RU2393772C1 - Способ прогнозирования развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря - Google Patents
Способ прогнозирования развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря Download PDFInfo
- Publication number
- RU2393772C1 RU2393772C1 RU2009110678/14A RU2009110678A RU2393772C1 RU 2393772 C1 RU2393772 C1 RU 2393772C1 RU 2009110678/14 A RU2009110678/14 A RU 2009110678/14A RU 2009110678 A RU2009110678 A RU 2009110678A RU 2393772 C1 RU2393772 C1 RU 2393772C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- invasive
- risk
- ubc
- patients
- development
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к онкоурологии. Из лимфоцитов периферической венозной крови выделяют ДНК, проводят ПЦР-анализ с последующей рестрикцией амплифицированных фрагментов полиморфного локуса Ile105Val гена GSTPI. При обнаружении у больных с поверхностными формами РМП гомозиготного генотипа Val/Val прогнозируют высокий риск развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря (РМП). При обнаружении гомозиготного генотипа I1е/I1е прогнозируют минимальный риск развития рецидивного инвазивного РМП. Использование изобретения прогнозирует риск развития инвазивного РМП у пациентов с поверхностными формами РМП. Способ обеспечивает высокую точность прогноза.
Description
Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к онкоурологии, и может быть использовано для выявления групп риска к развитию инвазивного рака мочевого пузыря у больных с поверхностными формами рака мочевого пузыря.
Рак мочевого пузыря (РМП) - одна из актуальных проблем в урологии и онкологии.
РМП - распространенное многофакторное онкологическое заболевание с широким разнообразием факторов риска. Известно, что пусковым механизмом развития любого многофакторного заболевания является индивидуальная генетическая предрасположенность, провоцируемая разнообразными внешнесредовыми факторами, прежде всего химической природы - ксенобиотиками [Кулинский В.И. Обезвреживание ксенобиотиков // Соросовский образовательный журнал. - 1999. - №1. - С.8-12].
Выбор метода лечения РМП зависит от степени инвазии опухоли. Различают поверхностные (неинвазивные) (Tis-TaT1) и инвазивные (Т2-Т3-Т4) формы РМП. Тактика лечения и прогноз поверхностных и инвазивных форм РМП значительно отличаются. Прогрессия поверхностного рака в инвазивный наблюдается в 25-65% случаев. Несоответствие между уровнем прогрессии поверхностного рака мочевого пузыря в инвазивный у различных пациентов позволило предположить генетическую детерминированность в развитии инвазии.
В метаболизме ксенобиотиков ключевая роль принадлежит ферментам глутатион-S-трансферазам (GSTP1, GSTM1, GSTT1) и эпоксидгидроксилазам. Полиморфизм этих генов, ассоциированный с изменением соответствующих ферментов, может участвовать в формировании риска целого ряда новообразований [Millikan R., Pitman G. et al. Glutatione S-transferase M1, T3, and P1 // Breast cancer. Cancer Epidemiology, Biomarkers and Prevention. - 2000; 12. P.567-573].
Особого внимания заслуживают глутатион-S-трансферазы П (GSTP1), поскольку в некоторых исследованиях была показана их роль в патогенезе ряда злокачественных новообразований, в частности рака мочевого пузыря [Brockmoller J., Cascorbi I., Kerb R. Combined analysis of inherited polymorphisms in arylamine N-acetyltransferase 2, glutathione S-transferase M1 and T1, microsomal epoxide hydrolase, and cytochrome P 450 enzymes as midulatiors of bladder cancer risk // Cancer Research. - 1996; 56. - P.3915-3925] и рака легкого [Miller D.P., Liu G. et al. Combinations of the variant genotypes of GSTP1, GSTM1 and p53 are assotiated with the lung cancer risk // Cancer. Research. - 2002; 62. P.2819-2823].
К глутатионам класса П относится фермент GSTP1, который участвует в детоксикации эпоксидпроизводных ПАУ, пестицидов и ряда канцерогенов [Райе Р.Х., Гуляева Л.Ф., 2003]. Высокий уровень экспрессии гена GSTP1 был обнаружен в тканях, на которых внешняя среда оказывает наибольшее влияние (эпителий легкого, мочевого пузыря и желудочно-кишечного тракта), поэтому в случае низкой ферментативной активности GSTP1 эти ткани являются зоной риска развития токсического процесса [Ма Q., Lin G., Qin Y.et al. GSTP1 Ilel05Val polymorphism in benzidine-exposed workers: an association with cytological grading of exfoliated urothelial cells // Pharmacogenetics. - 2003. - Vol.13. - №7. - P.409-15]. Транзиция аденина на гуанин в 313 положении 5 экзона гена (A313G) приводит к аминокислотной замене в 105 положении полипептида (Ile105Val), которая затрагивает последовательность ДНК, кодирующую сайт связывания фермента с определенными субстратами, и таким образом ведет к изменению активности фермента. По мнению ряда авторов, фермент, содержащий валин в 105 положении, в 7 раз активнее по отношению к диолам эпоксидов ПАУ, однако обладает в 3 раза более низкой способностью превращать 1-хлоро-2,4-динитробензен, чем фермент без замены.
Авторами в научно-медицинской и патентной литературе не обнаружено сведений об известности способа прогнозирования развития инвазивного рака мочевого пузыря у пациентов с поверхностными формами рака мочевого пузыря.
Прогнозирование риска развития инвазивного рака мочевого пузыря у пациентов с поверхностными формами рака мочевого пузыря имеет значение для определения частоты и характера наблюдения, проведения адъювантного лечения, а также влияет на выбор методики оперативного вмешательства.
Задачей изобретения является разработка объективного, высокоинформативного способа прогнозирования развития инвазивного рака мочевого пузыря у пациентов с поверхностными формами рака мочевого пузыря на основе выявления молекулярно-генетических маркеров. Метод доступен по реактивам и оборудованию.
Технический результат - получение критериев прогноза развития инвазивного рака мочевого пузыря у пациентов с поверхностными формами рака мочевого пузыря.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.
Материалом для молекулярно-генетического анализа служат образцы ДНК, выделенные из лимфоцитов периферической венозной крови. Кровь набирают в пробирки со стандартным консервантом (1 мл глюгицира) в соотношении 4:1. До выделения образцы крови хранят при температуре +4°С не более месяца. Для выделения ДНК используют стандартный метод фенольно-хлороформной экстракции [Mathew С., 1984 (The isolation of high molecular weight e ucariotic D NA // Methods in Molecular Biology / Ed. J.M.Walker. - New York., London. - 1984. - Vol.2. - P.31-34)]. К 4-8 мл крови добавляют 40 мл холодного лизирующего буфера, содержащего 320 мМ сахарозы, 1% тритона Х 100, 5 мМ MgCl2, 10 мМ трис-HCl pH 7,6. Ядра осаждают двойным центрифугированием при 4°С и 4000 g (сначала в течение 20 минут, а затем в течение 10 минут после слива супернатанта и повторного добавления 10 мл лизирующего буфера). Полученный осадок ресуспендируют в 400 мкл буфера Soline EDTA (25 мМ EDTA, NaCl 5M pH 8,0), добавляют 40 мкл 10% SDS и 30-40 мкл протеиназы К («Promega») до конечной концентрации 10 мг/мл. После перемешивания на шейкере инкубируют при 37°С в течение 10-12 часов.
Очистку ДНК от белков производят с помощью эктракции лизата забуференным фенолом (200 мкл меркаптоэтанола на 50 мл фенола-Трис-HCl, pH 7,8), смесью фенол-хлороформа (1:1) и хлороформом (2 мл изоамилового спирта на 48 мл хлороформа). При этом фенол активно денатурирует белки, смесь фенол-хлороформа полностью ингибирует РНК активность, в результате последней экстракции хлороформом из препарата ДНК удаляют остатки фенола. Экстракцию производят, смешивая лизат и растворитель до образования эмульсии. Разделение фаз проводят центрифугированием при 10000-12000 g в течение 8-10 мин. Осаждение ДНК производят добавлением двух объемов охлажденного 96% этанола. Осажденную ДНК дважды промывают 70% этанолом для очистки от солей, затем удаляют этанол из пробирки и подсушенный при комнатной температуре осадок ДНК растворяют в деионизированной воде. Раствор ДНК хранят при -20°С.
Анализ полиморфных локусов гена GSTP1 (Ile105Val) проводят методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК (ПЦР) на термоциклере в автоматическом режиме с использованием локусспецифических олигонуклеотидных праймеров. Реакционная ПЦР-смесь содержит следующие обязательные компоненты: 1,25 мкл 1×ПЦР-буфера (60 мМ Tris-HCl pH 8.5), 1,5 mM MgCl2, 25 mM KCl, 10 mM 2-меркаптоэтанол, 0.1% тритон Х-100), 200 мМ каждого dNTP, no 1 мкл соответствующих праймеров, примерно 100 нг геномной ДНК, 1 ед Taq-полимеразы («Сибэнзим», Россия) и необходимое количество деионизированной воды до объема 12.5 мкл.
Режим амплификации включает: предварительную денатурацию (94°С, 5-7 мин), 28-32 цикла амплификации: денатурация - 94°С, 40 сек; отжиг - 54 t°C, 40 сек; синтез - 72°С, 1 мин; завершающий синтез (72°С, 7-10 мин).
Полиморфизм локусов гена GSTP1 исследуют методом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ).
После амплификации ПЦР-продукт подвергают гидролизу соответствующей эндонуклеазой рестрикции. Для этого 5 мкл амплификата смешивают с 5 ед. фермента в соответствующем буфере, смесь инкубируют при определенной температуре, согласно инструкциям производителей («Сибэнзим») на протяжении 12 часов.
Результаты амплификации и рестрикции оценивают при помощи вертикального электрофореза в 6-8%-ном полиакриламидном геле (исходное соотношение акриламида и метиленбисакриламида 29:1) при напряжении 200-300 В (10 В/см). По окончании электрофореза гель окрашивают раствором бромистого этидия (0,1 мкг/мл) в течение 15 минут и фотографируют в проходящем ультрафиолетовом свете. Для идентификации аллелей использовали маркер молекулярного веса 100 bp DNA ladder («Сибэнзим»). При обнаружении у больных с поверхностными формами РМП гомозиготного генотипа Val/Val прогнозируют высокий риск развития рецидивного инвазивного РМП. При обнаружении гомозиготного генотипа Ile/Ile прогнозируют минимальный риск развития рецидивного инвазивного РМП.
Проведен анализ на выборке из 145 больных с диагнозом РМП, из них 68 пациентов с инвазивным и 77 с поверхностным РМП, находившихся на стационарном лечении в Республиканском онкологическом диспансере и Республиканской клинической больнице г.Уфы (РБ) в период с 2005 по 2008 г. Клиническое обследование больных проводилось врачами стационаров и включало обязательные и дополнительные методы исследования. Средний возраст больных с инвазивным РМП составил 62.07±11.12 лет, а с поверхностным РМП - 60.48±11.50 лет.
Ассоциацию генотипов, аллелей с развитием заболевания выявляли, сравнивая выборки больных и здоровых индивидов по частоте одного признака с использованием критерия χ2. Статистически значимыми считали различия при p<0.05.
Относительный риск заболевания по конкретному признаку вычисляли как соотношение шансов (OR - odds ratio): OR=(a×d)/(b×c),
где a - частота аллеля (генотипа) в выборке больных инвазивными формами РМП, b - частота аллеля (генотипа) в выборке больных поверхностными формами РМП, с - сумма частот остальных аллелей (генотипов) в выборке больных инвазивными формами РМП, d - сумма частот остальных аллелей (генотипов) в выборке больных поверхностными формами РМП. Доверительный интервал для относительного риска рассчитывали по следующей формуле:
Значение OR>1.5 рассматривали как положительную ассоциацию заболевания с признаком («фактор риска»), OR<0.5 - как отрицательную ассоциацию («фактор устойчивости»).
Анализ распределения генотипов локуса Ile105Val гена GSTP1 у больных РМП в зависимости от степени инвазии показал, что генотип Val/Val выявлялся достоверно чаще у индивидов с инвазивным течением заболевания, чем у индивидов с неинвазивной формой РМП (17% и 3% соответственно, χ2=5.9; р=0.01). В группе больных с неинвазивным характером роста частота генотипа Ile/Ile гена GSTP1 увеличена до 67% против 39% в группе больных с инвазивными формами РМП (χ2=10.1; р=0.002). Показатель отношения шансов для данного генотипа составил 0.3 (95% CI 0.1-0.6), указывая на его протективную значимость в отношении развития инвазивных форм РМП.
Предлагаемый способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.
Пример 1. Пациент, 42 года, поступил в урологическое отделение РКБ с жалобами на примесь крови в моче в течение 2 недель.
Объективно: состояние удовлетворительное; кожа и видимые слизистые обычной окраски. Дыхание везикулярное, тоны сердца ясные ритмичные. Живот мягкий безболезненный. Мочеиспускание самостоятельное, безболезненное. В моче примесь крови. Анализ крови: эр - 3,4×1012/л, л - 10,5×109/л, СОЭ - 19 мм/час. УЗИ органов брюшной полости без патологии. УЗИ мочевого пузыря выявило по задней стенке мочевого пузыря гиперэхогенное объемное образование 35×46 мм. ТРУЗИ подтвердило наличие объемного гиперэхогенного образования по задней стенке на 7 часах без инвазии в мышечную стенку размерами 35×45 мм, с кровотоком в режиме доплеровского картирования. Цистосткопия с биопсией подтвердила диагноз: умеренно-дифференцированный плоскоклеточный рак мочевого пузыря. Проведено исследование по предложенной методике. Установлено: пациент обладает генотипом Ile/Ile полиморфного локуса Ile105Val гена GSTP1. Риск развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря у данного пациента минимален.
Произведена трансуретральная резекция опухоли мочевого пузыря с интраоперационной химиопрофилактикой митомицином. Пациенту рекомендовано контрольное УЗИ исследование 1 раз в 3 месяца в первый год наблюдения. При контрольном обследовании через 2 года у пациента не выявлен рецидив опухоли мочевого пузыря.
Пример 2. Пациент, 45 лет, поступил в урологическое отделение РКБ с жалобами на примесь крови в моче в течение месяца.
Объективно: состояние удовлетворительное; кожа и видимые слизистые обычной окраски. Дыхание везикулярное, тоны сердца ясные ритмичные. Живот мягкий безболезненный. Мочеиспускание самостоятельное, безболезненное. В моче примесь крови. Анализ крови: эр - 3,7×1012/л, л - 8,5×109/л, СОЭ - 15 мм/час. УЗИ органов брюшной полости без патологии. УЗИ мочевого пузыря выявило по передней стенке мочевого пузыря гиперэхогенное объемное образование 40×35 мм. ТРУЗИ подтвердило наличие объемного гиперэхогенного образования по задней стенке на 8 часах без инвазии в мышечную стенку размерами 42×37 мм, с кровотоком в режиме доплеровского картирования. Цистосткопия с биопсией подтвердила диагноз: умеренно-дифференцированный плоскоклеточный рак мочевого пузыря. Проведено исследование по предложенной методике. Установлено: пациент обладает гомозиготным генотипом Val/Val полиморфного локуса Ile105Val гена GSTP1. У данного пациента высокий риск развития рецидива инвазивного рака мочевого пузыря.
Произведена трансуретральная резекция опухоли мочевого пузыря с интраоперационной химиопрофилактикой митомицином. В послеоперационном периоде пациенту проведена внутрипузырная иммунотерапия. Пациенту рекомендовано контрольное УЗИ и цистоскопическое исследование через 1 месяц и в дальнейшем 1 раз в 3 месяца. При 3-м контрольном УЗИ исследовании выявлен рецидив опухоли с инвазией в стенку мочевого пузыря. Пациенту произведена радикальная цистэктомия с илеоцистопластикой по Штудеру.
Таким образом, выявление высокого риска развития инвазии опухоли у данного пациента позволило выбрать более активную тактику послеоперационного наблюдении и лечения, что привело к своевременной диагностике развития инвазивного РМП и своевременному выполнению радикальной цистэктомии с илеоцистопластикой.
Claims (1)
- Способ прогнозирования риска развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря (РМП) у пациентов с поверхностными формами РМП, характеризующийся тем, что из лимфоцитов периферической венозной крови выделяют ДНК, проводят анализ полиморфного локуса Ile105Val гена GSTP1 методом ПЦР с последующей рестрикцией амплифицированных фрагментов и при обнаружении генотипа Val/Val прогнозируют высокий риск развития инвазивного РМП, при обнаружении генотипа lle/lle прогнозируют минимальный риск.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009110678/14A RU2393772C1 (ru) | 2009-03-23 | 2009-03-23 | Способ прогнозирования развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009110678/14A RU2393772C1 (ru) | 2009-03-23 | 2009-03-23 | Способ прогнозирования развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2393772C1 true RU2393772C1 (ru) | 2010-07-10 |
Family
ID=42684501
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009110678/14A RU2393772C1 (ru) | 2009-03-23 | 2009-03-23 | Способ прогнозирования развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2393772C1 (ru) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2469323C2 (ru) * | 2011-01-28 | 2012-12-10 | Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН | Способ диагностики рака мочевого пузыря (варианты) и набор для его осуществления |
RU2470301C2 (ru) * | 2011-03-16 | 2012-12-20 | Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН | Способ диагностики рака мочевого пузыря с помощью онкомаркера kifc1 (варианты) и набор для его осуществления |
RU2538632C2 (ru) * | 2012-11-08 | 2015-01-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ онкологии" СО РАМН) | Способ прогнозирования исхода мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря после комбинированного лечения |
EA026708B1 (ru) * | 2012-01-25 | 2017-05-31 | Государственное Научное Учреждение "Объединенный Институт Энергетических И Ядерных Исследований - Сосны" Национальной Академии Наук Беларуси | Способ выявления групп риска заболеваний раком мочевого пузыря |
RU2793510C1 (ru) * | 2022-07-25 | 2023-04-04 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования рецидива немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря |
-
2009
- 2009-03-23 RU RU2009110678/14A patent/RU2393772C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
МАТВЕЕВ В.Б. Рак мочевого пузыря. Дата публикации 18.08.2008, [он-лайн], найдено 19.10.2009, найдено из Интернет, http://www.ronc.ru/3837. VAN RHIJN B.W. et al. Urine markers for bladder cancer surveillance: a systematic review., Eur. Urol., 2005; 47: 736-48. * |
ШАЛАВИН И.А. Маркеры рецидива поверхностного рака мочевого пузыря. Дата публикации 13.06.2006, [он-лайн], найдено 19.10.2009, найдено из Интернет, http://www.vrach-aspirant.m/lib_show/l 7.html. * |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2469323C2 (ru) * | 2011-01-28 | 2012-12-10 | Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН | Способ диагностики рака мочевого пузыря (варианты) и набор для его осуществления |
RU2470301C2 (ru) * | 2011-03-16 | 2012-12-20 | Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН | Способ диагностики рака мочевого пузыря с помощью онкомаркера kifc1 (варианты) и набор для его осуществления |
EA026708B1 (ru) * | 2012-01-25 | 2017-05-31 | Государственное Научное Учреждение "Объединенный Институт Энергетических И Ядерных Исследований - Сосны" Национальной Академии Наук Беларуси | Способ выявления групп риска заболеваний раком мочевого пузыря |
RU2538632C2 (ru) * | 2012-11-08 | 2015-01-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ онкологии" СО РАМН) | Способ прогнозирования исхода мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря после комбинированного лечения |
RU2793510C1 (ru) * | 2022-07-25 | 2023-04-04 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования рецидива немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP3056576A2 (en) | A method of diagnosing neoplasms | |
ES2453108T3 (es) | Nuevos polimorfismos de un único nucleótido y combinaciones de polimorfismos nuevos y conocidos para determinar la expresión específica de alelo del gen IGF2 | |
CN109097477B (zh) | 一种用于乳腺癌诊断的circRNA标志物及其应用 | |
JP2007525980A (ja) | 患者結果を予測するトロンボモジュリン(thbd)ハプロタイプ | |
US8080378B2 (en) | Method of detecting colon cancer marker | |
US20120238463A1 (en) | LINE-1 Hypomethylation as a Biomarker for Early-Onset Colorectal Cancer | |
JP2007527718A (ja) | 患者結果(OutcomeofPatients)を予測するトール様受容体2(TLR−2)ハプロタイプ | |
KR20150067151A (ko) | 암을 스크리닝하는 방법 | |
CN109680064B (zh) | Ythdf2基因在尿路上皮癌诊断、预防和治疗中的应用 | |
RU2393772C1 (ru) | Способ прогнозирования развития рецидивного инвазивного рака мочевого пузыря | |
AU2005226398A1 (en) | Marker gene for arthrorheumatism test | |
Gamberi et al. | Detection of H3F3A p. G35W and p. G35R in giant cell tumor of bone by Allele Specific Locked Nucleic Acid quantitative PCR (ASLNAqPCR) | |
US20040072166A1 (en) | HURP gene as a molecular marker for bladder cancer | |
CN109321658B (zh) | 一种检测宫颈癌易感性的试剂盒 | |
WO2019077191A1 (es) | Medicina de precisión dirigida al diagnóstico, pronóstico y predicción del cáncer colorrectal | |
KR20210083100A (ko) | 대장암환자의 rcc 또는 lcc 판별용 마커 | |
CN113355420B (zh) | 一种jak3启动子甲基化的检测引物组合物、应用及检测方法 | |
Said et al. | Association between AXIN1 gene polymorphisms (wnt signaling pathway gene) and nephropathy induced by diabetes and hypertension in the Egyptian population | |
WO2012139945A1 (en) | Method for predicting survival in cancer patients | |
CN111139295B (zh) | 一种与非综合征型多生牙诊断相关的snp标志物及其应用 | |
CN108342488A (zh) | 一种用于检测胃癌的试剂盒 | |
RU2348039C1 (ru) | Способ прогнозирования нагноения однокамерной эхинококковой кисты у инвазированных детей | |
US8518644B2 (en) | Method of judging inflammatory disease by using single nucleotide polymorphism | |
Alwan et al. | Determination Of Polymorphism Of Glutathione S Transferase (GST) In The Iraqi (Diabetic And Non-Diabetic) Acromegalic Patients | |
JP4426549B2 (ja) | 新規遺伝子acmg1のメチル化を指標とする胃癌の診断方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110324 |