RU2302237C2 - Method for obtaining biologically active fraction s-1-10, a tremor-decreasing pharmaceutical composition at parkinsonism and convulsive activity-decreasing at epilepsy - Google Patents
Method for obtaining biologically active fraction s-1-10, a tremor-decreasing pharmaceutical composition at parkinsonism and convulsive activity-decreasing at epilepsy Download PDFInfo
- Publication number
- RU2302237C2 RU2302237C2 RU2003137373/15A RU2003137373A RU2302237C2 RU 2302237 C2 RU2302237 C2 RU 2302237C2 RU 2003137373/15 A RU2003137373/15 A RU 2003137373/15A RU 2003137373 A RU2003137373 A RU 2003137373A RU 2302237 C2 RU2302237 C2 RU 2302237C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- kda
- peptide fraction
- biologically active
- tremor
- decreasing
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION
Предлагаемое изобретение относится к медицине, может быть использовано для получения биологически активной пептидной фракции из сыворотки крови птиц, полезной при ряде заболеваний и расстройств в организме человека и животных (физическая работоспособность, координация движений, паркинсонизм, эпилепсия, стресс и т.д.)The present invention relates to medicine, can be used to obtain a biologically active peptide fraction from avian blood serum, useful in a number of diseases and disorders in humans and animals (physical performance, coordination of movements, parkinsonism, epilepsy, stress, etc.)
Уровень техникиState of the art
Широко известны способы получения биологически активной сыворотки крови, основанные на взятии крови у доноров и животных, инкубации, отделение с последующим консервированием. Способы предполагают получение сыворотки крови, повышающей устойчивость организма к таким экзогенным и эндогенным факторам, как атмосферное давление, температура, сила тяжести, свет и т.п., а также голод, жажда, сонная и половая потребности и т.п. (Патент Японии №2123287, ЕР 0542303 А2, Патенты России №2096041, 2120301).Widely known methods for producing biologically active blood serum, based on the collection of blood from donors and animals, incubation, separation, followed by canning. The methods include obtaining blood serum that increases the body's resistance to such exogenous and endogenous factors as atmospheric pressure, temperature, gravity, light, etc., as well as hunger, thirst, sleep and sexual needs, etc. (Japanese Patent No. 2123287, EP 0542303 A2, Russian Patents No. 2096041, 2120301).
Сыворотку получают из крови донора, предварительно введенного в определенное функциональное состояние, при этом, в зависимости от характера воздействия, получают сыворотки с биологической активностью различного характера: миогенной, сомногенной, офтальмогенной, аудиоактивной, термоактивной, диетактивной, сексактивной, антигипоксической, антиалкогольной и антиникотиновой.Serum is obtained from the blood of a donor previously introduced into a certain functional state, and, depending on the nature of the effect, serums with various biological activity are obtained: myogenic, somnogenic, ophthalmic, audioactive, thermoactive, dietetic, sex active, antihypoxic, anti-alcohol and anti-nicotine.
Сыворотку от животных подвергают гамма-обработке с целью усиления биологической активности (патент PCT/RU00/00073 - Россия и ЕР).Serum from animals is subjected to gamma processing in order to enhance biological activity (patent PCT / RU00 / 00073 - Russia and EP).
Задачей данного изобретения было получение биологически активной пептидной фракции до 10 кДа из электрошоковой сыворотки крови кур.The objective of the invention was to obtain a biologically active peptide fraction of up to 10 kDa from electroshock blood serum of chickens.
Краткое изложение сущности изобретенияSummary of the invention
Оказалось, что если электрошоковую сыворотку крови птиц облучить в интервале 20-30 кГр, профильтровать через мембраны 0,45 мм и 10 кДа, то можно получить низкомолекулярную биологически активную пептидную фракцию, обладающую рядом активностей (будут раскрыты далее), которые полезны при некоторых неблагоприятных состояниях пациента (будут раскрыты далее).It turned out that if the electroshock blood serum of birds was irradiated in the range of 20-30 kGy, filtered through 0.45 mm and 10 kDa membranes, it was possible to obtain a low molecular weight biologically active peptide fraction with a number of activities (which will be described below), which are useful for some unfavorable patient conditions (to be disclosed below).
Таким образом, целью настоящего изобретения является разработка нового способа получения биологически активной пептидной фракции S-1-10.Thus, the aim of the present invention is to develop a new method for producing a biologically active peptide fraction S-1-10.
Еще одной целью настоящего изобретения яляется разработка лекарственной формы новой биологически активной сыворотки. Изобретение предполагает разные лекарственные формы: в том числе для перорального, парентерального, назального, буккального, в виде суппозитариев и т.п.введения.Another objective of the present invention is the development of a dosage form of a new biologically active serum. The invention involves various dosage forms: including for oral, parenteral, nasal, buccal, in the form of suppositories, etc. administration.
В изобретении предусматривается использование подходящих физиологически приемлемых носителей (таких как дистил. вода, физиол. р-р), наполнителей (например, масло какао, витепсол), биологически активной пептидной фракции. Электрошоковая биологически активная пептидная фракция может применяться как самостоятельно, так и в сочетании с другими лечебными средствами.The invention provides for the use of suitable physiologically acceptable carriers (such as distillate water, physiol. Solution), excipients (e.g. cocoa butter, witepsol), a biologically active peptide fraction. The electroshock biologically active peptide fraction can be used both independently and in combination with other therapeutic agents.
Дополнительной целью изобретения является фармацевтическая композиция, в которой активным началом является пептидная фракция согласно настоящему изобретению. При этом фармацевтическая композиция должна содержать активный ингредиент в количестве, достаточном для оказания благоприятного воздействия на организм пациента, т.е. содержать его в эффективном количестве.An additional objective of the invention is a pharmaceutical composition in which the active principle is the peptide fraction according to the present invention. In this case, the pharmaceutical composition must contain the active ingredient in an amount sufficient to provide a beneficial effect on the patient's body, i.e. keep it in an effective amount.
Еще одной целью изобретения является определение эффективной дозы пептидной фракции согласно данному изобретению. Полагается, что эта доза находится в интервале от 0,1 до 50 мг/кг веса пациента. Очевидно, что конкретная доза будет определяться лечащим врачом в зависимости от состояния пациента, его возраста, веса и курса лечения.Another objective of the invention is to determine the effective dose of the peptide fraction according to this invention. It is believed that this dose is in the range from 0.1 to 50 mg / kg of patient weight. Obviously, the specific dose will be determined by the attending physician depending on the condition of the patient, his age, weight and course of treatment.
Подробное раскрытие изобретенияDetailed Disclosure of Invention
Далее изобретение подробно раскрывается в предпочтительных вариантах конкретного выполнения, при этом приводимые примеры активной пептидной фракции, фармацевтических композиций, лекарственных форм не должны стать основанием для ограничения притязаний, а предназначены исключительно лишь для демонстрации осуществимости изобретения и реализации указанного(ых) назначения(ий). Каждый специалист в данной области безусловно убедится, что могут быть предложены многочисленные модификации приводимых вариантов выполнения изобретения, которые подпадают под притязания, отраженные далее в формуле изобретения.Further, the invention is disclosed in detail in preferred embodiments of a specific implementation, while the examples of the active peptide fraction, pharmaceutical compositions, dosage forms should not become the basis for limiting claims, but are intended solely to demonstrate the feasibility of the invention and the implementation of the specified (s) destination (s). Each person skilled in the art will surely be convinced that numerous modifications of the cited embodiments of the invention may be proposed, which fall within the scope of the claims set forth in the claims.
1. Получение биологически активной пептидной фракции S-1-10.1. Obtaining a biologically active peptide fraction S-1-10.
Для получения биологически активной пептидной фракции S-1-10 использовали кровь птиц (кур), взятую через 3-4 с после электростимуляции головы в течение 2-3 с током напряжением 70-80 В. Кровь собирали самотоком в полиэтиленовые флаконы после перерезки сонных артерий и вен и инкубируют при температуре 4-8°С в течение 18-24 ч, сыворотку отсасывали и облучали С0 60 в режиме 25±5,0 кГр.To obtain a biologically active peptide fraction S-1-10, the blood of birds (chickens) was used, taken 3-4 seconds after electrical stimulation of the head for 2-3 with a voltage of 70-80 V. Blood was collected by gravity into plastic bottles after transection of the carotid arteries and veins and incubated at a temperature of 4-8 ° C for 18-24 hours, the serum was aspirated and irradiated With 0 60 in the mode of 25 ± 5.0 kGy.
Обработанную сыворотку экстрагировали дистиллированной водой, содержащей 0,5 мМ фенилметан сульфонил фторид (PMSF) в соотношении 1:10, размешивали в течение 1 ч при температуре 5°С. Полученную суспензию цетрифугировали при 12000 об/мин в течение 30 мин. Осадок вновь экстрагировали водой с PMSF и вновь центрифугировали при 12000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость фильтровали через мембрану с диаметром пор 0,45 мкм, а затем фильтрат вторично фильтровали через мембраны 10 кДа. Окончательный фильтрат (пептидная фракция) лиофилизировали общепринятым методом и хранили при температуре 4-8°С.The treated serum was extracted with distilled water containing 0.5 mM phenylmethane sulfonyl fluoride (PMSF) in a ratio of 1:10, stirred for 1 h at a temperature of 5 ° C. The resulting suspension was centrifuged at 12,000 rpm for 30 minutes. The pellet was again extracted with PMSF water and centrifuged again at 12,000 rpm for 30 minutes. The supernatant was filtered through a membrane with a pore diameter of 0.45 μm, and then the filtrate was again filtered through 10 kDa membranes. The final filtrate (peptide fraction) was lyophilized by the conventional method and stored at 4-8 ° C.
2. Доказательства биологической активности пептидной фракции S-1-10.2. Evidence of the biological activity of the peptide fraction S-1-10.
2.1. Физическая выносливость животных2.1. Physical endurance of animals
Физическая выносливость определялась по влиянию пептидной фракции на продолжительность плавания крыс линии Wistar при 25°С, с грузом на основании хвоста массой в 10% от веса животного. В эксперименте использовано 40 крыс весом 180-200 г. Крысы были разделены на 4 группы по 10 животных в каждой группе. 1 группа - контроль, крысам вводили 1,0 мл физиологического раствора, II, III и IV группам вводили пептидную фракцию в дозах 0,1; 1,0; 50,0 мг/кг веса, растворенных в 1,0 мл физиологического раствора.Physical endurance was determined by the influence of the peptide fraction on the duration of swimming of Wistar rats at 25 ° C, with a weight based on the tail weighing 10% by weight of the animal. In the experiment, 40 rats weighing 180-200 were used. Rats were divided into 4 groups of 10 animals in each group. Group 1 - control, rats were injected with 1.0 ml of physiological saline, groups II, III and IV were administered the peptide fraction in doses of 0.1; 1.0; 50.0 mg / kg of weight dissolved in 1.0 ml of physiological saline.
Все исследуемые растворы вводились внутрибрюшинно за 30 мин до тестирования.All test solutions were administered intraperitoneally 30 minutes before testing.
Результаты представлены в таблице 1.The results are presented in table 1.
Таким образом, пептидная фракция в дозе 50 мг/кг веса повышает физическую выносливость на 54% от контроля.Thus, the peptide fraction at a dose of 50 mg / kg of body weight increases physical endurance by 54% of the control.
2.2. Болезнь Паркинсона2.2. Parkinson's disease
При моделировании болезни Паркинсона использовался аналог 6-ГД - окситреморин, который вызывал у животных изменения, типичные для паркинсонизма: тремор конечностей, латентный период начала общего тремора (всего тела), периоды отсутствия тремора, прекращение тремора.When modeling Parkinson's disease, an analog of 6-HD was used - oxytremorin, which caused changes in animals typical of parkinsonism: tremor of the extremities, the latent period of the onset of general tremor (whole body), periods of absence of tremor, and termination of tremor.
Окситреморин вводили внутрибрюшинно в дозе 1,0 мг/кг веса в физиологическом растворе, взятом в объеме 1,0 мл. Пептидную фракцию вводили в дозах 0,1; 1,0; 10,0; и 50 мг/кг веса, также растворенных в 1,0 мл физиологического раствора. Фракция вводилась за 45 минут до применения окситреморина. В эксперименте были использованы 49 крыс линии Wistar весом 200-220 г.Oxytremorin was administered intraperitoneally at a dose of 1.0 mg / kg body weight in saline, taken in a volume of 1.0 ml. The peptide fraction was administered in doses of 0.1; 1.0; 10.0; and 50 mg / kg weight, also dissolved in 1.0 ml of physiological saline. The fraction was introduced 45 minutes before the use of oxytremorine. In the experiment, 49 Wistar rats weighing 200-220 g were used.
Результаты представлены в таблице 2.The results are presented in table 2.
>0,0585.0 ± 7.1
> 0.05
<0,0592.8 ± 7.3
<0.05
<0,01126.4 ± 17.7
<0.01
<0,01157.1 ± 26.0
<0.01
>0,056.7 ± 1.0
> 0.05
<0,05 21.3 ± 2.5
<0.05
<0,0521.2 ± 2.3
<0.05
<0,0523.1 ± 3.1
<0.05
<0,0114.9 ± 4.0
<0.01
Таким образом, пептидная фракция, введенная за 45 мин до моделирования болезни Паркинсона, уже в дозе 0,1 мг/кг веса удлиняет период начала общего тремора (тремор конечностей и туловища) на 31% и сокращает время исчезновения тремора конечностей на 50% от контроля. Дозы в интервале от 1,0 до 50 мг веса проявляют наибольшую эффективность, не только изменяя указанные параметры в 2 раза (при дозе 50 мг/кг), но и полностью предотвращают общий тремор животных (дозы: 1,0; 10.0 и 50,0 мг/кг).Thus, the peptide fraction introduced 45 minutes before the simulation of Parkinson's disease, already at a dose of 0.1 mg / kg of body weight, prolongs the onset of general tremor (tremor of the extremities and trunk) by 31% and reduces the extinction time of tremor of the extremities by 50% of the control . Doses in the range from 1.0 to 50 mg of weight are most effective, not only by changing these parameters 2 times (at a dose of 50 mg / kg), but they also completely prevent the general tremor of animals (doses: 1.0; 10.0 and 50, 0 mg / kg).
2.3. Эпилепсия2.3. Epilepsy
Исследовали влияние различных концентраций пептидных фракций на начало появления тонических и клонических судорог при моделировании эпилепсии внутрибрюшинным введением 0,5 мл. 20% раствора камфоры.We studied the effect of various concentrations of peptide fractions on the onset of tonic and clonic seizures in the simulation of epilepsy by intraperitoneal administration of 0.5 ml. 20% camphor solution.
Лиофилизированные образцы пептидной фракции, растворенные в 0,5 мл физиологического раствора, также вводились внутрибрюшинно за 45 минут до введения камфоры.Lyophilized samples of the peptide fraction, dissolved in 0.5 ml of physiological saline, were also administered intraperitoneally 45 minutes before the introduction of camphor.
Были исследованы 4 образца пептидной фракции в дозах 0,1; 1,0; 10,0 и 50,0 мг/кг веса животного.We studied 4 samples of the peptide fraction in doses of 0.1; 1.0; 10.0 and 50.0 mg / kg of animal weight.
Всего было использовано 50 крыс линии Wistar весом 220-230 г.In total, 50 Wistar rats weighing 220-230 g were used.
Результаты представлены в таблице 3.The results are presented in table 3.
>0,057.1 ± 1.1
> 0.05
<0,059.0 ± 1.0
<0.05
<0,0110.4 ± 1.1
<0.01
<0,0111.0 ± 1.4
<0.01
Таким образом, пептидная фракция, введенная за 45 мин до моделирования эпилепсии, взятая в дозах от 1,0 до 50 мг/кг веса животных, удлиняет время проявления тонических и клонических судорог на 30-50% соответственно, т.е. снижают судорожное проявление эпилептической болезни.Thus, the peptide fraction introduced 45 minutes before the simulation of epilepsy, taken in doses from 1.0 to 50 mg / kg of animal weight, lengthens the manifestation time of tonic and clonic seizures by 30-50%, respectively, i.e. reduce the convulsive manifestation of epileptic disease.
Claims (2)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003137373/15A RU2302237C2 (en) | 2003-12-26 | 2003-12-26 | Method for obtaining biologically active fraction s-1-10, a tremor-decreasing pharmaceutical composition at parkinsonism and convulsive activity-decreasing at epilepsy |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003137373/15A RU2302237C2 (en) | 2003-12-26 | 2003-12-26 | Method for obtaining biologically active fraction s-1-10, a tremor-decreasing pharmaceutical composition at parkinsonism and convulsive activity-decreasing at epilepsy |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2003137373A RU2003137373A (en) | 2005-06-10 |
RU2302237C2 true RU2302237C2 (en) | 2007-07-10 |
Family
ID=35833848
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2003137373/15A RU2302237C2 (en) | 2003-12-26 | 2003-12-26 | Method for obtaining biologically active fraction s-1-10, a tremor-decreasing pharmaceutical composition at parkinsonism and convulsive activity-decreasing at epilepsy |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2302237C2 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2563170C1 (en) * | 2014-09-10 | 2015-09-20 | Анна Аркадьевна Иванова | Method for producing agent possessing cytostatic action on human lymphoblasts |
-
2003
- 2003-12-26 RU RU2003137373/15A patent/RU2302237C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
U 2120031 С1, 20.10.1998. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2563170C1 (en) * | 2014-09-10 | 2015-09-20 | Анна Аркадьевна Иванова | Method for producing agent possessing cytostatic action on human lymphoblasts |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2003137373A (en) | 2005-06-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Augusto-Oliveira et al. | Astroglia-specific contributions to the regulation of synapses, cognition and behaviour | |
RU2236238C2 (en) | Method for preparing biologically active substance from blood serum | |
RU2302237C2 (en) | Method for obtaining biologically active fraction s-1-10, a tremor-decreasing pharmaceutical composition at parkinsonism and convulsive activity-decreasing at epilepsy | |
RU2275924C2 (en) | Method for preparing complex of biologically active polypeptides for normalization of brain function and pharmaceutical agent based on thereof | |
KR101289220B1 (en) | Peptide substance stimulating regeneration of central nervous system neurons, pharmaceutical composition on its base, and the method of its application | |
AU713332B2 (en) | Use of protein S-100b in medicines and medicines containing the protein S-100-b | |
Tian et al. | Problems and challenges in regeneration and repair of spinal cord injury | |
SE505316C3 (en) | Use of the protein S-100b for the preparation of drugs for nerve cells | |
Rao et al. | Immunological implications of xenogeneic and allogeneic transplantation to neonatal rats | |
RU2364404C2 (en) | Biotreatment blood serum, methods of production and application | |
US20070110817A1 (en) | Biological active blood serum obtained by electrostimulation | |
Vezzani et al. | Epileptogenic activity of two peptides derived from diazepam binding inhibitor after intrahippocampal injection in rats | |
RU2744411C1 (en) | Method for reducing alcoholic motivation in mice | |
CN110227146A (en) | The application of Metrnl albumen or gene in terms of preventing and treating cognitive disorder | |
TWI715864B (en) | Method for preventing or treating a disease, disorder or condition induced by retina ischemia | |
HUT66832A (en) | A stimulator of vascular endothelial cells and use thereof | |
Drucker-Colin et al. | Evolution of concepts of mechanisms of sleep | |
Khavinson et al. | Effect of epithalon on age-specific changes in the retina in rats with hereditary pigmentary dystrophy | |
EA003301B1 (en) | Method for preparing a medicament from brain tissue of animal embryo and pharmaceutical composition based thereon | |
US20090220585A1 (en) | Biological Active Blood Serum Fraction S-1-10, Methods for Producing It and Uses Thereof | |
Lynch | Investigating the influence of retinal pigment epithelium on retinal function with a view to studying RPE cell transplantation | |
RU2259836C1 (en) | Biotransplant and method for treating the cases of parkinsonism | |
Vasylieva et al. | Study guide for individual preparation of “Physiology”(training tests of license exam “Krok 1”): manual for students of medical and dental faculty | |
CN116514924A (en) | Polypeptide for relieving mouse morphine addiction and application thereof | |
RU2324512C1 (en) | Method of stimulation of immune function in emotional-pain stress |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20060113 |
|
FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20060320 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20121227 |