.д.).The resulting mixture is a finished form of an insecticidal agent that is used to treat mosquito breeding sites (basements, puddles, subways, water surface, etc.).
Срок хранения полученного инсектицидного средства - 1 год.The shelf life of the received insecticidal agent is 1 year.
Пример 9 (сравнительный)Example 9 (comparative)
Процесс получения инсектицидного средства осуществляют аналогично примеру 1, но не используя при этом добавки питательных веществ и веществ, придающих плавучесть гранулам.The process of obtaining an insecticidal agent is carried out analogously to example 1, but without using additives of nutrients and substances that add buoyancy to the granules.
Срок хранения полученного инсектицидного средства - 30 дней.The shelf life of the received insecticidal agent is 30 days.
Примеры 10-19 иллюстрируют эффективность инсектицидных средств, полученных по примерам 1-9 и прототипу.Examples 10-19 illustrate the effectiveness of insecticidal agents obtained in examples 1-9 and the prototype.
Оценку эффективности инсектицидных средств проводили путем сравнения обилия (численности) личинок в нескольких рядом расположенных, не сообщающихся водоемах, приблизительно одинаковой площади около 50 м каждый, до и после обработки. Один водоем обрабатывали инсектицидным средством, полученным по примерам 1-9, другой инсектицидным средством по прототипу. Один водоем (контрольный) не обрабатывали.Evaluation of the effectiveness of insecticides was carried out by comparing the abundance (number) of larvae in several adjacent, non-communicating bodies of water, approximately the same area of about 50 m each, before and after treatment. One pond was treated with an insecticidal agent obtained according to examples 1-9, another insecticidal agent according to the prototype. One pond (control) was not treated.
Обилие личинок насекомых в толще воды определяли согласно методическим указаниям МУ 3.1.1027-01 «Сбор, учет и подготовка к лабораторному исследованию кровососущих членистоногих - переносчиков возбудителей природно-очаговых инфекций», утвержденным главным санитарным врачом Российской Федерации 6 апреля 2001 г.The abundance of insect larvae in the water column was determined according to the guidelines MU 3.1.1027-01 “Collection, recording and preparation for laboratory testing of blood-sucking arthropods - carriers of pathogens of natural focal infections”, approved by the chief sanitary doctor of the Russian Federation on April 6, 2001
Обработку водоемов инсектицидным средством проводили путем распыления предварительно полученной суспензии гранул инсектицидного средства в воде, содержащей 1 мас.% гранул, исходя из расчета - 1 мл суспензии на 1 м2 поверхности водоема. Для распыления суспензии гранул использовали ранцевые опрыскиватели.The treatment of reservoirs with an insecticidal agent was carried out by spraying a previously obtained suspension of granules of an insecticidal agent in water containing 1 wt.% Granules, based on the calculation of 1 ml of suspension per 1 m 2 of the surface of the reservoir. Knapsack sprayers were used to spray the suspension of granules.
Перед обработкой, а также через 24 ч после обработки водоема определяли количество живых личинок в каждом из водоемов. В дальнейшем, определение количества живых личинок в водоемах проводили 1-2 раза в неделю в течение 3-5 месяцев. На основании полученных результатов определяли численность личинок в % от первоначальной (исходной численности).Before treatment, as well as 24 hours after treatment of the reservoir, the number of living larvae in each of the reservoirs was determined. In the future, the determination of the number of live larvae in ponds was carried out 1-2 times a week for 3-5 months. Based on the results obtained, the number of larvae was determined in% of the initial (initial number).
Пример 10Example 10
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, состава по примеру 1. Динамика изменения численности живых личинок в водоемах во времени до и после обработки (в % от первоначальной численности) приведена на чертеже.The treatment was carried out using a suspension of granules of an insecticidal agent, composition according to example 1. The dynamics of changes in the number of living larvae in water in time before and after treatment (in% of the initial number) is shown in the drawing.
Как видно из приведенного графика, заявленное инсектицидное средство обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых, по крайней мере, в течение 90 дней (3 месяца). В тоже время, средство по прототипу теряет свою эффективность через 50-60 дней.As can be seen from the graph, the claimed insecticidal agent has entomopathogenic activity against diptera insect larvae for at least 90 days (3 months). At the same time, the prototype product loses its effectiveness after 50-60 days.
Пример 11Example 11
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, состава по примеру 2. Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по примеру 2 обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 120 дней (4 месяца).The treatment was carried out using a suspension of granules of an insecticidal agent, composition according to example 2. It was experimentally established that the insecticidal agent according to example 2 has entomopathogenic activity against diptera insect larvae for 120 days (4 months).
Пример 12Example 12
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, состава по примеру 3. Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по примеру 3 обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 90 дней (3 месяца).The treatment was carried out using a suspension of granules of an insecticidal agent, composition according to example 3. It was experimentally established that the insecticidal agent according to example 3 has entomopathogenic activity against dipterous insect larvae for 90 days (3 months).
Пример 13Example 13
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, состава по примеру 4. Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по примеру 4 обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 100 дней (более 3 месяцев).The processing was carried out using a suspension of granules of an insecticidal agent, composition according to example 4. It was experimentally established that the insecticidal agent according to example 4 has entomopathogenic activity against dipterous insect larvae for 100 days (more than 3 months).
Пример 14Example 14
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, состава по примеру 5. Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по примеру 5 обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение ПО дней (более 3 месяцев).The treatment was carried out using a suspension of granules of an insecticidal agent, composition according to example 5. It was experimentally established that the insecticidal agent according to example 5 has entomopathogenic activity against dipterous insect larvae for PO days (more than 3 months).
Пример 15Example 15
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, состава по примеру 6. Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по примеру 6 обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 120 дней.The treatment was carried out using a suspension of granules of an insecticidal agent, composition according to example 6. It was experimentally established that the insecticidal agent according to example 6 has entomopathogenic activity against dipterous insect larvae for 120 days.
Пример 16Example 16
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, состава по примеру 7. Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по примеру 7 обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 70 дней.The treatment was carried out using a suspension of granules of an insecticidal agent, composition according to example 7. It was experimentally established that the insecticidal agent according to example 7 has entomopathogenic activity against diptera insect larvae for 70 days.
Динамика изменения численности живых личинок в водоемах во времени до и после обработки (в % от первоначальной численности) приведена на чертеже.The dynamics of changes in the number of living larvae in reservoirs in time before and after treatment (in% of the initial number) is shown in the drawing.
Несмотря на то, что при использовании инсектицидного средства по примеру 7 поставленная цель достигается (средство обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 80 дней), однако, из-за незначительного увеличения срока работы данного средства, использование средства такого состава экономически нецелесообразно.Despite the fact that when using the insecticidal agent of example 7, the goal is achieved (the agent has entomopathogenic activity against dipterous insect larvae within 80 days), however, due to a slight increase in the life of this agent, the use of an agent of this composition is not economically feasible .
Пример 17Example 17
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, состава по примеру 8. Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по примеру 8 обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 140 дней.The treatment was carried out using a suspension of granules of an insecticidal agent of the composition of Example 8. It was experimentally established that the insecticidal agent of Example 8 has entomopathogenic activity against diptera larvae for 140 days.
Динамика изменения численности живых личинок в водоемах во времени до и после обработки (в % от первоначальной численности) приведена на чертеже.The dynamics of changes in the number of living larvae in reservoirs in time before and after treatment (in% of the initial number) is shown in the drawing.
Несмотря на то, что при использовании инсектицидного средства по примеру 8 поставленная цель достигается (средство обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 140 дней), однако, при этом, в первые дни после обработки наблюдается медленное падение численности живых личинок в обработанном водоеме, и использование средства такого состава экономически нецелесообразно.Despite the fact that when using the insecticidal agent of example 8, the goal is achieved (the agent has entomopathogenic activity against dipterous insect larvae for 140 days), however, in the first days after treatment, there is a slow drop in the number of living larvae in the treated reservoir, and the use of funds of such a composition is not economically feasible.
Пример 18 (сравнительный)Example 18 (comparative)
Обработку проводили, используя суспензию гранул инсектицидного средства, полученного в примере 9 и не содержащего добавок веществ. Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по примеру 9 обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 64 дней.The treatment was carried out using a suspension of granules of an insecticidal preparation obtained in Example 9 and containing no additives. It was experimentally established that the insecticidal agent of example 9 has an entomopathogenic activity with respect to larvae of dipteran insects for 64 days.
Использование такого инсектицидного средства (не содержащего добавок питательных веществ и веществ, придающих гранулам плавучесть) позволяет очень незначительно увеличить срок его действия, при этом срок хранения такого средства не превышает 30 суток. Применение и использование такого средства экономически нецелесообразно.The use of such an insecticidal agent (which does not contain additives of nutrients and substances that add buoyancy to the granules) makes it possible to slightly increase its duration, while the shelf life of such an agent does not exceed 30 days. The use and use of such a tool is not economically feasible.
Пример 19 (по прототипу)Example 19 (prototype)
Обработку проводили, используя суспензию гранул, содержащих только клетки бактерии Bacillus thuringiensis var. Israelensis, полученных в примере 2.The treatment was carried out using a suspension of granules containing only cells of the bacterium Bacillus thuringiensis var. Israelensis obtained in example 2.
Экспериментально установлено, что инсектицидное средство по прототипу обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых в течение 60 дней. Динамика изменения численности живых личинок в водоемах во времени до и после обработки (в % от первоначальной численности) приведена на чертеже.It was experimentally established that the insecticidal agent of the prototype has entomopathogenic activity against larvae of dipteran insects for 60 days. The dynamics of changes in the number of living larvae in reservoirs in time before and after treatment (in% of the initial number) is shown in the drawing.
Таким образом, предлагаемое инсектицидное средство обладает энтомопатогенной активностью по отношению к личинкам двукрылых насекомых по отношению к личинкам двукрылых насекомым в течение 70-140 дней практически при любом соотношении клеток грибов и бактерии. Однако лучшие результаты достигаются при соотношениях количества клеток грибов к количеству клеток бактерии в инсектицидном средстве, равном 1:3.3÷30.Thus, the proposed insecticidal agent has an entomopathogenic activity with respect to dipterous insect larvae with respect to dipterous insect larvae for 70-140 days at almost any ratio of fungal cells and bacteria. However, the best results are achieved when the ratio of the number of fungal cells to the number of bacterial cells in an insecticidal agent is 1: 3.3 ÷ 30.
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008112038/13A RU2396749C2 (en) | 2008-04-01 | 2008-04-01 | Insecticide agent to control larvae of flies |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008112038/13A RU2396749C2 (en) | 2008-04-01 | 2008-04-01 | Insecticide agent to control larvae of flies |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008112038A RU2008112038A (en) | 2009-10-10 |
| RU2396749C2 true RU2396749C2 (en) | 2010-08-20 |
Family
ID=41260240
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008112038/13A RU2396749C2 (en) | 2008-04-01 | 2008-04-01 | Insecticide agent to control larvae of flies |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2396749C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD4091C1 (en) * | 2010-05-04 | 2011-09-30 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Process for obtaining immobilized cells of Rhodococcus rhodochrous |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101792717B (en) * | 2009-12-30 | 2012-08-08 | 吉林大学 | Thermophilic acid-resisting beta-glucosaccharase producing strain and preparation method thereof |
-
2008
- 2008-04-01 RU RU2008112038/13A patent/RU2396749C2/en active IP Right Revival
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD4091C1 (en) * | 2010-05-04 | 2011-09-30 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Process for obtaining immobilized cells of Rhodococcus rhodochrous |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008112038A (en) | 2009-10-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2006060213A2 (en) | Storage stable compositions for biological materials | |
| CN102308852B (en) | Microorganism algae-inhibiting agent capable of inhibiting free microalgae or membrane microalgae in water and preparation method thereof | |
| Green et al. | Formulating microorganisms for biological control of weeds | |
| KR20220047590A (en) | Microbial-based composition for soil health restoration and pest control | |
| WO2018208736A1 (en) | Compositions and methods to reduce the population of wheat-stem sawfly and hessian fly | |
| US4718935A (en) | Method for the preparation of mycoherbicide-containing pellets | |
| CN107779408A (en) | A kind of beauveria bassiana and its microbial bacterial agent for being used to prevent and treat chafer | |
| CN110106093A (en) | A kind of Strain of Beauveria bassiana and its application | |
| CN117580815A (en) | Composition for promoting plant growth and/or protecting plants against at least one plant pest and/or at least one plant disease | |
| Acuña-Jiménez et al. | Pathogenicity of microencapsulated insecticide from Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae against tobacco budworm, Heliothis virescens (Fabricius) | |
| Wesley et al. | Effects of agrochemicals (insecticides) on microbial population in soil | |
| US20040038825A1 (en) | Water soluble uv-protective coatings for biological pesticides and process for making same | |
| RU2396749C2 (en) | Insecticide agent to control larvae of flies | |
| WO2014193162A1 (en) | Preparation method for biopesticide using paecilomyces sp. strain | |
| EP2765185A2 (en) | Strain of Brevibacillus parabrevis and controlled release composition based on it | |
| CN100336898C (en) | A pythium bacterial spawn and use thereof | |
| CN103981108A (en) | Beauveria bassiana for preventing radysia odoriphaga and application thereof | |
| WO2002013608A1 (en) | Water soluble uv-protective coatings for biological pesticides and process for making same | |
| CN1211898A (en) | Waterbourne microbial pesticides | |
| Leland | Environmental-stress tolerant formulations of Metarhizium anisopliae var. acridum for control of African desert locust (Schistocerca gregaria) | |
| Bakr et al. | EFFECT OF THERMAL STORAGE ON THE STABILITY AND EFFICACY OF BIOFORMULATION BICONT-T AGAINST FIG MOTH LARVAE EPHESTIA CAUTELLA (LEPIDOPTERA: PYRALIDAE). | |
| WO2021070060A1 (en) | Insecticide device | |
| Williams et al. | The potential of some adjuvants in promoting infection with Verticillium lecanii: laboratory bioassays with Myzus persicae | |
| Nagamoto | Carrying and effect of granulated baits formulated with entomopathogenic fungi among Atta sexdens rubropilosa colonies (Hymenoptera: Formicidae) | |
| Margalit et al. | Development and Application of Bacillus Thuringiensis Var. Israelensis Serotype H 14 as an Effective Biological Control Agent Against Mosquitoes in Israel |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120402 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20130120 |