RU2152037C1 - Method of yersiniosis diagnosis - Google Patents
Method of yersiniosis diagnosis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2152037C1 RU2152037C1 RU99117991A RU99117991A RU2152037C1 RU 2152037 C1 RU2152037 C1 RU 2152037C1 RU 99117991 A RU99117991 A RU 99117991A RU 99117991 A RU99117991 A RU 99117991A RU 2152037 C1 RU2152037 C1 RU 2152037C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- yersiniosis
- antigen
- immunoenzyme
- added
- sera
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано в медицинской практике для иммуноферментной серодиагностики кишечного иерсиниоза, вызванного различными серовариантами Yersinia enterocolitica. The invention relates to the field of veterinary medicine and can be used in medical practice for enzyme immunoassay of serodiagnosis of intestinal yersiniosis caused by various serovariants of Yersinia enterocolitica.
Известен способ диагностики иерсиниозов, в частности реактивного артрита у людей, включающий сенсибилизацию полистироловой планшеты липополисахаридным антигеном (ЛПС), выделенным из клеток Yersinia enterocolitica серотипа 0:3, последующую отмывку его от несвязавшегося антигена и выявление антител в сыворотках крови с помощью ферментной метки (коммерческая ИФА тест-система DAKO производство Дании) (1). A known method for the diagnosis of yersiniosis, in particular reactive arthritis in humans, comprising sensitizing a polystyrene tablet with a lipopolysaccharide antigen (LPS) isolated from Yersinia enterocolitica cells of serotype 0: 3, its subsequent washing from unbound antigen and detection of antibodies in blood serum using an enzymatic label IFA test system DAKO production of Denmark) (1).
Недостатком данного способа является менее высокая чувствительность к выявлению иерсиниозов, вызванных серотипами 0:5, 0:7, 0:8. Кроме того для выполнения способа требуется очищенный антиген, на получение которого затрачивается значительное время, что усложняет его. The disadvantage of this method is less high sensitivity to the detection of yersiniosis caused by serotypes 0: 5, 0: 7, 0: 8. In addition, to perform the method requires a purified antigen, the preparation of which takes considerable time, which complicates it.
Известен также способ диагностики иерсиниозов (иерсиниоза и псевдотуберкулеза у людей), включающий сенсибилизацию полистироловой планшеты протеиновым антигеном, свободно секретируемым в культуральную среду патогенными иерсиниями, в частности Y. pseudotuberculosis 01, с последующим выявлением антител в сыворотках крови с помощью ферментной метки (2). There is also a method for the diagnosis of yersiniosis (yersiniosis and pseudotuberculosis in humans), which includes sensitizing a polystyrene tablet with a protein antigen that is freely secreted into the culture medium by pathogenic yersinia, in particular Y. pseudotuberculosis 01, followed by detection of antibodies in blood serum using an enzyme tag (2).
Недостатком данного способа является также менее высокая чувствительность и специфичность. Способ не позволяет с высокой достоверностью диагностировать иерсиниоз, вызванный Y. enterocolitica серотипа 0:9 ввиду общей антигенной детерминанты их ЛПС (4,6-дезокси-4-формамидо-L-D-маннопиранозила), присущей данному серотипу и различным видам бруцелл. Кроме того, способ более трудоемок в исполнении и на получение используемого антигена требуются значительные затраты времени и средств. The disadvantage of this method is also less high sensitivity and specificity. The method does not allow with high reliability to diagnose yersiniosis caused by Y. enterocolitica serotype 0: 9 due to the common antigenic determinant of their LPS (4,6-deoxy-4-formamido-L-D-mannopyranosyl) inherent in this serotype and various types of brucella. In addition, the method is more time-consuming to implement and to obtain the antigen used requires significant time and money.
Целью изобретения является повышение чувствительности и специфичности способа иммуноферментной диагностики иерсиниозов, а также его упрощение. Поставленная цель достигается тем, что в качестве антигена для сенсибилизации полистироловой планшеты используют инактивированный корпускулярный антиген из штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3 в забуференном физиологическом растворе (ЗФР) с pH 7,3 с оптической плотностью 0,1 о.е. мутности, устанавливаемой при длине волны 540 нм в кювете толщиной 10 мм, а сенсибилизацию полистироловой планшеты указанным антигеном осуществляют путем ее инкубации при 37oC в течение 15 мин.The aim of the invention is to increase the sensitivity and specificity of the method of enzyme immunoassay of yersiniosis, as well as its simplification. This goal is achieved in that inactivated corpuscular antigen from strain Y. enterocolitica of serovariant 0: 3 in buffered physiological solution (PBS) with a pH of 7.3 with an optical density of 0.1 p.u. is used as an antigen for sensitizing a polystyrene tablet. the turbidity established at a wavelength of 540 nm in a 10 mm thick cuvette, and the polystyrene plate is sensitized with the indicated antigen by incubation at 37 ° C for 15 minutes.
Для осуществления способа иммуноферментной диагностики иерсиниозов используют инактивированный иерсиниозный антиген из референтного штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3, выращенного на агаре Хоттингера. To implement the method of enzyme immunoassay of yersiniosis, an inactivated yersiniosis antigen from a reference strain of Y. enterocolitica of serovariant 0: 3 grown on Hottinger agar is used.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами. The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Изучают влияние сенсибилизирующей дозы инактивированного корпускулярного антигена из штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3 на величину показателей Единиц ИФА (БД ИФА) гипериммунной сыворотки к Y. enterocolitica 0:3 при постановке твердофазного ИФА, осуществляемого в стандартном непрямом варианте. Для постановки ИФА используют разведения указанного антигена в забуференном физиологическом растворе (ЗФР, pH 7,3) со следующими значениями оптической плотности, измеренной при длине волны 540 нм в кювете толщиной 10 мм, (ОП540): 0,5; 0,2; 0,1; 0,05 и 0,01 о.е. мутности. Антиген вносят в микротитраторную полистироловую планшету по 100 мкл/лунку и осуществляют ее сенсибилизацию при инкубации в течение 60 мин при 37oC. Планшету отмывают от неприсоединившегося антигена трижды холодной водопроводной водой и 1 раз ЗФР и тщательно стряхивают. Затем в лунки вносят гипериммунную кроличью антииерсиниозную (0:3), а в другие, в качестве контроля, отрицательную (от здорового кролика) сыворотки, взятые в разведении 1:25 600. Инкубацию с сыворотками проводят 1 час при комнатной температуре. После отмывки лунок от несвязавшихся антител в них добавляют антикроличий пероксидазный конъюгат в подобранном рабочем разведении. Инкубируют 1 ч при комнатной температуре. Отмывают. Тщательно стряхивают и добавляют по 100 мкл/лунку субстратной смеси ОФД (орто-фенилендиамин 10 мг, 40 мкл 3% перекиси водорода и 20 мл цитратно-фосфатного буфера, pH 5,5). Через 10 - 20 мин ферментативную реакцию останавливают добавлением 25 мкл/лунку 0,5М серной кислоты (H2SO4). Учет реакции проводят на вертикальном фотометре MicroELISA Auto Reader MR 580 (Dynatech, США) при длине волны 490 нм (ОП490), прибор бланкируют по воздуху. Результаты реакции выражают в единицах иммуноферментного анализа (ЕД ИФА). Данный показатель рассчитывают по формуле:
где ОПх - средняя оптическая плотность лунок с исследуемым образцом;
ОПо - средняя оптическая плотность лунок с отрицательной контрольной сывороткой. За положительные принимают значения ОП490 испытуемой сыворотки не менее, чем в 2 раза превышающие ОП490 отрицательного контроля, выраженные в процентах плюс удвоенное среднее квадратическое отклонение (т.е. ЕД ИФА+2 σ). В нашем исследовании этот показатель равен 244. Результаты представлены в табл. 1.Example 1. The effect of a sensitizing dose of an inactivated corpuscular antigen from strain Y. enterocolitica of serovariant 0: 3 on the value of IFA Units (IFA) of hyperimmune serum to Y. enterocolitica 0: 3 when stating solid-phase ELISA, carried out in the standard indirect variant, is studied. For ELISA, dilutions of the indicated antigen in buffered physiological saline (PBS, pH 7.3) with the following absorbance values measured at a wavelength of 540 nm in a 10 mm thick cuvette (OD 540 ) are used (OD 540 ): 0.5; 0.2; 0.1; 0.05 and 0.01 p.u. turbidity. The antigen is introduced into a microtiter polystyrene plate at 100 μl / well and sensitized by incubation for 60 min at 37 ° C. The plate is washed from the non-adherent antigen three times with cold tap water and 1 time PBS and thoroughly shaken off. Then, hyperimmune rabbit anti-yersiniosis (0: 3) is added to the wells, and negative serum (from a healthy rabbit) taken at a 1:25 600 dilution is taken as a control in other wells. The serum is incubated for 1 hour at room temperature. After washing the wells from unbound antibodies, they add anti-rabbit peroxidase conjugate in a selected working dilution. Incubated for 1 h at room temperature. Washed. Thoroughly shake off and add 100 μl / well of the substrate mixture OFD (ortho-
where OD x is the average optical density of the wells with the test sample;
OP about - the average optical density of the wells with a negative control serum. The positive values of OD 490 of the tested serum are taken as not less than 2 times higher than OD 490 of the negative control, expressed as a percentage plus twice the standard deviation (i.e., ELISA ELISA + 2 σ). In our study, this indicator is 244. The results are presented in table. 1.
Из табл. 1 следует, что оптимальной сенсибилизирующей дозой антигена является суспензия клеток с ОП540, равной 0,1 о.е. При этом разведении позитивная сыворотка дает достаточно высокие показатели ЕД ИФА, тогда как в последующих разведениях происходит их снижение.From the table. 1 it follows that the optimal sensitizing dose of antigen is a suspension of cells with OD 540 equal to 0.1 p.u. With this dilution, positive serum gives fairly high ELISA, while in subsequent dilutions, they decrease.
Пример 2. Изучают влияние времени инкубации на адсорбцию корпускулярного инактивированного антигена из штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3 в лунках полистироловых планшет с использованием оптимальной концентрации микробных клеток (ОП540 0,1 о.е в ЗФР с pH 7,3). Сенсибилизацию лунок проводят в течение 5, 10, 15, 30, 60 и 120 минут при 37oC.Example 2. The effect of incubation time on the adsorption of a particulate inactivated antigen from a Y. enterocolitica strain of serovariant 0: 3 in the wells of polystyrene plates using the optimal concentration of microbial cells (OD 540 0.1 pf in PBS with pH 7.3) is studied. Sensitization of the holes is carried out for 5, 10, 15, 30, 60 and 120 minutes at 37 o C.
После сенсибилизации в лунки вносят по 100 мкл гипериммунной кроличьей анти-0: 3 сыворотки а в другие, в качестве контроля, отрицательную сыворотку здоровых животных, взятых в одном разведении (1:12800). Далее опыт проводят как описано в примере 1 с момента внесения сывороток. Результаты представлены в табл. 2. After sensitization, 100 μl of hyperimmune rabbit anti-0: 3 serum are added to the wells and negative serum from healthy animals taken in one dilution (1: 12800) is used as a control in others. Further, the experiment is carried out as described in example 1 from the moment of making sera. The results are presented in table. 2.
Полученные данные позволяют сделать вывод о том, что оптимальным режимом сенсибилизации полистироловых планшет корпускулярным иерсиниозным антигеном из штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3 является инкубация их при 37oC в течение 15 минут. Сенсибилизация лунок в течение 5 и 10 минут несколько снижает чувствительность реакции по сравнению с 15-минутной инкубацией. Тогда как увеличение времени инкубации более 15 минут не приводит к сколько-нибудь значительному росту интенсивности окраски конечного продукта реакции и показателей ЕД ИФА.The data obtained allow us to conclude that the optimal mode of sensitization of polystyrene tablets with a corpuscular yersiniosis antigen from strain Y. enterocolitica serovariant 0: 3 is their incubation at 37 o C for 15 minutes. Sensitization of the wells for 5 and 10 minutes slightly reduces the sensitivity of the reaction compared to a 15-minute incubation. Whereas an increase in incubation time of more than 15 minutes does not lead to any significant increase in the color intensity of the final reaction product and the ELISA ELISA.
Пример 3. Изучают влияние pH буферных растворов: фосфатный буфер (pH 5,8 и 8,2), карбонат-бикарбонатный буфер (pH 9,8), ЗФР (pH 7,3), используемых для разведения инактивированного корпускулярного антигена из штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3, на показатели ОП490 конечных продуктов реакции, выраженных в ЕД ИФА. Сенсибилизацию проводят в подобранных оптимальных условиях (ОП540 0,1 о.е., 15 мин при 37oC). После сенсибилизации и отмывки в лунки вносят по 100 мкл положительной анти-иерсиниозной (0:3) сыворотки и отрицательной сыворотки здоровых животных, взятых в одном разведении (1: 25600) в буферном растворе с аналогичным значением pH. Далее опыт проводят как описано в примере 1 с момента добавления сыворотки. Результаты представлены в табл. 3.Example 3. The effect of pH buffer solutions is studied: phosphate buffer (pH 5.8 and 8.2), carbonate-bicarbonate buffer (pH 9.8), PBS (pH 7.3), used to dilute inactivated particle antigen from strain Y enterocolitica serovariant 0: 3, on indicators of OP 490 of the final reaction products, expressed in units of ELISA. Sensitization is carried out under selected optimal conditions (OD 540 0.1 p.u., 15 min at 37 o C). After sensitization and washing, 100 μl of positive anti-yersiniosis (0: 3) serum and negative serum of healthy animals taken in one dilution (1: 25600) in a buffer solution with the same pH value are added to the wells. Further, the experiment is carried out as described in example 1 from the moment of adding serum. The results are presented in table. 3.
Результаты, представленные в табл. 3, свидетельствуют о том, что оптимальным значением pH комплексирующего буфера для разведения антигена при сенсибилизации полистироловых планшет является значение 7,3. При использовании буфера с pH 6,1 в лунках с отрицательной сывороткой наблюдается значительное окрашивание (фон), т.е. понижается специфичность реакции. При использовании буферов с pH 8,2 и 9,8 понижается чувствительность реакции, что выражается в некотором снижении ОП490 положительной сыворотки. В обоих случаях происходит уменьшение величин ЕД ИФА.The results presented in table. 3, indicate that the optimal pH of the complexing buffer for dilution of antigen during sensitization of polystyrene tablets is 7.3. When using a buffer with a pH of 6.1 in wells with negative serum, significant staining is observed (background), i.e. the specificity of the reaction decreases. When using buffers with pH 8.2 and 9.8, the sensitivity of the reaction decreases, which is expressed in a certain decrease in the OD of 490 positive serum. In both cases, there is a decrease in the values of ELISA.
Все дальнейшие испытания в предлагаемой диагностической системе проводят на планшетах, сенсибилизированных инактивированным корпускулярным антигеном из штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3, с учетом подобранных оптимальных условий: концентрация антигена по ОП540 0,1 о.е. мутности в ЗФР с pH 7,3 в течение 15 мин при 37oC.All further tests in the proposed diagnostic system are carried out on tablets sensitized with inactivated corpuscular antigen from strain Y. enterocolitica of serovariant 0: 3, taking into account the selected optimal conditions: antigen concentration at OD 540 0.1 p.u. turbidity in PBS with a pH of 7.3 for 15 min at 37 o C.
Пример 4. Специфичность и чувствительность различных тест-систем оценивают путем сравнения ЕД ИФА гипериммунных кроличьих сывороток, полученных к различным серовариантам Y. enterocolitica 0:3, 0:5, 0:6, 0:7, 0:8, 0:9; коммерческих сывороток к бруцелле, сальмонеллам, шигеллам, E.coli; нормальных кроличьих и КРС сывороток. Гипериммунные антииерсиниозные сыворотки получают после 3-кратной иммунизации кроликов культурами иерсиний, инактивированными 50% раствором этилового спирта. Активность полученных сывороток контролируют в РА. Example 4. The specificity and sensitivity of various test systems is assessed by comparing ED ELISA of hyperimmune rabbit sera obtained for different serovariants Y. enterocolitica 0: 3, 0: 5, 0: 6, 0: 7, 0: 8, 0: 9; commercial sera to brucella, salmonella, shigella, E. coli; normal rabbit and cattle serum. Hyperimmune anti-yersiniosis sera are obtained after 3-fold immunization of rabbits with yersinia cultures inactivated with 50% ethanol. The activity of the obtained sera is monitored in RA.
Полистироловые планшеты сенсибилизируют инактивированным корпускулярным иерсиниозным антигеном из штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3 в оптимальном отработанном режиме. Для сравнения используют планшеты, сенсибилизированные протеиновым антигеном, полученным из культуральной ростовой среды Y. enterocolitica 0:3 по способу, описанному в прототипе и планшеты из коммерческой тест-системы DAKO (Дания), сенсибилизированные ЛПС Y. enterocolitica 0: 3 (аналог). Исследуют сыворотки: гипериммунные кроличьи к иерсиниям различных серовариантов (0: 3, 0:5, 0:6, 0:7, 0:8, 0:9), антииерсиниозные крупного рогатого скота (КРС) к 0:9 сероварианту, позитивные антибруцеллезные КРС (национальная бруцеллезная стандартная) и кроличьи и нормальные сыворотки кролика и КРС в разведении 1:400 в ЗФР+0,5% Твина 20 (ЗФРТ), вносимых на планшету в трех повторностях. Инкубируют 1 ч при комнатной температуре. Далее опыт проводят как описано в примере 1 с момента добавления сыворотки. Результаты представлены в табл. 4. Polystyrene tablets are sensitized with inactivated corpuscular yersiniosis antigen from strain Y. enterocolitica of serovariant 0: 3 in the optimal established mode. For comparison, tablets sensitized with protein antigen obtained from Y. enterocolitica 0: 3 culture medium were used according to the method described in the prototype and tablets from the commercial DAKO test system (Denmark), sensitized with LPS Y. enterocolitica 0: 3 (analogue). Serum is examined: hyperimmune rabbit to yersinia of various serovariants (0: 3, 0: 5, 0: 6, 0: 7, 0: 8, 0: 9), anti-yersiniosis of cattle (cattle) to 0: 9 serovariant, positive anti-brucellosis Cattle (national brucellosis standard) and rabbit and normal rabbit and cattle serum at a dilution of 1: 400 in PBS + 0.5% Tween 20 (PBS), applied to the tablet in triplicate. Incubated for 1 h at room temperature. Further, the experiment is carried out as described in example 1 from the moment of adding serum. The results are presented in table. 4.
Как следует из табл. 4 предложенный способ является более чувствительным и специфичным, поскольку все исследованные гипериммунные кроличьи сыворотки, полученные к различным серовариантам иерсиний, дают на корпускулярном иерсиниозном антигене из штамма Y. enterocolitica сероварианта 0:3 положительные результаты (ЕД ИФА>244); ЕД ИФА анти-бруцеллезных сывороток и антисывороток к другим энтеробактериям были отрицательными (<244). As follows from the table. 4, the proposed method is more sensitive and specific, since all the studied hyperimmune rabbit sera obtained for different yersinia serovariants give positive results on the corpuscular yersiniosis antigen from strain Y. enterocolitica serovariant (ELISA> 244); ED ELISA of anti-brucellosis sera and antisera to other enterobacteria were negative (<244).
Из данных, приведенных в примерах, можно сделать вывод, что предлагаемая ИФА тест-система имеет ряд преимуществ перед описанными в аналоге и прототипе. From the data given in the examples, we can conclude that the proposed ELISA test system has several advantages over those described in the analogue and prototype.
1. Уменьшение трудоемкости исследования в результате использования в качестве антигена целых клеток культур - Y. enterocolitica 0:3, а не очищенных клеточных или внеклеточных субстанций. 1. Reducing the complexity of the study as a result of using whole cell culture as an antigen - Y. enterocolitica 0: 3, rather than purified cell or extracellular substances.
2. Сокращение времени сенсибилизации полистирола антигенами. 2. Reducing the time of sensitization of polystyrene antigens.
3. Предлагаемая ИФА-тест-система обладает более широкой сероварспецифичностью при диагностике Y. enterocolitica по сравнению с аналогом и прототипом. Все проверенные в ней гипериммунные сыворотки, полученные к серовариантам 0:3, 0:5, 0:6, 0:7, 0:8 и 0:9 дают на иерсиниозном антигене положительный результат, тогда как ни одна позитивная бруцеллезная, сальмонелезная, шигеллезная или эшерихиозная сыворотки не реагируют на нем положительно. 3. The proposed ELISA test system has a wider serovarspecificity in the diagnosis of Y. enterocolitica in comparison with the analogue and prototype. All the hyperimmune sera tested in it, obtained for serovariants 0: 3, 0: 5, 0: 6, 0: 7, 0: 8 and 0: 9, give a positive result on the yersiniosis antigen, while no positive brucellosis, salmonella, shigellosis or Escherichia serum does not respond positively to it.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99117991A RU2152037C1 (en) | 1999-08-18 | 1999-08-18 | Method of yersiniosis diagnosis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99117991A RU2152037C1 (en) | 1999-08-18 | 1999-08-18 | Method of yersiniosis diagnosis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2152037C1 true RU2152037C1 (en) | 2000-06-27 |
Family
ID=20224076
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU99117991A RU2152037C1 (en) | 1999-08-18 | 1999-08-18 | Method of yersiniosis diagnosis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2152037C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2566188C1 (en) * | 2014-08-07 | 2015-10-20 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Method for simulating intestinal yersiniosis in experimental animals |
-
1999
- 1999-08-18 RU RU99117991A patent/RU2152037C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Granfors K., Ogasawara M., Hill J.L., Lahesmaa - Rantala R., Toivanen A., Yu DTY. Analysis of IgA antibodies to lipopolysaccharide in Yersiniatriggered reactive arthritis. J.Infect. Dis., 1989, v.159, p.1142-1147. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2566188C1 (en) * | 2014-08-07 | 2015-10-20 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Method for simulating intestinal yersiniosis in experimental animals |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Crabtree et al. | Evaluation of a commercial ELISA for serodiagnosis of Helicobacter pylori infection. | |
| US4200690A (en) | Immunoassay with membrane immobilized antibody | |
| JP2901296B2 (en) | Preparation of Campylobacter pylori macromolecular cell-associated protein and its use for serological detection of Campylobacter pylori infection | |
| JPH01501338A (en) | Methods for exposing group A streptococcal antigens and improved diagnostic tests for identifying group A streptococci | |
| FI82988B (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV MICROPROTEINER, SOM ERHAOLLITS UR CHLAMYDIA TRACHOMATIS, FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR. | |
| Lu et al. | A time-resolved fluorescence lateral flow immunoassay for rapid and quantitative serodiagnosis of Brucella infection in humans | |
| JPH02156157A (en) | Measurement of chlamydia antigen or gonococcus antigen using positive charge ionic binding support | |
| JPH02156158A (en) | Immune reagent composition and use thereof for measurement of chlamydia antigen or gonococcus antigen | |
| Mahony et al. | Diagnosis of Chlamydia trachomatis genital infections by cell culture and two enzyme immunoassays detecting different chlamydial antigens | |
| RU2152037C1 (en) | Method of yersiniosis diagnosis | |
| RU2152035C1 (en) | Method of brucellosis diagnosis | |
| JPH0363571A (en) | Inspection kit for coliform bacilli | |
| JPH03251764A (en) | Buffering cleaning composition, test kit and method of its use | |
| JPH0643164A (en) | Parodontitis disease accompanied with classification of microbes and product and kit available for said classification | |
| US20200166436A1 (en) | Substance that prevents antigen-antibody reaction inhibition by body fluid | |
| US6235487B1 (en) | Method of diagnosing Crohn's disease | |
| RU2329507C1 (en) | Method of acute bacterial enteric infections express-diagnostics | |
| Ashraf et al. | Evaluation of faecal occult blood test and lactoferrin latex agglutination test in screening hospitalized patients for diagnosing inflammatory and non-inflammatory diarrhoea in Dhaka, Bangladesh | |
| JPS5822980B2 (en) | Brucella canis antibody detection composition | |
| JPH10339731A (en) | Method for detecting intestinal bleeding colon bacillus infection | |
| RU2635515C1 (en) | Method of differential express diagnostics of brucellosis of large cattle | |
| RU2203499C1 (en) | Method for carrying out diagnostic reaction at brucellosis | |
| RU2800470C1 (en) | Method of obtaining a monoclonal peroxidase conjugate for the identification of typical and atypical strains of vibrio cholerae o1, including r-variants in dot-elisa | |
| CN111638329B (en) | ELISPOT detection kit for detecting brucellosis and application thereof | |
| RU2324188C2 (en) | Method of preparation of antigenic polymeric helicobacter diagnosticum |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20070819 |