RU2340371C1 - Substance for dermatological medical products on basis of collagenase of microbic parentage ultralysine - Google Patents
Substance for dermatological medical products on basis of collagenase of microbic parentage ultralysine Download PDFInfo
- Publication number
- RU2340371C1 RU2340371C1 RU2007122707/13A RU2007122707A RU2340371C1 RU 2340371 C1 RU2340371 C1 RU 2340371C1 RU 2007122707/13 A RU2007122707/13 A RU 2007122707/13A RU 2007122707 A RU2007122707 A RU 2007122707A RU 2340371 C1 RU2340371 C1 RU 2340371C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- substance
- collagenase
- activity
- ultrafiltrate
- collagenolytic
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к созданию на основе коллагеназы микробного происхождения субстанции для лекарственных средств.The invention relates to biotechnology, in particular to the creation of a substance for medicines on the basis of collagenase of microbial origin.
Известна группа микробных коллагеназ, которая широко используется в биотехнологии и для лабораторных целей, например, коллагеназы, синтезируемые бактерией Clostridium histolyticum. Продуцентами коллагеназ являются также насекомые Hypoderma lineatum и камчатские крабы [1].A known group of microbial collagenases, which is widely used in biotechnology and for laboratory purposes, for example, collagenases synthesized by the bacterium Clostridium histolyticum. Collagenase producers are also Hypoderma lineatum insects and Kamchatka crabs [1].
Известными аналогами предлагаемого изобретения могут быть препараты, полученные из бактерий Clostridium histolyticum и крабовая коллагеназа [1]. Бактерия Clostridium histolyticum является возбудителем газовой гангрены, строгим анаэробом, требующим особых условий выращивания. Технология получения препарата из этой бактерии сложная и дорогостоящая. Крабовая коллагеназа уступает по свойствам бактериальной, так как неполностью нейтрализует коллаген. Кроме того, присущий препарату фибренолитические и тромболитические свойства могут вызывать нежелательное воздействие при нанесении на кожу.Known analogues of the invention may be preparations obtained from the bacteria Clostridium histolyticum and crab collagenase [1]. The bacterium Clostridium histolyticum is a causative agent of gas gangrene, a strict anaerobic, requiring special growing conditions. The technology for producing the drug from this bacterium is complex and expensive. Crab collagenase is inferior in bacterial properties, as it does not completely neutralize collagen. In addition, the inherent fibrenolytic and thrombolytic properties of the drug can cause unwanted effects when applied to the skin.
Наиболее близким прототипом предлагаемого биологически активного ультрафильтрата является коллагеназа, выделенная из культуральной жидкости штамма Streptomyces lavendulae ВКПМ S-910 [2].The closest prototype of the proposed biologically active ultrafiltrate is collagenase isolated from the culture fluid of the strain Streptomyces lavendulae VKPM S-910 [2].
Недостатком указанного изобретения является низкая коллагенолитическая активность, более сложный и дорогостоящий способ получения названного фермента, а также ограниченная область использования в медицинской биотехнологии.The disadvantage of this invention is the low collagenolytic activity, a more complex and expensive way to obtain the named enzyme, as well as a limited area of use in medical biotechnology.
Технической задачей данного изобретения является получение высокоэффективного биологически активного ультрафильтрата, содержащего коллагеназу и протеазу микробного происхождения, предназначенного для использования в качестве субстанции для лекарственных средств в различных ранозаживляющих препаратах, препаратах для лизиса послеоперационного или посттравматического гемоторакса, для лизиса послеоперационных спаек, в косметологии.The technical task of this invention is to obtain a highly effective biologically active ultrafiltrate containing collagenase and protease of microbial origin, intended for use as a substance for drugs in various wound healing preparations, preparations for the lysis of postoperative or post-traumatic hemothorax, for the lysis of postoperative adhesions, in cosmetology.
Техническая задача решается тем, что заявленная биологически активная субстанция содержит коллагеназу и протеазу из Streptomyces lavendulae ВКПМ S-910 при следующих ферментативных активностях:The technical problem is solved in that the declared biologically active substance contains collagenase and protease from Streptomyces lavendulae VKPM S-910 with the following enzymatic activities:
- коллагенолитическая активность 1800-2500 КЕА/мл,- collagenolytic activity of 1800-2500 KEA / ml,
- протеолитическая активность 120-200 ПЕ/мл.- proteolytic activity of 120-200 PE / ml.
Для получения заявленной субстанции-ультрафильтрата используют штамм Streptomyces lavendulae ВКПМ S-910, который выращивают на плотной питательной среде - на картофельном агаре, а затем на ферментационной питательной среде следующего состава (г/л): кукурузная мука - 20; пептон - 0,5; сухие кормовые дрожжи - 0,05; MgSO4·7H2O - 0,4; желатин - 0,5; вода водопроводная рН 6,4-6,8. Выращивание проводят в колбах Эрленмейера объемом 250 мл на качалке (200 об/мин) при температуре 28 градусов Цельсия в течение 72-96 часов. Мицелий отделяют центрифугованием. Процедуру получения биологически активного ультрафильтрата из фильтрата культуральной жидкости начинают с ее концентрирования при одновременном отделении низкомолекулярных веществ и белковых фракций при температуре 15-20 градусов Цельсия и давлении 760-800 мм рт.ст. Фильтрат культуральной жидкости помещают в ультрафильтрационную лабораторную установку с рабочей поверхностью 2 квадратных дециметра. Приемная емкость заполняется фильтратом. Ультрафильтрацию нативного раствора проводят под давлением 0,4±0,02 МПа. Для получения биологически активного ультрафильтрата в работе используют мембрану с низкой проницаемостью по протеазе. Полученный биологически активный ультрафильтрат хранят при температуре+1-+20 градусов Цельсия в присутствии стабилизатора.To obtain the claimed substance-ultrafiltrate, the strain Streptomyces lavendulae VKPM S-910 is used, which is grown on solid nutrient medium - on potato agar, and then on a fermentation nutrient medium of the following composition (g / l): corn flour - 20; peptone - 0.5; dry fodder yeast - 0.05; MgSO 4 · 7H2O - 0,4; gelatin - 0.5; tap water pH 6.4-6.8. Cultivation is carried out in Erlenmeyer flasks with a volume of 250 ml on a shaker (200 rpm) at a temperature of 28 degrees Celsius for 72-96 hours. The mycelium is separated by centrifugation. The procedure for obtaining biologically active ultrafiltrate from the filtrate of the culture fluid begins with its concentration while separating low molecular weight substances and protein fractions at a temperature of 15-20 degrees Celsius and a pressure of 760-800 mm Hg. The filtrate of the culture fluid is placed in an ultrafiltration laboratory unit with a working surface of 2 square decimeters. The receiving tank is filled with filtrate. Ultrafiltration of the native solution is carried out under a pressure of 0.4 ± 0.02 MPa. To obtain a biologically active ultrafiltrate, a membrane with a low protease permeability is used. The obtained biologically active ultrafiltrate is stored at a temperature of + 1- + 20 degrees Celsius in the presence of a stabilizer.
Субстанция для дерматологических лекарственных средств «Ультрализин» соответствует требованиям разработанных технических условий ТУ 9336-001-11684510-03, введенных в действие с 01.07.2003 года, с соблюдением санитарных норм и правил, действующих на предприятиях микробиологической промышленности Российской Федерации.The substance for dermatological medicines “Ultralizin” meets the requirements of the developed technical specifications TU 9336-001-11684510-03, effective from 07.07.2003, in compliance with sanitary standards and rules in force at the enterprises of the microbiological industry of the Russian Federation.
По своим физико-химическим характеристикам «Ультрализин» соответствует следующим показателям:According to its physical and chemical characteristics, Ultralizin corresponds to the following indicators:
- раствор имеет цвета от светло-коричневого до темно-коричневого;- the solution has colors from light brown to dark brown;
- обладает специфическим запахом;- has a specific smell;
- растворяется в воде, 95-процентном спирте, хлороформе;- soluble in water, 95 percent alcohol, chloroform;
- рН водного раствора составляет 5,0-7,0;- the pH of the aqueous solution is 5.0-7.0;
- коллагенолитическая активность составляет от 1800 до 2500 коллагенолитических единиц активности на 1 мл;- collagenolytic activity is from 1800 to 2500 collagenolytic units of activity per 1 ml;
- общая протеалитическая активность составляет от 150 до 200 протеолитических единиц на 1 мл;- total proteolytic activity is from 150 to 200 proteolytic units per 1 ml;
- нетоксичен, неаллергенен;- non-toxic, non-allergenic;
- по микробиологической чистоте соответствует требованиям Га XI, вып.2, стр.193.- according to microbiological purity, meets the requirements of Ha XI, issue 2, p. 193.
Коллагенолитическая активность определяется по методу Розена [4]. Протеолитическая активность определялась по Кунитцу [3].Collagenolytic activity is determined by the method of Rosen [4]. Proteolytic activity was determined according to Kunitz [3].
Определение коллагенолитической активности.Determination of collagenolytic activity.
За единицу коллагенолитической активности (КЕА) принимается такое количество фермента, при воздействии которого на коллаген выделяются продукты гидролиза, равноценные 1 мкг L-лицина в стандартных условиях опыта.A unit of collagenolytic activity (KEA) is such an amount of enzyme, upon exposure to which hydrolysis products equivalent to 1 μg of L-lycine under standard experimental conditions are released on collagen.
В 5 пробирок вместимостью по 20 мл вносят пипеткой по 2 мл суспензии коллагена в фосфатном буфере рН 7,4. В 1, 2 и 3 пробирки (опытные) прибавляют по 2 мл испытуемого раствора ультрализина (перед анализом содержимое ампулы или флакона осторожно взболтать). В пробирки 4 и 5 (контрольные) прибавляют по 2 мл воды. Все пробирки закрывают пробками и помещают в термостат при 37±0,5 градусов Цельсия на 18 часов. Охлаждают.In 5 test tubes with a capacity of 20 ml each, add a pipette of 2 ml of a suspension of collagen in a phosphate buffer pH 7.4. In 1, 2 and 3 test tubes (experimental) add 2 ml of the test solution of ultralizine (before analysis, carefully shake the contents of the ampoule or vial). In tubes 4 and 5 (control) add 2 ml of water. All tubes are closed with stoppers and placed in a thermostat at 37 ± 0.5 degrees Celsius for 18 hours. Cool.
Из каждой опытной и контрольной пробирки отбирают по 1 мл раствора, вносят в 5 конических пробирок вместимостью 10 мл и прибавляют по 1 мл двухпроцентного раствора нингедрина в ацетоне. Пробирки помещают на 10 минут в водяную баню при 50 градусах Цельсия. Охлаждают и после испарения ацетона (определяют по отсутствию запаха ацетона), доводят объем раствора водой до 10 мл.From each test and control tubes, 1 ml of solution is taken, introduced into 5 conical tubes with a capacity of 10 ml, and 1 ml of a 2% solution of ninhedrin in acetone is added. The tubes are placed for 10 minutes in a water bath at 50 degrees Celsius. It is cooled and after evaporation of acetone (determined by the absence of a smell of acetone), the volume of the solution is adjusted with water to 10 ml.
Определяют величины оптической плотности на спектрофотометре при длине волны 600 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют воду. По калибровочному графику находят значения концентрации L-лицина в опытных и контрольных пробирках, вычисляют средние арифметические величины. Из величины опытной концентрации вычитают величину контрольной. Эту величину используют для расчета активности ультрализина. Активность субстанции (Ак) в коллагенолитических единицах (КЕА) вычисляют по формуле:The absorbance values are determined on a spectrophotometer at a wavelength of 600 nm in cuvettes with a layer thickness of 10 mm. As a comparison solution, water is used. According to the calibration graph, the L-lycine concentration values are found in the experimental and control tubes, and arithmetic mean values are calculated. From the value of the experimental concentration, the value of the control is subtracted. This value is used to calculate the activity of ultralysin. The activity of the substance (Ak) in collagenolytic units (KEA) is calculated by the formula:
где а - количество L-лицина в мг, найденное по графику.where a is the amount of L-lycine in mg, found according to the schedule.
Определение протеолитической активности по КунитцуKunitz determination of proteolytic activity
Приготовление двухпроцентного раствора казеина: реактив А 0,2 М Na·H2PO4·H2O-27,8 г/л.Preparation of a two percent casein solution: reagent A 0.2 M Na · H 2 PO 4 · H 2 O-27.8 g / l.
Реактив Б: 0,2 М Na2HPO4·7H2О - 53,65 г/л. Взять 81 мл реактива Б.Reagent B: 0.2 M Na 2 HPO 4 · 7H 2 O - 53.65 g / l. Take 81 ml of reagent B.
К 4 г казеина прилить 81 мл реактива Б, выдержать 5 минут при комнатной температуре, перенести в кипящую водяную баню, остудить. Добавить 19 мл реактива А и 100 мл дистиллированной воды.Pour 81 ml of reagent B to 4 g of casein, hold for 5 minutes at room temperature, transfer to a boiling water bath, cool. Add 19 ml of reagent A and 100 ml of distilled water.
Опытные и контрольные пробирки, содержащие по 2 мл двухпроцентного казеина термостатируют 10 минут при температуре 30 градусов Цельсия. В контроль вносят по 2,5 мл трихлоруксусной кислоты (ТХУ). В опытные и контрольные пробирки вносят по 0,5 мл ультрафильтрата. Инкубируют 10 минут. Затем в опыт вносят по 2,5 мл ТХУ, через 30 секунд в каждую пробирку. Определяют оптическую плотность (ОП) ультрафильтрата при 280 нм. Полученный показатель умножают на разведение.Experimental and control tubes containing 2 ml of two percent casein are thermostated for 10 minutes at a temperature of 30 degrees Celsius. 2.5 ml of trichloroacetic acid (TCA) are added to the control. 0.5 ml of ultrafiltrate is added to the experimental and control tubes. Incubate for 10 minutes. Then, 2.5 ml of TCA are added to the experiment, after 30 seconds, into each tube. The optical density (OD) of the ultrafiltrate is determined at 280 nm. The resulting indicator is multiplied by dilution.
Ферментативная активность ультраконцентрата варьировала в следующих диапазонах:The enzymatic activity of the ultraconcentrate varied in the following ranges:
Пример 1Example 1
Ультраконцентрат имел следующие характеристики:The ultraconcentrate had the following characteristics:
Коллагенолитическая активность - 1800 КЕА/млCollagenolytic activity - 1800 KEA / ml
Протеалитическая активность - 120 ПЕ/мл.Protealitic activity - 120 PE / ml.
Пример 2Example 2
Коллагенолитическая активность - 2000 КЕА/мл,Collagenolytic activity - 2000 KEA / ml,
протеолитическая активность - 150 ПЕ/мл.proteolytic activity - 150 PE / ml.
Пример 3Example 3
Коллагенолитическая активность - 2500 КЕА/мл,Collagenolytic activity - 2500 KEA / ml,
протеолитическая активность - 200 ПЕ/мл.proteolytic activity - 200 PE / ml.
Изучение острой токсичности субстанции проводилось на белых мышах (самцы и самки с массой тела 19-21 г).The study of acute toxicity of the substance was carried out on white mice (males and females with a body weight of 19-21 g).
Эксперименты выполнены в соответствии с "Методическими рекомендациями по изучению общетоксического действия фармакологических средств", 1997 [5].The experiments were carried out in accordance with the "Methodological recommendations for the study of the general toxic effects of pharmacological agents", 1997 [5].
«Ультрализин» вводили мышам внутривенно, однократно, в объеме 0,2-0,5 мл, со скоростью 0,1 мл/с.Ultralizin was administered to mice intravenously, once, in a volume of 0.2-0.5 ml, at a rate of 0.1 ml / s.
Длительность наблюдения за мышами составляла 10-15 дней. В ходе эксперимента следили за поведением, внешним видом, двигательной активностью, реакцией животных на внешние раздражители. В случаях летального исхода фиксировались клиническая картина и проводилось вскрытие погибших мышей.The duration of observation of mice was 10-15 days. During the experiment, we monitored the behavior, appearance, motor activity, and the reaction of animals to external stimuli. In cases of death, the clinical picture was recorded and an autopsy was performed of dead mice.
При внутривенном введении препарата мышам в дозах до 3500-4000 ЕД/кг признаков интоксикации не наблюдалось. Животные оставались подвижными, нормально реагировали на окружающую среду. При дальнейшем увеличении дозы введенного вещества отмечалась гибель отдельных животных. Были установлены среднесмертельные дозы (LD50) для мышей при однократном внутривенном введении субстанции: LD50=12400±2500 ЕД/кг.With the intravenous administration of the drug to mice in doses up to 3500-4000 U / kg, no signs of intoxication were observed. Animals remained motile, reacted normally to the environment. With a further increase in the dose of the administered substance, the death of individual animals was noted. Medium lethal doses (LD 50 ) were established for mice with a single intravenous administration of a substance: LD 50 = 12400 ± 2500 U / kg.
Максимально переносимая доза вещества при внутривенном введении мышам составляла ≈4500 ЕД/кг. В этих случаях при наблюдении за животными в течение 2 недель гибели не отмечено.The maximum tolerated dose of the substance upon intravenous administration to mice was ≈4500 U / kg. In these cases, when observing animals for 2 weeks, death was not observed.
Были также проведены исследования на микробиологическую чистоту и пирогенность заявленной композиции.Studies have also been conducted on the microbiological purity and pyrogenicity of the claimed composition.
Были проведены исследования на наличие пирогенных примесей в препарате. Испытание проводили на кроликах породы Шиншилла, содержащихся на стандартном рационе вивария.Studies have been conducted for the presence of pyrogenic impurities in the drug. The test was carried out on chinchilla rabbits, kept on a standard diet of vivarium.
Так как данный препарат применяется только наружно в качестве мази, установить четкую терапевтическую дозу сложно. Поэтому для подбора тест-дозы для испытания на пирогенность мы использовали дозу на коллагеназный препарат - от 50 ЕД/кг.Since this drug is used only externally as an ointment, it is difficult to establish a clear therapeutic dose. Therefore, to select a test dose for the pyrogenicity test, we used a dose for a collagenase preparation - from 50 units / kg.
Установлено, что этот препарат тест-доза выше 5000 ЕД на кг массы животного - пирогенен.It was established that this drug test dose above 5000 IU per kg of animal weight - pyrogenic.
Отмечена тенденция снижения пирогенной реакции с уменьшением вводимого объема.A tendency toward a decrease in the pyrogenic reaction with a decrease in the input volume was noted.
Установление четкой терапевтической дозы позволит более надежно подобрать тест-дозу на пирогенность. Проведение дополнительных испытаний с новыми образцами билогически активного ультрафильтрата, в минимальном объеме разбавителя, в обоснованной тест-дозе, возможно, позволит получить результаты, свидетельствующие об отсутствии пирогенности.The establishment of a clear therapeutic dose will make it possible to more reliably select a test dose for pyrogenicity. Conducting additional tests with new samples of biologically active ultrafiltrate, in a minimum diluent volume, in a reasonable test dose, will probably allow to obtain results indicating the absence of pyrogenicity.
Таким образом, биологически активный ультрафильтрат на основе коллагеназы, выделенного из штамма Streptomyces lavendulae ВКПМ S-910 с коллагенолитической активностью 1800-2500 КЕА/мл и протеалитической активностью 120-200 ПЕ/мл, является высокоэффективным, нетоксичным, неаллергенным средством. Имея в своем составе коллагеназу и усиливающую ее действие протеазу, предлагаемый биологически активный ультрафильтрат может быть использован в составе различных ранозаживляющих препаратов и дерматологии.Thus, a biologically active ultrafiltrate based on collagenase isolated from a strain of Streptomyces lavendulae VKPM S-910 with a collagenolytic activity of 1800-2500 KEA / ml and a proteolytic activity of 120-200 PE / ml is a highly effective, non-toxic, non-allergenic agent. Having in its composition collagenase and a protease enhancing its action, the proposed biologically active ultrafiltrate can be used in various wound healing preparations and dermatology.
Источники информацииInformation sources
1. Демина Н.С., Лысенко С.В. Коллагенолитические ферменты, синтезируемые микроорганизмами. Журнал «Микробиология», 1996 год, том 65, №3, стр.293-304.1. Demina N.S., Lysenko S.V. Collagenolytic enzymes synthesized by microorganisms. Journal of Microbiology, 1996, Volume 65, No. 3, pp. 293-304.
2. Демина Н.С., Лысенко С.В. Фармацевтическая композиция на основе коллагеназы микробного происхождения. Патент РФ №2075219, публ. 03.10.1997 г.2. Demina N.S., Lysenko S.V. Pharmaceutical composition based on collagenase of microbial origin. RF patent No. 2075219, publ. 10/03/1997
3. Kunits J./ The method of defection proteolytic enzyme. J. Gen. Physiol, 1947, v.30, №4 р.291-310.3. Kunits J. / The method of defection proteolytic enzyme. J. Gen. Physiol, 1947, v. 30, No. 4 p. 291-310.
4. Rozen H. Amodified ninhydryn colorimetric analysis for amino acids. Arch. Biohem. Biophys., 1957, v.67, p 10-15.4. Rozen H. Amodified ninhydryn colorimetric analysis for amino acids. Arch. Biohem. Biophys., 1957, v. 67, p 10-15.
5. "Методическими рекомендациями по изучению общетоксического действия фармакологических средств", 1997 год.5. "Guidelines for the study of the general toxic effects of pharmacological agents", 1997.
Claims (1)
Priority Applications (10)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007122707/13A RU2340371C1 (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | Substance for dermatological medical products on basis of collagenase of microbic parentage ultralysine |
PCT/RU2007/000581 WO2009002209A1 (en) | 2007-06-19 | 2007-10-22 | Substance for dermatological medicinal agents based on microbiotic collagenase 'ultra-lisin' |
BRPI0813442A BRPI0813442A8 (en) | 2007-06-19 | 2008-05-15 | METHOD FOR PRODUCTION OF POLYCRYSTALLINE SILICON FROM A SOLUTION OF HYDROSILICOFLUORIDIC ACID, AND INSTALLATION FOR PRODUCTION OF POLYCRYSTALLINE SILICON FROM A SOLUTION OF FLUOROSILICIC ACID IN THE FORM OF A POWDER WITH SPHERICAL-SHAPED PARTICLES |
EA201000036A EA015477B1 (en) | 2007-06-19 | 2008-08-15 | Method for producing polycrystalline silicon from a hydrosilicofluoric acid solution and a plant for producing polycrystalline silicon |
PCT/RU2008/000523 WO2009005412A2 (en) | 2007-06-19 | 2008-08-15 | Method for producing polycrystalline silicon |
CA002684973A CA2684973A1 (en) | 2007-06-19 | 2008-08-15 | Method for producing polycrystalline silicon |
US12/665,689 US20100221171A1 (en) | 2007-06-19 | 2008-08-15 | Method for producing polycrystalline silicon |
TNP2009000523A TN2009000523A1 (en) | 2007-06-19 | 2009-12-11 | Method for producing polycrystalline silicon from hudrosiliconfluoric acid solution and a plant for the producing silicon tetrafluoride and polycrystalline silicon |
IL202815A IL202815A0 (en) | 2007-06-19 | 2009-12-17 | Method for producing polycrystalline silicon from hudrosiliconfluoric acid solution and a plant for the producing silicon tetrafluoride and polycrystalline silicon |
MA32492A MA31511B1 (en) | 2007-06-19 | 2010-01-07 | PROCESS FOR PRODUCING POLYCRYSTALLINE SILICON FROM FLUOROSILICIC ACID SOLUTION AND MANUFACTURING PLANT FOR SILICON TETRAFLUORIDE AND POLYCRYSTALLINE SILICON |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007122707/13A RU2340371C1 (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | Substance for dermatological medical products on basis of collagenase of microbic parentage ultralysine |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2340371C1 true RU2340371C1 (en) | 2008-12-10 |
Family
ID=40185854
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007122707/13A RU2340371C1 (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | Substance for dermatological medical products on basis of collagenase of microbic parentage ultralysine |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2340371C1 (en) |
WO (1) | WO2009002209A1 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2484811C2 (en) * | 2011-08-15 | 2013-06-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Межотраслевая компания по науке и технологиям ООО "МКНТ" | Enzymatic wound healing medication |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1747043A4 (en) | 2004-05-04 | 2008-04-23 | Univ Rochester | Implantable bio-electro-physiologic interface matrix |
EP1744809A4 (en) | 2004-05-04 | 2008-05-07 | Univ Rochester | Leadless implantable intravascular electrophysiologic device for neurologic/cardiovascular sensing and stimulation |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2075219C1 (en) * | 1995-03-23 | 1997-03-10 | Нина Сергеевна Демина | COLLAGENASE |
US5989888A (en) * | 1996-01-24 | 1999-11-23 | Roche Diagnostics Corporation | Purified mixture of collagenase I, collagenase II and two other proteases |
RU2180002C2 (en) * | 1999-08-16 | 2002-02-27 | Пермское научно-производственное объединение "Биомед" | Method of collagenase producing |
RU2166950C1 (en) * | 2000-06-30 | 2001-05-20 | Демина Нина Сергеевна | Bacterial collagenase-base pharmaceutical composition |
RU2005128329A (en) * | 2005-09-13 | 2007-03-27 | Открытое акционерное общество "Система-Венчур" (RU) | Enzyme composition "Ultralizine" |
-
2007
- 2007-06-19 RU RU2007122707/13A patent/RU2340371C1/en not_active IP Right Cessation
- 2007-10-22 WO PCT/RU2007/000581 patent/WO2009002209A1/en active Application Filing
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2484811C2 (en) * | 2011-08-15 | 2013-06-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Межотраслевая компания по науке и технологиям ООО "МКНТ" | Enzymatic wound healing medication |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2009002209A1 (en) | 2008-12-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Dobell et al. | On the cultivation of Entamoeba histolytica and some other entozoic amoebae | |
Macfarlane et al. | The biochemistry of bacterial toxins: The lecithinase activity of Cl. welchii toxins | |
Wadström et al. | Studies on extracellular proteins from Staphylococcus aureus: VII. Studies on β-haemolysin | |
RU2663136C2 (en) | Process for preparing highly pure neurotoxic component of botulinum toxin and uses thereof | |
US10499655B2 (en) | Reagents and methods for inhibiting or disrupting biofilm | |
RU2340371C1 (en) | Substance for dermatological medical products on basis of collagenase of microbic parentage ultralysine | |
Zerda et al. | Schistosoma mansoni: expression and role of cysteine proteinases in developing schistosomula | |
Goes et al. | Interaction of myxobacteria-derived outer membrane vesicles with biofilms: Antiadhesive and antibacterial effects | |
KR20070024718A (en) | Use of human lysozyme in preparation of medicine for treating acne | |
Johnson et al. | Isolation of Trichomonas vaginalis with penicillin | |
Dienst et al. | Cultural studies on the" Donovan bodies" of granuloma inguinale | |
RU2129375C1 (en) | Biopreparation liquid "phytosporin" for plants protection against sicknesses | |
US20200215169A1 (en) | Antibacterial methods and related kits | |
RU2403283C2 (en) | Staphylococcus epidermidis bvm-1987 strain - producer of staphylolytic enzymic complex | |
Bamburg et al. | Progress in Molecular and Subcellular Biology | |
US2601350A (en) | Hydrolysis of beta lactam linkage by penicillinase | |
RU2827845C1 (en) | Elective nutrient medium for pseudomonas aeruginosa recovery | |
Smith | Bacteria with their coats off: spheroplasts, protoplasts and L-forms | |
RU2285038C2 (en) | Method for preparing proteolytic enzyme preparation and proteolytic enzyme preparation | |
Todosiichuk et al. | BIOTECHNOLOGICAL ASPECTS OF THE DEVELOPMENT OF A LIQUID FORMULATION OF MULTIFUNCTIONAL ENZYBIOTIC ANTISEPTIC | |
Ryazanova et al. | Effect of the proteolytic enzymes of Bacillus licheniformis and the lysoamidase of Lysobacter sp. XL1 on Proteus vulgaris and Proteus mirabilis cells | |
Dziekońska-Rynko et al. | Activity of selected hydrolases in excretion-secretion products and homogenates from L 3 and L 4 larvae of Anisakis simplex (Nematoda: Anisakidae) parasitising herring | |
Lenchenko et al. | International Journal of Veterinary Science | |
Wilson et al. | Structure and variability of mammalian peroxisomal membrane proteins | |
RU2117046C1 (en) | Finn-ii-base medium nutrient medium for the accelerated isolation of tuberculosis pathogen from extrapulmonary localization foci |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
QB4A | Licence on use of patent |
Effective date: 20090216 |
|
RH4A | Copy of patent granted that was duplicated for the russian federation |
Effective date: 20100715 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090620 |