RU2308036C1 - Method of individual estimation of sensitivity of mouth microflora to antimicrobial agents - Google Patents

Method of individual estimation of sensitivity of mouth microflora to antimicrobial agents Download PDF

Info

Publication number
RU2308036C1
RU2308036C1 RU2006112692/15A RU2006112692A RU2308036C1 RU 2308036 C1 RU2308036 C1 RU 2308036C1 RU 2006112692/15 A RU2006112692/15 A RU 2006112692/15A RU 2006112692 A RU2006112692 A RU 2006112692A RU 2308036 C1 RU2308036 C1 RU 2308036C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
microflora
antimicrobial agent
sensitivity
urea
test
Prior art date
Application number
RU2006112692/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
нцев Виталий Анатольевич Рум (RU)
Виталий Анатольевич Румянцев
н Лазарь Карленович Еса (RU)
Лазарь Карленович Есаян
Мари Владимировна Юсуфова (RU)
Мария Владимировна Юсуфова
Елена Владимировна Битюкова (RU)
Елена Владимировна Битюкова
Светлана Николаевна Громова (RU)
Светлана Николаевна Громова
Екатерина Витальевна Слободина (RU)
Екатерина Витальевна Слободина
Original Assignee
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава) filed Critical Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава)
Priority to RU2006112692/15A priority Critical patent/RU2308036C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2308036C1 publication Critical patent/RU2308036C1/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

FIELD: stomatology.
SUBSTANCE: one compares amplitudes of test sugar (Ac) and urea (Ak) before and after use of antimicrobial agent (ΔAs=A10-A2s and ΔAu=A1u-A2u). Test sugar pH curves are obtained by stimulating acid-producing mouth cavity microflora with 47% saccharose solution and urea pH curves are obtained by stimulating ammonia-producing microflora with 8% urea solution. Individual feature of sensitivity of mouth microflora to antimicrobial agents associated with its qualitative composition is determined from asymmetry coefficient obtained from formula: Ka = ΔAu/ΔAs and individual feature associated with its quantitative composition is determined from coefficient of prevailing effect obtained from formula: Kpe = [(A1u+A1s)/2]/[(A2u+A2s)/2]. Coefficient values are then compared with reference values obtained from reference group and individual sensitivities of mouth microflora to antimicrobial agents are estimated as difference of these values.
EFFECT: accelerated estimation and enabled differentiation of estimation according to qualitative and quantitative characteristics.
1 dwg

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии.The invention relates to medicine, namely to dentistry.

Главной причиной развития основных стоматологических заболеваний: кариеса и воспалительных заболеваний пародонта является микрофлора полости рта. Развитие кариеса связано, главным образом, с метаболической активностью кислотопродуцирующих микроорганизмов (Streptococcus mutans и др.), перерабатывающих углеводы в процессе гликолиза в конечные продукты - органические кислоты (лактат, пируват и др.). Их обильное выделение микрофлорой зубного налета смещает его реакцию и реакцию омывающей смешанной слюны в кислую сторону.The main reason for the development of major dental diseases: caries and inflammatory periodontal diseases is the microflora of the oral cavity. The development of caries is mainly associated with the metabolic activity of acid-producing microorganisms (Streptococcus mutans and others), which process carbohydrates during glycolysis into final products - organic acids (lactate, pyruvate, etc.). Their abundant release of plaque by microflora shifts its reaction and the reaction of washing mixed saliva to the acid side.

Воспалительные заболевания пародонта связаны, в основном, с жизнедеятельностью протеолитической анаэробной микрофлоры (Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia и др). Последняя в процессе метаболизма азотсодержащих веществ (карбамида, L-аргинина, нитратов, амидов аминокислот) продуцирует аммиак, который смещает реакцию в полости рта в щелочную сторону.Inflammatory periodontal diseases are associated mainly with the activity of proteolytic anaerobic microflora (Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, etc.). The latter during the metabolism of nitrogen-containing substances (urea, L-arginine, nitrates, amino acid amides) produces ammonia, which shifts the reaction in the oral cavity to the alkaline side.

Борьба с патогенной микрофлорой является важным звеном профилактики и лечения кариеса и воспалительных заболеваний пародонта. С этой целью используются гигиенические и противомикробные средства. Однако их эффективность у каждого конкретного пациента существенно зависит от индивидуального качественного и количественного состава ротовой микрофлоры с учетом действующих в полости рта собственных факторов защиты организма. Поэтому для проведения оптимальных (наиболее эффективных и безвредных) противомикробных профилактики и лечения основных стоматологических заболеваний требуется индивидуальный выбор того или иного препарата, его минимальной дозы или концентрации, формы и длительности курса применения. Это особенно важно в связи с риском аллергизации организма, развитием дисбактериоза в полости рта и возможными другими побочными действиями противомикробных и гигиенических средств при их применении без учета индивидуальной чувствительности к ним ротовой микрофлоры.The fight against pathogenic microflora is an important link in the prevention and treatment of caries and inflammatory periodontal diseases. For this purpose, hygienic and antimicrobial agents are used. However, their effectiveness in each individual patient significantly depends on the individual qualitative and quantitative composition of the oral microflora, taking into account the body's own protective factors acting in the oral cavity. Therefore, for the optimal (most effective and harmless) antimicrobial prophylaxis and treatment of major dental diseases, an individual choice of a drug, its minimum dose or concentration, form and duration of the course of application is required. This is especially important due to the risk of allergization of the body, the development of dysbacteriosis in the oral cavity and possible other side effects of antimicrobial and hygienic agents when used without taking into account the individual sensitivity of oral microflora to them.

Прототипом заявляемого способа авторы считают бактериологический метод или метод диффузии в агар с использованием бумажных дисков, подразумевающий взятие образцов микрофлоры из полости рта и их посев на питательные среды с последующей инкубацией в присутствии антибиотиков (например: «Лабораторные методы исследования в клинике»: справочник под ред. проф. В.В.Меньшикова. - М.: - Медицина. - 1987. - С.341-342).The authors consider the prototype of the proposed method a bacteriological method or a method of diffusion into agar using paper discs, which involves taking microflora samples from the oral cavity and plating them on nutrient media, followed by incubation in the presence of antibiotics (for example: “Laboratory research methods in the clinic”: reference ed Prof. V.V. Menshikov. - M .: - Medicine. - 1987. - P.341-342).

Указанный способ заключается в том, что со спинки языка, зубного налета или пародонтальных карманов берут образцы микрофлоры и в виде взвеси в стерильном физиологическом растворе наносят в количестве 1 мл на поверхность плотной питательной среды, предназначенной для культивирования аэробной микрофлоры, в чашке Петри. Взвесь равномерно распределяют по чашке, остатки жидкости отсасывают пипеткой. Чашку подсушивают при комнатной температуре 30-40 мин, после чего на поверхность чашки с помощью пинцета помещают бумажные диски, пропитанные противомикробными средствами. В качестве таких дисков используют изготовленные заводским путем диски, содержащие одну концентрацию антибиотика, соответствующую рекомендациям ВОЗ (диски с противомикробными и гигиеническими средствами не производятся). Чашку инкубируют при 37°С в течение 18 часов в перевернутом вверх дном положении в термостате. Учет результатов производят, измеряя с помощью линейки диаметры зоны задержки роста микробов вокруг дисков, включая диаметр диска.The specified method consists in the fact that microflora samples are taken from the back of the tongue, plaque or periodontal pockets and applied as a suspension in sterile physiological saline in an amount of 1 ml to the surface of a dense nutrient medium intended for the cultivation of aerobic microflora in a Petri dish. The suspension is evenly distributed over the cup, the remaining liquid is sucked off with a pipette. The cup is dried at room temperature for 30-40 minutes, after which paper discs soaked with antimicrobial agents are placed on the surface of the cup with tweezers. As such disks, factory-made disks are used containing one concentration of antibiotic that meets WHO recommendations (disks with antimicrobial and hygiene products are not manufactured). The cup is incubated at 37 ° C for 18 hours in an upside down position in a thermostat. The results are taken into account by measuring with a ruler the diameters of the microbial growth inhibition zone around the disks, including the diameter of the disk.

Недостатками этого метода являются его низкая точность из-за того, что оценка чувствительности проводится вне полости рта, без учета естественных факторов защиты организма, а также без учета функциональной активности микрофлоры. При этом активность анаэробной микрофлоры никак не учитывается, поскольку эта микрофлора не культивируется на указанной питательной среде. Оценка чувствительности микрофлоры возможна только к антибиотикам, поскольку бумажные диски с антисептиками и гигиеническими средствами не производятся.The disadvantages of this method are its low accuracy due to the fact that sensitivity assessment is carried out outside the oral cavity, without taking into account the natural factors of body protection, as well as without taking into account the functional activity of microflora. At the same time, the activity of anaerobic microflora is not taken into account in any way, since this microflora is not cultivated on the indicated nutrient medium. An assessment of the sensitivity of microflora is possible only for antibiotics, since paper disks with antiseptics and hygiene products are not produced.

Длительность метода велика (высушивание - 30-40 мин, инкубация 18 часов). Он также дорог из-за необходимости использования питательных сред, дисков с антибиотиками и лабораторного оборудования (термостат, средства стерилизации и др.) Доступность метода ограничена, так как для его реализации требуется микробиологическая лаборатория.The duration of the method is long (drying - 30-40 minutes, incubation 18 hours). It is also expensive because of the need to use nutrient media, antibiotic discs and laboratory equipment (thermostat, sterilization agents, etc.). The availability of the method is limited, since its implementation requires a microbiological laboratory.

Для оптимизации воздействия на ротовую микрофлору противомикробных и гигиенических средств и с целью устранения указанных недостатков прототипа предлагаем способ индивидуальной оценки чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробным средствам. Техническим результатом предлагаемого способа является оценка действия на кислото- и аммиак-продуцирующую микрофлору полости рта противомикробных и гигиенических средств с учетом количественного и качественного состава этой микрофлоры у индивидуума.To optimize the impact on the oral microflora of antimicrobial and hygiene products and to eliminate the aforementioned disadvantages of the prototype, we propose a method for individually evaluating the sensitivity of the oral microflora to antimicrobial agents. The technical result of the proposed method is to evaluate the effect on the acid and ammonia-producing microflora of the oral cavity of antimicrobial and hygiene products, taking into account the quantitative and qualitative composition of this microflora in an individual.

Способ заключается в сравнении амплитуд тестовых кривых рН в средах полости рта до и после применения противомикробного средства. Получают тестовые кривые рН, характеризующие метаболическую активность кислотопродуцирующей и аммиак-продуцирующей микрофлоры. Далее для выявления индивидуальных особенностей чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству проводят сравнение полученных значений амплитуд с эталонными значениями для данного средства.The method consists in comparing the amplitudes of the test pH curves in the environment of the oral cavity before and after the use of an antimicrobial agent. Test pH curves characterizing the metabolic activity of acid-producing and ammonia-producing microflora are obtained. Further, in order to identify individual characteristics of the sensitivity of the oral microflora to the antimicrobial agent, the obtained amplitudes are compared with the reference values for this agent.

Для реализации способа измеряют рН смешанной слюны (зубного или язычного налета) у пациента любым доступным методом (электрометрический, индикаторный, колориметрический) (начальное значение рН), затем он полощет рот в течение 30 секунд 15 мл 8% раствора карбамида (тестовый раствор карбамида), затем в последующие 15 минут определяют рН смешанной слюны и фиксируют его максимальное значение. По разнице между максимальным и начальным значениями определяют амплитуду первой тестовой карбамидной кривой изменения рН в щелочную сторону (A1k).To implement the method, the pH of the mixed saliva (dental or lingual plaque) is measured in a patient using any available method (electrometric, indicator, colorimetric) (initial pH value), then he rinses his mouth for 30 seconds with 15 ml of an 8% urea solution (urea test solution) , then in the next 15 minutes, the pH of the mixed saliva is determined and its maximum value is fixed. The difference between the maximum and initial values determines the amplitude of the first test urea curve of pH changes to the alkaline side (A 1k ).

После восстановления за счет буферных свойств слюны ее рН к начальному значению (в среднем через 40 мин) пациент полощет рот в течение 30 с 47% раствором сахарозы, затем в последующие 15 минут определяют рН смешанной слюны и фиксируют его минимальное значение. По разнице между минимальным и начальным значениями определяют амплитуду первой тестовой сахарозной кривой изменения рН в кислую сторону (A1c).After restoration, due to the buffering properties of saliva, its pH to its initial value (on average after 40 minutes), the patient rinses his mouth for 30 with a 47% sucrose solution, then in the next 15 minutes the pH of the mixed saliva is determined and its minimum value is fixed. The difference between the minimum and initial values determines the amplitude of the first test sucrose curve of pH changes in the acidic direction (A 1c ).

Далее пациент использует тестовую дозу противомикробного средства (например, ротовую ванночку с 15 мл метрогила в течение 1 минуты), после чего вновь определяют начальное значение рН и проводят, как и в первом случае, последовательную активацию микрофлоры тестовыми растворами карбамида и сахарозы. Рассчитывают амплитуды вторых тестовых карбамидной и сахарозной кривых рН (А2k и А) (см. чертеж).Then the patient uses a test dose of an antimicrobial agent (for example, an oral bath with 15 ml of metrogil for 1 minute), after which the initial pH is determined again and, as in the first case, microflora is sequentially activated with test solutions of urea and sucrose. The amplitudes of the second test urea and sucrose pH curves (A 2k and A 2c ) are calculated (see drawing).

Рассчитывают разность между первой и второй амплитудами тестовых карбамидных кривых рН:The difference between the first and second amplitudes of the test urea pH curves is calculated:

Figure 00000002
Figure 00000002

Индивидуальную оценку чувствительности аммиак-продуцирующей ротовой микрофлоры к противомикробному средству проводят по выраженности (силе) противомикробного действия (по цифровому значению ΔАк). Этот критерий характеризует степень подавления тестовой дозой противомикробного средства метаболической активности аммиак-продуцирующей ротовой микрофлоры у конкретного пациента.An individual assessment of the sensitivity of ammonia-producing oral microflora to an antimicrobial agent is carried out according to the severity (strength) of the antimicrobial effect (according to the digital value Δ A k ). This criterion characterizes the degree of suppression by a test dose of an antimicrobial agent of the metabolic activity of ammonia-producing oral microflora in a particular patient.

Количество растворов карбамида и сахарозы, активирующих ротовую микрофлору, длительность их экспозиции и концентрации подобраны опытным путем так, чтобы получать наиболее выраженные изменения рН в средах полости рта в щелочную и кислую стороны у пациентов референтной группы (с удовлетворительной гигиеной полости рта, обычным составом ротовой микрофлоры, без патологии со стороны зубов и пародонта). В качестве тестовой дозы противомикробного средства используют дозу, рекомендуемую производителем для клинического применения.The number of urea and sucrose solutions that activate the oral microflora, the duration of their exposure and concentration are selected experimentally so as to obtain the most pronounced pH changes in the oral media in the alkaline and acidic sides in patients of the reference group (with satisfactory oral hygiene, the usual composition of the oral microflora , without pathology from the teeth and periodontium). As a test dose of an antimicrobial, use the dose recommended by the manufacturer for clinical use.

Рассчитывают разность между первой и второй амплитудами тестовых сахарозных кривых рН:The difference between the first and second amplitudes of the test sucrose pH curves is calculated:

Figure 00000003
Figure 00000003

Индивидуальную оценку чувствительности кислотопродуцирующей ротовой микрофлоры к противомикробному средству проводят по выраженности (силе) противомикробного действия (по цифровому значению ΔАс).An individual assessment of the sensitivity of an acid-producing oral microflora to an antimicrobial agent is carried out according to the severity (strength) of the antimicrobial effect (according to the digital value Δ A s ).

Для выявления индивидуальных особенностей чувствительности ротовой микрофлоры по ее качественному составу к противомикробному средству рассчитывают индивидуальный коэффициент асимметрии (Кк), как частное от деления ΔАк и ΔАс:To identify the individual characteristics of the sensitivity of the oral microflora by its qualitative composition to the antimicrobial agent, an individual asymmetry coefficient (K k ) is calculated as the quotient of the division of Δ A k and Δ A s :

Figure 00000004
Figure 00000004

Сравнение индивидуального коэффициента асимметрии с эталонным его значением (Кэ) для данного противомикробного средства характеризует индивидуальную особенность чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству по ее качественному составу (показатель ИЧРМкач):Comparison of the individual coefficient of asymmetry with its reference value (K e ) for a given antimicrobial agent characterizes the individual characteristic of the sensitivity of the oral microflora to the antimicrobial agent in its qualitative composition (HDI quality indicator):

Figure 00000005
Figure 00000005

где ИЧРМкач - качественный показатель индивидуальной чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству.where HDI quality is a qualitative indicator of the individual sensitivity of the oral microflora to an antimicrobial agent.

При этом эталонное значение (Кэ) получают заранее в специальном исследовании, как среднее при оценке коэффициента асимметрии для данного противомикробного средства в референтной группе обследуемых, имеющих удовлетворительную гигиену полости рта и обычную (нормальную) микрофлору и не имеющих патологии зубов и пародонта.In this case, the reference value (K e ) is obtained in advance in a special study, as the average when evaluating the asymmetry coefficient for a given antimicrobial agent in the reference group of subjects who have satisfactory oral hygiene and normal (normal) microflora and who have no tooth or periodontal pathology.

Величина показателя ИЧРМкач характеризует индивидуальную качественную особенность чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству, которую необходимо учитывать при выборе оптимального противомикробного средства для данного пациента.The value of the indicator ICHRM Kutch characterizes the individual quality of the oral microflora is particularly sensitive to the antimicrobial agent, which must be considered when choosing the optimal antimicrobial agents for a given patient.

Для выявления индивидуальных особенностей чувствительности ротовой микрофлоры по ее количественному составу к противомикробному средству рассчитывают коэффициент его подавляющего действия (Кпд) у индивидуума:To identify the individual characteristics of the sensitivity of the oral microflora by its quantitative composition to the antimicrobial agent, the coefficient of its suppressive effect (K pd ) in an individual is calculated:

Figure 00000006
Figure 00000006

Сравнение индивидуального коэффициента Кпд с его эталонным значением (Кпдэ) для данного противомикробного средства характеризует индивидуальную особенность чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству по ее количественному составу (показатель ИЧРМкол):Comparison of the individual coefficient K PD with its reference value (K PDE ) for a given antimicrobial agent characterizes the individual characteristic of the sensitivity of the oral microflora to the antimicrobial agent according to its quantitative composition (indicator HDI count ):

Figure 00000007
Figure 00000007

где ИЧРМкол - количественный показатель индивидуальной чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству.where HDI count is a quantitative indicator of the individual sensitivity of the oral microflora to the antimicrobial agent.

При этом эталонное значение (Кпдэ) получают заранее в отдельном исследовании, как среднее при оценке коэффициента подавляющего действия для данного противомикробного средства в референтной группе обследуемых, имеющих удовлетворительную гигиену полости рта и обычную (нормальную) микрофлору, и не имеющих патологии зубов и пародонта.In this case, the reference value (K PDE ) is obtained in advance in a separate study, as the average when assessing the coefficient of suppressive effect for a given antimicrobial agent in the reference group of subjects who have satisfactory oral hygiene and normal (normal) microflora, and who do not have tooth and periodontal pathologies.

Величина показателя ИЧРМкол характеризует индивидуальную количественную особенность чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству, которую необходимо учитывать при выборе оптимальной концентрации, дозы и экспозиции конкретного противомикробного средства для данного пациента.The value of the HDI count indicator characterizes an individual quantitative feature of the sensitivity of the oral microflora to an antimicrobial agent, which must be taken into account when choosing the optimal concentration, dose and exposure of a particular antimicrobial agent for a given patient.

Преимущества предлагаемого способа в сравнении с прототипом.The advantages of the proposed method in comparison with the prototype.

1. Он более точный за счет комплексной оценки подавления средством метаболической активности ротовой микрофлоры (включая и анаэробную) непосредственно в полости рта, то есть в условиях действия собственных факторов противомикробной защиты организма, а также за счет возможности оценивать чувствительность к любым противомикробным и гигиеническим средствам (включая антисептики, фитопрепараты, бактериофаги и др.).1. It is more accurate due to a comprehensive assessment of the suppression by the agent of the metabolic activity of the oral microflora (including anaerobic) directly in the oral cavity, that is, under the action of its own factors of antimicrobial protection of the body, and also due to the ability to evaluate sensitivity to any antimicrobial and hygienic means ( including antiseptics, herbal remedies, bacteriophages, etc.).

2. Он позволяет оценивать индивидуальную чувствительность ротовой микрофлоры к противомикробным средствам достаточно быстро (реализуется в течение 3-3,5 часов), что в 6 раз быстрее в сравнении с прототипом.2. It allows you to evaluate the individual sensitivity of the oral microflora to antimicrobial agents quickly enough (implemented within 3-3.5 hours), which is 6 times faster in comparison with the prototype.

3. Дифференцировать оценку чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству по качественному и количественному показателям, что невозможно с помощью прототипа;3. To differentiate the assessment of the sensitivity of the oral microflora to the antimicrobial agent in terms of qualitative and quantitative indicators, which is impossible using the prototype;

4. Относительно недорогой и более доступный в сравнении с прототипом на клиническом приеме стоматолога - требуется только рН-метр, растворы карбамида и сахарозы.4. Relatively inexpensive and more affordable in comparison with the prototype at the dentist’s clinic - only a pH meter, urea and sucrose solutions are required.

ПРИМЕР.EXAMPLE.

Обследуемый в течение суток до определения не использовал никаких противомикробных средств и не принимал еду за 3 часа до обследования.The subject did not use any antimicrobial agents during the day before the determination and did not take food 3 hours before the examination.

С помощью рН-метра «Denver Basic» и рН-чувствительного FET-электрода определили начальное значение рН смешанной слюны обследуемого, которую он сплюнул в пробирку в объеме 1 мл. Это значение составило 7,10 ед. рН (pHs). Далее обследуемый набрал в рот 15 мл 8% раствора карбамида и в течение 30 с полоскал им рот (тестовый раствор карбамида), после чего выплюнул. Далее у него тем же способом с интервалом 2-5 мин определяли рН сплевываемой смешанной слюны и на 15 минуте после полоскания раствором карбамида фиксировали его максимальное значение. Это значение составило 7,68 ед. рН (рНmах1). Рассчитали амплитуду первой тестовой карбамидной кривой: A1k=рНmах1-pHs=7,68-7,10=0,58 ед. рН (см. чертеж). Через 35 минут от начала опыта значение рН смешанной слюны за счет ее буферных свойств вернулось к начальному значению (pHs=7,10 ед. рН). Обследуемый в течение 30 с полоскал рот 15 мл 47% раствора сахарозы (тестовый раствор сахарозы), после чего выплюнул. Далее у него тем же способом с интервалом 2-5 мин определяли рН сплевываемой смешанной слюны и на 18 минуте после полоскания раствором сахарозы фиксировали его минимальное значение. Это значение составило 6,51 ед. рН (pHmin1). Рассчитали амплитуду первой тестовой сахарозной кривой: A1c=pHs - pHmin1=7,10-6,51=0,61 ед. рН. Через 85 минут от начала опыта значение рН смешанной слюны за счет ее буферных свойств вернулось к начальному значению (pHs=7,10 ед. рН).Using a Denver Basic pH meter and a pH-sensitive FET electrode, the initial pH value of the mixed saliva of the subject was determined, which he spat into a test tube in a volume of 1 ml. This value amounted to 7.10 units. pH (pH s ). Next, the subject scored 15 ml of an 8% urea solution in his mouth and rinsed his mouth (urea test solution) for 30 seconds, and then spat out. Then, in the same way, the pH of the poured mixed saliva was determined in the same way with an interval of 2-5 minutes, and its maximum value was fixed at 15 minutes after rinsing with a urea solution. This value amounted to 7.68 units. pH (pH max1 ). The amplitude of the first test urea curve was calculated: A 1k = pH max1- pH s = 7.68-7.10 = 0.58 units. pH (see drawing). After 35 minutes from the start of the experiment, the pH value of the mixed saliva due to its buffering properties returned to the initial value (pH s = 7.10 pH units). Examined for 30 s, rinsed his mouth with 15 ml of 47% sucrose solution (test solution of sucrose), and then spat out. Then, in the same way, the pH of the poured mixed saliva was determined in the same way with an interval of 2-5 minutes, and its minimum value was fixed at 18 minutes after rinsing with a sucrose solution. This value was 6.51 units. pH (pH min1 ). The amplitude of the first test sucrose curve was calculated: A 1c = pH s - pH min1 = 7.10-6.51 = 0.61 units. pH After 85 minutes from the start of the experiment, the pH value of the mixed saliva due to its buffering properties returned to the initial value (pH s = 7.10 pH units).

Затем пациент в течение 2 минут полоскал рот 15 мл раствора метрогила (жидкий препарат метронидазола - противомикробного средства, действующего преимущественно на анаэробную уреазопозитивную аммиакпродуцирующую микрофлору). Сразу после выплевывания метрогила обследуемый повторно в течение 30 с полоскал рот 15 мл 8% раствора карбамида (тестовый раствор карбамида). Как и в первом случае, после этого с интервалом 2-5 минут у него определяли рН сплевываемой смешанной слюны. Максимальное значение рН зафиксировали на 12 минуте после повторного полоскания рта тестовым раствором карбамида. Оно составило 7,26 ед. рН (рНmах2). После восстановления через 30 минут после полоскания рта метрогилом рН смешанной слюны к начальному значению (pHs) пациент повторил полоскание рта тестовым раствором сахарозы. Последующее измерение рН смешанной слюны выявило его минимальное значение на 20 минуте после полоскания сахарозой, которое составило 6,63 ед. рН.Then the patient rinsed his mouth with 15 ml of metrogil for 2 minutes (a liquid preparation of metronidazole, an antimicrobial agent that acts mainly on anaerobic ureazopositive ammonia-producing microflora). Immediately after spitting out the metrogil, the patient is rinsed again for 30 s with mouthwash of 15 ml of 8% urea solution (test urea solution). As in the first case, after that, with an interval of 2-5 minutes, he determined the pH of poured mixed saliva. The maximum pH value was recorded at 12 minutes after repeated rinsing of the mouth with a test solution of urea. It amounted to 7.26 units. pH (pH max2 ). After recovery 30 minutes after rinsing the mouth with metrogil, the pH of the mixed saliva to the initial value (pH s ), the patient repeated rinsing the mouth with sucrose test solution. Subsequent measurement of the pH of the mixed saliva revealed its minimum value at 20 minutes after rinsing with sucrose, which amounted to 6.63 units. pH

Рассчитали амплитуду второй тестовой карбамидной кривой рН смешанной слюны: А=рНmах2 - pHs=7,26-7,10=0,16. Разность амплитуд двух тестовых карбамидных кривых рН смешанной слюны (ΔАк) составила:The amplitude of the second test urea pH curve of mixed saliva was calculated: A 2k = pH max2 - pHs = 7.26-7.10 = 0.16. The difference in the amplitudes of the two test urea pH curves of mixed saliva (ΔA to ) was:

ΔАк-a1k=0,58-0,16=0,42 ед. рН.ΔA to -a 1k -A 2k = 0.58-0.16 = 0.42 units pH

Полученная величина ΔАк (0,42 ед. рН) характеризовала индивидуальную чувствительность аммиак-продуцирующей ротовой микрофлоры пациента к 2-минутному полосканию рта 15 мл раствора метрогила.The obtained ΔA k value (0.42 pH units) characterized the individual sensitivity of the patient's ammonia-producing oral microflora to a 2-minute mouthwash of 15 ml of metrogil solution.

Рассчитали амплитуду второй тестовой сахарозной кривой рН смешанной слюны: A2c=pHs-pHmin2=7,10-6,63=0,47. Разность амплитуд двух тестовых сахарозных кривых рН смешанной слюны (ΔАс) составила: ΔАс=A1c=0,61-0,47=0,14 ед. рН. Полученная величина ΔАc (0,14 ед. рН) характеризовала индивидуальную чувствительность кислотопродуцирующей ротовой микрофлоры пациента к 2-минутному полосканию рта 15 мл раствора метрогила.The amplitude of the second test sucrose pH curve of mixed saliva was calculated: A 2c = pH s -PH min2 = 7.10-6.63 = 0.47. The difference in the amplitudes of the two test sucrose pH curves of mixed saliva (ΔA s ) was: ΔA s = A 1c -A 2s = 0.61-0.47 = 0.14 units. pH The obtained ΔA c value (0.14 pH units) characterized the individual sensitivity of the patient's acid-producing oral microflora to a 2-minute mouthwash of 15 ml of metrogil solution.

Рассчитали индивидуальный коэффициент асимметрии:The individual asymmetry coefficient was calculated:

Ка=ΔАк/ΔАс=0,42/0,14=3To a = Δ A to / Δ A s = 0.42 / 0.14 = 3

Полученное значение Ка свидетельствует, что у конкретного пациента чувствительность аммиак-продуцирующей микрофлоры полости рта к 2-минутному полосканию раствором метрогила в 3 раза выше, чем кислотообразующей.The obtained value of K a indicates that in a particular patient, the sensitivity of ammonia-producing microflora of the oral cavity to a 2-minute rinse with a solution of metrogil is 3 times higher than that of acid-forming.

Рассчитали показатель ИЧРМкач:Calculated the indicator of the HDI quality :

ИЧРМкачаэ=3/3,15=0,95ICHRM Qual = K a / K e = 3 / 3.15 = 0.95

При этом в качестве Кэ использовали его табличное значение (3,15), полученное опытным путем в исследованиях, проведенных в референтной группе пациентов. Полученное значение ИЧРМкач свидетельствует о том, что у конкретного пациента имеется качественное смещение состава ротовой микрофлоры на 5% в сторону преобладания кислотопродуцирующих штаммов микроорганизмов.Moreover, as K e , its tabular value (3.15) was used, which was obtained experimentally in studies conducted in the reference group of patients. The obtained value of the HDI quality indicates that a particular patient has a qualitative shift in the composition of the oral microflora by 5% in the direction of the predominance of acid-producing strains of microorganisms.

Рассчитали показатели Кпд и ИЧРМкол:Calculated indicators of efficiency and HDI count :

Кпд=[(A1k1c)/2]/[(А)/2]=[(0,58+0,61)/2]/[(0,16+0,47)]=1,9K pd = [(A 1k + A 1c ) / 2] / [(A 2k + A 2s ) / 2] = [(0.58 + 0.61) / 2] / [(0.16 + 0.47 )] = 1.9

ИЧРМколпдпдэ=1,9/2,2=0,86HDI count = K pd / K pde = 1.9 / 2.2 = 0.86

Полученное значение показателя Кпд говорит о том, что активность ротовой микрофлоры под влиянием 2-минутного полоскания рта раствором метрогила снизилась в 1,9 раза, а показателя ИЧРМкол - о том, что для этого конкретного пациента 2-минутного полоскания рта противомикробным средством оказалось недостаточно для оптимального подавления микрофлоры и время его экспозиции в полости рта следует увеличить на 13,6%, либо использовать другую форму препарата. При этом в качестве Кпдэ использовали его табличное значение (2,2), полученное опытным путем в исследованиях, проведенных в референтной группе пациентов.The obtained value of the Kd indicator indicates that the activity of the oral microflora under the influence of a 2-minute rinse of the mouth with a metrogil solution decreased by 1.9 times, and the HDI count indicates that for this particular patient a 2-minute rinse of the mouth with an antimicrobial agent turned out to be it is insufficient for optimal suppression of microflora and the time of its exposure in the oral cavity should be increased by 13.6%, or another form of the drug should be used. At the same time, the tabular value (2.2) was used as K PDE , which was obtained experimentally in studies conducted in the reference group of patients.

Таким образом, в ходе исследования, длившегося 160 минут, удалось оценить индивидуальную чувствительность ротовой микрофлоры пациента к 2-минутному полосканию рта раствором метрогила и в цифровом выражении оценить индивидуальные качественные и количественные особенности чувствительности ротовой микрофлоры к данному препарату.Thus, in the course of a study lasting 160 minutes, it was possible to assess the individual sensitivity of the patient's oral microflora to a 2-minute rinse of the mouth with a metrogil solution and to digitally evaluate the individual qualitative and quantitative features of the sensitivity of the oral microflora to this drug.

Claims (1)

Способ индивидуальной оценки чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробным средствам, включающий бактериологическую оценку действия противомикробного средства путем определения степени подавления ее активности этим средством, отличающийся тем, что оценивают действие противомикробного средства на кислото- и аммиак-продуцирующую микрофлору путем сравнения амплитуд тестовых сахарных и карбамидных кривых рН в средах полости рта до и после его применения по формуламA method for individually assessing the sensitivity of oral microflora to antimicrobial agents, including bacteriological evaluation of the action of an antimicrobial agent by determining the degree of suppression of its activity by this agent, characterized in that the effect of the antimicrobial agent on acid and ammonia-producing microflora is evaluated by comparing the amplitudes of test sugar and urea pH curves in oral media before and after its use according to the formulas ΔAc=A1c-A2c,ΔA c = A 1c -A 2c , где ΔАс - изменение амплитуд тестовых сахарных кривых рН;where ΔA s is the change in the amplitudes of the test sugar pH curves; A1c - амплитуда тестовой сахарной кривой до применения противомикробного средства;A 1c is the amplitude of the test sugar curve before the use of an antimicrobial agent; А2c - амплитуда тестовой сахарной кривой после применения противомикробного средства;And 2c is the amplitude of the test sugar curve after the use of an antimicrobial agent; ΔАк1k,-А,ΔA k = A 1k , -A 2k , где ΔАк - изменение амплитуд тестовых карбамидных кривых рН;where ΔA to - change in the amplitudes of the test urea pH curves; A1k - амплитуда тестовой карбамидной кривой до применения противомикробного средства;A 1k is the amplitude of the test urea curve before the use of an antimicrobial agent; A2k - амплитуда тестовой карбамидной кривой после применения противомикробного средства,A 2k is the amplitude of the test urea curve after application of an antimicrobial agent, и определяют индивидуальную особенность чувствительности ротовой микрофлоры к противомикробному средству, обусловленную ее качественным составом, по коэффициенту асимметрии по формулеand determine the individual characteristic of the sensitivity of the oral microflora to the antimicrobial agent, due to its qualitative composition, by the asymmetry coefficient by the formula Ка=ΔАк/ΔАс K a = ΔA to / ΔA s где Ка - коэффициент асимметрии;where K a is the asymmetry coefficient; а обусловленную ее количественным составом - по коэффициенту подавляющего действия по формулеand due to its quantitative composition - by the coefficient of suppressive action according to the formula Кпд=[(А1k)/2]/[(А)/2],K pd = [(A 1k + A 1s ) / 2] / [(A 2k + A 2s ) / 2], где Кпд - коэффициент подавляющего действия,where K PD - the coefficient of the inhibitory effect, затем сравнивают значения коэффициентов с величинами эталонных значений, и по разности этих значений оценивают индивидуальную чувствительность ротовой микрофлоры к действию противомикробного средства.then compare the values of the coefficients with the values of the reference values, and the difference in these values assesses the individual sensitivity of the oral microflora to the action of an antimicrobial agent.
RU2006112692/15A 2006-04-18 2006-04-18 Method of individual estimation of sensitivity of mouth microflora to antimicrobial agents RU2308036C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2006112692/15A RU2308036C1 (en) 2006-04-18 2006-04-18 Method of individual estimation of sensitivity of mouth microflora to antimicrobial agents

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2006112692/15A RU2308036C1 (en) 2006-04-18 2006-04-18 Method of individual estimation of sensitivity of mouth microflora to antimicrobial agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2308036C1 true RU2308036C1 (en) 2007-10-10

Family

ID=38953005

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2006112692/15A RU2308036C1 (en) 2006-04-18 2006-04-18 Method of individual estimation of sensitivity of mouth microflora to antimicrobial agents

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2308036C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2476890C2 (en) * 2008-02-08 2013-02-27 Колгейт-Палмолив Компани Oral care methods and systems

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник под ред. проф. В.В.Меньшикова. - М.: Медицина. 1987, с.41-342. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2476890C2 (en) * 2008-02-08 2013-02-27 Колгейт-Палмолив Компани Oral care methods and systems
US9376722B2 (en) 2008-02-08 2016-06-28 Colgate-Palmolive Company Oral care methods and systems

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Lundström et al. Streptococcus mutans and lactobacilli frequency in orthodontic patients; the effect of chlorhexidine treatments
Simratvir et al. Efficacy of 10% povidone iodine in children affected with early childhood caries: an in vivo study
Kamma et al. The effect of diode laser (980 nm) treatment on aggressive periodontitis: evaluation of microbial and clinical parameters
Southard et al. The effect of 2% chlorhexidine digluconate irrigation on clinical parameters and the level of Bacteroides gingivalis in periodontal pockets
Aykut-Yetkiner et al. Does casein phosphopeptid amorphous calcium phosphate provide remineralization on white spot lesions and inhibition of Streptococcus mutans?
Yasukawa et al. The relationship between physiologic halitosis and periodontopathic bacteria of the tongue and gingival sulcus
Benn et al. Plaque and dental caries risk in midlife
RU2308036C1 (en) Method of individual estimation of sensitivity of mouth microflora to antimicrobial agents
Jeong et al. Dental caries risk can be predicted by simply measuring the pH and buffering capacity of saliva
Iwawaki et al. Effect of water temperature during ultrasonic denture cleaning
Pavlič et al. Effect of repeated antimicrobial photodynamic therapy in treatment of periodontitis associated with Fanconi anemia
Hirsch et al. Pulpal pathosis and severe alveolar lesions: a clinical study
RU2251693C1 (en) Method for evaluating the action and efficiency of antimicrobial preparations upon oral microflora
Almeida et al. Gingival crevicular fluid volume evaluation in patients with controlled periodontal disease submitted to orthodontic treatment
JP4792585B2 (en) Rapid detection method for oral bacteria
Salman et al. Effect of ZnO Nanoparticles on AST activity in gingival cervicular fluid of smokers and nonsmokers chronic periodontitis patients: in vitro study
Takane et al. Microbiological Evaluation of Biofilm Formation on the Fixed Twin Block Appliance: A Clinical Trial
Kachuie et al. Chlorhexidine Antimicrobial Activity in Self-ligating and Conventional Orthodontic Brackets Infected with Porphyromonas Gingivalis Biofilm
WO2017186571A1 (en) Biomarker for periodontal disease and peri-implantitis
Deepika et al. Longevity of the antimicrobial effect of silver diamond fluoride on cariogenic bacteria in children-A systematic review
Rahardjo et al. Efficacy of Essential Oil Strips Containing Thymol, Eucalyptol, Menthol, Methyl Salicylate, and Peppermint Against Dental Caries
Kashyap Scardovia Wiggsiae-A new etiological agent for early childhood caries
Kadam COLLECTION AND BIOCHEMICAL EVALUATION OF HUMAN GINGIVAL CREVICULAR FLUID
US9968526B1 (en) System for caries management by risk assessment
Almushayt et al. Salivary characteristics in a sample of preschool children with severe early childhood caries (S-ECC)

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20090419