RU2329507C1 - Method of acute bacterial enteric infections express-diagnostics - Google Patents
Method of acute bacterial enteric infections express-diagnostics Download PDFInfo
- Publication number
- RU2329507C1 RU2329507C1 RU2007100832/15A RU2007100832A RU2329507C1 RU 2329507 C1 RU2329507 C1 RU 2329507C1 RU 2007100832/15 A RU2007100832/15 A RU 2007100832/15A RU 2007100832 A RU2007100832 A RU 2007100832A RU 2329507 C1 RU2329507 C1 RU 2329507C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- minutes
- diagnostics
- incubated
- acute
- poly
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Данное изобретение относится к области медицинской диагностики, а именно к выявлению бактериальных инфекцийThis invention relates to the field of medical diagnosis, namely the detection of bacterial infections
Острые кишечные инфекции (ОКИ) широко распространены среди всех возрастных групп, при этом занимают значительное место в структуре детской смертности. ОКИ - это группа заболеваний различной этиологии (дизентерия, сальмонеллезы, брюшной тиф, кишечная коли-инфекция и др.). В США ежегодно регистрируется 6,5 млн случаев пищевых инфекций и свыше 9000 летальных исходов. Среди бактериологически расшифрованных случаев на первом месте был сальмонеллез, далее шигеллез (Г.И.Осипова, 2002, Kilgore P.E., 1995). Эти заболевания бактериальной этиологии объединяют сходный патогенез (бактериемия/антигеемия, воздействие токсинов, нарушение обменных процессов) и похожие клинические проявления - кишечный синдром, эксикоз, токсикоз (Т.Е.Ивановская, Л.В.Леонова, 1989), что затрудняет их клиническую дифференциацию. Для подтверждения диагноза используют бактериологические методы исследования: посевы кала, крови, рвотных масс, а также серологические методы для выявления в динамике уровня специфических антител к бактериям (В.В. Иванова, 2002). Ввиду огромного эпидемиологического значения кишечных инфекций особую значимость приобретают ускоренные методы диагностики для назначения адекватной этиотропной и патогенетической терапии.Acute intestinal infections (acute intestinal infections) are widespread among all age groups, while occupying a significant place in the structure of infant mortality. AEI is a group of diseases of various etiologies (dysentery, salmonellosis, typhoid fever, intestinal coli infection, etc.). In the United States, 6.5 million cases of foodborne infections and over 9,000 deaths are reported annually. Among bacteriologically deciphered cases, salmonellosis followed by shigellosis (G.I.Osipova, 2002, Kilgore P.E., 1995) came first. These diseases of bacterial etiology combine a similar pathogenesis (bacteremia / antigemia, exposure to toxins, metabolic disorders) and similar clinical manifestations - intestinal syndrome, exicosis, toxicosis (T.E. Ivanovskaya, L.V. Leonova, 1989), which complicates their clinical differentiation. To confirm the diagnosis, bacteriological research methods are used: stool, blood, vomit cultures, as well as serological methods to detect the dynamics of the level of specific antibodies to bacteria (V.V. Ivanova, 2002). Due to the enormous epidemiological significance of intestinal infections, accelerated diagnostic methods for the appointment of adequate etiotropic and pathogenetic therapy are of particular importance.
Известным способом выявления бактериальных инфекций является проведение реакции непрямой гемагглютинации РНГА.A known method for detecting bacterial infections is the reaction of indirect hemagglutination of RNGA.
1. В 10 лунок ряда вносят по 0,5 мл 9%-ного раствора хлорида натрия.1. In 10 holes of a row make 0.5 ml of a 9% solution of sodium chloride.
2. В 1-ю лунку ряда вносят 0,5 мл исследуемой сыворотки, разведенной 1:25, и делают серию двукратных разведений от 1:50 до 1:6400 путем переноса из лунки в лунку 0,5 мл и перемешивания их не менее 3-4 раз.2. 0.5 ml of the test serum diluted 1:25 is added to the 1st well of the series and a series of double dilutions from 1:50 to 1: 6400 is made by transferring 0.5 ml from the well to the well and mixing them for at least 3 -4 times.
3. В каждую лунку добавляют по 0,2 мл 1%-ной рабочей взвеси диагностикума. Одновременно ставят контроли.3. To each well add 0.2 ml of a 1% working suspension of the diagnosticum. At the same time they put in control.
4. Пластины слегка встряхивают и инкубируют при температуре 37°С 1,5-2 ч.4. The plates are shaken slightly and incubated at a temperature of 37 ° C for 1.5-2 hours
5. Инкубация при комнатной температуре 14-18 ч.5. Incubation at room temperature for 14-18 hours
6. Оценка результатов6. Evaluation of the results
Этот метод позволяет получить хорошие результаты. Однако существуют обстоятельства, снижающие его эффективность: он занимает много времени (24 часа), трудоемок и для получения результатов требуется дополнительное оборудование (микропланшеты и спектрофотометр), препараты невозможно длительно хранить и фотографировать. В ряде случаев определение серологических маркеров малоэффективно: у новорожденных вследствие несформировавшейся иммунной системы, при угнетении иммунной системы и в начальной стадии болезни, так как антитела образуются отсроченно.This method allows you to get good results. However, there are circumstances that reduce its effectiveness: it takes a lot of time (24 hours), is time-consuming and requires additional equipment (microplates and a spectrophotometer) to obtain results, it is impossible to store and photograph the preparations for a long time. In some cases, the determination of serological markers is ineffective: in newborns due to an unformed immune system, with inhibition of the immune system and in the initial stage of the disease, since antibodies are formed delayed.
Наиболее близким к предлагаемому нами способу является "Способ диагностики гемофильной инфекции в гистологических препаратах" патент на изобретение №21932004 от 20.11.02, Р.А.Насыров, А.С.Кветная, М.В.Маньков.Closest to our proposed method is the "Method for the diagnosis of hemophilic infection in histological preparations" patent for invention No. 21932004 from 11/20/02, R. A. Nasyrov, A. S. Kvetnaya, M. V. Mankov.
1. Гистологические парафиновые срезы тканей депарафинизируют в трех порциях ксилола, по 15 минут в каждой, при температуре 60°С.1. Histological paraffin sections of tissues are dewaxed in three portions of xylene, 15 minutes each, at a temperature of 60 ° C.
2. Промывают в фосфатно-солевом буфере (рН 7.2-7.4) в течение 3-4 минут.2. Wash in phosphate-buffered saline (pH 7.2-7.4) for 3-4 minutes.
3. Обрабатывают 0,1% раствором трипсина в 0,1% CaCl2 в течение 20 минут.3. Treat with a 0.1% solution of trypsin in 0.1% CaCl 2 for 20 minutes.
4. Обрабатывают 0,03% перекисью водорода в течение 20 минут.4. Process 0.03% hydrogen peroxide for 20 minutes.
5. Промывают в двух порциях фосфатно-солевого буфера (рН 7.2), по 5 минут в каждой.5. Wash in two portions of phosphate-buffered saline (pH 7.2), 5 minutes each.
6. Инкубируют в 0,3% ТритонХ-100 при температуре 37°С в течение 15 минут.6. Incubate in 0.3% TritonX-100 at a temperature of 37 ° C for 15 minutes.
7. Наносят поликлональные кроличьи антитела к рибозилрибитолфосфату. Инкубируют с поликлональными антителами при температуре 37°С в течение 45 минут.7. Apply polyclonal rabbit antibodies to ribosylribitolphosphate. Incubate with polyclonal antibodies at 37 ° C for 45 minutes.
8. Промывают в воде в течение 5 минут.8. Washed in water for 5 minutes.
9. Промывают в двух порциях фосфатно-солевого буфера (рН 7.2), по 5 минут в каждой.9. Wash in two portions of phosphate-buffered saline (pH 7.2), 5 minutes each.
10. Наносят антивидовой конъюгат DAKO En Vision+System, HRP и инкубируют в течение 45 мин в темной камере при комнатной температуре.10. Apply DAKO En Vision + System, HRP anti-species conjugate and incubate for 45 minutes in a dark chamber at room temperature.
11. Промывают в двух порциях фосфатно-солевого буфера (рН 7.2), по 5 минут в каждой.11. Wash in two portions of phosphate-buffered saline (pH 7.2), 5 minutes each.
12. Обрабатывают материал в водном растворе, содержащем 0,05% 3,3-диаминобензидин тетрахлорида (ДАБ) и 0,025% перекиси водорода, в течение 3 минут.12. The material is treated in an aqueous solution containing 0.05% 3,3-diaminobenzidine tetrachloride (DAB) and 0.025% hydrogen peroxide for 3 minutes.
13. Слабо докрашивают гематоксилином.13. Weakly stain with hematoxylin.
14. Микроскопия.14. Microscopy.
Этот метод позволил авторам получить хорошие результаты. Однако недостатком данного метода является то, что он травматичен, так как материалом для исследования служат биоптаты. Проведение всех этапов способа достаточно длительно по времени. Взятие биоптата, его фиксация, заливка в парафин, приготовление гистологических срезов занимают не менее 6-7 часов и более 5 часов уходит на проведение иммунопероксидазной реакции. За счет высокого фонового окрашивания при работе с парафиновыми срезами снижается точность результата.This method allowed the authors to get good results. However, the disadvantage of this method is that it is traumatic, since biopsy samples serve as the material for the study. Carrying out all the steps of the method is quite long in time. Taking the biopsy specimen, fixing it, pouring it into paraffin, preparing histological sections takes at least 6-7 hours and more than 5 hours is spent on the immunoperoxidase reaction. Due to the high background staining when working with paraffin sections, the accuracy of the result is reduced.
Устранению указанных недостатков может помочь предлагаемый авторами способ диагностики ОКИ, основанный на выявлении антигенов возбудителей.The elimination of these disadvantages can be helped by the authors proposed method for the diagnosis of acute intestinal infections, based on the identification of pathogen antigens.
Технический результат изобретения состоит в сокращении сроков и в повышении точности диагностики. Этот результат достигается тем, что антиген возбудителя ОКИ определяют непрямым иммунопероксидазным методом и согласно изобретению клетки крови (лимфоцитарную взвесь в объеме 0,05 мл), полученные путем центрифугирования, наносят на предметное стекло (мазок), высушивают при комнатной температуре, фиксируют в чистом ацетоне - 3-5 мин, затем обрабатывают в 3% Н2О2 20 минут, инкубируют с нормальной блокирующей сывороткой (10 минут), инкубируют с поли- или моноклональными антителами к искомым антигенам при температуре 37°С в течение 45 минут, инкубируют с полимерной системой детекции (Super Enhacer в течение 20 мин в темной камере при комнатной температуре, инкубируют с SS Label в течение 30 мин в темной камере при комнатной температуре), далее обрабатывают 3,3-диаминобензидин тетрахлоридом (ДАБ) и наличие коричневых гранул в лимфоцитах и моноцитах свидетельствует о выявлении искомого антигена возбудителя (диагностике инфекции) для своевременного назначения этиотропной и патогенетической терапии. Способ хорошо воспроизводим, что свидетельствует о его надежности.The technical result of the invention is to reduce the time and increase the accuracy of diagnosis. This result is achieved in that the antigen of the OCI pathogen is determined by the indirect immunoperoxidase method and, according to the invention, blood cells (lymphocyte suspension in a volume of 0.05 ml) obtained by centrifugation are applied to a glass slide (smear), dried at room temperature, fixed in pure acetone - 3-5 min, and then treated with 3% H 2 O 2 for 20 minutes, incubated with normal blocking serum (10 minutes), incubated with poly- or monoclonal antibodies to desired antigens at 37 ° C for 45 minutes, incubating t with a polymer detection system (Super Enhacer for 20 min in a dark chamber at room temperature, incubated with SS Label for 30 min in a dark chamber at room temperature), then 3,3-diaminobenzidine is treated with tetrachloride (DBA) and the presence of brown granules in lymphocytes and monocytes indicates the identification of the desired pathogen antigen (diagnosis of infection) for the timely appointment of etiotropic and pathogenetic therapy. The method is well reproducible, which indicates its reliability.
Стандартная схема непрямого иммунопероксидазного метода описана Дж.Полак, С.Ван-Норден. Введение в иммуноцитохимию. М.: Мецицина, 1986 г.The standard scheme of the indirect immunoperoxidase method is described by J. Polak, S. Van-Norden. Introduction to immunocytochemistry. M .: Metsitsina, 1986
1 - промывка срезов в буфере;1 - washing sections in the buffer;
2 - обработка 0,03% раствором перекиси водорода;2 - treatment with a 0.03% hydrogen peroxide solution;
3 - промывка в буфере;3 - washing in buffer;
4 - нанесение на срез первых специфических антител;4 - application to the slice of the first specific antibodies;
5 - промывка в буфере;5 - washing in buffer;
6 - нанесение вторых антител, связанных с пероксидазой;6 - application of second antibodies associated with peroxidase;
7 - промывка в буфере;7 - washing in buffer;
8 - обработка 0,03% раствором диаминобензидина (ДАБ);8 - treatment with a 0.03% solution of diaminobenzidine (DAB);
9 - докраска гематоксилином;9 - dyeing with hematoxylin;
10 - заключение в бальзам. Микроскопия.10 - the conclusion of the balm. Microscopy.
Но как показывают данные литературы и собственный опыт, приведенная схема лишь в общем виде отражает ход постановки методики. В зависимости от размеров, структуры и природы выявляемого антигена необходима детальная разработка всех этапов, начиная с фиксации и до нанесения диаминобензидина.But as the literature data and our own experience show, the above scheme only in general terms reflects the progress of the methodology. Depending on the size, structure and nature of the detected antigen, a detailed development of all stages is necessary, from fixing to applying diaminobenzidine.
Предложенный авторами метод отличается тем, что для выявления антигенов возбудителей ОКИ в качестве объекта исследования была впервые использована лимфоцитарная взвесь.The method proposed by the authors is characterized in that lymphocyte suspension was used for the first time to identify antigens of the causative agents of acute intestinal infections as an object of study.
Опытным путем было выявлено, что необходимо 0,05 мл лимфоцитарной взвеси как минимально достаточного количества для приготовления мазка, проведения иммуноцитогистохимической окраски и адекватной оценки результата.Empirically, it was found that 0.05 ml of lymphocytic suspension is required as the minimum sufficient amount for smear preparation, immunocytochemistry and adequate assessment of the result.
В рамках предлагаемого способа впервые предложена обработка мазков более концентрированным (3%) раствором перекиси водорода, способствующая более полному и качественному блокированию эндогенной пероксидазы, что особенно важно при использовании лимфоцитарной взвеси.In the framework of the proposed method, the first treatment of smears with a more concentrated (3%) hydrogen peroxide solution is proposed, which contributes to a more complete and high-quality blocking of endogenous peroxidase, which is especially important when using lymphocytic suspension.
Одна из сложных проблем - это возможное наличие в сыворотке неспецифических (фоновых) антител. Для устранения неспецифической реакции предложена обработка нормальной (блокирующей) сывороткой перед нанесением первых антител.One of the difficult problems is the possible presence of non-specific (background) antibodies in serum. To eliminate the non-specific reaction, treatment with normal (blocking) serum is proposed before applying the first antibodies.
Использование в качестве системы детекции полимерного комплекса Super Sensitiv Polimer-HRP Detection System производства BioGenex, как более чувствительного, позволило использовать специфические антитела в малых концентрациях и свести до минимума фон неспецифического окрашивания, чего нельзя было достичь при применении обычных систем детекции. Кроме вышеуказанного, эта система детекции не содержит авидин и биотин, следовательно, неспецифическое окрашивание при взаимодействии авидина с эндогенным биотином исключается. Кровь является сложным и чувствительным объектом при проведении иммуногистоцитохимических исследований. В связи с этим предложенный новый способ диагностики ОКИ, основанный на выявлении антигенов возбудителей в клетках крови, требует выполнения комплекса разработанных методических приемов. Невыполнение последних не дает объективных результатов или искажает конечный результат исследований, не позволяет провести соответствующую интерпретацию полученных данных.The use of the Super Sensitiv Polimer-HRP Detection System polymer complex produced by BioGenex as a more sensitive polymer system made it possible to use specific antibodies in low concentrations and to minimize the background of non-specific staining, which could not be achieved with conventional detection systems. In addition to the above, this detection system does not contain avidin and biotin, therefore, nonspecific staining during the interaction of avidin with endogenous biotin is excluded. Blood is a complex and sensitive object during immunohistocytochemical studies. In this regard, the proposed new method for the diagnosis of acute intestinal infections, based on the identification of pathogen antigens in blood cells, requires a set of developed methodological techniques. Failure to comply with the latter does not give objective results or distorts the final result of research, and does not allow an appropriate interpretation of the data obtained.
Предложенный способ осуществляется следующим образом.The proposed method is as follows.
1. Лимфоциты и моноциты, полученные путем центрифугирования периферической крови, наносят на предметное стекло (мазок).1. Lymphocytes and monocytes obtained by centrifugation of peripheral blood are applied to a glass slide (smear).
2. Высушивают при комнатной температуре.2. Dry at room temperature.
3. Фиксация в чистом ацетоне 3-5 мин.3. Fixation in pure acetone 3-5 minutes.
4. Промывают в фосфатно-солевом буфере (рН 7.4) в течение 3-4 минут.4. Wash in phosphate-buffered saline (pH 7.4) for 3-4 minutes.
5. Обработка в 3% Н2О2 20 минут.5. Processing in 3% H 2 O 2 20 minutes.
6. Промывка в двух порциях фосфатно-солевого буфера (рН 7.4), по 5 минут в каждой.6. Rinsing in two portions of phosphate-buffered saline (pH 7.4), 5 minutes each.
7. Инкубация в нормальной блокирующей сыворотке (Power Block) 10 минут.7. Incubation in normal blocking serum (Power Block) 10 minutes.
8. Нанесение на мазки поли- или моноклональных антител к искомым антигенам. Инкубация с данными антителами при температуре 37°С в течение 45 минут.8. Application of smears of poly - or monoclonal antibodies to the desired antigens. Incubation with these antibodies at 37 ° C for 45 minutes.
9. Промывка в воде в течение 5 минут.9. Rinse in water for 5 minutes.
10. Промывка в двух порциях фосфатно-солевого буфера (рН 7.4), по 5 минут в каждой.10. Rinse in two portions of phosphate-buffered saline (pH 7.4), 5 minutes each.
11. Нанесение на мазки Super Enhacer. Инкубация в течение 20 мин в темной камере при комнатной температуре.11. Application on smears Super Enhacer. Incubation for 20 min in a dark chamber at room temperature.
12. Промывка в двух порциях фосфатно-солевого буфера (рН 7.4), по 5 минут в каждой.12. Washing in two portions of phosphate-buffered saline (pH 7.4), 5 minutes each.
13. Нанесение на мазки SS Label. Инкубация в течение 30 мин в темной камере при комнатной температуре.13. Application on smears SS Label. Incubation for 30 min in a dark chamber at room temperature.
14. Обработка материала в водном растворе, содержащем 0,05% 3,3-диаминобензидин тетрахлорида (ДАБ) и 0,025% перекиси водорода, в течение 3 минут.14. Processing the material in an aqueous solution containing 0.05% 3,3-diaminobenzidine tetrachloride (DAB) and 0.025% hydrogen peroxide for 3 minutes.
15. Слабая докраска гематоксилином.15. Weak coloring with hematoxylin.
16. Микроскопия.16. Microscopy.
Микроскопию окрашенных препаратов проводят в обычном микроскопе. Продукт реакции при исследовании лимфоцитов и моноцитов, содержащих искомый антиген, выявляется в виде коричневых гранул внутриклеточно и на клеточной оболочке. При оценке данных микроскопического исследования важно учитывать возникновение артефициальных изменений, имитирующих положительную окраску. Чаще всего - это клеточные артефакты, выявляемые по краю мазка. В этом случае необходима оценка реакции на соседних участках.Microscopy of stained preparations is carried out in a conventional microscope. The reaction product in the study of lymphocytes and monocytes containing the desired antigen is detected in the form of brown granules intracellularly and on the cell membrane. When evaluating microscopic findings, it is important to consider the occurrence of artifacts that mimic a positive coloration. Most often, these are cellular artifacts that are detected along the edge of the smear. In this case, an assessment of the reaction in neighboring areas is necessary.
Необходимые контроли для используемых антителNecessary controls for antibodies used
Для получения достоверных результатов и исключения возможности неспецифических реакций обязательным условием является проведение контролей на качество реактивов и специфичность антисыворотки.To obtain reliable results and to exclude the possibility of nonspecific reactions, a prerequisite is to carry out controls on the quality of the reagents and the specificity of the antiserum.
1) Для проведения контроля специфичности антисыворотки в качестве первого слоя наносят неиммунную сыворотку или буфер (результаты должны быть отрицательными).1) To control the specificity of the antiserum, a non-immune serum or buffer is applied as the first layer (the results must be negative).
2) Неспецифичность сыворотки устраняют посредством максимального разведения высококонцентрированной сыворотки и укорочения времени инкубации. Описанный способ подкреплен примерами конкретного выполнения.2) Serum non-specificity is eliminated by maximally diluting highly concentrated serum and shortening the incubation time. The described method is supported by examples of specific performance.
Было проведено исследование материала 20 больных острой кишечной инфекцией в первые 3-е суток от начала заболевания, у 8 из них была выявлена экспрессия комплексного антигена Salmonella, у 2-х Sh.Sonnei, у 5 Sh. Flexneri как моноинфекция, у 2-х определялись антигены Sh. Flexneri и Salmonella, у 2-х Sh. Sonnei и Salmonella и у одного Sh. Flexneri и Sh. Sonnei. Полученные результаты полностью совпадали с данными серологического исследования и клинических проявлений. Во всех случаях результаты исследования на выявление антигенов возбудителей ОКИ были получены через 4 часа от момента поступления материалаA study of the material of 20 patients with acute intestinal infection in the first 3 days from the onset of the disease was carried out, in 8 of them the expression of the Salmonella complex antigen was detected, in 2 Sh. Sonnei, in 5 Sh. Flexneri as a monoinfection; in 2, Sh antigens were determined. Flexneri and Salmonella, in 2 Sh. Sonnei and Salmonella and in one Sh. Flexneri and Sh. Sonnei. The results obtained completely coincided with the data of serological studies and clinical manifestations. In all cases, the results of a study to identify antigens of the causative agents of acute intestinal infections were obtained after 4 hours from the moment of receipt of the material
В качестве примера приводим микрофотографию мазка лимфоцитарной взвеси с четко определяемой экспрессией комплексного антигена Salmonella в лимфоцитах и моноцитах у больного Звягинцева, 4 лет, № истории болезни 5650, ФГУ НИИДИ Росздрава, г.Санкт Петербург от 12.10.2006 г., с выраженными проявлениями острой кишечной инфекции (фиг.1).As an example, we give a micrograph of a smear of lymphocytic suspension with clearly defined expression of the Salmonella complex antigen in lymphocytes and monocytes in a patient Zvyagintsev, 4 years old, case history No. 5650, Federal State Research Institute for Nuclear Research Roszdrav, St. Petersburg dated October 12, 2006, with severe manifestations of acute intestinal infection (figure 1).
Микрофотографии мазка лимфоцитарной взвеси с четко определяемой экспрессией антигена Sh. Flexneri в лимфоцитах и моноцитах больного Пликайс Д., 2 лет, № истории болезни 3347, ДИБ № 3, г.Санкт Петербург от 03.11.2006 г., с клиникой острой кишечной инфекции (фиг.2).Micrographs of a smear of lymphocyte suspension with clearly defined expression of Sh. Flexneri in the lymphocytes and monocytes of a patient D. Plykays, 2 years old, case history No. 3347, DIB No. 3, St. Petersburg dated 03.11.2006, with a clinic of acute intestinal infection (figure 2).
Микрофотографии мазка лимфоцитарной взвеси с выраженной экспрессией антигена Sh. Sonnei в лимфоцитах и моноцитах больного Ефремова А., 4 лет, № истории болезни 3210, ДИБ № 3, г.Санкт Петербург от 27.10.2006 г., с клиникой тяжелого течения острой кишечной инфекции (фиг.3).Microphotographs of a smear of lymphocytic suspension with pronounced expression of Sh. Sonnei in the lymphocytes and monocytes of the patient A. Efremov, 4 years old, case history No. 3210, DIB No. 3, St. Petersburg dated 10.27.2006, with a clinical presentation of a severe course of acute intestinal infection (Fig. 3).
В качестве контрольной группы была исследована лимфоцитарная взвесь двух больных с коклюшем и одного больного с герпетической нейроинфекцией. Во всех случаях антигены Salmonella, Sh. Flexneri, Sh. Sonnei не выявлялись.As a control group, a lymphocytic suspension of two patients with whooping cough and one patient with herpetic neuroinfection was studied. In all cases, antigens Salmonella, Sh. Flexneri, Sh. Sonnei were not detected.
Таким образом, предложенный способ позволяет с высокой степенью специфичности и достоверности выявлять экспрессию антигенов возбудителей ОКИ в мазках лимфоцитарной взвеси. Разработанный метод обладает и высокой надежностью.Thus, the proposed method allows with a high degree of specificity and reliability to detect the expression of antigens of the causative agents of acute intestinal infections in smears of lymphocytic suspension. The developed method has high reliability.
Метод достаточно прост, возможно его широкое применение в практическом здравоохранении для экспресс-диагностики ОКИ и соответственно своевременного назначения этиотропной и патогенетической терапии.The method is quite simple, it can be widely used in practical health care for rapid diagnosis of acute intestinal infections and, accordingly, the timely appointment of etiotropic and pathogenetic therapy.
Предлагаемый способ имеет экономическую значимость, т.к. при этом не требуется применения дополнительного лабораторного оборудования и может использоваться в качестве экспресс-диагностики, так как сокращает время получения результата до 3-4 часов.The proposed method is of economic importance, because it does not require the use of additional laboratory equipment and can be used as express diagnostics, as it reduces the time to obtain the result to 3-4 hours.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007100832/15A RU2329507C1 (en) | 2007-01-09 | 2007-01-09 | Method of acute bacterial enteric infections express-diagnostics |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007100832/15A RU2329507C1 (en) | 2007-01-09 | 2007-01-09 | Method of acute bacterial enteric infections express-diagnostics |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2329507C1 true RU2329507C1 (en) | 2008-07-20 |
Family
ID=39809258
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007100832/15A RU2329507C1 (en) | 2007-01-09 | 2007-01-09 | Method of acute bacterial enteric infections express-diagnostics |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2329507C1 (en) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2514011C2 (en) * | 2012-08-20 | 2014-04-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИВС им. И.И. Мечникова" РАМН) | METHOD FOR SEROLOGICAL ASSESSMENT OF Bordetella pertussis ANATOXIN TOXICITY |
RU2525050C1 (en) * | 2012-12-24 | 2014-08-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора | Method for evaluating severity of acute intestinal infections in children |
-
2007
- 2007-01-09 RU RU2007100832/15A patent/RU2329507C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
WAIN J et al. Quantitation of bacteria in blood of typhoid fever patients and relationship between counts and clinical features, transmissibility, and antibiotic resistance. J Clin Microbiol., 1998, Jun; 36 (6), p.1683-7, найдено в PubMed, PMID: 9620400. PROBERT CS et al. A novel method for rapidly diagnosing the causes of diarrhea. Gut, 2004, Jan, 53 (1), p.58-61, найдено в PubMed, PMID: 14684577. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2514011C2 (en) * | 2012-08-20 | 2014-04-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИВС им. И.И. Мечникова" РАМН) | METHOD FOR SEROLOGICAL ASSESSMENT OF Bordetella pertussis ANATOXIN TOXICITY |
RU2525050C1 (en) * | 2012-12-24 | 2014-08-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора | Method for evaluating severity of acute intestinal infections in children |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Jones et al. | Detection of Chlamydia trachomatis in genital specimens by the Chlamydiazyme test | |
EP0615129B1 (en) | Methods for selectively detecting perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody of ulcerative colitis or primary sclerosing cholangitis | |
US6916626B1 (en) | Detection of Candida | |
CN105785030A (en) | Light-activating chemiluminescence immunoassay kit for serum specific IgE (immunoglobulin E) | |
FI82988C (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV MICROPROTEINER, SOM ERHAOLLITS UR CHLAMYDIA TRACHOMATIS, FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR. | |
CA1340973C (en) | Immunometric assay kit and method applicable to whole cells | |
JPS6367864B2 (en) | ||
DK150810B (en) | PROCEDURE FOR DETERMINING ONE OR MORE ANTIGENS IN A TEST WITH ANIMALS BONDED FOR SMALL PARTICLES | |
Devi et al. | A new serum hydatid antigen detection test for diagnosis of cystic echinococcosis | |
Ljungström | Immunodiagnosis in man | |
RU2329507C1 (en) | Method of acute bacterial enteric infections express-diagnostics | |
CN108802368A (en) | A kind of kit of enzyme linked immunosorbent detection ox miscarriage Chlamydia | |
DE69319240T2 (en) | IN VITRO TEST FOR HELICOBACTER PYLORI | |
Collado et al. | Serum IgA anti-Klebsiella antibodies in ankylosing spondylitis patients from Catalonia | |
JP5280214B2 (en) | Diagnosis method of inflammatory bowel disease | |
Lockwood et al. | Intracellular potassium in diffuse proctocolitis | |
Ashraf et al. | Evaluation of faecal occult blood test and lactoferrin latex agglutination test in screening hospitalized patients for diagnosing inflammatory and non-inflammatory diarrhoea in Dhaka, Bangladesh | |
RU2769578C1 (en) | Method for producing a fluorescent immunoglobulin diagnostic agent for detecting pathogens of rickettsioses and coxielloses, fluorescent immunoglobulin diagnostic agent and application thereof | |
RU2800470C1 (en) | Method of obtaining a monoclonal peroxidase conjugate for the identification of typical and atypical strains of vibrio cholerae o1, including r-variants in dot-elisa | |
Fife Jr et al. | Isolation and characterization of a serologically active exoantigen of Schistosoma mansoni cercariae | |
Sturk et al. | Endotoxin testing revisited | |
Gray et al. | Immunofluorescence identification of Thermopolyspora polyspora, the causative agent of farmer's lung | |
RU2728340C1 (en) | Method for producing a set of fluorescent rickettsial and query fever diagnosticums and use thereof for serological diagnosis of rickettsiosis and query fever, a serological diagnostic technique | |
RU2730980C1 (en) | Method of lambliasis diagnosing | |
RU2152037C1 (en) | Method of yersiniosis diagnosis |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090110 |