RU2393214C1 - Immunobiologial antiallergic agent (versions), lactobacillus acidophilus nkjc strain, lactobacillus acidophilus jch strain, lactobacillus acidophilus kaa strain - Google Patents
Immunobiologial antiallergic agent (versions), lactobacillus acidophilus nkjc strain, lactobacillus acidophilus jch strain, lactobacillus acidophilus kaa strain Download PDFInfo
- Publication number
- RU2393214C1 RU2393214C1 RU2009102950/13A RU2009102950A RU2393214C1 RU 2393214 C1 RU2393214 C1 RU 2393214C1 RU 2009102950/13 A RU2009102950/13 A RU 2009102950/13A RU 2009102950 A RU2009102950 A RU 2009102950A RU 2393214 C1 RU2393214 C1 RU 2393214C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lactobacillus acidophilus
- collection
- strain
- microorganisms
- immunobiological
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности и может быть использовано в производстве и использовании медицинских иммунобиологических препаратов и биологически активных добавок к пище.The invention relates to medicine and the pharmaceutical industry and can be used in the production and use of medical immunobiological preparations and biologically active food additives.
Известно противоаллергическое действие молочнокислых бактерий, преимущественно лактобацилл (Weid Т., Ibnou-Zekri N., Pfeifer A. Novel probiotics for the management of allergic inflammation. // Digestive and liver disease: official journal of the Italian Society of Gastroenterology and the Italian Association for the Study of the Liver. - 2002. - Vol.34, № 2. - P. 25-28), которое обусловлено снижением уровня специфических IgE в сыворотке крови (Peng S., Lin J.Y., Lin M.Y. Antiallergic effect of milk fermented with lactic acid bacteria in a murine animal model. // Journal of agricultural and food chemistry. - 2007. - Vol.55, № 13. - P.5092-5096) при стимуляции лактобациллами синтеза регуляторных цитокинов: штаммы Lactobacillus plantarum CCRC 12944, Lactobacillus acidophilus CCRC 14079, Lactobacillus rhamnosus CCRC 10940, Lactobacillus paracasei subsp. paracasei CCRC 14023, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCRC 12297, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCRC 14007 и Lactobacillus deldrueckii subsp. bulgaricus CCRC 14069 стимулировали синтез лимфоцитами интерферона-γ (US патент, номер публикации 2004/0047849 Al, C12N 1/20); штамм Lactobacillus paracasei KW 3110 стимулировал синтез лимфоцитами интерлейкина-12 и интерлейкина-4 (ЕР патент № 1634600 A1, A61K 35/74, А61Р 11/02, 11/06, 17/00, 27/02, 37/08, A23L 1/30, C12N 1/20); синтез спленоцитами и мононуклеарами периферической крови интерферона-γ стимулировал штамм Lactobacillus paracasei GM-080 (US патент, номер публикации 2005/0214271 A1; патент US № 6994848 В2, A61K 45/00, C12N 1/20).The anti-allergic effect of lactic acid bacteria, mainly lactobacilli, is known (Weid T., Ibnou-Zekri N., Pfeifer A. Novel probiotics for the management of allergic inflammation. // Digestive and liver disease: official journal of the Italian Society of Gastroenterology and the Italian Association for the Study of the Liver. - 2002. - Vol. 34, No. 2. - P. 25-28), which is due to a decrease in the level of specific IgE in the blood serum (Peng S., Lin JY, Lin MY Antiallergic effect of milk fermented with lactic acid bacteria in a murine animal model. // Journal of agricultural and food chemistry. - 2007. - Vol.55, No. 13. - P.5092-5096) when stimulated by lactobacilli synthesis of regulatory cytokines: strains of Lactobacillus plantarum CCRC 12944, Lactobacillus acidophilus CCRC 14 079, Lactobacillus rhamnosus CCRC 10940, Lactobacillus paracasei subsp. paracasei CCRC 14023, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCRC 12297, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCRC 14007 and Lactobacillus deldrueckii subsp. bulgaricus CCRC 14069 stimulated lymphocyte synthesis of interferon-γ (US patent, publication number 2004/0047849 Al, C12N 1/20); strain Lactobacillus paracasei KW 3110 stimulated lymphocyte synthesis of interleukin-12 and interleukin-4 (EP Patent No. 1634600 A1, A61K 35/74, A61P 11/02, 11/06, 17/00, 27/02, 37/08, A23L 1 / 30, C12N 1/20); synthesis of interferon-γ by splenocytes and peripheral blood mononuclear cells stimulated the strain Lactobacillus paracasei GM-080 (US patent, publication number 2005/0214271 A1; US patent No. 6994848 B2, A61K 45/00, C12N 1/20).
Однако штаммы разных видов лактобацилл, например: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus delbrueckii, - способны продуцировать гистамин (Garai G., Dueñas M.T., Irastorza A., Moreno-Arribas M.V. Biogenic amine production by lactic acid bacteria isolated from cider. // Letters in applied microbiology. - 2007. - Vol.45, № 5. - P.473-478; Azcarate-Peril M.A., Altermann E., Hoover-Fitzula R.L., Cano R.J., Klaenhammer T.R. Identification and inactivation of genetic loci involved with Lactobacillus acidophilus acid tolerance. // Applied and environmental microbiology. - 2004. -Vol.70, № 9. - P.5315-5322; Leuschner R.G., Kurihara R., Hammes W.P. Effect of enhanced proteolysis on formation of biogenic amines by lactobacilli during Gouda cheese ripening. // International journal of food microbiology. - 1998. - Vol.20, № 44. - P.15-20). Этот недостаток ограничивает показания к применению средств, содержащих лактобациллы, и препятствует использованию лактобацилл в качестве ингредиентов композиций, перспективных для профилактики и лечения заболеваний, в развитии которых имеет значение уровень гистамина в организме.However, strains of different types of lactobacilli, for example: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus delbrueckii, are capable of producing histamine (Garai G., Dueñas MT, Irastorza A., Moreno-Arribas MV Biogenic amine production by lactic acid bacteria isolated from cider. Letters in applied microbiology. - 2007. - Vol. 45, No. 5. - P.473-478; Azcarate-Peril MA, Altermann E., Hoover-Fitzula RL, Cano RJ, Klaenhammer TR Identification and inactivation of genetic loci involved with Lactobacillus acidophilus acid tolerance. // Applied and environmental microbiology. - 2004.-Vol. 70, No. 9. - P.5315-5322; Leuschner RG, Kurihara R., Hammes WP Effect of enhanced proteolysis on formation of biogenic amines by lactobacilli during Gouda cheese ripening. // International journal of food microbiology. - 1998. - Vol.20, No. 44. - P.15-20). This drawback limits the indications for the use of agents containing lactobacilli and prevents the use of lactobacilli as ingredients in compositions that are promising for the prevention and treatment of diseases in the development of which the level of histamine in the body matters.
Ранее не было известно, что производственные штаммы Lactobacillus acidophilus меньше других видов лактобацилл продуцируют гистамин. Кроме того, штаммы Lactobacillus acidophilus способны подвергать гистамин гидролитическому дезаминированию с помощью фермента диамино-оксидазы (гистаминазы). При этом соотношение уровня продукции гистамина и уровня его дезаминирования лактобациллами зависит от ряда факторов, в том числе от кислотности, ионного состава и других показателей среды культивирования.It was not previously known that production strains of Lactobacillus acidophilus produce histamine less than other types of lactobacilli. In addition, strains of Lactobacillus acidophilus are able to hydrolyze histamine with the aid of the enzyme diamine oxidase (histaminase). At the same time, the ratio of the level of histamine production and the level of its deamination with lactobacilli depends on a number of factors, including acidity, ionic composition and other indicators of the culture medium.
Известны иммунобиологические средства и закваски ацидофильных культур на основе консорциума штаммов Lactobacillus acidophilus 100 аш, NK1 и К3Ш24, в том числе содержащие живые или убитые микробные клетки и продукты метаболизма в среде культивирования, которые являются наиболее близкими аналогами заявляемого иммунобиологического средства (авторское свидетельство SU 1004471, А23С 9/123, C12N 1/20; патент RU № 2123344, А61К 35/74; Ворошилина Н.Н. Микробы вида Lactobacillus acidophilus как основа фармакопейных форм бактерийных препаратов. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. - Москва, 1982. - 22 с.).Known immunobiological agents and starter cultures of acidophilic cultures based on a consortium of strains of Lactobacillus acidophilus 100 al, NK1 and K 3 W 24 , including those containing live or killed microbial cells and metabolic products in the culture medium, which are the closest analogues of the claimed immunobiological agent (copyright certificate SU 1004471, А23С 9/123, C12N 1/20; patent RU No. 2123344, А61К 35/74; Voroshilina NN Microbes of the species Lactobacillus acidophilus as the basis for pharmacopoeial forms of bacterial preparations.Abstract of dissertation for the scientific degree penalties of a candidate of medical sciences. - Moscow, 1982. - 22 p.).
Недостатком указанного консорциума штаммов лактобацилл является то, что он не обладает достаточно стабильным наличием критериев противоаллергического действия, что соответствует его способности более чем в 1,5 раза повышать содержание гистамина в среде культивирования.The disadvantage of this consortium of lactobacillus strains is that it does not have a sufficiently stable presence of anti-allergic action criteria, which corresponds to its ability to increase the histamine content in the cultivation medium by more than 1.5 times.
Задачей заявляемого изобретения является повышение эффективности противоаллергического действия иммунобиологических средств на основе лактобацилл.The task of the invention is to increase the effectiveness of the antiallergic action of immunobiological agents based on lactobacilli.
Задача решена тем, что варианты иммунобиологического средства содержат консорциум микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus, в том числе включающий штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, коллекционный № 220, штамм Lactobacillus acidophilus JCH, коллекционный № 221, и штамм Lactobacillus acidophilus КАА, коллекционный № 223. Микроорганизмы данных штаммов в консорциуме дополняют, особенно при культивировании, оригинальные сочетания свойств друг друга, обеспечивающие наличие критериев противоаллергического действия консорциума: уникальной биохимической активности с особенностями регуляции уровня гистамина, продукцией лектинов, биосурфактантов, антагонистической активности в отношении микроорганизмов, интенсивно продуцирующих гистамин, и устойчивости к антибиотикам. Поэтому заявляемые варианты иммунобиологического средства являются перспективной основой вариантов иммунобиологического средства, эффективных при аллергических заболеваниях, псевдоаллергических заболеваниях без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника.The problem is solved in that the variants of the immunobiological agent contain a consortium of microorganisms of the strains of Lactobacillus acidophilus, including the Lactobacillus acidophilus NKJC strain, collection No. 220, the Lactobacillus acidophilus JCH strain, collection No. 221, and the Lactobacillus strain microorganism No. KA3 data. in the consortium complement, especially during cultivation, the original combination of the properties of each other, ensuring the presence of criteria for the antiallergic action of the consortium: unique biochemical activity with special features ulyatsii levels of histamine, lectins products biosurfactants, antagonistic activity against microorganisms intensively producing histamine, and antibiotic resistance. Therefore, the claimed variants of an immunobiological agent are a promising basis for variants of an immunobiological agent effective in allergic diseases, pseudo-allergic diseases without concomitant pathology or in combination with a disease of infectious etiology, intestinal dysbiosis.
Штамм Lactobacillus acidophilus NKJC получен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры ФГУН МНИИЭМ имени Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора под № 220 и характеризуется следующими свойствами.The strain Lactobacillus acidophilus NKJC was obtained from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora of the Federal State Institution of Medicine and Science named after G.N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor under No. 220 and is characterized by the following properties.
1. Морфологические свойства.1. Morphological properties.
Прямые, неподвижные, бесспоровые, грамположительные палочки с закругленными краями, размером 5-10 мкм, располагающиеся в мазке единично или в виде цепочек по две-четыре клетки.Straight, motionless, undisputed, gram-positive rods with rounded edges, 5-10 microns in size, located in a smear singly or in the form of chains of two to four cells.
2. Культуральные свойства.2. Cultural properties.
Микроаэрофил, оптимальные условия для культивирования - анаэробные. Температура культивирования - 38-40°С. На полужидких средах вырастает в течение 20-22 часов, на агаризованных - 48 часов.Microaerophil, optimal conditions for cultivation are anaerobic. The cultivation temperature is 38-40 ° C. On semi-liquid media grows within 20-22 hours, on agarized - 48 hours.
В среды для культивирования для стабилизации свойств штамма можно дополнительно добавлять источники гистамина, ионов Сu1+, Сu2+, Co2+, Ni2+, глюкозы, галактозы, фруктозы, лактозы, маннозы, фракций казеина или гидролизатов фракций казеина, жидкое масло, которое может быть выбрано из ряда: растительное масло, жир рыб, жир морских млекопитающих, минеральное масло, синтетическое масло или их сочетания.In cultivation media, to stabilize the properties of the strain, it is possible to add additional sources of histamine, Cu 1+ , Cu 2+ , Co 2+ , Ni 2+ ions , glucose, galactose, fructose, lactose, mannose, casein fractions or casein fractions hydrolysates, liquid oil which can be selected from among: vegetable oil, fish fat, marine mammalian fat, mineral oil, synthetic oil, or combinations thereof.
Сквашивает молоко с образованием плотного сметанообразного сгустка.Fermenting milk with the formation of a dense creamy clot.
При культивировании на полужидких средах происходит равномерное помутнение среды по всему ее объему. Единичные колонии при выращивании в течение 18-24 часов имеют вид шариков диаметром 2-3 мм или комет длиной 0,7 мм. При выращивании в течение 18-24 часов число КОЕ/мл лактобацилл составляет 108-109.When cultivated on semi-liquid media, a uniform turbidity of the medium occurs over its entire volume. Single colonies when grown for 18-24 hours have the form of balls with a diameter of 2-3 mm or comets 0.7 mm long. When grown for 18-24 hours, the number of CFU / ml of lactobacilli is 10 8 -10 9 .
На агаре с гидролизованным молоком образуют темные локонообразные колонии на поверхности и в виде «паучков» в глубине. При выращивании на поверхности агаризованных сред образуют полупрозрачные морщинистые мелкие колонии с неровными краями. Диаметр колонии 1-2 мм. Время культивирования 48 часов.On agar with hydrolyzed milk, dark curly colonies form on the surface and in the form of “spiders” in depth. When grown on the surface of agarized media, they form translucent wrinkled small colonies with uneven edges. The diameter of the colony is 1-2 mm. The cultivation time is 48 hours.
3. Биохимическая активность.3. Biochemical activity.
Штамм гомоферментативен. Каталазу не продуцирует, нитрат не редуцирует. Желатину не разжижает. Штамм ферментирует без образования газа глюкозу, лактозу, галактозу, маннозу, декстрозу, фруктозу, трегалозу, N-ацетилглюкозамин, ликсозу, маннит, замедленно ферментирует раффинозу, арабинозу, ксилозу. Штамм не повышает содержание гистамина в среде культивирования. Продуцирует лектины, связывающие в гликоконъюгатах остатки N-ацетил-D-галактозамина с α-связью (GalNAc-α-), D-маннозы с α-связью (Man-α-) и D-маннозы-6-фосфата с α-связью (Man-6P-α-). Продуцирует биосурфактанты, в том числе липидосодержащие и пенообразующие вещества.The strain is homoenzymatic. Catalase does not produce, nitrate does not reduce. It does not dilute gelatin. The strain ferments without the formation of gas glucose, lactose, galactose, mannose, dextrose, fructose, trehalose, N-acetylglucosamine, lyxose, mannitol, slowly ferments raffinose, arabinose, xylose. The strain does not increase the histamine content in the culture medium. It produces lectins that bind in the glycoconjugates the residues of N-acetyl-D-galactosamine with the α-bond (GalNAc-α-), D-mannose with the α-bond (Man-α-) and D-mannose-6-phosphate with the α-bond (Man-6P-α-). Produces biosurfactants, including lipid-containing and foaming agents.
4. Активность кислотообразования.4. The activity of acid formation.
В процессе культивирования на производственных средах образует молочную кислоту, закисляя среду культивирования до рН 3,5-4,2, 250°Т.In the process of cultivation on production media forms lactic acid, acidifying the culture medium to a pH of 3.5-4.2, 250 ° T.
1-3% закваски за 6-7 часов снижает рН молока до 3,8-4,2 за 10 часов. Протеолитическая активность 35,4 мг% по сумме трех аминокислот в пересчете на тирозин. Значение титруемой кислотности при этом составляет 200-220°Т.1-3% of the starter culture in 6-7 hours reduces the pH of the milk to 3.8-4.2 in 10 hours. Proteolytic activity of 35.4 mg% in the sum of three amino acids in terms of tyrosine. The value of titratable acidity in this case is 200-220 ° T.
5. Антагонистическая активность.5. Antagonistic activity.
Штамм антагонистически активен в отношении тест-культур (Shigella flexneri-2 штамма, Shigella sonnei, энтеропатогенной Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis): зона угнетения роста тест-штаммов должна быть не менее 20 мм.The strain is antagonistically active against test cultures (Shigella flexneri-2 strain, Shigella sonnei, enteropathogenic Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis): the growth inhibition zone of the test strains should be at least 20 mm.
6. Устойчивость к антибиотикам.6. Resistance to antibiotics.
Штамм высоко устойчив к полимиксину, пефлоксацину, налидиксовой кислоте, устойчив к рифампицину, гентамицину, амикацину, промежуточно устойчив к клиндамицину, неомицину, канамицину, линкомицину, ципрофлоксацину и ломефлоксацину.The strain is highly resistant to polymyxin, pefloxacin, nalidixic acid, resistant to rifampicin, gentamicin, amikacin, intermediate resistant to clindamycin, neomycin, kanamycin, lincomycin, ciprofloxacin and lomefloxacin.
7. Содержание гуанина и цитозина в ДНК составляет 36 мол.%.7. The content of guanine and cytosine in DNA is 36 mol%.
8. Генотипирование.8. Genotyping.
ПЦР-анализ подтвердил принадлежность к виду Lactobacillus acidophilus.PCR analysis confirmed the belonging to the species Lactobacillus acidophilus.
Штамм Lactobacillus acidophilus JCH получен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры ФГУН МНИИЭМ имени Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора под №221 и характеризуется следующими свойствами.The strain Lactobacillus acidophilus JCH was obtained from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora of the Federal State Budget Scientific Research Institute named after G.N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor under No. 211 and is characterized by the following properties.
1. Морфологические свойства.1. Morphological properties.
Прямые, крупные, длинные, неподвижные, бесспоровые, грамположительные палочки размером 5-10 мкм, располагающиеся поодиночке или в виде цепочек по две-четыре клетки.Straight, large, long, motionless, indisputable, gram-positive rods 5-10 microns in size, located singly or in chains of two to four cells.
2. Культуральные свойства.2. Cultural properties.
Микроаэрофил, оптимальные условия для культивирования - анаэробные. Температура культивирования - 38-40°С. На полужидких средах вырастает в течение 20-24 часов, на агаризованных - 48 часов.Microaerophil, optimal conditions for cultivation are anaerobic. The cultivation temperature is 38-40 ° C. On semi-liquid media grows within 20-24 hours, on agarized - 48 hours.
В среды для культивирования для стабилизации свойств штамма можно дополнительно добавлять источники гистамина, ионов Сu1+, Сu2+, Со2+, Ni2+, глюкозы, галактозы, фруктозы, лактозы, маннозы, фракций казеина или гидролизатов фракций казеина, жидкое масло, которое может быть выбрано из ряда: растительное масло, жир рыб, жир морских млекопитающих, минеральное масло, синтетическое масло или их сочетания.In cultivation media, to stabilize the properties of the strain, you can add sources of histamine, Cu 1+ , Cu 2+ , Co 2+ , Ni 2+ , glucose, galactose, fructose, lactose, mannose, casein fractions or casein fractions hydrolysates, liquid oil which can be selected from among: vegetable oil, fish fat, marine mammalian fat, mineral oil, synthetic oil, or combinations thereof.
Сквашивает молоко с образованием плотного ровного сгустка.Fermenting milk with the formation of a dense, even clot.
На полужидких средах растут равномерно по всему объему, без зоны аэробиоза. Единичные колонии имеют форму шариков диаметром 1-2 мм или комет-елочек длиной 0,7-1,2 см. При выращивании на полужидких средах и в течение 18-24 часов число КОЕ/мл лактобацилл достигает 108-109.On semi-liquid media they grow evenly throughout the volume, without an aerobiotic zone. Single colonies are in the form of balls with a diameter of 1-2 mm or comet-trees 0.7-1.2 cm long. When grown on semi-liquid media and for 18-24 hours, the number of CFU / ml of lactobacilli reaches 10 8 -10 9 .
На поверхности агаризованной МРС в анаэробных условиях через 24 часа роста образуются полупрозрачные шероховатые колонии с неровными краями. Диаметр колонии 2-4 мм. На агаре с гидролизованным молоком образуют темные локонообразные колонии на поверхности и в виде «паучков» в глубине. Время культивирования 24-48 часов.On the surface of agarized MPC under anaerobic conditions, after 24 hours of growth, translucent rough colonies with uneven edges form. The diameter of the colony is 2-4 mm. On agar with hydrolyzed milk, dark curly colonies form on the surface and in the form of “spiders” in depth. The cultivation time is 24-48 hours.
3. Биохимическая активность.3. Biochemical activity.
Штамм гомоферментативен. Каталазу не продуцирует. Желатину не разжижает. Ферментирует без образования газа глюкозу, галактозу, фруктозу, маннозу, N-ацетилглюкозамин, лактозу, трегалозу, замедленно ферментирует арабинозу, ксилозу. Штамм не повышает содержание гистамина в среде культивирования. Продуцирует лектины (преимущественно кислые лектины), связывающие в гликоконъюгатах остатки D-маннозы с α-связью (Man-α-), D-маннозы-6-фосфата с α-связью (Man-6Р-α-) и N-ацетил-D-галактозамина с α-связью (GalNAc-α-). Продуцирует биосурфактанты, в том числе липидосодержащие и пенообразующие вещества.The strain is homoenzymatic. Catalase does not produce. It does not dilute gelatin. It ferments without the formation of gas glucose, galactose, fructose, mannose, N-acetylglucosamine, lactose, trehalose, slowly ferments arabinose, xylose. The strain does not increase the histamine content in the culture medium. It produces lectins (mainly acidic lectins) that bind glycoconjugate residues of D-mannose with an α-bond (Man-α-), D-mannose-6-phosphate with an α-bond (Man-6P-α-) and N-acetyl- Α-linked D-galactosamine (GalNAc-α-). Produces biosurfactants, including lipid-containing and foaming agents.
4. Активность кислотообразования.4. The activity of acid formation.
В процессе культивирования на производственных средах рН 3,0-3,5. Значение титруемой кислотности при выращивании в стерильном молоке через 24 часа составляет 195°Т, на МРС среде - до 200°Т.In the process of cultivation in production environments, pH 3.0-3.5. The value of titratable acidity when grown in sterile milk after 24 hours is 195 ° T, on MPC medium - up to 200 ° T.
5. Антагонистическая активность.5. Antagonistic activity.
Штамм антагонистически активен в отношении тест-культур (Shigella flexneri-2 штамма, Shigella sonnei, энтеропатогенной Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis): зона угнетения роста тест-штаммов должна быть не менее 20 мм.The strain is antagonistically active against test cultures (Shigella flexneri-2 strain, Shigella sonnei, enteropathogenic Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis): the growth inhibition zone of the test strains should be at least 20 mm.
6. Устойчивость к антибиотикам.6. Resistance to antibiotics.
Штамм высокоустойчив к канамицину, устойчив к амикацину, промежуточно устойчив к неомицину, линкомицину, клиндамицину, стрептомицину.The strain is highly resistant to kanamycin, resistant to amikacin, intermediate resistant to neomycin, lincomycin, clindamycin, streptomycin.
7. Содержание гуанина и цитозина в ДНК составляет 36 мол.%.7. The content of guanine and cytosine in DNA is 36 mol%.
8. Генотипирование.8. Genotyping.
ПЦР-анализ подтвердил принадлежность к виду Lactobacillus acidophilus.PCR analysis confirmed the belonging to the species Lactobacillus acidophilus.
Штамм Lactobacillus acidophilus KAA получен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры ФГУН МНИИЭМ имени Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора под №223 и характеризуется следующими свойствами.The strain Lactobacillus acidophilus KAA was obtained from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora of the Federal State Institution of Medicine and Medicine named after G.N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor under No. 223 and is characterized by the following properties.
1. Морфологические свойства.1. Morphological properties.
Прямые, крупные, длинные, неподвижные, бесспоровые, грамположительные палочки размером 3-14×1,0-1,5 мкм, располагающиеся поодиночке или в виде цепочек по две-четыре клетки.Straight, large, long, motionless, undisputed, gram-positive rods 3-14 × 1.0-1.5 μm in size, located singly or in chains of two to four cells.
2. Культуральные свойства.2. Cultural properties.
Микроаэрофил, оптимальные условия для культивирования - анаэробные. Температура культивирования - 38-40°С. На полужидких средах вырастает в течение 20-24 часов, на агаризованных - 48 часов.Microaerophil, optimal conditions for cultivation are anaerobic. The cultivation temperature is 38-40 ° C. On semi-liquid media grows within 20-24 hours, on agarized - 48 hours.
В среды для культивирования для стабилизации свойств штамма можно дополнительно добавлять источники гистамина, ионов Сu1+, Сu2+, Со2+ Ni2+, глюкозы, галактозы, фруктозы, лактозы, маннозы, фракций казеина или гидролизатов фракций казеина, жидкое масло, которое может быть выбрано из ряда: растительное масло, жир рыб, жир морских млекопитающих, минеральное масло, синтетическое масло или их сочетания.In cultivation media, to stabilize the properties of the strain, you can additionally add sources of histamine, Cu 1+ , Cu 2+ , Co 2+ Ni 2+ ions , glucose, galactose, fructose, lactose, mannose, casein fractions or casein fractions hydrolysates, liquid oil, which can be selected from among: vegetable oil, fish fat, marine mammalian fat, mineral oil, synthetic oil, or combinations thereof.
Сквашивает молоко с образованием плотного ровного сгустка. На полужидких средах растут равномерно по всему объему, без зоны аэробиоза. Единичные колонии имеют форму шариков диаметром 1-2 мм или комет-елочек длиной 0,7-1,2 см. При выращивании в течение 18-24 часов число КОЕ/мл составляет 108.Fermenting milk with the formation of a dense, even clot. On semi-liquid media they grow evenly throughout the volume, without an aerobiotic zone. Single colonies are in the form of balls with a diameter of 1-2 mm or comet-trees 0.7-1.2 cm long. When grown for 18-24 hours, the number of CFU / ml is 10 8 .
На поверхности агаризованной МРС в анаэробных условиях через 24 часа роста образуются плотные однородные белые, выпуклые, круглые колонии с ровными краями. Диаметр колонии 2-4 мм. На агаре с гидролизованным молоком образуют темные локонообразные колонии на поверхности и в виде «паучков» в глубине. Время культивирования 24-48 часов.On the surface of an agarized MRS under anaerobic conditions, after 24 hours of growth, dense uniform white, convex, round colonies with smooth edges are formed. The diameter of the colony is 2-4 mm. On agar with hydrolyzed milk, dark curly colonies form on the surface and in the form of “spiders” in depth. The cultivation time is 24-48 hours.
3. Биохимическая активность.3. Biochemical activity.
Штамм гомоферментативен. Каталазу не продуцирует. Желатину не разжижает. Ферментирует без образования газа глюкозу, арабинозу, рибозу, галактозу, фруктозу, маннозу, сорбозу, манит, сорбитол, эскулин, целлобиозу, сахарозу, трегалозу, мелецитозу, туранозу, тагатозу, L-арабит, замедленно ферментирует N-ацетилглюкозамин, амигдалин, арбутин, мальтозу, лактозу, мелибиозу, инулин, гентиобиозу, ликсозу, калия глюконат. Штамм повышает содержание гистамина в среде культивирования не более чем в 1,5 раза. Продуцирует пектины (преимущественно кислые лектины), связывающие в гликоконъюгатах остатки D-маннозы с α-связью (Man-α-), D-маннозы-6-фосфата с α-связью (Man-6Р-α-) и N-ацетил-D-галактозамина с α-связью (GalNAc-α-). Продуцирует биофлокулянты, биосурфактанты, в том числе пенообразующие вещества.The strain is homoenzymatic. Catalase does not produce. It does not dilute gelatin. It ferments without gas formation glucose, arabinose, ribose, galactose, fructose, mannose, sorbose, beckons, sorbitol, esculin, cellobiose, sucrose, trehalose, melecitose, turanose, tagatose, L-arabitol, slowly ferments N-acetylglucosamine, arbum, arbum, arbum, arbum, glucoseamine maltose, lactose, melibiosis, inulin, gentiobiosis, lyxosis, potassium gluconate. The strain increases the histamine content in the culture medium not more than 1.5 times. It produces pectins (mainly acidic lectins) that bind in the glycoconjugates residues of D-mannose with the α-bond (Man-α-), D-mannose-6-phosphate with the α-bond (Man-6P-α-) and N-acetyl- Α-linked D-galactosamine (GalNAc-α-). It produces bioflocculants, biosurfactants, including foaming agents.
4. Активность кислотообразования.4. The activity of acid formation.
В процессе культивирования на производственных средах рН 3,5-4,2. Значение титруемой кислотности при выращивании в стерильном молоке через 24 часа составляет 198°Т, на жидкой МРС - 200°Т.In the process of cultivation in production environments, pH 3.5-4.2. The value of titratable acidity when grown in sterile milk after 24 hours is 198 ° T, on liquid MPC - 200 ° T.
5. Антагонистическая активность.5. Antagonistic activity.
Штамм антагонистически активен в отношении тест-культур (Shigella flexneri-2 штамма, Shigella sonnei, энтеропатогенной Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis): зона угнетения роста тест-штаммов должна быть не менее 20 мм.The strain is antagonistically active against test cultures (Shigella flexneri-2 strain, Shigella sonnei, enteropathogenic Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis): the growth inhibition zone of the test strains should be at least 20 mm.
6. Устойчивость к антибиотикам.6. Resistance to antibiotics.
Штамм устойчив к гентамицину, амикацину, промежуточно устойчив к бензилпенициллину, стрептомицину, неомицину, канамицину, тетрациклину.The strain is resistant to gentamicin, amikacin, intermediate resistant to benzylpenicillin, streptomycin, neomycin, kanamycin, tetracycline.
7. Содержание гуанина и цитозина в ДНК составляет 36 мол.%.7. The content of guanine and cytosine in DNA is 36 mol%.
8. Генотипирование.8. Genotyping.
ПЦР-анализ подтвердил принадлежность к виду Lactobacillus acidophilus.PCR analysis confirmed the belonging to the species Lactobacillus acidophilus.
Подобраны соотношение штаммов в консорциуме, ингредиенты сред для культивирования, целевые добавки, в сочетании стабилизирующие уникальную биохимическую активность микроорганизмов заявляемых штаммов лактобацилл и содержащих их консорциума.The ratio of the strains in the consortium, the ingredients of the culture media, the target additives, in combination, stabilizing the unique biochemical activity of the microorganisms of the inventive strains of lactobacilli and the consortium containing them are selected.
Варианты иммунобиологического противоаллергического средства содержат консорциум микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus, включающий штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, штамм Lactobacillus acidophilus JCH и штамм Lactobacillus acidophilus КАА, в виде биомассы консорциума штаммов Lactobacillus acidophilus в среде культивирования при соотношении штаммов в КОЕ 2:1:2 в общем количестве l04-1010 КОЕ/мл или в виде супернатанта, полученного при культивировании микроорганизмов штаммов консорциума. Среда культивирования может быть выбрана из ряда: казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл, сквашенное молоко, имеющее жирность 0,5-1,5% и рН 5,0-6,8, сквашенное обезжиренное молоко, имеющее рН 5,0-6,8, сквашенное обезжиренное, выпаренное на 10-20% молоко, имеющее рН 5,0-6,8, гидролизатно-молочная среда после культивирования лактобацилл или их смеси. Заявляемое средство может дополнительно содержать целевые добавки в количестве 0,01-95,0 мас.% и быть выполнено в форме суспензии или крема, или мази, или пасты, или маски. Заявляемое средство может содержать целевые добавки, выбранные из ряда: казеин, желатин, агар, глицерин, яичный желток, яичный белок, пектин, целлюлоза, производные целлюлозы, бентонит, каолин, аэросил, меди сульфат, меди глюконат, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, настой ромашки, воск эмульсионный, комбижир, ланолин, спермацет, вазелин, церезин, вазелиновое масло, искусственный вазелин, пальмитин, гидрированный жир, переэтирифицированный жир, кондитерский жир, пальмовый олеин, пальмовый стеарин, масло оливковое, масло персиковое, масло подсолнечное, масло касторовое, полиэтиленоксид, нипагин, нипазол, микрокаре РМ5, микрокаре IT или их смеси. Заявляемое средство может быть использовано при профилактике и лечении дефектов кожи, дерматита, аллергического заболевания, псевдоаллергического заболевания без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника.Variants of an immunobiological antiallergic agent contain a consortium of microorganisms of strains of Lactobacillus acidophilus, including a strain of Lactobacillus acidophilus NKJC, a strain of Lactobacillus acidophilus JCH and a strain of Lactobacillus acidophilus KAA in the form of a biomass of a strain of a total of 2 cultures of Lactobacus strain 2 l0 4 -10 10 CFU / ml or in the form of a supernatant obtained by culturing microorganisms of the strains of the consortium. The cultivation medium can be selected from the following series: casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli, fermented milk having a fat content of 0.5-1.5% and pH 5.0-6.8, fermented skim milk having a pH of 5.0-6 , 8, fermented skim milk, evaporated by 10-20% milk, having a pH of 5.0-6.8, a hydrolyzate-milk environment after cultivation of lactobacilli or a mixture thereof. The inventive tool may additionally contain target additives in an amount of 0.01-95.0 wt.% And be made in the form of a suspension or cream, or ointment, or paste, or mask. The inventive tool may contain targeted additives selected from the series: casein, gelatin, agar, glycerin, egg yolk, egg white, pectin, cellulose, cellulose derivatives, bentonite, kaolin, aerosil, copper sulfate, copper gluconate, chinosol, chitosan, root extract licorice, rosehip extract, chamomile infusion, emulsion wax, combination, lanolin, spermaceti, petrolatum, ceresin, petroleum jelly, artificial petrolatum, palmitin, hydrogenated fat, transesterified fat, confectionery fat, palm olein, palm stearin, olive oil Persic layer, sunflower oil, castor oil, polyethylene oxide, Nipagin, Nipasol, Microcars RM5, IT Microcars or mixtures thereof. The inventive tool can be used in the prevention and treatment of skin defects, dermatitis, allergic diseases, pseudo-allergic diseases without comorbidity or in combination with a disease of infectious etiology, intestinal dysbiosis.
Заявляемые варианты иммунобиологического противоаллергического средства являются новыми и в литературе не описаны.The inventive variants of an immunobiological antiallergic agent are new and are not described in the literature.
Техническим результатом заявляемого изобретения является повышение эффективности противоаллергического действия иммунобиологических средств на основе лактобацилл. Повышение эффективности противоаллергического действия при использовании заявляемого изобретения показано при наличии у пациентов аллергического заболевания, псевдоаллергического заболевания без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника.The technical result of the claimed invention is to increase the effectiveness of the antiallergic action of immunobiological agents based on lactobacilli. An increase in the effectiveness of the antiallergic effect when using the claimed invention is indicated when patients have an allergic disease, a pseudo-allergic disease without a concomitant pathology, or in combination with a disease of infectious etiology or intestinal dysbiosis.
Сущность изобретения поясняется на следующих примерах, показывающих эффективность противоаллергического действия вариантов заявляемого средства на основе консорциума новых штаммов Lactobacillus acidophilus NKJC, JCH и КАА. При этом приведенные в примерах комбинации ингредиентов вариантов заявляемого средства показывают конкретную реализацию заявляемого изобретения, но не ограничивают объем притязаний формулы заявляемого изобретения.The invention is illustrated by the following examples showing the effectiveness of the antiallergic action of the variants of the claimed funds based on a consortium of new strains of Lactobacillus acidophilus NKJC, JCH and KAA. In this case, the examples of combinations of ingredients of variants of the claimed funds show a specific implementation of the claimed invention, but do not limit the scope of claims of the claims of the claimed invention.
Пример 1. В двух группах больных с аллергической крапивницей, в каждой из которых было по 15 пациентов, проводилось сравнение эффективности противоаллергического действия иммунобиологические средства на основе консорциума штаммов Lactobacillus acidophilus 100 аш, NK1 и К3Ш24 (в первой группе пациентов) и варианта заявляемого иммунобиологического средства (во второй группе пациентов), содержащего биомассу консорциума микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus, включающего штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, штамм Lactobacillus acidophilus JCH и штамм Lactobacillus acidophilus КАА, в среде их культивирования (в сквашенном обезжиренном молоке, имеющем рН 5,5), в общем количестве 108 КОЕ/мл при их соотношении в КОЕ 2:1:2 соответственно, и целевые добавки (меди сульфат и экстракт ромашки) в общем количестве 2,0 мас.%. При этом заявляемое иммунобиологическое средство было выполнено в форме суспензии. При проведении исследования критерии наличия противоаллергического средства чаще регистрировались во второй группе пациентов (у 14 больных, 93,3% случаев), чем в первой группе (у 10 больных, 66,7% случаев).Example 1. In two groups of patients with allergic urticaria, each of which had 15 patients, the effectiveness of the antiallergic effect of immunobiological agents was compared on the basis of a consortium of strains of Lactobacillus acidophilus 100 al, NK1 and K 3 W 24 (in the first group of patients) and option of the claimed immunobiological agent (in the second group of patients) containing the biomass of a consortium of microorganisms of Lactobacillus acidophilus strains, including Lactobacillus acidophilus NKJC strain, Lactobacillus acidophilus JCH strain and Lactobacillus acidophilus CAA strain, in their assimilation (in skimmed skim milk, having a pH of 5.5), in a total amount of 10 8 CFU / ml with their ratio in CFU 2: 1: 2, respectively, and target additives (copper sulfate and chamomile extract) in a total amount of 2.0 wt.%. Moreover, the claimed immunobiological agent was made in the form of a suspension. During the study, the criteria for the presence of an antiallergic agent were more often recorded in the second group of patients (in 14 patients, 93.3% of cases) than in the first group (in 10 patients, 66.7% of cases).
Пример 2. Пациент Н., 24 года. Диагноз: аллергическая крапивница. При лечении пациента использовалось иммунобиологическое противоаллергическое средство - консорциум микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus, включающий штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, штамм Lactobacillus acidophilus JCH и штамм Lactobacillus acidophilus КАА, которое назначалось перорально 2 раза в сутки, в течение 5 дней по 5 доз (5×107 КОЕ Lactobacillus acidophilus). После двух дней лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического действия средства: полного разрешения уртикарий и отсутствия свежих высыпаний на коже.Example 2. Patient N., 24 years old. Diagnosis: allergic urticaria. In managing the patient used immunobiological antiallergic agent - a consortium of microorganisms Lactobacillus acidophilus, comprising the strain Lactobacillus acidophilus NKJC, strain Lactobacillus acidophilus JCH strain and Lactobacillus acidophilus SAA, which was orally administered 2 times a day, for 5 days for 5 doses (5 × 10 July CFU Lactobacillus acidophilus). After two days of treatment, the presence of criteria for the antiallergic effect of the drug was revealed: full resolution of the urticaria and the absence of fresh skin rashes.
Пример 3. Пациент О., 36 лет. Диагноз: аллергический дерматит, вызванный съеденной пищей, и дисбактериоз кишечника с высевом Staphylococcus aureus. При лечении пациента использовалось иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее биомассу консорциума микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus в среде их культивирования (казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл), включающего штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, штамм Lactobacillus acidophilus JCH и штамм Lactobacillus acidophilus КАА, в общем количестве 104 КОЕ/мл при соотношении штаммов в КОЕ 2:1:2, которое назначалось перорально 3 раза в сутки, в течение 14 дней по 5×107 КОЕ Lactobacillus acidophilus. В результате лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического и противоинфекционного действия средства: исчезновения зуда, разрешения высыпаний на коже, элиминации Staphylococcus aureus и коррекции микробиоценоза кишечника.Example 3. Patient O., 36 years old. Diagnosis: allergic dermatitis caused by food eaten, and intestinal dysbiosis with inoculation of Staphylococcus aureus. The patient was treated with an immunobiological anti-allergic agent containing the biomass of a consortium of microorganisms of Lactobacillus acidophilus strains in their cultivation medium (casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli), including Lactobacillus acidophilus NKJC strain, Lactobusacillus strain 4 , and a total of 10 lactobacillus acidophilus strain 4 CFU / ml with a ratio of strains in CFU of 2: 1: 2, which was administered orally 3 times a day, for 14 days, 5 × 10 7 CFU of Lactobacillus acidophilus. As a result of treatment, the presence of criteria for anti-allergic and anti-infective action of the agent was revealed: the disappearance of itching, the resolution of skin rashes, the elimination of Staphylococcus aureus and the correction of intestinal microbiocenosis.
Пример 4. Пациент Ю., 28 лет. Диагноз: аллергический дерматит, вызванный съеденной пищей, и дисбактериоз кишечника с высевом Staphylococcus aureus. При лечении пациента использовалось иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее биомассу консорциума микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus в среде их культивирования (сквашенное обезжиренное молоко, имеющее рН 5,0), включающего штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, штамм Lactobacillus acidophilus JCH и штамм Lactobacillus acidophilus КАА, в общем количестве 108 КОЕ/мл при соотношении штаммов в КОЕ 2:1:2, которое назначалось перорально 3 раза в сутки, в течение 14 дней по 5×107 КОЕ Lactobacillus acidophilus. В результате лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического и противоинфекционного действия средства: исчезновения зуда, разрешения высыпаний на коже, элиминации Staphylococcus aureus и коррекции микробиоценоза кишечника.Example 4. Patient Y., 28 years old. Diagnosis: allergic dermatitis caused by food eaten, and intestinal dysbiosis with inoculation of Staphylococcus aureus. The patient was treated with an immunobiological antiallergic agent containing the biomass of a consortium of microorganisms of Lactobacillus acidophilus strains in their culture medium (fermented skim milk, having a pH of 5.0), including Lactobacillus acidophilus NKJC strain, Lactobacillus strain A total Jacophilus acidophilus acidophilus acidophilus 10 8 CFU / ml with a ratio of strains in CFU of 2: 1: 2, which was administered orally 3 times a day, for 14 days, 5 × 10 7 CFU of Lactobacillus acidophilus. As a result of treatment, the presence of criteria for anti-allergic and anti-infective action of the agent was revealed: the disappearance of itching, the resolution of skin rashes, the elimination of Staphylococcus aureus and the correction of intestinal microbiocenosis.
Пример 5. Пациент Ф., 41 год. Диагноз: аллергический дерматит, вызванный съеденной пищей, и пиодермия с высевом Staphylococcus aureus. При лечении пациента использовалось иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее биомассу консорциума микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus в среде культивирования (казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл), включающего штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, штамм Lactobacillus acidophilus JCH и штамм Lactobacillus acidophilus КАА, в общем количестве 1010 КОЕ/мл при соотношении штаммов в КОЕ 2:1:2 и целевые добавки (меди сульфат) в количестве 0,01 мас.% и выполненное в форме суспензии, которое назначалось перорально 2 раза в сутки, в течение 14 дней по 5×107 КОЕ Lactobacillus acidophilus, а также иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее супернатант, полученный при культивировании консорциума микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus в среде их культивирования (казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл), включающего штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, штамм Lactobacillus acidophilus JCH и штамм Lactobacillus acidophilus КАА, при соотношении штаммов в КОЕ 2:1:2, и целевые добавки (вода, глицерин, хитозан, воск эмульсионный, ланолин, масло оливковое, нипагин и нипазол) в количестве 60,0 мас.% и выполненное в форме крема, которое назначалось наружно на поверхность высыпаний 2 раза в сутки в течение 6 дней. В результате лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического и противоинфекционного действия средства: исчезновения зуда, разрешения высыпаний на коже и элиминации Staphylococcus aureus.Example 5. Patient F., 41 years old. Diagnosis: allergic dermatitis caused by food eaten, and pyoderma with inoculation of Staphylococcus aureus. The patient was treated with an immunobiological anti-allergic agent containing the biomass of a consortium of microorganisms of Lactobacillus acidophilus strains in a cultivation medium (casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli), including Lactobacillus acidophilus strain NKJC, Lactobacacillus strain 10 and total Kacillus acidophilus acidophilus 10 / ml with a ratio of strains in CFU of 2: 1: 2 and target additives (copper sulfate) in an amount of 0.01 wt.% and made in the form of a suspension, which was administered orally 2 times a day, for 14 days 5 × July 10 CFU Lactobacillus acidophilus, and immunobiological antiallergic agent containing supernatant obtained by culturing the consortium Lactobacillus acidophilus strains of microorganisms in their culture medium (casein, yeast medium after lactobacillus culture) comprising a strain of Lactobacillus acidophilus NKJC, strain Lactobacillus acidophilus JCH and a strain of Lactobacillus acidophilus KAA, with a ratio of strains in CFU of 2: 1: 2, and target additives (water, glycerin, chitosan, emulsion wax, lanolin, olive oil, nipagin and nipazole) in an amount of 60.0 wt.% and completed in the form of a cream, which was assigned externally to surface eruption 2 times a day for 6 days. As a result of treatment, the presence of criteria for anti-allergic and anti-infective action of the agent was revealed: the disappearance of itching, the resolution of skin rashes and the elimination of Staphylococcus aureus.
Пример 6. Пациент С., 30 лет. Диагноз: острая крапивница (псевдоаллергическая), хронический тонзиллит в стадии обострения, носительство Staphylococcus aureus. При лечении пациента использовалось иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее биомассу консорциума микроорганизмов штаммов Lactobacillus acidophilus в среде их культивирования (казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл) в общем количестве 1010 КОЕ/мл, включающего штамм Lactobacillus acidophilus NKJC, штамм Lactobacillus acidophilus JCH и штамм Lactobacillus acidophilus KAA, при соотношении штаммов в КОЕ 2:1:2 и целевые добавки (меди сульфат, экстракт корня солодки, экстракт шиповника и настой ромашки) в количестве 95,0 мас.% и выполненное в форме суспензии, которое назначалось перорально 3 раза в сутки, в течение 10 дней по 5×107 КОЕ Lactobacillus acidophilus. В результате лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического и противоинфекционного действия средства: полного разрешения уртикарий, отсутствия свежих высыпаний на коже, элиминации Staphylococcus aureus, купирования обострения хронического тонзиллита в течение 3 дней (предыдущие обострения хронического тонзиллита у пациента продолжались в течение 7-10 дней).Example 6. Patient S., 30 years old. Diagnosis: acute urticaria (pseudo-allergic), chronic tonsillitis in the acute stage, carriage of Staphylococcus aureus. The patient was treated with an immunobiological anti-allergic agent containing the biomass of a consortium of microorganisms of Lactobacillus acidophilus strains in their cultivation medium (casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli) in a total amount of 10 10 CFU / ml, including Lactobacillus acidophilus Lactus acidophilus strain NKJCob Cactus, Lactobacillus acidophilus, Nactus acidophilus, Nactus acidophilus, Nactus acidophilus acidophilus KAA, with a ratio of strains in CFU of 2: 1: 2 and target additives (copper sulfate, licorice root extract, rosehip extract and chamomile infusion) in an amount of 95.0 wt.% and made in the form of a suspension, which was administered orally 3 times a day, for 10 days, 5 × 10 7 CFU of Lactobacillus acidophilus. As a result of treatment, the presence of criteria for anti-allergic and anti-infective action of the agent was revealed: full resolution of urticaria, lack of fresh skin rashes, elimination of Staphylococcus aureus, relief of exacerbation of chronic tonsillitis within 3 days (previous exacerbations of chronic tonsillitis in the patient lasted for 7-10 days) .
Claims (16)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009102950/13A RU2393214C1 (en) | 2009-01-29 | 2009-01-29 | Immunobiologial antiallergic agent (versions), lactobacillus acidophilus nkjc strain, lactobacillus acidophilus jch strain, lactobacillus acidophilus kaa strain |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009102950/13A RU2393214C1 (en) | 2009-01-29 | 2009-01-29 | Immunobiologial antiallergic agent (versions), lactobacillus acidophilus nkjc strain, lactobacillus acidophilus jch strain, lactobacillus acidophilus kaa strain |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2393214C1 true RU2393214C1 (en) | 2010-06-27 |
Family
ID=42683605
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009102950/13A RU2393214C1 (en) | 2009-01-29 | 2009-01-29 | Immunobiologial antiallergic agent (versions), lactobacillus acidophilus nkjc strain, lactobacillus acidophilus jch strain, lactobacillus acidophilus kaa strain |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2393214C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2653757C2 (en) * | 2011-09-23 | 2018-05-14 | Интрексон Актобиотикс Н.В. | Modified gram positive bacteria and uses thereof |
| CN112273657A (en) * | 2019-07-22 | 2021-01-29 | 安琪酵母股份有限公司 | Probiotic composition for preventing or improving allergic diseases, preparation method and application |
| RU2773435C2 (en) * | 2011-09-23 | 2022-06-03 | Интрексон Актобиотикс Н.В. | Modified gram-positive bacteria and their applications |
-
2009
- 2009-01-29 RU RU2009102950/13A patent/RU2393214C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ШЕНДЕРОВ Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. - М.: Грантъ, 2001, т.111, с.80-81. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2653757C2 (en) * | 2011-09-23 | 2018-05-14 | Интрексон Актобиотикс Н.В. | Modified gram positive bacteria and uses thereof |
| RU2773435C2 (en) * | 2011-09-23 | 2022-06-03 | Интрексон Актобиотикс Н.В. | Modified gram-positive bacteria and their applications |
| CN112273657A (en) * | 2019-07-22 | 2021-01-29 | 安琪酵母股份有限公司 | Probiotic composition for preventing or improving allergic diseases, preparation method and application |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gilliland | Acidophilus milk products: a review of potential benefits to consumers | |
| DE60205646T2 (en) | COMPOSITION AND USES THEREOF COMPRISING A LACTOBACILLUS TRIBE | |
| Tannock | The lactic microflora of pigs, mice and rats | |
| US5296221A (en) | Lactobacillus johnsonii ferm bp-2680 lactic acid bacteria preparations using the same and a process of manufacturing the preparations | |
| EP1840205B1 (en) | Bifidobacterium lactis 668 strain used as a component for food products, starters, medicinal and cosmetic agents | |
| KR20200067299A (en) | Lactococcus lactis strain for treating degenerative brain disease and uses thereof | |
| RU2375444C1 (en) | Bifidobacterium bifidum OV-19 STRAIN USED TO PREPARE BACTERIAL PREPARATIONS, BIOLOGICALLY ACTIVE FOOD ADDITIVES, FERMENTED AND UNFERMENTED FOODSTUFF, HYGIENIC AND COSMETIC PRODUCTS | |
| KR101873898B1 (en) | Novel lactobacillus sp. and feed composition for animal comprising thereof | |
| CN113151045A (en) | Novel lactobacillus plantarum isolated from tea tree leaves | |
| RU2393214C1 (en) | Immunobiologial antiallergic agent (versions), lactobacillus acidophilus nkjc strain, lactobacillus acidophilus jch strain, lactobacillus acidophilus kaa strain | |
| KR20080004515A (en) | Hypotensive agent produced by cultivation of lactic acid bacterium | |
| KR20060108964A (en) | Enterococcus faecalis cbt-sl(5), preparation of its culture fluid and composition comprising the same | |
| KR101471033B1 (en) | Novel Strains of Weissella sp. F22 with Anti-Obesity Ability | |
| N’tcha et al. | Probiotic properties of lactic acid bacteria isolated from a beninese traditional beer’s ferment | |
| KR100371503B1 (en) | Probiotic preparations for aquacultured fish and its production method | |
| JPH05292947A (en) | Lactobacillus-acidophilus pn-ri-2-4, lactic acid bacterial formulation using the same and its production | |
| RU2460781C2 (en) | Immunobiological antiallergic agent (versions) and lactobacillus acidophilus strain used for production of immunobiological antiallergic agent | |
| RU2431663C2 (en) | IMMUNOBIOLOGICAL ANTIALLERGIC AGENT (VERSIONS) AND Lactobacillus acidophilus 100 "аш" PA STRAIN USED FOR PRODUCTION OF IMMUNOBIOLOGICAL ANTIALLERGIC AGENT | |
| JP3052208B2 (en) | Lactobacillus acidophilus F-133, lactic acid bacteria preparation using the same and method for producing the same | |
| Kumar et al. | Isolation and characterization of endemic strains of Lactobacillus sp. and evaluation of their probiotic activity | |
| KR100533677B1 (en) | Feed additive for fish-breeding containing Lactobacillus plantarum as effective ingradient | |
| Schaller | In vitro antibacterial activity of different clotrimazole formulations | |
| CN100352915C (en) | Bacillus subtilis, composite preparation, and method for preparing the composite preparation | |
| RU2253672C2 (en) | Bacterial probiotic preparation | |
| RU2373275C1 (en) | Bifidobacterium pseudocatenulatum ov-17 strain, used for making bacterial preparations, bioligically active additives to food, fermented and unfermented food products, hygienic and cosmetic agents |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170130 |