RU2349913C1 - Способ определения альфа-токоферола в растительных маслах - Google Patents
Способ определения альфа-токоферола в растительных маслах Download PDFInfo
- Publication number
- RU2349913C1 RU2349913C1 RU2007141452/28A RU2007141452A RU2349913C1 RU 2349913 C1 RU2349913 C1 RU 2349913C1 RU 2007141452/28 A RU2007141452/28 A RU 2007141452/28A RU 2007141452 A RU2007141452 A RU 2007141452A RU 2349913 C1 RU2349913 C1 RU 2349913C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tocopherol
- alpha
- chromatographic
- chromatogram
- sorbfil
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
Способ определения альфа-токоферола включает приготовление спиртового раствора исследуемого объекта, нанесение пробы раствора на хроматографическую пластину марки "Sorbfil", хроматографирование в присутствии элюента октан:диэтиловый эфир (7:1), проявление хроматографических зон альфа-токоферола концентрированной азотной кислотой, сканирование хроматограммы. Обработку полученного изображения хроматограммы проводят компьютерной программой «Sorbfil Videodensitometer». Нахождение количественного содержания альфа-токоферола осуществляют по градуировочной зависимости. Изобретение обеспечивает повышение точности и достоверности количественного определения альфа-токоферола за счет улучшения качества хроматографических зон. 3 ил.
Description
Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть применено для определения α-токоферола (альфа-токоферола) в различных объектах растительного и животного происхождения.
Наиболее близкими по технической сущности и достигаемому эффекту являются способы определения α-токоферола методом ТСХ с применением элюентов: 1) бензол:этилацетат (8:2) (Надиров Н.К. Токоферолы и их использование в медицине и сельском хозяйстве. М.: Наука, 1991, с.71); 2) бензол:петролейный эфир (1:1); 3) хлороформ (Экспериментальная витаминология. Справочное руководство. Под. ред. Островского Ю.М. Мн.: Наука и техника, 1979, с.48); 4) гексан:этилацетат (37:3) (Кирхнет Ю. Тонкослойная хроматография. Москва: Изд. Мир, 1981, с.410). В данном способе в качестве адсорбента используют силикагель марки КСК и АСК с добавлением 15% гипса. Перед применением пластины активируют в течение 2 часов при 110°С. Хроматограмма развивается в темноте, подвижным растворителем является хлороформ. Это занимает 35 -45 мин. Пластинки опрыскивают реактивом Эммери - Энгеля, состоящим из равных объемов 0,25% раствора α,α′-дипиридила и 0,1%-ного спиртового раствора FeCl3. Токоферолы окрашиваются в розовый цвет. Для количественного определения токоферолов пластинку делят на две части. После развития хроматограммы и подсушивания пластинок левую половину закрывают, а правую опрыскивают раствором Эммери-Энгеля. Далее на левой части пластинки на высоте окрашенных пятен токоферолов соскабливают силикагель и помещают его в пробирку, куда добавляют 5 мл этанола. Адсорбент отделяют центрифугированием. К 4 мл элюата добавляют 0,5 мл 0,25%-ного спиртового раствора α,α′-дипиридила и 0,5 мл 0,1% спиртового раствора FeCl3. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют через 5 мин при 520 нм. Содержание токоферолов рассчитывают по градуировочным графикам в перерасчете на α-токоферол.
Недостатки известного способа - невозможность получения округлой формы хроматографических зон α-токоферола, соответствующих линейной изотерме сорбции, объясняющаяся значительным сродством витамина Е к неподвижной фазе (элюент №1 и 3) и подвижной фазе (элюент №2 и 4), а также длительное по времени количественное определение витамина Е.
Задачей изобретения является определение α-токоферола методом хроматографии в тонком слое сорбента с применением элюента, обеспечивающего получение хроматографических зон α-токоферола, соответствующих линейной изотерме сорбции.
Технический результат заключается в повышении точности и достоверности количественного определения α-токоферола за счет улучшения качества хроматографических зон.
Технический результат достигается тем, что способ определения альфа-токоферола методом хроматографии в тонком слое сорбента включает приготовление спиртового раствора исследуемого объекта, нанесение пробы раствора на хроматографическую пластину марки "Sorbfil", хроматографирование в присутствии элюента октан:диэтиловый эфир (7:1), высушивание пластины на воздухе, проявление хроматографических зон альфа-токоферола концентрированной азотной кислотой, выдержку в термостате, сканирование хроматограммы, обработку полученных изображений хроматограмм компьютерной программой «Sorbfil Videodensitometer» и нахождение количественного содержания альфа-токоферола по градуировочной зависимости.
На фиг.1 - хроматограмма, полученная в системе октан:диэтиловый эфир (7: 1), проявитель - HNO3 конц., концентрации растворов α-токоферола - 2,5, 5, 10, 15 мг/мл.; на фиг.2 - градуировочный график для определения содержания α-токоферола в области концентраций (2,5-15 мг/мл), на фиг.3 - хроматограмма масляного экстракта череды; 1 - хроматограмма стандартного раствора α-токоферола (с=10 мг/мл, V проб.=1 мкл), 2 - хроматограмма спиртового раствора неомыляемой части масляного экстракта череды (с=165,8 мг/мл, V проб.=10 мкл).
Предлагаемый способ определения α-токоферола методом хроматографии в тонком слое сорбента осуществляется по следующей методике.
Приготовленные стандартные растворы α-токоферола с концентрациями 2,5, 5, 10, 15 мг/мл и объемом 1 мкл наносят на хроматографическую пластину марки "Sorbfil" (Краснодар) размером 10×10 см, сорбент - силикагель зернением 5-12 мкм, и помещают в предварительно насыщенную элюентом октан:диэтиловый эфир (7:1) хроматографическую камеру. Элюирование проводят в течение 15 минут и прекращают, когда элюент поднимется на высоту 9 см. Далее пластину вынимают из камеры и высушивают на воздухе, после чего ее обрабатывают концентрированной азотной кислотой и помещают на 10 мин в термостат, нагретый до температуры 100°С. На белом фоне хроматографические зоны α-токоферола, окисляясь до α-токоферилхинона, окрашиваются в красный цвет (фиг.1).
Количественное определение альфа-токоферола проводят относительно стандартных растворов индивидуальных веществ путем построения градуировочной кривой зависимости площади хроматографической зоны от концентрации раствора. Сразу же после проявления хроматографических зон пластины сканируют, а полученные изображения обрабатывают компьютерной программой «Sorbfil Videodensitometer». Принцип работы программы состоит в построении аналоговой кривой хроматограммы по отклонению яркости пятен от яркости фона с последующим нахождением пиков на этой кривой и расчетом их площади. Анализ полученных данных позволил установить линейную зависимость между концентрацией α-токоферола и площадью соответствующего пика в области изучаемых концентраций (2,5-15 мг/мл). По полученным данным был построен градуировочный график, иллюстрирующий эту зависимость (фиг.2).
Осуществление способа иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1.
Выделение неомыленной фракции из масляного экстракта череды проводят по методике [1]. В результате эксперимента получают неомыляемую часть экстракта череды массой 663,2 мг, которую немедленно растворяют в 4 мл этилового спирта. Таким образом, концентрация неомыляемой части составляет 165,8 мл. Далее раствор неомыляемой части объемом 10 мкл и спиртовый раствор альфа-токоферола концентрацией 25 мг/мл и объемом 1 мкл наносят на силикагелевую пластину и помещают в камеру для хроматографирования, насыщенную раствором элюента: октан:диэтиловый эфир (7:1). После завершения процесса хроматографирования пластину вынимают из камеры, сушат на воздухе, обрабатывают концентрированной азотной кислотой и помещают в термостат, нагретый до температуры 100°С. Хроматограмма, полученная в описанных выше условиях, представлена на фиг.3.
Затем проводят количественное определение альфа-токоферола по градуировочной зависимости. Сразу же после проявления хроматографических зон пластины сканируют, а полученные изображения обрабатывают компьютерной программой «Sorbfil Videodensitometer». По градуировочному графику (фиг.2) находят концентрацию альфа-токоферола в масляном экстракте череды. Установлено, что концентрация альфа-токоферола равна 40 мг,% (40 мг/100 г масла).
Пример 2.
Выделение неомыляемой фракции из подсолнечного масла проводят по методике ГОСТ 30417-96. Этапы выделения и определения альфа-токоферола в различных растительных маслах принципиально не отличаются, поэтому ход эксперимента по определению альфа-токоферола в подсолнечном масле аналогичен определению данного вещества в масляном экстракте череды, подробно описанному в примере 1. В результате эксперимента масса неомыляемой части подсолнечного масла составляет 872,8 мг. Концентрация неомыляемой части в этаноле равна 218,2 мг/мл, объем наносимой на хроматографическую пластину спиртового раствора неомыляемой части - 10 мкл. Концентрация альфа-токоферола в подсолнечном масле составляет 36 мг,% (36 мг/100 г масла).
Источники информации
1. ГОСТ 30417-96. Методы определения массовой доли витамина Е в растительных маслах. - Введ. 1998-01-01. - М.: Изд. Стандартов, 1997.
Claims (1)
- Способ определения альфа-токоферола, включающий приготовление спиртового раствора исследуемого объекта, нанесение пробы раствора на хроматографическую пластину марки "Sorbfil", хроматографирование в присутствии элюента октан-диэтиловый эфир (7:1), высушивание пластины на воздухе, проявление хроматографических зон альфа-токоферола концентрированной азотной кислотой, выдержка в термостате, сканирование хроматограммы, обработка полученного изображения хроматограммы компьютерной программой «Sorbfil Videodensitometer» и нахождение количественного содержания альфа-токоферола по градуировочной зависимости.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007141452/28A RU2349913C1 (ru) | 2007-11-07 | 2007-11-07 | Способ определения альфа-токоферола в растительных маслах |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007141452/28A RU2349913C1 (ru) | 2007-11-07 | 2007-11-07 | Способ определения альфа-токоферола в растительных маслах |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2349913C1 true RU2349913C1 (ru) | 2009-03-20 |
Family
ID=40545382
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007141452/28A RU2349913C1 (ru) | 2007-11-07 | 2007-11-07 | Способ определения альфа-токоферола в растительных маслах |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2349913C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2530620C1 (ru) * | 2013-07-30 | 2014-10-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ВГУ) | Способ определения жирорастворимых витаминов а, d2, е и в-каротина при совместном присутствии методом тонкослойной хроматографии |
-
2007
- 2007-11-07 RU RU2007141452/28A patent/RU2349913C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ГОСТ 30417-96. Масла растительные. Методы определения массовых долей витаминов А и Е. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2530620C1 (ru) * | 2013-07-30 | 2014-10-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ВГУ) | Способ определения жирорастворимых витаминов а, d2, е и в-каротина при совместном присутствии методом тонкослойной хроматографии |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Shewiyo et al. | HPTLC methods to assay active ingredients in pharmaceutical formulations: A review of the method development and validation steps | |
| de Jong et al. | Current status and future developments of LC-MS/MS in clinical chemistry for quantification of biogenic amines | |
| Yu et al. | Development of an HPLC–UV method for the simultaneous determination of tetracyclines in muscle and liver of porcine, chicken and bovine with accelerated solvent extraction | |
| Helfer et al. | Direct analysis of the mushroom poisons α-and β-amanitin in human urine using a novel on-line turbulent flow chromatography mode coupled to liquid chromatography–high resolution-mass spectrometry/mass spectrometry | |
| Tsikas | Quantitative analysis of biomarkers, drugs and toxins in biological samples by immunoaffinity chromatography coupled to mass spectrometry or tandem mass spectrometry: a focused review of recent applications | |
| Johansen et al. | Simultaneous determination of γ-hydroxybutyrate (GHB) and its analogues (GBL, 1.4-BD, GVL) in whole blood and urine by liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry | |
| Dispas et al. | Supercritical fluid chromatography: a promising alternative to current bioanalytical techniques | |
| Luan et al. | Gas-phase postderivatization following solid-phase microextraction for rapid determination of trans-resveratrol in wine by gas chromatography-mass spectrometry | |
| Karlonas et al. | Mixed‐mode SPE for a multi‐residue analysis of benzodiazepines in whole blood using rapid GC with negative‐ion chemical ionization MS | |
| Sherma | Planar chromatography | |
| Zhang et al. | Quantification of domoic acid in shellfish samples by capillary electrophoresis-based enzyme immunoassay with electrochemical detection | |
| Álvarez et al. | Determination of cocaine and cocaethylene in plasma by solid-phase microextraction and gas chromatography–mass spectrometry | |
| Luan et al. | Determination of hydroxy metabolites of polycyclic aromatic hydrocarbons by fully automated solid-phase microextraction derivatization and gas chromatography–mass spectrometry | |
| Liang et al. | Recent development of two-dimensional liquid chromatography in food analysis | |
| del Nogal Sánchez et al. | A method based on microextraction by packed sorbent-programmed temperature vaporizer–fast gas chromatography–mass spectrometry for the determination of aromatic amines in environmental water samples | |
| Maurer et al. | Validated gas chromatographic–mass spectrometric assay for determination of the antifreezes ethylene glycol and diethylene glycol in human plasma after microwave-assisted pivalylation | |
| Blokker et al. | At-line gas chromatographic–mass spectrometric analysis of fatty acid profiles of green microalgae using a direct thermal desorption interface | |
| Li et al. | Simultaneous determination of antioxidants and ultraviolet absorbers by ultra-performance liquid chromatography in food simulants | |
| Dong et al. | Surrogate analyte‐based quantification of main endocannabinoids in whole blood using liquid chromatography–tandem mass spectrometry | |
| Elboraie et al. | Dispersive solid-phase extraction for simultaneous determination of four amphetamines drugs in urine using gas chromatography–mass spectrometry | |
| Zhong et al. | Automatic on‐line solid‐phase extraction with ultra‐high performance liquid chromatography and tandem mass spectrometry for the determination of ten antipsychotics in human plasma | |
| Larreta et al. | Experimental design to optimise the analysis of organic volatile compounds in cow slurry by headspace solid-phase microextraction–gas chromatography–mass spectrometry | |
| RU2349913C1 (ru) | Способ определения альфа-токоферола в растительных маслах | |
| CN112782295A (zh) | 一种在线测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法与应用 | |
| Perestrelo et al. | Determination of urinary levels of leukotriene B4 using ad highly specific and sensitive methodology based on automatic MEPS combined with UHPLC-PDA analysis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20091108 |