RU2317072C1 - Способ подготовки спермы для внутриматочной инсеминации - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к области медицины, в частности к урологии, андрологии, гинекологии, и касается подготовки спермы для внутриматочной инсеминации. Для этого осуществляют отбор спермы. Добавляют к ней физиологический раствор и центрифугируют дважды по 10 минут при 1500 оборотах в минуту. В полученную массу сперматозоидов вводят перфторан в соотношении 1:3, выдерживают в течение 3-5 минут и вводят полученную смесь в полость матки. Способ обеспечивает увеличение подвижности и дыхательной способности сперматозоидов в сперме мужчин, страдающих азооспермией, и, как следствие, повышает вероятность наступления беременности после внутриматочной инсеминации спермы. 1 табл.

Description

Изобретение относится к области медицины, в частности к урологии, андрологии, гинекологии, и может быть использовано для повышения вероятности наступления беременности при внутриматочной инсеминации.

Проблема бесплодия - важная составляющая часть современной медицины. Это не только медицинская, но и социальная проблема.

Известно, что если частота бесплодных браков достигает или превышает критический уровень 15%, то проблема бесплодия в этом случае приобретает государственное значение. Согласно данным эпидемиологических исследований частота бесплодных пар в настоящее время колеблется до 25%, а в ряде регионов Российской Федерации имеет тенденцию к увеличению. Поэтому лечение бесплодия следует рассматривать как резерв рождения желанных детей и перспективного увеличения репродуктивного потенциала населения РФ.

Таким образом, бесплодие имеет значение не только для конкретных индивидуумов, но и оказывает влияние на общество в целом, снижая социальную и профессиональную активность этой группы населения.

Последние десятилетия XX столетия характеризуются значительными достижениями в области диагностики различных форм бесплодия. Наименее решённый аспект в проблеме бесплодного брака является лечение различных форм мужского бесплодия.

Методы вспомогательных репродуктивных технологий и их модификации не всегда позволяют решить проблему отцовства при олигозооспермии, астенозооспермии и т.д. К примеру, вероятность беременности после инсеминации составляет 10-15%. На сегодняшний день нет четкого, научно обоснованного алгоритма, раскрывающего этиологию, патогенез различных нарушений сперматогенеза и дающего эффективные рекомендации по диагностике и лечению различных форм мужского бесплодия.

Следовательно, дальнейшие перспективы в вопросах восстановления и сохранения репродуктивной функции человека должны характеризоваться фундаментальными исследованиями, позволяющими оценить механизмы процессов овуляции, сперматогенеза, оплодотворения, имплантации яйцеклетки и эмбриона (знание вышеуказанных механизмов обусловят эффективное проведение целого ряда профилактических и лечебных мероприятий, направленных на восстановление и сохранение репродуктивной функции), разработкой новых медицинских технологий, методов вспомогательной репродукции, новых препаратов и схем стимуляции овуляции и сперматогенеза, совершенствование методов организации лечебного процесса.

Известен способ повышения оплодотворяющей способности спермы [Заявка на изобретение №2000119029, МПК А61D 19/02; Деряженцев В.И., Бортникова А.М., Шлыгин А.Н., Шейко Е.И., заключающийся введением в среду биологически активного вещества (БАВ) - синтетического аналога простагландина F2α-натриевой соли клопростенола в концентрации 200 мкг на 100 мл разбавленной спермы быков.

Недостатком способа является то, что синтетический аналог простагландина F2α-натриевой соли клопростенола обладает способностью проникать через неповрежденную кожу, в связи с чем следует соблюдать осторожность в работе с препаратом, особенно женщинам детородного возраста и астматикам. Простагландины F2 альфа могут вызывать бронхиоспазм у людей.

Способ ограничен в применении и не позволяет его использование при астенозооспермии.

Известен способ улучшения качества спермы при патоспермии в программе экстракорпорального оплодотворения [Патент RU №2205047, М. кл. А61N 5/067; Гаврилов Ю.А., Кузьмичев Л.Н., Леонов Б.В., Левчук Т.Н., БИПМ №2205047, МПК A61N 5/067, БИМП №15, 27.05.03, с.353], заключающийся в том, что больному бесплодием проводят в течение двух недель: 7-10 процедур лазерной стимуляции в импульсном режиме предстательной железы, лазерную стимуляцию проводят путем установления датчиков одновременно на промежность и надлобковую область с частотой 0,6 кГц, мощностью 3,5 Вт, длительностью 8-10 минут, и яичек с частотой 0,3 кГц, мощностью 1,5 Вт, длительностью 7-9 минут, 5-7 процедур стимулирующего массажа простаты. Назначают: аминокислотный хелат цинка по 22 мг и селен по 200 мкг 2 раза в сутки, пурегон по 50 ME внутримышечно ежедневно в течение месяца.

Недостатком способа является то, что лазеротерапия имеет противопоказания при острых воспалительных процессах, злокачественных новообразованиях и туберкулезе. Кроме того, назначение пурегона противопоказано при выраженных нарушениях функции печени и/или почек. Противопоказаниями хелата цинка являются: острый гломерулонефрит, обострение язвенной болезни, брадикардия. Способ ограничен в применении и не позволяет его использование при астенозооспермии.

Известен способ подготовки спермы к внутриматочной инсеминации, включающий забор спермы, подготовку к оплодотворению по методике «swim up», заключающейся в отмывании сперматозоидов от семенной плазмы (семенная плазма содержит вещества, подавляющие активность сперматозоидов) в физиологическом растворе путем двукратного центрифугирования по 10 минут при 1500 оборотах в минуту.

Проводят искусственную инсеминацию спермой мужа, которую вводят во влагалище женщины без полового акта. В результате весь объем спермы попадает в область зева шейки матки, а не его незначительная часть, как это происходит при половом акте. Соответственно, в несколько раз повышается вероятность зачатия. В день овуляции обработанная и сконцентрированная сперма мужа в питательной среде через шейку матки вводится в полость матки.

Если после 6-ой попытки беременность не наступила, то переходят к следующему методу оплодотворения.

Процедура внутриматочной инсеминации безболезненна, так как сперма вводится с помощью специального катетера с очень маленьким диаметром, который беспрепятственно проходит через канал шейки матки. Продолжительность внутриматочной инсеминации занимает около 2 минут. После выполнения процедуры женщина находится в горизонтальном положении в течение 20-30 минут [Бесплодный брак. Методы вспомогательных репродуктивных технологий. Руководство для врачей под редакцией В.И.Кулакова М., Геотар медиа 2005 год, стр.441-444].

Недостатком способа является то, что эффективность способа составляет всего 10-15%, а также удовлетворительное качество спермы - количество подвижных сперматозоидов должно составлять более 10 млн. на инсеминацию. Способ нельзя применять при астенозооспермии - патологическом снижении количества подвижных сперматозоидов.

ЗАДАЧА ДАННОГО ИЗОБРЕТЕНИЯ: разработка возможности применения внутриматочной инсеминации при астенозооспермии - снижении количества подвижных сперматозоидов путем улучшения качества спермы за счет увеличения подвижности сперматозоидов и их дыхательной способности, что позволяет увеличить вероятность наступления беременности после внутриматочной инсеминации.

Поставленная задача достигается тем, что проводят подготовку спермы для внутриматочной инсеминации путем забора спермы, добавления физиологического раствора и двухкратного центрифугирования смеси по 10 минут при 1500 оборотах в минуту. После центрифугирования в полученную массу сперматозоидов вводят перфторан в соотношение 1:3, выдерживают в течение 3-5 минут, после чего вводят в полость матки.

НОВИЗНА СПОСОБА:

- После центрифугирования полученную массу сперматозоидов смешивают с перфтораном для улучшения качества спермы: увеличения активности живых сперматозоидов и их дыхательной способности.

- Выдерживают в течение 3-5 мин, что обеспечивает более полное взаимодействие сперматозоидов с перфтораном, и вводят полученную смесь в полость матки.

Нами впервые перфторан был применен для лечения секреторной формы мужского бесплодия. При смешивании перфторана и спермы отмечено улучшение ее качественных показателей, получен новый технический результат: увеличение числа подвижных сперматозоидов в эякуляте, увеличение дыхательной способности сперматозоидов, а следовательно, оплодотворяющей способности, резистентности, увеличение расчетного показателя Фарриса, что позволяет увеличить количество оплодотворений на 60-70 %.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить вероятность наступления беременности после внутриматочной инсеминации путем улучшения качества спермы, увеличения двигательной активности сперматозоидов, что делает его применимым при астенозооспермии - патологическом снижении количества подвижных сперматозоидов.

Перфторан - перфторуглеродное соединение - эмульсия-кровезаменитель, обладающий газотранспортной функцией, улучшающий газообмен и метаболизм на уровне тканей, повышающий кислородный транспорт крови, обладающий мембраностабилизирующей функцией, восстанавливающий центральную гемодинамику, обладающий протекторным действием на миокард и блокирующий медленно входящие токи. Обладает сорбционными, диуретическими свойствами, улучшает динамику кровотока и переферическую микроциркуляцию крови. Кислородная емкость перфторана в 3 раза выше кислородной емкости цельной крови (Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Иваницкий Г.Р., Пущино; 1999; 1: с.225.; Местное применение перфторана в лечении больных распространенным гнойным перитонитом. Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино; 2001, с.137-141; Биофизические основы создания перфторуглеродных сред и газотранспортных кровезаменителей (обзор) / Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино; 2001, с.44-48).

Показания: применяется в качестве кровезаменителя с газотранспортной функцией при шоковых состояниях, больших кровопотерях, множественных травмах, ожогах больших поверхностей тела, циррозах печени, множественных скелетных травмах, отравлениях угарным газом, комбинированных поражениях, перитонитах, состояниях клинической смерти, а также в трансплантологии при пересадке органов.

Применение перфторана с целью улучшения качества спермы, повышения жизнеспособности и активности сперматозоидов для повышения эффективности оплодотворения яйцеклетки ранее не использовалось.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ.

Подготовка спермы.

Необходимо сексуальное воздержание от 2 до 6 дней (но не более 6-ти дней).

Перед сдачей спермы нужно, чтобы мужчина помочился для прочистки уретры.

Половой орган и руки должны быть чистыми.

Путем мастурбации сперма собирается в специальный флакон и через 20-30 минут после разжижения начинается её подготовка по следующей методике.

- Отмывание сперматозоидов от семенной плазмы потому, что семенная плазма содержит вещества, подавляющие активность сперматозоидов. Для чего в сперму добавляют физиологический раствор и проводят двукратное центрифугирование по 10 минут при 1500 оборотах в минуту. Не активные сперматозоиды, семенная плазма, клеточные отбросы при этом оседают, а активные сперматозоиды поднимаются наверх.

- Забор сперматозоидов из пробирки проводят лабораторной пипеткой и смешивают с перфтораном в соотношении 3 части перфторана и 1 часть массы сперматозоидов.

- Выдерживают обработанную сперму в течение 3-5 минут.

Проводят процедуру инсеминации на обычном гинекологическом кресле по общепринятой технологии.

В день овуляции (стимулированный или натуральный цикл) обработанная и сконцентрированная сперма мужа через шейку матки вводится в полость матки. Процедура внутриматочной инсеминации безболезненна, так как сперма вводится с помощью специального катетера с очень маленьким диаметром, который беспрепятственно проходит через канал шейки матки.

Продолжительность внутриматочной инсеминации занимает около 2 минут. После выполнения процедуры женщина находится в горизонтальном положении в течение 20-30 минут.

Если после 6-ой попытки беременность не наступила, то переходят к другим методам оплодотворения.

При использовании спермы мужа этот способ эффективен только тогда, когда сперма отвечает определенным качественным показателям.

Если в сперме число подвижных сперматозоидов снижено, что бывает при астенозооспермии, то это не позволяет рассчитывать на возможность оплодотворения естественным путем или путем внутриматочной инсеминации и требуется улучшить качество спермы, чтобы повысить вероятность оплодотворения. Женщина при этом должна быть здорова.

Нами проведено обследование 11 бесплодных пар, проживших в браке от 3 до 12 лет. Причина бесплодия во всех случаях - астенозооспермия. Проводимая ранее процедура внутриматочной инсеминации была безуспешной.

Проведено лечение предложенным способом. Оплодотворение и развитие беременности наступило у 7 пар. В течение 1-4 попыток от начала лечения.

Таблица
Показатели спермограммы
До введения перфторана	После введения перфторана
	Соотношение количества массы сперматозоидов к перфторану
	1:1	1:2	1:3	1:4
Нормокинезис 32%	39%	46%	62%	62%
Нормокинезис 26%	32%	41%	56%	56%
Нормокинезис 18%	24%	29%	48%	48%

Как видно из результатов таблицы оптимальным является введение перфторана в соотношении 1:3, так как при данном разведении максимально увеличивается количество активно подвижных сперматозоидов. При более высоком разведении количество активно подвижных сперматозоидов остается неизменным.

Пример 1. Семейная пара В., 25 и 33 лет. Живут в браке 8 лет. Брак бесплодный. При обследовании у гинеколога - жена здорова. Муж наблюдается у врача-уролога по поводу бесплодия в браке в течение 5 лет. В анамнезе - хронический простатит, эпидидимит. По данному поводу принимает лечение в настоящее время.

При исследовании эякулята: количество сперматозоидов - 69 млн. (в норме - более 40 млн.). Живых - 52% (норма - 89-90%). Нормокинезис (активно поступательные движения) - 42% (норма - более 80%). Дыхательная способность сперматозоидов - 11 минут (норма 23-75 минут). Показатель Фарриса - 28,9.

Заключение: значительное снижение двигательной активности сперматозоидов.

Было принято решение о проведении внутриматочной инсеминации предложенным способом.

Подготовку спермы для внутриматочной инсеминации проводили путем забора спермы, отделения сперматозоидов от семенной жидкости при разведении физраствором и центрифугировании. Отмытые сперматозоиды смешивали с перфтораном в соотношении 1:3, выдерживали в течение 5 минут, полученную смесь вводили в полость матки. Также провели исследование подготовленной и обработанной перфтораном спермы: количество сперматозоидов - 69 млн. Живых - 52%. Нормокинезис - 77%. Дыхательная способность сперматозоидов - 42 минуты (норма 23-75 минут). Показатель Фарриса - 53,1.

Через 18 дней после процедуры инсеминации супруге пациента проведен тест на беременность. Получен положительный результат.

Пример 2. Семейная пара Р., 32 и 33 лет. Живут в браке 9 лет. Брак бесплодный. При обследовании у гинеколога - жена здорова. Муж наблюдается у врача - уролога по поводу хронического простатита.

При исследовании эякулята: количество сперматозоидов - 86 млн. (в норме - более 40 млн.). Живых - 68% (норма - 89-90%). Нормокинезис (активно поступательные движения) - 44% (норма - более 80%). Дыхательная способность сперматозоидов - 17 минут (норма 23-75 минут). Показатель Фарриса - 37,8.

Заключение: значительное снижение двигательной активности сперматозоидов.

Было принято решение о проведении внутриматочной инсеминации.

Подготовку спермы для внутриматочной инсеминации проводили путем забора спермы, отделения сперматозоидов от семенной жидкости при разведении физраствором и центрифугировании. Отмытые сперматозоиды смешивали с перфтораном в соотношении 1:3, выдерживали в течение 3 минут, полученную смесь вводили в полость матки. Также провели исследование подготовленной и обработанной перфтораном спермы: количество сперматозоидов - 86 млн. Живых - 68%. Нормокинезис - 79%. Дыхательная способность сперматозоидов - 29 минут. Показатель Фарриса - 67,9.

Через 18 дней после процедуры инсеминации супруге пациента проведен тест на беременность. Получен положительный результат.

Пример 3. Семейная пара И., 29 и 36 лет. Живут в браке 12 лет. Брак бесплодный. При обследовании у гинеколога - жена здорова. Муж наблюдается у врача - уролога.

В анамнезе - перенес смешанный (микст-инфекцию) уреаплазменно-хламидийно-трихомонадный уретрит 7 лет назад, который осложнился орхоэпидидимитом. По данному поводу принимал лечение, которое не закончил.

При исследовании эякулята: количество сперматозоидов - 160 млн. (в норме - более 40 млн.). Живых - 56% (норма - 80-90%). Нормокинезис (активно поступательные движения) - 32% (норма - более 80%). Дыхательная способность сперматозоидов - 10 минут (норма 23-75 минут). Показатель Фарриса - 51,2. Исследование подготовленной и обработанной перфтораном спермы: количество сперматозоидов - 160 млн. Живых - 56%. Нормокинезис - 79%. Дыхательная способность сперматозоидов - 29 минут. Показатель Фарриса - 126,4.

Заключение: значительное снижение двигательной активности сперматозоидов.

Было принято решение о проведении внутриматочной инсеминации.

Подготовку спермы для внутриматочной инсеминации проводили путем забора спермы, отделения сперматозоидов от семенной жидкости при разведении физраствором и центрифугировании. Отмытые сперматозоиды смешивали с перфтораном в соотношении 1:3, выдерживали в течение 5 минут, полученную смесь вводили в полость матки.

Только после третьей попытки инсеминации проведенный тест на беременность дал положительный результат.

В результате добавления перфторана повышается качество спермы, а именно увеличивается подвижность сперматозоидов и их дыхательная способность, что повышает вероятность наступления беременности после внутриматочной инсеминации.

Способ позволяет применять внутриматочную инсеминацию при астенозооспермии.

Claims (1)

1. Способ подготовки спермы для внутриматочной инсеминации, включающий забор спермы, добавление физиологического раствора и двухкратное центрифугирование по 10 мин при 1500 оборотах в минуту, отличающийся тем, что в полученную после центрифугирования массу сперматозоидов вводят перфторан в соотношении 1:3, выдерживают в течение 3-5 мин и вводят полученную смесь в полость матки.