RU2356050C1 - Method of total antioxidant effect definition for bioactive substances - Google Patents

Method of total antioxidant effect definition for bioactive substances Download PDF

Info

Publication number
RU2356050C1
RU2356050C1 RU2007146632/15A RU2007146632A RU2356050C1 RU 2356050 C1 RU2356050 C1 RU 2356050C1 RU 2007146632/15 A RU2007146632/15 A RU 2007146632/15A RU 2007146632 A RU2007146632 A RU 2007146632A RU 2356050 C1 RU2356050 C1 RU 2356050C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
analyzed
standard
antioxidant effect
peak
antioxidant activity
Prior art date
Application number
RU2007146632/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Александр Андреевич Конарев (RU)
Александр Андреевич Конарев
Борис Маркович Фельдман (RU)
Борис Маркович Фельдман
Татьяна Петровна Косачева (RU)
Татьяна Петровна Косачева
Вера Васильевна Конарева (RU)
Вера Васильевна Конарева
Original Assignee
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр "Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей" (ФГУП "ГНЦ "НИОПИК")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр "Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей" (ФГУП "ГНЦ "НИОПИК") filed Critical Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр "Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей" (ФГУП "ГНЦ "НИОПИК")
Priority to RU2007146632/15A priority Critical patent/RU2356050C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2356050C1 publication Critical patent/RU2356050C1/en

Links

Landscapes

  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

FIELD: chemistry.
SUBSTANCE: invention concerns medicine, pharmaceutics, analytical chemistry, and can be applied in antioxidant effect (AOE) assessment for various medical extractions and drugs, foods, beverages and bioactive dietary supplements (BDS). Claimed method of total antioxidant effect definition for bioactive substances involves preparation of analysed and reference material samples, electrochemical oxidation of samples at carbon glass electrode in three-electrode electrochemical cell in ammonia buffer solutions, and voltampergram registration is performed in classical or differential mode with further use of registered wave (peak) height values in calculation of antioxidant effect by the formula.
EFFECT: possible efficient definition of total AOE for bioactive substances along with simplified method implementation due to the use of standard instrumentation.
5 ex

Description

Изобретение относится к области медицины, фармакологии, аналитической химии и может быть использовано для оценки антиоксидантной активности (АОА) различных лекарственных экстрактов и препаратов, пищевых продуктов, напитков и биологически активных добавок к пище (БАД). АОА лекарственного препарата является одним из важнейших показателей его качества и мерой его биологической активности; она характеризует восстановительные свойства препарата, т.е. его способность вступать в реакцию с активными формами кислорода, которые возникают в организме при неполном восстановлении кислорода до активных кислородсодержащих свободных радикалов, в частности супероксидного анион-радикала, гидропероксидного радикала, пероксида водорода, гидроксил радикала и др. Многие биохимические реакции, обеспечивающие жизнедеятельность клеток, органов и организма в целом, протекают с образованием и участием свободных радикалов. Но увеличение концентрации радикалов выше нормальных значений может привести к возникновению окислительного стресса. Эти радикалы окисляют липиды в клеточных мембранах, белки тканей, энзимы, полисахариды и ДНК при их избытке или при снижении антиоксидантной системы организма человека, что приводит к тяжелым заболеваниям и старению.The invention relates to the field of medicine, pharmacology, analytical chemistry and can be used to evaluate the antioxidant activity (AOA) of various medicinal extracts and preparations, food products, drinks and biologically active food additives (BAA). AOA of the drug is one of the most important indicators of its quality and a measure of its biological activity; it characterizes the recovery properties of the drug, i.e. its ability to react with reactive oxygen species that occur in the body during incomplete reduction of oxygen to active oxygen-containing free radicals, in particular superoxide anion radical, hydroperoxide radical, hydrogen peroxide, hydroxyl radical, etc. Many biochemical reactions that ensure cell activity, organs and the body as a whole, proceed with the formation and participation of free radicals. But an increase in the concentration of radicals above normal values can lead to oxidative stress. These radicals oxidize lipids in cell membranes, tissue proteins, enzymes, polysaccharides and DNA when there is an excess of them or when the antioxidant system of the human body is reduced, which leads to serious diseases and aging.

Для поддержания необходимой концентрации в организме свободных радикалов используются лекарственные препараты и биологически активные вещества (БАВ) (в т.ч. в виде БАД), обладающие АОА.To maintain the necessary concentration of free radicals in the body, drugs and biologically active substances (BAS) (including in the form of dietary supplements) with AOA are used.

В последнее время значительно возросла актуальность определения показателя суммарной антиоксидантной активности препаратов в связи с необходимостью жесткого контроля качества лекарственных препаратов, биологически активных веществ, пищевых продуктов и напитков, а также для повышения качества лечения и профилактики заболеваний.Recently, the relevance of determining the total antioxidant activity of drugs has significantly increased due to the need for strict quality control of drugs, biologically active substances, food and drinks, as well as to improve the quality of treatment and prevention of diseases.

Известен метод определения АОА по ингибированию реакции перекисного окисления липидов (ПОЛ) (Владимиров Ю.А., Арчаков A.M. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972, 252 с). При этом интенсивность ПОЛ определяют по цветной реакции тиобарбитуровой кислоты с продуктом окисления - малоновым диальдегидом. Этот метод является очень длительным, трудоемким и дорогостоящим. Кроме того, для его проведения требуются биологические объекты (липиды живых субстанций).A known method for the determination of AOA by inhibiting the reaction of lipid peroxidation (POL) (Vladimirov Yu.A., Archakov A.M. Lipid peroxidation in biological membranes. M: Nauka, 1972, 252 s). Moreover, the LPO intensity is determined by the color reaction of thiobarbituric acid with the oxidation product malondialdehyde. This method is very long, laborious and expensive. In addition, its implementation requires biological objects (lipids of living substances).

Известен способ определения количества антиоксидантов методом жидкостной хроматографии со спектроскопическим детектированием (Grosset С., Cantin P. Alarys // Analusis, 1989, 17, №7, p.409-412). Недостатками этого метода являются невозможность суммарного определения АОА (определяются только отдельные индивидуальные вещества), сложное приборное исполнение, требующее специалиста для обслуживания, и длительность определения.A known method for determining the amount of antioxidants by liquid chromatography with spectroscopic detection (Grosset C., Cantin P. Alarys // Analusis, 1989, 17, No. 7, p.409-412). The disadvantages of this method are the impossibility of a total determination of AOA (only individual individual substances are determined), complex instrumentation requiring a specialist for maintenance, and the duration of the determination.

Известен способ определения АОА, основанный на изменении интенсивности хемилюминесцентного свечения, пропорциональном количеству свободных радикалов (RU 2033609, 20.04.1995). Основными недостатками этого метода являются образование люминесцирующих веществ из различных индивидуальных соединений (не всегда имеющих отношение к антиоксидантам) и отсутствие избирательности к окислительным веществам в сложных многокомпонентных системах.A known method for the determination of AOA, based on a change in the intensity of the chemiluminescent glow, is proportional to the number of free radicals (RU 2033609, 04.20.1995). The main disadvantages of this method are the formation of luminescent substances from various individual compounds (not always related to antioxidants) and the lack of selectivity to oxidizing substances in complex multicomponent systems.

Известен способ определения суммарной АОА БАВ с помощью катодной вольтамперометрии (Короткова А.Н., Лукина А.Н., Гончаров Л.А и др. Сборник докладов научно-практического семинара «Методы оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения». М., 2004, с.182-192). Суть этого способа заключается в том, что в качестве модельной реакции, лежащей в основе методики, используется процесс электровосстановления кислорода, идущий по механизму, подобному восстановлению кислорода в клетках организма человека и животных, а также в тканях растений. Измеряется первая катодная волна восстановления кислорода на ртутно-пленочном электроде в различных фоновых электролитах (фосфатный буфер, для апротонных сред 0.1 М NaClO4 и для биологических объектов - 0,9% NaCl) в области потенциалов от 0,0 до - 0,6 В. В качестве критерия АОА БАВ предлагается использовать параметр, отражающий количество «обезвреженных» активных кислородных радикалов за минуту времени, мг/л·мин. Недостатком предложенного способа является то, что результат измерения суммарной АОА является косвенным параметром. Кроме того, к существенному недостатку способа следует отнести использование ртутно-пленочного электрода, для получения которого применяют токсичные соли ртути.There is a method of determining the total AOA of biologically active substances using cathodic voltammetry (Korotkova AN, Lukina AN, Goncharov L.A. et al. Collection of reports of a scientific and practical seminar "Methods for assessing the antioxidant activity of biologically active substances for therapeutic and prophylactic purposes". M., 2004, p. 182-192). The essence of this method is that, as a model reaction, which underlies the methodology, the process of oxygen electroreduction, which follows a mechanism similar to oxygen reduction in human and animal body cells, as well as in plant tissues, is used. The first cathode wave of oxygen reduction on a mercury-film electrode is measured in various background electrolytes (phosphate buffer, 0.1 M NaClO 4 for aprotic media and 0.9% NaCl for biological objects) in the potential range from 0.0 to - 0.6 V It is proposed to use a parameter reflecting the amount of “neutralized” active oxygen radicals per minute of time, mg / l · min, as a criterion of AOA BAS. The disadvantage of the proposed method is that the result of measuring the total AOA is an indirect parameter. In addition, the use of a mercury-film electrode, for which toxic salts of mercury are used, is a significant disadvantage of the method.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ амперометрического определения суммарной АОА БАВ, основанный на измерении электрического тока, возникающего при окислении исследуемого вещества (или смеси веществ) на поверхности рабочего электрода из стеклоуглерода, находящегося при определенном потенциале (патент РФ 2238554, G01N 33/15, 20.10.2004). Электрохимическое окисление анализируемого и стандартного веществ проводят путем непосредственной поочередной подачи их в термостатируемую электрохимическую ячейку амперометрического детектора с получением сигналов в виде импульсов электрического тока, усиления сигналов, регистрации в виде выходных кривых и расчета площадей полученных пиков анализируемого и стандартного веществ, по которым производят расчет показателя АОА.Closest to the proposed invention in technical essence and the achieved result is an amperometric method for determining the total AOA of biologically active substances, based on measuring the electric current arising from the oxidation of the test substance (or mixture of substances) on the surface of a working electrode made of glassy carbon at a certain potential (RF patent 2238554 G01N 33/15, 10.20.2004). The electrochemical oxidation of the analyzed and standard substances is carried out by directly supplying them to the thermostatically controlled electrochemical cell of the amperometric detector to obtain signals in the form of electric current pulses, amplify the signals, register in the form of output curves and calculate the areas of the obtained peaks of the analyzed and standard substances, according to which the indicator is calculated AOA.

В условиях амперометрического детектирования хорошо окисляются соединения, содержащие гидроксильные группы, предел их обнаружения составляет 10-9-10-12 г. Поскольку основные и наиболее активные природные антиоксиданты (природные полифенолы, разные типы флавоноидов, фенольные оксикислоты, витамины и другие продукты) имеют фенольную природу, амперометрический метод наиболее пригоден для оценки их суммарной антиоксидантной активности.Under the conditions of amperometric detection, compounds containing hydroxyl groups are well oxidized, the detection limit is 10 -9 -10 -12 g. Since the main and most active natural antioxidants (natural polyphenols, different types of flavonoids, phenolic hydroxy acids, vitamins and other products) have phenolic nature, amperometric method is most suitable for assessing their total antioxidant activity.

Недостатком известного способа является дорогостоящая и громоздкая установка, включающая в себя: емкость для растворителя, насос, кран-дозатор, выполненный в виде многоходового крана, амперометрический детектор, состоящий из термостатируемой электрохимической ячейки со сменными рабочими электродами, усилитель тока, аналого-цифровой преобразователь, устройство регистрации выходного сигнала (компьютер с принтером) и устройство ввода анализируемого и стандартного веществ. Кроме того, этот способ требует большого расхода реагентов, в том числе, растворителя и стандартов.The disadvantage of this method is an expensive and cumbersome installation, which includes: a solvent tank, a pump, a metering valve made in the form of a multi-way valve, an amperometric detector consisting of a thermostatically controlled electrochemical cell with replaceable working electrodes, a current amplifier, an analog-to-digital converter, an output signal recording device (a computer with a printer) and an input device for the analyzed and standard substances. In addition, this method requires a large consumption of reagents, including solvent and standards.

Задачей предлагаемого изобретения является создание более простого в осуществлении вольтамперометрического способа измерения суммарной антиоксидантной активности фармацевтических препаратов, лекарственных растений, биологически активных добавок и пищевых продуктов (чай, вино, соки).The objective of the invention is the creation of an easier to implement voltammetric method for measuring the total antioxidant activity of pharmaceuticals, medicinal plants, biologically active additives and food products (tea, wine, juices).

Для решения этой задачи предложен способ вольтамперометрического определения антиоксидантной активности биологически активных веществ на стационарном стеклоуглеродном электроде в аммиачных буферных растворах, а регистрацию вольтамперограмм осуществляют в классическом или постояннотоковом дифференциальном режиме с последующим использованием высоты регистрируемой волны (пика) для расчета антиоксидантной активности.To solve this problem, a method for voltammetric determination of the antioxidant activity of biologically active substances on a stationary glassy carbon electrode in ammonia buffer solutions is proposed, and voltammograms are recorded in the classical or constant current differential mode with the subsequent use of the height of the recorded wave (peak) to calculate antioxidant activity.

Предлагаемый способ осуществляют в обычной стеклянной термостатируемой трехэлектродной электрохимической ячейке с использованием серийных приборов: электронного полярографа и двухкоординатного самописца. В качестве рабочего электрода используют стационарный стеклоуглеродный электрод, а электродом сравнения и вспомогательным служат насыщенные каломельные электроды.The proposed method is carried out in a conventional glass thermostatic three-electrode electrochemical cell using serial devices: an electronic polarograph and a two-coordinate recorder. A stationary glassy carbon electrode is used as the working electrode, and saturated calomel electrodes serve as the reference and auxiliary electrodes.

Для определения суммарной антиоксидантной активности различных биологически активных веществ в аммиачных буферных растворах в классическом или в постояннотоковом дифференциальном режиме в анодной области потенциалов наблюдаются четко выраженные волны (пики) окисления антиоксидантов, содержащиеся в исследуемых растворах. Использование аммиачных буферных растворов в качестве фонового электролита исключает искажение анодных волн (пиков) и увеличивает их высоту по сравнению с другими электролитами вследствие более высокой протонодонорной активности ионов аммония.To determine the total antioxidant activity of various biologically active substances in ammonia buffer solutions in the classical or constant current differential mode, clearly pronounced waves (peaks) of antioxidant oxidation contained in the studied solutions are observed in the anode region of potentials. The use of ammonia buffer solutions as the background electrolyte eliminates distortion of the anode waves (peaks) and increases their height compared to other electrolytes due to the higher proton donor activity of ammonium ions.

В качестве стандартных растворов используют следующие растворы общеизвестных антиоксидантов: аскорбиновой кислоты, кверцетина, дигидрокверцетина и рутина, окисляющихся в аммиачных буферных растворах приThe following solutions of well-known antioxidants are used as standard solutions: ascorbic acid, quercetin, dihydroquercetin and rutin, which are oxidized in ammonia buffer solutions at

E1/2 -0,29 В, -0,28 В, -0,15 В и -0,1 В (н.к.э.) соответственно. В зависимости от Е1/2 регистрируемых анодных пиков (волн) на вольтамперограммах исследуемых биологически активных веществ выбирают соответствующий стандартный раствор. Расчет показателя антиоксидантной активности (АОА) осуществляют по следующей формуле:E 1/2 -0.29 V, -0.28 V, -0.15 V and -0.1 V (N.E.C.E.) respectively. Depending on the E 1/2 of the recorded anode peaks (waves) in the voltammograms of the studied biologically active substances, the corresponding standard solution is chosen. The calculation of the indicator of antioxidant activity (AOA) is carried out according to the following formula:

Figure 00000001
Figure 00000001

где Ix - высота пика (волны) анализируемого препарата, мм;where I x is the height of the peak (wave) of the analyzed drug, mm;

Ic - высота пика (волны) стандарта, мм;I c is the height of the peak (wave) of the standard, mm;

Vx - объем анализируемого препарата, мл;V x - the volume of the analyzed drug, ml;

Сс - концентрация стандарта, г/л;C with - the concentration of the standard, g / l;

Vc - объем стандарта, мл;V c - standard volume, ml;

Vф - объем фонового раствора, мл;V f - the volume of the background solution, ml;

Vp - разбавление анализируемого препарата, мл;V p - dilution of the analyzed drug, ml;

m - навеска анализируемого препарата, г.m - sample of the analyzed drug,

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.

Пример 1. Китайский зеленый чай.Example 1. Chinese green tea.

1,80 г зеленого чая заливают 100 мл нагретой до кипения дистиллированной водой, накрывают часовым стеклом и настаивают в течение 5 мин, затем полученный водный экстракт фильтруют через бумажный фильтр «белая лента», охлаждают и доводят объем до 100 мл водой.1.80 g of green tea is poured with 100 ml of distilled water heated to a boil, covered with a watch glass and infused for 5 minutes, then the resulting aqueous extract is filtered through a white ribbon filter, cooled and the volume is adjusted to 100 ml with water.

В электрохимическую ячейку заливают 4 мл аммиачного буферного раствора (фоновый раствор), продувают его азотом 5 минут и записывают классическую и дифференциальную вольтамперограммы фонового раствора при скорости развертки потенциала 20 мВ/с от -0,6 до +0,5 В в анодном направлении с использованием электронного полярографа ПУ-1М и двухкоординатного самописца ПДС-021. К фоновому раствору прибавляют 0,1 мл приготовленного водного экстракта чая, полученный раствор продувают азотом в течение 5 минут и записывают классическую и дифференциальную вольтамперограммы в области потенциалов от - 0,6 до +0,5 В. В анодной области наблюдают общий пик (волну), отвечающий процессам окисления содержащихся в анализируемой пробе антиоксидантов. Затем в этот же раствор добавляют 0,1 мл предварительно приготовленного стандартного раствора антиоксиданта - рутина с концентрацией 2,0 г/л, продувают азотом 5 минут и записывают его вольтамперограммы. Измеряют высоту пиков (волн) анализируемой пробы и стандартного раствора, а количественную оценку антиоксидантной активности анализируемого сорта чая проводят по формуле, приведенной выше. Найдено экспериментально: высота пика исследуемого чая - 67 мм, а высота пика стандарта рутина - 102 мм. Для анализируемого сорта зеленого чая АОА составляет 70,9 мг/г в расчете на сухой продукт.4 ml of ammonia buffer solution (background solution) is poured into the electrochemical cell, it is flushed with nitrogen for 5 minutes, and the classical and differential voltammograms of the background solution are recorded at a potential sweep speed of 20 mV / s from -0.6 to +0.5 V in the anode direction with using the PU-1M electronic polarograph and the PDS-021 two-coordinate recorder. 0.1 ml of the prepared aqueous tea extract is added to the background solution, the resulting solution is purged with nitrogen for 5 minutes, and the classical and differential voltammograms are recorded in the potential range from - 0.6 to +0.5 V. In the anode region, a common peak is observed (wave ), corresponding to the oxidation processes contained in the analyzed sample of antioxidants. Then, 0.1 ml of a pre-prepared standard solution of an antioxidant - rutin with a concentration of 2.0 g / l is added to the same solution, purged with nitrogen for 5 minutes and its voltammograms are recorded. The height of the peaks (waves) of the analyzed sample and the standard solution are measured, and the antioxidant activity of the analyzed tea variety is quantified using the formula above. It was found experimentally: the peak height of the tea under study was 67 mm, and the peak height of the rutin standard was 102 mm. For the analyzed variety of green tea, AOA is 70.9 mg / g calculated on the dry product.

Пример 2. Экстракт герани.Example 2. Geranium extract.

0,2030 г экстракта герани вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем колбы дистиллированной водой до метки, а затем перемешивают.0.2030 g of geranium extract is introduced into a 100 ml volumetric flask, dissolved in distilled water and the volume of the flask is made up with distilled water to the mark, and then stirred.

Запись вольтамперограмм и определение высоты пиков анализируемого раствора и стандарта рутина, а также количественный расчет АОА проводился аналогично примеру 1. Для анализируемого экстракта герани АОА составляет 206,7 мг/г в расчете на сухой продукт.The recording of voltammograms and the determination of the peak heights of the analyzed solution and the rutin standard, as well as the quantitative calculation of AOA, were carried out analogously to Example 1. For the analyzed geranium extract, AOA was 206.7 mg / g based on dry product.

Пример 3. Биологически активная добавка «Экстралайф».Example 3. Dietary supplement "Extralife".

0,2005 г препарата вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем колбы дистиллированной водой до метки, а затем перемешивают.0.2005 g of the drug is introduced into a 100 ml volumetric flask, dissolved in distilled water and the volume of the flask is made up with distilled water to the mark, and then stirred.

Запись вольтамперограмм и определение высоты пиков анализируемого раствора препарата и стандарта рутина, а также количественный расчет АОА проводят аналогично примеру 1. Для анализируемого препарата АОА составляет 190 мг/г в расчете на сухой продукт.Recording voltammograms and determining the height of the peaks of the analyzed solution of the drug and the standard of rutin, as well as the quantitative calculation of AOA are carried out analogously to example 1. For the analyzed preparation, AOA is 190 mg / g, calculated on the dry product.

Пример 4. Чай «Maitre» зеленый.Example 4. Tea "Maitre" green.

2,00 г зеленого чая заливают 100 мл нагретой до кипения дистиллированной водой, накрывают часовым стеклом и настаивают в течение 5 мин, затем полученный водный экстракт фильтруют через бумажный фильтр «белая лента», охлаждают и доводят объем до 100 мл водой.2.00 g of green tea is poured into 100 ml of distilled water heated to a boil, covered with a watch glass and infused for 5 minutes, then the resulting aqueous extract is filtered through a white ribbon filter, cooled and the volume is adjusted to 100 ml with water.

Запись вольтамперограмм и определение высоты пиков анализируемого раствора препарата и стандарта рутина, а также количественный расчет АОА проводят аналогично примеру 1. Для анализируемого сорта чая АОА составляет 76 мг/г в расчете на сухой продукт.Record voltammograms and determine the height of the peaks of the analyzed solution of the drug and the standard of rutin, as well as the quantitative calculation of AOA is carried out analogously to example 1. For the analyzed variety of tea AOA is 76 mg / g per dry product.

Пример 5. Продукт пчеловодства - прополис.Example 5. The beekeeping product is propolis.

0,2300 г прополиса вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, заливают в нее 20 мл этилового спирта, тщательно перемешивают и оставляют полученную суспензию на 7 суток для экстракции, затем полученный спиртовый экстракт фильтруют и получают раствор для анализа.0.2300 g of propolis is added to a 25 ml volumetric flask, 20 ml of ethanol are poured into it, thoroughly mixed, and the resulting suspension is left for 7 days for extraction, then the resulting alcoholic extract is filtered and a solution for analysis is obtained.

Запись вольтамперограмм анализируемого раствора и стандарта рутина проводят на фоне смешанного аммиачного буферного раствора с этиловым спиртом (1:1), а определение высоты пиков анализируемого раствора препарата и стандарта рутина, а также количественный расчет АОА проводят аналогично примеру 1. Для прополиса АОА составляет 130 мг/г в расчете на сухой продукт.Voltammograms of the analyzed solution and the rutin standard are recorded against a background of a mixed ammonia buffer solution with ethyl alcohol (1: 1), and the peak heights of the analyzed solution of the drug and the rutin standard are determined, as well as the quantitative calculation of AOA is carried out analogously to example 1. For propolis, AOA is 130 mg / g calculated on the dry product.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет эффективно определять суммарную АОА БАВ с одновременным упрощением его реализации за счет использования серийного приборного оформления.Thus, the proposed method allows you to effectively determine the total AOA BAS while simplifying its implementation through the use of serial instrumentation.

Claims (1)

Способ определения суммарной антиоксидантной активности биологически активных веществ, включающий подготовку проб анализируемого и стандартного веществ, их электрохимическое окисление на стеклоуглеродном электроде и расчет показателя антиоксидантной активности, отличающийся тем, что окисление анализируемого и стандартного вещества проводят в трехэлектродной электрохимической ячейке в аммиачных буферных растворах, а регистрацию вольтамперограмм осуществляют в классическом или дифференциальном режиме с последующим использованием значений высоты регистрируемых волн (пиков) для расчета антиоксидантной активности, при этом расчет показателя антиоксидантной активности (АОА) осуществляют по следующей формуле:
Figure 00000002

где Ix - высота пика (волны) анализируемого препарата, мм;
Ic - высота пика (волны) стандарта, мм;
Vx - объем анализируемого препарата, мл;
Сс - концентрация стандарта, г/л;
Vc - объем стандарта, мл;
Vф - объем фонового раствора, мл;
Vp - разбавление анализируемого препарата, мл;
m - навеска анализируемого препарата, г.
A method for determining the total antioxidant activity of biologically active substances, including the preparation of samples of the analyzed and standard substances, their electrochemical oxidation on a glassy carbon electrode and the calculation of the indicator of antioxidant activity, characterized in that the oxidation of the analyzed and standard substances is carried out in a three-electrode electrochemical cell in ammonia buffer solutions, and registration voltammograms are carried out in classical or differential mode with subsequent use em values recorded wave height (the peak) for the calculation of the antioxidant activity, the index calculation antioxidant activity (AOA) is carried out according to the following formula:
Figure 00000002

where I x is the height of the peak (wave) of the analyzed drug, mm;
I c is the height of the peak (wave) of the standard, mm;
V x - the volume of the analyzed drug, ml;
C with - the concentration of the standard, g / l;
V c - standard volume, ml;
V f - the volume of the background solution, ml;
V p - dilution of the analyzed drug, ml;
m - sample of the analyzed drug,
RU2007146632/15A 2007-12-19 2007-12-19 Method of total antioxidant effect definition for bioactive substances RU2356050C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007146632/15A RU2356050C1 (en) 2007-12-19 2007-12-19 Method of total antioxidant effect definition for bioactive substances

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007146632/15A RU2356050C1 (en) 2007-12-19 2007-12-19 Method of total antioxidant effect definition for bioactive substances

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2356050C1 true RU2356050C1 (en) 2009-05-20

Family

ID=41021816

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007146632/15A RU2356050C1 (en) 2007-12-19 2007-12-19 Method of total antioxidant effect definition for bioactive substances

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2356050C1 (en)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2447444C1 (en) * 2010-10-12 2012-04-10 Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации Method for determining total content of thiol antioxidants in plant objects by cathodic voltammetry
RU2469316C1 (en) * 2011-05-06 2012-12-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ГОУ ВПО ВГУ) Method for quantitative determination of rutin via thin-layer chromatography
RU2486499C1 (en) * 2012-04-10 2013-06-27 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральский государственный экономический университет" (ФГБОУ ВПО "УрГЭУ") Method of determining oxidant/antioxidant activity of substances and apparatus for realising said method
RU2523564C1 (en) * 2012-12-03 2014-07-20 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы Method for measuring antioxidant activity of biological fluids

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2447444C1 (en) * 2010-10-12 2012-04-10 Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации Method for determining total content of thiol antioxidants in plant objects by cathodic voltammetry
RU2469316C1 (en) * 2011-05-06 2012-12-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ГОУ ВПО ВГУ) Method for quantitative determination of rutin via thin-layer chromatography
RU2486499C1 (en) * 2012-04-10 2013-06-27 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральский государственный экономический университет" (ФГБОУ ВПО "УрГЭУ") Method of determining oxidant/antioxidant activity of substances and apparatus for realising said method
RU2523564C1 (en) * 2012-12-03 2014-07-20 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы Method for measuring antioxidant activity of biological fluids

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Campanella et al. New biosensor for superoxide radical used to evidence molecules of biomedical and pharmaceutical interest having radical scavenging properties
Brainina et al. Potentiometric method of plant microsuspensions antioxidant activity determination
CN106124581B (en) Same system builds two kinds of ratio electrochemical sensor detection antitumor drug methods
RU2356050C1 (en) Method of total antioxidant effect definition for bioactive substances
CN112067764B (en) Method for evaluating skin inflammation relieving or repairing effect of cosmetic
RU2426109C1 (en) Voltammetric method of determining activity of antioxidants
Alipour et al. Electrochemically activated pencil lead electrode as a sensitive voltammetric sensor to determine gallic acid
CN104792756A (en) Application of tetra-p-sulfonic group-phenyl porphyrin derivative as fluorescent probe in aspect of detecting zinc ions
Maslov et al. Development and validation potentiometric method for determination of antioxidant activity of epigallocatechin-3-O-gallate
Karyakina et al. Kinetic approach for evaluation of total antioxidant activity
Campanella et al. Antioxidant capacity of the algae using a biosensor method
RU2381502C2 (en) Method for quantitative determination of hesperedin using differential voltammetry method
RU2235998C2 (en) Method of determination of oxidant/anti-oxidant activity of solutions
KR101784201B1 (en) Composition for improving skin conditions containing fermented extracts of artemisia annua as active ingredient
DE2924117A1 (en) ELECTRODE SYSTEM WITH A REFERENCE ELECTRODE WITHOUT LIQUID TRANSITION FOR VOLTAMETER MEASUREMENTS
CN115501128B (en) Composition for regulating skin, whitening and brightening skin and essence emulsion
CN116370323A (en) Whitening composition, skin care product and whitening liquid
RU2238554C1 (en) Method for determining total antioxidation activity of biologically active substances
CN103091305A (en) Method for detecting quinolone antibiotic by means of electrochemical luminescence
RU2449275C2 (en) Method of determining index of total antioxidant activity of biological objects by method of cathode voltammetry
RU2224997C1 (en) Volt-ampere method determining summary activity of antioxidants
CN111979289B (en) Cytological evaluation method for plant extract resisting skin chemical stimulus and application thereof
RU2312343C2 (en) Method of analysis of peloid humic acids
Chang et al. Simultaneous voltammetric determination of ascorbic acid and its derivatives in cosmetics using epoxy-carbon composite electrodes
Hu et al. Evaluation of a resorufin-based fluorescent probe for tyrosinase detection in skin pigmentation disorders

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20151220