RU2325644C2 - Способ проведения клинического и биохимического анализа биологических жидкостей - Google Patents
Способ проведения клинического и биохимического анализа биологических жидкостей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2325644C2 RU2325644C2 RU2005123717/15A RU2005123717A RU2325644C2 RU 2325644 C2 RU2325644 C2 RU 2325644C2 RU 2005123717/15 A RU2005123717/15 A RU 2005123717/15A RU 2005123717 A RU2005123717 A RU 2005123717A RU 2325644 C2 RU2325644 C2 RU 2325644C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- samples
- latex suspension
- latex
- applicator
- carrier
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биологии, медицине, ветеринарии и предназначено, в частности, для лабораторий, проводящих клинические, биохимические анализы биологических жидкостей. Способ проведения иммунологического анализа биологических жидкостей заключается в том, что аппликатор с микростержнями погружают в латексную суспензию, сенсибилизированную антителами, с взятием микрокапель латексной суспензии, эти микрокапли наносят на носитель в геометрически определенных местах в виде упорядоченной матрицы, затем другим аппликатором берут образцы биологической жидкости и наносят на тот же носитель так, чтобы образцы смешались с латексной суспензией, перемешивают и инкубируют 2-3 минуты и помещают в видеоцифровое устройство для регистрации агглютинации. Способ позволяет снизить затраты на проведение анализа, автоматизировать анализ и повысить его точность. 1 ил.
Description
Изобретение относится к биологии, медицине, ветеринарии и предназначено, в частности, для медицинских, санитарно-эпидемиологических и других аналитических лабораторий, проводящих иммунологические анализы биологических жидкостей, образцов окружающей среды и других образцов методами на основе агглютинации частиц латекса.
Изобретение может быть использовано для медицинской и ветеринарной диагностики, в частности для повышения эффективности проведения анализов биологических жидкостей, а именно крови, сыворотки, мочи и лимфатической жидкости, основанных на методах латекс-агглютинации.
Известен способ проведения иммунологического анализа биологических жидкостей на основе метода латексной агглютинации, состоящий в смешивании на поверхности плоского носителя одной или нескольких капель исследуемого образца с суспензией латексных частиц, сенсибилизированных антителами или антигенами, с последующим визуальным наблюдением формирования агрегатов («крупинок») латекса, агглютинирующего в присутствии определенных концентраций определяемого вещества (N. Engl. J. Med. 1958; 258 (15): 731-735).
Для традиционного метода («макровариант») в качестве носителя применяют специальные черные непрозрачные пластиковые карты, на которые латексная суспензия наносится капельницей в объеме около 50 мкл, а затем смешивается с таким же количеством образца (Инструкция для определения С-реактивного белка OOO фирмы ИМТЕК, Москва, Россия). На карты аналогично образцам также наносятся положительный и отрицательный контроли. Карты с образцами инкубируют в течение 2-3 мин при комнатной температуре, а затем результаты регистрируют визуальным наблюдением. Исследуемые образцы считаются положительными, если оператор видит формирование агглютината. Для того чтобы белые крупинки латексного агглютината были лучше заметны при визуальной регистрации, зоны нанесения образов и суспензии окрашиваются в черный цвет. Метод считается полуколичественным и предполагает получение информации о концентрации определяемого вещества путем приготовления серии разведений образца (титрования) и определения, в каком максимальном разведении образец регистрируется как положительный в данной реакции.
Для «микроварианта» метода в качестве носителя используют крышки от стандартных 96-ти луночных микропланшетов для иммуноферментного анализа или предметные стекла (Инструкция для определения ревматоидного фактора OOO фирмы ИМТЕК, Москав, Россия). Все остальные этапы проводятся также, как и в «макроварианте». В этом случае для одного анализа используется 10-20 мкл латекса и такое же количество образца и контролей. Этот способ выбран в качестве прототипа.
Недостатки существующего способа заключаются в следующем:
- используется визуальная регистрация результатов реакции, что приводит к субъективной оценке результатов. Данный способ регистрации может приводить к ошибкам, особенно для проб, содержащих определяемое вещество в концентрациях, близких к порогу чувствительности метода;
- отсутствует документирование результатов анализа, что не позволяет в сомнительных случаях или в случаях, связанных с необходимостью уточнения результатов из-за ошибок оператора, провести повторную регистрацию результатов постановки анализа;
- плохая приспособленность к серийным постановкам, так как образцы и контроля наносятся последовательно один за другим и на момент регистрации результатов при значительном количестве одновременно анализируемых образцов для разных образцов время инкубации существенно различается;
- относительно большой объем необходимой латексной суспензии (особенно в «макроварианте»), что приводит к значительной цене одного анализа.
В изобретении поставлена задача создать способ проведения и регистрации результатов агглютинационных анализов, который бы позволил уменьшить трудоемкость проведения анализа, снизить стоимость одного анализа, снизить количество необходимой для анализа биологической жидкости, обеспечить документирование и объективную регистрацию результатов анализа, обеспечить возможность высокопроизводительного серийного анализа.
Для достижения указанного выше результата в предложенном способе, используя блок распределения-смешивания реагентов и образцов, несколько микрокапель латексной суспензии и исследуемых образцов объемом менее 1 мкл помещают, а затем смешивают в геометрически определенных местах носителя в виде упорядоченной матрицы, а результат реакции регистрируют с помощью видеоцифрового устройства (сканер или анализатор на основе видеоцифровой камеры) и оценивают с помощью специализированной программы. Блок распределения-смешивания реагента и образцов состоит из микропланшета хранения и распределения латексной суспензии, микропланшета для хранения и распределения образцов и системы нанесения микрокапель с расположением их в виде матрицы с фиксацией геометрического положения на носителе. Система нанесения микрокапель представляет собой аппликатор с несколькими микростержнями (пинами), расположенными в определенном порядке, и позиционер носителя, обеспечивающий фиксированные относительные позиции носителя и аппликатора в момент переноса микрокапель с пинов на носитель.
Предлагаемый способ проведения агглютинационных иммунологических анализов биологических жидкостей осуществляют следующим образом.
Из микропланшета хранения и распределения латексной суспензии, погружая пины аппликатора в лунки с образцами, производят взятие капель латексной суспензии (объем капли зависит от площади поперечного сечения пина и составляет менее 1,0 мкл) и наносят капли на носитель с помощью позиционера. Из микропланшета для хранения и распределения образцов, погружая пины аппликатора в лунки с образцами, производят взятие капель образца (объем капли менее 1,0 мкл). Затем наносят с помощью позиционера капли образца на носитель так, чтобы каждая наносимая капля образца смешалась с каплей латексной суспензии, уже находящейся на носителе.
Носитель с располагающимися на нем в виде упорядоченной матрицы микрокаплями, содержащими смесь образца и латексной суспензии, инкубируют 2-3 мин и помещают в анализатор изображения. В анализаторе получают изображение носителя, а изображение каждой капли анализируется отдельно с помощью программы, которая фиксирует наличие или отсутствие агглютинации и дает возможность автоматической дискриминации положительных и отрицательных образцов.
Пример.
Серийное определение концентрации С-реактивного белка в образцах сыворотки крови.
Блок для сбора и хранения латексной суспензии и блок для сбора и хранения анализируемых образцов представляют собой 30-луночные планшеты с неглубокими круглыми лунками (глубина до 2 мм). В лунках одного планшета находится суспензия латексных частиц, сенсибилизированных антителами к С-реактивному белку. В другом планшете находятся индивидуальные образы сыворотки крови, в которых необходимо определить содержание С-реактивного белка, и контроли. Анализируемые образцы сыворотки крови и контроли заливают в лунки планшета с помощью стандартных микропипеток.
Аппликатор для распределения реагентов и образцов представляет собой матрицу из 30 пинов, расположенных в 5 рядов по 6 пинов в ряду. Расстояние между пинами составляет 4,5 мм.
Сначала пины аппликатора погружают в лунки планшета, содержащего латексную суспензию (чертеж, а). При извлечении их из лунок на каждом пине остается капля латексной суспензии объемом менее 1 мкл (чертеж, б). Затем пины приводят в соприкосновение с носителем (чертеж, в), в результате чего на носителе формируется геометрически фиксированная матрица микрокапель латексной суспензии с периодом расположения элементов 4,5 мм (чертеж, г).
Затем ту же операцию проводят, погружая пины другого аппликатора в лунки планшета с исследуемыми образцами и контролями (чертеж, д, е), и после соприкосновения с поверхностью носителя (чертеж, ж) в местах расположения микрокапель латексной суспензии производят несколько вращательных движений, смешивая оба реагента. Причем расположение образцов и контролей на носителе сохраняется точно таким же, как и в планшете, из которого они забирались (чертеж, з).
Через 2 минуты оценивают результаты реакции с помощью видеоцифрового устройства и специализированной программы.
Предлагаемый способ имеет следующие преимущества:
- с использованием видеоцифровой регистрации и компьютерной оценки результатов анализа повышается объективность метода;
- появляется возможность документирования и хранения результатов анализа в компьютере и в распечатанном виде;
- использование многопинового аппликатора позволяет проводить серийное определение, что существенно сокращает время проведения анализа;
- значительное уменьшение объема используемого латексного реагента существенно удешевляет анализ.
Claims (1)
- Способ проведения иммунологического анализа биологических жидкостей, характеризующийся тем, что аппликатор с микростержнями погружают в латексную суспензию, сенсибилизированную антителами, с взятием микрокапель латексной суспензии, эти микрокапли наносят на носитель в геометрически определенных местах в виде упорядоченной матрицы, затем другим аппликатором берут образцы биологической жидкости и наносят на тот же носитель так, чтобы образцы смешались с латексной суспензией, перемешивают и инкубируют 2-3 мин и помещают в видеоцифровое устройство для регистрации агглютинации.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005123717/15A RU2325644C2 (ru) | 2005-07-26 | 2005-07-26 | Способ проведения клинического и биохимического анализа биологических жидкостей |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005123717/15A RU2325644C2 (ru) | 2005-07-26 | 2005-07-26 | Способ проведения клинического и биохимического анализа биологических жидкостей |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2005123717A RU2005123717A (ru) | 2007-02-10 |
RU2325644C2 true RU2325644C2 (ru) | 2008-05-27 |
Family
ID=37862065
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2005123717/15A RU2325644C2 (ru) | 2005-07-26 | 2005-07-26 | Способ проведения клинического и биохимического анализа биологических жидкостей |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2325644C2 (ru) |
-
2005
- 2005-07-26 RU RU2005123717/15A patent/RU2325644C2/ru not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2005123717A (ru) | 2007-02-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20090215158A1 (en) | Micro Flow Channel Chip | |
CN105353159A (zh) | 微流体检验装置及其运作方法 | |
KR20040076226A (ko) | 분석 중의 응집물의 검출 | |
US20090075828A1 (en) | Integrated protein chip assay | |
Park et al. | Prospects for the commercialization of chemiluminescence-based point-of-care and on-site testing devices | |
EP1628768B1 (en) | Assay method and apparatus | |
US20060292558A1 (en) | Methods and apparatus for protein assay diagnostics | |
US20060292649A1 (en) | Methods and apparatus for reference lab diagnostics | |
JP2011013000A (ja) | バイオチップの分析方法及びその自動分析システム | |
US20220299525A1 (en) | Computational sensing with a multiplexed flow assays for high-sensitivity analyte quantification | |
EP1667780B1 (en) | Method of detecting multiple analytes | |
AU2018202308A1 (en) | Method and apparatus for measuring physiological properties of biological samples | |
WO2021097275A1 (en) | Systems and methods for rapid, sensitive multiplex immunoassays | |
US20210190771A1 (en) | Automated liquid immunoassay device and method therefor | |
EP1718970B1 (de) | Verfahren und vorrichtung zur bestimmung mehrerer analyten mit simultaner internen kontrolle in einer grafischen kombination | |
US6582912B1 (en) | Device, method and apparatus for implementing the method, for dosing at least a particular constituent in a product sample | |
RU2325644C2 (ru) | Способ проведения клинического и биохимического анализа биологических жидкостей | |
US11061045B2 (en) | Sample analysis system and method | |
WO2017100652A1 (en) | Automated agglutination analyzer with thresholding | |
US20180231539A1 (en) | Device and method for detecting substances present in biological or chemical samples | |
EP3479130B1 (en) | Method and system for substance dispense evaluation | |
JP2002090362A (ja) | 分析のための生物学的流体の保持容器 | |
Eickhoff et al. | Planar Protein Arrays in Microtiter Plates: Development of a New Format Towards Accurate, Automation-Friendly and Affordable (A 3) Diagnostics | |
US20220241788A1 (en) | Analytical Device And Reaction Chamber | |
RU212243U1 (ru) | Устройство для мультиплексного иммунофлуоресцентного анализа с использованием одноразовых картриджей |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20070503 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090727 |