RU2319142C1 - Method of determining 2,4,6-trinitromethylbenzene in biological material - Google Patents
Method of determining 2,4,6-trinitromethylbenzene in biological material Download PDFInfo
- Publication number
- RU2319142C1 RU2319142C1 RU2006137383/04A RU2006137383A RU2319142C1 RU 2319142 C1 RU2319142 C1 RU 2319142C1 RU 2006137383/04 A RU2006137383/04 A RU 2006137383/04A RU 2006137383 A RU2006137383 A RU 2006137383A RU 2319142 C1 RU2319142 C1 RU 2319142C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- acetonitrile
- mobile phase
- trinitromethylbenzene
- column
- acetone
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биологии, токсикологической и санитарной химии, а именно к способам определения 2,4,6-тринитрометилбензола в биологическом материале, и может быть использовано в практике санэпидстанций и химико-токсикологических лабораторий. Способ относится к числу массовых.The invention relates to biology, toxicological and sanitary chemistry, and in particular to methods for determining 2,4,6-trinitromethylbenzene in biological material, and can be used in the practice of sanitary epidemiological stations and chemical toxicological laboratories. The method belongs to the mass.
Известен способ определения органических веществ в биологическом материале путем измельчения исследуемого биологического объекта, неоднократного настаивания с этанолом (каждый раз в течение суток), объединения вытяжек, сгущения объединенного извлечения, осаждения в нем белков абсолютным этанолом, фильтрования, упаривания фильтрата до густоты сиропа и разбавления его водой с последующей экстракцией анализируемых соединений сначала из кислого, а затем из щелочного раствора (Швайкова М.Д. Токсикологическая химия. - М.: Медицина, 1975. - С.119-123).A known method for the determination of organic substances in biological material by grinding the investigated biological object, repeated infusion with ethanol (each time during the day), combining extracts, thickening the combined extraction, precipitation of proteins with absolute ethanol in it, filtering, evaporating the filtrate to the density of the syrup and diluting it water, followed by extraction of the analyzed compounds first from an acidic, and then from an alkaline solution (Shvaikova MD Toxicological chemistry. - M .: Medicine, 1975. - P.119-1 23).
Способ трудоемок, требует значительных затрат времени на его осуществление, характеризуется низкой степенью извлечения 2,4,6-тринитрометилбензола и малой селективностью.The method is time consuming, requires a significant investment of time for its implementation, is characterized by a low degree of extraction of 2,4,6-trinitromethylbenzene and low selectivity.
Известен способ определения 2,4,6-тринитрометилбензола в биологическом материале, заключающийся в неоднократном настаивании биологического объекта с диэтиловым эфиром при возможном добавлении к биологическому объекту безводного сульфата натрия, отделении эфирных извлечений, их объединении, испарении эфира, растворении остатка в ацетоне с последующей обработкой этанольным раствором гидроксида натрия и измерением оптической плотности образующегося окрашенного раствора (Гадаскина И.Д., Филов В.А. Превращения и определение промышленных органических ядов в организме. - Л.: Медицина, 1971. - С.254-255).A known method for the determination of 2,4,6-trinitromethylbenzene in biological material, which consists in repeatedly infusing the biological object with diethyl ether with the possible addition of anhydrous sodium sulfate to the biological object, separating the ether extracts, combining them, evaporating the ether, dissolving the residue in acetone, followed by processing ethanol solution of sodium hydroxide and measuring the optical density of the resulting colored solution (Gadaskina I.D., Filov V.A. Transformations and determination of industrial organic poisons in the body .-- L .: Medicine, 1971. - P.254-255).
Способ характеризуется низкой чувствительностью, недостаточно высокими селективностью и точностью определения.The method is characterized by low sensitivity, insufficiently high selectivity and accuracy of determination.
Наиболее близким является способ определения 2,4,6-тринитрометилбензола в биологическом материале путем измельчения биологического объекта, настаивания с равным по массе количеством 95% этанола в течение 24 часов, прибавления к смеси дистиллированной воды до получения раствора с содержанием этанола 15%, фильтрования смеси, неоднократной экстракции эфиром, объединения экстрактов, испарения части объединенного эфирного извлечения до сухого остатка, растворения остатка в ацетоне с последующим определением анализируемого вещества методом газожидкостной хроматографии в колонке длиной 122 см, заполненной сорбентом OV-17 на хромосорбе W, с использованием азотно-фосфорного детектора и гелия в качестве подвижной фазы при скорости подачи гелия 40 мл/мин, воздуха 280 мл/мин, водорода 2 мл/мин, температуре детектора 270°С, инжектора 230°С, колонки 185°С.The closest is a method for determining 2,4,6-trinitromethylbenzene in a biological material by grinding a biological object, insisting with an equal mass of 95% ethanol for 24 hours, adding distilled water to the mixture to obtain a solution with an ethanol content of 15%, filtering the mixture , repeated extraction with ether, combining the extracts, evaporating part of the combined ether extraction to a dry residue, dissolving the residue in acetone, followed by determination of the analyte by g liquid chromatography in a 122 cm long column filled with OV-17 sorbent on chromosorb W using a nitrogen-phosphorus detector and helium as a mobile phase at a flow rate of helium of 40 ml / min, air 280 ml / min, hydrogen 2 ml / min, detector temperature 270 ° C, injector 230 ° C, column 185 ° C.
Способ характеризуется длительностью выполнения, недостаточно высокой степенью извлечения анализируемого вещества из биоматериала, относительно низкими точностью и чувствительностью (Комаров П.П., Котлярова Э.Л., Сергеев С.Н. Методика обнаружения тринитротолуола в биологических объектах. // Судебно-медицинская экспертиза. - 1990. - Т.33, №3. - С.26-27).The method is characterized by the duration of execution, the insufficiently high degree of extraction of the analyte from the biomaterial, relatively low accuracy and sensitivity (Komarov P.P., Kotlyarova E.L., Sergeev S.N. Method for the detection of trinitrotoluene in biological objects. // Forensic medical examination . - 1990. - T.33, No. 3. - S.26-27).
Задачей настоящего изобретения является сокращение продолжительности анализа, повышение точности и чувствительности определения, увеличение степени извлечения анализируемого вещества из биологического материала.The objective of the present invention is to reduce the duration of the analysis, increase the accuracy and sensitivity of the determination, increase the degree of extraction of the analyte from biological material.
Поставленная задача достигается с помощью предлагаемого способа, который заключается в том, что биологическую ткань (например, ткань печени) измельчают, двукратно обрабатывают ацетонитрилом (каждый раз в течение 45 минут), ацетонитрильные извлечения объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 16-22°С до сухого остатка, остаток растворяют в смеси растворителей гексан - ацетон (8,5:1,5), хроматографируют в колонке с силикагелем L 40/100μ (минимальный и максимальный размер частиц сорбента) с использованием подвижной фазы гексан - ацетон (8,5:1,5), фракции элюата, содержащие 2,4,6-тринитрометилбензол, объединяют, элюент испаряют, остаток растворяют в системе растворителей ацетонитрил - вода (4:6) и хроматографируют методом ВЭЖХ в колонке с сорбентом «Nova Pack C-18» (насадка в виде двуокиси кремния, обработанной C18, с размером пор 60 А° и содержанием углерода 7%), используя подвижную фазу ацетонитрил - вода (4:6) и диодно-матричный детектор при температуре колонки 20°С и скорости подачи подвижной фазы 1 мл/мин.The problem is achieved using the proposed method, which consists in the fact that the biological tissue (for example, liver tissue) is crushed, treated twice with acetonitrile (each time for 45 minutes), the acetonitrile extracts are combined, evaporated in a stream of air at a temperature of 16-22 ° C to the dry residue, the residue is dissolved in a solvent mixture of hexane - acetone (8.5: 1.5), chromatographed on a column of silica gel L 40 / 100μ (minimum and maximum particle size of the sorbent) using the mobile phase hexane - acetone (8, 5: 1.5) eluate fractions containing 2,4,6-trinitromethylbenzene are combined, the eluent is evaporated, the residue is dissolved in an acetonitrile-water solvent system (4: 6) and chromatographed by HPLC in a column with a Nova Pack C-18 sorbent (nozzle in the form of dioxide silicon-treated C 18, with a pore size of 60 a ° and carbon content of 7%) using a mobile phase acetonitrile - water (4: 6) and diode-array detector at a column temperature of 20 ° C and the feed rate of the mobile phase of 1 ml / min .
Способ осуществляется следующим образом: биологическую ткань, содержащую 2,4,6-тринитрометилбензол, измельчают, дважды настаивают с ацетонитрилом (каждый раз в течение 45 минут), извлечения отделяют от твердых частиц биоматериала, объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 16-22°С до сухого остатка, остаток растворяют в ацетоне, полученный раствор вводят в сорбент, растворитель испаряют, хроматографируют в колонке с силикагелем L 40/100μ с использованием подвижной фазы гексан - ацетон (8,5:1,5), фракции элюата, содержащие 2,4,6-тринитрометилбензол, объединяют, элюент испаряют, остаток растворяют в системе растворителей ацетонитрил - вода (4:6) и хроматографируют методом ВЭЖХ в колонке с сорбентом «Nova Pack C-18», используя подвижную фазу ацетонитрил - вода (4:6) и диодно-матричный детектор при температуре колонки 20°С и скорости подачи подвижной фазы 1 мл/мин.The method is as follows: biological tissue containing 2,4,6-trinitromethylbenzene is crushed, infused with acetonitrile twice (each time for 45 minutes), the extracts are separated from the solid particles of the biomaterial, combined, evaporated in an air stream at a temperature of 16-22 ° C to a dry residue, the residue is dissolved in acetone, the resulting solution is introduced into the sorbent, the solvent is evaporated, chromatographed on a column of silica gel L 40 / 100μ using a mobile phase hexane - acetone (8.5: 1.5), eluate fractions containing 2,4,6-trinitromethylb The benzene is combined, the eluent is evaporated, the residue is dissolved in an acetonitrile-water (4: 6) solvent system and chromatographed by HPLC in a Nova Pack C-18 sorbent column using a mobile phase acetonitrile-water (4: 6) and diode a matrix detector at a column temperature of 20 ° C and a feed rate of the mobile phase of 1 ml / min.
Пример 1Example 1
Качественное определение 2,4,6-тринитрометилбензола в ткани печениQualitative determination of 2,4,6-trinitromethylbenzene in liver tissue
К 10 г мелкоизмельченной свежей трупной ткани печени человека прибавляют 10 мг 2,4,6-тринитрометилбензола, тщательно перемешивают биологическую ткань с веществом, оставляют на 2 часа при температуре 16-18°С. По истечении указанного времени смесь заливают 20 г ацетонитрила, выдерживают 45 минут, периодически перемешивая.10 mg of 2,4,6-trinitromethylbenzene are added to 10 g of finely chopped fresh cadaveric tissue of the human liver, the biological tissue is thoroughly mixed with the substance, left for 2 hours at a temperature of 16-18 ° C. After the specified time, the mixture is poured 20 g of acetonitrile, incubated for 45 minutes, stirring occasionally.
Извлечение отделяют, операцию настаивания повторяют в вышеописанных условиях. Вытяжки объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 16-22°С до сухого остатка, остаток растворяют в 10 мл ацетона. 1 мл полученного раствора смешивают с 1 г силикагеля L 40/100μ и испаряют остатки ацетона из сорбента в токе воздуха.The extract is separated, the infusion operation is repeated under the above conditions. The extracts are combined, evaporated in a stream of air at a temperature of 16-22 ° C to a dry residue, the residue is dissolved in 10 ml of acetone. 1 ml of the resulting solution is mixed with 1 g of silica gel L 40 / 100μ and the remaining acetone from the sorbent is evaporated in a stream of air.
В колонку размером 490×10 мм вносят вначале 9 г силикагеля типа L 40/100μ, а затем, поверх образующегося слоя, - 1 г силикагеля L 40/100μ, содержащего анализируемое вещество, предварительно введенное в виде ацетонового раствора. Хроматографирование осуществляют, используя в качестве элюента систему растворителей гексан - ацетон (8,5:1,5). Элюат собирают отдельными фракциями по 2 мл каждая. Фракции с 5 по 6 включительно объединяют, элюент испаряют в токе воздуха при температуре 16-22°С. Остаток растворяют в 50 мл смеси растворителей ацетонитрил - вода (4:6). 8 мкл полученного раствора вводят в жидкостный хроматограф «Alliance» фирмы «Waters» (США), снабженный диодно-матричным детектором. Процесс хроматографирования осуществляют в колонке размером 150×3,9 мм, заполненной сорбентом с привитой поверхностью «Nova Pack C-18», используя подвижную фазу ацетонитрил - вода (4:6). Скорость подачи подвижной фазы составляет 1 мл/мин, температура колонки 20°С. Оптическую плотность регистрируют при длине волны 229 нм. Качественное определение 2,4,6-тринитрометилбензола осуществляют по величинам характерных значений объема и времени удерживания, которые равны соответственно 7650 мкл и 7,65 мин.First, 9 g of silica gel of type L 40 / 100μ are introduced into a column measuring 490 × 10 mm, and then, on top of the resulting layer, 1 g of silica gel L 40 / 100μ containing the analyte previously introduced in the form of an acetone solution. Chromatography is carried out using a hexane-acetone solvent system (8.5: 1.5) as an eluent. The eluate is collected in separate fractions of 2 ml each. Fractions 5 to 6 inclusive are combined, the eluent is evaporated in a stream of air at a temperature of 16-22 ° C. The residue was dissolved in 50 ml of a solvent mixture of acetonitrile - water (4: 6). 8 μl of the resulting solution was introduced into an Alliance liquid chromatograph (Waters, USA) equipped with a diode array detector. The chromatography process is carried out in a column with a size of 150 × 3.9 mm, filled with a sorbent with a grafted surface "Nova Pack C-18", using the mobile phase acetonitrile - water (4: 6). The feed rate of the mobile phase is 1 ml / min, the column temperature is 20 ° C. The optical density is recorded at a wavelength of 229 nm. Qualitative determination of 2,4,6-trinitromethylbenzene is carried out according to the values of the characteristic values of the volume and retention time, which are respectively 7650 μl and 7.65 min.
Пример 2Example 2
Количественное определение 2,4,6-тринитрометилбензола в ткани печениQuantification of 2,4,6-trinitromethylbenzene in liver tissue
К 10 г мелкоизмельченной свежей трупной ткани печени человека прибавляют 10 мг 2,4,6-тринитрометилбензола, тщательно перемешивают биологическую ткань с веществом и оставляют на 2 часа при температуре 16-18°С. По истечении указанного времени смесь заливают 20 г ацетонитрила, выдерживают 45 минут, периодически перемешивая. Извлечение отделяют, операцию настаивания повторяют в вышеописанных условиях. Вытяжки объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 16-22°С до сухого остатка, остаток растворяют в 10 мл ацетона. 1 мл полученного раствора смешивают с 1 г силикагеля L 40/100μ и испаряют остатки ацетона из сорбента в токе воздуха. В колонку размером 490х10 мм вносят вначале 9 г силикагеля L 40/100μ, а затем, поверх образующегося слоя сорбента, - 1 г силикагеля L 40/100μ, содержащего анализируемое вещество, предварительно введенное в виде ацетонового раствора. Хроматографирование осуществляют, используя в качестве элюента систему растворителей гексан - ацетон (8,5:1,5). Элюат собирают отдельными фракциями по 2 мл каждая. Фракции с 5 по 6 включительно объединяют, испаряют в токе воздуха при температуре 16-22°С. Остаток растворяют в 50 мл смеси растворителей ацетонитрил - вода (4:6). 8 мкл полученного раствора вводят в жидкостный хроматограф «Alliance» фирмы «Waters» (США), снабженный диодно-матричным детектором. Процесс хроматографирования осуществляют в колонке размером 150×3,9 мм, заполненной сорбентом с привитой поверхностью «Nova Pack С-18», используя в качестве подвижной фазы систему растворителей ацетонитрил - вода (4:6). Скорость подачи подвижной фазы составляет 1 мл/мин, температура колонки 20°С. Оптическую плотность регистрируют при длине волны 229 нм.10 mg of 2,4,6-trinitromethylbenzene are added to 10 g of finely ground fresh cadaveric tissue of the human liver, the biological tissue is thoroughly mixed with the substance and left for 2 hours at a temperature of 16-18 ° C. After the specified time, the mixture is poured 20 g of acetonitrile, incubated for 45 minutes, stirring occasionally. The extract is separated, the infusion operation is repeated under the above conditions. The extracts are combined, evaporated in a stream of air at a temperature of 16-22 ° C to a dry residue, the residue is dissolved in 10 ml of acetone. 1 ml of the resulting solution is mixed with 1 g of silica gel L 40 / 100μ and the remaining acetone from the sorbent is evaporated in a stream of air. First, 9 g of L 40 / 100μ silica gel is introduced into a 490 x 10 mm column, and then, on top of the sorbent layer formed, 1 g of L 40/100 μ silica gel containing the analyte previously introduced in the form of an acetone solution. Chromatography is carried out using a hexane-acetone solvent system (8.5: 1.5) as an eluent. The eluate is collected in separate fractions of 2 ml each. Fractions 5 to 6 inclusive are combined, evaporated in a stream of air at a temperature of 16-22 ° C. The residue was dissolved in 50 ml of a solvent mixture of acetonitrile - water (4: 6). 8 μl of the resulting solution was introduced into an Alliance liquid chromatograph (Waters, USA) equipped with a diode array detector. The chromatography process is carried out in a column 150 × 3.9 mm in size, filled with a Nova Pack C-18 grafted surface sorbent using an acetonitrile-water solvent system (4: 6) as the mobile phase. The feed rate of the mobile phase is 1 ml / min, the column temperature is 20 ° C. The optical density is recorded at a wavelength of 229 nm.
Пик на хроматограмме со временем удерживания 7,65 мин (объемом удерживания 7650 мкл) соответствует 2,4,6-тринитрометилбензолу.The peak in the chromatogram with a retention time of 7.65 min (retention volume 7650 μl) corresponds to 2,4,6-trinitromethylbenzene.
Количественное содержание 2,4,6-тринитрометилбензола определяют, исходя из площади хроматографического пика, и пересчитывают на навеску данного вещества, внесенную в биологический материал.The quantitative content of 2,4,6-trinitromethylbenzene is determined based on the area of the chromatographic peak, and is counted on a sample of this substance introduced into the biological material.
Построение калибровочного графикаCalibration plotting
В ряд мерных колб вместимостью 50 мл вносят 1,25, 2,54, 5,0, 10,0, 15,0, 20,0 мл 0,0025% раствора, 5,0, 10,0, 20,0 мл 0,02% раствора 2,4,6-тринитрометилбензола в ацетонитриле, соответственно 18,75, 17,5, 15,0, 10,0, 5,0, 0,0, 15,0, 10,0, 0,0 мл ацетонитрила и доводят объем раствора в каждой колбе до метки водой. 8 мкл каждого из полученных растворов вводят в хроматограф. Хроматографирование осуществляют в колонке размером 150×3,9 мм с сорбентом «Nova Pack C-18», используя в качестве элюента систему растворителей ацетонитрил - вода (4:6). Скорость подачи подвижной фазы составляет 1 мл/мин, температура колонки 20°С.Оптическую плотность регистрируют при длине волны 229 нм. По результатам измерений на хроматографе строят график зависимости площади пика от концентрации определяемого вещества. График линеен в интервале концентраций 5·10-9-6,4·10-7 г.In a series of volumetric flasks with a capacity of 50 ml add 1.25, 2.54, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 ml of a 0.0025% solution, 5.0, 10.0, 20.0 ml 0.02% solution of 2,4,6-trinitromethylbenzene in acetonitrile, respectively 18.75, 17.5, 15.0, 10.0, 5.0, 0.0, 15.0, 10.0, 0, 0 ml of acetonitrile and adjust the volume of the solution in each flask to the mark with water. 8 μl of each of the resulting solutions was introduced into the chromatograph. Chromatography is carried out in a column 150 × 3.9 mm in size with a Nova Pack C-18 sorbent using an acetonitrile-water solvent system (4: 6) as an eluent. The feed rate of the mobile phase is 1 ml / min, the column temperature is 20 ° C. The optical density is recorded at a wavelength of 229 nm. According to the results of measurements on a chromatograph, a graph of the dependence of the peak area on the concentration of the analyte is built. The graph is linear in the concentration range 5 · 10 -9 -6.4 × 10 -7 g
Методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение калибровочного графика, которое в данном случае имеет вид:The least squares method calculates the equation of the calibration graph, which in this case has the form:
S=4938107·C-1575,55,S = 4938107; C-1575.55,
где S - площадь хроматографического пика;where S is the area of the chromatographic peak;
С - концентрация определяемого вещества в анализируемой пробе, мкг.C is the concentration of the analyte in the analyzed sample, mcg.
Результаты количественного определения 2,4,6-тринитрометилбензола в ткани печени представлены в таблице 1.The results of the quantitative determination of 2,4,6-trinitromethylbenzene in the liver tissue are presented in table 1.
Пример 3Example 3
Количественное определение 2,4,6-тринитрометилбензола в ткани легкихQuantification of 2,4,6-trinitromethylbenzene in lung tissue
К 10 г мелкоизмельченной свежей трупной ткани легких человека прибавляют 10 мг 2,4,6-тринитрометилбензола, тщательно перемешивают биологическую ткань с веществом и оставляют на 2 часа при температуре 16-18°С. По истечении указанного времени смесь заливают 20 г ацетонитрила, выдерживают 45 минут, периодически перемешивая. Извлечение отделяют, операцию настаивания повторяют в вышеописанных условиях. Вытяжки объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 18-22°С до сухого остатка, остаток растворяют в 10 мл ацетона. 1 мл полученного раствора смешивают с 1 г силикагеля L 40/100μ и испаряют остатки ацетона из сорбента в токе воздуха. В колонку размером 490×10 мм вносят вначале 9 г силикагеля L 40/100μ, а затем, поверх образовавшегося слоя сорбента,- 1 г силикагеля L 40/100μ, содержащего анализируемое вещество, предварительно введенное в виде ацетонового раствора. Хроматографирование осуществляют, используя в качестве элюента систему растворителей ацетонитрил - вода (4:6). Элюат собирают отдельными фракциями по 2 мл каждая. Фракции с 5 по 6 включительно объединяют, испаряют в токе воздуха при температуре 16-22°С. Остаток растворяют в 50 мл смеси растворителей ацетонитрил - вода (4:6). 8 мкл полученного раствора вводят в жидкостный хроматограф «Alliance» фирмы «Waters» (США), снабженный диодно-матричным детектором. Процесс хроматографирования осуществляют в колонке размером 150×3,9 мм, заполненной сорбентом с привитой поверхностью «Nova Pack С-18», используя в качестве подвижной фазы систему растворителей ацетонитрил - вода (4:6). Скорость подачи подвижной фазы составляет 1 мл/мин, температура колонки 20°С. Оптическую плотность регистрируют при длине волны 229 нм.10 mg of 2,4,6-trinitromethylbenzene are added to 10 g of finely ground fresh cadaveric tissue of human lungs, the biological tissue is thoroughly mixed with the substance and left for 2 hours at a temperature of 16-18 ° C. After the specified time, the mixture is poured 20 g of acetonitrile, incubated for 45 minutes, stirring occasionally. The extract is separated, the infusion operation is repeated under the above conditions. The extracts are combined, evaporated in a stream of air at a temperature of 18-22 ° C to a dry residue, the residue is dissolved in 10 ml of acetone. 1 ml of the resulting solution is mixed with 1 g of silica gel L 40 / 100μ and the remaining acetone from the sorbent is evaporated in a stream of air. First, 9 g of L 40/100 μ silica gel is introduced into a 490 × 10 mm column, and then, on top of the formed sorbent layer, 1 g of L 40/100 μ silica gel containing the analyte previously introduced in the form of an acetone solution is added. Chromatography is carried out using an acetonitrile - water solvent system (4: 6) as an eluent. The eluate is collected in separate fractions of 2 ml each. Fractions 5 to 6 inclusive are combined, evaporated in a stream of air at a temperature of 16-22 ° C. The residue was dissolved in 50 ml of a solvent mixture of acetonitrile - water (4: 6). 8 μl of the resulting solution was introduced into an Alliance liquid chromatograph (Waters, USA) equipped with a diode array detector. The chromatography process is carried out in a column 150 × 3.9 mm in size, filled with a Nova Pack C-18 grafted surface sorbent using an acetonitrile-water solvent system (4: 6) as the mobile phase. The feed rate of the mobile phase is 1 ml / min, the column temperature is 20 ° C. The optical density is recorded at a wavelength of 229 nm.
Пик на хроматограмме со временем удерживания 7,65 мин (объемом удерживания 7650 мкл) соответствует 2,4,6-тринитрометилбензолу.The peak in the chromatogram with a retention time of 7.65 min (retention volume 7650 μl) corresponds to 2,4,6-trinitromethylbenzene.
Количественное содержание 2,4,6-тринитрометилбензола определяют, исходя из площади хроматографического пика, и пересчитывают на навеску данного вещества, внесенную в биологический материал.The quantitative content of 2,4,6-trinitromethylbenzene is determined based on the area of the chromatographic peak, and is counted on a sample of this substance introduced into the biological material.
Построение калибровочного графикаCalibration plotting
Процесс построения калибровочного графика и его уравнение приведены выше в примере 2.The process of constructing a calibration graph and its equation are given above in example 2.
Предлагаемый способ по сравнению с прототипом в 16 раз повышает чувствительность определения в хроматографируемой пробе и в 2 раза в ткани печени, в 1,5 раза увеличивает степень извлечения 2,4,6-тринитрометилбензола из ткани печени (с 61,41% до 90,38%), снижает продолжительность одного анализа в 8 раз (с 25-26 часов до 3,5 часов), характеризуется более высокой точностью (относительная ошибка среднего результата уменьшается в 2 раза).The proposed method in comparison with the prototype 16 times increases the sensitivity of determination in a chromatographic sample and 2 times in liver tissue, 1.5 times increases the degree of extraction of 2,4,6-trinitromethylbenzene from liver tissue (from 61.41% to 90, 38%), reduces the duration of one analysis by 8 times (from 25-26 hours to 3.5 hours), is characterized by higher accuracy (the relative error of the average result is reduced by 2 times).
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006137383/04A RU2319142C1 (en) | 2006-10-23 | 2006-10-23 | Method of determining 2,4,6-trinitromethylbenzene in biological material |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006137383/04A RU2319142C1 (en) | 2006-10-23 | 2006-10-23 | Method of determining 2,4,6-trinitromethylbenzene in biological material |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2319142C1 true RU2319142C1 (en) | 2008-03-10 |
Family
ID=39281031
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006137383/04A RU2319142C1 (en) | 2006-10-23 | 2006-10-23 | Method of determining 2,4,6-trinitromethylbenzene in biological material |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2319142C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2456597C1 (en) * | 2011-04-05 | 2012-07-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" | Method of detecting 2-methoxy-4-allylhyroxybenzene in biological material |
| RU2477479C1 (en) * | 2011-12-12 | 2013-03-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Method of determining n-butyl ether of 2-[4-(5-trifluoromethyl pyridyl-2-oxy)phenoxy]propionic acid in biological material |
| RU2499259C1 (en) * | 2012-08-22 | 2013-11-20 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений Россельхозакадемии (ГНУ ВИЛАР Россельхозакадемии) | Method for measuring organic phase amount in biological mineralised tissue samples |
-
2006
- 2006-10-23 RU RU2006137383/04A patent/RU2319142C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| КОМАРОВ П.П., КОТЛЯРОВА Э.Л., СЕРГЕЕВ С.Н. Судебно-медицинская экспертиза. - 1990, т.33, №3, с.26-27. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2456597C1 (en) * | 2011-04-05 | 2012-07-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" | Method of detecting 2-methoxy-4-allylhyroxybenzene in biological material |
| RU2477479C1 (en) * | 2011-12-12 | 2013-03-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Method of determining n-butyl ether of 2-[4-(5-trifluoromethyl pyridyl-2-oxy)phenoxy]propionic acid in biological material |
| RU2499259C1 (en) * | 2012-08-22 | 2013-11-20 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений Россельхозакадемии (ГНУ ВИЛАР Россельхозакадемии) | Method for measuring organic phase amount in biological mineralised tissue samples |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111855871B (en) | Method for measuring iprovalicarb and fluopyram in tobacco by combination of filtration type solid-phase extraction and supercritical fluid chromatography-mass spectrometry | |
| Wang et al. | An ultra-performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry method for determination of microcystins occurrence in surface water in Zhejiang Province, China | |
| CN109696514B (en) | Method for measuring 12 polyphenol compounds in fresh tobacco leaves | |
| CN107748212B (en) | Method for detecting medicine in goat milk and goat milk product | |
| RU2319142C1 (en) | Method of determining 2,4,6-trinitromethylbenzene in biological material | |
| CN109564147A (en) | System and method for analyzing the analyte for using adsorbent material to extract from sample | |
| Yuan et al. | Analysis of anticancer compound, indole-3-carbinol, in broccoli using a new ultrasound-assisted dispersive-filter extraction method based on poly (deep eutectic solvent)-graphene oxide nanocomposite | |
| RU2395081C2 (en) | Method of detecting 2-methoxy-4-allylhyroxybenzene in biological material | |
| RU2413225C1 (en) | Method of detecting deltamethrin and lambda-cyhalothrin in biological material | |
| CN113533548B (en) | Method for detecting 1-vinyl imidazole in chemical product | |
| CN113341015B (en) | Method for determining triazole fungicide in plant-derived food | |
| RU2300765C1 (en) | Method for determination of n-(benzimidazolyl-2)-o-methylcarbamate in biological material | |
| RU2287812C1 (en) | Method for assay of 2-[4-(5-trifluoromethylpyridyl-2-oxy)phenoxy]propionic acid n-butyl ester in biological material | |
| CN109632781A (en) | The measuring method of anticoccidial feedstuff additive product Content of Chlorogenic Acid and coffee acid content | |
| RU2269780C1 (en) | Method for determination of o-(2,3-dihydro-2,2-dimethyl-7-benzofuranyl)-n-methylcarbamate in biological sample | |
| CN114609298A (en) | Method for determining content of triterpenic acid compounds in poria cocos and application of triterpenic acid compounds | |
| RU2426726C1 (en) | Method of detecting 2-dimethylamino-1,3-bis-(phenylsulphonylthio)propane in biological material | |
| RU2617176C1 (en) | Method for determination of 2,6-bis-[bis-(beta-oxyethyl)-amino]-4,8-di-n-piperidino-pyrimido(5,4-d)pyrimidine in biological material | |
| CN113295800A (en) | Method for determining fluorosulfonyl-Lin metabolite by combined phase chromatography tandem mass spectrometry | |
| Liu et al. | Surfactant-assisted dispersive liquid–liquid micro-extraction combined with magnetic solid-phase extraction for analysis of polyphenols in tobacco samples | |
| RU2153169C1 (en) | Method of determining complex nitrophenol preparation "nitrafen" in biological material | |
| RU2269137C1 (en) | Method for detection of oxybenzene and monomethyl derivatives thereof in biological sample | |
| RU2322674C1 (en) | Method of determining 2,6-bis[bis(beta-hydroxyethyl)amino]-4,8-di-n-pyperidino-pyrimido(5,4-d)pyrimidine in biological material | |
| RU2546294C1 (en) | Method of determining novocaine in biological material | |
| CN111044625A (en) | Novel method for determining related substances in mecobalamin dispersible tablets |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20081024 |